JPS5849237B2 - ジエンタマイシンＣ／ａの製造法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は抗生物質ジェンタマイシンｃ，ａの製造法に関
する。

さらに詳しくは本発明はミクロモノスポラ属に属しシソ
ミシンからジエンクマイシンｃ１ａへの転換活性を有す
る微生物もしくはその処理物の存在下、シソミシンをジ
ェンクマイシンｃ１８に転換せしめることを特徴とする
ジェンタマイシンｃ１ａの製造力法に関する。

本発明によれば、ダラム陽性菌、ダラム陰性菌に対して
広範囲でかつきわめて強力な抗菌作用を有するジエンタ
マイシンＣ１ａを工業的に有利に製造することができる
。

ジエンタマイシンは１９６３年にＭ ． Ｊ ．Ｗｅ
ｉｎｓｔｅｉｎら（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇ
ｅｎｔｓ ａｎｄＣｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ（１ ９６
３ ）ＰＩ ， Ｐ８ ，Ｐ１４，Ｐ１７，米国特許第
３０９１ ５７２号、特公昭４４−２１３９４）によっ
て発見された。

ついでジエンタマイシンが数種の同族体の混合物（ジェ
ンクマイシンＣ１８，Ｃ２ａ，Ｃ２，Ｃ１）であること
が分り、ジエンタマイシンＣｌａが分離されたＣＭ．Ｊ
．Ｗｅ ｉ ｎ ｓ ｔ ｅ ｉ ｎら， Ｊ ． Ｂ
ａｃｔｅｒｉｏ１．，９４，７８９（ １ ９６７ ）
， Ｇ．Ｈ．Ｗａｇｍａｎら，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏ
ｇｒ．，３ ４，２ １ ０ （ １ ９ ６ ８ ）
，米国特許３，６ ５ １，０ ４ ２号〕。

シエンタマイシンＣ１ａ等を含むジェンタマイシンＣコ
ンプレックスは現在医薬用として広く用いられている。

ジエンタマイシンＣｌａは次の化学構造式を有する。

ジエンタマイシンＣ１ａの製造力法としては、従来、ミ
クロモノスポラ・パープレア（ Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓ
ｐｏｒａ ｐｕｒｐｕｒｅａ ）、ミクロモノスポラ・
エキノスポラ（ Ｍ−ｅｃｈｉｎｏｓｐｏｒａ） （特
公昭４４−２１３９４）、ミクロモノスポラ・サガミエ
ンシス（ Ｍ−ｓａｇａｍｉｅｎｓｉｓ） （特公昭４
９４２８８８）、ストレフトマイセス・ロンジスポ口フ
ラバス（ Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ Ｉｏｎｇｉｓｐ
ｏｒｏｆ−ｌａｖｕｓ ） （ Ｇｅｒ．Ｏｆｆｅｎ
２，２ ２ ６，２ ３ ９ ）などのジエンタマイシ
ン生産菌を培養し、培養液中に生成蓄積したジエンタマ
イシン抗生物質群（ジェンタマイシンＣ群、サガマイシ
ン、ジェンタマイシンＡなど）よりジェンタマイシンｃ
１ａを採取する方法が知られている。

本発明者らは、ジエンタマイシンＣ１ａの選造法につい
て研究の結果、シソミシン（ Ｍ．Ｊ ．Ｗｅ ｉ ｎ
５ｔｅｉｎら， Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，２ ３ ，
５ ５ １ ，５５５，５５９（１９７０））をジエ
シタマイシンＣ１ａに転換する能力（以下Ｓ−＋Ｇ転換
能力という）を有し、ミクロモノスポラ属に属する微生
物のあることを見い出し、本発明を完成した。

本発明によればＳ→Ｇ転換能力を有する微生物もしくは
その処理物の存在下、シソミシンをジエンタマイシンＣ
，ａに転換せしめることにより、短時間に収率よくジエ
ンタマイシンＣ１ａを製造することができる。

シソミシンを用いる他の抗生物質への生化学的転換反応
についてはＢ．Ｋ．Ｌｅｅら（ Ａｎ ｔ ｉｍｉｃｒ
ｏｂ．Ａｇ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．，１ ２ ， ３３
５（１９７７））がミクロモノスポラ・ロドランジエ（
Ｍ． ｒｈｏｄｏｒａｎｇｅａ）をもちいて、シソミ
シンをサガミシンへ転換せしめた報告があるのみで、シ
ソミシンからジエンタマイシンＣ１ａが生成したという
報告はこれまでみられず、全く新規な発見である。

