JPS63133994A - γ−リノレン酸を含有する脂質の製造方法 - Google Patents

γ−リノレン酸を含有する脂質の製造方法

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JPS63133994A JP61279147A JP27914786A JPS63133994A JP S63133994 A JPS63133994 A JP S63133994A JP 61279147 A JP61279147 A JP 61279147A JP 27914786 A JP27914786 A JP 27914786A JP S63133994 A JPS63133994 A JP S63133994A
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、γ−リノレン酸を含む脂質を微生物を利用し
て製造する方法に関する。
丈米勿伎亙 従来、γ−リノレン酸を含む脂質を微生物を利用して製
造する方法として、下記■〜■に示すもの等が知られて
いる。
■　モルティエレラ属の糸状菌を炭化水素を炭素源とし
て培養し、その培養物より脂質を採取する方法（特開昭
５７−１４４９８６号公報）。
■　モルティエレラ属の糸状菌を高濃度の炭水化物を炭
素源として培養し、その培養物より脂質を採取する方法
（特開昭６０−１６８３９１号公報）。
■　ジルペルテラ属の脂質生産菌を炭素源濃度の高い培
地で培養し、その培養物より脂質を採取する方法（特開
昭６１−３７０９７号公報）。
■　タムニブイウム属の脂質生産菌を炭素源濃度の高い
培地で培養し、その培養物より脂質を採取する方法（特
開昭６１−３７０９６号公報）。
■　カニンガメラ属の脂質生産菌を炭素源濃度の高い培
地で培養し、その培養物より脂質を採取する方法（特開
昭６０−１２６０９１号公報）。
明が解決しようとする問題点 しかしながら、従来の方法はいずれもｎ−アルカン等の
炭化水素、グルコース等の炭水化物、或いは酢酸ナトリ
ウムなどを炭素源として培養を行うものであり、他の物
質を炭素源とする方法はこれまで提案されていない。こ
のため、従来より更に他の物質を炭素源として微生物を
培養し、この培養物からγ−リノレン酸を含む脂質を得
ることが望まれていた。
間１″鑞を解決するための手段及び作用本発明者らは、
上記事情に鑑み１種々の物質を炭素源として微生物を培
養し、この培養物からγ−リノレン酸を含む脂質を得る
ことにつき種々研究を行っているうち、アビシディア・
コリムビフェラ等のアビシディア属に属する菌２モルテ
ィエレラ・イサベリナ等のモルティエレラ属に属する菌
、ムコール・アンビグアス等のムコール属に属する菌、
リゾプス・オリゼー等のリゾプス属に属する菌又はシン
セファラストラム・ラセモサム等のシンセファラストラ
ム属に属する菌を脂肪酸又はそのエステルを炭素源とし
て培養した場合、炭化水素、炭水化物等を炭素源とした
場合と同等もしくはそれ以上の増殖を示し、脂肪酸又は
そのエステルがγ−リノレン酸に効率良く変換されるこ
と、従ってこの培養物より炭化水素、炭水化物等を炭素
源として培養した場合とほぼ同等のγ−リノレン酸含有
量を有するγ−リノレン酸含量の高い脂質が得られるこ
とを見出し、本発明をなすに至ったものである。
従って、本発明は、アビシディア属９モルティエレラ属
、ムコール属、リゾプス属又はシンセファラストラム属
