JPS60156399A - ５’−キサンチル酸の製造法 - Google Patents
５’−キサンチル酸の製造法Info
- Publication number
- JPS60156399A JPS60156399A JP59012552A JP1255284A JPS60156399A JP S60156399 A JPS60156399 A JP S60156399A JP 59012552 A JP59012552 A JP 59012552A JP 1255284 A JP1255284 A JP 1255284A JP S60156399 A JPS60156399 A JP S60156399A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- xanthylic acid
- acid
- cell wall
- xanthylic
- producing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
さらに詳しくは、本発明は、プレビハクテリウム属に属
し、細胞壁合成阻害抗生物質に耐性を有しかつ５′−キ
サンチル酸生成能を有する変異株を培地に培養し、培養
液中に５′一キサンチル酸を生成蓄積せしめ、これを採
取することを特徴とする５′−キツンチル酸の製造法に
関する。
し、細胞壁合成阻害抗生物質に耐性を有しかつ５′−キ
サンチル酸生成能を有する変異株を培地に培養し、培養
液中に５′一キサンチル酸を生成蓄積せしめ、これを採
取することを特徴とする５′−キツンチル酸の製造法に
関する。
本発明において、細胞壁合成阻害抗生物質とは、細胞壁
ペプチドクリカンの生合成系を阻害する抗生物質をいう
。
ペプチドクリカンの生合成系を阻害する抗生物質をいう
。
５′−キサンチル酸は呈味物質として有用である。
従来、５′−キサンチル酸の製造法としては、ブレビバ
クテリウム属に属する野性株を用いる方法、アデニン要
求性もしくはグアニン要求性を有するブレビバクテリウ
ム属に属する変異株を用いる方法（英国特許第１１７０
．９７０）等が知られている。
クテリウム属に属する野性株を用いる方法、アデニン要
求性もしくはグアニン要求性を有するブレビバクテリウ
ム属に属する変異株を用いる方法（英国特許第１１７０
．９７０）等が知られている。
常に優れた５′−キサンチル酸の製法がめられている。
５′一キサンチル酸の製法について種々検討した結果、
細胞壁合成阻害抗生物質耐性を付与することによって著
量の５′一キサンチル酸が生成することが見い出された
。
細胞壁合成阻害抗生物質耐性を付与することによって著
量の５′一キサンチル酸が生成することが見い出された
。
本発明によれば５′一キサンチル酸はブレビバクテリウ
ム属に属する５′−キサンチル酸生産性変異株、この変
異株は細胞壁合成阻害抗生物質耐性を有することで特徴
づけられている；を５′−キサンチル酸が培養液中に蓄
積する迄培養し、しかる後、５′−キサンチル酸を回収
することによって生産される。
ム属に属する５′−キサンチル酸生産性変異株、この変
異株は細胞壁合成阻害抗生物質耐性を有することで特徴
づけられている；を５′−キサンチル酸が培養液中に蓄
積する迄培養し、しかる後、５′−キサンチル酸を回収
することによって生産される。
本発明に使用する微生物は、ブレビバクテリウム属に属
し、細胞壁合成阻害抗生物質を有し、５′−キサンチル
酸生産能を有する変異株が使用される。好適な例として
ブレビバクテリウム・アンモニアゲネスＴ−２（アデニ
ン要求、グアニン要求、ペニシリンＧ耐性）、ブレビバ
クテリウム・アンモニアゲネスＴ−２７（アデニン要求
、グアニン要求、バチドラジン耐性）があげられ、これ
らの菌株は工業技術院微生物工業技術研究所に、微工研
菌寄第７３９７号および７３９８号としてそれぞれ寄託
されている。細胞壁合成阻害抗生物質としては、ホスホ
ノマイシン、ザイクロセリン、カルバミルセリン、エン
ラマインン、ハンコマインン、リストセチン、メツマイ
シン、プランノマイシン、グイユマイシン、マカーボマ
イシン、ハンドラシン、ペニシリン類、セファロスポリ
ンＣ類等があげられる。
し、細胞壁合成阻害抗生物質を有し、５′−キサンチル
酸生産能を有する変異株が使用される。好適な例として
ブレビバクテリウム・アンモニアゲネスＴ−２（アデニ
