JPH01132371A - 新規微生物およびそれを用いるγ−リノレン酸含量の高い脂質成分の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野］ 本発明は新規微生物およびそれを用いるγ−リノレン酸
含量の高い脂質成分の製造方法に関する。

〔従来の技術〕

γ−リノレン酸は哺乳動物の体内でリノール酸から合成
されるが、原料となるリノール酸が哺乳動物の体内で合
成することのできないため、該リノール酸と同様、必須
脂肪酸として知られている物質である。動物体内に食餌
として摂取された、あるいは動物体内でリノール酸から
合成されたγ−リノレン酸は、ビスホモγ−リノレン酸
とアラキドン酸に変換され、これらはさらに極めて重要
な生理活性物質であるプロスタグランジン１グループと
プロスタグランジン２グループとに変換される。

近年、リノール酸からγ−リノレン酸への合成反応が老
化、高アルコール摂取、ビタミン不足等の要因により著
しく阻害されることが見出され、ひいてはこれがプロス
タグランジンのバランスを崩すことにもつながるため、
成人病予防の観点からもγ−リ゛ルン酸が重要視される
ようになっている。

γ−リノレン酸は月見草種子油中あるいは糸状菌類の菌
体内に存在することが既に知られている。

このうち、糸状菌類の菌体内の存在については、Ｒ，シ
ョウら（Ｒ，Ｓｈａｗ、　ｅｔ　ａｌ、）が１９６５年
にバイオケミ−・バイオフィジカ・アクタ　（Ｂｉｏｃ
ｈｅｍ。

Ｂｉｏｐｈｙｓ、　Ａｃｔａ）第９８巻、２３０ページ
に、Ｒ５０゜ムマ（Ｒ９Ｏ，Ｍｕｍｍａ）が１９７１年
にリピッズ（Ｌｉｐｉｄｓ）第６巻、５８４ページに、
また鈴木らが１９８１年に油化学第３０巻、８６３ペー
ジに報告している。

また、鈴木らが特開昭５９−１３０１９１号公報に開示
したところによれば、モルティエレラ属の糸状菌を炭化
水素を炭素源とする培地で培養することにより、γ−リ
ノレン酸を脂肪酸組成の２０％以上含む脂質成分が得ら
れる。

〔発明が解決しようとする問題点〕

しかしながら、月見草種子油中にはγ−リノレン酸が脂
肪酸組成の１０％程度しか含有されておらず、しかも該
月見草種子油中にはクロマトグラフィー的挙動や化学的
挙動がγ−リノレン酸に非常に類似したリノール酸が７
０％近く含まれている。

したがって、月見草種子油からγ−リノレン酸を単離精
製する作業には困難が伴う。

また、糸状菌類の菌体内においてもγ−リノレン酸の脂
肪酸組成に占める割合は十数％に過ぎない。一方、モル
ティエレラ属の糸状菌を使用する場合は上記の割合は増
加するが、炭素源が炭化水素であるために菌体の生育が
遅く、また生成した菌体内に含有される脂質成分の量が
少ない等、生産性に問題を残していた。

そこで本発明は、γ−リノレン酸を効率的に生産する新
規微生物およびそれを用いるγ−リノレン酸含量の高い
脂質成分の製造方法を提供することを目的とする。

〔発明の構成〕

本発明者らは、γ−リノレン酸含量の高い脂質を生産し
かつ生産性の高い菌株のスクリーニングを行った結果、
愛知県下の土壌から常法にしたがって平板分離法により
分離した糸状菌がその目的にほぼ適合することを見出し
、本発明を完成するに至った。

本発明者らが分離した一菌株を菌学的に同定した結果、
［菌類図鑑Ｊ　（講談社、　１９８２年版）、「微生物
の分類と同定」　（学会出版センター。

１９８４年版）、Ｍ、Ａ、Ａ、　　ジッパ−（Ｍ、＾、
八。

５ｈｉｐｐｅｒ）　　による文献〔スタディース・イン
・マイコロジー（Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｉｎ　Ｍｉｃｏｌｏ
ｇｙ）、　Ｎｏ、４　　およびＮｏ、１７）　、Ｈ，ツ
７　ツバ（）１．　Ｚｈｃｈａ）らによる文献〔ムコラ
ーレ（Ｍｕｃｏｒａｌｅｓ）、　１９６９）からムコー
ル属に属する新規微生物であることが判明した。

