JPS639837B2

JPS639837B2 -

Info

Publication number: JPS639837B2
Application number: JP59159276A
Authority: JP
Inventors: Akira Seto
Original assignee: Nisshin Oil Mills Ltd
Current assignee: Nisshin Oillio Group Ltd
Priority date: 1984-07-31
Filing date: 1984-07-31
Publication date: 1988-03-02
Also published as: JPS6137097A

Description

【発明の詳細な説明】

＜産業上の利用分野＞本発明はジルベルテラ属に属するγ−リノレン
酸（以下GLAという）含量の高い脂質生産菌を
炭素源濃度の高い培地で培養し、集めた菌体より
GLA含量の高い脂質（中性脂質、極性脂質など）
を製造する方法に係る。＜従来の技術＞これまでに報告されたGLA含有微生物につい
てはR.O.Mumma〔Lipids、６、584（1971）〕、R.
Shaw〔Biochem.Biophys.Acta.98、230（1965）〕、
鈴木ら〔油化学、30、863、（1981）〕などの文献
に記されているが、全脂質でのGLA含量は全体
に低く、十数％にすぎない。また、最近公告され
た鈴木らの発明（特公昭58―22199号）ではモル
テイエレラ属の糸状菌を用い、培地に炭化水素を
添加することにより、GLA含量が全脂質の脂肪
酸組成の20％以上になると報告されている。しか
しこのように培地に炭化水素を添加しても、完全
にその炭化水素を資化できず、醗酵終了後もいく
らかが培地中に残存する。そのため、総脂質中に
この炭化水素が混入し、その後のGLAの精製に
困難を生じるという問題があつた。＜発明が解決しようとする問題点＞そこで本発明者らはGLA含量が高い、油
分含量が高い、生育速度が早いなどの条件を満
す菌株のスクリーニングを行つた結果、ジルベル
テラ・ペルシキヤリア（Gilbertella Persicaria
以下G.Percicariaと記す）〔NRRL−1546、2357、
2700〕が、これにほぼ適合することを見出し、本
発明を完成するに至つた。＜問題点を解決するための手段＞本発明はジルベルテラ属に属するγ−リノレン
酸含量の高い脂質生産菌を炭素源濃度の高い培地
で培養し、培養物からγ−リノレン酸含量の高い
脂質を採取することを特徴とする脂質成分の製法
である。本発明で使用する菌は、上述のG.Persicariaが
適当であるが、ジルベルテラ属に属するものであ
ればすべての菌が使用できる。これらの菌はいず
れも米国ノーザンリージヨナルリサーチラボラト
リー（Northern Regional Research
Laboratory）に保存され、カタログに記載され
ている糸状菌である。培養する際の培地組成については、特に規定す
るものではないが、グルコース、酢酸ナトリウム
などの有機炭素源が好ましい。またその使用量は
３〜30重量％程度用いるのが望ましい。窒素源
は、酵母エキス、麦芽エキス等の有機窒素源のほ
か、硝酸塩、尿素なども使用できる。また、これ
らの組成分の他、ビタミンB₆のようなビタミン
類の添加も、生育を早めるのに効果的である。上記糸状菌の培養は、通常液体培地で静置培
養、振とう培養、通気撹拌培養などにより行う。
培地のPHは微酸性乃至中性が良い。培養温度は15
〜30℃程度が好ましく、培養期間は４〜15日間程
度が必要である。このようにして得られた培養物
より菌体を集め、その菌体より脂質抽出を行う。
GLAを含む脂質が培地中に分泌されることはな
いので、培地を回収する必要はない。脂質の抽出
法については、湿菌体とガラスビーズを混合して
ｎ−ヘキサンなどの溶剤とともにホモジナイズす
る方法や、湿菌体を凍結乾燥後、ｎ−ヘキサン：
イソプロパノール混合溶剤などで抽出する方法な
どで行われる。また、必要により得られた総脂質
を常法によりケン化分解すれば、GLA含量の高
い脂肪酸混合物が得られる。 GLAは、リノール酸から動物体内において合
成される脂肪酸であり、GLAとなつた後にもビ
スホモ−γ−リノレン酸を経由してプロスタグラ
ンジンE₁、F₁およびE₂。、₂などに変換されるとい
う非常に重要な役割を持つ物質である。最近にな
り、リノール酸からGLAへの変換反応が、老化、
アルコール摂取、ビタミン不足などの要因により
著しく阻害されることが見出され、GLAの不足
による体内プロスタグランジンバランスの変化が
アレルギー疾患、血栓症、ガンなどの原因の１つ
にあげられるようになつている。 GLAは、月見草種子などのような植物種子中
にも微量存在することが知られているが、総脂質
の脂肪酸組成のせいぜい10％どまりである。ま
た、このような植物種子油はGLA以外の脂肪酸
主成分として70％ほどのリノール酸を含むためケ
ン化分解した後の脂肪酸混合物よりGLAを精製
する場合、溶剤分別などの手法を用いても、両者
が非常によく似た挙動を示すため分離が困難であ
つた。これに対し、本発明によるGLA高含量油
は表−１に示すようにGLAに対し、リノール酸
のような物理的性質のよく似た脂肪酸が比較的少
なく、GLAの精製も容易である。

