JPS6314695A - γ―リノレン酸及びこれを含有する脂質の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は醗酵法によ、るγ−リノレン酸の製造方法に関
する。 〔従来技術〕 現在までに、γ−リノレン酸を生産するモルティエレラ
（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌ　Ｉａ）属に属する微生物として
は、モルティエレラ・イサベリナ、モルティエレラ・ビ
ナセア、モルティエレラ・ラマニアナ、モルティエレラ
・ラマニアナ・アングリスボラ、及びモルティエレラ・
ナナが報告されている（特開昭６Ｏ−１６８３９１）。 しかしながら、」＝配力法においては炭素源として、高
濃度の炭水化物が必要であり、また、生成脂質量におけ
るγ−リノレン酸の占める割合は決して高いものではな
い。 〔発明が解決しようとする問題点〕 本発明は、従来γ−リノレン酸を生産する能力を有する
ことが知られていなかったモルティエレラ属微生やモル
ティエレラ・エロンガタ、モルテ５イエレ゛う・エキシ
グア、又はモルティエレラ・ヒグロフィラを使用して、
安価な常用の培地を用いて、従来法より高収率で、しか
も単純な工程でγ−リノレン酸を製造ずイ）ごとが（き
る方法を折供しようとするものである。　 　−〔問題点を解決するだめの手 段〕上記の目的は干ルティエレラ属に属するエルティエ
レラ・エロンガタ、モルディエレラ・エキシグア、又は
エルティエレラ・ヒゲ１１フイラを培養してγ−リノレ
ン酸、又はγ、リルン酸を含有する脂質を生成せしめ、
そしてγ−リノレン酸を採取することを特徴とするγ−
リノレン酸の製造方法により達成される。 〔具体的な説明〕 本発明において使用することができる微生物の例として
、モルテイエレラ・工１′１ンガタΩ垣０１虹旦１１ａ
ｅセ■［柚り□ＩＦＯ８５７０、モルティエレラ・エキ
シグア（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ　ｅｘｉ　ｕａ）ＩＰ
Ｏ８５７１、モルティエレラ・ヒグロフィラ（Ｍｏｒｔ
ｉｅｒｅｌ　１ａｈＵ亜厄■）　Ｉ　Ｐ　０５９４１等
が財団法人醗酵研究所からなんら制限な（人手すること
ができる。 また、本発明者らが土壌から分離した菌株モルティエレ
ラ・エロンガタＳＡＭ　０２１９　（微工研菌寄第８７
０３号）を使用することもできる。 次に、上詰の菌株ＳＡＭ’０２１９　（微工研菌寄第８
７０３１　号）の菌学的性質を記載する。 各培地における生育状態 、培養条件：２５℃、暗黒下 １、麦芽エキス寒天培地　　　゛ コロニーの生育は良好、培養２日目のコロニーは直径２
８−３１ｍｍ　、培養５日目のコロニーは直径６５−７
２ｍｍ　、コロニーは決裂状を呈する、気菌糸の発達は
乏しい、胞子のう胞子の形成は良好、胞子のう柄は気菌
糸より生じる、ニンニクに類似した臭いあり。 ２、バレイショ・ブＩつ糖寒天培地 コロニーの生育は良好、培養２日目のコロニーは直径２
７−３１ｍｍ　、培養５１−、、ｌ’　１１のコロニー
は直径７５−８Ｏｎ＋ｍ　、　＝ｒ口二一はバー７（７
）乳状を呈する、コロニー中心部で気菌糸が著しく発達
する、コロニーの裏側は黄白色あるいは黄色、胞子のう
胞子の形成は不良、ニンニクに類似した臭いあり、臭い
はやや強い。 ３、　ツアペック寒天培地 コロニーの生育は比較的良好、培養２日目のコロニーの
