JPS5934358B2 - 抗生物質ナナオマイシンａの誘導体 - Google Patents
抗生物質ナナオマイシンａの誘導体Info
- Publication number
- JPS5934358B2 JPS5934358B2 JP51049224A JP4922476A JPS5934358B2 JP S5934358 B2 JPS5934358 B2 JP S5934358B2 JP 51049224 A JP51049224 A JP 51049224A JP 4922476 A JP4922476 A JP 4922476A JP S5934358 B2 JPS5934358 B2 JP S5934358B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- nanaomycin
- absorption spectrum
- reaction
- medium
- ethyl acetate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
- C12P17/06—Oxygen as only ring hetero atoms containing a six-membered hetero ring, e.g. fluorescein
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Pyrane Compounds (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は抗生物質ナナオマイシンＡの誘導体とくに次式
で示される誘導体およびその製造方法に関する。
で示される誘導体およびその製造方法に関する。
６ｄδヒー〜へ
式中 （イ） Ｒ＝Ｈ、Ｒ’■ＮＨ２
（向 Ｒ＝Ｃ０ＣＨ３、Ｒ’■ＯＨ
（／→ Ｒ＝Ｈ、Ｒ＝０ＣＨ３
式（イ）、（口）、（’→の化合物をナナオマイシンＣ
、アセチルナナオマイシンＡおよびナナオマイシンＡメ
チルエステルと称する。
、アセチルナナオマイシンＡおよびナナオマイシンＡメ
チルエステルと称する。
さきに本発明者らは、ストレプトミセス属に属するナナ
オマイシン生産能を有する微生物を培地において好気的
に培養し、培養液または菌体から、ナナオマイシンＡを
回収することにより新規化合物ナナオマイシンＡを製造
することおよび類似の性状を有するナナオマイシンＢを
醗酵法により同様の手法で製造することを見出した。
オマイシン生産能を有する微生物を培地において好気的
に培養し、培養液または菌体から、ナナオマイシンＡを
回収することにより新規化合物ナナオマイシンＡを製造
することおよび類似の性状を有するナナオマイシンＢを
醗酵法により同様の手法で製造することを見出した。
これらは、本願と同一出願人による特願昭４８−１０１
７１９号および同４８−１０１７２０号に記載されてい
る。ナナオマイシンＡおよびＢの性状は次のとおりであ
る。ナナオマイシンＡおよびＢ（ＯＳ−３９６６一Ａお
よびＢまたはロザソマイシンＡおよびＢとも称する）は
、それぞれ次式…、１１で示される化合物である。
７１９号および同４８−１０１７２０号に記載されてい
る。ナナオマイシンＡおよびＢの性状は次のとおりであ
る。ナナオマイシンＡおよびＢ（ＯＳ−３９６６一Ａお
よびＢまたはロザソマイシンＡおよびＢとも称する）は
、それぞれ次式…、１１で示される化合物である。
ナナオマイシンＡおよびＢは、マイコプラズマ、グラム
陽性菌およびトリコフイトンに活性を示し、急性毒性（
ＬＤ５Ｏ，ｉｐ，マウス）はそれぞれ２８２および１６
９１１９／Ｋｇである。
陽性菌およびトリコフイトンに活性を示し、急性毒性（
ＬＤ５Ｏ，ｉｐ，マウス）はそれぞれ２８２および１６
９１１９／Ｋｇである。
これらはトリコフイトンまたはマイコプラズマ感染症に
治療効果を有するので医薬および動物薬として利用する
ことができる。ナナオマイシンＡおよびＢが動物の白癖
症治療剤として有用であることは、本願と同一出願人に
よる特願昭５０−４４８５９号および同５１一４２８８
１号に記載されている。
治療効果を有するので医薬および動物薬として利用する
ことができる。ナナオマイシンＡおよびＢが動物の白癖
症治療剤として有用であることは、本願と同一出願人に
よる特願昭５０−４４８５９号および同５１一４２８８
１号に記載されている。
ナナオマイシンＡおよびＢの性状はたとえばフレノリシ
ン、デオキシフレノリシン、カラフンジン（カラマイシ
ン）およびエチルカラフンジネート（エチルカラマイシ
ネート）のような公知の抗生物質と異なることが分かつ
た。
ン、デオキシフレノリシン、カラフンジン（カラマイシ
ン）およびエチルカラフンジネート（エチルカラマイシ
ネート）のような公知の抗生物質と異なることが分かつ
た。
ナナオマイシンＡは、グラム陽性菌たとえばスタフイロ
コツカス・アウレウスの発育を２．０ないし８，０μｇ
／Ｗｌｅ、トリコフイトンに属する真菌の発育を３．１
μ９／ｍｌ以下で阻止する。
コツカス・アウレウスの発育を２．０ないし８，０μｇ
／Ｗｌｅ、トリコフイトンに属する真菌の発育を３．１
μ９／ｍｌ以下で阻止する。
また、マイコプラズマ・ガリセプチクムの発育を０．１
μｆ！）１以下で阻止するほか、スピラマイシン耐性を
有するマイコプラズマ・ガリセプチクムに対しても強い
活性を示す。ナナオマイシンＡは動物のトリコフイトン
感染症に優れた治療効果を示した。
μｆ！）１以下で阻止するほか、スピラマイシン耐性を
有するマイコプラズマ・ガリセプチクムに対しても強い
活性を示す。ナナオマイシンＡは動物のトリコフイトン
感染症に優れた治療効果を示した。
モルモツトの背部の皮膚のトリコフイトン・メタグロフ
イテス感染症にプロピレングリコール−エタノール（３
：１容量／容量）に溶解したナナオマイシンＡ（０．０
１−１％）を１日１回８日間与えたところ、紅斑および
鱗屑の改良から優れた治療効果がみられた。さらに動物
のマイコプラズマ感染症の治療薬として有効で、たとえ
ばマイコプラズマ・ガリセプチクムによる鶏の慢性呼吸
器病に治療効果を示した。トリコフイトン・ベルコスム
の集団感染による牛の皮膚白椿症をナナオマイシンＡで
処理した。その際ナナオマイシンＡを適当な担体（例、
オリーブ油）に溶解または分散し、鱗屑を除去しまたは
しないで患部に与えた。動物の皮膚白癖症に対するもつ
とも優れた薬剤と考えられるＳＰ−プルトン（酪農振興
株式会社製）と対照した。治療効果を４週間観察した。
ナナオマイシンＡを１回または２回（２回目は１週間後
に）塗つた結果はそれぞれ第１，２表のとおりである。
次にナナオマイシンＢは、アルカリ性条件では容易に、
酸性または中性条件では徐々にナナオマイシンＡに変わ
る。
イテス感染症にプロピレングリコール−エタノール（３
：１容量／容量）に溶解したナナオマイシンＡ（０．０
１−１％）を１日１回８日間与えたところ、紅斑および
鱗屑の改良から優れた治療効果がみられた。さらに動物
のマイコプラズマ感染症の治療薬として有効で、たとえ
ばマイコプラズマ・ガリセプチクムによる鶏の慢性呼吸
器病に治療効果を示した。トリコフイトン・ベルコスム
の集団感染による牛の皮膚白椿症をナナオマイシンＡで
処理した。その際ナナオマイシンＡを適当な担体（例、
オリーブ油）に溶解または分散し、鱗屑を除去しまたは
しないで患部に与えた。動物の皮膚白癖症に対するもつ
とも優れた薬剤と考えられるＳＰ−プルトン（酪農振興
