JPS58919A - 血球たん白質およびヘムの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明嬬酸と有機溶媒の影畳下でヘモグロビンを分裂さ
せることによｐ血球たん白質とへムを製造する方法、お
よびこのようにして得られた血球たん白質とヘム、およ
び本発明の方法によシ完全にあるいは部分的に得られた
血球たん白質を含有する肉と肉製品に関する。

オーストラリア国特許明細書第４９２，５５５号（Ｃ３
ｌＲＱ　）には、低分子量で水混和性の酸性化された有
機溶媒を用いることによる原形質分離あるいは溶血によ
シ、人が消費するのに遍し九血球九ん白質濃縮物の製造
方法が記載されている。使用可能な酸として塩酸、蟻酸
、酢酸、酒石酸があり、好ましく拡塩酸であることが記
載されている。有機溶媒としてはアセトン、メタノール
あるいはエタノールでもよいが、強い脱色作用を有する
ことと容易に再生され得ることからアセトンが好ましい
ことが記載されている。有機溶媒拡溶媒と血液の１量比
が６：１で使用され、該有機溶媒は０．１から肌５重量
％の酸を含む。この方法では好ましくは、まず血液をコ
ロイドミルを用いて発泡させ、しかるのち発泡した血液
を酸性化溶媒と混合する。

この方法の改良法がオーストラリア国特許明細書第５０
２，１１２号（Ｃ８１ＲＯ）に記載されている。

この改良法では非凝固血液を乱流条件下で酸性化アセト
ンに注入すると、注入している間に非常にゆつ〈シ流れ
ているアセトンが注入点より血液を移動させる・この方
法で嬬出発物質紘赤血球の濃縮物が好ましい。この方法
を集施する温度は決定的に１要で嬬ないが、操作中温度
を一定に保つとよいことがわかった。使用温度は一１０
℃から＋３５℃の範囲でよい。

前記２つのオーストクリア国の特許明細書の紬示と比較
して、有機ｆｌＩ＃ｌＦｉ任意には選べないことがわか
つ九、アセトンやメチルエテルケトンなどの低級脂肪族
ケトンを用いると、これらの溶媒は最終的に得られた血
球よ多除去できないか、あるい抹除去できたとしても非
常に困難である（したがって経済的に受けいれられない
）ことがわかつ九、低級脂肪族アルコールの中ではメタ
ノールのみが強い脱色作用を有しているようであった。

またメタノールは血球よ）水を奪いとシ、これがあとで
血球たん白質を乾燥させるときに当然役にたつ。

いったんメタノールあるいはメタノールと水および／あ
るいはエタノールとの混合物を有ａｍ媒として選べば、
適切な酸も見つけなければならない。法律的および生理
学的理由から、塩酸が最適の酸であるように思えたが、
塩酸とメタノールあるいはメタノールと水および／ある
い社エタノールを組みあわせて、ヘモグロビンをヘムと
血球たん白質の分離に使用した場合、酸性化溶媒をヘモ
グロビンと混合すると、血球たん白質をそれ以上分離で
きないようなどろどろの固ｔｎが生成してくるようであ
る。

広範囲の集験によシ、ヘモグロビンの分離に、塩酸とメ
タノールあるいはメタノールと水および／Ｔｏるいはエ
タノールの混合液との所期の組みあわせが実用的（およ
び経済的）に使用できるの鉱、ヘモグロビンあるいは赤
血球のヘモグロビン含有濃縮物をまず非酸性化メタノー
ルあるいはメタノールと水および／あるいはエタノール
との混合物と、高温下で強く攪拌しながら（し九がって
乱流状態で）接触させ、その後で酸性化接媒と緊密に混
合する場合のみであることがわかった。ヘムと血球九ん
白質をさらに分離するには、湿式サイクロンの使用が特
に有効なようで、高い分離効率が得られ、さらに合成物
質でできている湿式サイクロンの中では腐食性の酸の使
用も可能であった。