直径は２２−２４ｍ−ｍ　、培養５日目のコロニーの直
径は５０−５３ｍｍ　、気菌糸の発達は乏しい、気菌糸
が密にからまりあうことがある。 胞子のう胞子の形成は非常に良好、胞子のう柄は気菌糸
より生じる。ニンニクに類似した臭いあり。 ４、ＬＣＡ寒天培地（培地の調製方法は、三浦宏一部、
工藤光代と“水生不完全菌のための一寒天培地”１１本
蘭学会会報１１巻、１１６−１１８頁、１９７０年に従
った） コロニーの生育は良好、培養２日目のコロニーの直径は
２７−２９ｍｍ　、培養５日目のコロニーは直径６４−
６６ｍｍ・、コロニーは決裂状を呈する、気菌糸の発達
はコロニーの中心部を除いて乏しい、胞子のう胞子の形
成は良好。胞子のう柄は気菌糸より生じる。ニンニクに
類似した臭いあり。 検鏡観察 各培地の検鏡標本およびコロニーの直接検鏡で、胞子の
う柄、胞子のう柄の分岐の仕方、胞子のう、胞子のう胞
子などを観察した。 胞子のう柄は長さ８７．５−３２０μｍ、幅は基部で３
−７．５μｍ、先端に向けて先細り、１．　Ｏ−２，５
μｍとなる。胞子のう柄はしばしば基部で分岐する。胞
子のうば球形、直径１５−３０μｍ、内部に多数の胞子
のう胞子を含む、離脱後やや不明瞭なカラーを残す。胞
子のう胞子は楕円形、希に腎臓形、表面は平滑ミ７．５
−１２．５Ｘ　５−７．５μｍ、厚膜胞子は比較的多数
形成される。単独、希に連鎖することがある。時に数本
の菌糸を周囲に出すことがある。楕円形またＩＦ　Ｌｌ
ｉ形、Ｈ！、５−３０　ｘ　７．５−１５μｍ０または
直径１２．５−１５　Ｉｔ　ｍ。接合胞子は観察されな
い。 ３、生理的性質 Ｒ通生育条件 ｐＨ：６−９ 温度：２０３（ビ（： 生育の範囲 ｐ　Ｈ７４−１０ 温度：　５−４０°〔： 以上の菌学的諸ｔ／Ｉ？ｒに従い本発明の菌株（ＳＡＭ
−０２１９）の分類学部位；６の検索を、Ｊ、八、ｖｏ
ｎ　Ａｒｘ。 ”Ｔｈｅ　Ｇｅｎｅｒａ　　ｏｆ　　Ｆｕ＋Ｂ４ｉ　　
５ｐｏｒｕｌａｔｉｎＢ　　ｉｎ　　ＰｕｒｅＣｕｌｔ
ｕｒｅ＋”　３ｒｄ　ｃｄ、、、　Ｊ、Ｃｒａｍｅｒ＋
１９旧、およびに、Ｈ。 Ｄｏｍｓｃｈ、　　Ｗ、Ｇａｍ５＋＆　　１’、Ｉｌ、
八ｎｄｅｒｓｏｎ、　Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ　　ｏｆＳ
ｏｉｌ　Ｆｕｎｇｉ、”＾ｃａｄｐｍｉ（、Ｐｒｅｓｓ
、　１９８０に準拠して求めると、胞子のう柄の先端に
球状の胞子のうを形成する、柱軸を持たない、胞子のう
胞子に付属糸がない、培養菌糸がニンニクに類似した臭
いを発する、ということから本菌株はＭｏｒｔｉｅｒｅ
ｌｊａ属に属する真菌であると考えられる。 そこで、Ｗ、Ｇａｍ５＋″Ａ　Ｋｅｙ　ｔｏ　ｔｈｅ　
５ｐｅｃｉｅｓ　ｏｆＭｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ、Ｐｅｒ
ｓｏｏｎｉａ　９　、　３８１−３９１　、１９７７準
拠して既知のル生り−ｅｒｅｌｌａ属の種類と菌学的諸
性質を比較すると、本菌株はコロニーがビロード状でな
い、培養菌糸がニンニクに＠領した臭いを発つする、胞
子のう柄が長さ８７．５．３２０μｍで分岐は下部での
み生じ、葡萄の房状に分岐しない、胞子のうば内部に多
数の胞子のう胞子を含む、ということからＭｏｒｔｉｅ
ｒｅｌｌａ属Ｍｏｒ　ｔ　１ｅｒｅ　ｌ　ｌａ亜属（Ｓ
ｕｇｅｎ、　Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ　　Ｈｒｏ　ｈｉ
