JPS589676B2 - ノジリマイシン ｂ ノ セイゾウホウ - Google Patents
ノジリマイシン ｂ ノ セイゾウホウInfo
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- JPS589676B2 JPS589676B2 JP50073748A JP7374875A JPS589676B2 JP S589676 B2 JPS589676 B2 JP S589676B2 JP 50073748 A JP50073748 A JP 50073748A JP 7374875 A JP7374875 A JP 7374875A JP S589676 B2 JPS589676 B2 JP S589676B2
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- nojirimycin
- substance
- culture
- sulfite
- sulfite adduct
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- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はストレブトミセス属に属する微生物の選択され
た特定菌株を培養することにより得られる酵素阻害剤で
ある新規物質ノジリマイシンＢの製造法に関するもので
ある。
た特定菌株を培養することにより得られる酵素阻害剤で
ある新規物質ノジリマイシンＢの製造法に関するもので
ある。
本発明者等は先にストレブトミセス・ラベンデュレＳＦ
−４２５と命名した放線菌の培養物中にサルシナ・ルテ
ア（Ｓａｒｃｉｎａ Ｉｕｔｅａ ）．キサントモナス
・オリゼ（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｏｒｙｚａｅ）等
に有効な抗生物質ノジリマイシンが蓄積されることを発
見しこれを採取する方法を見出したが（特公昭４３−７
６０号公報）、今回、上記菌種の培養液を更に詳細に検
討することによってノジリマイシンとは理化学的性状を
異にする新規物質ノジリマイシンＢが同時に生産される
ことを見出し、その有効物質を培地中から採取すること
に成功し、本発明を完成した。
−４２５と命名した放線菌の培養物中にサルシナ・ルテ
ア（Ｓａｒｃｉｎａ Ｉｕｔｅａ ）．キサントモナス
・オリゼ（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｏｒｙｚａｅ）等
に有効な抗生物質ノジリマイシンが蓄積されることを発
見しこれを採取する方法を見出したが（特公昭４３−７
６０号公報）、今回、上記菌種の培養液を更に詳細に検
討することによってノジリマイシンとは理化学的性状を
異にする新規物質ノジリマイシンＢが同時に生産される
ことを見出し、その有効物質を培地中から採取すること
に成功し、本発明を完成した。
ノジリマイシンは上記の抗菌活性の他にβ−グルコシダ
ーゼに対し強い阻害作用を有する（アグリカルチュラル
・アンド・バイオロジカルケミストリー，３４巻，９６
６頁，１９７０年）が、本発明者らはノジリマイシン生
産菌の培養ｐ液よりノジリマイシンを得る精製工程でノ
ジリマイシンを亜硫酸付加物（明治製菓研究年報，Ａ１
３．８０頁．１９７３年）の結晶として単離した後、そ
の結晶母液からサルシナ・ルテアに対して抗菌活性を示
さないがβ−グリコシダーゼ阻害活性を有する結晶（ノ
ジリマイシンの場合と同様に亜硫酸付加物である）部分
を新たに分離した。
ーゼに対し強い阻害作用を有する（アグリカルチュラル
・アンド・バイオロジカルケミストリー，３４巻，９６
６頁，１９７０年）が、本発明者らはノジリマイシン生