ン要求、グアニン要求、ペニシリンＧ耐性）、ブレビバ
クテリウム・アンモニアゲネスＴ−２７（アデニン要求
、グアニン要求、バチドラジン耐性）があげられ、これ
らの菌株は工業技術院微生物工業技術研究所に、微工研
菌寄第７３９７号および７３９８号としてそれぞれ寄託
されている。細胞壁合成阻害抗生物質としては、ホスホ
ノマイシン、ザイクロセリン、カルバミルセリン、エン
ラマインン、ハンコマインン、リストセチン、メツマイ
シン、プランノマイシン、グイユマイシン、マカーボマ
イシン、ハンドラシン、ペニシリン類、セファロスポリ
ンＣ類等があげられる。
本発明の変異株は、例えばブレビバクテリウム・アンモ
ニアゲネスＡＴＣＣ２１０７５（アデニン要求性及びグ
アニン要求性）を親株とし、これに通常の変異誘導操作
、例えば、紫外線照射、Ｘ線照射、又はＮ−メチル−Ｎ
′−ニトロ−Ｎ−ニトロソガアニシンなどの化学薬剤処
理を施し、次いで親株が生育できないような量の細胞壁
阻害抗生物質を含有する寒天平板培地（プレート）で培
養し、当該プレート上に生育するコロニーを選択するこ
とによって得られる。
ニアゲネスＡＴＣＣ２１０７５（アデニン要求性及びグ
アニン要求性）を親株とし、これに通常の変異誘導操作
、例えば、紫外線照射、Ｘ線照射、又はＮ−メチル−Ｎ
′−ニトロ−Ｎ−ニトロソガアニシンなどの化学薬剤処
理を施し、次いで親株が生育できないような量の細胞壁
阻害抗生物質を含有する寒天平板培地（プレート）で培
養し、当該プレート上に生育するコロニーを選択するこ
とによって得られる。
以下の実験例にて本発明の変異株の細胞壁阻害抗生物質
への耐性度を示す。
への耐性度を示す。
実験例
第１表に示す組成の液体培地１０ｍ１を試験管に分注し
、加熱滅菌した。これに無菌濾過した細胞壁合成阻害抗
生物質水溶液を加え、第２表に示す濃度の細胞壁合成阻
害抗生物質を含む培地を調整した。
、加熱滅菌した。これに無菌濾過した細胞壁合成阻害抗
生物質水溶液を加え、第２表に示す濃度の細胞壁合成阻
害抗生物質を含む培地を調整した。
ｐＨ７，２（ＮａＯＨ）
上記培地に薬剤を加えない培地で培養した試験菌を、一
定量宛接種し、３０℃で２４時間振盪培養した。夫々の
培養液の６６０ｎｍに於る吸光度を測し、生育度をめた
。その結果を第２表に示す。
定量宛接種し、３０℃で２４時間振盪培養した。夫々の
培養液の６６０ｎｍに於る吸光度を測し、生育度をめた
。その結果を第２表に示す。
本発明に使用する培地としては、通常の発酵培地に使用
する炭素源、窒素源、無機物、その他の栄養物を程よく
含有する培地であれば、合成培地、天然培地のいずれも
使用可能である。炭素源としてグルコース、シュークロ
ース、フラクトース、マルトース、マンノース、澱粉、
澱粉加水分解物、糖蜜等の炭水化物、グリセリン、ソル
ビトール等の糖アルコーノペギ酸１．酢酸、酪酸、フマ
ール酸、リンゴ酸等の有機酸、メタノール、エタノール
等の低級アルコール、炭化水素等が用いられる。
する炭素源、窒素源、無機物、その他の栄養物を程よく
含有する培地であれば、合成培地、天然培地のいずれも
使用可能である。炭素源としてグルコース、シュークロ
ース、フラクトース、マルトース、マンノース、澱粉、
澱粉加水分解物、糖蜜等の炭水化物、グリセリン、ソル
ビトール等の糖アルコーノペギ酸１．酢酸、酪酸、フマ
ール酸、リンゴ酸等の有機酸、メタノール、エタノール
等の低級アルコール、炭化水素等が用いられる。
窒素源としてアンモニア、塩化アンモニウム、硫酸アン
モニウム、炭酸アンモニウム、酢酸アンモニウム、硝酸
アンモニウム、燐酸アンモニウム等の種々の無機、有機
アンモニウム塩、尿素、ペプトン、ポリペプトン、肉エ
キス、酵母エキス、コーン・スチーブ・リカー、カゼイ
ン加水分解物、大豆粕加水分解物、菌体もしくはその加
水分解物等天然窒素含有物が用いられる。
モニウム、炭酸アンモニウム、酢酸アンモニウム、硝酸
アンモニウム、燐酸アンモニウム等の種々の無機、有機
アンモニウム塩、尿素、ペプトン、ポリペプトン、肉エ
キス、酵母エキス、コーン・スチーブ・リカー、カゼイ
ン加水分解物、大豆粕加水分解物、菌体もしくはその加
水分解物等天然窒素含有物が用いられる。
無機物としては燐酸第一カリウム、燐酸第二カリウム、
硫酸マグネシウム、リン酸マグネシウム、塩化す） Ｉ
Ｊウム、硫酸第一鉄、硫酸マンガン、炭酸カルシウム等
が用いられる。
硫酸マグネシウム、リン酸マグネシウム、塩化す） Ｉ
