JPS6137096A - γ−リノレン酸含量の高い脂質成分の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〈産業上の利用分野〉 本発明はタムニブイウム属に属するγ−リノレン酸（以
下ＧＬＡという）含量の高い脂質生産菌を炭素源濃度の
高い培地で培養し、集めた菌体よりＧＬＡ含量の高い脂
質（中性脂質、極性脂質など）を製造する方法に係る。

〈従来の技術〉 これまでに報告されたＧＬＡ含有微生物についてはＲ，
Ｏ，Ｍｕｍｍａ　ＣＬｉｐｉｄｓ、　６．５８４　（１
９７１）　　）　　、　Ｒ９Ｓｈａｗ　　　（Ｂｉｏｃ
ｈｅｍ、　　Ｂｉｐｈｙｓ、　　八ｃｔａ、９８．２３
０　（１９６５））　、給水ら〔油化学、Ｕ、８６３、
（１９８１））などの文献に記されているが、全脂質で
のＧＬＡ含量は全体に低く、十数％にすぎない。また、
最近公告された給水らの発明（特公昭５８−２２１９９
号）ではモルティエレラ属の糸状菌を用い、培地に炭化
水素を添加することにより、ＧＬＡ含量が全脂質の脂肪
酸組成の２０％以上になると報告されている。しかし、
このように、培地中に炭化水素を添加しても、完全にそ
の炭化水素を資化できず、醗酵終了後も、いくらかが培
地中に残存する。そのため総脂質中に、この炭化水素が
混入しその後のＧＬＡの精製に困難を生じるという問題
があった。

〈発明が解決しようとする問題点〉 そこで本発明者らは■ＧＬＡ含量が高い、■油分含量が
高い、■生育速度が早いなどの条件を満す菌株のスクリ
ーニングを行った結果、タムニディウム・エレガンス（
Ｔｈａｍｎｉｄｉｕｍ　ｅｌｅｇａｎｓ以下Ｔ。

ｅｌｅｇａｎｓと記す）　（ＮＲＲＬ−１６１３，２４
６８，２４，６９）が、これにほぼ連合することを見出
し、本発明を完成するに至った。

く問題点を解決するための手段〉 本発明はタムニブイウム属に属するγ−リノレン酸含量
の高い脂質生産菌を炭素源濃度の高い培地で培養し、培
養物からγ−リノレン酸含量の高い脂質を採取すること
を特徴とする脂質成分の製造方法である。

本発明で使用する菌は、上述の７．６１ｅｇａｎｓが適
当であるが、カニンガメラ属に属するものであればすべ
ての菌が使用できる。例えば、タムニディウムアノマラ
ム（Ｔｈａｍｎｉｄｉｕｍａｎｏｍａｌｕｍ）　　（Ｎ
ＲＲＬ−２４６５）などである。これらの菌はいずれも
米国ノーザンリージョナルリサーチラボラトリー（Ｎｏ
ｒｔｈｅｒｎ　Ｒｅｇｉｏｎａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）に保存され、カタログに記載さ
れている糸状菌である。

培養する際の培地組成については、特に規定するもので
はないが、グルコース、酢酸ナトリウムなどの有機炭素
源が好ましい。またその使用量は３〜３０重量％程度用
いるのが望ましい。窒素源は、酵母エキス、麦芽エキス
等の有機窒素源のほか、硝酸塩、尿素なども使用できる
。また、これらの組成分の他、ビタミンＢ６のようなビ
タミン類の添加も、生育を早めるのに効果的である。

上記糸状菌の培養は、通常液体培地で静置培養、振とう
培養、通気攪拌培養などにより行う。培地のＰＨは微酸
性乃至中性が良い。培養温度は１５〜３０℃程度が好ま
しく、培養期間は４〜１５日間程度が必要である。この
ようにして得られた培養物より菌体を集め、その菌体よ
り脂質抽出を行う。

Ｇ　Ｌ　Ａを含む脂質が培地中に分泌されることはない
ので、培地を回収する必要はない。脂質の抽出法につい
ては、湿菌体とガラスピーズを混合してｎ−ヘキサンな
どの溶剤とともにホモジナイズする方法や、湿菌体を凍
結乾燥後、ｎ−ヘキサン：イソプロパツール混合溶剤な
どで抽出する方法などで行われる。また、必要により得
られた総脂質を常法によりケン化分解すれば、ＧＬＡ含
量の高い脂肪酸混合物が得られる。

Ｇ　Ｌ　Ａは、リノール酸から動物体内において合成さ
れる脂肪酸であり、ＧＬＡとなった後にもビスホモ−γ
−リノレン酸を経由してプロスタグランジンＥ１、Ｆｌ
およびＥｌ、　Ｆ、などに変換されるという非常に重要
な役割を持つ物質である。最近になり、リノール酸から
ＧＬＡへの変換反応が、老化、アルコール摂取、ビタミ
ン不足などの要因により著しく阻害されることが見出さ
れ、ＧＬＡの不足による体内プロスタグランジンバラン
スの変化がアレルギー疾患、血栓症、ガンなどの原因の
１つにあげられるようになっている。