産菌の培養ｐ液よりノジリマイシンを得る精製工程でノ
ジリマイシンを亜硫酸付加物（明治製菓研究年報，Ａ１
３．８０頁．１９７３年）の結晶として単離した後、そ
の結晶母液からサルシナ・ルテアに対して抗菌活性を示
さないがβ−グリコシダーゼ阻害活性を有する結晶（ノ
ジリマイシンの場合と同様に亜硫酸付加物である）部分
を新たに分離した。
この結晶化合物につき種々検討を行なった結果、本物質
はノジリマイシン亜硫酸付加物とは極めて類似するが、
これとは明らかに異なる新規物質であることを知り、ノ
ジリマイシンＢと命名した。
はノジリマイシン亜硫酸付加物とは極めて類似するが、
これとは明らかに異なる新規物質であることを知り、ノ
ジリマイシンＢと命名した。
ノジリマイシンＢ生産菌の一例としては、ストレプトミ
セス属に属するストレプトミセス・ラベンデュレＳＦ−
４２５が用いられる。
セス属に属するストレプトミセス・ラベンデュレＳＦ−
４２５が用いられる。
本菌は台湾の土壌から分離され微工研に微工研寄託番号
第３０９６号として寄託された。
第３０９６号として寄託された。
ＳＦ−４２５株（微工研菌寄番号第３０９６株）の菌学
的性状は以下に示す通りである。
的性状は以下に示す通りである。
■形態
スターチ寒天等づ気菌糸を良好に着生し、胞噂■ 各種
培地上の生育状態 子形成も豊富である。
培地上の生育状態 子形成も豊富である。
分枝は単純分枝で車軸分枝はみられない。
気菌糸の先端はゆるい不完全ならせん状となる。
電子顕微鏡による胞子の表向構造は平滑型である。
胞子は卵型〜円型で１．２Ｘ０．６ミクロンの大きさで
通常１０胞子以上連鎖する ■ 生理的性質 （１）生育温度範囲：スターチ寒天において２０〜３８
℃の温度範囲で生育する。
通常１０胞子以上連鎖する ■ 生理的性質 （１）生育温度範囲：スターチ寒天において２０〜３８
℃の温度範囲で生育する。
（２）ゼラチンの液化：２０℃にて徐々に進行する。
（３）スターチの加水分解：陽性（２８℃）（４）脱脂
乳の凝固 ：蔭性（２８℃）〃 のペブトン化：陽注
（２８℃） （５）メラニン様色素の生成：陽性 ■ 炭素源の利用性（プリードハム・ゴットリーブ寒天
培地） （１）利用する： Ｄ−グルコース， Ｌ−アラビソー
ス， Ｄ−キシロース （２）利用が疑わしい： Ｄ−フラクトース， （３）利用しない：ラウノース， ラフイノース，シュ
クロース， ■−イノシ トール Ｄ−マンニトール 上記から、ＳＦ−４２５株はストレブトミセス属に属し
、気菌糸の形態及び色調、さらにメラニン様色素を生成
すること等から、ストレブトミセス・ラベンデュレに最
も近似している。
乳の凝固 ：蔭性（２８℃）〃 のペブトン化：陽注
（２８℃） （５）メラニン様色素の生成：陽性 ■ 炭素源の利用性（プリードハム・ゴットリーブ寒天
培地） （１）利用する： Ｄ−グルコース， Ｌ−アラビソー
ス， Ｄ−キシロース （２）利用が疑わしい： Ｄ−フラクトース， （３）利用しない：ラウノース， ラフイノース，シュ
クロース， ■−イノシ トール Ｄ−マンニトール 上記から、ＳＦ−４２５株はストレブトミセス属に属し
、気菌糸の形態及び色調、さらにメラニン様色素を生成
すること等から、ストレブトミセス・ラベンデュレに最
も近似している。
ＩＳＰ（インターナショナル・ストレブトミセス・プロ
ジェクト）の記載株（インターナショナル・ジャーナル
・オブ・システマテイク・バクテリオロギ−１８巻．１
３７〜１３８頁，１９６８年）と比較すると、Ｌ−アラ
ビノースとＤ−キンロースの利用性が異なる以外は両者
はよく一致している。
ジェクト）の記載株（インターナショナル・ジャーナル
・オブ・システマテイク・バクテリオロギ−１８巻．１
３７〜１３８頁，１９６８年）と比較すると、Ｌ−アラ
ビノースとＤ−キンロースの利用性が異なる以外は両者