本菌株の菌学的性質は以下のとおりである。

１　麦芽エキス寒天培地における生育状態（ａ）巨大集
落　：３０°Ｃ１３日間の培養により直径８５〜９０　
ｍｍに発達。発育旺盛。

表面は全体に茶褐色で、裏面は 灰色。

（ｂ）菌糸　　　：栄養菌糸は良く発達。

（ｃ）胞子前納　：長さ１００〜８００μｍで不規則に
分校。先端部には部分的に湾曲 した側枝を有し、小型の胞子前 をつける個所が随所にある。

（ｄ）胞子前　　：直径１５〜５０μｍの亜球形。淡褐
色。柱軸も亜球形。

（ｅ）胞子　　　：直径４〜６μｍの平滑な亜球形。

単細胞。灰色。

■　合成ムコール寒天培地における生育状態（ａ）巨大
集落　：３０’Ｃ１５日間の培養により直径８５〜９０
　ｍｍに発達。発育良好。

表面は全体に黄白色で、綿状菌 糸に覆われている。裏面は黄色。

気中菌糸の一部が螺旋状にカー ルしている。

（ｂ）菌糸　　　：栄養菌糸は良く発達。

（ｃ）胞子前納　：不規則に分枝。その他の形態的特徴
は、上記麦芽エキス寒天培 地を使用した場合とほぼ同し。

（ｄ）胞子前　　：直径１５〜５０μｍの亜球形。淡褐
色。柱軸も亜球形。

（ｅ）胞子　　　：直径４〜６μｍの平滑な亜球形。

単細胞。灰色。

■　生理的・生態的性質 （ａ）最適生育条件・温度２５〜３０°Ｃ，ｐ　Ｈ４，
５〜５．５（ｂ）生育可能範囲：温度７〜３７°Ｃ，ｐ
Ｈ３，０〜８．０上記の新規微生物は、ムコール　エス
ピー　Ｍ−５９５（Ｍｕｃｏｒ　ｓｐ、　Ｍ−５９５）
と命名され、通商産業省工業技術院微生物工業技術研究
所に微工研菌寄第９６８０号として寄託されている。

本発明にがかるγ−リノレン酸含量の高い脂質成分の製
造方法において使用する菌は上述の新規微生物であるが
、ムコール属に属するものであれば全ての菌株が使用で
きる。たとえばムコール・ランプロスポラス（Ｍｕｃｏ
ｒ　ｌａｍｐｒｏｓｐｏｒｕｓ）ＩＦＯ−６７４７ヤム
コー／Ｌ／φジヤバニカス（Ｍｕｃｏｒ　ｊａｖａｎｉ
ｃｕｓ）ＩＦＯ−５３８２等が使用でき、これらはいず
れも財団法人醗酵研究所に保存され、カタログに記載さ
れている。

上記新規微生物を培養するにあたっては、天然培地また
は人工培地として広く使用されている各種組成の栄養源
を含む液体培地にて静置培養、振とう培養あるいは通気
撹拌培養を行うか、または固体培地にて表面培養を行う
。

上記栄養源としては、たとえばグルコース、シュクロー
ス、廃糖蜜、ハイテストモラセス、澱粉糖を炭素源とし
、これにコーンステイープリカー。

大豆粕、フスマ、硫安、尿素、硝酸ソーダおよび無機塩
類等を組合せたものが使用できるが、培地組成について
は特に限定されるものではない。

さらに培地のｐＨは４．０〜５．５に調整し、培養温度
は２５〜３０°Ｃとするのが望ましい。培養期間はたと
えば通気撹拌培養の場合、３〜６日間と比較的短い期間
で十分である。

上述のようにして培養された菌体中にはγ−リノレン酸
含量の高い脂質成分が蓄積されているので、液体培地あ
るいは固体培地から該菌体を回収し、脂質成分の抽出を
行う。この抽出は常法にしたがって行えば良く、たとえ
ば湿菌体とガラスピーズを混合し、ｎ−ヘキサン等の溶
剤と共にホモジナイズする方法や、凍結乾燥した菌体を
ｎ−ヘキサンやクロロホルム−メタノール（２：　１　
）混合溶剤等で抽出する方法がある。

