JPS5819679B2 - 新規抗生物質及びその製法 - Google Patents
新規抗生物質及びその製法Info
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- JPS5819679B2 JPS5819679B2 JP52133051A JP13305177A JPS5819679B2 JP S5819679 B2 JPS5819679 B2 JP S5819679B2 JP 52133051 A JP52133051 A JP 52133051A JP 13305177 A JP13305177 A JP 13305177A JP S5819679 B2 JPS5819679 B2 JP S5819679B2
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/22—Cyclohexane rings, substituted by nitrogen atoms
- C07H15/222—Cyclohexane rings substituted by at least two nitrogen atoms
- C07H15/224—Cyclohexane rings substituted by at least two nitrogen atoms with only one saccharide radical directly attached to the cyclohexyl radical, e.g. destomycin, fortimicin, neamine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
- C12P19/46—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen atom of the saccharide radical bound to a cyclohexyl radical, e.g. kasugamycin
- C12P19/48—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen atom of the saccharide radical bound to a cyclohexyl radical, e.g. kasugamycin the cyclohexyl radical being substituted by two or more nitrogen atoms, e.g. destomycin, neamin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
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- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、新規抗生物質及びその製法に関する３本発明
者らは先に、土壌から分離されたＫＣ−６６０６株がダ
ラム陽性菌、ダラム陰性菌及び抗酸菌に対して抗菌力を
示す新規抗生物質を生産することを見い出し、その培養
液より抗生物質ＫＡ−６６０６Ｉ及びＫＡ６６０６ＩＩ
を単離した（特公昭５７−８１１６号公報参照）。
者らは先に、土壌から分離されたＫＣ−６６０６株がダ
ラム陽性菌、ダラム陰性菌及び抗酸菌に対して抗菌力を
示す新規抗生物質を生産することを見い出し、その培養
液より抗生物質ＫＡ−６６０６Ｉ及びＫＡ６６０６ＩＩ
を単離した（特公昭５７−８１１６号公報参照）。
本発明者らは更に研究を重ねた結果、上記ＫＣ−６６０
６株の培養ｒ液中に、上記２種の抗生物質の他に更に２
種の抗生物質の存在を見い出し、これらの物質を単離す
ることに成功した。
６株の培養ｒ液中に、上記２種の抗生物質の他に更に２
種の抗生物質の存在を見い出し、これらの物質を単離す
ることに成功した。
本発明の抗生物質はその物理化学的性質及び生物学的性
質が既知物質のそれと異なることから新規物質であるこ
とが認められ、それぞれＫＡ−６６０６■物質及びＫＡ
−６６０６ＩＶ物質と命名された。
質が既知物質のそれと異なることから新規物質であるこ
とが認められ、それぞれＫＡ−６６０６■物質及びＫＡ
−６６０６ＩＶ物質と命名された。
ＫＡＩ−６６０６物質は、末端にグリシル基を有し、分
子式Ｃ１７Ｈ３５ｏ５Ｎ５で示されるアミノ配糖体（Ｋ
Ａ−６６０６１物質）及び分子式 Ｃ１５Ｈ３２ｏ４Ｎ４で示される脱グリシル体（ＫＡ−
６６０６■物質）のほかに、末端にカルバモイルグリシ
ル基を有し、分子式Ｃ１８Ｈ３６ｏ６Ｎ６で示されるア
ミノ配糖体（ＫＡ −６６０６１１Ｉ物質）及び末端に
ホルミルグリシル基を有し、分子式Ｃｌ８Ｈ３５０６Ｎ
５で示されるアミノ配糖体（ＫＡ−６６０６ＩＶ物質）
からなる混合物として生産されることを見い出した。
子式Ｃ１７Ｈ３５ｏ５Ｎ５で示されるアミノ配糖体（Ｋ
Ａ−６６０６１物質）及び分子式 Ｃ１５Ｈ３２ｏ４Ｎ４で示される脱グリシル体（ＫＡ−
６６０６■物質）のほかに、末端にカルバモイルグリシ
ル基を有し、分子式Ｃ１８Ｈ３６ｏ６Ｎ６で示されるア