ｌａ節（Ｓｅｃｔ。 ｈ肛亜紅釦）に含まれると考えられる。 ｈ肛亜紅釦節には２２種が含まれている。本菌株とこれ
ら２２種と菌学的諸性質を比較すると、本菌株は聾１圏
胆且虹α薊憇ユＬ１凱且赳ハ、およびＬ１並且圏の３種
に類似すると考えられる。そこで、Ｋ、Ｈ，Ｄｏｍｓｃ
ｈ、　Ｗ、Ｇａｍ５．＆　Ｔ、−Ｈ，Ｉｎｄｅｒｓｏ、
ｎ。 ”Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ　ｏｆ　５ｏｉｌ　Ｆｕｎｇｉ
＋″＾ｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ＋１９８０、Ｗ、Ｇ
ａｍ５．　”Ｓｏｍｅ　ｎｅｗ　ｏｒ　ｎｏｔｅｗｏｒ
ｔｈｙ　５ｐｅｃｉｅｓｏｆ　Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ
、”　Ｐｅｒｓｏｏｎｉａ９　、１１１−１４０．１９
７７）、およびＧ、Ｌｉｎｎｅｍａｎｎ、”Ｍ、ｏｒＬ
ｉ；７ａ、Ｉｊａ−Ｃｏｅｍａｎｓ　１８６３．”Ｈ，
Ｚｙｃｈａ　＆　Ｒ，Ｓｉｅｐｍａｎｎ、　　”Ｍｕｃ
ｏｒａｌｅｓ　Ｅｉｎｅ　Ｂｅｓｃｈ−ｒｅｉｂｕｎｇ
　　Ａ１１ｅｒ　　ＧａＬＬｕｎＢｅｎ　　ａｎｄ　　
八ｒＬｃｎ　　ｄｉｅｓｅｒ　　Ｐｉｌｚ−ｇｒｕｐｐ
ｅ、　”ｐｐ、　１５５−１４０．　Ｊ、Ｃｒａｍｅ、
ｒ、　１９６９を参考にして、本菌株とこれら３種と菌
学的諸性質を比較した。本菌株は、崩ｔ（ｈ　；ｒ　、
＋２とは胞子のう柄の長さと基部の幅、胞子のうの大き
さで、明瞭に異なる。 Ｍ、ｅｌｏｎ　ａｔｕｌａとは胞子のう胞子の形態と大
きさで、明瞭に異なる。鼾１組曲とは胞子のう柄がやや
短い、厚膜胞子の形態が楕円形または細球形でときに連
鎖することがあり、さらに厚膜胞子がときに数本の菌糸
を周囲に出す、という点で異なるが、本発明者らはこの
ような差異は本菌株をＭｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ　　、ｅ
ｊ、ｏｎ６ｕｔｑと別種であるとするには十分でないと
判断した。そこで、本発明者らは本菌株をＭｏｒｔｉｅ
ｒｅｌｊａ　ｅｌｏｎ８ｔｉ−Ｌａ　ＳＡＭ　０２１９
と同定した。ＳＡＭ　０２１９株は昭和６１年３ＪＪｌ
Ｑ日に通商産業省工業技術院微η−物［、業技術＋ＩＩ
ｒ究所（ＦＲＩ）に受託番号ＦＡＲＭ　Ｐ、　１１７０
３として寄託されている。 本発明に使用される菌株を’ｆ’を養する為には、その
菌株の胞子、菌糸又は予め培養して得られた前培養液を
、液体培地又は固体培地に接種し培養する。液体培地の
場合に、炭素源としてはグルコース、フラクトース、キ
シロース、サッカロース、マルトース、可溶性デンプン
、糖蜜、グリセロール、マンニトール等の一般的に使用
されているものがいずれも使用できるが、これらに限ら
れるものではない。窒素源としてはペプトン、酵母エキ
ス、麦芽エキス、肉エキス、カザミノ酸、コーンステイ
ブリカー等の天然窒素源の他に、尿素等の有機窒素源、
ゲらびに硝酸ナトリウム、硝酸アンモニウム、硫酸アン
モニウム等の無機窒素源を用いることができる。この他
必要に応じリン酸塩、硫酸マグネシウム、硫酸鉄、硫酸
銅等の無機塩及びビタミン等も微量栄養源として使用で
きる。これらの培地成分は微生物の生育を害しない濃度
であれば特に制限はない。実用上一般に、炭素源は０、
１〜３０重量％、好ましくは１〜ＩＯ重量％、窒素源は
