JPS58187191A - ブドウ状菌の感染に対して選択的に効力を発揮する抗生物質およびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 病気に対して人体の自然の保護機構の１つを構−１２− 成する正常のａＦｌｉのフロラに対してではなく、４Ｉ
定の病原性微生物に対して効力を発揮する狭いスペクト
ルの抗生物質全開発することが兼い間探求されてきた。

多くの既知の抗生物質に対してきわめて抵抗性であり、
かつ選択的殺菌剤を必費とする有機体は、ブドウ軟球Ｉ
Ｉ、たとえば、貢色ツＶつ軟球＠　（ＳｔａｐｈｙＬｏ
ａｅｅａｍａ　ａｕｒａｍａ）および表皮ブドウ状球菌
Ｃ８ｔａｐｈｙｌｏａｏｅｃｗａ　ｇｐｉｄｍｒｍｉｄ
ｉｍ）を包含する。これらのダラム陽性有俄体は創傷お
よび人工器官の感染に関連し、そしてＳ、ａｘデー％口
は広範な種類の全身的および局所的な病気にも包含され
てきた。タリンメマイシン、ｒンタｉイシン、す７アン
ピシンおよびメチシリンのような。

ある数の広いスペクトルの抗生資質はこれらの細菌に対
して有効であるが、一方このようなブドウ軟球−に対し
て選択的抗微生物活性をＭするスペクトルの抗生物質は
、従来開発されてきていない。

−１３中 したがって１本発明の目的は、λ色ブドウ状体■（Ｓ、
　　ａｃｒ＃ｍｓ）および表皮ブドウ軟球ＶＳ＜Ｓ。

ｇｐｉｄｍｒｍｉｄｉｍ）　Ｋ関連するブドウ状体園に
対して選択的抗微生物活性を有する狭いスペクトルの抗
生り質の製造法、およびＮ記抗生′４Ｊ質を含有する組
成りを提供することである。本質の個の目的は。

ｓ次的適用において有効であり、正常の植物相を無傷に
残し、そして制限された吸収のため、とくに危篤である
患者において、全身的廊性の危険ｊ排除する。このよう
な抗生＃買を提供することである。

本発＠Ｏ方法および組成物の他の目的および利点は、好
ましい実施態様の、Ｓ付図＠を増殖した。

以下の詳細１ｋｔＪＲ＠を考察すると明らかであろう。

本発明によれと、微生物のロシア・プントカリオｔ　Ｃ
Ｒｍｔｋｉａ　ｄａｓｔｏｅａｆｉｏａａ）　（Ｄｌｒ
規ｆ＆が発見すした。ｆｒ蜆な株、以後ロシア・プント
カリオー　１４− ｔ　（Ｒｏｄｍｓｔｏａａｒｔ・ａｇ）のホウランド（
＃ｏｗｊａｓｄ）株と呼ぶ、ヒトの咽頭の正常の好気性
ｍ−のフープの培養物から回収された。好気的に発酵さ
せると、新規な株は新規な抗生物質、以恢［スタフイ四
シデイン（ａｔすｈｙｌｏｅｔｄ軸）」と呼ぶ、を生産
する。スタフイロシデインは、狭い抗生スペクトルを有
し、そしテＳ、　　ａｕｒｍｕａおよびＳ、ａｐｉｄｍ
ｖ−ｍｔｔａａ　ｔ−包含するブドウ状球菌に対して選
択的な抗微生物活性を示す。

ホウランド株ＯＮ粋な培養物は、受は入れ番号ＡＴＣＣ
３１９１ｇでアメリカン磨タイプ・カルチャー嗜コレク
Ｖ　Ｍ　ｙ　（ｔｈｅ　ｋｎａｖｉｃａ＊　Ｔｌｌｐｍ
Ｃｕｌｔｕｒｅ　　Ｃｏ１１ｅｔＩｔｉｏｎ、　　Ｒｏ
ａｋｖｉＬＬａ、Ｍａｒｙｌａｎｄ）に供託された。こ
の生きている有機座の二次培養物は、ＡＴＣＣの永久的
収集物から要求に応じて入手できる。

ホウランド株（ＡＴＣ０８１９１Ｂ＞Ｆｉ、同化で寝る
炭素、１ｉ１素および無機ｖｌＪ質の源を含有する水性
栄養培地中で、液中好気的条件下に１発酵すると、スタ
フイ誼シデインを生産することが発見された１発酵の間
生産された細胞の艦またはムレイン〔文献において従来
１蛎されているように。

ｍ１ｉＡレイｙ＃ｉ短か一ペプチドを介して憤かけされ
たダリカン鎖（ａｔデａｎｄ）からなるペプチドグリカ
ンノヘテａＳリマーである（Ｓｃｈｌｅｒｉｆａｒ、　
Ｋ。

Ｂ、およびＫａｍｄｌｍｖ　、　Ｏｏ、　”Ｐａｐｔｉ
ｄｏｇＬｙｃａｎＴｌｐｍｔ　　ｏｆ　Ｂａａ＊ｍｒｉ
ａｌ　　Ｃａ１ｌ　　Ｗａｌｌｓ　　ａｎｄ　　ｔｈｅ
ｉｒＴａｘｏｎｅｆｆｉｉｇ　Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ
ｓ”、　Ｂａｃｔ、　　Ｒｘｖ。

３＠（４）ｅ４Ｇ丁−４７７（１９７２］）からなるス
タフイ四シデイン含有生産物は、その恢。

それ自体既知の分別法により分離され、回収される（Ｐ
ａｒｋ、　Ｊ、　Ｔ、−シよびＨａｙｃｏｃｋ　、　Ａ
　、　”　ＡＦｒ８ａｔｉｏｓ＠ｇｔｅｓ　　Ｐｒｏｃ
ｅｄｕｒｅ　　ｆｏｒ　　Ｓｔｕｄｉｍｓ　　ｏｆｔｈ
ｅ　Ｓｙ＊ｇｈａｍｉａ　ａｆ　Ｃａｌｌ−ｗａｌｌ　
Ｍｕｃｏｐｍｐｔｉｄｍａｓｄ　　ｏｆ　　ｏｔｈｅｒ
　　Ｐｏｌｙｍｅｒｓ　　＜ｓ　Ｃａ１ｌｓ　　ｏｆ　
Ｓ互二ｌ船ｔ：１ｓｅｏａｅｓａ　　ａｓデーｍｓ”　
　、　　Ｊ、　　ＧＥＬ　　ＭｉｎデＬ　　Ｌｉ　　１
ｇ４ｓ−２ｓｓ（１ｅ＠ｏｌ）。

Ｓ、ａｂｙｓｓｓおよびＳ、　　ａｐｔｄａｒｍｉｄｉ
ｍに対して選択的に効力のある抗生物質を生産するホウ
ランド株の発酵は％１９７０年４月２９日〜２月意日の
り・アメリカン・ペディアトリック・ソサイアテイ（Ｔ
ｈｅ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｐａｄｉａｔｒｔｃ　Ｓｏｇ
４ｍｇｇ）およびザ・ソサイアテイφフォー・ペディア
トリック噛リサーチ（Ｔｈｅ　５ｏｃｉｅｔｙ　ｆｏｒ
　Ｐｍｄｉａｔｒ４ａＲ−ロａｒｅｈ）のシン／Ｖつ五
において提出され７ｔ。