ミノ配糖体（ＫＡ −６６０６１１Ｉ物質）及び末端に
ホルミルグリシル基を有し、分子式Ｃｌ８Ｈ３５０６Ｎ
５で示されるアミノ配糖体（ＫＡ−６６０６ＩＶ物質）
からなる混合物として生産されることを見い出した。
これらの化合物は次の一般式にまとめることができる。
この式中Ｒ′はグリシル基（１）、水素原子（ＩＩ）、
カルバモイルグリシル基（ホ）又はホルミルグリシル基
Ｗを示す。
カルバモイルグリシル基（ホ）又はホルミルグリシル基
Ｗを示す。
本発明に使用される菌は、ＫＣ−６６０６株（微工研菌
寄第３９１２号）ならびにその変異株で、その菌学的性
質は先の出願である特願昭５２−３１５８０号明細書に
詳記されている。
寄第３９１２号）ならびにその変異株で、その菌学的性
質は先の出願である特願昭５２−３１５８０号明細書に
詳記されている。
ＫＣ−６６０６株は該明細書で説明したように、炭素源
の資化性においてはサツカロポリスポラ・ヒルスタと相
違するが、形態学的性質、各種培地上の性質、生理的性
質等の基本性状がよ（一致したことから、サツカロポリ
スポラ・ヒルスタの自然変異株と考えられ、サツカロポ
リスポラ・ヒルスタ・ＫＣ−６６０６株と命名された。
の資化性においてはサツカロポリスポラ・ヒルスタと相
違するが、形態学的性質、各種培地上の性質、生理的性
質等の基本性状がよ（一致したことから、サツカロポリ
スポラ・ヒルスタの自然変異株と考えられ、サツカロポ
リスポラ・ヒルスタ・ＫＣ−６６０６株と命名された。
本発明で用いるサツカロポリスポラ・ヒルスタに属する
菌株は、その性状が変化しやすく、例えば紫外線、エッ
クス線、薬品などを用いる人工変異手段で容易に変異し
得るものであり、このような変異株であっても抗生物質
ＫＡ−６６０６の生産能を有するものはすべて本発明に
使用することができる。
菌株は、その性状が変化しやすく、例えば紫外線、エッ
クス線、薬品などを用いる人工変異手段で容易に変異し
得るものであり、このような変異株であっても抗生物質
ＫＡ−６６０６の生産能を有するものはすべて本発明に
使用することができる。
なおサツカロポリスポラ・ヒルスタに属する菌株が抗生
物質を生産することは文献に報告されていない。
物質を生産することは文献に報告されていない。
本菌株の培養には通常の放線菌の培養方法が用いられる
。
。
培養基の炭素源としては種々のものが用いられるが、殿
粉、ブドウ糖、グリセリン、マルトース、デキストリン
、蔗糖、果糖、糖蜜などを単独で又は組み合わせて用い
ることが好ましい。
粉、ブドウ糖、グリセリン、マルトース、デキストリン
、蔗糖、果糖、糖蜜などを単独で又は組み合わせて用い
ることが好ましい。
さらに菌の資化性によっては炭化水素、有機酸、植物油
なども用いられる。
なども用いられる。
窒素源としては大豆粉、酵母エキス、乾燥酵母、ペプト
ン、肉エキス、コーンステイープリカー、カザミノ酸、
デイステイラーズソリュブル、塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム、尿素、硝酸ナトリウムなどが単独で又は
組み合わせて用いられる。
ン、肉エキス、コーンステイープリカー、カザミノ酸、
デイステイラーズソリュブル、塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム、尿素、硝酸ナトリウムなどが単独で又は
組み合わせて用いられる。
その他必要に応じ、食塩、燐酸カリウム、硫酸マグネシ
ウム、塩化カルシウム、炭酸カルシウム、水酸化カルシ
ウム、塩化コバルト、硫酸亜鉛、塩化鉄、硫酸鉄などの
無機塩、並びに微量の重金属を添加することができる。
ウム、塩化カルシウム、炭酸カルシウム、水酸化カルシ
ウム、塩化コバルト、硫酸亜鉛、塩化鉄、硫酸鉄などの
無機塩、並びに微量の重金属を添加することができる。
更に菌の発育を助け、ＫＡ −６６０６物質の生産を促
進する有機及び無機物質を適宜に添加することができる
。
進する有機及び無機物質を適宜に添加することができる
。
通気培養法を用いる場合には、更に脂肪油、シリコーン
油、パラフィンなどの消泡剤が用いられる。
油、パラフィンなどの消泡剤が用いられる。
培養方法としては、固体培地上での培養も可能であるが
、一般抗生物質生産の方法と同様に液体培養法、特に深
部培養法を用いることが好ましい。
、一般抗生物質生産の方法と同様に液体培養法、特に深
部培養法を用いることが好ましい。
培養は好気的条件下で行なわれ、培養温度は２０〜３５
℃で、２７℃付近が好ましい。
℃で、２７℃付近が好ましい。
ＫＡ−６６０６物質の生産は、振盪培養又はりンク培養
のいずれの場合も２〜６日間培養を行なうと、活性物質
が培養液中の生産蓄積される。
のいずれの場合も２〜６日間培養を行なうと、活性物質
が培養液中の生産蓄積される。
培養液中の生産量が最大に達した時点で培養を停止し、
培養液中より目的の抗生物質を単離精製する培養Ｆ液か
ら本物質を単離精製するには、ＫＡ−６６０６物質が水
に可溶で一般の有機溶媒に難溶の水溶性塩基性物質であ
るため、通常の水溶性塩基性抗生物質の単離、精製法を
利用することができる。
培養液中より目的の抗生物質を単離精製する培養Ｆ液か