０．０１〜５重量％、好ましくは０．１〜２重量％の濃
度とし、さらに好ましくは、炭化水素、脂肪酸、脂肪酸
塩、または油脂を添加するのが良い。又、培養温度は５
〜４０℃好ましくは２０〜３０℃とし、培地のｐｌ＋は
４〜１０．好ましくは６〜９として、通気攪拌培養、振
盪培養、又は静置培養を行なう。 培養は通常２〜１０口間行う。 固体培地で培養する場合は、固形物重量に対して５０〜
１００重量％の水を加えたふすま、もみがら、米ぬか等
を用い、５〜４０℃、好ましくは２０〜３０℃の温度に
おいて、３〜１４０間培養を行う。この場合に必要に応
じて培地中に窒素源、無機塩類、微量栄養源および、添
加物として、炭化水素、脂肪酸、脂肪酸塩、または油脂
を加えることができる。 このように培養して、菌体内に、γ−リノレン酸を含有
する脂質が１１″成蓄積される。液体培地を使用した場
合には、培孜菌体から、次のようにしてγ−リノレン酸
の採取を行なう。 培養終了後、培養液より遠心分離及び濾過等の常用の固
液公証り段により培養菌体を得る。菌体は十分水洗し、
好ましくは乾燥する。乾燥は凍結乾燥、風乾等によって
行うことができる。乾燥菌体は、好ましくは窒素気流下
で有機溶媒によって抽出処理する。有機溶媒としてはエ
ーテル、ヘキサン、メタノール、エタノール、クロロホ
ルム、ジクロロメタン、石油エーテル等を用いることが
でき、またメタノールと石油エーテルの交互抽出や、ク
ロロボルム−メタノール−水の一層系の溶媒を用いた抽
出によっても良好な結果を得ることができる。抽出物か
ら減圧下で有機溶媒を留去することにより、高濃度のγ
−リノレン酸を含有した脂質が得られる。 また、上記の方法に代えて湿菌体を用いて抽出を行うこ
とができる。この場合にはメタノール、エタノール等の
水に対して相溶性の溶媒、又はこれらと水及び／又は他
の溶媒とから成る水に対して相溶性の混合溶媒を使用す
る。その他の手順は上記と同様である。 上記のようにして得られた脂質中には、γ−リノレン酸
が脂質化合物、例えば脂肪の構成成分として含まれてい
る。これらを、直接分離することもできるが、低級アル
コールとのエステル、例えばγ−リノレン酸メチルとし
て分離するのが好ましい。このようなエステルにするこ
とにより、他の脂質成分から容易に分離することができ
、また、培養中に生成する他の脂肪酸、例えばパルミチ
ン酸、オレイン酸、アラニドトン酸等（これらも、γ−
リノレン酸のエステル化に際してエステル化される）か
ら容易に分離することができる。例えば、γ−リノレン
酸のメチルエステルを得るには、前記の抽出脂質を無水
メタノール−塩酸５％〜１０％、Ｂ　Ｆ　３−メタノー
ル１０％〜５０％等により、室温にて１〜２４時間処御
するのが好ましい。 前□記の処理液からγ−リノレン酸メチルエステルを回
収するにはへキサン、エーテル、酢酸エチル等の有機溶
剤で抽出するのが好ましい。次に、この抽出液を無水酢
酸すｌ・リウム等により乾燥し、有機溶媒を好ましくは
減圧下で留去することにより主として脂肪酸エステルか
ら成る混合物が得られる。この混合物中には、目的とす
るγ−リノレン酸メチルエステルの他に、バルミチン酸
メチルエステル、ステアリン酸メチルエステル、オレイ
ン酸メチルエステル等が含まれている。これらの脂肪酸
メチルエステル混合物からγ−リノレン酸メチルエステ
ルを単離するには、カラムクロマトグラツー−、低温結
晶化法、尿素包接体法等を、単独で、又は組み合わせて