株式会社製）と対照した。治療効果を４週間観察した。
ナナオマイシンＡを１回または２回（２回目は１週間後
に）塗つた結果はそれぞれ第１，２表のとおりである。
次にナナオマイシンＢは、アルカリ性条件では容易に、
酸性または中性条件では徐々にナナオマイシンＡに変わ
る。
たとえばナナオマイシンＢ（２００ワ）を０．１Ｎカセ
イソーダ（６０ｍ０に溶解し、１０分間静置し、６Ｎ塩
酸でＰＨ２．Ｏにし、酢酸エチルで抽出し、蒸発乾固し
、エタノール溶液から橙黄色のナナオマイシンＡを得る
ことができる。このようにして、アルカリ溶液中でナナ
オマイシンＢからＡを得ることができる。ナナオマイシ
ンＢ自体は活性を示さないかまたは弱い活性しか示さな
いと考えられるが、たとえば培地中でナナオマイシンＡ
に変わるので活性化される。
イソーダ（６０ｍ０に溶解し、１０分間静置し、６Ｎ塩
酸でＰＨ２．Ｏにし、酢酸エチルで抽出し、蒸発乾固し
、エタノール溶液から橙黄色のナナオマイシンＡを得る
ことができる。このようにして、アルカリ溶液中でナナ
オマイシンＢからＡを得ることができる。ナナオマイシ
ンＢ自体は活性を示さないかまたは弱い活性しか示さな
いと考えられるが、たとえば培地中でナナオマイシンＡ
に変わるので活性化される。
従つて、ナナオマイシンＢが生体内でＡに変わる場合、
その活性は持続的である。ナナオマイシンＢをＡと同様
の目的に用いることができる。ナナオマイシンＡ，Ｂの
生物学的性状は次のとおりである。
その活性は持続的である。ナナオマイシンＢをＡと同様
の目的に用いることができる。ナナオマイシンＡ，Ｂの
生物学的性状は次のとおりである。
第３表（各種微生物に対する最小阻止濃度）、第４表（
真菌に対する活性）、第５表（マイコプラズマに対する
活性）を示す。
真菌に対する活性）、第５表（マイコプラズマに対する
活性）を示す。
ナナオマイシンＢの真菌に対する活性は、第４表に示さ
れたＰＨよりも高いＰＨの培地で試験した場合には、さ
らに強い活性を示す。
れたＰＨよりも高いＰＨの培地で試験した場合には、さ
らに強い活性を示す。
ナナオマイシンＡおよびＢはマイコプラズマに対して、
デオキシフレノリシン、エチルカラフンジネート（エチ
ルカラマイシネート）のような公知の抗生物質よりも良
好な活性を示す。
デオキシフレノリシン、エチルカラフンジネート（エチ
ルカラマイシネート）のような公知の抗生物質よりも良
好な活性を示す。
（注）ペーパーデイスク法（栄研ＰＰＬＯ寒天培地、Ｐ
Ｈ７．８，３７℃，１日）ナナオマイシンＡは黄色針状
晶であり、理化学的諸性状は次のとおりである。
Ｈ７．８，３７℃，１日）ナナオマイシンＡは黄色針状
晶であり、理化学的諸性状は次のとおりである。
（１）元素分析：実験値、Ｃ，６３．３５；Ｈ，４．４
７；Ｎ，ＯＯＡ）。
７；Ｎ，ＯＯＡ）。
理論値（Ｃ，６Ｈ，４Ｏ６として）、Ｃ，６３．５７；
Ｈ，４．６６；Ｎ，ＯＯｌＯＯ（２）分子量：質量分析
によりｍ／Ｅ３Ｏ２．Ｏ８４と測走された。
Ｈ，４．６６；Ｎ，ＯＯｌＯＯ（２）分子量：質量分析
によりｍ／Ｅ３Ｏ２．Ｏ８４と測走された。
理論値は分子式Ｃｌ６Ｈｌ４Ｏ６としてｍ／Ｅ３Ｏ２．
Ｏ７９である。（３）融 へ：１７８〜１８０℃。
Ｏ７９である。（３）融 へ：１７８〜１８０℃。
（４）比旋光度：〔α〕侍−２７．５
タノール）。
（５）紫外線吸収スペクトル：λＭｅＯＨｎｍ（０；Ｍ
ａｘ２５Ｏ（０．９８５Ｘ１０４）、２７４ （１．２２×１０４）、４２３（０．４０４×１０４）
（第１図）。
ａｘ２５Ｏ（０．９８５Ｘ１０４）、２７４ （１．２２×１０４）、４２３（０．４０４×１０４）
（第１図）。
（６）赤外線吸収スペクトル：ＫＢｒ法で測定した場合
３１５０２９６０２９１０１７２５９？
９９１６４０１６１０１４５０１３７０ラ９
９９ １３２０１２７０１２２０９９ 学 １１６０ＣＴｒＬ−１に比較的強い吸収を示す（第２図
）。
３１５０２９６０２９１０１７２５９？
９９１６４０１６１０１４５０１３７０ラ９
９９ １３２０１２７０１２２０９９ 学 １１６０ＣＴｒＬ−１に比較的強い吸収を示す（第２図
）。
（７）溶解性：メタノール、エタノール、酢酸エチル、
クロロホルム、アセトン、エーテルに易溶、ｎ−ヘキサ
ン、石油エーテル、水に不溶。
クロロホルム、アセトン、エーテルに易溶、ｎ−ヘキサ
ン、石油エーテル、水に不溶。
（８）呈色反応：塩化第二鉄反応、還元触媒反応（Ｆｅ
ｌｇｌ，Ｎ．，ＡｎａＩ．Ｃｈｅｍ．Ｊ旦，３９７（１
９５６）】は陽性であり、ニンヒドリン反応、坂口反応
、エールリツヒ反応、フエーリング反応、モーリツシユ
反応は陰性であつた。
ｌｇｌ，Ｎ．，ＡｎａＩ．Ｃｈｅｍ．Ｊ旦，３９７（１
９５６）】は陽性であり、ニンヒドリン反応、坂口反応
、エールリツヒ反応、フエーリング反応、モーリツシユ
反応は陰性であつた。
上記性状よりナナオマイシンＡはキノン系の新規化合物
であることが明らかとなつた。
であることが明らかとなつた。
ナナオマイシンＢは淡黄色粉末であり、理化学的諸性状
は次のとおりである。
は次のとおりである。
（１）元素分析：実験値、Ｃ，５９．７Ｏ；Ｈ，４．９
Ｏ；Ｎ，Ｏ％。
Ｏ；Ｎ，Ｏ％。
理論値（Ｃｌ６Ｈ，６Ｏ７として）、Ｃ，５９．９９；
Ｈ，５．Ｏ８；Ｎ，Ｏ％。
Ｈ，５．Ｏ８；Ｎ，Ｏ％。
（２）分子量：質量分析によりｍ／Ｅ３２Ｏ．Ｏ９Ｏと
測定された。
測定された。
理論値は分子式Ｃｌ６Ｈｌ６Ｏ７としてｍ／Ｅ３２Ｏ．
Ｏ９Ｏである。（３）融 点：約８４〜８６℃ｏ （４）比旋光度：〔α〕Ｌ６−７４．５ｌ（Ｃ−１．０
、メタノール）。
Ｏ９Ｏである。（３）融 点：約８４〜８６℃ｏ （４）比旋光度：〔α〕Ｌ６−７４．５ｌ（Ｃ−１．０
、メタノール）。
（５）紫外線吸収スペクトル：λＭｅＯＨｎｍ（ε）；
Ｍａｘ２３ｌ（２．０８×１０４），２４８（肩）（０
．８７０×１０４），２６９（肩）（０．５０３×１０
４），３５２（０．４９７×１０４）（第３図）。
Ｍａｘ２３ｌ（２．０８×１０４），２４８（肩）（０
．８７０×１０４），２６９（肩）（０．５０３×１０
４），３５２（０．４９７×１０４）（第３図）。
（６）赤外線吸収スペクトル：ＫＢｒ法で測定した場合
、３５００，−２９００，１７０５，１６４８１６０５
１４５０１３８０９９ ９９１３５５１２６８１２１ １１６０，１１０７ｃＴｎ−１に特徴的な比較的強い吸
収を示す（第４図）。
、３５００，−２９００，１７０５，１６４８１６０５
１４５０１３８０９９ ９９１３５５１２６８１２１ １１６０，１１０７ｃＴｎ−１に特徴的な比較的強い吸
収を示す（第４図）。
（７）溶解性：メタノール、エタノール、酢酸エチル、
クロロホルム、アセトン、エーテルに易溶、ｎ−ヘキサ
ン、石油エーテル、水に不溶。
クロロホルム、アセトン、エーテルに易溶、ｎ−ヘキサ
ン、石油エーテル、水に不溶。
（８）呈色反応：塩化第二鉄反応、還元触媒反応（Ｆｅ
ｉｇｌ，Ｎ．，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，亜，８９７（１
９５６））ｌは陽性であり、ニンヒドリン反応、坂口反
応、エールリツヒ反応、フエーリング反応、モーリツシ
ユ反応は陰性であつた。
ｉｇｌ，Ｎ．，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，亜，８９７（１
９５６））ｌは陽性であり、ニンヒドリン反応、坂口反
応、エールリツヒ反応、フエーリング反応、モーリツシ
ユ反応は陰性であつた。
上記性状よりナナオマイシンＢはナナオマイシンＡと類
