JPS6137097A - γ−リノレン酸含量の高い脂質成分の製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〈産業上の利用分野〉 本発明はジルベルテラ属に属するＴ−リノレン酸く以下
Ｇ　Ｌ　Ａという）含量の高い脂質生産菌を炭素源濃度
の高い培地で培養し、集めた菌体よりＧＬＡ含量の高い
脂質（中性脂質、極性脂質など）を製造する方法に係る
。

〈従来の技術〉 これまでに報告されたＧＬＡ含有微生物についてはＲ，
Ｏ，Ｍｕｍｍａ　ＣＬｉｐｉｄｓ、　６．５８４　（１
９７１）　）　、、　Ｒ，Ｓｈａｗ　ＣＢｊｏｃｈｅｍ
、　Ｂｉｏｐｈｙｓ、　Ａｃｔａ、　９８　％２３０　
（１９６５））　、鈴木ら〔油化学、Ｕ、８６３、（１
９８１））などの文献に記されているが、全脂質でのＧ
　Ｌ　Ａ含量は全体に低く、十数％にすぎない。また、
最近公告された鈴木らの発明（特公昭５８−２２１９　
Ｌ’ｉ＋）ではモルティエレラ属の糸状菌を用い、培地
に炭化水素を添加することにより、ＧＬＡ含量が全脂質
の脂肪酸組成の２０％以上になると報告されている。し
かしこのように培地に炭化水素を添加しても、完全にそ
の炭化水素を資化できず、醗酵終了後もいくらかが培地
中に残存する。そのため、総脂質中にこの炭化水素が混
入し、その後のＧＬＡの精製に困難を生じるという問題
があった。

〈発明が解決しようとする問題点〉 そこで本発明者らは■ＧＬＡ含量が高い、■油分含量が
高い、■生育速度が早いなどの条件を満す菌株のスクリ
ーニングを行った結果、ジルベルテラ・ペルシキャリア
（Ｇｉｌｂｅｒｔｅｌｌａ　Ｐｅｒｓｉｃａｒｉａ以下
Ｇ、Ｐｅｒｃｉｃａｒｉａと記す）（ＮＲＲＬ−１５４
６，２３５７，２７００）が、これにほぼ適合すること
を見出し、本発明を完成するに至った。

〈問題点を解決するための手段〉 本発明はジルベルテラ属に属するＴ−リノレン酸含量の
高い脂質生産菌を炭素源濃度の高い培地で培養し、培養
物からＴ−リノレン酸含量の高い脂質を採取することを
特徴とする脂質成分の製法である。

本発明で使用する菌は、上述のＧ、Ｐｅｒｓｉｃａｒｉ
ａが適当であるが、ジルベルテラ属に属するものであれ
ばすべての菌が使用できる。これらの菌はいずれも米国
ノーザンリージョナルリサーチラボラトリー（Ｎｏｒｔ
ｈｅｒｎ　Ｒｅｇｉｏｎａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｌａ
ｂｏｒａｔｏｒｙ　）に保存され、カタログに記載され
ている糸状菌である。

培養する際の培地組成については、特に規定するもので
はないが、グルコース、酢酸ナトリウムなどの有機炭素
源が好ましい。またその使用量は３〜３０重量％程度用
いるのが望ましい。窒素源は、酵母エキス、麦芽エキス
等の有機窒素源のほか、硝酸塩、尿素なども使用できる
。また、これらの組成分の他、ビタミンＢ６のようなビ
タミン類の添加も、生育を早めるのに効果的である。

上記糸状菌の培養は、通常液体培地で静置培養、振とう
培養、通気攪拌培養などにより行う。培地のＰＨは微酸
性乃至中性が良い。培養温度は１５〜３０℃程度が好ま
しく、培養期間は４〜１５日間程度が必要である。この
ようにして得られた培養物より菌体を集め、その菌体よ
り脂質抽出を行う。

ＧＬＡを含む脂質が培地中に分泌されることはないので
、培地を回収する必要はない。脂質の抽出法については
、湿菌体とガラスピーズを混合してｎ−ヘキサンなどの
溶剤とともにホモジナイズする方法や、湿菌体を凍結乾
燥後、ｎ−ヘキサン：イソプロパツール混合溶剤などで
抽出する方法などで行われる。また、必要により得られ
た総脂質を常法によりケン化分解すれば、ＧＬＡ含量の
高い脂肪酸混合物が得られる。

ＧＬＡは、リノール酸から動物体内において合成される
脂肪酸であり、ＧＬＡとなった後にもビスホモ−Ｔ−リ
ノレン酸を経由してプロスタグランジンＥ１、Ｆ、およ
びＥいＦ２などに変換されるという非常に重要な役割を
持つ物質である。最近になり、リノール酸からＧＬＡへ
の変換反応が、老化、アルコール摂取、ビタミン不足な
どの要因により著しく阻害されることが見出され、ＧＬ
Ａの不足による体内プロスタグランジンバランスの変化
がアレルギー疾患、血栓症、ガンなどの原因の１つにあ
げられるようになっている。