ら本物質を単離精製するには、ＫＡ−６６０６物質が水
に可溶で一般の有機溶媒に難溶の水溶性塩基性物質であ
るため、通常の水溶性塩基性抗生物質の単離、精製法を
利用することができる。
イオン交換樹脂、活性炭、セルロース、シリカゲル、ア
ルミナ等によるクロマトグラフィー、補助剤として高級
脂肪酸を加えブタノール、アミルアルコール等で抽出す
る方法などを適宜に組み合わせて用いることができる。
ルミナ等によるクロマトグラフィー、補助剤として高級
脂肪酸を加えブタノール、アミルアルコール等で抽出す
る方法などを適宜に組み合わせて用いることができる。
培養涙液を弱酸性陽イオン交換樹脂の層に通すと、ＫＡ
−６６０６物質が吸着されろ。
−６６０６物質が吸着されろ。
これを０．１〜３０規定のアルカリ、又は酸、又は各種
塩溶液で溶出し、活性成分を凍結乾燥すると、ＫＡ−６
６０６物質の粗粉末が得られる。
塩溶液で溶出し、活性成分を凍結乾燥すると、ＫＡ−６
６０６物質の粗粉末が得られる。
このとき用いられる弱酸性陽イオン交換樹脂としては、
アンバーライトＩＲＣ〜５０、Ｊ ＲＣ−８４又はＣＧ
−５０（ｏ−ム・アンド・ハース社製）、タイヤイオン
ＷＫ−１０又はＷＫ−２０（三菱化成社製などがあげら
れる。
アンバーライトＩＲＣ〜５０、Ｊ ＲＣ−８４又はＣＧ
−５０（ｏ−ム・アンド・ハース社製）、タイヤイオン
ＷＫ−１０又はＷＫ−２０（三菱化成社製などがあげら
れる。
またアルカリとしてはアンモニア水、水酸化ナトリウム
水溶液などが、酸としては蟻酸、塩酸、硫酸などが、塩
溶液としては炭酸アンモニウム溶液、蟻酸アンモニウム
溶液などがあげられる。
水溶液などが、酸としては蟻酸、塩酸、硫酸などが、塩
溶液としては炭酸アンモニウム溶液、蟻酸アンモニウム
溶液などがあげられる。
培養涙液をｐＨ７〜９に調整し、目的物質を活性炭に吸
着させ、酸性の水又は塩酸−メタノールで溶出させる方
法も利用できる。
着させ、酸性の水又は塩酸−メタノールで溶出させる方
法も利用できる。
こうして得られる粗粉末は、弱酸性陽イオン交換樹脂、
ＣＭ−セファデックス、ＣＭ−セルロースなどに吸着さ
せ、アルカリ性水溶液、例えばアンモニア水、炭酸アン
モニウム、蟻酸アンモニウムの水溶液などを用い、濃度
匂配法又は濃度段階法で溶出することにより、数種の微
量成分が溶出されたのちに、遊離塩基としてＫＡ−６６
０６ＩＶ物質、次いで同■物質が溶出され、更に溶出を
続けると同Ｉ物質及び同■物質が順次溶出され、各成分
に分離することができる。
ＣＭ−セファデックス、ＣＭ−セルロースなどに吸着さ
せ、アルカリ性水溶液、例えばアンモニア水、炭酸アン
モニウム、蟻酸アンモニウムの水溶液などを用い、濃度
匂配法又は濃度段階法で溶出することにより、数種の微
量成分が溶出されたのちに、遊離塩基としてＫＡ−６６
０６ＩＶ物質、次いで同■物質が溶出され、更に溶出を
続けると同Ｉ物質及び同■物質が順次溶出され、各成分
に分離することができる。
こうして得られる各成分は、それぞれセルロース、シリ
カゲルなどのクロマトグラフィー、セファデックス例え
ばＬＨ２０を用いるクロマトグラフィーなどを適宜に組
合わせて精製することができる。
カゲルなどのクロマトグラフィー、セファデックス例え
ばＬＨ２０を用いるクロマトグラフィーなどを適宜に組
合わせて精製することができる。
例えばシリカゲル力ラムクロマトグラフィーヲ用い、ク
ロロホルム−メタノール−１７％アンモニア水（ｉ：８
：３）で展開することにより精製できる。
ロロホルム−メタノール−１７％アンモニア水（ｉ：８
：３）で展開することにより精製できる。
こうして得られる遊離塩基（■及び■）は更に強塩基性
陰イオン交換樹脂、例えばダウエックス１Ｘ２（ダウケ
ミカル社製）のカラムに吸着させ、次いで例えば水で溶
出し、活性区分を集めて凍結乾燥することにより、それ
ぞれ純品の遊離塩基（■及び■）を得ることができる。
陰イオン交換樹脂、例えばダウエックス１Ｘ２（ダウケ
ミカル社製）のカラムに吸着させ、次いで例えば水で溶
出し、活性区分を集めて凍結乾燥することにより、それ
ぞれ純品の遊離塩基（■及び■）を得ることができる。
これらの遊離塩基はそれぞれ無機酸例えば塩酸、硫酸、
臭化水素酸又は有機酸例えば酢酸、修酸などを加え、常
法により対応する酸付加塩に導（ことができる。
臭化水素酸又は有機酸例えば酢酸、修酸などを加え、常
法により対応する酸付加塩に導（ことができる。
ＫＡ−６６０６ＩＩＩ物質及び同■物質は、それぞれ末
端にカルバモイルグリシル基及びホルミルグリシル基を
有しており、これらの物質をアルカリ又は酸で分解する
ことにより、先に本発明者らが分離した末端からこれら
の基が除去されている構造を有するＫＡ−６６０６ｍ物
質を製造することができる。
端にカルバモイルグリシル基及びホルミルグリシル基を
有しており、これらの物質をアルカリ又は酸で分解する
ことにより、先に本発明者らが分離した末端からこれら
の基が除去されている構造を有するＫＡ−６６０６ｍ物
質を製造することができる。
すなわちＫＡ−６６０６ｍ物質又は同■物質に、アルカ
リ試薬例えば水酸化ナトリウム、水酸化バリウムなどの
０．１〜４．０規定水溶液あるいは酸性試薬例えば塩酸