似の新規化合物であることが分かつた。
似の新規化合物であることが分かつた。
ナナオマイシンＡおよびＢの性状は、フレノリシン、デ
オキシフレノリシン、カラフンジン（カラマイシン）、
エチルカラフンジネート（エチルカラマイシネート）の
ような公知の類似抗生物質のものと異なることは明らか
であるが、さらに前者の比旋光度および旋光分散（０Ｒ
Ｄ）曲線（第５図）によつて、公知のものと識別される
。ナナオマイシンＡおよびＢは、ナナオマイシンＡおよ
びＢ生産能を有する微生物ストレプトミセス・ローザ・
パリアンド・ノトエンシスを培地で好気的に培養し、培
養された材料に蓄積されたナナオマイシンＡおよびＢを
回収することにより製造される。この微生物は０Ｓ−３
９６６菌とも称せられ、能登半島七尾市の土壌サンプル
から分離されたもので、微工研寄託番号ＦＥＲＭＰ−２
２０９として入手することができる。
オキシフレノリシン、カラフンジン（カラマイシン）、
エチルカラフンジネート（エチルカラマイシネート）の
ような公知の類似抗生物質のものと異なることは明らか
であるが、さらに前者の比旋光度および旋光分散（０Ｒ
Ｄ）曲線（第５図）によつて、公知のものと識別される
。ナナオマイシンＡおよびＢは、ナナオマイシンＡおよ
びＢ生産能を有する微生物ストレプトミセス・ローザ・
パリアンド・ノトエンシスを培地で好気的に培養し、培
養された材料に蓄積されたナナオマイシンＡおよびＢを
回収することにより製造される。この微生物は０Ｓ−３
９６６菌とも称せられ、能登半島七尾市の土壌サンプル
から分離されたもので、微工研寄託番号ＦＥＲＭＰ−２
２０９として入手することができる。
もちろん、ストレプトミセス属に属しかつナナオマイシ
ンＡおよびまたはＢを生産する他の微生物を用いること
もできる。ナナオマイシンＡおよびまたはＢを次の方法
で得ることができる。
ンＡおよびまたはＢを生産する他の微生物を用いること
もできる。ナナオマイシンＡおよびまたはＢを次の方法
で得ることができる。
ナナオマイシンＡおよびまたはＢ生産能を有する微生物
の胞子または菌体を常法により培地に植え、振とうまた
は通気攪拌深部培養により、温度１５−４０℃、調整さ
れたＰＨ６−１０で約２−８日間好気的地養すると、培
地および菌体に多量のナナオマイシンＡおよびまたはＢ
が蓄積される。
の胞子または菌体を常法により培地に植え、振とうまた
は通気攪拌深部培養により、温度１５−４０℃、調整さ
れたＰＨ６−１０で約２−８日間好気的地養すると、培
地および菌体に多量のナナオマイシンＡおよびまたはＢ
が蓄積される。
ストレプトミセス属に属する微生物の培養用の公知の各
種の培地を用いるこ５とができ、固体培地でもよいが大
量生産には液体培地がよい。本培地と類似の組成を有す
る種培地を用いることができ、たとえば坂ロフラスコを
用いて２７℃で２日間好気的に培養して、種を得ること
ができる。適当な炭素源、窒素源、無機物および必要に
応じて他の各種養分を含む人工または天然培地を用いる
ことができる。
種の培地を用いるこ５とができ、固体培地でもよいが大
量生産には液体培地がよい。本培地と類似の組成を有す
る種培地を用いることができ、たとえば坂ロフラスコを
用いて２７℃で２日間好気的に培養して、種を得ること
ができる。適当な炭素源、窒素源、無機物および必要に
応じて他の各種養分を含む人工または天然培地を用いる
ことができる。
炭素源の濃度は培地に対して０．５−５．０％（グルコ
ースとして）がよい。有利な醗酵法の例は次のとおりで
ある。５００ｍ１坂口フラスコに培地（１００ｍ０を入
れ、１２０℃で１５分滅菌した後、使用する微生物の胞
子または菌体を植え、２７℃で醗酵プロス中に多量のナ
ナオマイシンＡおよびまたはＢを蓄積するに充分な期間
（例、３日）振とう培養（１１０ｒｐｍ）する。
ースとして）がよい。有利な醗酵法の例は次のとおりで
ある。５００ｍ１坂口フラスコに培地（１００ｍ０を入
れ、１２０℃で１５分滅菌した後、使用する微生物の胞
子または菌体を植え、２７℃で醗酵プロス中に多量のナ
ナオマイシンＡおよびまたはＢを蓄積するに充分な期間
（例、３日）振とう培養（１１０ｒｐｍ）する。
または培地（２０１）を３０１のシャーに入れ、１２０
℃で１５分間滅菌した後、植菌し、２７℃で３日間振と
う（３００ｒｐｍ）通気（１０ｅ／分）培養する。また
４００１タンクを用い、培地（２００１）を２７℃で３
日間振とう（２００ｒｐｍ）通気（１００１／分）培養
してもよい。どの場合にも、グリセリンおよび大豆粉を
炭素および窒素源として用いると、良い結果が得られる
。とくに良い培地の例はグリセリン（２．０％）、大豆
粉（２．０％）および食塩（０．３０１０）を含むもの
（ＰＨ７．Ｏ）である。この培地を用いた例において、
２７℃で７０時間タンク培養後のＰＨは５．２で、培養
液の上澄に直径８０ｍｕの阻止帯が生じた。ナナオマイ
シンＡ，Ｂは醗酵液と固形分との両方に含まれているが
、通常液体成分の方に多い。ナナオマイシンＡ，Ｂの試
験方法ナナオマイシンＡまたはＢを、たとえばジヤーナ
ル・オブ・アンチバイオチツクス，旦，８５５８５９（
１９７１）に報告されたペーパー・デイスタ法と同様に
して、次のように試験することができる。
℃で１５分間滅菌した後、植菌し、２７℃で３日間振と
う（３００ｒｐｍ）通気（１０ｅ／分）培養する。また
４００１タンクを用い、培地（２００１）を２７℃で３
日間振とう（２００ｒｐｍ）通気（１００１／分）培養
してもよい。どの場合にも、グリセリンおよび大豆粉を
炭素および窒素源として用いると、良い結果が得られる
。とくに良い培地の例はグリセリン（２．０％）、大豆
粉（２．０％）および食塩（０．３０１０）を含むもの
（ＰＨ７．Ｏ）である。この培地を用いた例において、
２７℃で７０時間タンク培養後のＰＨは５．２で、培養
液の上澄に直径８０ｍｕの阻止帯が生じた。ナナオマイ
シンＡ，Ｂは醗酵液と固形分との両方に含まれているが
、通常液体成分の方に多い。ナナオマイシンＡ，Ｂの試
験方法ナナオマイシンＡまたはＢを、たとえばジヤーナ
ル・オブ・アンチバイオチツクス，旦，８５５８５９（
１９７１）に報告されたペーパー・デイスタ法と同様に
して、次のように試験することができる。
菌を２７℃で振とう培養した。
グリセリン（２，０％）大豆粉（２．０％）食塩（０．
３％）を含む培地（ＰＨ７．Ｏ）を用いた。
３％）を含む培地（ＰＨ７．Ｏ）を用いた。
２４，４８，７２，９６時間培養後、培養液に直径各１
７，２７，２８，２９ｍ７！Ｌの阻止帯を認めた。
７，２７，２８，２９ｍ７！Ｌの阻止帯を認めた。
ナナオマイシンＡ，Ｂの回収
醗酵後のナナオマイシンＡおよびＢの回収法の例は次の
とおりである。
とおりである。
濾過や遠心分離のような常法により、醗酵プロスを固相
と液相に分ける。液相すなわち濾液を塩酸などで酸性（
ＰＨ２から４）にし、酢酸エチルまたは酢酸ブチルのよ
うな有機溶媒で抽出した後、有機溶媒に可溶性の公知物
質の精製に常用される手法で精製する。抽出液からナナ
オマイシンＡおよびＢを酸性条件で単離してもよいが、
ナナオマイシンＢはアルカリ性条件ではナナオマイシン
Ａに変わる性質があるので、多量のナナオマイシンＢを
得たいなら、高すぎるＰＨを避けねばならない。たとえ
ば重炭酸ソーダ（１０１０）水溶液を用いて、ナナオマ
イシンＡおよびまたはＢを早い速度で抽出液から溶出し
た直後、ナナオマイシンＡおよびまたはＢを含む液を塩
酸などで酸性にし、酢酸エチルまたは酢酸ブチルのよう
な適当な有拶溶媒で再抽出することができる。この液を