はよく一致している。
以上より、ＳＦ−４２５株は若干の相違点があるものの
基本的性状においてストレブトミセス・ラベンデュレと
よく一致していることから、本発明者らはＳＦ−４２５
株をストレプトミセス・ラベンデュレＳ Ｆ − ４
２ ５ （ Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ Ｉａｖｅｎ−
ｄｕｌａｅ Ｓ Ｆ−４ ２ ５ ）と命名した。
基本的性状においてストレブトミセス・ラベンデュレと
よく一致していることから、本発明者らはＳＦ−４２５
株をストレプトミセス・ラベンデュレＳ Ｆ − ４
２ ５ （ Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ Ｉａｖｅｎ−
ｄｕｌａｅ Ｓ Ｆ−４ ２ ５ ）と命名した。
ＳＦ−４２５株は他のストレプトミセス属の菌株の場合
にみられるようにその性状が変化しやすく、例えば紫外
線、高周波、放射線、薬品等を用いる人工的変異手段で
変異しうるものであり、このような変異株であってもＳ
Ｆ−４２５物質の生産能を有するストレプトミセス属の
菌はすべて本発明の方法に使用することが出来る。
にみられるようにその性状が変化しやすく、例えば紫外
線、高周波、放射線、薬品等を用いる人工的変異手段で
変異しうるものであり、このような変異株であってもＳ
Ｆ−４２５物質の生産能を有するストレプトミセス属の
菌はすべて本発明の方法に使用することが出来る。
本発明の方法では前記菌株の通常の微生物が利用しうる
栄養物を含有する培地で培養する。
栄養物を含有する培地で培養する。
栄養源きしては、従来ストレプトミセス属の菌の培養に
利用されている公知のものが使用できる。
利用されている公知のものが使用できる。
例えば、炭素源としてグルコース， シュクロース，澱
粉， グリセリン， 水あめ， 糖みつ， 大豆油等を
使用しうる。
粉， グリセリン， 水あめ， 糖みつ， 大豆油等を
使用しうる。
また窒素源さしては大豆粉，小麦胚芽， 肉エキス，
ペプトン， 乾燥酵母，コーンステイープリカー， 硫
酸アンモニウム，硝酸ナトリウム等を使用しうる。
ペプトン， 乾燥酵母，コーンステイープリカー， 硫
酸アンモニウム，硝酸ナトリウム等を使用しうる。
その他必要に応じて炭酸カルシウム， 食塩， 塩化カ
リ， 燐酸塩等の無機塩類を添加するほか、菌の発育を
助け、ノジリマイシンＢ物質の生産を促進することが出
来る。
リ， 燐酸塩等の無機塩類を添加するほか、菌の発育を
助け、ノジリマイシンＢ物質の生産を促進することが出
来る。
培養法としては、一般抗生物質生産の方法と同じく、液
体培養法、特に深部培養法が最も適している。
体培養法、特に深部培養法が最も適している。
培養は好気的条件で行われ、培養に適蟲な温度は２５〜
３５℃であるが、多くの場合２８℃付近で培養する。
３５℃であるが、多くの場合２８℃付近で培養する。
ノジリマイシンＢ物質の生産は振盪培養、タンク培養共
に２〜６日で最高に達する。
に２〜６日で最高に達する。
ノジリマイシンＢ物質の検定は本物質が抗菌活性がなく
、酵素（β−グルコシダーゼ）阻害活性を有するが、ノ
ジリマイシンＢ生産菌としてＳＦ一４２５菌を使用する
場合には、本物質の生産と同時にノジリマイシンが主成
分として生産され、これ自身が強いβ−グルコシダーゼ
阻害活性を有するので、生産の時点で両者を区別できる
適当な検定方法はない。
、酵素（β−グルコシダーゼ）阻害活性を有するが、ノ
ジリマイシンＢ生産菌としてＳＦ一４２５菌を使用する
場合には、本物質の生産と同時にノジリマイシンが主成
分として生産され、これ自身が強いβ−グルコシダーゼ
阻害活性を有するので、生産の時点で両者を区別できる
適当な検定方法はない。
従って後述の様に精製を行ない、サルシナ・ルテアに対