、硫酸などの０．１〜１．０規定水溶液を作用させるこ
とによりＫＡ−６６０６■物質に変換することができる
。
リ試薬例えば水酸化ナトリウム、水酸化バリウムなどの
０．１〜４．０規定水溶液あるいは酸性試薬例えば塩酸
、硫酸などの０．１〜１．０規定水溶液を作用させるこ
とによりＫＡ−６６０６■物質に変換することができる
。
この際アルカリ試薬には強塩基性陰イオン交換樹脂例え
ばアンバーライトＩＲＡ４００（ＯＨ−型）、ダウエッ
クスｌＸ２（ＯＨ−型）、などを、酸性試薬には強酸性
陽イオン交換樹脂例えばアンバーライ）ＩＲ＋ １２０（Ｈ型）、ダウエックス５０Ｘ８（Ｈ十型）など
を加えて、懸濁状態で反応させても目的物質が得られろ
。
ばアンバーライトＩＲＡ４００（ＯＨ−型）、ダウエッ
クスｌＸ２（ＯＨ−型）、などを、酸性試薬には強酸性
陽イオン交換樹脂例えばアンバーライ）ＩＲ＋ １２０（Ｈ型）、ダウエックス５０Ｘ８（Ｈ十型）など
を加えて、懸濁状態で反応させても目的物質が得られろ
。
反応は通常３０〜１００ ℃で０．５〜３時間で終了す
る。
る。
ＫＡ−６６０６ｍ物質及び同■物質はいずれも塩基性水
溶性の白色物質で、主としてダラム陽性菌、陰性菌及び
抗酸菌に対して抗菌性を示す有用な新抗性物質である。
溶性の白色物質で、主としてダラム陽性菌、陰性菌及び
抗酸菌に対して抗菌性を示す有用な新抗性物質である。
本物質の物理化学的及び生物学的性状は下記のとおりで
ある。
ある。
ＫＡ−６６０６ＩＩＩ物質の遊離塩基：
（１）外観 白色粉末
（２）分子式 Ｃ１８Ｈ２Ｏｏ６Ｎ６
（３）元素分析値
ＣＨＮ
実験値（％） ４９，５１ ８．１１ １９．１０計
算値（％） ４９，９９ ８．３９ １９．４３（４
）分子量 ４３２（マススペクトル）（５）融点 １４
５〜１５２°Ｃ （６）比旋光度 〔α）”；＋１ｏ３° （ｃ−１、Ｈ
２Ｏ） （７）紫外線吸収スペクトル ２２０〜３６０ ｎｍで特異的な吸収を示さず、末端吸
収のみを示す。
算値（％） ４９，９９ ８．３９ １９．４３（４
）分子量 ４３２（マススペクトル）（５）融点 １４
５〜１５２°Ｃ （６）比旋光度 〔α）”；＋１ｏ３° （ｃ−１、Ｈ
２Ｏ） （７）紫外線吸収スペクトル ２２０〜３６０ ｎｍで特異的な吸収を示さず、末端吸
収のみを示す。
（８）赤外線吸収スペクトル
臭化カリウム中にペレットした赤外線吸収スペクトルは
第１図に示すとおりである。
第１図に示すとおりである。
（９）溶剤に対する溶解性
水に極めて溶けやすい。
メタノールに易溶、アセトンにやや溶けにくい。
クロロホルム、酢酸エチル、エーテル、ヘキサン、石油
エーテルに不溶。
エーテルに不溶。
Ｃ０）呈色反応
ニンヒドリン反応、ライドン・スミス反応に陽性、坂口
反応、マルトール反応、塩化第二鉄反応、フェーリング
反応に陰性。
反応、マルトール反応、塩化第二鉄反応、フェーリング
反応に陰性。
０υ 安定性
ｐＨ３〜８で安定で、塩基性及び強酸性で徐徐に分解失
活する。
活する。
（Ｌ２ 核磁気共鳴スペクトル
δＤ２０ （ｐｐｍ ） ：
１．２１ （３Ｈ，ａ、Ｃ−ＣＨ）
３、０７ （３Ｈ，Ｓ 、 Ｎ Ｃ４）３．４０ （
３Ｈ，ｓ 、 ０−ＣＨ３）４．０６ （２Ｈ，ｓ 、
ＣＯ−Ｃ現−Ｎ ）４．９５（ＩＨ，ｄ、アノメリッ
ク■） （１３） マススペクトル ｍ／Ｚ ： ４３２ （Ｍ＋）、２７３．２１９．１９
４．１７３．１４３ α（イ）ペーパ ｐロマトグラフイー Ｒｆ値：０．２７ 沢紙：ワットマン扁１ 溶媒；クロロホルム−メタノール−１７％アンモニア水
（２：１：１）の下層 （１５１薄層クロマトグラフィー プレート：ＴＬＣアルミニウムシート・シリカゲル６０
Ｆ２５４０．２ｍｍ（メルク社製）ＫＡ−６６０６１Ｖ
物質の遊離塩基： （１）外観 白色粉末 （２）分子式 Ｃ１８Ｈ３５ｏ６Ｎ５ （３）元素分析値 ＣＨＮ 実験値（％）’ ５１．３９ ８．０８ １６．４１
計算値（％） ５１，７８ ８．４５ １６．７７（
４）分子量 ４１７（マススペクトル）（５）融点 １
３５〜１４０℃ （６）比旋光度 〔α）７＋１ｏ１° （ｃ−１、Ｈ２
Ｏ） （７）紫外線吸収スペクトル ２２０〜３６０ｎｍで特異的な吸収を示さず、末端吸収
のみを示す。
３Ｈ，ｓ 、 ０−ＣＨ３）４．０６ （２Ｈ，ｓ 、
ＣＯ−Ｃ現−Ｎ ）４．９５（ＩＨ，ｄ、アノメリッ
ク■） （１３） マススペクトル ｍ／Ｚ ： ４３２ （Ｍ＋）、２７３．２１９．１９
４．１７３．１４３ α（イ）ペーパ ｐロマトグラフイー Ｒｆ値：０．２７ 沢紙：ワットマン扁１ 溶媒；クロロホルム−メタノール−１７％アンモニア水
（２：１：１）の下層 （１５１薄層クロマトグラフィー プレート：ＴＬＣアルミニウムシート・シリカゲル６０
Ｆ２５４０．２ｍｍ（メルク社製）ＫＡ−６６０６１Ｖ
物質の遊離塩基： （１）外観 白色粉末 （２）分子式 Ｃ１８Ｈ３５ｏ６Ｎ５ （３）元素分析値 ＣＨＮ 実験値（％）’ ５１．３９ ８．０８ １６．４１
計算値（％） ５１，７８ ８．４５ １６．７７（
４）分子量 ４１７（マススペクトル）（５）融点 １
３５〜１４０℃ （６）比旋光度 〔α）７＋１ｏ１° （ｃ−１、Ｈ２
Ｏ） （７）紫外線吸収スペクトル ２２０〜３６０ｎｍで特異的な吸収を示さず、末端吸収
