JPS6017517B2 - 補酵素ｑ↓１↓０の製造法 - Google Patents
補酵素ｑ↓１↓０の製造法Info
- Publication number
- JPS6017517B2 JPS6017517B2 JP57167594A JP16759482A JPS6017517B2 JP S6017517 B2 JPS6017517 B2 JP S6017517B2 JP 57167594 A JP57167594 A JP 57167594A JP 16759482 A JP16759482 A JP 16759482A JP S6017517 B2 JPS6017517 B2 JP S6017517B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- coenzyme
- nonionic surfactant
- genus
- coenzymes
- pronone
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、発酵法による補酵素Ｑ，ｏの製造法に関する
。
。
補酵素Ｑ，ｏはュビキノン１０とも呼ばれ、下等動植物
から高等動物に至るまで広く生物組織中に存在し、末端
の電子伝達系の構成成分として、生物体内におけるエネ
ルギー代謝に重要な生理的役割を有し、その薬理機能と
して、高血圧症、冠状動脈硬化症、弁膜症などに伴なう
狭心症状、うっ血症状を改善することなどが知られ、そ
れらの治療薬として実用に供されている。
から高等動物に至るまで広く生物組織中に存在し、末端
の電子伝達系の構成成分として、生物体内におけるエネ
ルギー代謝に重要な生理的役割を有し、その薬理機能と
して、高血圧症、冠状動脈硬化症、弁膜症などに伴なう
狭心症状、うっ血症状を改善することなどが知られ、そ
れらの治療薬として実用に供されている。
従来、発酵法による補酵素ね，ｏの製造法に関しては、
各種の細菌、酵母、糸状菌を培養し、菌体中から補酵素
Ｑ，ｏを採取する方法が報告されているが、いずれも菌
体中の補酵素Ｑ，。
各種の細菌、酵母、糸状菌を培養し、菌体中から補酵素
Ｑ，ｏを採取する方法が報告されているが、いずれも菌
体中の補酵素Ｑ，。
含有量が低いために、千甫酵素Ｑ，ｏを工業的かつ安価
に生産することが困難であった。そこで、本発明者らは
、補酵素ＱＭを工業的に、より有利に生産するため、菌
体中の補酵素Ｑ，。
に生産することが困難であった。そこで、本発明者らは
、補酵素ＱＭを工業的に、より有利に生産するため、菌
体中の補酵素Ｑ，。
含有量をさらに増大せしめる方法について研究を行なっ
た結果、桶酵素Ｑ，ｏの生産能を有する微生物を、下記
一般式で示される非イオン界面活性剤の存在下で培養す
ることにより、菌体内の桶酵素ＱＭ含量を顕著に増加さ
せ得ることを見出し、本発明を完成した。（式中、ｍ、
ｎ、ｍ′は任意の整数を表わす。
た結果、桶酵素Ｑ，ｏの生産能を有する微生物を、下記
一般式で示される非イオン界面活性剤の存在下で培養す
ることにより、菌体内の桶酵素ＱＭ含量を顕著に増加さ
せ得ることを見出し、本発明を完成した。（式中、ｍ、
ｎ、ｍ′は任意の整数を表わす。
）本発明においては、補酵素ね，。の生産能を有する微
生物として、例えば、シュードモナス属に属するシユー
ドモナス・デイミニユータ、シユードモナス・デニトリ
フイカンス、シユードモナス・シユイルキリエンシスな
ど、アグロバクテリウム属に属するアグロバクテリウム
・ツメフアシェンスなど、ロドスピリラム属に属するロ
ドスピリラム・ルブラムなど、ロドシュードモナス属に
属する０ドシユードモナス・カプシユラ−夕、ロドシユ
ードモナス・スフエロイデス、ロドシユードモナス・パ
ルストリスなど、いずれの菌株を用いても、上記非イオ
ン界面活性剤の添加効果が見られる。本発明における微
生物の培養に用いる培地としては、炭素源、窒素線、無
機塩、ビタミンなどの徴量要素をほどよく含有するもの
であれば、合成培地、天然培地のいずれも使用できる。
生物として、例えば、シュードモナス属に属するシユー