し抗菌がなく、β−グルコシダーゼに対する阻害作用を
見るか、ペーパークロマドグラフイーでそのＲｆ値を測
定しノジリマイシンＢ物質を確認する方法が取られる。
し抗菌がなく、β−グルコシダーゼに対する阻害作用を
見るか、ペーパークロマドグラフイーでそのＲｆ値を測
定しノジリマイシンＢ物質を確認する方法が取られる。
ノジリマイシンＢを培養物から採取する方法は後記のノ
ジリマイシンＢの理化学的性状にもとづき採取し精製さ
れる。
ジリマイシンＢの理化学的性状にもとづき採取し精製さ
れる。
ノジリマイシンＢはノジリマイシンと極めてその理化学
性状が類似するため主として特公昭４３−７６０号公報
に記載の精製方法が先づ適用され、ノジリマイシンと共
に精製される。
性状が類似するため主として特公昭４３−７６０号公報
に記載の精製方法が先づ適用され、ノジリマイシンと共
に精製される。
即チストレプトミセス・ラベンデュレＳＦ一４２５の培
養ｒ液を陽イオン交換樹脂例えばアンバーライトＩＲ−
１２０（Ｈ型）又はアンバーライトＩＲ−１２０Ｂ（Ｈ
型）の塔に通すとノジリマイシンＢはノジリマイシンと
同様に吸着される。
養ｒ液を陽イオン交換樹脂例えばアンバーライトＩＲ−
１２０（Ｈ型）又はアンバーライトＩＲ−１２０Ｂ（Ｈ
型）の塔に通すとノジリマイシンＢはノジリマイシンと
同様に吸着される。
目的物の溶出は塩基性水例えばアンモニア水で容易に行
なわれる。
なわれる。
溶出液は減圧・濃縮の手段で液量を減じ、次に蔭イオン
交換樹脂例えばダウエックスｌＸ２（ＯＨ型）の塔を通
過させる。
交換樹脂例えばダウエックスｌＸ２（ＯＨ型）の塔を通
過させる。
これらの操作によってノジリマイシンＢはノジリマイシ
ンと共に脱色精製される。
ンと共に脱色精製される。
この脱色精製溶液を減圧濃縮して凍結乾燥するとノジリ
マイシンとノジリマイシンＢの混合物の粗粉末が得られ
る。
マイシンとノジリマイシンＢの混合物の粗粉末が得られ
る。
しかし、ノジリマイシンＢもノジリマイシンと同様吸湿
性で不安定であるため、上記の脱色液に亜硫酸ガスを通
じ安定な亜硫酸付加物の混合物に一旦導く方が有利であ
る。
性で不安定であるため、上記の脱色液に亜硫酸ガスを通
じ安定な亜硫酸付加物の混合物に一旦導く方が有利であ
る。
ノジリマイシンＢとノジリマイシンの分別単離はこの安
定な亜硫酸付加物で行なうと容易である。
定な亜硫酸付加物で行なうと容易である。
即ち前述の脱色濃縮液に亜硫酸ガスを通し結晶亜硫酸付
加物を得る際に、分別結晶化法及び再結晶化法により両
者の亜硫酸付加物の結晶状に別々に単離することが出来
る。
加物を得る際に、分別結晶化法及び再結晶化法により両
者の亜硫酸付加物の結晶状に別々に単離することが出来
る。
ノジリマイシン亜硫酸付加物とノジリマイシンＢ亜硫酸
付加物は、前者はサルシナ・ルテアに対し強い抗菌活性
を示すのに対し、後者はペーパーディスク法で１０００
μｇ／ｍｌの濃度で全く抗菌活性を示さないので両者は
明瞭に区別出来る。
付加物は、前者はサルシナ・ルテアに対し強い抗菌活性
を示すのに対し、後者はペーパーディスク法で１０００
μｇ／ｍｌの濃度で全く抗菌活性を示さないので両者は
明瞭に区別出来る。
またノジリマイシンＢ亜硫酸付加物はノジリマイシン亜
硫酸付加物と同様にβ−グルコシダーゼに対し強い阻害
作用を有する。
硫酸付加物と同様にβ−グルコシダーゼに対し強い阻害
作用を有する。
例えば前述のアグリ力ルチュアル・バイオロジカル・ケ
ミストリー，３４巻，９６６頁，１９７０年記載の方法
でノジリマイシンＢ亜硫酸付加物の杏エムルシンβ−グ
ルコシダーゼに対する５０％阻害濃度は３．４×１０−
５Ｍであり、ノジリマイシン亜硫酸付加物のそれとほゾ
同程度の阻害力を有する。
ミストリー，３４巻，９６６頁，１９７０年記載の方法