さらに、使用した有機溶媒はできるだけ循環使用される
。

したがって本方法社酸と有機溶媒の影響下でヘモグロビ
ンを分裂させることによシヘムと血球たん一白質を調整
する方法を与え、（ハ））２０’から５０℃の温度で乱
流状態においてヘモグロビンを有機溶媒と接触させ、（
ｂ）　　このようにして得られた混合液に乱流状態にお
いて有機溶媒と酸の混合物を添加し、（Ｃ）　　得られ
九分散液を湿式サイクロンを用いて、ヘムに富む鵬と血
球たん白質に富む層に分離し、（イ）血球たん白質に富
む層を中和し、この層よ）血球九ん白質を分離し、へム
に富む層よシヘムを分離し、これらの分離液よシ得られ
た有機溶媒を少なくとも部分的に循環使用することを特
徴とする。

ヘモグロビンは、血液（クエン酸ナトリウＡ（２）よう
な抗凝固剤を加えてもよい）をたとえはウエストファリ
ア（Ｗａｉｉｔｆａｌｉａ　）分離機ＢＴＡ　ｍ　（登
録商標；８３００Ｘ、ｌのようなソリッドメウル蓋液／
液分離機を用いて血漿と赤血球の濃縮物に分離すること
によシ得られる。血漿杖全血液次ん白質含量の約６２％
を含有しておシ、たとえは肉象品に使用すると・とがで
きる。

実際に社通常少量の血漿を含む赤血球鎖線物に今度社、
高温でかつ乱流状態において有機溶媒を接触させる。こ
れは赤血球濃縮物をメタノールかあるいはメタノールと
水および／あるい抹エタノールの混合液を有機溶媒とし
て非常に激しく攪拌することＫよシ、そして好ましくは
連続的に激しく攪拌しながら２０＠から５０℃に加熱す
ることによシなされる。有機溶媒と赤血球濃縮物の混合
液は２０°から４０℃の温度（％に約３５℃）に加熱す
るのが好ましい。使用温度はヘモグロビンと有機溶媒の
体積比に多少左右されるようである。ヘモグロビンとの
混合液中に溶媒が多いほど、混合物の加熱温度を低くし
なければならない。

有機溶媒と混合し加熱した後、このようにして得られ九
混合物に有機溶媒と酸の混合液を乱流状ｍｌ（九とえば
激しく攪拌すること）下で添加する。

この有機溶ｓｉｔこの方法の第１段階で使用した溶媒と
同じであることが好ましいが、必ずしも必要で嬬ない。

塩酸も気体状態で混合液中に分配される。

使用する酸拡塩酸が好ましく、この酸は溶媒と酸の−が
少なくとも４．５以下であるような量で用いられる。一
般的に酸中の有機溶媒が０．０１から０．１モルである
ような量の酸を用いる。

有機溶媒、酸１分離したヘモグロビンの分散液は、つぎ
に湿式サイクロンによってヘムに富む層と血球九ん白質
に富む層に分離される。血球九ん白質に富む層をたとえ
に水酸化ナトリウムのような塩基で中和し、しかる後こ
の中和した層よシ公知の方法で血球たん白質を分離する
。同様にヘムに富む層よシ公知の方法でヘムを分離する
。これらの分離液よ）得られ九有機湊媒嬬少なくとも一
部は循環使用される。

１ｉ１１と図２を参照しながらヘモグロビンの分離を説
明する。

図１では血球濃縮物を自動配水ポンプ２を用いて貯蔵タ
ンク１から混合装置３へ供給する。この混合装置３へ自
動配水ポンプ２を用いて有機１１ｍ８も供給する。この
混合装置の中で赤血球濃縮物を有機溶媒と非常に激しく
混合する。この激しく混合された混合液をつぎに熱交換
１ｆ）４の中で２５℃から５０℃まで加熱する。しかし
もちろん、混合装置が同時に熱又換器であってもよい（
これは図には示されていない）、つぎに加熱し九混合液
を自動配水ポンプ２を用いて、酸貯蔵タンク５からの酸
と有機溶媒の混合液と、２番目の混合装置３の中で激し
く混合する。

２番目の混合装置３の中で激しく混合し九駿性化混合液
を、つぎにポンプ２を用いて湿式サイクロン装置Ｈ１に
供給する。この装置の上部の生成物はへムに富む層であ
シ、これを湿式サイクロン装置Ｈ２に供給する。この湿
式ナイフロン装置Ｈ２の上部の生成物を溶媒回収装置８
Ｒに送シ。