に属する菌を脂肪酸又はそのエステルを炭素源として培
養し、この脂肪酸又はそのエステルをγ−リノレン酸に
変換することを特徴とするγ−リノレン酸を含有する脂
質の製造方法を提供する。
本発明においては、上述した菌がγ−リノレン酸以外の
脂肪酸又はそのエステルを炭素源としてこの脂肪酸又は
そのエステルをγ−リノレン酸に変換しながら増殖し、
従ってこの増殖した菌体から適宜手段で脂質を分離する
ことにより、γ−リノレン酸含量の高い脂質を得ること
ができるものである。
以下、本発明につき更に詳しく説明する。
本発明において用いるアピシディア属２モルティエレラ
属、ムコール属、リゾプス属、シンセファラストラム属
の菌の種類に特に制限はなく、これらの属に属するもの
であればいずれのものでも使用し得るが、特に上述した
アビシディア・コリムビフエラ（Ａｂｓｉｄｉａ　ｃｏ
ｒｙｍｂｉｆｅｒａ、　Ｉ　Ｆ○４０１０）。
モルティエレラ・イサベリナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ
　１ｓａｂｅｌｌａｎａ。
ＩＦＯ７８７３）、ムコール・アンビグアス（Ｍｕｃｏ
ｒａｍｂｉｇｕｕｓ、　Ｉ　Ｆ　Ｏ６７４２）＋リゾプ
ス・オリゼー（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ　ｏｒｙｚａｅ、　Ｉ
　Ｆ　Ｏ５４１８Ｌシンセファラストラム０ラセモサム
（Ｓ　ｙｎｃｅｐｈａｌａｓｔｒｕｍ　ｒａｃｅｍｏｓ
ｕｍ。
ＩＦＯ４８１６）等を好適に使用し得る。
また、炭素源として用いる脂肪酸又はそのエスチルの種
類に制限はなく、飽和、不飽和、また直鎖２分枝鎖等の
区別なく種々のものを使用し得るが、炭素数８〜２２、
特に８〜１８の脂肪酸１例示するとカプロン酸、カプリ
ル酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステ
アリン酸、オレイン酸、リノール酸等を用いることが好
ましい。また、エステルとしては、これら脂肪酸のメタ
ノール、エタノール、プロパツール等の低級１価アルコ
ール又はグリセリン等の多価アルコールのエステルが好
ましく１例示すると、主にパルミチン酸及びオレイン酸
より構成されるパーム油、主にオレイン酸及びリノール
酸より構成される大豆油、コーン油、落花生油、米糠油
、主にオレイン酸、リノール酸及びエルシン酸より構成
されるナタネ油、主にオレイン酸及びリシルイン酸より
構成されるヒマシ油等を用いることができる。
なお、これら脂肪酸及びそのエステルは１種を単独で用
いてもよく、２種以上を併用しても差支えない。
更に、本発明においては培養に際して適切な窒素源を与
えることが望ましい。この場合、窒素源としては（ＮＨ
，）２Ｓ０４．ＮＨ４ＮＯ３等の無機窒素源を用いるこ
ともできるが、尿素、ペプトン、大豆蛋白、コーン・ス
チープ・リカー等の有機窒素源を用いることがより好適
である。この場合、炭素源として加えた脂肪酸又はその
エステルと大豆蛋白、コーン・スチープ・リカー、ペプ
トン、ポリペプトン、カザミノ酸、乾燥酵母又はスキム
ミルク等の有機窒素源との重量比を３：１〜１：２の範
囲にすることにより脂質中のγ−リノレン酸含量を高め
ることができる。
また、本発明においては、ＫＨ，Ｐ　Ｏ４，ＭｇＳ　Ｏ
，・７Ｈ，Ｏ，ＦｅＳＯ４・７Ｈ２０，ＺｎＳ　０４・
７　Ｈ２Ｏ，ＣａＣＱ２・２　Ｈ２Ｏ，ＣｕＳ　Ｏ，・
５　Ｈ２Ｏ等の無機塩、その他必要に応じて酵母エキス