でノジリマイシンＢ亜硫酸付加物の杏エムルシンβ−グ
ルコシダーゼに対する５０％阻害濃度は３．４×１０−
５Ｍであり、ノジリマイシン亜硫酸付加物のそれとほゾ
同程度の阻害力を有する。
ノノジリマイシンＢ亜硫酸付加物は融点１６３〜１６５
℃（発泡分解）の白色針状結晶である。
℃（発泡分解）の白色針状結晶である。
溶解性は水に溶け、エタノール、アセトン，クロロホル
ム， 酢酸エチル， エーテル等の有機溶媒には難溶又
は不溶である。
ム， 酢酸エチル， エーテル等の有機溶媒には難溶又
は不溶である。
本物質は炭素，水素， 窒素， 酸素及び硫黄を含有し
、元素分析の結果は、Ｃ２９．５６，Ｈ５．２９．Ｎ５
．６７，Ｓ１３．７２％で、本物質の分子式はＣ６Ｈ１
３０７ＮＳが最も適当である。
、元素分析の結果は、Ｃ２９．５６，Ｈ５．２９．Ｎ５
．６７，Ｓ１３．７２％で、本物質の分子式はＣ６Ｈ１
３０７ＮＳが最も適当である。
紫外部吸収は２１０〜３６０ｍμに特異吸収を示さず、
赤外部吸収曲線は第１図に示されている。
赤外部吸収曲線は第１図に示されている。
ノジリマイシンＢの遊離塩基は上記ノジリマイシンＢ亜
硫酸付加物を水酸化バリウム乃至はアンバーライトＩＲ
Ａ−４００（ＯＨ型）等の強塩基性イオン交換樹脂で処
理することにより得られる。
硫酸付加物を水酸化バリウム乃至はアンバーライトＩＲ
Ａ−４００（ＯＨ型）等の強塩基性イオン交換樹脂で処
理することにより得られる。
例えばノジリマイシンＢ亜硫酸付加物の水溶液に水酸化
バリウムを添加し放置すると付加した亜硫酸は亜硫酸バ
リウムとして沈澱する。
バリウムを添加し放置すると付加した亜硫酸は亜硫酸バ
リウムとして沈澱する。
過剰の水酸化バリウムは炭素ガスを通じ炭酸バリウムの
沈澱として除去され、その炉液中にノジリマイシンＢ遊
離塩基が存在する。
沈澱として除去され、その炉液中にノジリマイシンＢ遊
離塩基が存在する。
本操作で若干の分解物の副生が認められるが、このもの
は引続きセファデックスＧ−１０のクロマトグラフイー
に付すことにより容易に除去し得る。
は引続きセファデックスＧ−１０のクロマトグラフイー
に付すことにより容易に除去し得る。
活性区分を集め凍結乾燥するとノジリマイシンＢ遊離塩
基が白色粉末として得られる。
基が白色粉末として得られる。
本物質は７０℃で変色を始め１０７〜１０９℃で分解し
明瞭な融点を示さない。
明瞭な融点を示さない。
溶解性は水に良く溶け、メタノールにやゝ溶ける他、ア
セトン， クロロホルム，酢酸エチル， ベンゼン及び
エーテル等の有機溶媒には不溶である。
セトン， クロロホルム，酢酸エチル， ベンゼン及び
エーテル等の有機溶媒には不溶である。
本物質の紫外部吸収は２１０〜３６０ｍμに特異吸収を
示さず、赤外部吸収曲線は第２図に示されている。
示さず、赤外部吸収曲線は第２図に示されている。
本物質の呈色反応はベネディクト， エルソンモルガン
， フェーリング反応について陽性で、過マンガン酸カ
リ液を脱色するが、ピューレット、塩化第二鉄等の反応
では蔭性である。
， フェーリング反応について陽性で、過マンガン酸カ
リ液を脱色するが、ピューレット、塩化第二鉄等の反応
では蔭性である。
本物質の元素分析値はＣ３９．５６，Ｈ７．３３．Ｎ７
．７５であり、滴定曲線より得られた中和価は１８０の
値が得られ、従って本物質の分子式はＣ６Ｈ１３ＮＯ，
が最も適当である。
．７５であり、滴定曲線より得られた中和価は１８０の
値が得られ、従って本物質の分子式はＣ６Ｈ１３ＮＯ，
が最も適当である。
この分子式はノジリマイシンと同一であることから本物
質はノジリマイシンの構造異性体であることが強く示唆
される。
質はノジリマイシンの構造異性体であることが強く示唆
される。
ｎ−ブタノール・ピリジン・水（６：４：３）の系を用