ドモナス・デイミニユータ、シユードモナス・デニトリ
フイカンス、シユードモナス・シユイルキリエンシスな
ど、アグロバクテリウム属に属するアグロバクテリウム
・ツメフアシェンスなど、ロドスピリラム属に属するロ
ドスピリラム・ルブラムなど、ロドシュードモナス属に
属する０ドシユードモナス・カプシユラ−夕、ロドシユ
ードモナス・スフエロイデス、ロドシユードモナス・パ
ルストリスなど、いずれの菌株を用いても、上記非イオ
ン界面活性剤の添加効果が見られる。本発明における微
生物の培養に用いる培地としては、炭素源、窒素線、無
機塩、ビタミンなどの徴量要素をほどよく含有するもの
であれば、合成培地、天然培地のいずれも使用できる。
すなわち、炭素源としては有機酸、アルコール類、炭化
水素類、糠類、油類など、窒素源としてはアンモニア態
窒素、硝酸態窒素、有機窒素などが用いられる。また、
その他カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩、リン
酸塩などの無機塩類および金属類の硫酸塩あるいは硝酸
塩などが用いられる。これらの培地に「一般式（式中、
ｍ、ｍ、ｎは任意の整数を表わす。
水素類、糠類、油類など、窒素源としてはアンモニア態
窒素、硝酸態窒素、有機窒素などが用いられる。また、
その他カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩、リン
酸塩などの無機塩類および金属類の硫酸塩あるいは硝酸
塩などが用いられる。これらの培地に「一般式（式中、
ｍ、ｍ、ｎは任意の整数を表わす。
）で示される非イオン界面活性剤、例えばプロノン（日
本油脂製品）などを添加して培養を行なうが、その非イ
オン界面活性剤は（ｍ＋ｍ′）が１〜３０、ｏが２５〜
４０の構造のものが良く、例えばブロノン２０１、２０
４（いずれも日本油脂製品）などが使用される。その至
通の添加濃度は０．０１〜０．１５％で、より好ましく
は０．０３〜０．０７％添加して培養を行なう。培養温
度は２５〜４０００が適当で、ｐＨは５〜９で培養する
のが好ましい。
本油脂製品）などを添加して培養を行なうが、その非イ
オン界面活性剤は（ｍ＋ｍ′）が１〜３０、ｏが２５〜
４０の構造のものが良く、例えばブロノン２０１、２０
４（いずれも日本油脂製品）などが使用される。その至
通の添加濃度は０．０１〜０．１５％で、より好ましく
は０．０３〜０．０７％添加して培養を行なう。培養温
度は２５〜４０００が適当で、ｐＨは５〜９で培養する
のが好ましい。
培養終了後は、常法どおり、例えば連続式遠心分離機あ
るいはドラムフィルターを用いて集菌し、抗酸化剤存在
下でケン化後、有機溶剤（例えば、メタノール、クロロ
ホルム、ヘキサンなど）で抽出し、シリカゲルによるカ
ラムクロマトグラフィーによって精製することにより、
精製補酵素Ｑ，ｏを得ることができる。
るいはドラムフィルターを用いて集菌し、抗酸化剤存在
下でケン化後、有機溶剤（例えば、メタノール、クロロ
ホルム、ヘキサンなど）で抽出し、シリカゲルによるカ
ラムクロマトグラフィーによって精製することにより、
精製補酵素Ｑ，ｏを得ることができる。
培地中に存在する上記非イオン界面活性剤の補酵素Ｑ，
ｏの生産に及ぼす影響を、各種菌株を用いて調べた実験
例を以下に示す。
ｏの生産に及ぼす影響を、各種菌株を用いて調べた実験
例を以下に示す。
実験例 １
グルコース２％、グリセリン２％、ベプトン１％、酵母
エキス０．３％、塩化ナトリウム０．２％、（ｐＨ６．
８）から成る培地に、さらにプロノン２０４を０．０５
％添加し、この培地１００の【を含む５００泌客フラス
コに、表１に示した各菌株を移植し、３が０で７２時間
振鶴培養を行なった。
エキス０．３％、塩化ナトリウム０．２％、（ｐＨ６．
８）から成る培地に、さらにプロノン２０４を０．０５
％添加し、この培地１００の【を含む５００泌客フラス
コに、表１に示した各菌株を移植し、３が０で７２時間
振鶴培養を行なった。
プロノン２０４の菌体内ネ建韓素Ｑ，ｏ含表１
量に与える影姿馨
※値はプ。
ノン２ｏ４無勅口をｌｏｏとしたオ団枇ヒ率を示す。こ