ここでへムが分離され有機溶媒嬬回収される。

湿式サイクロン装置Ｈ２の下部の生成物を２番目の混合
装置３からの酸性化混合液といっしょにして湿式サイク
ロン装置Ｈ１に供給する。この湿式サイクロン装置Ｈ１
の下部の生成物をポンプ２を用いて湿式ティクロン装ｆ
Ｈ３に供給する。湿式サイクロン装置Ｈ６の上部の生成
物を貯蔵タンク５からの酸と混合し、２番目の混合装置
３に供給する。血球たん白質に富む層よ構成る湿式サイ
クロン装置Ｈ６の下部の生成物を純粋な有機溶媒と混合
し、ポンｆ２に用いて、湿式ティクロン装置Ｈ４に供給
する。８１式サイクロン装置Ｈ４がらのヘムに富む上部
の生成物１−、血球たん白質に富む湿式サイクロン装置
Ｈ１の下部の生成物といっシょニして、この混合液を湿
式サイクロン装置）１３に供給する。

血球たん白質に富む洗浄した層鉱下部の生成物として湿
式サイクロン装置Ｈ４を離れ、ポンプ（図に示されてい
ない）を用いて塩基貯Ｒタンクから中和装置６に運ばれ
た塩基（九とえば水酸化ナトリウム）で中和する。ここ
で塩基社血球たん白質と激しく混合される。

このように中和された血球九ん白質濃縮物は、つぎに分
離機８の中で溶媒と分離される。該分離機ｔｉ７’ｈと
えば遠心分離機あるい扛デカンタ−（スクリューコンベ
アー型の水平穴ソリッドボウル型遠心分離機走とえばウ
エストファリアデヵンターＣＡ型ｈ　３２００Ｘｐ；商
標）から構成されていてもよい。分離機８から得られた
溶媒祉ポンプ２を用いてこの工程の中へ戻され、湿った
血球九ん白質ケーキｗｐはたとえば真空乾燥機の中で４
０℃の壁温度で乾燥される。

図２はこの工程を一部変更したものである。１ことでは
貯東タンク１からの赤血球澱縮物はポンプ２を用いて混
合装置３に供給され、ここで分離機８からの有［１１媒
と激しく混合される。この激しく混合され九混合液を熱
変換器４の中で２００から５０℃の間の温度にする。ｔ
たこの場合混合機は同時に熱変換器であってもよい。

２番目の混合装置３の中で、加熱された混合液Ｆｉ（湿
式ディクロン装置１Ｈ３からの）有機溶媒と酸貯蔵タン
ク５から自動配水ポンプ２を用いて添加された酸との混
合液と、激しく混合される。

この２喬目の混合装置の中で激しく混合され酸性化され
た混合液は、つぎにポンプ２で湿式サイクロン装置ＨＩ
Ｋ供給される。この装置から得られる上部の生成物はへ
ムに富む層であシ、辷れは湿式すイクロ／装置Ｈ２に供
給される。この湿式ナイフロンＨ２の上部の生成物は溶
媒回収装置ＳＲに送られ、ここでへＡが分離され有機溶
媒は層成される。

湿式フイクロンＨ２の下部の生成物は２番目の混合装置
３からの酸性化混合液といっしょにされ、湿式ナイフ四
ン装置Ｈ１に供給される。この湿式ナイクロ／装置Ｈ１
の下部の生成倫社ボンｆ２を用いて湿式ナイフ四ン装置
Ｈ３に供給される。酸Ｆｉ自動配水Ｉンプ２を用いて１
ｏのところから補ってもよい。