使用することができる。 こうして単離されたγ−リノレン酸メチルからγ−リノ
レン酸を得るには、アルカリで加水分解した後、エーテ
ル、酢酸エチル等の有機溶媒で抽出すればよい。 また、γ−リノレン酸をそのメチルエステルを経ないで
採取するには、前記の抽出脂質をアルカリ分解（例えば
５％氷酸化ナトリウムにより室温にて２〜３時間）した
後、この分゛解液から、脂肪酸の抽出・精製に′常用さ
れている方法により゛抽出・精製するどとができる。 次に、実施例により、この発明をさらに具体的に説明す
る。 ス４１例」− グルコース５％、ベゾトン０．５％、酵母エキス０．３
％及び麦芽工・１−ス０．３％を含む培地（ｐＨ６，０
）５０ｍ＃を５００ｒｒ＋７！容坂１１ソラス′：Ｉに
入れ、１２０℃で２０分間殺菌した。干ルテＣエレラ・
エロンガタＳＡＭ　ｏ２ｔｑ（ＦＥｒｎ＋　ｐ　ｏ７ｏ
３）＋白金耳を接種し、レシプロシェーカー（ｌ　ＩＯ
ｒｐｍ）により２８℃で５日間振盪培養した。培？ｉ：
後、濾過にて菌体を回収し、十分水洗した後、凍結乾燥
した。これにより、１．４ｇの乾燥菌体を得た。この菌
体より、クロロホルム−メタノール−水の一層系の溶媒
を用いる旧ｉｇｈ　＆　Ｄｙｅｒの抽出法によって総脂
質を抽出したところ、３４０曙の脂質がｉ÷ｔられた。 この脂質を無水メタノール−塩酸（９５：５）を用いて
２０°Ｃにて３時間処理するごとによってメチルエステ
ル化し、エーテルで抽出して２１０■の脂肪酸メチルを
得た。これをさらにカラムク１１マドグラフイーによっ
て分離し、γ−リノレン酸メチル画分を分取し、ロータ
リーエバポレーターによって溶媒を留去した結果、１３
’＋＋ｇの債製さ才＋、ｊ、：ｒ　−リノレン酸メチル
を得た。本標品と市販のγ−リノレン酸メチル標準サン
プルについて、ガスクロマトグラフィー分析、高速液体
クロマトグラフィー分析及、質量分析及びＮＭＲ分析に
よって比較を行なったところ、両者は、いずれの分析に
おいても一致した。精製前及び精製後のγ−リノレン酸
メチルの量は培地当りそれぞれ０．４２■／　ｍ　Ｉ及
び０．２６■／ｍｌ、乾燥菌体当りそれぞれ１５ｍｇ／
ｇ及び９．３■／ｇであった。 夫屓Ｉ」Δ 実施例１と同じ組成の培地５ｐを１５１ジャーファーメ
ンタ−に仕込み、１２０℃で４０分間殺菌後、モルティ
エレラ・エロンガタＳＡＭ　０２１９（ＦＥＲＭＰ−８
７０３）の前培養液２００ｍ７！を接種した。３０℃、
通気量０．’５ｖ、ｖ、ｍで３日間通気攪拌培養を行な
い、得られた湿菌体３２０ｇ　（乾燥重量９５ｇ）につ
いて、実施例１と同様に抽出、加水分解、及びメチルエ
ステル化を行なったところ、総脂質２５ｇ、及び混合脂
肪酸メチル１５ｇを得た。このもののγ−リノレン酸メ
チル含量は１１％、生成量は培地当す０．３３ｇ／＃、
’Ｘｂ　ｋ菌体当す１７　ｍｇ／　ｇ　テアった。 又、培養終了後、濾過によって得られた培養濾液４，４
００ｍｆを乾燥後、実施例１と同様に抽出、加水分解、
及びメチルエステル化を行なったところ、１２％のγ−
リノレン酸メチルを含む混合脂肪酸メチル１６１■をｔ
ｊＪた。 η１．［Ｊ モルティエレラ・工二トうｌグア（、Ｍｏｒ、ｔｊ−ｇ
ｒｅｌｌａ■几叩、　ＩＦＯ８５７１）、及びモルティ
エレラ・ヒグロフィラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｊｊａ　−ｈ
ｙＨｒｐｐｊ＋ｊｌｎ、　ＩＦＯ５９４１）について実
施例１と同様な操作を行なったところ、それぞれ６８■