や麦芽エキス等の増殖因子、ポリオキシエチレン（６０
）ソルビタン脂肪酸エステル等の界面活性剤、その他の
栄養源などを培養時に添加することができる。
本発明において、上記菌類の培養方法に限定はないが、
液体培地で振盪培養、通気攪拌培養により培養を行うか
、或いは液体培地をスポンジ等に含浸して固体培養によ
り培養を行うことが好ましい。この場合、上記脂肪酸又
はそのエステルは液体培地ｌａ中に１０〜１００ｇ加え
ることが適当であり、また培地のｐＨは３．５〜５．５
．培養温度は１５〜３５℃、培養時間は５〜１０日程度
とすることが好適である。
なお、培養終了後、培養物からγ−リノレン酸を含む脂
質を採取する方法としては公知の手段を採用し得、例え
ば培養物より菌を集菌した後、破砕助剤を用いてホモジ
ナイザーで菌体の破砕を行うと共に、抽出溶媒により脂
質を抽出する方法などを好適に採用し得る。
次に実施例を示し、本発明を具体的に説明するが１本発
明は下記実施例に限定されるものではない。
ヌ】１生Ｙ パーム油３０ｇ、大豆蛋白３ｇ、ＫＨ，ＰＯ４３ｇ＋Ｍ
ｇＳＯ４−７Ｈ２００，３ｇ、酵母ニー１ｒス０．２ｇ
＋麦芽エキス０．２ｇ、Ｆｅ５０．・７Ｈ２０１０ｍｇ
、　ＣａＣＱｚ　・２８２０１．２■、Ｃｕ５Ｏ，・５
Ｈ，００，２ｍｇ及びＺｎ５Ｏ，・７Ｈ，０１，Ｏｍｇ
を蒸留水ＩＱに混ぜ、ＰＨ４，５に調整した。これを５
００　ｍＱ容の坂ロフラスコに５０ｍ１Ｑずつ分注した
。これに下記第１表に示す菌株をそれぞれ植菌した後、
温度３０℃、振幅約７　ａｍ　、振盪数２００回／分で
８日間培養した。
培養後、ガラス繊維Ｐ紙で集菌し、蒸留水とヘキサンで
それぞれ数回洗浄して残っている油を取り除いた。これ
をクロロホルム／メタノール＝２７１（Ｖ／Ｖ）を抽出
溶媒、ガラスピーズを破砕助剤としてホモジナイザーで
菌体の破砕及び脂質の抽出を行った。抽出した脂質の不
鹸化物を除去した後、メチルエステル化し、ガスクロマ
トグラフィーで脂肪酸組成を分析した。結果を第１表に
示す。
第　　１　　表 中り、Ｃ，＝菌体生成量 Ｔ、Ｌ、＝生成脂質量 γ＝γ−リノレン酸生成量悌２〜４表においても同じ）
実施例２ 炭素源としてパーム油を大豆油、米糠油、ナタネ油、コ
ーン油、ヒマシ油或いは落花生油に変えた以外は実施例
１と同様な培地を用い、これにＭｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ
　１ｓａｂｅｌｌａｎａ（Ｉ　Ｆ　Ｏ７８７３）を植菌
し、実施例１に示した条件で培養及び分析を行った。
第２表にその結果を示す。
第　　２　　表 オレイン酸３０　ｇ　ｐ大豆蛋白３　ｇ　、　Ｋ　Ｈ２
Ｐ　０４３　ｇ　、ＭｇＳ　Ｏ，・７Ｈ，００，３ｇ、
酵母エキス０．２ｇ、麦芽エキス０．２ｇ、Ｆｅ５０．
・７Ｈ，０１０■。
ＣａＣｎ２−２Ｈ，０１，２ｍｇ、ＣｕＳＯ４”５Ｈ２
００，２■及びＺｎＳＯ４・７Ｈ，０１，Ｏｍｇを蒸留
水ＩＱに混ぜ、ｐＨ４，５に調整した。これを５００ｍ
１ｌの坂ロフラスコに１００ｄずつ分注し、下記第３表
に示す菌株をそれぞれ植菌した後、温度３０℃、振幅的
７１．振盪数２００回／分で８日間培養した。
培養後、ガラス繊維−紙で集菌し、蒸留水とヘキサンで
それぞれ数回洗浄した。これをクロロホルム／メタノー
ル＝２／１（Ｖ／Ｖ）を抽出溶媒、ガラスピーズを破砕
助剤としてホモジナイザーで菌体の破砕及び脂質の抽出
を行った。抽出した脂質の不鹸化物を除去した後、メチ