いたペーパークロマトグラフィーに於いてノジリマイシ
ンのＲｆ値は０．２８であり、ノジリマイシンＢのＲｆ
値は０．３３であるから両者が相異なる化合物であるこ
とは明確である。
いたペーパークロマトグラフィーに於いてノジリマイシ
ンのＲｆ値は０．２８であり、ノジリマイシンＢのＲｆ
値は０．３３であるから両者が相異なる化合物であるこ
とは明確である。
ノジリマイシンＢはまたサルシナ・ルテアに対し抗菌活
性を示さない点でノジリマイシンと明確に区別されるが
、β−グルコシダーゼに対してはノジリマイシン同様強
い阻害作用を示す。
性を示さない点でノジリマイシンと明確に区別されるが
、β−グルコシダーゼに対してはノジリマイシン同様強
い阻害作用を示す。
例えばノジリマイシンＢの杏エムルシンβ−グルコシダ
ーゼに対する５０％阻害濃度は１．１×１０−５Ｍであ
りノジリマイシンと同程度の阻害力を有する。
ーゼに対する５０％阻害濃度は１．１×１０−５Ｍであ
りノジリマイシンと同程度の阻害力を有する。
次に本発明の実施例を示すがこれは本発明の実施の態様
を示す一例であって、本発明の範囲はこれら実施例によ
り限定されるべきものではなく、ここに例示しない多く
の変形あるいは修飾手段を用い得ることは勿論である。
を示す一例であって、本発明の範囲はこれら実施例によ
り限定されるべきものではなく、ここに例示しない多く
の変形あるいは修飾手段を用い得ることは勿論である。
実施例 １
グルコース２．５％， 大豆粉３．５％． ｓ．ｖ．
ｐ．（ソンブル・ベジタブル・プロテイン）０．５％及
び食塩０．２５％からなる培地（ｐＨ７．０）を５００
ｍｌ容の坂口フラスコ４本に１００ｍｌづつ分注し蒸気
滅菌機にて１２０℃、１５分滅菌後、ストレプトミセス
・ラベンデュレＳＦ−４２５（微工研菌寄番号第３０９
６号）を一白金耳づつ接種し、レシブロシェーカーにて
２８℃で４０時間培養し前培養物を得る。
ｐ．（ソンブル・ベジタブル・プロテイン）０．５％及
び食塩０．２５％からなる培地（ｐＨ７．０）を５００
ｍｌ容の坂口フラスコ４本に１００ｍｌづつ分注し蒸気
滅菌機にて１２０℃、１５分滅菌後、ストレプトミセス
・ラベンデュレＳＦ−４２５（微工研菌寄番号第３０９
６号）を一白金耳づつ接種し、レシブロシェーカーにて
２８℃で４０時間培養し前培養物を得る。
この前培養物を３０６容ジャーファーメンターの予め上
記培養２０ｌを蒸気滅菌したものに接種し、２８℃，通
気量１００％で７２時間通気攪拌培養し、培養ろ液１６
／を得た。
記培養２０ｌを蒸気滅菌したものに接種し、２８℃，通
気量１００％で７２時間通気攪拌培養し、培養ろ液１６
／を得た。
この炉液はサルシナ・ルテアに対する抗菌活性から２６
００μｇ／ｍｌのノジリマイシンの生産が見られた。
００μｇ／ｍｌのノジリマイシンの生産が見られた。
この培養ｐ液をアンバーライトＩＲ−１２０（Ｈ型）２
ｇの塔に通し（流速２０ｒｕｌ／分）、次にこの塔に脱
イオン水２０ｌを通過させ洗滌し、０．５Ｎアンモニア
水を通すとノジリマイシンＢはノジリマイシンと共に溶
離される。
ｇの塔に通し（流速２０ｒｕｌ／分）、次にこの塔に脱
イオン水２０ｌを通過させ洗滌し、０．５Ｎアンモニア
水を通すとノジリマイシンＢはノジリマイシンと共に溶
離される。
溶離溶をｌｌづつ分画し、ノジリマイシンＢを含有する
ノジリマイシンの画分６ｌを減圧濃縮し約２５０ｍｌと
し、次にダウエックス１×２（ＯＨ型）（１００〜２０
０メッシュ）４００ｍＡの塔に掛け脱イオン水を用いク
ロマト的に展開する。
ノジリマイシンの画分６ｌを減圧濃縮し約２５０ｍｌと
し、次にダウエックス１×２（ＯＨ型）（１００〜２０
０メッシュ）４００ｍＡの塔に掛け脱イオン水を用いク
ロマト的に展開する。
展開液を１００ｍｌづつ分画しノジリマイシンＢを含有