の結果から、表１に示したいずれの菌株においても、プ
ロノン２０４は補酵素Ｑ，。
の結果から、表１に示したいずれの菌株においても、プ
ロノン２０４は補酵素Ｑ，。
含量を増加させることがわかる。次に、表２に示した各
種非イオン界面活性剤の補酵素ね，ｏの生産に及ぼす影
響を調べた実験例を以下に示す。
種非イオン界面活性剤の補酵素ね，ｏの生産に及ぼす影
響を調べた実験例を以下に示す。
実験例 ２実験例１と同じ培地に各種非イオン界面活性
剤（日本油脂製品）を０．０５％添加して、実験例１と
同様にしてロドシュードモナス・スフェロイデスＡＳ−
１０５６３朱（徴工研菌寄第５２５２号）を移植培養を
行なった。
剤（日本油脂製品）を０．０５％添加して、実験例１と
同様にしてロドシュードモナス・スフェロイデスＡＳ−
１０５６３朱（徴工研菌寄第５２５２号）を移植培養を
行なった。
第 ２ 非イオン界面活性剤の繭体内ネ鹿酵素Ｑ，
ｏ鐘に与える燐※非イオン界面活性斉ｌ健勅。
ｏ鐘に与える燐※非イオン界面活性斉ｌ健勅。
をｌｏｏとした柚対ヒ率を示す。この結果から、各種非
イオン界面活性剤の中でもプロノン２０４が補酵素Ｑ，
ｏの生産には顕著な効果を示していることがわかる。
イオン界面活性剤の中でもプロノン２０４が補酵素Ｑ，
ｏの生産には顕著な効果を示していることがわかる。
次に、表３に示した一般式
日。
くＣＨ２ＣＨ２０）ｍ（ｍ、ｍ、ｎは
任意の整数を表わす）で示される非イオン界面活性剤の
補酵素Ｑ，ｏの生産に及ぼす影響を調べた実験例を以下
に示す。
補酵素Ｑ，ｏの生産に及ぼす影響を調べた実験例を以下
に示す。
実験例 ３
実験例１と同じ塔地に、上記一般式を有する非イオン界
面活性剤（日本油脂製品）を０．０５％添加して、実験
例１と同様にしてロドシュードモナス・スフェロィデス
ＡＳ−１０５６３珠（徴工研菌寄第５２５２号）を移植
培養を行なった。
面活性剤（日本油脂製品）を０．０５％添加して、実験
例１と同様にしてロドシュードモナス・スフェロィデス
ＡＳ−１０５６３珠（徴工研菌寄第５２５２号）を移植
培養を行なった。
この結果から、プロノン２０１、プロ／ン２０４が補酵
素ね，ｏの生産には顕著な効果を示していることがわか
る。
素ね，ｏの生産には顕著な効果を示していることがわか
る。
すなわち、（ｍ十ｍ′）が１〜３０、ｎが２５〜４０の
構造のものが補酵素Ｑ，。含量の増加に効果がある。（
ｍ，ｎ，血は任意の整数を表わす）で示表 ３ され
る非イオン界面活性剤の菌体内ネ腰算素Ｑ，ｏ含量に及
ぼす影多響※非イオン界面清性斉ｌ艇勅口をｌｏｏとし
た桐枇艦率を示す。
構造のものが補酵素Ｑ，。含量の増加に効果がある。（
ｍ，ｎ，血は任意の整数を表わす）で示表 ３ され
る非イオン界面活性剤の菌体内ネ腰算素Ｑ，ｏ含量に及
ぼす影多響※非イオン界面清性斉ｌ艇勅口をｌｏｏとし
た桐枇艦率を示す。
次に、非イオン界面活性剤プロノン２０４（日本油脂製
品）添加濃度を変化させて、補酵素Ｑ，ｏの生産に及ぼ
す影響を調べた実験例を図面に示す。
品）添加濃度を変化させて、補酵素Ｑ，ｏの生産に及ぼ
す影響を調べた実験例を図面に示す。
この結果から、プロノン２０４添加濃度が０．０１％を
超えると補酵素ね，。含量が急激に増大し−、０．０１
〜０．１５％の範囲でその促進効果が特に大きく、０．
０３〜０．０７％がより至通である。実施例 １ 実験例１と同じ培地にプロノン２０４（日本油脂製品）
を０．０５％添加して、２０ク客培養槽に培地を１２Ｚ
入れ、シユードモナス・デニトリフイカンス（ＡＴＣＣ
１３８６７）を移植後、３０仇ｐｍ、０．５ｖｖｍ、
３〆０で７幼時間培養後、生成した補酵素Ｑ，ｏを常法
によりケン化抽出し定量した。
超えると補酵素ね，。含量が急激に増大し−、０．０１
〜０．１５％の範囲でその促進効果が特に大きく、０．
０３〜０．０７％がより至通である。実施例 １ 実験例１と同じ培地にプロノン２０４（日本油脂製品）
を０．０５％添加して、２０ク客培養槽に培地を１２Ｚ
入れ、シユードモナス・デニトリフイカンス（ＡＴＣＣ
１３８６７）を移植後、３０仇ｐｍ、０．５ｖｖｍ、