のみを示す。
（８）赤外線吸収スペクトル
Ａ化カリウム中にペレットした赤外線吸収スペクトルは
第２図に示すとおりである。
第２図に示すとおりである。
（９）溶剤に対する溶解性
水に極めて溶けやすい。
メタノールに易溶、エタノール、アセトンに溶けに（い
。
。
クロロホルム、酢酸エチル、エーテル、ヘキサン、石油
エーテルに不溶。
エーテルに不溶。
００）呈色反応
ニンヒドリン反応、ライドン・スミス氏反応に陽性、坂
口反応、マルトール反応、塩化第二鉄反応、フェーリン
グ反応に陰性。
口反応、マルトール反応、塩化第二鉄反応、フェーリン
グ反応に陰性。
００ 安定性
ｐＨ３〜８で安定で、塩基性及び強酸性で徐徐に分解失
活する。
活する。
０ｚ 核磁気共鳴スペクトル
δＤ２０ （ｐｐｍ ） ：
１．２３ （３Ｈ，ｄ、 Ｃ−Ｃ馬）
３．０９ （３Ｈ，ｓ 、 Ｎ−ＣＨ３）３．４０ （
３Ｈ，ｓ、０−Ｃル０ ４．１８ （２Ｈ，ｓ 、 ＣＯＣＨ２Ｎ ）５．０３
（ＩＨ，ｄ、アノメリック旦）（１３） マススペ
クトル ｍ／ｚ ： ４１７ （Ｍ” ）、３０４．２７６．２
５８．２１９．１７３．１４３ ０４）ペーパークロマトグラフィー Ｒｆ値：０．５５ 沢紙；ワットマンＡ Ｉ 溶媒；クロロホルム−メタノール−１７％アンモニア水
（２：ｌ：１）の下層 ０■ 薄層クロマトグラフィー プレート：ＴＬＣアルミニウムシート・シリカゲル６０
Ｆ２５４０．２龍（メルク社製）以上の物理化学的諸性
質を参照してＫＡ−６６０６ＩＩＩ及び■物質は遊離塩
基の形で下記の構造式で表わされる。
３Ｈ，ｓ、０−Ｃル０ ４．１８ （２Ｈ，ｓ 、 ＣＯＣＨ２Ｎ ）５．０３
（ＩＨ，ｄ、アノメリック旦）（１３） マススペ
クトル ｍ／ｚ ： ４１７ （Ｍ” ）、３０４．２７６．２
５８．２１９．１７３．１４３ ０４）ペーパークロマトグラフィー Ｒｆ値：０．５５ 沢紙；ワットマンＡ Ｉ 溶媒；クロロホルム−メタノール−１７％アンモニア水
（２：ｌ：１）の下層 ０■ 薄層クロマトグラフィー プレート：ＴＬＣアルミニウムシート・シリカゲル６０
Ｆ２５４０．２龍（メルク社製）以上の物理化学的諸性
質を参照してＫＡ−６６０６ＩＩＩ及び■物質は遊離塩
基の形で下記の構造式で表わされる。
ＫＡ−６６０６１［物質：Ｒ−ＣｏｃＨ２ＮＨｃｏＮＨ
２ＫＡ−６６０６１Ｖ物質：Ｒ＝ＣＯＣＨ２ＮＨＣＨＯ
抗菌作用； ＫＡ−６６０６ｍ及び同■物質の各種微生物に対する抗
菌スペクトラムは第１表に示すとおりである。
２ＫＡ−６６０６１Ｖ物質：Ｒ＝ＣＯＣＨ２ＮＨＣＨＯ
抗菌作用； ＫＡ−６６０６ｍ及び同■物質の各種微生物に対する抗
菌スペクトラムは第１表に示すとおりである。
本物質は前述のように広範囲の優れた抗菌スペクトラム
を有することから、抗菌性物質として医薬、動物薬など
に有用である。
を有することから、抗菌性物質として医薬、動物薬など
に有用である。
また本物質は種々の誘導体を合成するための出発物質と
しても有用である。
しても有用である。
実施例 １
殿粉３％、大豆粉１．５％、コーンステイープリカー０
．５％、酵母エキス０．２％、硫酸マグネシウム七水化
物０．０５％、食塩０．３％、炭酸カルシウム０．３％
及び塩化第二コバルト六水塩０．００１％の組成を有し
、ｐＨ７，０に調整し滅菌した培地にＫＣ−６６０６株
を接種し、２７℃で約５０時間前培養したものを第一種
菌とする。
．５％、酵母エキス０．２％、硫酸マグネシウム七水化
物０．０５％、食塩０．３％、炭酸カルシウム０．３％
及び塩化第二コバルト六水塩０．００１％の組成を有し
、ｐＨ７，０に調整し滅菌した培地にＫＣ−６６０６株
を接種し、２７℃で約５０時間前培養したものを第一種
菌とする。
２００ ｚ容のタンクに種菌培地と同じ培地に綿実油１
％を添加した培地１００Ｊを仕込み、第一種菌２００ｍ
Ａを接種し、２７℃で通気攪拌方式（２２５ｒｐｍ 通
気量５０１／分）により４日間培養する。
％を添加した培地１００Ｊを仕込み、第一種菌２００ｍ
Ａを接種し、２７℃で通気攪拌方式（２２５ｒｐｍ 通
気量５０１／分）により４日間培養する。
培養終了後、培養液に硫酸を添加してｐＨ２，０に調整
したのち、沢過助剤としてダイカライド（ダイカライド
・オリエント社製）を加えて菌体を沢別する。
したのち、沢過助剤としてダイカライド（ダイカライド
・オリエント社製）を加えて菌体を沢別する。
涙液に希水酸化ナトリウム水溶液を加えてｐＨを８．０
に調整し、陽イオン交換樹脂アンバーライトＩＲＣ−５
０（ＮＨ４＋型）のカラムに通しく流出液は捨てる）、
水洗後、１規定アンモニア水で吸着された活性物質を溶
出する。
に調整し、陽イオン交換樹脂アンバーライトＩＲＣ−５
０（ＮＨ４＋型）のカラムに通しく流出液は捨てる）、
水洗後、１規定アンモニア水で吸着された活性物質を溶
出する。
バチルス・ズブチリスの寒天平板を用いてペーパーディ
スク法により溶出液の活性を測定し、活性を有する区分
を合わせ、減圧下で約５０ｍ１まで濃縮する。
スク法により溶出液の活性を測定し、活性を有する区分
を合わせ、減圧下で約５０ｍ１まで濃縮する。
この濃縮液を凍結乾燥すると、ＫＡ−６６０６物質の粗
粉末８．８１が得られる。