本発明はミクロモノスポラ属に属するＳ→Ｇ転換能力を
有する菌もしくはその処理物（菌体破砕抽出液などＳ→
Ｇ転換能力を有する物質を含む菌体処理物のすべてを含
む）とシソミシンとを接触せしめて、ジエンクマイシン
Ｃ，ａを生成せしめることにより実施され、上記条件を
満足するすべての力法を含むものである。

本発明は実際的には次のごとき具体的方法にしたがって
行うことができる。

（１）Ｓ→Ｇ転換能力を有する微生物の培養後菌体を分
離し、得られる菌体もしくはその処理物（菌体破砕抽出
液など）をシソミシンと水性媒体（緩衝液など）中で接
触せしめる〔以下力法（１）という〕。

（２）Ｓ−）Ｇ転換能力を有する微生物をシソミシン．
含有培地において培養する〔以下力法（２）という〕。

（３）Ｓ−＋Ｇ転換能力を有する微生物とシソミシン生
産菌を混合培養する〔以下方法（３）という〕。

次に本発明をさらに詳しく説明する。

本発明で使用するＳ−＋Ｃ転換能力を有する菌としては
ミクロモノスポラ属に属し、該能力を有する菌であれば
いずれの菌でもよい。

好適な菌としてはミクロモノスポラ・サガミエンシス、
ミクロモノスポラ・パープレアまたはミクロモノスポラ
・エキノスポラに属しＳ−）Ｇ転換能力を有する菌があ
げられる。

具体的にはミクロモノスポラ・サガミエンシス微工研菌
寄第３５７３号（ＮＲＲＬ１１００６）、ミクロモノス
ポラ・サガミエンシス微工研菌寄第１４７７号（ＡＴＣ
Ｃ２１８０３）、ミクロモノスポラ・パープレアＡＴＣ
Ｃ３ １ １ １ ９、ミクロモノスポラ・パープレア
ＮＲＲＬ２ ９ ５ ３（ＡＴＣＣＩ ５ ８ ３ ５
）、ミクロモノスポラ・エキノスポラＮ’Ｒ．ＲＬ２
９ ８ ５ （ ＡＴＣＣＩ ５ ８ ３ ７ ）な
どがあげられる。

上記微生物の培養においては通常の放線菌の培養法が一
般に用いられる。

培養のための培地としては資化可能な炭素源、窒素源、
無機物等をほどよく含有する培地であれば天然培地、合
成培地のいずれでも使用可能である。

炭素源としてはブドウ糖、澱粉、デキストリン、マンノ
ース、フランクトー・ス、シュークロース、イノシトー
ル、マンニトール、グリセリン、糖密などが単独または
組み合わせて用いられる。

無機および有機窒素源としては塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム、尿素、硝酸アンモニウム、硝酸ソーダな
どが、また天然窒素源としてはペプトン、肉エキス、酵
母エキス、乾燥酵母、コーン・スチープ・リカー、大豆
粉、カザミノ酸、ソリュブルベジタブル・プロテイン、
綿実カスなどが単独または組み合わせて用いられる。

そのほか必要に応じて食塩、塩化カリウム、燐酸塩など
の無機塩、硫酸マグネシウム、塩化第１鉄、塩化コバル
トなどの金属塩を適当に加えることができる。

培養法としては、液体培養法、とくに深部撹拌培養法が
もつとも適している。

培養温度は２５〜４０℃、ＰＨは中性付近で培養するこ
とが望ましい。

次に前記力法（１．） ， （２） ， （３）にした
がってシソミシンを転換してジエンクマイシンＣ１ａを
製造する工程について説明する。

方法 （１） （菌体もしくはその処理物とシ六シンとの接触）（イ）
菌体と接触せしめる場合 Ｓ−＋Ｇ転換能力を有する菌株を上記培養法にしたがっ
て１〜６日培養した後得られる菌体を集め、これをシソ
ミシン（５〜５ ０ ０ ０ １４ｊ４ ）と水性媒体
、好適にはＰ Ｈ ５． ０〜１０．０の緩衝液中で２
０〜４０℃で３〜９６時間接触せしめる。