ルエステル化してガスクロマトグラフィーで脂肪酸組成
を分析した。
第３表に結果を示す。
第　　３　　表 オレイン酸メチルエステルとリノール酸メチルエステル
との９：１混合物３０ｇ、大豆大豆蛋白３ｇ、ＫＨ，Ｐ
Ｏ４３ｇ、ＭｇＳＯ４”７Ｈ，００，３ｇｙ酵母エキス
０．２ｇ、麦芽エキス０．２ｇ、Ｆｅ５０．・７Ｈ７Ｈ
２Ｏ１０，ＣａＣｎ、・２Ｈ，０１，２■、Ｃｕ５Ｏ，
・５Ｈ，○ｏ、２■及びＺｎＳＯ４７Ｈ２０１，Ｏｍｇ
を蒸留水ＩＱに混ぜ、ｐＨ４，５に調整した。これを５
００−の坂ロフラスコに１００ｄずつ分注し、下記第４
表に示す菌株をそれぞれ植菌した後、実施例１と同様な
培養条件で８日間培養した。その後、培養物を実施例１
と同様な方法で分析した結果を第４表に示す。
第　　４　　表 パーム油１０ｇ、コーン・スチープ・リカー（Ｃ，Ｓ、
Ｌと略す）３ｇ（重量比１０：３）、酵母エキス０．５
ｇ。
麦芽エキス０．５ｇ、ＫＨ２Ｐ０．３ｇ、ＭｇＳＯ４・
７Ｈ２００，３ｇ、Ｆｅ５０．・７Ｈ，ＯＬ　Ｏｍｇ、
ＣａＣｎ２・２　Ｈ，０１、２ｍｇ、　ＣｕＳ　Ｏ，・
５　Ｈ，００，２■及びＺｎ５Ｏ，・７Ｈ２０１，Ｏｍ
ｇを蒸留水ＩＱに混ぜ、ｐＨ４，１に調整した。また比
較としてパーム油Ｌｏｇ、コーン・スチープ・リカー１
ｇ（重量比１ｏ：１）とした他は上記成分を同様に混ぜ
たものを調製した。
これらを５００−容の坂ロフラスコに５ｏｄずつ分注し
た。これに下記第５表に示す菌株をそれぞれ植菌した後
、温度３０℃、振幅的７０．振盪数２００回／分で６日
間培養した。培養後、ガラス繊維２紙で集菌し、蒸留水
とヘキサンでそれぞれ数回洗浄して残存しているパーム
油を除去した。
これをクロロホルム／メタノール＝　２　／　１　（Ｖ
／Ｖ）を抽出溶媒、ガラスピーズを破砕助剤としてホモ
ジナイザーで菌体の破砕及び脂質の抽出を行った。
抽出した脂質の不鹸化物を除去した後、メチルエステル
化してガスクロマトグラフィーで脂肪酸組成を分析した
。結果を第５表に示す。
第５表かられかるように、いずれの菌株においても炭素
源（パーム油）と有機態の窒素源（Ｃ，Ｓ、Ｌ、）の重
量比が１０＝３の場合は１０：１の場合の１．５倍以上
の濃度（γ／Ｔ、Ｌ、）のγ−リノレン酸を含有する脂
質を生成する。
叉五五旦 実施例５でコーン・スチープ・リカーの仕込景を１〜２
０ｇ（重量比１０：１〜１０：２０）とした他は、実施
例５と同様な培地を調製した。これを５００ｄ容坂ロフ
ラスコに５０ＩＩＬＱ分注し、Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ
ｉｓａｂｅｌｌａｎａ（Ｉ　Ｆ　０７８７３　）を植菌
した。これを実施例５と同様の条件で培養及び分析を行
った。第６表にその結果を示す。
第　　６　　表 パーム油とコーン・スチープ・リカーの重量比が１０／
３〜１０／２０の場合、１０／１に比べてγ−リノレン
酸含量の高い脂質が得られることがわかる。
ヌｆｆｉ パーム油５０ｇ、大豆蛋白１５ｇ（重量比１０：３）。
酵母Ｚ　キＸ　１−　Ｏｇ　＋麦芽ｘ、、　キス１　、
０　ｇ　、Ｋ　Ｈｚ　Ｐ　Ｏ４１０ｇ、ＭｇＳＯ４・７
Ｈ，００，３ｇ、ＦｅＳＯ４・７Ｈ，０１０１１１ｇ。
Ｃａ　ＣＱ２　”　２　Ｈ２０１、２■、ＣｕＳ　Ｏ，
・５　Ｈ，００，２Ｉｎｇ。
Ｚｎ５Ｏ，・７Ｈ２０１，０■を蒸留水ＩＱに混ぜ、Ｐ
Ｈ４，５に調整した。この培地２Ｑを２Ｑジャーファー
メンタ−に入れ、　Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ　１ｓａｂ