粉末８．８１が得られる。
この粗粉末８１を蒸留水５０ｍ１に溶解し、ｐＨを７．
０に調整し、陽イオン交換樹脂アンバーライ）ＣＧ−５
ＯＩ型（ＮＨ４＋）のカラム（３×１５０ＣＩｒＬ）に
通し、水洗後、０．０１規定のアンモニア水５１と１規
定のアンモニア水５１の間で濃度匂配法を用いて１５０
ｍ１／時の流速で溶出し、２５ｍ１ごとに分画する。
０に調整し、陽イオン交換樹脂アンバーライ）ＣＧ−５
ＯＩ型（ＮＨ４＋）のカラム（３×１５０ＣＩｒＬ）に
通し、水洗後、０．０１規定のアンモニア水５１と１規
定のアンモニア水５１の間で濃度匂配法を用いて１５０
ｍ１／時の流速で溶出し、２５ｍ１ごとに分画する。
各両分をペーパーディスク法により活性を検定し、ＫＡ
−６６０６ＩＩＩに該当する成分の含まれる画分及びＫ
Ａ−６６０６１Ｖに該当する成分の含まれる両分をそれ
ぞれ集め、凍結乾燥すると、ＫＡ −６６０６Ｉ［を含
む粗粉末１２０即及びＫＡ−６６０６ＩＶを含む粗粉末
７９４をが得られる。
−６６０６ＩＩＩに該当する成分の含まれる画分及びＫ
Ａ−６６０６１Ｖに該当する成分の含まれる両分をそれ
ぞれ集め、凍結乾燥すると、ＫＡ −６６０６Ｉ［を含
む粗粉末１２０即及びＫＡ−６６０６ＩＶを含む粗粉末
７９４をが得られる。
ＫＡ−６６０６ＩＩ［を含む粗粉末１２０〜を、あらか
じめクロロホルム−メタノール−１７％アンモニア水（
１：８：３）に懸濁させたシリカゲルを充填したカラム
（２Ｘ６０ｍ）に付し、同溶媒で展開し、該当する溶出
画分を減圧下に濃縮したのち凍結乾燥すると、ＫＡ−６
６０６ｍの白色粉末７０即が得られる。
じめクロロホルム−メタノール−１７％アンモニア水（
１：８：３）に懸濁させたシリカゲルを充填したカラム
（２Ｘ６０ｍ）に付し、同溶媒で展開し、該当する溶出
画分を減圧下に濃縮したのち凍結乾燥すると、ＫＡ−６
６０６ｍの白色粉末７０即が得られる。
ＫＡ−６６０６ＩＶの粗粉末７９４〜を同様に処理する
と、５０〜の白色粉末が得られる。
と、５０〜の白色粉末が得られる。
この凍結乾燥品をそれぞれ水に溶解し、ｐＨを７．０に
調整したのち、陰イオン交換樹脂ダウエックスｌＸ２（
ＯＨ−型）のカラム（ＩＸ １５０に７７１）に通し、
水で溶出する。
調整したのち、陰イオン交換樹脂ダウエックスｌＸ２（
ＯＨ−型）のカラム（ＩＸ １５０に７７１）に通し、
水で溶出する。
活性区分を集めて凍結乾燥すると、ＫＡ−６６０６ＩＩ
Ｉの遊離塩基の精製標品４０ダ及びＫＡ−６６０６ＩＶ
の遊離塩基の精製標品４０ｍ９が得られる。
Ｉの遊離塩基の精製標品４０ダ及びＫＡ−６６０６ＩＶ
の遊離塩基の精製標品４０ｍ９が得られる。
実施例 ２
殿粉２％、大豆粉１％、コーンステイープリカー０．５
％、硫酸マグネシウム七水化物０．０５％、食塩０．３
％及び炭酸カルシウム０．３％の組成を有し、ｐＨ７，
０に調整滅菌した培地にＫＣ−６６０６株を接種し、２
７℃で約５０時間、前培養したものを第一種菌とする。
％、硫酸マグネシウム七水化物０．０５％、食塩０．３
％及び炭酸カルシウム０．３％の組成を有し、ｐＨ７，
０に調整滅菌した培地にＫＣ−６６０６株を接種し、２
７℃で約５０時間、前培養したものを第一種菌とする。
２０Ｊ容のジャーファメンターに前記培地１０Ｊを仕込
み、第一種菌１００ｍ１を接種して２７℃で４日間通気
攪拌方式（２５Ｏｒｐｍ、通気量１０１／分）により培
養する。
み、第一種菌１００ｍ１を接種して２７℃で４日間通気
攪拌方式（２５Ｏｒｐｍ、通気量１０１／分）により培
養する。
以下実施例１と同様に処理し、単離精製を行なうと、Ｋ
Ａ−６６０６ｍの遊離塩基８１ｎ９及びＫＡ−６６０６
１Ｖの遊離塩基１０〜がそれぞれ精製標品として得られ
る。
Ａ−６６０６ｍの遊離塩基８１ｎ９及びＫＡ−６６０６
１Ｖの遊離塩基１０〜がそれぞれ精製標品として得られ
る。
実施例 ３
実施例１又は２により得られたＫＡ−６６０６■物質４
０１ｒ１９を４規定水酸化ナトリウム水溶液１ｍｌに溶
解し、１時間加熱する。
０１ｒ１９を４規定水酸化ナトリウム水溶液１ｍｌに溶
解し、１時間加熱する。
反応混合物を水１００ｍ１に溶解し、中和したのち陽イ
オン交換樹脂アンバーライトＣＧ−５０（ＮＨ４＋型）
のカラム（ＩＸｌｏｃｍ、）に通し、カラムを水１００
ｍ１で洗浄後、１規定アンモニア水で溶出する。
オン交換樹脂アンバーライトＣＧ−５０（ＮＨ４＋型）
のカラム（ＩＸｌｏｃｍ、）に通し、カラムを水１００
ｍ１で洗浄後、１規定アンモニア水で溶出する。
ニンヒドリン反応陽性で抗菌活性を有する両分を集め、
凍結乾燥すると、白色粉末としてＫＡ−６６０６■物質
の遊離塩基１８〜が得られる。
凍結乾燥すると、白色粉末としてＫＡ−６６０６■物質
の遊離塩基１８〜が得られる。
実施例 ４
実施例１又は２で得られたＫＡ−６６０６ＩＶ物質４０
ｍ９を実施例３と同様に処理すると、白色粉末としてＫ
Ａ−６６０６１１物質の遊離塩基２６ｍ９が得られる。
ｍ９を実施例３と同様に処理すると、白色粉末としてＫ
Ａ−６６０６１１物質の遊離塩基２６ｍ９が得られる。
第１図は抗生物質ＫＡ−６６０６ＩＩＩの赤外線吸収ス
ペクトルを示すグラフ、第２図は抗生物質ＫＡ−６６０
６ＩＶの赤外線吸収スペクトルを示すグラフである。