（０）菌体処理物と接触せしめる場合 Ｓ−）Ｇ転換能力を有する菌株を上記培養法にしたがっ
てｌ〜６日培養した後得られる菌体を超音波破砕器など
で破砕後固形物を除いて得られる液（抽出液）とシソミ
シン（５〜５０００μＥｌ／ｍｌ）を水性媒体中、好適
にはＰＨ５．０〜１０．０の緩衝液中で２０〜３０℃で
１〜９６時間接触せしめる。

方法 （２） シソミシン含有培地でＳ→Ｇ転換能力を有する菌の培養 Ｓ−）Ｇ転換能力を有する菌株を上記培養法で培養する
に際し、シソミシン（５〜５０００μｇ／ＴＬｌ）を培
養開始時から培養開始後１０日の間に添加し、さらに１
〜１２日間培養すればよい。

方法 （３） 混合培養 シソミシン生産菌としてはミクロモノスポラ属に属しシ
ソミシン生産能力を有する菌であればいずれの菌でもよ
い。

好適な菌としてはミクロモノスポラ・インヨエンシス（
Ｍ． ｉｎｙｏｅｎｓ ｉｓ ）またはミクロモノス
ポラ・グリセア（ Ｍ． ｇｒ ｉ ｓｅａ）に属し、
シソミシン生産能力を有する菌があげられる。

具体的にはミクロモノスポラ・インヨエンシスＮＲＲＬ
３２９２（ＡＴＣＣ２７６００）、ミクロモノスポラ・
グリセアＮＲＲＬ ３ ８ ０ ０などがあげられる。

シソミシン生産菌の培養はＳ−＋Ｇ転換能力を有する菌
と同様に行えばよい。

Ｓ−）Ｇ転換能力を有する菌とシソミシン生産菌の混合
培養は、両菌株を同時に発酵培地に植菌し、これを好気
条件下で１〜１２日間培養したり、個個の菌株を発酵培
地に別々に植菌し１〜６日間培養した後、両培養液を混
合して更に１〜１２日間培養すればよい。

上記力法（１）による場合や方法（２）もしくは（３）
でＳ→Ｇ転換能力を有する菌としてジエンタマイシン（
Ｃ，，Ｃ２，Ｃ２ａ，Ｃ１ａ，Ａ）、サガミシン非生産
菌、例えば２−デオキシストレプタミン（ＤＯＳ）を要
求する変異株（ミクロモノスポラ・サガミエンシス微工
研菌寄第３５７３号、ミクロモノスポラ・パープレアＡ
ＴＣＣ３ １ １ １９など）を用いる場合には反応液
や培養液にこれらの抗生物質が入ってこないので生成成
分の組成を単純にすることができる。

上記方法（１）〜（３）において、反応液もしくは培養
液中のジエンタマイシンＣ１ａの生成量が最犬に達した
ときに、培養ないしは反応を停止し培養液ないしは反応
液中より目的物を精製単離する。

培養液ないしは反応液からのジエンタマイシンＣ１ａの
精製単離は微生物代謝産物を単離するためにふつう用い
られる分離・精製の方法が利用される。

ジエンタマイシンＣ１ａは、水溶性、塩基性物質なので
いわゆる水溶性・塩基性抗生物質の精製によく用いられ
る方法により精製を行うことができる。

すなわち、カチオン交換樹脂による吸脱着法、活性炭素
による吸脱着法、セルロースカラムクロマトグラフイー
、セファデツクスＬＨ−２０カラム（ファーマシア・フ
ァイン・ケミカルズ社製、ＵＳ．Ａ．）による吸脱着法
、シリカゲルクロマトグラフイー、向流分配法などの力
法を適当に組み合わせて行うことができる。

またジエンタマイシンＣ，ａの遊離塩基はアセトンに溶
けるが、硫酸塩は同溶媒に溶けにくいので、この点を利
用して本物質の遊離塩基または硫酸塩を単離・精製する
ことができる。

次に培養液ないしは反応液からジエンタマイシンＣ１ａ
の精製・単離の一例を示す。

培養ないしは反応終了後、培養液ないしは反応液から固
形物を除き、得られる上清液を弱アルカリ性に調整した
後、カチオン交換樹脂アンバーライトＣＧ−５０タイプ
Ｉ （ ＮＨｊ型）（ローム・アンド・ハース社製）を
充填したカラムに通して、活性物質を吸着し、水洗後稀
アンモニア水で活性物質を溶出する。