濃縮乾固させるとナナオマイシンＡおよびまたはＢの粗
粉末が得られる。これをシリカゲルクロマトグラフイ一
によつて精製する。その際粗粉末をベンゼンーアセトン
（４：１容量／容量）の溶媒で展開すると、はじめにナ
ナオマイシンＡ区分、次にナナオマイシンＢ区分が得ら
れる。各区分を別々に合わせて濃縮乾固する。ナナオマ
イシンＡを含む固形分をエタノールに溶解し、次に少量
の水を加えるとナナオマイシンＡの針状結晶が析出する
。これと同様にして、ナナオマイシンＢを精製すること
ができる。
と液相に分ける。液相すなわち濾液を塩酸などで酸性（
ＰＨ２から４）にし、酢酸エチルまたは酢酸ブチルのよ
うな有機溶媒で抽出した後、有機溶媒に可溶性の公知物
質の精製に常用される手法で精製する。抽出液からナナ
オマイシンＡおよびＢを酸性条件で単離してもよいが、
ナナオマイシンＢはアルカリ性条件ではナナオマイシン
Ａに変わる性質があるので、多量のナナオマイシンＢを
得たいなら、高すぎるＰＨを避けねばならない。たとえ
ば重炭酸ソーダ（１０１０）水溶液を用いて、ナナオマ
イシンＡおよびまたはＢを早い速度で抽出液から溶出し
た直後、ナナオマイシンＡおよびまたはＢを含む液を塩
酸などで酸性にし、酢酸エチルまたは酢酸ブチルのよう
な適当な有拶溶媒で再抽出することができる。この液を
濃縮乾固させるとナナオマイシンＡおよびまたはＢの粗
粉末が得られる。これをシリカゲルクロマトグラフイ一
によつて精製する。その際粗粉末をベンゼンーアセトン
（４：１容量／容量）の溶媒で展開すると、はじめにナ
ナオマイシンＡ区分、次にナナオマイシンＢ区分が得ら
れる。各区分を別々に合わせて濃縮乾固する。ナナオマ
イシンＡを含む固形分をエタノールに溶解し、次に少量
の水を加えるとナナオマイシンＡの針状結晶が析出する
。これと同様にして、ナナオマイシンＢを精製すること
ができる。
その際ナナオマイシンＢを含む区分を合わせて濃縮乾固
した後、ベンゼンーアセトン（３：１容量／容量）を展
開剤として用いるシリカゲルクロマトグラフイ一によつ
て精製する。
した後、ベンゼンーアセトン（３：１容量／容量）を展
開剤として用いるシリカゲルクロマトグラフイ一によつ
て精製する。
さて本発明者はその後研究の結果、いくつかのナナオマ
イシン誘導体を得たが、これはナナオマイシンＡと類似
の性状を有すること、およびＡと同様の用途に有用な抗
生物質であることが分かつた。
イシン誘導体を得たが、これはナナオマイシンＡと類似
の性状を有すること、およびＡと同様の用途に有用な抗
生物質であることが分かつた。
従つて本発明の目的は、上記の種類のナナオマイシンＡ
の誘導体およびその製造方法を供することにある。本発
明の特徴によるナナオマイシンＡの誘導体は次の一般式
で示される。
の誘導体およびその製造方法を供することにある。本発
明の特徴によるナナオマイシンＡの誘導体は次の一般式
で示される。
式中 （イ） Ｒ−Ｈ，Ｒ７＝ＮＨ２または（ロ） Ｒ
−ＣＯＣＨ３，Ｒｌ＝０Ｈまたは（ハ）Ｒ−Ｈ，Ｒ′−
０ＣＨ３化合物（イ）、（１：］）、（ハ）をナナオマ
イシンＣ、アセチルナナオマイシンＡおよびナナオマイ
シンＡメチルエステルと称する。
−ＣＯＣＨ３，Ｒｌ＝０Ｈまたは（ハ）Ｒ−Ｈ，Ｒ′−
０ＣＨ３化合物（イ）、（１：］）、（ハ）をナナオマ
イシンＣ、アセチルナナオマイシンＡおよびナナオマイ
シンＡメチルエステルと称する。
本発明によるナナオマイシンＡ誘導体は次の性状を有す
る。
る。
１．理化学的性状
（イ）ナナオマイシンＣ
中性の橙黄色針状晶であり、理化学的諸性状は次のとお
りである。
りである。
（１）元素分析：実験値、Ｃ，６３．４６；Ｈ，４，５
Ｏ；Ｎ，４．８９Ｏｋ）。
Ｏ；Ｎ，４．８９Ｏｋ）。
理論値（Ｃｌ６Ｈｌ５ＮＯ５として）、Ｃ，６３．７８
；Ｈ，４．６４；Ｎ，５．Ｏ２（１００（２）分子量：
質量分析によりｍ／Ｅ３Ｏｌ．Ｏ９２と測定された。
；Ｈ，４．６４；Ｎ，５．Ｏ２（１００（２）分子量：
質量分析によりｍ／Ｅ３Ｏｌ．Ｏ９２と測定された。
理論値は分子式Ｃｌ６Ｈｌ５ＮＯ５としてｍ／Ｅ３Ｏｌ
．Ｏ９５である。
．Ｏ９５である。
（３）融 点：２２２−２２４℃（分解）。
（４）比旋光度：〔α〕２６−２℃（Ｃ−０．５、ジオ
Ｄ１ １キサン）。
Ｄ１ １キサン）。
（５）紫外線吸収スペクトル：λＭＯＯＨｎｍ（ε）；
Ｍａｘ２４８（１０１００），２７４ （１２４００），４２４（４６１０） （第６図）。
Ｍａｘ２４８（１０１００），２７４ （１２４００），４２４（４６１０） （第６図）。
（６）赤外線吸収スペクトル：ＫＢｒ法で測定した場合
、３４００，３２６０−７０，３１８０２９６０２９１
０９９ ４５１６０５１５７０９９１４５０ ２０１３９２９９１３６０ １３１５１２７８９９ ６３１２３３１２１０９９１１６０ ０８ＣＴＩ１−１に特徴的な比 較的強い吸収を示す（第７図）。
、３４００，３２６０−７０，３１８０２９６０２９１
０９９ ４５１６０５１５７０９９１４５０ ２０１３９２９９１３６０ １３１５１２７８９９ ６３１２３３１２１０９９１１６０ ０８ＣＴＩ１−１に特徴的な比 較的強い吸収を示す（第７図）。
（７）溶解性：メタノール、エタノール、酢酸 こエチ
ル、クロロホルム、アセトンに易溶、水、ｎ−ヘキサン
、石油エーテル に不溶。
ル、クロロホルム、アセトンに易溶、水、ｎ−ヘキサン
、石油エーテル に不溶。
（８）呈色反応：塩化第二鉄、２，４−ジニトロフエニ
ルヒドラジンおよびフオルムアルデヒド一０−ジニトロ
ベンゼ゛ンには 陽性に反応し、ニンヒドリン反応、エ ールリツヒ反応および坂口反応は陰性 である。
ルヒドラジンおよびフオルムアルデヒド一０−ジニトロ
ベンゼ゛ンには 陽性に反応し、ニンヒドリン反応、エ ールリツヒ反応および坂口反応は陰性 である。
（９）Ｒｆ値：クロロホルムーメタノール（１０：１容
量／容量）を用いるシリ カゲル薄層クロマトグラフイ一におい て０．３５。
量／容量）を用いるシリ カゲル薄層クロマトグラフイ一におい て０．３５。
（自）核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペタトル：第８図。
上記性状よりナナオマイシンＣはナナオマイシンＡに類
似の新規化合物であり、ナナオマイシンＡの酸アミド体
であることが分かつた。
似の新規化合物であり、ナナオマイシンＡの酸アミド体
であることが分かつた。
（ロ）アセチルナナオマイシンＡ
淡黄色針状結晶で、理化学的諸性状は次のとおりである
。
。
（１）元素分析：実験値、Ｃ，６２．８９；Ｈ，４，７
８；Ｎ，Ｏ％ｏ理論値（Ｃｌ８Ｈ，６Ｏ７として）、Ｃ
，６２．７９；Ｈ，４。
８；Ｎ，Ｏ％ｏ理論値（Ｃｌ８Ｈ，６Ｏ７として）、Ｃ
，６２．７９；Ｈ，４。
６８；Ｎ，Ｏ％。
（２）分子式：質量分析によりｍ／Ｅ３４４，Ｏ８９と
測定された。
測定された。
理論値は分子式Ｃｌ８Ｈｌ６Ｏ７としてＷｖ／Ｅ３４４
．Ｏ９Ｏである。
．Ｏ９Ｏである。
（３）融 点：１９０−１９２℃
（４）比旋光度：〔α〕２Ｌ＋３２．４．（Ｃ−１．０
２，ＣＨＣ１３）。
２，ＣＨＣ１３）。
（５）紫外線吸収スペクトル：λＭＯＯＨｎｍ（０：Ｍ
ａｘ２３５（２０７００），２６５ （１２１００），２７０（１２３００），３４２（３７
５０）（第９図）。
ａｘ２３５（２０７００），２６５ （１２１００），２７０（１２３００），３４２（３７
５０）（第９図）。
（６）赤外線吸収スペクトル：ＫＢｒ法で測定した場合
、１７６５，１７００，１６７０Ｃ７ｒＬ−１に特徴的