ＧＬＡは、月見草種子などのような植物種子中にも微量
存在することが知られているが、総脂質の脂肪酸組成の
せいぜい１０％どまりである。また、このような植物種
子油はＧＬＡ以外の脂肪酸主成分として７０％はどのリ
ノール酸を含むためケン化分解した後の脂肪酸混合物よ
りＧＬＡを精製する場合、溶剤分別などの手法を用いて
も、両者が非常によく似た挙動を示すため分離が困難で
あった。これに対し、本発明によるＧＬＡ高含量油は表
−１に示すようにＧＬＡに対し、リノール酸のような物
理的性質のよく似た脂肪酸が比較的少なく、ＧＬＡの精
製も容易である。

表−１ Ｔ、　ｅｌｅｇａｎｓより抽出した脂質の脂肪酸組成ま
た本発明方法によれば、炭素源はグルコースなどの安全
性のＷ１認された有機炭素源を使用できるから、このよ
うな場合は、炭化水素を炭素源とする場合に比べ安全性
が高いというメリットもある。またタムニディウム属の
菌は、これまでにアフラトキシンなどの有毒物質を生産
しないことが確認されている。

実施例　１ 表−２に示すような有機栄養培地（１１）にＴ。

ｅｌｅｇａｎｓ　　（ＮＲＲＬ　−１６１３）を接種し
、２７℃、８日間、２００　ｒｐｍで振とう培養した。

培養後、口過にて菌体を回収し凍結乾燥した。これによ
り、培地ＩＩｌあたり４．０ｇの乾燥菌体を得た。

この菌体より、ｎ−ヘキザン：イソプロパノール＝３：
２（ｖ／ν）の混合溶剤で総脂質を抽出したところ、０
．９ｇの脂質が得られた。次に脂質の一部を常法により
、ケン化分解し、不ケン化物を除去した後、脂肪酸を得
、これをメチルエステル化して脂肪酸組成を分析した。

結果を表−３に示す。

表−２ （水で１１にする） 表−３ 実施例　２ 表−４に示す培地（１１）にＴ、　ｅｌｅｇａｎｓ　（
Ｎ　ＲＲＬ−２４６８）を接種し２３℃、９日間２００
ｒｐｍで振とう培養した。培養後、実施例１と同様に処
理した結果、乾燥菌体３．６ｇ、総脂質０．９５ｇが得
られた。このものの総脂肪酸組成を表−５に示す。

表−４ 表−５ 実施例　３ 表−６に示す培地（３０７りを、５０ｆｆのジャーフプ
ーメンターに入れ、加熱加圧殺菌後Ｔ、　ｅｌｅｇａｎ
ｓ（ＮＲＲＬ−２４６８）を接種し、２８℃、５日間の
通気攪拌培養を行った。なお培地のＰ　Ｈは、常に４．
０以上となるよう調節した。

表−６ グルコース　　　　　　　　２００　　ｇ／７！酵母エ
キス　　　　　　　　　　２　　“尿素　　　　　１５
〃 ＫＩ−５ＰＯ午　　　　１０〃 ＭｇＳＯ４・７Ｈ，０２” ＮａＣｌ　　　　　　Ｏ，３〃 ＦｅＳＯ４・７Ｈ，０３０ｍｇ／Ａ ＣａＣＩｚ　　　　　　３０　　／／ ＣｕＳ０４−・５１１１０　０．５〃 Ｚｎ５ＯＩ）・７Ｈ，０３〃 ＭｎＣ１，Ｌ・４Ｈ，０３〃 ビタミンＢ　　　　　　　　　　　６　　“ビオチン　
　　　　　　　　　　　０．０６〃培養後、実施例１と
同様に処理した結果、乾燥菌体１３５０ｇ、総脂質４．
３０　ｇが得られた。このものの総脂肪酸組成を表−７
に示す。

表−７ 〈発明の効果〉 本発明のタムニブイウム属に属するγ−リノレン酸含量
の高い脂質生産菌を炭素源濃度の高い培地で培養するこ
とによって、培養物からγ−リノレン酸含量が総脂質の
脂肪酸組成の２０％以上である高い脂質を採取すること
ができた。

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. （１）タムニディウム属に属するγ−リノレン酸含量の
   高い脂質生産菌を炭素源濃度の高い培地で培養し、培養
   物からγ−リノレン酸含量の高い脂質を採取することを
   特徴とする脂質成分の製造法。
2. （２）タムニディウム属に属するγ−リノレン酸含量の
   高い脂質生産菌がタムニディウム・エレガンス（Ｔｈａ
   ｍｎｉｄｉｕｍ　ｅｌｅｇａｎｓ）である特許請求の範
   囲第１項記載の製造法
3. （３）培地の炭素源が有機炭素源である特許請求の範囲
   第１項記載の製造法。
4. （４）γ−リノレン酸含量が総脂質の脂肪酸組成の２０
   ％以上である特許請求の範囲第１項又は第２項記載の製
   造法。
5. （５）特許請求の範囲第１項、第２項又は第３項記載の
   方法で得られた脂質成分をケン化分解することを特徴と
   するγ−リノレン酸含量の高い脂質成分の製造法。