ジエンタマイシンＣ１ａを含む活性区分を集め、減圧下
で濃縮乾固してジエンタマイシンＣ１ａの粗粉末を得る
。

次に活性炭カラムクロマトグラフイーを行なう。

粗粉末を少量の塩酸に溶解して、活性炭（和光純薬製）
を充填したカラムに通し、０． ５ Ｎ塩酸にて溶出す
る。

ジエンタマイシンＣ，ａの区分を集めて減圧下で濃縮乾
固した後水に溶かし、微アルカリに調整し、これをカチ
オン交換樹脂アンバーライトＩＲＣ−５０（口−ム・ア
ンド・ハース社製、ＵＳＡ）（ＮＨ，’型）を充填した
カラムに通してジエンクマイシンＣ１ａを吸着せしめ、
水洗後、ＩＮ−アンモニア水で溶出し、ジエンタマイシ
ンＣ１ａ区分を集めて減圧濃縮後凍結乾燥を行うことに
より、精製されたジエンタマイシンＣｔａを得ることが
できる。

上記精製工程中のジエンタマイシンＣ１ａの動向は、東
洋済紙Ａ５１を用いた上昇式ペーパークロマトグラフイ
ー〔展開溶媒、クロロホルム、メタノール、１７％（
ＶＡＪ）アンモニア水（容量比２：ｉ：１）の下層〕な
どの方法によりチェックする。

次に実示例を示す。

実施例 Ｉ Ａ ミクロモノスポラ・サガミエンシス微工研菌寄第３
５７３号の培養： 種菌としてミクロモノスポラ・サガミエンシス（ Ｍｉ
ｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ ｓａｇａｍｉｅｎｓｉｓ微
工研菌寄第３５７３号（ＮＲＲＬ１１００６）（ＤＯＳ
−）を用いた。

第１種培地としては、スタビローズＫ〔澱粉の加水分解
物、松谷化学■製〕２９７ｄｉ、グルコース０． ５
ｇ／ｄｌ，ペプトン０． ５ ｇ／ｄｌ，酵母エキス０
． ５ ９ ７ｄｌ，肉エキス０． ３ ｇ／ｄｌ，炭
酸カルシウム０． ２ ｇ／ｄｌ （殺菌前ＰＨ８．０
）の培地を用いた。

種菌１白金耳を、大型試験管中１０ｍｌの上記培地に植
菌し、３０℃で３日間振盪培養した。

この種培養液１０ＴＬｌを２ｌバツフル付キエルレンマ
イヤーフラスコに入った３５０７７１ｌの第２種培地に
移した。

第２種培地の組成は第１種培地の組或と同じである。

第２種培養は３０℃で２日間振盪培養した。

この種培養液１．５ｌ（フラスコ５本分）を３０１容量
のジャーファーメンター中の第３種培地１５ｌに移し、
３４℃で２４時間通気撹拌方式（回転数２５Ｏｒｐｍ、
通気量１５１１７ｍｉｎ）により培養を行った。

第３種培養地の組戒は第１種培養地の組或と同じである
。

最後にこの第３種培養液１５ｌを３０１容量のタンク中
の発酵培地１５０ｌに移した。

発酵培地の組或はスタビローズＫ４９ ／ｄｌ， ソ
イビーンミール（ Ｓｏｙｂｅａｎｍｅａｌ ）１ｇ／
ｄｌ，ファーマメディア（ ｐｈａｍａｍｅｄｅａ）（
Ｔｒａｄｅｒｓ Ｏｉ Ｉ Ｍｉ ｌ Ｃｏｍ−ｐａ
ｎｙ製）ＵＳＡ）２ｇ／ｄｌ、大豆カゼイン０． ５
ｇ／ｄｌ、燐酸２カリウム０．０ ２ ５ ｇ／ｄｌ，
硫酸マグネシウム０．０５９ ７ｄｉ，カルシウムフィ
チン０． ２ ，９ ／ｄｌ、コーンオイル（ Ｃｏｒ
ｎ ｏｉｌ）０．１ ｇ／ｄｌ、硫酸第１鉄０．０ １
５ ｇ／ｄｉ， Ｌ−グルタミン０．０００１．！
ｉｉ’／ｄｌ， Ｌ−シスチンｏ．ｏ ｏ ５ｊ！／ｄ
ｌ− β−アラニン０．０ ０ ５ ｇ／ｄｌ，ユヨチ
ン酸０，０００５ｒ／ｄ７、パントテン酸カルシウム０
．０ ０ ０ ５ ｇ／ｄＬ 硫酸亜鉛（７水塩） ０
．０ ０ ０ ５ ９７ｄｌ、カリウム明ばん（２４水
塩） ０．０ ０ １ ９７ｄｉ、モリブデン酸アンモ
ニウム（４水塩） ０． ０ ２ ５ ｇ／ｄｉ，（殺
菌前ＰＨ８．０）の培地を用いた。