な比較的強い吸収を示す（第１０図）。
、１７６５，１７００，１６７０Ｃ７ｒＬ−１に特徴的
な比較的強い吸収を示す（第１０図）。
（７）溶解性：メタノール、エタノール、酢酸エチル、
クロロホルム、アセトン、エーテルに易溶、ｎ−ヘキサ
ン、石油エ ーテル、水に不溶。
クロロホルム、アセトン、エーテルに易溶、ｎ−ヘキサ
ン、石油エ ーテル、水に不溶。
（８）呈色反応：還元触媒反応〔Ｆｅｉｇｌ，Ｎ．，Ａ
ｎａｌ．Ｃｈｅｍ．２８３９７ＯＯ９？ ９ （１９５６）〕は陽性。
ｎａｌ．Ｃｈｅｍ．２８３９７ＯＯ９？ ９ （１９５６）〕は陽性。
ニンヒドリン反応、坂口反応、エールリツヒ反応、
フエーリング反応、モーリツシユ反応
は陰性。
上記性状よりアセチルナナオマイシンＡはナナオマイシ
ンＡに類似の新規化合物であることが分かつた。
ンＡに類似の新規化合物であることが分かつた。
（ハ）ナナオマイシンＡメチルエステル
橙黄色の粉末であり、理化学的性状は次のとおりである
。
。
（１）元素分析：実験値、Ｃ，６４．８４：Ｈ，５．２
ｌ；Ｎ，ＯＯ／００理論値（Ｃ，７Ｈｌ６Ｏ６として）
、Ｃ，６４．５５；Ｈ，５．ｌＯ；Ｎ，ＯＯｋ）。
ｌ；Ｎ，ＯＯ／００理論値（Ｃ，７Ｈｌ６Ｏ６として）
、Ｃ，６４．５５；Ｈ，５．ｌＯ；Ｎ，ＯＯｋ）。
（２）分子量：質量分析により亀／Ｅ３ｌ６．Ｏ９２と
測定された。理論値は分子式Ｃｌ７Ｈｌ６Ｏ６としてｍ
／Ｅ３ｌ６．Ｏ９Ｏである。
測定された。理論値は分子式Ｃｌ７Ｈｌ６Ｏ６としてｍ
／Ｅ３ｌ６．Ｏ９Ｏである。
（３）融 点：９９−１０２℃。
（４）比旋光度：〔α〕２−１２．７．（Ｃ−１．０２
，ＣＨＣ１３）。
，ＣＨＣ１３）。
（５）紫外線吸収スペクトル：λＭｅＯＨｎｍ（ε）；
Ｍａｘ２４８（１２４００），２７４ （１５１００），４２４（５６５０） （第１１図）。
Ｍａｘ２４８（１２４００），２７４ （１５１００），４２４（５６５０） （第１１図）。
（６）赤外線吸収スペクトル：ＫＢｒ法で測定した場合
、１７３０，１６４５，１６１５ｃｍ−１に特徴的な比
較的強い吸収を示す（第１２図）。
、１７３０，１６４５，１６１５ｃｍ−１に特徴的な比
較的強い吸収を示す（第１２図）。
（７）浩解性：メタノール、エタノール、酢酸エチル、
クロロホルム、アセトン、エーテルに易溶、ｎ−ヘキサ
ン、石油エ ーテル、水に不溶。
クロロホルム、アセトン、エーテルに易溶、ｎ−ヘキサ
ン、石油エ ーテル、水に不溶。
（８）呈色反応：塩化第二鉄反応、還元触媒反応〔Ｆｅ
ｉｇｌ，Ｎ．，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，？影，３９７（
１９５６）〕は陽性。
ｉｇｌ，Ｎ．，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，？影，３９７（
１９５６）〕は陽性。
ニンヒドリン反応、坂口反応、エールリツヒ
反応、フエーリング反応、モーリツシ
ユ反応は陰性。
上記性状よりナナオマイシンＡメチルエステルはナナオ
マイシンＡと類似の新規化合物であることが分かつた。
マイシンＡと類似の新規化合物であることが分かつた。
．生物学的性状
下表は（イ）ナナオマイシンＣ、（口）アセチルナナオ
マイシンＡ、（ハ）ナナオマイシンＡメチルエステルの
各種微生物に対する活性を示す。
マイシンＡ、（ハ）ナナオマイシンＡメチルエステルの
各種微生物に対する活性を示す。
対照はナナオマイシンＡのものである。ナナオマイシン
Ｃは、主としてグラム陽性菌およびマイコプラズマに活
性を示す。
Ｃは、主としてグラム陽性菌およびマイコプラズマに活
性を示す。
前者に対する活性はナナオマイシンＡと同等であるが、
真菌およびマイコプラズマに対する活性はナナオマイシ
ンＡよりも低い。アセチルナナオマイシンＡは、グラム
陽性菌に対してナナオマイシンＡよりも強い活性を示し
、真菌およびマイコプラズマに対してはほぼ同等の活性
を示す。
真菌およびマイコプラズマに対する活性はナナオマイシ
ンＡよりも低い。アセチルナナオマイシンＡは、グラム
陽性菌に対してナナオマイシンＡよりも強い活性を示し
、真菌およびマイコプラズマに対してはほぼ同等の活性
を示す。
なおアセチルナナオマイシンＡをマウスに腹腔内投与し
た場合の急性毒性（ＬＤ５Ｏ）は３８．５〜／Ｋ９であ
り、ナナオマイシンＡよりも低い。ナナオマイシンＡメ
チルエステルの活性は一般に他のものよりも低い。
た場合の急性毒性（ＬＤ５Ｏ）は３８．５〜／Ｋ９であ
り、ナナオマイシンＡよりも低い。ナナオマイシンＡメ
チルエステルの活性は一般に他のものよりも低い。
前述したモルモツトおよび牛のトリコフイトン感染症に
対するナナオマイシンＡの治療効果の観察と同様の方法
により、その他のナナオマイシン関連物質の治療効果を
調べたところ、濃度０．０１１％の場合アセチルナナオ
マイシンＡはナナオマイシンＡと同等以上の効果を示し
た。
対するナナオマイシンＡの治療効果の観察と同様の方法
により、その他のナナオマイシン関連物質の治療効果を
調べたところ、濃度０．０１１％の場合アセチルナナオ
マイシンＡはナナオマイシンＡと同等以上の効果を示し
た。
ナナオマイシンＡメチルエステルの効果はこれらよりも
劣つた。ナナオマイシンＣのトリコフイトン感染症に対
する治療効果は低い。なおナナオマイシンＢの効果は徐
々に現われ持続的で、しかも毒性が少なく、最終的効果
はナナオマイシンＡと同等であつた。ナナオマイシンＡ
誘導体の製造方法は次のとおりである。
劣つた。ナナオマイシンＣのトリコフイトン感染症に対
する治療効果は低い。なおナナオマイシンＢの効果は徐
々に現われ持続的で、しかも毒性が少なく、最終的効果
はナナオマイシンＡと同等であつた。ナナオマイシンＡ
誘導体の製造方法は次のとおりである。
（イ）ナナオマイシンＣ
前述したナナオマイシンＡおよびＢ生産能を有するスト
レプトミセス・ローザ・バリアントノトエンシス（ＦＥ
ＲＭＰ−２２０９）を好気的に培養するとナナオマイシ
ンＡおよびＢと同時にナナオマイシンＣを醗酵液および
菌体に蓄積することができるが、その量はＡおよびＢよ
りも少ない。
レプトミセス・ローザ・バリアントノトエンシス（ＦＥ
ＲＭＰ−２２０９）を好気的に培養するとナナオマイシ
ンＡおよびＢと同時にナナオマイシンＣを醗酵液および
菌体に蓄積することができるが、その量はＡおよびＢよ
りも少ない。
前述したナナオマイシンＡおよびＢの回収法において、
１０１０重炭酸ソーダでナナオマイシンＡおよびＢを酢
酸エチル層から抽出する際、ナナオマイ１シンＣは中性
なので酢酸エチル層に残存する。これを濃縮乾固すると
ナナオマイシンＣの粗粉末が得られる。これをクロロホ
ルム−メタノール（５０：１容量／容量）を用いたシリ
カゲルカラムクロマトグラフイ一で処理する。ナナオマ
イシンＣを含む区分を濃縮乾固して得た粗粉末を酢酸エ
チルで抽出し、さらに酢酸エチルから再結晶するとナナ
オマイシンＣの橙黄色結晶が得られる。（ロ）アセチル
ナナオマイシンＡ ナナオマイシンＡを無水酢酸とビリジンを含む溶液中に
静置し、塩酸を含む氷水に加えクロロホルムで抽出した
後、水洗乾固する。
１０１０重炭酸ソーダでナナオマイシンＡおよびＢを酢
酸エチル層から抽出する際、ナナオマイ１シンＣは中性
なので酢酸エチル層に残存する。これを濃縮乾固すると
ナナオマイシンＣの粗粉末が得られる。これをクロロホ
ルム−メタノール（５０：１容量／容量）を用いたシリ
カゲルカラムクロマトグラフイ一で処理する。ナナオマ
イシンＣを含む区分を濃縮乾固して得た粗粉末を酢酸エ