Ｊウム、硫酸第一鉄、硫酸マンガン、炭酸カルシウム等
が用いられる。
用いる菌がアミノ酸、核酸、ビタミン等特定の栄養素を
生育に要求する場合には培地にこれらの物質を適当量包
含させなければならない。
生育に要求する場合には培地にこれらの物質を適当量包
含させなければならない。
発酵液からの５′−キサンチル酸の採取は、イオン交換
処理法、吸着法、沈殿法、抽出法等の単独または組み合
せて行なわれる。
処理法、吸着法、沈殿法、抽出法等の単独または組み合
せて行なわれる。
本発明の実施の態様が以下の実施例によって説明される
。
。
実施例１
種菌として第４表に示す菌株を用いる。
第３表に示す組成の培地１０ｍ１を２５ Ｑｍｌ容振盪
フラスコに分注し１２０℃で１０分間加熱滅菌する。
フラスコに分注し１２０℃で１０分間加熱滅菌する。
第 ３ 表
グルコース １００ｇ／ｊｌ！
ＫＨ２Ｐｏ、 １０ｇ／β
に２８Ｐ０． １０ｇ／β
Ｆ ｅ ＳＯ４・７ ）（２０２０ｍｇ／ｊ２ＺｎＳＯ
，−７８２０１０ｍｇ／ｎ Ｍｎ５○、・７Ｈ２０１０ｍｇ／β ＣａＣｎ２・２．Ｈ２０１００ｍｇ／ ｊ２ＭｇＳ○、
・７Ｈ２０１０ｇ、＃ ビ オ チ ン １５０ μｇ／ｌ ア テ゛ ニ ン ３０ μｇ／β り ア ニ ン ２０ μｇ／ β パントテン酸カルシュウム５ｍｇ／ｊ！チアミン塩酸塩
１５ｍｇ／＊ （ｐ Ｈ６，２＞ この培地に第４表に示す菌株をブイヨンスラント上で２
８℃、２４時間培養して得られた菌体を１白金耳接種し
、２８℃で培養する。培養中ｐＨが６．０〜７．０にな
った時、尿素３ｇ／βを添加する。こうして４日間培養
する。培養中蓄積された５′−キサンチル酸を第４表に
示す。
，−７８２０１０ｍｇ／ｎ Ｍｎ５○、・７Ｈ２０１０ｍｇ／β ＣａＣｎ２・２．Ｈ２０１００ｍｇ／ ｊ２ＭｇＳ○、
・７Ｈ２０１０ｇ、＃ ビ オ チ ン １５０ μｇ／ｌ ア テ゛ ニ ン ３０ μｇ／β り ア ニ ン ２０ μｇ／ β パントテン酸カルシュウム５ｍｇ／ｊ！チアミン塩酸塩
１５ｍｇ／＊ （ｐ Ｈ６，２＞ この培地に第４表に示す菌株をブイヨンスラント上で２
８℃、２４時間培養して得られた菌体を１白金耳接種し
、２８℃で培養する。培養中ｐＨが６．０〜７．０にな
った時、尿素３ｇ／βを添加する。こうして４日間培養
する。培養中蓄積された５′−キサンチル酸を第４表に
示す。
第４表
八Ｔｆ：Ｃ２１０７５１５
Ｔ−２２０
Ｔ−２７２０
実施例２、
種菌としてＴ−２を用いる。
第３表の液体培地（但しグルコース１８％）７５ Ｑｍ
ｌを２１容ジャーファーメンタ−に張り込み、１２０℃
、１０分間加熱滅菌する。これに実施例１と同様の方法
で調整したＴ−２の種菌体（スラント６本の菌体）を接
種し、３０℃で７２時間１通気１１ ／ｍｉｎ攪拌８０
０ｒｐｍで培養する。
ｌを２１容ジャーファーメンタ−に張り込み、１２０℃
、１０分間加熱滅菌する。これに実施例１と同様の方法
で調整したＴ−２の種菌体（スラント６本の菌体）を接
種し、３０℃で７２時間１通気１１ ／ｍｉｎ攪拌８０
０ｒｐｍで培養する。
尚、培養期間中の培養液のｐＨはアンモニア水を用いて
６．５〜７．５に維持する。培養終了後、培養液中には
５′−キサンチル酸が４０ｇ／β蓄積していた。なお同
様の方法で培養した親株Ａ、ＴＣＣ２１０７５では３０
ｇ／ｆｌであった。このＴ−２の培養終了液より菌体を
除去して得られた濾液５０ ＱｍｌをＩＮＨ（ｌでｐ
Ｈ０，３として強酸性カチオン交換樹脂ダイヤイオン５
Ｋｔｔ１ （）（型）に通した後、水でレジンを洗滌す
る。この流出液および水洗による最初の流出液を合わせ
て、飽和水酸化バリウム液でｐ Ｈ７，２に調節した後
、３０℃で減圧濃縮する。濃縮液１０ Ｑｍｌにエタノ
ール２０３ｍ１滴下して０℃で一昼夜放置すると、５′
−キサンチル酸バリウム塩の結晶を生じる。これを濾別
採取後常法によりキサンチル酸ナトリウム塩にかえ５′
−キサンチル酸・２ナトリウム塩の７水塩の結晶１５ｇ
が得られる。
６．５〜７．５に維持する。培養終了後、培養液中には
５′−キサンチル酸が４０ｇ／β蓄積していた。なお同
様の方法で培養した親株Ａ、ＴＣＣ２１０７５では３０
ｇ／ｆｌであった。このＴ−２の培養終了液より菌体を
除去して得られた濾液５０ ＱｍｌをＩＮＨ（ｌでｐ
Ｈ０，３として強酸性カチオン交換樹脂ダイヤイオン５
Ｋｔｔ１ （）（型）に通した後、水でレジンを洗滌す
る。この流出液および水洗による最初の流出液を合わせ