本発明者の２人の［咽頭の有機体からの抗ブドウ状体画
物質（Ａｎｔｔａｔａｐ五１１１＊ｅｏａａａｉ　Ｓｕ
ｂａｔａｓａｄａ）ｆｒｏｗｎ　ａ　Ｐｈａｆｙｎｇｍ
ａｌ　Ｏデｇ＠ｓ（ｍｓ）と題する論文に述べられた。

ホウランド株は仁の論文においてｌＷＪ足されず、その
時、公の墳養物収果所に供託されず、その中に開示され
たスタフイロシデイン會有細廁ムレイン発酵生産物に分
離さＩＬ丁１回収されず、あるい＃ｉ％注づけされなか
った。

Ｒ６ｄａｎｔｏｃａｒｉｏａａｌｔｉ、従来、アメリカ
７−タイｆ−カルチャー・コレクションＷＣｌ６ＡＴＣ
Ｃ１７９３１で供託された原型体に勝ついて、同足され
た。　ＳｃｈＬｇｉｆｔｔｒ、　ａｔ　ａＬ、　、　ａ
ｕｐｒａに記載されている細胞ムレインの輿型的なぺｌ
チドグリヵｙ（１４造に基づくと、　Ｒｏｄａｎｔｏｃ
ａｒｉｏａａのＡ’ｌ’ＣＣ１７９３１株から製造され
たムレイン（仁こでは「ＡＴｃｃムレイン」と呼ぶ）は
下の式！に示す反復単位を含むポリマー構造を有すると
、ＩＷｌじられるニ ー　１８− 式ｌ Ｎ−アセチルダリコ　　　　　　Ｎ−アセチルムラミン
サミン単位　　　　　　　　　　戯事１ＶペデチＹ単位
　　　　　　　　ペグチｙ自架橋示したようにＳ　ＡＴ
ＣＣムレインの推定上のポリマーの構造は、Ｎ−アセチ
ルグルコサミンおよびＮ−アセチルムランンばの反復率
ＩＩｔからなる炭水化物の主鎖、ペプチド単位、および
このペプチド単位を他のペプチド単位へ粘合するペプチ
ド自架＃ｋを含有する。

大ていの細菌中の炭水化物の王釦ハ同様に、式！に示す
ような交互するβ−１，４−結合Ｎ−アセチルｒダルサ
きンおよびＮ−アセチルムラミン＃単位からなる。今日
１で、６裡知の震糧のみが文献に記載されてきており、
そして谷このような変種はＮ−アセチルムラミン酸中に
見出されてきた（ＧｈｓＬｙａｅ算、　ＪｏＭ、　、　
Ｓｈｏｃｋｍａｎ、　、、ｒ、　７Ｊ、。

”Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　Ｐａｐｔｉａｏｇ
ｌｙｃａ＋″。

＠ＨａｅｔｍｒｉａＪ　　Ｍａｖａｂｒａ＊ａａ　　ａ
ｎｄ　Ｗａｌｌｓ＠、Ｌａｉｖｇ。

ム優Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ＊　Ｍａｒｃａｌ　Ｄｍｋｋｇｒ
ｒ、　Ｉｎｃ、　、　Ｂ３マ（ｉｏ７ａ））。

しかしながら１本発明の新規なホウランド株の発＃によ
り生産されたｍ胞ムレイン（ここでは「ホウランドムレ
イン」と呼ぶ）ハ、炭水化物の主鎖中のＮ−アセチルム
ラミン酸単位中の直換およびその上のペプチド内架橋の
組成の両者に関して％Ａ　１’　ＣＣムレインと異なる
と信じられる。この仮説に、以後計述するＡ　’１”　
ＣＣムレインおよびホウランドムレインの両者のアミノ
酸および７２ノ糖の分析で子側される。このような分析
は、ホウランドムレインのムラミンば対グルコサミン含
量の比がＡＴＣＣムレインにおけるこのような部分の比
より鳴３分の１小さく、そしてホウランドムレインがＡ
ＴＣＣムレインのアラニン金型のほば２分の１を金層す
ることを示す。両省の事実により、それぞれのベプチド
ダリカンの炭水化物の主鎖の構造が真なっておシ、多分
ホウランドムレインＯＮ−アセチルムラミン酸琲位けそ
の上にア−２１− 建ノ基をもたないｓＫよりちらに腸−侠されていること
が示唆される。後者の＃に実により、それぞれの高分子
のベプチＶ自架慟の栴Φが異なっていることが示簀され
る。

以上から、ホウランドムレインのＩＥ確な化学的構造は
、現仕九られていないことが場解できない。

しかしながら、下により詳しく丁すように、それは、ホ
ウランド株の発酵生産物から回収さｎ、少なくとも２０
Ｘ１０”　〆ルトンに少ｌくとも等しい分子量を有し、
以ｍｓ定するアミノ酸およびアミノ槍の概算含１を有し
、そしてＳ、　　ａｕｒｇｕｓおよびＳ、　　ｇｐｉｄ
−ｒｒｎｉｄｉａを色目するブドウ状球菌に対して選択
的に効力を発弾する。抗生＠質のスタフイＩシデインを
官有する。ペプチド−グリカン４リマーからなるとして
、・四の方法で軸性づけることができる。

ｆＪＬ在のデータ以前において、スタフイロシデイ２２
− ンは情造的に特性づけられなかった。しかしながら、ス
タフイロシデインはホウランドムレインの尚分子の固有
部分であると信じられる。

スタフイロシデインがホウランドムレインの４リマー構
危の一座部分であるという証拠は、ホウランドムレイン
を種々のムレイン分％　（ｍｕｒｏｌｙｔ４４）酵素と
反応させることにより、提供される。こうして、一方に
おいて、ホウランドムレインを酵素のアミラーゼ、りが
ヌクレアーゼＡ、ホスホリパーゼＡ、キモトリプシン、
プロナーゼ、またはトリプシンのいずれかで処理したと
き、その抗微生物活性は変化しないｅ−１ｔｌＪ方にお
いて、ムレインを消化できる＃素、たとえば、リゾチー
ム（Ｎ−アセチルムラミダーゼ活性をもつ）、リンスタ
フイン（Ｎ−アセチルグルコサミニダーゼｈ−よＯＮ−
アセチルムラミル−アラニンアミダーゼを含有する）、
またはパシデイオミセテス分解酵１Ｆ、＜Ｎ−アセチル
ムラ電ルーアラニンーアミダーゼを含有する）で処理す
るとき、ホウランドムレインの抗微生物活性は破壊され
る。仮搬の酵素は、ホウランドムレインの炭水化物の玉
鎖の砧分子間の結合あるいはその炭水加物の主−とペプ
チド単位との閣の結合を、加水分解する。これらの結果
に基づき、ホウランドムレインの無傷の炭水化物の鎖ハ
。