チルで抽出し、さらに酢酸エチルから再結晶するとナナ
オマイシンＣの橙黄色結晶が得られる。（ロ）アセチル
ナナオマイシンＡ ナナオマイシンＡを無水酢酸とビリジンを含む溶液中に
静置し、塩酸を含む氷水に加えクロロホルムで抽出した
後、水洗乾固する。
固形物をベンゼンから再結晶するとアセチルナナオマイ
シンＡの淡黄色針状結晶が得られる。（ハ）ナナオマイ
シンＡメチルエステル ナナオマイシンＡをエーテルに溶解し、ジアゾメタンの
エーテル溶液で処理する。
シンＡの淡黄色針状結晶が得られる。（ハ）ナナオマイ
シンＡメチルエステル ナナオマイシンＡをエーテルに溶解し、ジアゾメタンの
エーテル溶液で処理する。
溶剤を除いた後クロロホルム−メタノールを用いたシリ
カゲルカラムクロマトグラフイ一により、橙黄色のナナ
オマイシンＡメチルエステルが得られる。本発明による
ナナオマイシンＡ誘導体の試験方法は、たとえば前述の
ナナオマイシンＡの試験方法と同様に行なうことができ
る。
カゲルカラムクロマトグラフイ一により、橙黄色のナナ
オマイシンＡメチルエステルが得られる。本発明による
ナナオマイシンＡ誘導体の試験方法は、たとえば前述の
ナナオマイシンＡの試験方法と同様に行なうことができ
る。
実施例 １
ナナオマイシン生産菌ストレプトミセス・ローザ・バリ
アントノトエンシス（ＦＥＲＭＰ２２Ｏ９）の１白金耳
を斜面培地から種培地（ＰＨ７．Ｏ）に接種し、２７℃
、２日間培養した。
アントノトエンシス（ＦＥＲＭＰ２２Ｏ９）の１白金耳
を斜面培地から種培地（ＰＨ７．Ｏ）に接種し、２７℃
、２日間培養した。
３０１シャーに入れた培地（２０１）に種（１％）を植
え、２７℃で４日間通気（１０１／分）攪拌（３００ｒ
ｐｍ）培養した。
え、２７℃で４日間通気（１０１／分）攪拌（３００ｒ
ｐｍ）培養した。
これらの培地は共にグリセリン（２０ｋ））、大豆粉（
２０１０）、食塩（０．３０ｋ））を含み、ＰＨ７．Ｏ
に調整され、使用前に１２０℃で１５分滅菌された。培
翼後の培地のＰＨは４．８で、プロスの上澄にマイコプ
ラズマ・ガリセプチクムに対する阻止帯（径３０ｍｍ）
が生じた。プロス（２０１）を遠心分離して菌体を除い
た後、６Ｎ塩酸で濾液をＰＨ２．Ｏに調整し、酢酸ブチ
ル（４１）で抽出した。酢酸ブチル層を１％重炭酸ソー
ダ水溶液（８００ｗＬ１）で抽出した。水層を６Ｎ塩酸
でＰＨ２．Ｏにした後、酢酸エチルで抽出し、酢酸エチ
ル層を濃縮し、石油エーテルを加え、ナナオマイシンＡ
およびＢを含む黄褐色粉末（１．０９９）を得た。これ
らを次のように精製した。粗粉末を酢酸エチル（１５ｍ
１）に溶解し、シリカゲル（４９）を加え、減圧下に濃
縮乾固した。
２０１０）、食塩（０．３０ｋ））を含み、ＰＨ７．Ｏ
に調整され、使用前に１２０℃で１５分滅菌された。培
翼後の培地のＰＨは４．８で、プロスの上澄にマイコプ
ラズマ・ガリセプチクムに対する阻止帯（径３０ｍｍ）
が生じた。プロス（２０１）を遠心分離して菌体を除い
た後、６Ｎ塩酸で濾液をＰＨ２．Ｏに調整し、酢酸ブチ
ル（４１）で抽出した。酢酸ブチル層を１％重炭酸ソー
ダ水溶液（８００ｗＬ１）で抽出した。水層を６Ｎ塩酸
でＰＨ２．Ｏにした後、酢酸エチルで抽出し、酢酸エチ
ル層を濃縮し、石油エーテルを加え、ナナオマイシンＡ
およびＢを含む黄褐色粉末（１．０９９）を得た。これ
らを次のように精製した。粗粉末を酢酸エチル（１５ｍ
１）に溶解し、シリカゲル（４９）を加え、減圧下に濃
縮乾固した。
乾燥したものをシリカゲルカラム（５５９）の上層部に
のせた後、ベンゼン一酢酸エチル（４：１容量／容量）
を用いて展開した。溶出液を各区分（１５ｍ０に分け、
前述したとおり、検定菌としてマイコプラズマ・ガリセ
プチクムを用いたペーパーデイスク法で試，験した。第
１活性区分（８から２２番）はナナオマイシンＡを含み
、１４番目が検定菌に対して最大の活性を示した。３０
番以下の区分はベンゼン一酢酸エチル（３：１容量／容
量）で展開した。
のせた後、ベンゼン一酢酸エチル（４：１容量／容量）
を用いて展開した。溶出液を各区分（１５ｍ０に分け、
前述したとおり、検定菌としてマイコプラズマ・ガリセ
プチクムを用いたペーパーデイスク法で試，験した。第
１活性区分（８から２２番）はナナオマイシンＡを含み
、１４番目が検定菌に対して最大の活性を示した。３０
番以下の区分はベンゼン一酢酸エチル（３：１容量／容
量）で展開した。
分けられた区分３２から６０番まではナナオマイシンＢ
を含み、４６番が検定菌に対して最大の活性を示した。
８番から２２番までの区分を合わせて、減圧下に濃縮乾
固した。
を含み、４６番が検定菌に対して最大の活性を示した。
８番から２２番までの区分を合わせて、減圧下に濃縮乾
固した。
固形物をエタノールに溶解し、少量の水を加えたところ
黄色の針状結晶（３１．７η）が得られた。これを水性
エタノールから前記の手法で再結晶し、精製されたナナ
オマイシンＡ（２５．３η）を得た。純度９９％以上。
融点１７８−１８０′ＣＯ紫外線吸収スペクトルλＭｅ
ＯＨｎｍ；２５０２７４および４２３０ｍａｘ赤外線吸
収スペクトル（ＫＢｒ法） １７２５１６４０および１６１０ＣＴ！ｌ−１ツに特徴
的な強い吸収を示した。
黄色の針状結晶（３１．７η）が得られた。これを水性
エタノールから前記の手法で再結晶し、精製されたナナ
オマイシンＡ（２５．３η）を得た。純度９９％以上。
融点１７８−１８０′ＣＯ紫外線吸収スペクトルλＭｅ
ＯＨｎｍ；２５０２７４および４２３０ｍａｘ赤外線吸
収スペクトル（ＫＢｒ法） １７２５１６４０および１６１０ＣＴ！ｌ−１ツに特徴
的な強い吸収を示した。
区分の第２部（３２から６０番）を合わせ、減圧下に濃
縮乾固し、淡黄色粉末（４５０Ｔ１Ｚ９）を得た。
縮乾固し、淡黄色粉末（４５０Ｔ１Ｚ９）を得た。
これを前記と同様のシリカゲルカラムクロマトグラフイ
一によつて精製ナナオマイシンＢ（２７０Ｔ！１９）を
得た。純度９９０１００融点８４−８６℃ｏ 紫外線吸収スペクトル λＭｅＯＨｎｍ；２３１および３５２０ ｍａｘ 赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ法） １７０５１６４８および１６０５ＣＴｒＬ−１に特徴的
な強い吸収を示した。
一によつて精製ナナオマイシンＢ（２７０Ｔ！１９）を
得た。純度９９０１００融点８４−８６℃ｏ 紫外線吸収スペクトル λＭｅＯＨｎｍ；２３１および３５２０ ｍａｘ 赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ法） １７０５１６４８および１６０５ＣＴｒＬ−１に特徴的
な強い吸収を示した。
上記のとおり１％重炭酸ソーダ液で抽出した場合、ナナ
オマイシンＣは中性なので酢酸ブチル層に残つた。
オマイシンＣは中性なので酢酸ブチル層に残つた。
これを濃縮乾固し、ナナオマイシンＣの粗粉末（１．３
ｇ）を得た。粗粉末をシリカゲル（４０ｇ）とクロロホ
ルム−メタノール（５０：１容量／容量）とを用いるカ
ラムクロマトグラフイ一で処理し、得られた区分（各１
５ｍ０を前述のペーパーデイスク法で試験した。全部で
５８個の区分のうち５１から６３番までの区分がナナオ
マイシンＣを含み、５５番目の区分が検定菌に対して最
大の活性を示した。ナナオマイシンＣを含む区分を合わ
せて濃縮乾固し、固形物（５２η）を得た。これを酢酸
エチルで抽出し、さらに酢酸エチルから再結晶してナナ
オマイシンＣの橙黄色針状結晶を得た（３５η）。純度
９９０／００融点２２２−２２４℃ｏ紫外線吸収スペク