〔実施例〕

以下、本発明の好適な実施例について説明する。

まず、第１表に示す組成にしたがって培地Ａおよび培地
Ｂを調整した。

（以下余白） 第１表 実施例１ 本実施例は、炭素源となる炭水化物としてハイテストモ
ラセスを使用する例である。

まず、２０での上記培地Ａを３０ｐ、容のジャー・ファ
ーメンタ−にとり、１２０°Ｃで２０分間滅菌した。

次にこの培地Ａに予めＩＩ２．容のマイヤーフラスコ３
本を使用して等量ずつ培養した１、５尼のムコール　エ
スピー　Ｍ−５９５を接種し、３０°Ｃで４日間通気撹
拌培養を行った。培養終了後、菌体を濾過して回収し、
凍結乾燥した。ここで、培地１１当たり２８．６　ｇの
乾燥菌体を得た。

次に、この菌体をクロロホルム−メタノール（２：１）
混合溶剤中でガラスピーズを用いてホモジナイズし、脂
質を抽出したところ、５．５ｇの脂質が得られた。さら
にこの脂質を常法にしたがってケン化分解した。得られ
た脂肪酸は、メチルエステル化した後、ガスクロマトグ
ラフィーにより分析した。この結果、全脂肪酸中に占め
るγ−リノレン酸の割合は２６．３％であった。

実施例２ 本実施例は、炭素源となる炭水化物として廃糖蜜を使用
する例である。

まず、１５０１の上記培地Ｂを２００　Ａ容の培養槽に
とり、１２０°Ｃで２０分間滅菌した。

次に、この培地Ｂに上述の第１の実施例におけろ方法と
同様に予め培養した１５ｐ、のムコール　エスピー　Ｍ
−５９５を接種し、３０°Ｃで６日間通気撹拌培養を行
った。培養終了後、菌体を濾過して回収し、凍結乾燥し
た。ここで、培地ｌ！当たり４０ｇの乾燥菌体を得た。

次に、第１の実施例に記載した方法に準じて脂質を抽出
したところ、８．０ｇの脂質が得られた。

さらに同様にケン化分解、メチルエステル化を経て分析
した。この結果を第２表に示す。

第２表 この表中、１８：３がγ−リノレン酸に相当し、全脂肪
酸中に占めるγ−リノレン酸の割合は３０．２％と高い
値を示した。

なお、本実施例において使用した廃糖蜜は、加糖から砂
糖を抽出した後の残分であるが、上述のように優れたγ
−リノレン酸の製造原料となり得ることが明らかである
。

〔発明の効果］ 以上の説明からも明らかなように、本発明にかかる新規
微生物を利用して生産される脂質成分はγ−リノレン酸
含量が高く、しかも該γ−リノレン酸に化学的挙動のＭ
偵したリノール酸等の脂肪酸の含量が低いという特徴を
有する。また本新規微生物は、炭素源として炭水化物を
利用することができるので、生育が速い。したがって、
γ−リノレン酸の単離精製が容易となり、効率的な生産
が可能となる。

さらに、本発明において製糖工程の廃棄物である廃糖蜜
が炭素源として使用できることは、資源の有効利用の観
点から産業上極めて有利であると言える。

＝１２−

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. （１）ムコール属に属しγ−リノレン酸含量の高い脂質
   成分を生産することを特徴とする微工研菌寄第９６８０
   号として寄託された新規微生物。
2. （２）上記新規微生物を炭水化物を炭素源とする培地に
   培養し、生成した菌体から脂質成分の抽出を行うことを
   特徴とするγ−リノレン酸含量の高い脂質成分の製造方
   法。
3. （３）γ−リノレン酸含量が上記脂質成分の脂肪酸組成
   の少なくとも２５％を占める特許請求の範囲第２項記載
   のγ−リノレン酸含量の高い脂質成分の製造方法。
4. （４）上記脂質成分をケン化分解することを特徴とする
   特許請求の範囲第２項または第３項記載のγ−リノレン
   酸含量の高い脂質成分の製造方法。