スタフイロシデインの活性からなるか、あるいはスタフ
イロシデインの活性に立体的に必須であり。

そして抗性物質はこうしてホウランドムレインの高分子
の一体部分であるように、思われる。

その上、スタフイロシデインのホウランドムレインへの
結合はｒルＶ過の実験により示唆される。

この実験において、ホウランドの発酵肉汁をセファデッ
クス（Ｓｍｐｈａｄｍｇ）　Ｇ　−７５（ビーズ形の橋
かけｆ＊、Ｉｃ　ト９３／吸着ｒｈ、　Ｐｈａｒｍａｅ
ｉａ　Ｉｓｓ、かｂ商業的に入手できる）カラムに通過
させ、そして活性分画は、尚塙員度の溶液（０，５モル
のＭＣＩへ８モルの尿素で溶−した後でさえ、あるいは
肉汁試料を１ｓの健敏ドデシルナトリウム中で沸とうさ
せ、それを０．１　％の―鐵ドデシルナトリウムで＃離
した後、カラムの一イド体積から回収された。

ダルのカラム（球状タン−譬り質についてａｏｏ。

〜８へ０００の分子皺の分解範囲をもつ）はスタフイロ
シデインを含有分画を分離しないので、スタフイロシデ
インはムレモ高分子子へ共有結合していると、推測され
る。

上に示したように、抗生物質のスタフイロシデインは、
ｉｔ、ｔｔｍｎｔｏｃａｒｉｏａａの新規な休（ホウラ
ンド株）を発酵することにより生首される。スタフイ■
シデイン含有発酵生ｍ物は、ホウランドムレイン２よび
その活性断片（それらＦｉ、なかでも１発酵肉汁中に存
在する）を単離することによって得られる。スタフイロ
シデイン自体は、ホウ−２５− ランドムレインから分離されなかったが、その高分子―
造へ共有結合しかつその一部分であると１６しられる。

新規な微生物およびそれをＳ＠書してスタフイ四シデイ
ン含有生腫物ケ製造する方法、それらの生産物を臀性づ
けかつ七ｎらの選択的抗倣生吻活性を実証づけるデータ
、および抗生物質を含有する生ｗ１物の使用法の飲明を
、以下に詳述する。

ホウランド（Ｈｏｗｌαｎｄ）休（Ａ’ｌ’ＣＣＣＣ８
１９ｌ＃′ｉ、アメリカンｅタイプ・カルチャー伊コレ
クシｗｙ（ｔｈｅ　　ムーｒｉｇａｓ　Ｔｙｐｅ　　Ｃ
ｕ１ｔｕｒｅ　　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ）によ）、その
形態および生化学反応の雨着に基づいて、　Ｈ０ｄｓ＊
Ｌｅｅａｒ４ｏａａとｌＩ’Ｊ雉された。Ｒ９ｄｇｓｔ
・Ｃａデｉ・１＠は、カタラーゼの生型、硝叡塩の還元
、エスクリンの加水分解、およびダルコース、マルトー
ス、″Ｖンノース、メレソトース、サ２６− リシン、スクロースおよびトレハロースカラの線生成に
対して陽性であると報告されている（Ｂａｒｇｍｙ’ａ
　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆ　ＤｇｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅＢ
ａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ、第８版）、脳心臓注入（Ｄｉ
ｆ−・ＢＨＩ）肉汁中に接種し、３７℃で４８時間生育
させた麦、ホウランド株はこれらの反応の各々に対して
陽性である。同様に、全細胞の加水分解および炭水化物
の発酵および生産物の分析の結果−Ｒｏｔｔａｎｔｏｅ
ａｒｉｏａａと合致する。

ホウランド株は、さらに次のように特性づけできる富 （ａ）ＢＨＩ寒天上で３７℃において７２時間の生育後
の形態１コロニーは全境界をもつ平滑なりリーム状で灰
色であるが、各コロ＝−内の個々の細胞はダラム陽性で
るや、形状が球桿−に似ており、フィラメント状の形庫
を含まず、そして抗酸性である。

（＆）　　前述のよう＆Ｃ８７℃において４８時間の生
育後の生化学的反応（試験結果は反厄開始後７日目に鋳
ｊ定する）富 ヒツジの血の溶血　　　　　　　　　−インドール　　
　　　　　　　　　　−グオウダスープμスヵウェル （Ｖｏｇｕｅ−Ｐｒｏａｋａ＊ｔｒｒ）　　　　　　　
　−ゼラチナーゼ　　　　　　　　　　　＋硝緻塩の還
元　　　　　　　　　　　十カタラーゼ　　　　　　　
　　　　　　＋ウレアーゼ　　　　　　　　　　　　　
−レシチナーセ　　　　　　　　　　　　−リＪＩ−髪
　　　　　　　　　　　　　　　　−Ｈｌｌの生産　　
　　　　　　　　　　−馬尿酸塩の加水分解 エスクリンの加水分解　　　　　　　十でんぷんの加水
分解　　　　　　　　　−（４１）　　＃生成反応１ アＶニトール　　　　　　　　　　　−アイダメリン　
　　　　　　　　　　−Ｌ−アラビノース　　　　　　
　　　　−セロビオース　　　　　　　　　　　　−ズ
ルシトール　　　　　　　　　　　　−エリスリトール
　　　　　　　　　　　　−Ｄ−フルクトース　　　　
　　　　　　＋Ｄ−ガラクトース　　　　　　　　　−
Ｄゆダルコース　　　　　　　　　　＋ダリセロール　
　　　　　　　　　　−ダリコーｒン　　　　　　　　
　　　　　−１−イノシトール　　　　　　　　　一一
２９− イヌリン　　　　　　　　　　　　　−ラクトース　　
　　　　　　　　　　　　−ｉルトース　　　　　　　
　　　　　　　　　＋Ｄ争マンニトール　　　　　　　
　　−Ｄ−マンノース　　　　　　　　　　　＋Ｄ−メ
レジトース　　　　　　　　　＋メリビオース　　　　
　　　　　　　　−ラフイノース　　　　　　　　　　
　　　−Ｌ−ラムノース　　　　　　　　　　　−Ｄ−
リが−ス　　　　　　　　　　　　　−すりシン　　　
　　　　　　　　　　＋Ｄ−ソルビトール　　　　　　
　　　−Ｌ−ツルが一ス　　　　　　　　　　　−スク
ｑ−ス　　　　　　　　　　　　＋トレハロース　　　
　　　　　　　　　＋Ｄ−キシロース　　　　　　　　
　　ｍ−全細胞の加水分解智！唯一の炭水化物とし−３
０− てのガラクトースを含み、＄７アオノビメリン酸（ＤＡ
Ｐ　）および乎うビノースを含まない、および （−）炭水化物の発酵の絨終生産物富乳ばおよびコハク
酸を含むが、プロピオン酸を含まない。

ホウランド株の形態および生化学的反応ｉｊ、検ｆまた
は反応の時の培養物の生育の程度に依存して、変化しう
ろことが理解されるであろう、こうして、たとえば、異
なる培養条件にさらした培養物Ｆｉ、フィラメント状な
らびに球桿麺状の細胞を含みつる。

スタフイロシデイン含有生産物のｌ！８！造法本発明に
よれば、ホウランド株またはその突然質異体を、同化し
うる炭水化物、窒業および無機塩類の源を含有する水性
栄養培地中で、液中好気的条件下でニスタフィ叶ディン
にょる実質的な抗ａＦ１４を６性が生腫されるまで％培
誉する。