３〆０で７幼時間培養後、生成した補酵素Ｑ，ｏを常法
によりケン化抽出し定量した。
同時に対照区としてプロノン２０４鴎添加培養も行なっ
た。その結果は表４に示すとおりである。表 ４ さらにプロノン２０４添加区菌体を常法によりケン化、
エタノールにより抽出後、シリカゲルカラムでクロロホ
ルム：ベンゼン（９５：５）で、溶出後、エタノール晶
折して補酵素Ｑ，。
た。その結果は表４に示すとおりである。表 ４ さらにプロノン２０４添加区菌体を常法によりケン化、
エタノールにより抽出後、シリカゲルカラムでクロロホ
ルム：ベンゼン（９５：５）で、溶出後、エタノール晶
折して補酵素Ｑ，。
３０の９の結晶を得た。
また、対照区からも同様にして２２の９の結晶を得た。
実施例 ２ 実施例１と同様にして、アグロバクテリウム・トウメフ
アシェンス（ＩＦ０３０５８）を移植後、培養を行ない
、同様にして定量した。
実施例 ２ 実施例１と同様にして、アグロバクテリウム・トウメフ
アシェンス（ＩＦ０３０５８）を移植後、培養を行ない
、同様にして定量した。
その結果は表５に示すとおりである。表５
実施例 ３
実施例１と同様にして、ロドスピリラム・ルフラム（ｍ
０３９８６）を移植後、培養を行ない、同様にして定量
した。
０３９８６）を移植後、培養を行ない、同様にして定量
した。
その結果は表６に示すとおりである。表６
実施例 ４
実施例１と同様にして、ロドシュードモナス・スフェロ
ィデスＡＳ−１０５６３朱（徴工研菌寄第５２５２号）
を移植後、培養を行ない、同様にして定量した。
ィデスＡＳ−１０５６３朱（徴工研菌寄第５２５２号）
を移植後、培養を行ない、同様にして定量した。
その結果は表７に示すとおりである。表７
従来、発酵法による補酵素Ｑ，ｏの製造において、本発
明のような一般式で示される非イオン界面活‘性剤の存
在が、菌体中の補酵素Ｑ，ｏの含有量を増大せしめるこ
とは全く知られておらず、これは本発明者らによりはじ
めて見出されたものであり、工業的に容易に安価に収率
良く多量の補酵素Ｑ，ｏを製造することを可能にした。
明のような一般式で示される非イオン界面活‘性剤の存
在が、菌体中の補酵素Ｑ，ｏの含有量を増大せしめるこ
とは全く知られておらず、これは本発明者らによりはじ
めて見出されたものであり、工業的に容易に安価に収率
良く多量の補酵素Ｑ，ｏを製造することを可能にした。
図面の簡単な説明図面は培地中のプロノン２０４膿度と
菌体中の補酵素Ｑ，。
菌体中の補酵素Ｑ，。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 補酵素Ｑ＿１＿０の生産能を有する微生物を、一般
式▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ｍ、ｍ′、ｎは任意の整数を表わす。 ）で示される非イオン界面活性剤の存在下で培養するこ
とを特徴とする補酵素Ｑ＿１＿０の製造法。２ 補酵素
Ｑ＿１＿０の生産能を有する微生物がシユードモナス属
、アグロバクテリウム属、ロドスピリラム属、ロドシユ
ードモナス属に属する微生物である特許請求の範囲第１
項記載の補酵素Ｑ＿１＿０の製造法。 ３ 非イオン界面活性剤の（ｍ＋ｍ′）が１〜３０、ｎ
が２５〜４０であり、その添加濃度が０．０１〜０．１
５％である特許請求の範囲第１項または第２項記載の補
酵素Ｑ＿１＿０の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57167594A JPS6017517B2 (ja) | 1982-09-28 | 1982-09-28 | 補酵素ｑ↓１↓０の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57167594A JPS6017517B2 (ja) | 1982-09-28 | 1982-09-28 | 補酵素ｑ↓１↓０の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5959197A JPS5959197A (ja) | 1984-04-04 |