、　　１０２ｍｇの脂肪酸メチルが得られた。 これらの脂肪酸メチル中に含まれるγ−リノレン酸メチ
ルを単離・精製したところ、それぞれの菌株につき８■
、及び７■が得られた。 大巖炎↓ グルコース２％、酵母エキス１％、Ｔｗｅｅｎ　２００
．２％及び、種々の炭化水素、脂肪酸ナトリウム又は油
脂０．５％を含む培地（ｐＨ６、０）　２０　ｒｒ＋ｊ
！を］００ｍ１容マイヤーに入れ、１２０℃で２０分間
殺菌した。モルう−イエレラ・エロンガタＳＡＭ　（１
２１！］（ＦＥＲＭ　Ｐ−８７０３）、　１白金耳を接
種し、ロータリーシェーカ’　（２００ｒｐｍ）により
２８℃で５日間培養した。 得られた菌体について、実施例１と同様に抽出、加水分
解、及びメチルエステル化を行なった。培地に添加した
種にの炭化水素、脂肪酸ナトリウム、及び油脂それぞれ
について、得られた乾燥菌体重量、総脂質量、総脂肪酸
メチル量、γ−リノレン酸メチル含量、及び培地当りの
γ−リノレン酸メチル生成量は下表のようになった。 以下余白 標準培地に炭化水素、脂肪酸、油脂類などを添加するこ
とにより、対象無添加区よりも、γ−リノレン酸生成量
は１０・〜６０％」ニジ♂した。 手続補正書（自発） 昭和６２年１月λε日 特許庁長官　黒　１）明　雄　殿 １、事件の表示 昭和６１年特許願第１５８６４９号 １、発明の名称 γ−リノレン酸の製造方法 ３、補正をする者 事件との関係　　特許出願人 名称　（１９０）サントリー株式会社 ４、代理人 住所　〒１０５東京都港区虎ノ門−丁目８番１０号（外
４名） ５、補正の対象 （１）明細書の「特許請求の範囲」の欄（２）明細書の
「発明の詳細な説明」の欄６、補正の内容 （１）　　特許請求の範囲を別紙の通シに補正する。 （２）■　明細書第４頁第８行目、及び第４頁第９行目
から第１０行目ｒ　８７０３号）」の次にｒ（微工研条
寄第１２３９号）」を加入する。 ■　同第９頁第１９行目「寄託されている。」を１寄託
され、ＦＥＲＭ　ＢＰ−１２３９として国際寄託に目、
及び第１８ｓ第３行目［（ＦＥＢＭ　Ｐ−８７０３）　
Ｊの次にｒ　（ＦＥＲＭ　ＢＰ−１２３９）　Ｊを加入
する。 ■　同第１２頁猶丁刀桁−訃の次に、次の記載を加入す
る。 ｒ実施例５ グルコース２％、酵母工Φス１％を含む培地（ｐｉ−１
６，０）２０〆ｌを１００ｄ容マイヤーに入れ、１２０
℃で２０分間殺菌した。モルティエレラ・エロンガタＳ
ＡＭ　０２１９　（Ｆ”ＥＲＭ　Ｐ−８７０３）　（Ｆ
ＥＭＰＢＰ−１２３９）　ｌ白金耳を接種し、ロータリ
ーシェーカー（２００ｒｐｍ　）により２８℃で４日間
培養後。 種々の脂肪酸ナトリウム又は油脂１００■を１２０℃で
１５分間殺菌後、添加し、さらに同様にして２日間培養
した。得られた菌体について、実施例１と同様に抽出、
加水分解、及びメチルエステル化を行なった。培地に添
加した種々の脂肪酸ナトリウム、及び油脂それぞれにつ
いて、得られた乾燥菌体当り、及び培地当シのγ−リノ
レン酸メチル生成量は下表のようになった。 培養途中（培養４日後）に、脂肪酸、油脂類などを添加
することにより、対照無添加区よりも。 γ−リノレン酸生成量は５〜１２０％上昇した。 」（３）受託紅の写し、を遺児する。 ７、　添付書類の目録 （１）補正特許請求の範囲　　　　　　　１通（２）受
託鉦の写し　　　　　　　　　　１通２、特許請求の範
囲 １、モルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ　　）属