スタフイロシデインへの生物学的変俟の発酵条件は、好
気的液中発＃による珈々の抗生物質を生産する現在知ら
れている方法ｖｃｓｉ−いて、用いられている条件と一
般に同一である。発ｎＪ＠地は、通常の栄養物質および
無慎物質を官有する。適当な栄養物質の例ｕ、　ｌＷＩ
化できる炭素源、たとえば。

多ｌＩｉ類またはでんぷん類、または多１曲アルコール
類、たとえばダリセロールである。同化できる輩巣源は
、タンノ９り質、タン・９り区の加水分ｙｓ物。

原案、トウモロコシ浸出液、ヘプトン、酒造家の可溶成
分、魚粉および他の常用物質の使用により供給されうる
。普通の１イオンおよび陽イオンは。

無毒の塩類の形で供給される。倣蓋元木たとえばマンガ
ン、コバルト、亜鉛、ｍなどは上の化合物中の不＃４＊
とじて、水道水の１史用により、あ暮いはこれらの倣亀
元嵩でことに凝縮された浴液の特定の添加によ）ａ得ら
れる。

発酵の他の一般条件、たとえば、水素イオン一度、温度
１時間１通気速度、Ｗ！種物の調製、滅鉋。

接種などは慣用されているものであシ、他の抗生物質の
製造に用いられている条件Ｋ１１ｌ似する。

発酵は通常の条件下で約２４〜７２時間通行させる。こ
の時間はホウランド株の培養物のすぐれた生育を得るた
めに通常要求される時間である。

その後、抗生活性物質Ｆｉ、全有機体から、ムレインを
精製するために案出され九手順により、たとえば、　Ｐ
ａｒｋ、　ａｔ　ａｌ、　、　μｍ１の方法により、全
細胞を収穫し、トリクロロ酢酸とともに加熱し。

緩衝し１次いでトリプシンで処理することＫよ如。

回収される。別法により、ホウランドムレインＦｉ。

既知の技術により、たとえば、トリプシン％ポリオキシ
エチレンエーテル（たとえａ’、　”Ｔｒｉｔｏ欝ｒ−
１０６＠）およびドデシル健蒙ナトリウムで処理するこ
とにより、−収できる。

３３− ホウランド株の発酵法およびスタフイロシデイン含有ホ
ウランドムレインの回収のとくに好ましい実施例１−、
下に記載する。

実施ｆＩｌ１ ＭＨＩ培地中のスチフイロシデインの製造ホウランド株
を１強制ψ気堵重益により脳心臓注入肉汁（Ｄｔｆｇ＠
ＢＨＩ　）中で３５℃において。

おだやか和振曽することにより通気しながら、生育嘔せ
た。６５時間培養佐、細胞をＩ　Ｑ、ＯＯＯＧで３０分
間遠心分離することにより収穫し１次いで蒸留水で５ｌ
１９１洗浄した。

次いで細胞をｌＯ−のトリクロロ酢酸中に懸濁させ、９
！ｉ’ｃ［２０分間加熱した。懸濁液を１へ０００Ｇで
２・分間遠心分−し、生ずる沈Ｓｔ−α１モルのνＥ　
７．０のリン酸堰緩＊液で５回洗浄した０次いで沈澱を
１００ミクロダラム／−のトリプシンをさらに含有する
リン数基緩衝液中に書−３４− 懸濁し、そして懸濁液を３７℃において２時間培養した
。

このようにして回収されたホウランドムレインを、その
後蒸貿水でさらに４回洗浄した。生ずる１質は白色の粉
末状物質であり、これは、下に示すように、Ｓ、　　ａ
ｕｒａｓａおよびＳ、ａｐｉｄａｒｍｉｄｔｍの両者に
対して、きわめてすぐれた抗微生物活性を示した。

実施例２ １Ｉｔ＠ｓキス／スクロース培地中の発酵にょるスタホ
ウランド株を実施例１におけるように培養したが、ただ
し培養は４’Ａｔ）＠用級の酵母エキス（Ａｒｄａｒｎ
ｉｎａ　　ＺとしてＹｅａｓｔ　Ｐｒｏｄｕｃｔ　Ｃｏ
、から入手できる）および炭素源として２慢のスフ胃−
スタフイロシデイン含有午産吻の舟性づけ前述のようＫ
ＩＥｊＪ収しかつスタフイロシデイン活性をもつホウラ
ンドムレインに、上に示すように。

ペプチドグリカン高分子からな、６ように思われる。

しかしながら、ホウランドムレインの化学Ｗｉｔ造は。

対応するムレインのアンノばおよびアミノ楯の含量の変
ＮｈにＬ）一部分証明塾ｔするよう和、ＡＴＣＣムレイ
ンの化学構造と異なる。

アミノ酸およびアミノ楯の百重は、マイクロがア系（ａ
ｓｃｒｅ＆ｅｒｇ　ａｙａｔｍｔｎ）により％ｏ−フタ
ルジアルデヒドフルオレセン−Ｉ＃−キン−エルマー型
データブーセッサ、積分器およびマイクロプロセッサと
インターフェースする為感度検出系（Ｄ％デ１属）を用
いる分析によりＩＩＩＪ　Ｍした。アミノ酸類およびア
々ノｓｕｍの定量的値は、２種のムレイｙのり四マド！
ラムを真正標準のクロマトグラふと比較することによ〕
得た。アしｔ酸含ｍ＃ｉ。

６ＮのＨＣｌ中で１１０″Ｃにおいて真壁中で１１４時
間加水分解後、１４１Ｊ定した。アミノ糖の分析＃ｉ。

おだやか凌加水分屏（２Ｈのｌ１Ｃ１中でｔｏｏ℃にお
いて２時間）後実施した。

次の比ｉ分析が得られた。

ψ　８１　・ 表　　厘 ホウランドムレインおよびＡ７’　ＣＣムレインの試料
のアミノ酸およびアミノ楯の含首の比較 Ａｒｇ　　　　　　　α１Ｇ　　　　　　　　０．０５
ムラミ７＊　　　　　　α４７　　　　　　　　　　（
Ｌ６３本　アラニンＶＣ関して表わした１２４時間の〃
ｌ水分Ｓ俊のアき）＆朔、２時間のカロ水分解後のアき
ノＳａ。

−３８− ホウランドムレインのスタフイロシイデイン金層生産物
を、躊ｍ＞ロマトダラフ分析により、さらに特性づけ、
ＡＴＣＣムレインと区別した１分析は１次のように実施
した。

２００ｑのホウランドムレイン！＊ｒｔｉＡ１’ＣＣム
レインを、１０１ｇのりゾチーム、１０■のりソスタフ
ィン、０．０２％のナトリウムアシドおよび０．０１モ
ルのリン酸塩とともにｐＨ７，０において４８時間３７
℃の水浴中で培養した。ムレイン消化物をｌへ０ＯＯＧ
で２０分関連心分離し、０．４１！ミクロンのフィルタ
ーで０５過した。Ｐ液を凍結乾燥し、０．５１１７の蒸
留水中に再懸濁した。