この発酵は３０℃で３日間通気撹拌培養方式（回転数１
８ ０ ｒｐｍｓ通気量１ ５ ０ ｌ／ｍｉｎ ）
により行った。

Ｂ．ミクロモノスポラ・サガミエンシス微工研菌寄第３
５７３号の菌体採取： 前記培養終了後、培養液をシャープレス型連続遠心分離
器を用いて菌体を分離採取した。

得られた菌体量は９ｋｇ（湿菌体重量）であった。

Ｃ．シソミシンの転換反応： 前記のように行って得られたミクロモノスポラ・サガミ
エンシス微工研菌寄第３５７３号の湿菌体３ｋｇと、シ
ソミシン硫酸塩７５０■を０． １ Ｍ トリス塩酸緩
衝液（ＰＨ７．５）１５ｌに懸濁し、３０ｌジャーファ
ーメンター中で３０℃、１０時間反応した（回転数２
５ ０ ｒｐｍ，通気量１５１１／ｍｉｎ）。

Ｄ．ジエンタマイシンＣ１ａの精製単離 前記反応終了後、反応液のＰＨを１２Ｎ一硫酸でＰＨ２
．０に調整し８０℃で１０分間加熱撹拌した。

そののち炉過助剤としてラジオライト＋６００〔昭和化
学工業■製〕を５００ｇ加え、菌体を炉別した。

この炉液をダイヤイオンＨＰＫ−２５（三菱化或製）（
ＮＨ４＋型）ＩＡを充填したカラムに通し、流水液は捨
てた。

水で樹脂を水洗後２Ｎ−アンモニア水で溶出し、活性物
質のある区分を減圧下で５００ｍｌまで濃縮した。

濃縮液を６Ｎ塩酸でＰ Ｈ ７． ８に調整したのち、
アンバーライトＣＧ−５０クイプＩ（ＮＨＺ型）■ｌを
充填したカラムに通し、水洗後、０．２Ｍ塩化アンモニ
ウムを含む０． Ｉ Ｎアンモニア水にて溶出した。

ジエンタマイシンＣ１ａを含む活性区分を集め、Ｐ Ｈ
７． ８に調整後アンバーライトＩＲＣ−５０（ＮＨ
４＋型）２００ｍｌを充填したカラムに通塔し、水洗後
２Ｎ−アンモニア水で溶出し、ジエンタマイシンＣ１ａ
を含む区分を集めこれを濃縮乾燥すると、ジエンタマイ
シンＣ１ａを含む粗粉末３００■が得られた。

この粗粉末を少量の０． ５ Ｎ一塩酸に溶解し、活性
炭（和光純薬■製）２００．９を充填したカラムの上端
に導入する。

その後０．５Ｎ塩酸で溶出を行い；ジエンタマイシンＣ
１ａ区分を集める。

この区分をＰ Ｈ ７． ８に調整後、アンバーライト
ＩＲＣ −５０（ＮＨ４＋型）５０■を充填したカラム
に通し、水洗後２Ｎ−アンモニア水で溶出し、活性区分
を集め減圧下で濃縮すると白色粉末２ ５ ０ｍＪ９が
得られた。

この白色粉末は、物性値、生物活性共にジエンタマイシ
ンＣｔａの標準標品に完全に一致した。

実施例 ２ 種菌としてミクロモノスポラ・サガミエンシス微工研菌
寄第３５７３号を用いた。

種培地の組或は実施例１と同様の組或のものを用いた。

種菌１白金耳を、大型試験管中１０ＴｆＬｌの種培地に
植菌し、３０℃で３日間振盪培養した。

この種培養液１０ｍｌを２ｌバツフル付きエルレンマイ
ヤーフラスコに入った３５０ｍｌの第２種培地に移した
。

第２種培養は３０℃で２日間振盪培養した。

この種培養液全量を５ｌ容量のジャーファーメンター中
の第３種培地３．５ｌに移し、３０℃で２４時間通気撹
拌方式（４００ｒｐｍ、通気量３．５ １１ ／ ｍｉ
ｎ ）により培養を行った。