必要であれば、湿式ナイクｎン装置Ｈ３の上部の生成物
音熱交換ＩＩ９で加熱し、貯蔵タンク５がらの酸と混合
し、２番目の混合装置３に供給してもよい。湿式サイク
ロン装置Ｈ３の下部の生成物をつぎに湿式サイクロン装
置Ｈ５の上部の生成物と混合し、ポンプ２を用いて湿式
サイクロン装置Ｈ４に供給する。ヘムに富む湿式サイク
ロン装置Ｈ４の上部の生成物を、血球たん白質に富む湿
式サイクロン装［Ｈｌの下部の生成物といっしょにし、
ボ／ゾ２を用いてこの混合液を湿式サイクロン装置Ｈ６
に供給する。血球九ん白質に富む湿式サイクロン装置Ｈ
４の下部の生成物は純粋な有機溶媒８と混合され、ポン
プ（図には示されていない）を用いて湿式サイクロン装
置Ｈ５に供給される。湿式サイクロン装置Ｈ５の下部１
の生成倫社。

たとえと水酸化ナトリウムのような塩基で中和し、中和
装置６の中で分離機８から得られる有機溶媒と混合する
。

中和し友愈球たん白質濃縮倫社、つぎに分離機８の中で
溶媒よシ分離する。骸分離機はたとえに遠心分離機ある
いはデカンタ−（スクリューコンベアー型の水平式ソリ
ッドボウル瀧遠心分離機。

九とえはウエストファリアデヵンター、ＣＡ、Ｉｔ、３
２００ｘ＃；登録商標）で構成されていてもよい０分離
機８より得られた溶媒は一部を咳塩基と混合し１残りは
ボンｆ２を用いて工程の中へ再循積され、湿った血球九
ん白質ケーキｗｐは乾燥される。

前述した工程はパッチ式でも連続式でも実施可能で６１
％経済的な理由から連続式が好ま“しいことは１解され
るであろう。

両方の混合装置中で混合嬬非常に激しく行ない、さらに
ヘモグルビンの分離後反応混合液よりできるだけ早く血
球たん白質を除去することが１１１！でめる。またもし
へ五の存在下で血球九ん白質が中和されるとヘムは血球
たん白質に結合してしまうのでＳ血球九ん白質＃細物の
中和の前にここからできるだけたくさんへム濃細物を除
去しなければならない。

使用し次湿式ナイクロンは九とえはり、デ２ツドレー（
Ｄ、　Ｂｒａｄｌａｙ　）著、　　「’Ｉ’ｈｅ　Ｈｙ
ｌｖｏｃｙｌｏｎｅｊパーＩモンプレス社（Ｐｅｒｇａ
ｍｏｎ　Ｐｒｅｓｓ　）　、オックスフォード１９６５
の４ＬＫｊｉ１０章（第２００−２１１ページ）に評し
く１萌されている。同心円上に配置された約３６個の別
々のサイクロンの装置から成るニボパ（Ｎ１ｖｏｂａ　
）　？イクロンを使用するのが好ましい。前記のデラツ
ドレー（Ｂｒａｄｌｅｙ　）の本の中で抹このニボパ（
Ｎ１ｖｏｂａ　）型線、１０から４０個を含む複合装置
から成るドルクローン（Ｄｏｒｒｃｌｏｎ・）型の湿式
サイクロンに和尚する。

本工程で使用される溶媒はメタノール、あるいはメタノ
ールと水および／あるい嬬エタ７／１−ルの混合液が好
ましい。骸溶媒は周囲温度と同じでもよいが、ヘモグロ
１ンと有機溶媒の混合液の加熱段階との関連から、加熱
した溶媒を用いるのが好ましい。

血球たん白質の沈澱倫社また水に再湊解させることもで
亀、たとえに噴霧乾燥によシ、においと味のよい血球た
ん白質の粉末が得られ、これ線内製品、食品の成分、乳
化剤（たとえば発泡剤）などに使用することができる。