トル λＭｅＯＨｎｍ（ε）：２４８（１０１００），ＭａＸ
２７４（１２４００），４２４（４６１０）。
ｇ）を得た。粗粉末をシリカゲル（４０ｇ）とクロロホ
ルム−メタノール（５０：１容量／容量）とを用いるカ
ラムクロマトグラフイ一で処理し、得られた区分（各１
５ｍ０を前述のペーパーデイスク法で試験した。全部で
５８個の区分のうち５１から６３番までの区分がナナオ
マイシンＣを含み、５５番目の区分が検定菌に対して最
大の活性を示した。ナナオマイシンＣを含む区分を合わ
せて濃縮乾固し、固形物（５２η）を得た。これを酢酸
エチルで抽出し、さらに酢酸エチルから再結晶してナナ
オマイシンＣの橙黄色針状結晶を得た（３５η）。純度
９９０／００融点２２２−２２４℃ｏ紫外線吸収スペク
トル λＭｅＯＨｎｍ（ε）：２４８（１０１００），ＭａＸ
２７４（１２４００），４２４（４６１０）。
赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ法）１６４５および１６
０５ｃｍ−１に特徴的な吸収を示した。
０５ｃｍ−１に特徴的な吸収を示した。
実施例 ２
実施例１と回様の方法によつて得た醗酵プロスを遠心分
離して固形物を得た。
離して固形物を得た。
これに酢酸エチル（５１）を攪拌下に加えた。こうして
得られた抽出液に１０１０重炭酸ソーダ液（２１）を加
えたところ、ナナオマイシンＡ，Ｂを含む成分は水相に
移動した。塩酸で水相をＰＨ２．Ｏに調整し、酢酸エチ
ル（５００ｍ０で抽出し、抽出液を減圧下に濃縮乾固し
、黄褐色の粗粉末（５２１η）を得た。この粗粉末を実
施例１と同様の方法でシリカゲルカラムクロマトグラフ
イ一で処理して、ナナオマイシンＡ，Ｂを得た。１％重
炭酸ソーダ液で抽出すると、ナナオマイシンＣは酢酸エ
チル相に残つた。
得られた抽出液に１０１０重炭酸ソーダ液（２１）を加
えたところ、ナナオマイシンＡ，Ｂを含む成分は水相に
移動した。塩酸で水相をＰＨ２．Ｏに調整し、酢酸エチ
ル（５００ｍ０で抽出し、抽出液を減圧下に濃縮乾固し
、黄褐色の粗粉末（５２１η）を得た。この粗粉末を実
施例１と同様の方法でシリカゲルカラムクロマトグラフ
イ一で処理して、ナナオマイシンＡ，Ｂを得た。１％重
炭酸ソーダ液で抽出すると、ナナオマイシンＣは酢酸エ
チル相に残つた。
これを減圧下に濃縮乾固し、ナナオマイシンＣの粗粉末
（６８５Ｔｎ９）を得た。この粗粉末を実施例１と同様
の方法により処理して得た固形物（２８．３η）からナ
ナオマイシンＣを得た。実施例 ３ 実施例１と同様の方法によつて得たナナオマイシンＡ（
２００η）を無水酢酸（２ｍ０とピリジン（４ｍ０を含
む溶液中に室温で１６時間放置した後、塩酸（１００Ａ
））を含む氷水に加え、クロロホルム（３０ｍ０で抽出
し、水洗後、減圧下に濃縮乾固した。
（６８５Ｔｎ９）を得た。この粗粉末を実施例１と同様
の方法により処理して得た固形物（２８．３η）からナ
ナオマイシンＣを得た。実施例 ３ 実施例１と同様の方法によつて得たナナオマイシンＡ（
２００η）を無水酢酸（２ｍ０とピリジン（４ｍ０を含
む溶液中に室温で１６時間放置した後、塩酸（１００Ａ
））を含む氷水に加え、クロロホルム（３０ｍ０で抽出
し、水洗後、減圧下に濃縮乾固した。
固形物をベンゼンから再結晶し、アセチルナナオマイシ
ンＡの淡黄色針状結晶（１４５η）を得た。純度９９％
以上。
ンＡの淡黄色針状結晶（１４５η）を得た。純度９９％
以上。
融点１９０−１９２℃。紫外線吸収スペクトル
λＭｅＯＨｎｍ（ε）：２３５（２０７００），Ｍａｘ
２６５（１２１００），２７０（１２３００）および３
４２（３７５０）。
２６５（１２１００），２７０（１２３００）および３
４２（３７５０）。
赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ法）
１７６５１７００１６７０ｃｒｒＬ−１に特徴的な強い
吸収を示した。
吸収を示した。
実施例 ４
実施例１と同様の方法により得たナナオマイシンＡ（２
００η）をエーテル（３０ｍ０に溶解し、過剰のジアメ
ゾメタンのエーテル溶液を加え室温に１時間放置した後
、減圧下に溶剤を除去し、シリカゲル（６９）とクロロ
ホルム−メタノール（１００：１容量／容量）とを用い
たカラムクロマトグラフイ一で処理し、各区分（５ｍ０
を上述のペーパーデイスク法で試験した。
００η）をエーテル（３０ｍ０に溶解し、過剰のジアメ
ゾメタンのエーテル溶液を加え室温に１時間放置した後
、減圧下に溶剤を除去し、シリカゲル（６９）とクロロ
ホルム−メタノール（１００：１容量／容量）とを用い
たカラムクロマトグラフイ一で処理し、各区分（５ｍ０
を上述のペーパーデイスク法で試験した。
ナナオマイシンＡメチルエステルを含む区分（５番から
９番）のうち６番目が検定菌に対して最大の活性を示し
た。ナナオマイシンＡメチルエステルを含む区分を濃縮
乾固し、橙黄色粉末（３４η）を得た。純度９７％以上
。融点９９−１０２℃ｏ紫外線吸収スペクトル λＭＯＯＨｎｍ（ε）：２４８（１２４００），ＭａＸ
２７４（１５１００），４２４（５６５０）。
９番）のうち６番目が検定菌に対して最大の活性を示し
た。ナナオマイシンＡメチルエステルを含む区分を濃縮
乾固し、橙黄色粉末（３４η）を得た。純度９７％以上
。融点９９−１０２℃ｏ紫外線吸収スペクトル λＭＯＯＨｎｍ（ε）：２４８（１２４００），ＭａＸ
２７４（１５１００），４２４（５６５０）。
赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ法）１７３０，１６４５
，１６１５？−１に特徴的な吸収を示した。
，１６１５？−１に特徴的な吸収を示した。
第１図はナナオマイシンＡの紫外線吸収スペクトル、第
２図はナナオマイシンＡの赤外線吸収スベクトル、第３
図はナナオマイシンＢの紫外線吸収スペクトル、第４図
はナナオマイシンＢの赤外線吸収スペクトル、第５図は
（１）ナナオマイシンＡ、（）カラフンジン、（ｌ）デ
オキシフレノリシンの０ＲＤ曲線、第６図はナナオマイ
シンＣの紫外線吸収スペクトル、第７図はナナオマイシ
ンＣの赤外線吸収スペクトル、第８図はナナオマイシン
Ｃの核磁気共鳴スペクトル、第９図はアセチルナナオマ
イシンＡの紫外線吸収スペクトル、第１０図はアセチル
ナナオマイシンＡの赤外線吸収スペクトル、第１１図は
ナナオマイシンＡメチルエステルの紫外線吸収スペクト
ル、第１２図はナナオマイシンＡメチルエステルの赤外
線吸収スペクトルである。
２図はナナオマイシンＡの赤外線吸収スベクトル、第３
図はナナオマイシンＢの紫外線吸収スペクトル、第４図
はナナオマイシンＢの赤外線吸収スペクトル、第５図は
（１）ナナオマイシンＡ、（）カラフンジン、（ｌ）デ
オキシフレノリシンの０ＲＤ曲線、第６図はナナオマイ
シンＣの紫外線吸収スペクトル、第７図はナナオマイシ
ンＣの赤外線吸収スペクトル、第８図はナナオマイシン
Ｃの核磁気共鳴スペクトル、第９図はアセチルナナオマ
イシンＡの紫外線吸収スペクトル、第１０図はアセチル
ナナオマイシンＡの赤外線吸収スペクトル、第１１図は
ナナオマイシンＡメチルエステルの紫外線吸収スペクト
ル、第１２図はナナオマイシンＡメチルエステルの赤外
線吸収スペクトルである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 次の一般式で示される抗生物質ナナオマイシンＡの
誘導体。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）式中（イ）