するノジリマイシンの両分５ ０ ０ ｍｌを集め減圧
濃縮して、濃縮液約５０ｍｌを得た。
するノジリマイシンの両分５ ０ ０ ｍｌを集め減圧
濃縮して、濃縮液約５０ｍｌを得た。
この濃縮液を氷冷しつつ亜硫酸ガスを通し、少量づつメ
タノールを加えるとノジリマイシン亜硫酸付加物の結晶
（１９．８１が析出して来る。
タノールを加えるとノジリマイシン亜硫酸付加物の結晶
（１９．８１が析出して来る。
これをろ別し再び亜硫酸ガスを通すとノジリマイシンと
ノジリマイシンＢの亜硫酸付加物の混晶（４．１）が析
出する。
ノジリマイシンＢの亜硫酸付加物の混晶（４．１）が析
出する。
これをろ別し、ろ液に更に亜硫酸ガスを通すとノジリマ
イシンＢ亜硫酸付加物の結晶が析出する。
イシンＢ亜硫酸付加物の結晶が析出する。
これを炉取し、真空乾燥しノジリマイシンＢ亜硫酸吋加
物の白色針状結晶１９ｇを得た。
物の白色針状結晶１９ｇを得た。
実施例 ２
実施例１の培地２００ｌを３００１タンクに仕込み蒸気
殺菌後（１２０℃，１５分）、予めジャーファーメンタ
ーでストレプトミセス・ラベンデュＬ−ＳＦ−４２０（
微工研申請書受理番号第３０９６号）を培養した前培養
物４ｌを種母として接種し、２８℃で、通気量１００％
、回転数１３０／分で７２時間通気攪拌培養した。
殺菌後（１２０℃，１５分）、予めジャーファーメンタ
ーでストレプトミセス・ラベンデュＬ−ＳＦ−４２０（
微工研申請書受理番号第３０９６号）を培養した前培養
物４ｌを種母として接種し、２８℃で、通気量１００％
、回転数１３０／分で７２時間通気攪拌培養した。
途中培養開始後２４時間及び４８時間後に別殺菌した１
０％グルコース液をそれぞれ５ｌづつ添加した。
０％グルコース液をそれぞれ５ｌづつ添加した。
培養液をフィルタープレスでろ別しろ液１５０ｇを得た
（ノジリマイシン生産量２０００μｇ／ｍｌしこのろ液
を実施例１の場合と同様に処理しノジリマイシンＢ亜硫
酸付加物の結晶１２．４ｇを得た。
（ノジリマイシン生産量２０００μｇ／ｍｌしこのろ液
を実施例１の場合と同様に処理しノジリマイシンＢ亜硫
酸付加物の結晶１２．４ｇを得た。
実施例 ３
ノジリマイシンＢ亜硫酸付加物の結晶５ ０ ０ｍｇを
飽和水酸化バリウム水１５ｍｌに溶解し、５０℃にて２
０分間加温すると亜硫酸バリウムの沈澱が析出する。
飽和水酸化バリウム水１５ｍｌに溶解し、５０℃にて２
０分間加温すると亜硫酸バリウムの沈澱が析出する。
次いで過剰の水酸化バリウムは炭素ガスを通じ炭酸バリ
ウムとして沈澱させ沢過する。
ウムとして沈澱させ沢過する。
ろ液は約３ｍｌまで減圧濃縮し、セファデツクスＧ一１
０（１８００ｍｌ）の塔に掛け、水にて展開し６ｍｌづ
つ分取する。
０（１８００ｍｌ）の塔に掛け、水にて展開し６ｍｌづ
つ分取する。
フラクションＮｏ１７６〜１８７を集め減圧濃縮し、凍
結乾燥するとノジリマイシンＢ遊離塩基の白色粉末２１
０〜を得た。
結乾燥するとノジリマイシンＢ遊離塩基の白色粉末２１
０〜を得た。
実施例 ４
ノジリマイシンＢ亜硫酸付加物の結晶３００ｍｇを水１
００ｍｌに溶解し、ダウエックスＩ×２（ＯＨ型）の塔
（３００ｍｌ）に１時間掛けて通過させる。
００ｍｌに溶解し、ダウエックスＩ×２（ＯＨ型）の塔
（３００ｍｌ）に１時間掛けて通過させる。
カラムは水６０ｍｌで洗滌後、通過液及び洗滌を合併し
、約２ｒｎｌまで濃縮する。
、約２ｒｎｌまで濃縮する。
この濃縮液をセファデツクスＧ−１０（８００ｍｌ）の
塔に掛け、水にて展開し３ｍｌずつ分取する。
塔に掛け、水にて展開し３ｍｌずつ分取する。
フラクションＮｏ１７１〜１８３を集め減圧濃縮し、凍
結乾燥を行なうとノジリマイシンＢ遊離塩基の白色粉末
９２ｍ９が得られた。
結乾燥を行なうとノジリマイシンＢ遊離塩基の白色粉末
９２ｍ９が得られた。
第１図は本発明の方法で製造されたノジリマイシンＢの