て、飽和水酸化バリウム液でｐ Ｈ７，２に調節した後
、３０℃で減圧濃縮する。濃縮液１０ Ｑｍｌにエタノ
ール２０３ｍ１滴下して０℃で一昼夜放置すると、５′
−キサンチル酸バリウム塩の結晶を生じる。これを濾別
採取後常法によりキサンチル酸ナトリウム塩にかえ５′
−キサンチル酸・２ナトリウム塩の７水塩の結晶１５ｇ
が得られる。
ぐθ・４７ノ
手続補正書（方式）
％式％
１、事件の表示
昭和５９年特許願第１２５５２号
２、発明の名称
５′−キサルチン酸の製造法
３、補正をする者
事件との関係 特許出願人
郵便番号 １００
住 所 東京都千代田区大手町−丁目６番１号名 称
（１０２）協和醗酵工業株式会社昭和５９年斗月中日（
発送日、昭和５９年４月２俸日）５袖正の対象 明 細 書 ６、補正の内容 明細書の浄書（内容に変更なし）
（１０２）協和醗酵工業株式会社昭和５９年斗月中日（
発送日、昭和５９年４月２俸日）５袖正の対象 明 細 書 ６、補正の内容 明細書の浄書（内容に変更なし）
Claims (1)
- ブレビバクテリウム属に属し、細胞壁合成阻害抗生物質
に耐性を有しかつ５′−キサンチル酸生成能を有する変
異株を培地に培養し、培養液中に５′−キサンチル酸を
生成蓄積せしめ、これを採取することを特徴とする５′
−キサンチル酸の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59012552A JPS60156399A (ja) | 1984-01-26 | 1984-01-26 | ５’−キサンチル酸の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59012552A JPS60156399A (ja) | 1984-01-26 | 1984-01-26 | ５’−キサンチル酸の製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60156399A true JPS60156399A (ja) | 1985-08-16 |
Family
ID=11808495
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59012552A Pending JPS60156399A (ja) | 1984-01-26 | 1984-01-26 | ５’−キサンチル酸の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60156399A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002165588A (ja) * | 2000-11-22 | 2002-06-11 | Ajinomoto Co Inc | 発酵法によるキサントシン−５’−モノフォスフェートの製造法 |
| US6821768B2 (en) | 2001-12-28 | 2004-11-23 | Cj Corporation | Corynebacterium ammoniagenes KCCM 10340 for producing 5'-xanthylic acid |
-
1984
- 1984-01-26 JP JP59012552A patent/JPS60156399A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002165588A (ja) * | 2000-11-22 | 2002-06-11 | Ajinomoto Co Inc | 発酵法によるキサントシン−５’−モノフォスフェートの製造法 |
| KR100862172B1 (ko) * | 2000-11-22 | 2008-10-09 | 아지노모토 가부시키가이샤 | 코리네박테리움 암모니아게네스의 변이주를 사용하는 발효법에 의한 크산토신-5'-모노포스페이트의 제조 방법 |
| US6821768B2 (en) | 2001-12-28 | 2004-11-23 | Cj Corporation | Corynebacterium ammoniagenes KCCM 10340 for producing 5'-xanthylic acid |
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