| JPS6017517B2 true JPS6017517B2 (ja) | 1985-05-02 |
Family
ID=15852652
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57167594A Expired JPS6017517B2 (ja) | 1982-09-28 | 1982-09-28 | 補酵素ｑ↓１↓０の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6017517B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6285609A (ja) * | 1985-10-09 | 1987-04-20 | 株式会社 日本可鍛鋳鉄所 | 鋼管腕金用の導体耐張装置取付金具 |
-
1982
- 1982-09-28 JP JP57167594A patent/JPS6017517B2/ja not_active Expired
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6285609A (ja) * | 1985-10-09 | 1987-04-20 | 株式会社 日本可鍛鋳鉄所 | 鋼管腕金用の導体耐張装置取付金具 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5959197A (ja) | 1984-04-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPS59118090A (ja) | ロウ・エステル、高級脂肪アルコ−ルおよび高級脂肪酸の製造法 | |
| JPH0775589A (ja) | プロトカテキュ酸の製造方法 | |
| JPS6017517B2 (ja) | 補酵素ｑ↓１↓０の製造法 | |
| JPS5824119B2 (ja) | 微生物によるユビキノン−１０の製造法 | |
| JPH0286789A (ja) | 微生物によるアラキドン酸含有油脂の製造方法 | |
| JPS639835B2 (ja) | ||
| JPH04152895A (ja) | 光学活性１，３―ブタンジオールの製法 | |
| JP2519980B2 (ja) | （ｓ）−２−ヒドロキシ−４−フェニル−３−ブテン酸の製造方法 | |
| JP2761064B2 (ja) | 光学活性１，３―ブタンジオールの製法 | |
| JPH0614876B2 (ja) | 光学活性α−ヒドロキシケトンおよびそのカルボン酸エステルの製造法 | |
| SU966115A1 (ru) | Штамм рSеUDомоNаS меNDосINа 3121 продуцент холестеролэстеразы | |
| JPH0683672B2 (ja) | 醗酵法によるパルミトレイン酸の製造法 | |
| JPH0787988A (ja) | 海洋性微細藻類の培養方法 | |
| JPH0260590A (ja) | 天然型アブシジン酸の製造方法 | |
| JPS5921599B2 (ja) | Ｄ（−）−β−ヒドロキシイソ酪酸の製造法 | |
| JPS6137097A (ja) | γ−リノレン酸含量の高い脂質成分の製法 | |
| JPH04126097A (ja) | 光学活性アミン類の製造方法 | |
| JPS5945894A (ja) | 補酵素ｑ↓１↓０の製造法 | |
| JPH0787959A (ja) | 海洋性微細藻類の培養方法 | |
| JPH0566957B2 (ja) | ||
| JPS63198993A (ja) | 新規微生物および新規微生物を使用するメナキノン−４の製造法 | |
| JPS6012993A (ja) | 光学活性カルボン酸の製造法 | |
| JPS6244915B2 (ja) | ||
| JPS6257312B2 (ja) | ||
| JPS639836B2 (ja) |