セファデックス（Ｐ；ｍｐｈａｄｍｚ）　Ｇ　−１０Ｐ
ｋ　（ビーズ形、槁かけデキストラン吸収ダル％Ｐｋａ
ｒｒｎａ−ｃｉαＩｎｅ、から商業的に入゛手できる）
を、ｒ＃造会仕の指示に従って、オートクレーブ処理し
、カラムに詰めた。カラムを滅−した蒸留水で展開し。

用いる炭水化物についての分町に１分画中の炭水化物の
存在を実証した。での後、分１１．ＩＩをＩ＝ｍ乾燥し
、５０１の蒸留水中に溶かした。

いくつかの分（−％ｎ−アセチルムラミン酸および舊−
アセチルグルコサミンを不活性化したシリ１ｙＰｋＧ板
上に付層させ、イソゾロ・ｔノール／酢販／水７５１１
０！１５Ｖ／ｖ／ｌを用いて１方向に展開させた。ｉＦ
ｉ、燥後、板を５％のアンモニア性硝酸銀で噴精し、１
００℃で１０分間、あるいはスポットが明らかとなるま
で、加熱した。

表■ ＡＴＣＣムレインおよびホウランドムレインの酵素消化
物からのセファデクスＧ−ｔｏの分画中の糖類の＃ＪＷ
Ｉクロｉトダラフィーｎ−アセチル　　　　　外−アセ
チル グルコサミン＝α６５　グルコサミン＝α６！Ｂ　　　
　　　ａ５８±（ＬＯ１Ｇ、５　ａ±Ｑ、ＯＩＣＱ、４
１ｆＯ Ｄ　　　　　　Ｏ，５９±０．０１　　　　　（Ｌ５９
±０．０１Ｅ　　　　　　０．７４±０．０１ ｎ−アセチル ムラミン緻　＝０．７３ 本　Ｒｆは、化付物の移動距離対浴味の移動距離スタフ
イａシデイン含有生産物の抗倣生物粘性上の実施例１に
記載するようにｉ・遺したホウランドムレイン試料の抗
微生物スペクトルを♂り定し。

く 同様に生産されたＡＴＣＣムレインのスペクトルと比較
した。下表層に普約した試験ＶＣおいて、各試験有恢体
１ｋ１ｍ（Ｄ脳心臓注入肉汁中に、５チのヒラＶの血液
を象加して、あるいＬＩｉ添加しないで（特定の有慎捧
に依存する）接種し、−夜３７“Ｃで培養した。特定の
試験有Ｐｋ庫の５より少ないコロニーが生育した、５Ｉ
ｓのヒツジの血液を含有すルＡ　ｘ　ラ−−ヒ：／トｙ
　（Ｍｕａｌｌａｒ）ｔｉｎｔ　ｏｎ）寒天の１ｄｆｉ
りのホウランドムレインの微生物の数トして、抗倣生物
凝度を決足した。下に示すように。

同じ磯度のＡＴＣＣムレインは抗倣生物効力をもたなか
った。

Ｓｔａｐｋｙｌｏｃｏｃｇｕａ ｌ−３３μｇ／ｄ 　−ＮＫ １−＆３μ１１／１ ｈｎｔｍｒｏｂａｃｔｍｒ　　ａｍｒｏｇａｎｍｇ　　
　　　　！ｉ　　　　　　　　　　　　　　　ＭＫＥｎ
ｔｍｒｏｂａｃｔａｒ　　ａＬｏａｃａｍ　　　　　　
　　５　　　　　　　　　　　　　　　ＮＫｆ’ｒｏｔ
ｍｍａ　ｒｇｔｔｇａｒｉ　　　　　　　　Ｓ　　　　
　　　　　ＮＫＰｒｏｔｍｓａ　　ｍ１ｒａｂｉＬｉｔ
ｒ　　　　　　　　　　　　５　　　　　　　　　　　
　　　　ＮＫＰｒｏｔｇ％ａ　　ｖ＊４ｇａｒｉａ　　
　　　　　　　　　　’　　　　　　　　　　　　　　
　Δ′ＫＫ１ｇｂａｉｍｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｓ
　　　　”　’　　　　　　　　　ＮＫで示す場合リン
酸緩衛堪類溶液、ｐＨ７，４，中にｌＣに希釈した１Ｋ ＮＫ ＮＫ ＮＫ ＮＫ ＮＫ ＮＫ ＮＫ ＮＫ ＮＫ ＮＫ ＮＫ ＮＫ ＮＫ ＮＫ　　　　　　　Ｉ　　ＮＫ＝致死な−ＮＡ　　　　
　　　　の数を表わす。

ＮＫ ＮＫ ＮＫ ＮＫ あるいは　　　　　　　　　　　−４３ξＳ、α１４ｒ
ｔｒｕａに対するスタフイロシデイン含有生座吻の選択
的Ｍ、倣生智効釆の追〃口の証明は、Ｓ。

αＵデーｖ、ａのｍｍ竜に欠乏する４１ｒ’４ＪＣＬ−
形）Ｋ対する試−によって得られる。Ｌ−形を、ａｏｒ
ｔチルの’Ｉ’ｒｉａ　ｔｉ　Ｃｌ、ｐ　Ｈ？、　０中
の５優のＮａＣＬ。

２（ｌのウマの血清、および９００ミクロダラム／−の
メチシリンを含有する脳心臓注入嘩大中で＃発させた。

ホウランド肉汁（６５時間の４１１後）および実施例１
に記載するように製造したホウランドムレインおよびＡ
ＴＣＣムレインの試Ｎ（４０ａｙ／ｓ＋Ｊ）を、０．０
５％ルのＴｒｉｍＨＣｌ、ｐＨ７，０，中（８５％０Ｎ
ａＣ１中［１ｗ＋＠＆ｃ　ｌｓ　ｌＯ＆Ｃ希釈した。

細胞壁に欠乏するＳ、αｓｒｇｓｓ試験株で１試験板上
にすしをつけた０次いで種々の試験＃液（純粋な緩１Ｌ
ふ・よびホウランド肉汁、および前述のように調製した
ホウランドムレインお・よＯｘｃｃムレイン）のス４ッ
トを、球天也上につけた。

３７℃において４８時間培誉し九慄、谷揃の特定の場所
Ｋ＞ける透明区域１＋（低い活性）から４＋（高い活性
）に定量的［４敏つけた。下表Ｖかられかるように、ホ
ウランド肉汁およびホウランドムレインの両者ｔｉ４＋
の活性を示したが、これに対して緩ｌｌ液およびＡ　ｉ
’　に　にムレインの両者の試料は活性を示さなかった
。

表　ｙ Ｓ、　　ａ％デー藝−の細胞＠に欠乏する形についての
ホウランド株およびＡＴＣＣ株のムレインノ抗緩衝液　
　　　　　　　　　なし ホウランド肉汁　　　　　　　４＋ ホウラｙトムレイン　　　　　４＋ Ｓ、　　ａｐｉｄａデｗｒｔｄｔｍの培養−に対する本
発明のスタフイロシデイン含有生ｌＩｉ智の抗微生物活
性も。