亜硫酸付加物の赤外部吸収曲線図であり、第２図はノジ
リマイシンＢ遊離塩基の赤外部吸収曲線図である。
亜硫酸付加物の赤外部吸収曲線図であり、第２図はノジ
リマイシンＢ遊離塩基の赤外部吸収曲線図である。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ ストレプトミセス属に属するノジリマイシンＢ生産
菌を培養してノジリマイシンＢを生産、蓄積せしめ、得
られた培養物からノジリマイシンＢを採取することを特
徴とする、新規物質ノジリマイシンＢの製造法。 ２ ストレプトミセス属に属するノジリマイシンＢ生産
菌を培養してノジリマイシンＢを生産、蓄積せしめ、得
られた培養物からノジリマイシンＢをノジリマイシンＢ
亜硫酸付加物として採取することを特徴とする、ノジリ
マイシンＢの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP50073748A JPS589676B2 (ja) | 1975-06-19 | 1975-06-19 | ノジリマイシン ｂ ノ セイゾウホウ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP50073748A JPS589676B2 (ja) | 1975-06-19 | 1975-06-19 | ノジリマイシン ｂ ノ セイゾウホウ |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS51151393A JPS51151393A (en) | 1976-12-25 |
| JPS589676B2 true JPS589676B2 (ja) | 1983-02-22 |
Family
ID=13527167
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP50073748A Expired JPS589676B2 (ja) | 1975-06-19 | 1975-06-19 | ノジリマイシン ｂ ノ セイゾウホウ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS589676B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6385420U (ja) * | 1986-11-21 | 1988-06-03 | ||
| JPS6385421U (ja) * | 1986-11-21 | 1988-06-03 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5484094A (en) * | 1977-11-21 | 1979-07-04 | Nippon Shinyaku Co Ltd | Preparation of piperidine derivative |
-
1975
- 1975-06-19 JP JP50073748A patent/JPS589676B2/ja not_active Expired
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6385420U (ja) * | 1986-11-21 | 1988-06-03 | ||
| JPS6385421U (ja) * | 1986-11-21 | 1988-06-03 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS51151393A (en) | 1976-12-25 |
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