ペクトルを示すグラフ、第２図は抗生物質ＫＡ−６６０
６ＩＶの赤外線吸収スペクトルを示すグラフである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 次式 （式中Ｒはカルバモイルグリシル基則又はホルミルグリ
シル基円を示す）で表わされ、■の場合は融点が１４５
〜１５２℃、比旋光度が〔α〕賢十１０３° （ｃ ＝
１ 、Ｈ２−０） 、分子式がＣｌ８Ｈ３６０６Ｎ６
であり、■の場合は融点が１３５〜１４０℃、比旋光度
が〔α〕■＋１０１° （Ｃ−１、Ｈ２Ｏ）、分子式が
Ｃ１ｓ Ｈ３５０６Ｎ５である化合物（ＫＡ−６６０６
ｍ又はＫＡ−６６０６ＩＶ）又はその塩。 ２ サツカロポリスポラ属に属するＫＡ−６６０６物質
生産菌を培養し、培養液よりＫＡ−６６０６物質を採取
し、これからＫＡ−６６０６ｍ及びＫＡ−６６０６ＩＶ
を単離し、所望によりこれを配付加塩にすることを特徴
とする、次式 （式中Ｒはカルバモイルグリシル基（ホ）又はホルミル
グリシル某国を示す）で表わされ、■の場合は融点が１
４５〜１５２℃、比旋光度が〔α〕Ｍ十１０３° （ｃ
＝ １ 、 Ｈ２Ｏ） 、分子式がＣｌ８Ｈ３６０６
Ｎ６であり、■の場合は融点が１３５〜１４０℃、比旋
光度が〔α〕■＋１０１° （Ｃ−１、Ｈ２０） 、分
子式がｃ１８ Ｈ３５ｏ６Ｎ５である化合物（ＫＡ−６
６０６ｍ又はＫＡ −６６０６１Ｖ）又はその塩の製法
。
Priority Applications (15)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP52133051A JPS5819679B2 (ja) | 1977-11-08 | 1977-11-08 | 新規抗生物質及びその製法 |
| US05/888,149 US4206206A (en) | 1977-03-24 | 1978-03-16 | Antibiotics of the KA-6606 series and pharmaceutical compositions thereof |
| GB10696/78A GB1579312A (en) | 1977-03-24 | 1978-03-17 | Antibiotics process for preparation thereof and biologically pure culture for use therein |
| ES468181A ES468181A1 (es) | 1977-03-24 | 1978-03-22 | Un procedimiento para obtener un antibiotico. |
| DE2813021A DE2813021C2 (de) | 1977-03-24 | 1978-03-23 | Antibiotika KA-6606 I, II, III und IV, diese Antibiotika enthaltende Mittel und Verfahren zur Herstellung dieser Verbindungen |
| FR7808650A FR2384790A1 (fr) | 1977-03-24 | 1978-03-24 | Nouveaux antibiotiques et medicaments contenant ces substances |
| SE7808363A SE438326B (sv) | 1977-11-08 | 1978-08-03 | Nya antibiotika, ett forfarande for framstellning derav och biologiskt ren kultur for anvendning deri och som utgores av saccharopolyspora hirsuta kc-6606 |
| CA000308731A CA1117045A (en) | 1977-11-08 | 1978-08-03 | Antibiotic ka-6606 from saccharopolyspora |
| BE189750A BE869579A (fr) | 1977-11-08 | 1978-08-07 | Nouveaux antibiotiques, leur preparation et cultures biologiquement utilisees pour leur preparation |
| NLAANVRAGE7808927,A NL187691C (nl) | 1977-11-08 | 1978-08-30 | Antibiotische verbindingen, antibiotische preparaten en werkwijze ter bereiding van antibiotische verbindingen. |
| IT27213/78A IT1098768B (it) | 1977-11-08 | 1978-08-31 | Antibiotici,procedimento per la loro preparazione e coltura bilogicamente pura destinata a venire usata in essa |