証明された。下に示すように、スタフイロシデインは、
Ｓ、−峠ｉｄａローｄｉｍについて殺園性かつ−ｍ嬉購
性である。

＠ｌ試験に２いて、　Ｓ、　　ｍｐｔｄａｒ＊ｂｉｄｉ
ａの一夜の培養物をＢＨＩ肉汁中に接種した。上の実施
例１ｖｃ配躯するように６１６時間尭酵した俊生童され
。

１１１００の希釈で４＋そして１１４０Ｇの希釈で１十
の抗微生物活性を有する。ホウランド肉汁を、その後、
　Ｓ、ａｐｅｄ−デ嵩４４４ｍの４時間俊の培誉響の第
１肉汁試料に加え九、こうして、約１１１ＯのＳ、ａｐ
ｉｄ−デｍｌｄｉｍｓホウランド肉汁の着後の希釈が、
第１肉汁試料において得られた。

机　リ４ｄｍｒｍｉｄ４ｍ肉汁試料（ｍ付図面中の―巌
２）およびＳ、すｉｄａデｍ１ｄｉｅｔホウランＦ肉汁
試料（図面において曲９１１０）中の生存しうみｍ−４
６− 胞の濃度を一定し、プロットした。同様に、光吸収性（
６１１Ｏｓａにおいて）ｆ、　Ｓ、　　ｓｐｉｄｅｒ−
ｗｈ４ｄｔｍ肉汁拭科（ｍ付図面において曲、１ｊ４）
およびＳ、−シシｄ＠ｒａ（４４ｓｔホウランＶ肉汁試
料（図面において曲１１４０）の両者について測道した
１１雇４０で示される吸収蝋はホウランド肉汁自犀の元
字効米について補正されており、こうして曲線４および
４０はスタフイロシデイン官有ホウランド肉汁によって
Ｓｏｇｐｉｄａｒｍｉｄｉａの溶解時に得られた濁りの
減少のみを示す６図面において見ることができるように
、　ｓ、　　ａｐｉｒｔｍｒｍｉｄｉａ　４Ｖ吻の生存
率νよび濁り度は、ホウランド肉汁の媛稙後、１１るし
く減少した。

それ以上の試験ＩＩｃおいて、ホウランドムレインの活
性ｆ、　Ｓ、　　ｍｐｉｄａｒｒｎｉｄｉａ株に対して
、ＡＴＣＣムレインの活性と比較した。こうして、掘々
の希釈皐のホウランドムレインおよびＡ　７’　ＣＣム
レイー４フ− ンを、　ｘｎｔノｓ０ｇｐｉｄａｒｍｉｄｔａ株の肉汁
患濁液に加えた。試料を３５℃において３時間碩しく振
虜しながら坩責した。下表ＹＫ示すように、ＡＴＣＣム
レインの跨加ｒ６．　Ｓ　、　　ａｐｉｄｍｒｖｎｉｄ
ｔｍに対するホウランドムレインの抗微生物活性を競合
的に阻止することが発見された。

表マ Ｓ、ａｐｔｄｍｒｍｉｄｉａ　ｌｆｃ対するホウランド
ムレインの抗微生物活性へのＡＴＣ’Ｃムレインの作用
スタフイνシデイン　　　　　　　　　１．ｌＸ１Ｇ”
スタフイロシデイン＋１８１００　　　　　　Ｇホウラ
ンドムレイン スタフイロシデイｙ＋１　！　５００　　　　１ＸＩ　
Ｏ”　　’−ホウランＦムレイン ４８− ホウランド＋１！１０　　ＡＴ（：Ｃ ムレイン マウスの予備的生体内試験に２いて１本発明により製造
されたスタフイロシデイン官有分画は宿主動物に対して
明らかなｍａｔ示さないことも証明された。すなわち、
ホウランド休の発酵からの上置みＯ肉汁のオートクレー
ブ処理した希釈しないものを用いる第１実験に２いて、
０．５１１７の試験物質を２４＃間以内に１３〜１５．
ｉＪのマウスに腹腔内注射したとき、全体の毒性は検出
されなかった。

それ以上の実験において、ホウランド株の下位固体群（
ａｓｈ−ｐｏｐａＬａｔｉｏｎ）の発酵時に回収される
細胞ムレインは、マウスの外科的ｍｔｌＷの感染のモデ
ルの直ちの処置においてＳ、　　ａｕｒｏｒａに対して
活性を示し、用いる試験乗汁下で急性の毒性作用をまっ
たく−発しなかった。　　　　、スタフイロシデイン含
有材料を、ホウランド株の荒い相Ｃｒｏ＊ｇｈ　ｐｈａ
ｓｅ）の下位（５）体群（アメリカン番タイプ・カルチ
ャー・コレクションにＡＴＣＣ３１９１９で供託されて
いる）から調製した。荒い相のコロニーは乾燥し、しわ
がよっており、−ｔして崩壊し、不規則なヘリをもち、
各コロニー内に個々の細胞はダラムｉｓ性の５棒であシ
。

多形産性であり、ディｌテロイドＣｄｉｐｔｈｍｒｏｉ
ｄ）および球菌の形ならびに多くのフィラメントの形で
あった。細胞は抗酸性ではなかった。荒い相の下位個体
群の生化学的反応性は全体のそれ＃ＩＣ＠似シ、荒い相
がグオウダスープロスカウエルＣＶｏｇａａ−Ｐｒｏａ
ｋａｓａｒ）試験において弱い反応を与え、そしてラフ
ィノースと反応して皺を生成するということにおいて相
違した。荒い相のｍ胞プレインはホウランドムレインと
岡じ狭い辿択注の抗−Ｓ　Ｏ・ 微生物スペクトルを示したが、その抗微生物活性は約１
０分の１のみであった。

ブラシーが１質よりも有意に大さいが、ｒフタマイシン
含有局所用配合物よりも壱慧に小さい活性Ｆｉ、荒い細
胞ムレインを用いて、マウスの試験において証明された
。

スタフイロシディン含有生産ｉの投与および使用ここに
説明するよう＃ＩＣ製造されたスタフィロシデイン含有
配合物は、ブドウ状球菌類および他の感受性有機体を局
所的に抑制または処置するために投与することが、現在
好ましい０局所的に投与するとき、活性＃！Ｊ質を適当
な担体、たとえば、りφ−ム、ｆＡ−またはローション
と混合する。ｒルに基つ〈担体、たとえに、アクリル黴
ポリマー（たとえば、　Ｂ、ＪＰ、　Ｇｏｏｄｒｉｃｈ
　Ｃａｒｐ、からＣａｖｋ・ν０１９４・として＃ｉ東
的に入手できるｏ、　ｇ饅の一濁液）を使用する仁とが
、現在好ましい・−５１− 一般に、約ｌＬｓ〜約５０憾の活性＃Ｉ實をこのような
担体と混会して、適当な局所用軟膏を形成することがで
きる。この局所用軟膏の配合、適用、および投与ハ、、
よく知られている。