Ｒ＝Ｈ、Ｒ′＝ＮＨ＿２または（ロ）Ｒ＝ＣＯＣＨ＿３
、Ｒ′＝ＯＨまたは（ハ）Ｒ＝Ｈ、Ｒ′＝ＯＣＨ＿３２
ストレプトミセス属に属しかつナナオマイシンＣ生産
能を有する微生物を培地に好気的に培養し、培地中およ
び菌体中にナナオマイシンＣを蓄積させ、これを回収す
ることを特徴とする、次式▲数式、化学式、表等があり
ます▼で示されるナナオマイシンＣの製造方法。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP51049224A JPS5934358B2 (ja) | 1976-04-28 | 1976-04-28 | 抗生物質ナナオマイシンａの誘導体 |
| AU15196/76A AU507234B2 (en) | 1976-04-15 | 1976-06-23 | Nanomycin antibiotic compounds |
| US05/858,215 US4196266A (en) | 1976-04-28 | 1977-12-07 | Production of nanaomycin A and derivatives thereof |
| US06/047,451 US4324728A (en) | 1976-04-28 | 1979-06-11 | Compound nanaomycin A and derivatives thereof and a process for producing the same |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP51049224A JPS5934358B2 (ja) | 1976-04-28 | 1976-04-28 | 抗生物質ナナオマイシンａの誘導体 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS52133986A JPS52133986A (en) | 1977-11-09 |
| JPS5934358B2 true JPS5934358B2 (ja) | 1984-08-22 |
Family
ID=12824947
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP51049224A Expired JPS5934358B2 (ja) | 1976-04-15 | 1976-04-28 | 抗生物質ナナオマイシンａの誘導体 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4324728A (ja) |
| JP (1) | JPS5934358B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5602171A (en) * | 1995-06-07 | 1997-02-11 | Sugen Inc. | Methods of inhibiting phosphatase activity and treatment of disorders associated therewith using naphthopyrones and derivatives thereof |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3452051A (en) * | 1967-09-01 | 1969-06-24 | American Cyanamid Co | Deoxyfrenolicins |
| US3632607A (en) * | 1968-07-10 | 1972-01-04 | Upjohn Co | Process for purifying kalafungin |
| JPS5124595B2 (ja) * | 1973-09-11 | 1976-07-24 |
-
1976
- 1976-04-28 JP JP51049224A patent/JPS5934358B2/ja not_active Expired
-
1979
- 1979-06-11 US US06/047,451 patent/US4324728A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US4324728A (en) | 1982-04-13 |
| JPS52133986A (en) | 1977-11-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPS608117B2 (ja) | 新生理活性物質エステラスチンおよびその製造法 | |
| JPS6310953B2 (ja) | ||
| DK146342B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af anthracyclinglycosidantibiotika betegnet ma 144-m1 og ma 144-m2 eller ikke toksiske syreadditionssalte eller komplekser deraf med desoxyribonucleinsyre | |
| JPS5934358B2 (ja) | 抗生物質ナナオマイシンａの誘導体 | |
| JPH03141290A (ja) | 抗腫瘍抗生物質ｂｍｙ―４１３３９ | |
| JPS6158593A (ja) | 新規サフラマイシンａ誘導体およびその製造法 | |
| US4091093A (en) | Protease inhibitors | |
| JPH0367077B2 (ja) | ||
| JP4730879B2 (ja) | キガマイシノン類及びその製造方法、並びに、該キガマイシノン類を含む薬用組成物 | |
| JP2546239B2 (ja) | 新規物質オバリシン | |
| JPS59148795A (ja) | アントラサイクリン化合物、その製造法およびその用途 | |
| JPS60218396A (ja) | 抗生物質ｄｏ−２４８−ａおよびｂならびにその製造法 | |
| JPS5811838B2 (ja) | シンコウセイブツシツ ｂｎ−１６５ ブツシツノ セイゾウホウ | |
| JP2594085B2 (ja) | 新規抗腫瘍抗生物質ｓｆ２５７５物質ならびにその製造法 | |
| JPS6025999A (ja) | アンスラサイクリン化合物ａｇ−２およびその用途 | |
| JPS6253518B2 (ja) | ||
| JPH02221292A (ja) | 新規物質０２―３、その使用および製造 | |
| JPS63203676A (ja) | 新規物質ｋｒ２８２７ | |
| JPS6236371A (ja) | 新規抗菌性物質およびその製法 | |
| JPS623789A (ja) | 抗生物質トキマイシンａおよびその製造法 | |
| JPS62138196A (ja) | アンスラサイクリン化合物およびその製造法 | |
| JPS61167679A (ja) | 新規物質ａ３２ | |
| JPS5970697A (ja) | アンスラサイクリン化合物、その製造法およびその用途 | |
| JPS5819679B2 (ja) | 新規抗生物質及びその製法 | |
| JPH01290673A (ja) | 新規物質ｋ３５４３ｒ１、その使用および製造 |