本発明はまた、完全にあるいは部分的に本発明の方法を
用いて得られた血球たん白質を含有する肉および肉製品
に関する。

本発明はまた、完全にあるいは部分的に本発明の方法を
用いて得られたヘムから完全にあるいは部分的に成る。

鉄含有医薬組成物に関する。

本発明の方法を用いて赤血球濃縮物の鉄含有量（約３０
００から４００　Ｏｒｐｍ　）を１最終的に得られた血
球たん白質の鉄含有量の約３５０　ｐｐｍ　Ｔ。

るいはそれ以下まで下げられる。

本発明を次の例において説明するが、これは決して本発
明の保験範囲を制限するものではない。

実施例 図１に示した装置（この中で湿式サイクロンはすべて３
６個の装置よル成るニポパ（Ｎ１ｖｏｂａ　）湿式サイ
クロンである）で、ターボミキサー（ウルトラートラッ
クス（Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ　）、登鎌商標）の中
で、４．０５？の赤血球を３０リツトルのメタノールと
激しく温合した。ついで熱又換器中テとの混合液を３５
℃にした。２番目のターボミキサ−（タルト２−ト２ツ
クス（Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ）、登録商標）の中で
、加熱し要理合液を、１０．５Ａのメタノールと０．６
５リツトルの３６％塩酸の混合液と激しく混合した。ポ
ンプを用いて、酸性化した混合液を湿式サイクロンＨ１
に添加した。この混合液線図１に示したようにさらに処
理された。

中和のためＫ　Ｏ，−２０リツトルの３３％水酸化ナト
リウム溶液を用い、中和混合液を分離するために遠心分
離を行なつ九、このようＫして得られたグロビンすなわ
ち血球九ん白質の湿ったケーキを真空乾燥器中で４０’
Ｏの空気で乾燥し、最終的に鉄含量が２５０　ｐｐｍの
１．５′ＫＩＰの乾燥粉末を得々。

【図面の簡単な説明】

図１は血球濃縮物よ如ヘモグロビンを分離する工程を示
す。 図２社図１を一部変更した奄のである。 代理人　桟材　皓 外４名

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）酸と有機溶媒の影響下でヘモグロビンを分裂させ
   て血球たん白質とへムを製造する方法において、 （ａ）　　乱流状態で２０℃から５０℃の温度において
   ヘモグロビンを有機溶媒に接触させ、（ｂ）　　このよ
   うにして得られた混合液に、乱流状態で有機溶媒と酸の
   混合液を加え、 （Ｃ）　　得られた分散液を湿式サイクロンによシ、ヘ
   ムに富む層と血球九ん白質に富む部分に分離し、 （ｄ）　　このようにして得られた血球たん白質に富む
   層を中和し、この層より血球を分離し、ヘムに富む層よ
   シヘムを分離し、この分離操作中に得られる有機溶媒は
   少なくとも一部は微積使用される仁と１＊＊とする、上
   記血球たん白質及びへムの製造方法。 （２）有機溶媒がメタノール、あるいはメタノールとエ
   タノールおよび／Ｔｏるいは水の混合物であることを特
   徴とする特許請求の範囲第１項に記載の方法。 （３）酸が塩酸であること１に％黴とする、特許請求の
   範囲第１項に記載の方法。 （４１（ｂ）工程において、酸中の有機溶媒の濃度が０
   ．０１から０．１モルであるような酸を用いることを特
   徴とする特許請求の範囲第１項に記載の方法。 （５）へモグロげンと有機溶媒の混合液を２０°から４
   ０℃の間の温度まで加熱することｔ％像とする、特許請
   求の範囲ｊ１１項に記載の方法。 （６）　　ヘモグロビンと有機溶媒の混合液を表面掻取
   熱又換器中で加熱することを特徴とする特許請求の範囲
   ＃１１項に記載の方法。 （７）（Ｃ）工程において、できるだけ早く血球たん白
   質を分散液から除去することを特徴とする特許請求の範
   囲第１項に記載の方法。 （８）　　血球九ん白質濃縮物の中和の前に、へム濃縮
   物を血球たん白質澱縮物よシ除去することを特徴とする
   特許請求の範囲８１項に記載の方法。 （９）湿式サイクロンが、１０から４０個のユニットを
   含む複合装置から成ることを特徴とする特許請求の範囲
   第１項に記載の方法。 Ｑｌ　　特許請求の範囲第１項から第９項までのいずれ
   か１項に記載の方法によシ完全にあるいは部分的に得ら
   れ九血球九ん白質よｐ部分的になる肉製品あるい社内。 α１１　　特許請求の範囲第１項から第９項までのいず
   れか１項に記載の方法によシ完全にあるいは部分的に得
   ら−Ｉ′Ｌ九ヘムよ如完全にあるい抹部分的になる鉄含
   有医薬組成物。