【表】また本発明方法によれば、炭素源はグルコース
などの安全性の確認された有機炭素源を使用でき
るから、このような場合は、炭化水素を炭素源と
する場合に比べ安全性が高いというメリツトもあ
る。またジルベルテラ属の菌は、これまでにアフ
ラトキシンなどの有毒物質を生産しないことが確
認されている。実施例１表−２に示すような有機栄養培地（１）に
G.Persicaria（NRRL−1546）を接種し、27℃、
８日間、200rpmで振とう培養した。培養後、ロ
過にて菌体を回収し凍結乾燥した。これにより、
培地１あたり5.0ｇの乾燥菌体を得た。この菌
体より、ｎ−ヘキサン：イソプロパノール＝３：
２（ｖ／ｖ）の混合溶剤で総脂質を抽出したとこ
ろ、1.0ｇの脂質が得られた。次に脂質の一部を
常法により、ケン化分解し、不ケン化物を除去し
た後、脂肪酸を得、これをメチルエステル化して
脂肪酸組成を分析した。結果を表−３に示す。

【表】（水で１にする）

【表】実施例２表−４に示す培地（１）にG.Persicaria
（NRRL−2357）を接種し23℃、９日間200rpmで
振とう培養した。培養後、実施例１と同様に処理
した結果、乾燥菌体3.2ｇ、総脂質1.05ｇが得ら
れた。このものの総脂肪酸組成を表−５に示す。

【表】

【表】実施例３表−６に示す培地（30）を50のジヤーフア
ーメンターに入れ、加熱加圧殺菌後、G.
Persicaria（NRRL−2357）を接種し30℃４日間
の通気撹拌培養を行つた。なお、培地のPHは常に
4.0以上となるよう調節した。培養後、実施例１
と同様に処理した結果、乾燥菌体1800ｇ、総脂質
480ｇが得られた。このものの総脂肪酸組成を表
−７に示す。表−６グルコース 250 ｇ／酵母エキス３〃尿素 15 〃（NH₄）₂SO₄ ５〃 KH₂PO₄ 10 〃 MgSO₄7H₂O ２〃 NaCl 0.3 〃 PeSO₄7H₂O 30 mg／ CaCl 30 〃 CuSO₄5H₂O 0.5 〃 ZnSO₄7H₂O ３〃 MnCl₂4H₂O ３〃ビタミンB₆ ６〃ビオチン 0.06 〃

【表】＜発明の効果＞本発明のジルベルテラ属に属するγ−リノレン
酸含量の高い脂質生産菌を炭素源濃度の高い培地
で培養することによつて、培養物からγ−リノレ
ン酸含量が総脂質の脂肪酸組成の20％以上である
高い脂質を採取することができた。

Claims

【特許請求の範囲】１ジルベルテラ属に属するγ−リノレン酸含量
の高い脂質生産菌を炭素源濃度の高い培地で培養
し、培養物からγ−リノレン酸含量の高い脂質を
採取することを特徴とする脂質成分の製法。２ジルベルテラ属に属するγ−リノレン酸含量
の高い脂質生産菌がジルベルテラ・ペルシキヤリ
ア（Gilbertella Persicaria）である特許請求の
範囲第１項記載の製法。３培地の炭素源が有機炭素源である特許請求の
範囲第１項記載の製法。４ γ−リノレン酸含量が総脂質の脂肪酸組成の
20％以上である特許請求の範囲第１項又は第２項
記載の製法。５特許請求の範囲第１項、第２項又は第３項記
載の方法で得られた脂質成分をケン化分解するこ
とを特徴とするγ−リノレン酸含量の高い脂質成
分の製法。