に属するモルティエレラ・エロンガタ（Ｍｏｒｔｌｅｒ
ｅｌｌａｅｌｏｎｇａｔａ　）、モルティエレラ・エキ
シグア（Ｍｏｒｔｔｅｒｅｌｌａ　ｅｘｌｇｕａ　）、
又はモルティエレラ拳ヒグロフィラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅ
ｌｌａ　ｈｙｇｒｏｐｈ目ａ）を培養して、ｒ−リノレ
ン酸、又はγ−リノレン酸を含有する脂質を生成せしめ
、そし七γ−リノレン酸を採取することを特徴とするγ
−リノレン酸の製造方法。 ２、培地へ炭化水禦、脂肪酸、脂肪酸塩または油脂を添
加することを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の方
法。 ３、培養中の培養液へ脂肪酸、脂肪酸塩または油脂を添
加することを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の方
法。 ４、　モルティエレラ・エロンガタを培養することを特
徴とする特許請求の範囲第１項記載の方法。 ５、モルティエレラ・エロンガタＳＡＭ　０２１９（Ｆ
ＥＲＭ　Ｐ−８７０３）　（ＦＥＢＭ　ＢＰ−１２３９
）を培養することを特徴とする特許請求の範囲第１項記
載の方法。 手続補正書（自発） 昭和６２年６月Ｉ３日 特許庁長官　黒　１）明　雄　殿 ■、事件の表示 昭和６１年特許願第１５８６４９号 ２、発明の名称 γ−リノレン酸及びこれを含有する脂質の製造方法（新
名称） ３、補正をする者 事件との関係　　特許出願人 名称　（１，９０）サントリー株式会社４、代理人 住所　〒１０５東京都港区虎ノ門−丁目８番１０号静光
虎ノ門ビル　電話５０４−０７２１６、補正の対象 ＋１１　　明細書の［発明の名称］の欄（２）明細書の
［特許請求の範囲］の欄（３）明細書の［発明の詳細な
説明］の欄ｑ、補正の内容 る。 （２、特許請求の範囲を別紙の通りに補正する。 （３）■　明細書第２頁第３行「１１酸の」を１酸及び
これを含有する脂質の」に補正する。 ■　同第３頁第６　ｔ−ｉ’　ｌ−Ｉ　Ｉ酸を１を１酸
、及びこれを含有する脂質を１に補正する。 ■　同第３頁第１６行１１１方法１をｒ方法；及びモル
ティエレラ属に属するモルテイエレラ・エロンガタ、モ
ルティ〕ニレラ・エニＴ−シグア、又はモルティエレラ
・ヒグロフイラを培養してγ−リノレン酸を含有する脂
買−Ｅ牛戒せ一しみテそ廿でさ央を採取することを特徴
とするγ−リノレン酸を含有する脂質の製造方法」に補
正する。 ３、添付書類の目録 ２、特許請求の範囲 １、　モルティエ１．−：＞　（ＭｏｒＬｉｅｒｃｌｌ
ｎ）属に属するモルティエレラ・ｘｎンガタ（Ｈｏ　ｒ
電１ｅｒｅｌ　Ｉｎｅｌｏｎｇａｔａ）、モルディユ：
レラ・工：〜シグア（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ　ｃｘｉ
Ｈｕｕ）、又はモルテイエレラ・ヒグロフィラ（Ｍｏｒ
Ｌｉｅｒｒｌｌａ　Ｉ＋ｙ＋？ｒｏｐｌ＋１ｌａ）を培
養して、γ−リノレン酸、又は７・−リノレン酸を含有
する脂質を生成せしめ、そしてγ−リノレン酸を採取す
ることを特徴とするγ−リノレン酸の製造方法。 ２、培地へ炭化水素、脂肪酸、脂肪酸塩または油脂を添
加することを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の方
法。 ３、培養中の培養液へ脂肪酸、脂肪酸塩または油脂を添