ｅｌｌａｎａ（ＩＦＯ７８７３）を植菌した後、３０℃
９通気量ｌＶＶｍｔ攪拌回転数４０Ｏｒｐｍで１５０時
間培養した。培養後、実施例５と同様に処理した結果、
乾燥菌体５９ｇ、総脂質２４ｇが得られた。このものの
脂肪酸組成を第７表に示す。
第　　７　　表 月Ｊの効果 以上説明したように、本発明方法は脂肪酸又はそのエス
テルからγ−リノレン酸を効率良く製造し得るものであ
り、従って本発明によれば、動植物油脂より採れる安価
な脂肪酸又はそのエステルから付加価値の高いγ−リノ
レン酸を含む油脂を製造することができる。
出願人　　ラ　イ　オ　ン　株式会社 代理人　　弁理士　　小　島　隆　同 学　　腕’Ａ　　　’ｆ＋Ｉｊ　　　正　　書（自　発
）昭和６２年１０月３０日 特許庁長官　　　小　川　邦　夫　　殿１、事件の表示 昭和６１年特許願第２７９１４７号 ２、発明の名称 γ−リノレン酸を含有する脂質の製造方法３、補正をす
る者 事件との関係　　　　　特許出願人 住　　所　　東京都墨田区本所１丁目３番７号氏　　名
　　（６７６）ライオン　株式会社代表者　　小　林　
　敦 ４、代理人　〒１０４ ６、補正の内容 （１）明細書第１０頁第１２行目、第１２頁第１３行目
乃至第１４行目及び第１５頁第７行目にそれぞれ「抽出
した脂質の」とあるのをいずれも「抽出した脂質を鹸化
して」と訂正する。
以上

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １、アビシディア属、モルティエレラ属、ムコール属、
    リゾプス属又はシンセファラストラム属に属する菌を脂
    肪酸又はそのエステルを炭素源として培養し、この脂肪
    酸又はそのエステルをγ−リノレン酸に変換することを
    特徴とするγ−リノレン酸を含有する脂質の製造方法。 ２、アビシディア属に属する菌がアビシディア・コリム
    ビフェラである特許請求の範囲第１項記載の製造方法。 ３、モルティエレラ属に属する菌がモルティエレラ・イ
    サベリナである特許請求の範囲第１項記載の製造方法。 ４、ムコール属に属する菌がムコール・アンビグアスで
    ある特許請求の範囲第１項記載の製造方法。 ５、リゾプス属に属する菌がリゾプス・オリゼーである
    特許請求の範囲第１項記載の製造方法。 ６、シンセファラストラム属に属する菌がシンセファラ
    ストラム・ラセモサムである特許請求の範囲第１項記載
    の製造方法。 ７、脂肪酸又はそのエステルとしてカプロン酸、カプリ
    ル酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステ
    アリン酸、オレイン酸及びリノール酸並びにそれらのエ
    ステルから選ばれた１種又は２種以上を使用した特許請
    求の範囲第１項乃至第６項いずれか記載の製造方法。 ８、脂肪酸又はそのエステルとしてパーム油、大豆油、
    米糠油、ナタネ油、コーン油、ヒマシ油及び落花生油か
    ら選ばれた１種又は２種以上を使用した特許請求の範囲
    第７項記載の製造方法。
JP61279147A 1986-11-21 1986-11-21 γ−リノレン酸を含有する脂質の製造方法 Pending JPS63133994A (ja)

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