最後に第３種培養液１．５ｌを３０４容量のジャーファ
ーメンター中の発酵培地１５ｌに移した。

発酵培地の組或は、実施例１で示した発酵培地と同様の
組或の培地にシソミシンを５ Ｑ ，Ｊ，，Ｈ， （硫
酸塩）を添加したものを用いた。

この発酵は３０℃で３日間、通気撹拌方式（回転数２
５ ０ ｒｐｍｓ通気量１５ｌ／ｍｉｎ）で行なった。

培養終了後、実施例１−Ｄと同様にジエンタマイシンＣ
１ａを精製分離し、ジエンタマイシンＣ１ａの遊離塩基
１９０■を得た。

なお、発酵培地にシソミシンを加えないで同様に培養を
行った場合には、ジエンタマイシンＣ１ａは培養液中に
生成蓄積しなかった。

実施例 ３ 種菌としてミクロモノスポラ・サガミエンシス微工研菌
寄第３５７３号とミクロモノスポラ・インヨエンシスＮ
ＲＲＬ３２９２を用いた。

各々の菌株を実施例２と同様にして種培養した。

ついで第３種培養液１．５ｌを３０ｌ容量のジャーファ
ーメンター中の発酵培地１５ｌに移した。

発酵培地は実施例１で示した発酵培地と同じ組戊のもの
を使用した。

各本培養を各々３０℃で４８時間通気撹拌方式（回転数
２５Ｏｒｐｍ、通気量１５１１／ｍｉｎ）で行なった後
、ミクロモノスポラ・サガミエンシス微工研菌寄第３５
７３号の培養液７ｌと、ミクロモノスポラ・インヨエン
シスＮＲＲＬ３２９２の培養液８ｌを無菌的に混合した
。

混合液を３（１ジャーファーメンター中で通気撹拌力式
（回転数２ ５ Ｏ ｒｐｍ，通気量１５ｌ／ｍｉｎ）
により培養を行った。

混合後、３０℃で１１６時間培養した後培養を停止し、
実施例１−Ｄと同様にジエンタマイシンＣ１ａを精製分
離し、ジエンタマイシンＣ１ａの遊離塩基３２０１１Ｔ
９を得た。

なお、ミクロモノスポラ・サガミエンシス微工研菌寄第
３５７３号を単独で同様に培養した場合（培養時間１６
４時間）は、ジエンタマイシンＣ１ａは培養液中に生或
蓄積しなかった。

また、ミクロモノスポラ・インヨエンシスＮＲＲＬ３２
９２を単独で同様培養した場合（培養時間１６４時間）
は、シソミシン５７μめΩ（硫酸塩）を蓄積したが、ジ
エンタマイシンＣ１ａは蓄積しなかった。

実施例 ４ 種菌として、ミクロモノスポラ・サガミエンシス微工研
菌寄第１４７７号、ミクロモノスポラ・パープレアＮＲ
ＲＬ２ ９ ５ ３、ミクロモノスポラ・エキノスポラ
ＮＲＲＬ２９８５またはミクロモノスポラ・パープレア
ＡＴＣＣ３ １ １ １ ９（ＤＯＳ−）を用いた。

各菌株を実施例１と同様に実施（培養、菌体採取、転換
反応および精製単離）し、ジエンタマイシンＣ１ａを採
取した。

各菌株によるジエンタマイシンＣ１ａの収得量は第１表
に示したようである。

実施例 ５ 実施例３の種菌のうち、ミクロモノスポラ・インヨエン
シスＮＲＲＬ３ ２９ ２の代わりにミクロモノスポラ
・グリセアＮＲＲＬ３８００を用いる他は、実施例３と
同様に実推してジエンタマイシンＣｌａの遊離塩基１７
２■を得た。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ ミクロモノスポラ属に属しシソミシンからジエンタ
   マイシンＣ１ａへの転換活性を有する微生物もしくはそ
   の処理物の存在下、シソミシンをジェンクマイシンＣ１
   ａに転換せしめることを特徴とするジエンタマイシンＣ
   ，ａの製造法。