Ｓ、ａｓｒｇｍａおよびＳ、　　ａｐｉｄｓｒｍｉｄｉ
ａに対する本発明の製剤の抗細菌作用の機構は、現在知
られていない。しかしながら、に）ムレイン分解（ｍ％
デａｔ１１ｔ＝ａ）酵素の消化（活性についての無傷の
炭水化物の結合の重要性を鉦明する）、（＆）スタフイ
■シデイン含有生産物Ｆｉ細胞４１１に欠乏する細−を
殺すという事実、および（−）活性および不活性のムレ
インの炭水化物の主鎖の差を示すアンノ緻分析は、可能
な生物学的機構の証拠を提供する。

細胞壁における灰石を含まないが、無傷の炭水化物の結
合を含むムレインの生合成における工程は。

液状担体のサイクルにおいて起こる。スタフイ四シデイ
ンからなるムレイン成分ＩＩ′ｉ、廂質の担体分ｓｇ− 子を不可逆的に粕合し、並単位が細胞膜から細胞膜の中
に、あるいは細胞膜から細胞膜の中ＶＣ，移動すること
を防止゛１きる。

もちろん、本発明は、上の仮説により、その１］舵な反
応慎檜に快定されないことを８！解すべきである。

【図面の簡単な説明】

図ｇＢｆＪ、　Ｓ、　　ｇｐｉｄｍｒｖｎｉｄｉａの培
養物の生育力および濁り度についての本発明の新規な抗
生物質の効果を崗解するグラフである。 −５３− 第１頁の続き ＋７）発　明　者　カサリン・スプラントアメリカ合衆
国ニュージャーシ イ州０７６０５レオニア・グレンウ ッドアベニュー２１ （７■発　明　者　パイパー・ウェルディアメリカ合衆
国ニューヨーク州 １００１４ニユーヨーク・ブリーカ ーストリート３５０ （重比　願　人　ブレイス・レイディ アメリカ合衆国ニュージャーシ イ州０７６０５レオニア・グレンウ ッドアベニュー２１ ■出　願　人　カサリン・スプラント アメリカ合衆国ニュージャーシ イ州０７６０５レオニア・グレンウ ッドアベニュー２１ ■出　願　人　パイパー・ウェルディ アメリカ合衆国ニューヨーク州 １００１４ニユーヨーク・ブリーカ ーストリート３５０ 手続補正書（自発） 昭和５８年５月２７日 特許庁長官　若杉和夫　殿 １、事件の表示 轡願昭５８−５４０７９号 物質およびその製造法 ３補正をする渚 事件との関係　　特許出願人 ４代　理　人〒１０７