| CH938278A CH641473A5 (en) | 1977-11-08 | 1978-09-07 | Antibiotic and process for its preparation |
| US05/955,412 US4328307A (en) | 1977-03-24 | 1978-10-26 | Novel antibiotics, process for preparation thereof and biologically pure culture for use therein |
| FR7834325A FR2401992A1 (fr) | 1977-03-24 | 1978-12-06 | Culture de saccharopolyspora hirsuta |
| US06/316,526 US4389486A (en) | 1977-03-24 | 1981-10-29 | Biologically pure culture |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP52133051A JPS5819679B2 (ja) | 1977-11-08 | 1977-11-08 | 新規抗生物質及びその製法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5466603A JPS5466603A (en) | 1979-05-29 |
| JPS5819679B2 true JPS5819679B2 (ja) | 1983-04-19 |
Family
ID=15095660
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP52133051A Expired JPS5819679B2 (ja) | 1977-03-24 | 1977-11-08 | 新規抗生物質及びその製法 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5819679B2 (ja) |
| BE (1) | BE869579A (ja) |
| CA (1) | CA1117045A (ja) |
| CH (1) | CH641473A5 (ja) |
| IT (1) | IT1098768B (ja) |
| NL (1) | NL187691C (ja) |
| SE (1) | SE438326B (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BE882501A (fr) * | 1979-03-29 | 1980-09-29 | Abbott Lab | 2-epifortimicine a et derives, et leurs applications therapeutiques |
-
1977
- 1977-11-08 JP JP52133051A patent/JPS5819679B2/ja not_active Expired
-
1978
- 1978-08-03 CA CA000308731A patent/CA1117045A/en not_active Expired
- 1978-08-03 SE SE7808363A patent/SE438326B/sv not_active IP Right Cessation
- 1978-08-07 BE BE189750A patent/BE869579A/xx not_active IP Right Cessation
- 1978-08-30 NL NLAANVRAGE7808927,A patent/NL187691C/xx not_active IP Right Cessation
- 1978-08-31 IT IT27213/78A patent/IT1098768B/it active
- 1978-09-07 CH CH938278A patent/CH641473A5/de not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NL7808927A (nl) | 1979-05-10 |
| IT1098768B (it) | 1985-09-18 |
| IT7827213A0 (it) | 1978-08-31 |
| JPS5466603A (en) | 1979-05-29 |
| BE869579A (fr) | 1978-12-01 |
| CA1117045A (en) | 1982-01-26 |
| CH641473A5 (en) | 1984-02-29 |
| SE438326B (sv) | 1985-04-15 |
| NL187691B (nl) | 1991-07-16 |
| NL187691C (nl) | 1991-12-16 |
| SE7808363L (sv) | 1979-05-09 |
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