加することを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の方
法。 ４、モルティエレラ　エロンガタを培養することを特徴
とする特許請求の範囲第１項記載の方法。 ５、　モルティエレラ・エロンガタＳＡＭ　０２１９（
ＦＥＲＭＰ−８７０３＞（ＦＥＲＮ　ＤＰ−１２３９）
を培養することを特徴とする特許請求の範囲第１項記載
の方法。 ６、モルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）属に属
するモルティエレラ・エロンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌ
　ｌａｅｌｏｎｇａｔａ）、モルテイエレラ・エキシグ
ア（Ｈｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ　ｅｘｉｇｕａ）、又はモ
ルテイエレラ・ヒグロフイラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ
　ｈｙｇｒｏｐｈｉｌａ）を培養してγ−リノレン酸を
含有する脂質をイ貴す七ぬ＝千七で亡央寺採取すること
を特徴とするγ−リノレン酸を含有する脂質の製造方法
。 ７、培地へ炭化水素、脂肪酸、脂肪酸塩または油脂を添
加することを特徴とする特許請求の範囲第６項記載の方
法。 ８、培養中の培養液へ脂肪酸、脂肪酸塩または油脂を添
加することを特徴とする特許請求の範囲第６項記載の方
法。 ９、モルティエレラ・エロンガタを培養することを特徴
とする特許請求の範囲第６項記載の方法。 １０、　　モルティエレラ・エロンガタＳＡＭ　０２１
９（ＦＥＲＮ　Ｐ−８７０３）（ＦＥＲＮ　ＢＰ−１２
３９＞を培養することを特徴とする特許請求の範囲第６
項記載の方法。 受託番号変更届 昭和６２年１月ンｇ日

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、モルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）属に属
   するモルティエレラ・エロンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌ
   ｌａｅｌｏｎｇａｔａ）、モルティエレラ・エキシグア
   （Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａｅｘｉｇｕａ）、又はモルテ
   ィエレラ・ヒグロフィラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａｈｙ
   ｇｒｏｐｈｉｌａ）を培養して、γ−リノレン酸、又は
   γ−リノレン酸を含有する脂質を生成せしめ、そしてγ
   −リノレン酸を採取することを特徴とするγ−リノレン
   酸の製造方法。 ２、培地へ炭化水素、脂肪酸、脂肪酸塩または油脂を添
   加することを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の方
   法。 ３、モルティエレラ・エロンガタを培養することを特徴
   とする特許請求の範囲第１項記載の方法。 ４、モルティエレラ・エロンガタＳＡＭ０２１９（ＦＥ
   ＲＭＰ−８７０３）を培養することを特徴とする特許請
   求の範囲第１項記載の方法。