ＧＬＡは、月見草種子などのような植物種子中にも微量
存在することが知られているが、総脂質の脂肪酸組成の
せいぜい１０％どまりである。また、このような植物種
子油はＧＬＡ以外の脂肪酸′　主成分として７０％はど
のリノール酸を含むためケン化分解した後の脂肪酸混合
物よりＧＬＡを精製する場合、溶剤分別などの手法を用
いても、両者が非常によく似た挙動を示すため分離が困
難であった。これに対し、本発明によるＧＬＡ高含量油
は表−１に示すようにＧＬＡに対し、リノール酸のよう
な物理的性質のよく偵た脂肪酸が比較的少なく、ＧＬＡ
の精製も容易である。

表−Ｉ　　Ｇ、Ｐｅｒｓｉｃａｒｉａより抽出した脂質
の脂肪酸組成 また本発明方法によれば、炭素源はグルコースなどの安
全性の確認された有機炭素源を使用できるから、このよ
うな場合は、炭化水素を炭素源とする場合に比べ安全性
が高いというメリットもある。またジルベルテラ属の菌
は、これまでにアフラトキシンなどの有毒物質を生産し
ないことが確認されている。

実施例１ 表−２に示すような有機栄養培地（１１）にＧ。

Ｐｅｒｓｉｃａｒｉａ　（Ｎ　ＲＲＬ　−１５４６）を
接種し、２７°Ｃ１８０間、２０　Ｏｒｐｍで振とう培
養した。培養後、口過にて菌体を回収し凍結乾燥した。

これにより、培地１１あたり５．０ｇの乾燥菌体を得た
。

この菌体より、ｎ−ヘキサン：イソプロパツール＝３：
２（ｖ／ν）の混合溶剤で総脂質を抽出し除去した後、
脂肪酸を得、これをメチルエステル化して脂肪酸組成を
分析した。結果を表−３に示（水で１ｊ２にする） 表−３ ００ｒｐｍで振とう培養した。培養後、実施例１と同様
に処理した結果、乾燥菌体３．２　ｇ　、総脂質１゜０
５ｇが得られた。このものの総脂肪酸組成を表裏−５ 実施例３ 表−６に示す培地（３０ｊりを５ｏｌのジャーファーメ
ンタ−に入れ、加熱加圧殺菌後、Ｇ、Ｐｅｒｓｉｃａｒ
ｉａ　　（ＮＲＲＬ−２３５７）を接種し３０’ｃ４日
間の通気攪拌培養を行った。なお、培地のＰＨは常に４
．０以上となるよう調節した。培養後、表−６ グルコース　　　　　　　２５０　　　ｇ／Ａ’酵母エ
キス　　　　　　　　　３　　〃尿　　　素　　　　　
　　　　　　　　１５　　　〃（Ｎｌ＋、）よ５％　　
　　５　ｔｔ Ｋｌｌ、Ｐｏ、　　　　１０１１ Ｍｇ５Ｏ，７Ｈ，０２Ｎ ＮａＣｌ　　　　　　　　　　　　　　　　０．３　　
ｇ／　ＲＦｅ５Ｏ４７ＨＬ０　　　　　　　　　　　　
　　　３　０　　　■／　ｌｌＣａＣｌ　　　　　　　
　　　　　　　　　３０　　　　”ＣｕＳＯ４５Ｈｉ　
Ｏ０，５ｔｔ ＺｎＳＯ４７ＨｚＯ３〃 ＭｎＣ１ｔ　４１ｆ、ｏ　　　　　　　　　　　　　３
　　　　／／ビタミンＢ６　　　　　　　　　６　　〃
表−７ 〈発明の効果〉 本発明のジルベルテラ属に属するＴ−リノレン酸含量の
高い脂質生産菌を炭素源濃度の高い培地で培養すること
によって、培養物がらＴ−リノレン酸含量が総脂質の脂
肪酸組成の２０％以上である高い脂質を採取することが
できた。

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. （１）ジルベルテラ属に属するγ−リノレン酸含量の高
   い脂質生産菌を炭素源濃度の高い培地で培養し、培養物
   からγ−リノレン酸含量の高い脂質を採取することを特
   徴とする脂質成分の製法。
2. （２）ジルベルテラ属に属するγ−リノレン酸含量の高
   い脂質生産菌がジルベルテラ・ペルシキャリア（Ｇｉｌ
   ｂｅｒｔｅｌｌａ　Ｐｅｒｓｉｃａｒｉａ）である特許
   請求の範囲第１項記載の製法。
3. （３）培地の炭素源が有機炭素源である特許請求の範囲
   第１項記載の製法。
4. （４）γ−リノレン酸含量が総脂質の脂肪酸組成の２０
   ％以上である特許請求の範囲第１項又は第２項記載の製
   法。
5. （５）特許請求の範囲第１項、第２項又は第３項記載の
   方法で得られた脂質成分をケン化分解することを特徴と
   するＴ−リノレン酸含量の高い脂質成分の製法。