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 Ｌ　Ａ７’Ｃ（、’３１９１ｇの同定有性を有し、抗生
   物質のスタフイ０−／ディｙ　（ａｔａｐｈｙｌｏｅｉ
   ｄｔｍ）を生産する仁とができ、黄色ブドウ状球菌Ｃ８
   ｔａｐｈｙｌｏｃｏｅｃｗａ　ａｕｒａｓａ）　ｓｒよ
   ひ表皮ブドウ状体鉋（Ｓｔａｐ五ｙＬｏｃｏｏａｕａ　
   ａｐｉｄｍｒｍｉｄｉｍ）　ｆ包含するブドウ状体−に
   対する選択的抗倣生吻活性を有し、同化できる炭素、窒
   嵩２工び無機物質の源を含肩する水性栄讐培庵中の発酵
   時に回収可能な重にある％値化りロシア・プントカリオ
   サ（Ｒｏｔｈｉａ　ｄａｎｔｏｃａｒｉｏａａ）の生物
   学的に純粋な層ＩＩ物。 ！（ａ）７２時間の生育後の形ｍｔコロニーは全境界を
   もつ平檜なりリーム状で灰色であり、一方間コロニー内
   の個々、の細胞はダラム陽任であり。 形状が球桿ＩＩＫ似ており、フィラメント状の形態を含
   まないかあるいは抗酸性である。 （＆）４８時間の生四後の生化学的反応：ヒラＶの血の
   静置　　　　　　　　　−インドール　　　　　　　　
   　　　　−グオウダスーデロスカウエル （Ｖ６ｇａｍ−Ｐｒｏａｋａｓａｒ）　　　　　　　　
   　−ゼラチナーゼ　　　　　　　　　　　＋硝酸塩の還
   元　　　　　　　　　　　十カタラーゼ　　　　　　　
   　　　　　＋ウレアーゼ　　　　　　　　　　　　　−
   レシチナーゼ　　　　　　　　　　　−リノ豐−ゼ　　
   　　　　　　　　　　　　　　　−Ｈ，Ｓの生産　　　
   　　　　　　　　−馬尿ば塩の加水分解　　　　　　　
   　−エスクリンの加水分解　　　　　　　十でんぷんの
   加水分解　　　　　　　　−（＃）　　ｌＲ生成反応富 アドニトール　　　　　　　　　　　−アでダメリン　
   　　　　　　　　　− Ｌ−アラビノース　　　　　　　　　−セロビオース　
   　　　　　　　　　　−ズルシ′トール　　　　　　　
   　　　　−エリスリトール　　　　　　　　　　　−Ｄ
   −フルクトース　　　　　　　　　＋Ｄ−がラクトース
   　　　　　　　　　−Ｄ−グルコース　　　　　　　　
   　　＋グリセロール ダリコーｒ７　　　　　　　　　　　　　　″″ｉｉ−
   イノシトール　　　　　　　− イヌリン　　　　　　　　　　　　〆−ラクトース　　
   　　　　　　　　　　　　−マルトース　　　　　　　
   　　　　　＋Ｄ・マンニトール　　　　　　　　　−Ｄ
   −−ンノース　　　　　　　　　　＋Ｄ−メレジトース
   　　　　　　　　　＋メリビオース　　　　　　　　　
   　　　−ラフイノース　　　　　　　　　　　　−Ｌ−
   ラムノース　　　　　　　　　　　−Ｄ−りが一ス　　
   　　　　　　　　　　　−サリシン　　　　　　　　　
   　　　　　十り−ソルビトール　　　　　　　　　−Ｌ
   拳ツルが−ス　　　　　　　　　　　−スクロース　　
   　　　　　　　　　　　＋トレハローズ　　　　　　　
   　　　　　　＋Ｄ−キシロース （ｄ）　　全細胞の加水分牌物１唯一の炭水化物として
   のガラクトースを含み％ＤＡＰおよびアシビノースを含
   まない、および （ａ）　　炭水化物ｐ発酵の厳科生産＠富乳酸およびコ
   ハク酸を含むが、プロピオンＨ１ｌｔ−言筐ない。 ことを特徴とする特許請求の範囲第１項配賦の主１学的
   に純粋な培養物。 ＆　発酵時に細胞ムレインを生腫することができ。 （ａ）　　次のＷＸアンノ酸およびアきノ檀の含量を有
   するペプチドダリカンポリマーを含有してなＡｍｐ　　
   　　　　　　　　　　α１６ｒｈデ　　　　　　　　　
   　　　　　　αｏ９Ｓａｙ　　　　　　　　　　　　Ｏ
   ，０７５− Ｇｌｕ　　　　　　　　　　　　　　　Ｏ，４３Ｑｌｙ
   　　　　　　　　　　　　０．１６４　Ｊ（１，００ Ｖａえ　　　　　　　　　　　　　　０．１６ＩＪｅ　
   　　　　　　　　　　　　　　Ｏ，０９Ｌ、、　　　　
   　　　　　　　　　　０．２０、Ｔｗ、　　　　　　　
   　　　　ｏ、ｏａｐｈｌ　　　　　　　　　　　　　　
   　Ｏ，０ｇＡＶ８　　　　　　　　　　　　　０．３４
   Ｈ４ａ　　　　　　　　　　　　　　　　０．０４Ａｙ
   ｇ　　　　　　　　　　　　　０．１０ムチ電ンＩ２０
   ・４７ ダルコサイン　　　　　　１．０４８および（＆）　　
   リゾチームおよびリンスタフインで消化４１に、　シリ
   カｙルＱ板上でイソプロ・９ノール／酢赦／水系におけ
   る薄層クロマトグラフィーによ９次のＲｆ値會示し； 　６− 〔舊−アセチルダルコサミン＝ｏ、ｇｈ〕（動　　　　
   　　　　　　　　α５８±０．０１（３）　　　　　　
   　　　　　α５９±０．０１（４）　　　　　　　　　
   　　　０．７４±０．０１〔５−アセチルムラ２ン酸＝
   α７３〕廖寂よび （Ｃ）狭いスペクトルの抗生のスタフイロシデインを結
   合して有し、前記スタフイロシデインは黄色ブドウ状体
   陳（Ｓ、ａｓｃｒ−Ｕａ）および衣皮ブドウ状体＠　（
   ３０ｇｐｉｄ−デｍ＜ｄ＜ｇ）を含むブト・つ状体鉋に
   対して選択的に効力を特徴する 特許請求の範囲第１項記載の生物学的に純粋な培貢物。 ４（ａ）次の概算アミノ酸およびアミノ楯の含量を有す
   るヘプチドダリカンポリマーを含有してなり冨 アミノ酸　　　　　　アラニンに関する中、鼠含被Ａｓ
   ｐ　　　　　　　　　　　　Ｏ，１６Ｔｈｆ　　　　　
   　　　　　　　　　０．０９Ｓａｗ　　　　　　　　　
   　　　　Ｏ，ＯＴＧｌｍ　　　　　　　　　　　　０．
   ４３Ｇｊｙ　　　　　　　　　　　　Ｕ、１ｇＡＪａ　
   　　　　　　　　　　　１．００ＶＧＩ　　　　　　　
   　　　　　Ｏ，１ｇ１１ａ　　　　　　　　　　　　０
   ．０９Ｌ−％　　　　　　　　　　　０．２０Ｔνデ　
   　　　　　　　　　　　０８０６Ｐｋｇ　　　　　　　
   　　　　　Ｏ，０８Ｌｙｅ　　　　　　　　　　　　０
   ．３４ｔｅａ　　　　　　　　　　　　０．０４Ａｒｇ
   　　　　　　　　　　　　Ｏ，１０ムフイン＆　　　　
   　　　０．４７ ダル；すイン　　　　　１．０４茅および（６）　　リ
   ゾチーム２よびリソスタフィンで消化後、シリカダルＧ
   板上でイソプロ／＃ノール／匪鍍／水系における溶層ク
   ロマトダラフイーによｆｉ＆のＲｆ値を示し客 〔ｎ−アセチルダルコサばン＝α６５〕（２）　　　　
   　　　　　　　　　α５８±０．０１俤）　　　　　　
   　　　　　　　０．５９±０．０１（４）　　　　　　
   　　　　　α７４士αＯ１〔鴨−アセチルムラミンｆ！
   に＝０．７３３蓼および （ｇ）　　狭いスペクトルの抗生物質スタフイロシデイ
   ンを結合して有し、前記スタフイロシデインは黄色ブド
   ウ状体＠（Ｓ、ａ％ｒｇｓｇ）および表皮ブドウ状Ｒ薗
   （Ｓ９ｍｐｉｄ−肖ａｊｄ４ａ）を言む１ドウ状球−に
   対して選択的に効力を発揮する。 特許請求の範囲第ｌまたは２項記躯の生物学的に９− 純粋な培養物の発酵生′＃：＠ρ・らＬＩ−Ｉ駆された
   細胞ムレインを含有してなる。スタフイロシデイン言有
   生産物。 ＆　特許請求の範囲第３項記載の生物学的に純粋な培養
   物の発酵生産物から回収された細胞ムレインを含有して
   なる、スタフイログランデイン含有生産管。 亀　同化しうる炭素、屋素および無慎堪傾源を含有する
   水性栄養培地中で、９＋計請求の範囲第１項記載のａ＋
   ｍｒ、液中好気的条件下で、スタフイロシデインによる
   実質的な抗細−１゛占性が生産されるまで、培養するこ
   とを袴憾とする。黄色ブドウ状球＊（Ｓ、　　α％ｒ＋
   ５ｕＪ）および表皮ブドウ状体−（Ｓ、　　ｍｐｉｉｄ
   ｍｒｍｉｄｉａ）　ｆ包含Ｔルフｙｔ状ＲＦｓに対して
   選択的抗倣生ｇＩ活注を有する。狭いスペクトルの抗生
   物質スタフイロシデインの製造法。 ７、　スタフイロシデインを結付して有する細胞−１０
   − ムレインを発酵肉汁から分離することにより、スタフイ
   ロシデイン含有生慮吻を回収することを含む、待Ｗ＋請
   求の範囲第６項記載の方法。 ＆　同イ１しうる炭巣、菫累および無慎場類源を百臂す
   る水性栄養培地中で１％−許側求の範囲第２項記載の細
   鉋全、液中好気的粂件下で、スタフィロシデインによる
   実″に的な抗細−活性が生産されるまで、培養すること
   を特徴とする。黄色ブドウして選択的抗微生物活性を有
   する、狭いスペクトルの抗生物質スタフィロシディンの
   製造法。 張　スタフイ四シデインを結合して鳴する細胞ムレイン
   を発酵肉汁から分離することにょシ、スタフイロシデイ
   ン含有生産物を回収することを含む、待ｃｆＦ請求の範
   囲第８項記載の方法。 １０、同化しうる炭本、ｉｉｉ＊および無慎塩類源−１
   １− を含有する水性栄養培地中で−’ｆ＋ｉＲ”請求の範囲
   第３項記載の細菌を％液中好気的乗汗下で、スタフイロ
   シデインによる実質的な抗ｌ１ｄｌ薗活性が生産される
   まで、培養することを特徴とする。黄色プＦつ状球菌（
   Ｊ、　錦デ＃％１）および表皮ブドウ軟球＠　（Ｓ、　
   　ａｐｉｄａｒｖｍｉｄｉａ）　ｆ包含するブドウ軟球
   −に対して選択的抗微生物活性ｆＭする。狭いスペクト
   ルの抗生スタフイロシデインの製造法。 ＩＬ　　スタフイロシデインを結合して有する細胞ムレ
   インを発酵肉汁から分離することＫより。 スタフイロシデイン含有生産物を回収することを含む、
   籍許請求の範囲第１０］ｔＪＦｉｅ載の方法。 １！Ｗ１１１！Ｆ１１１求の範囲第６〜１１項のいずｎ
   かに記載Ｏ方法に製造された。スタフイロシデイン含有
   生童物。