JPH08510245A - コントラスト剤として使用するための２−ピリジルメチレンポリアザマクロシクロホスホン酸、それらの錯体および誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 Ｇｄ、ＭｎまたはＦｅイオンと一緒に不活性な錯体を形成し得る２−ピリジルメチレンポリアザマクロシクロホスホン酸化合物およびそれらの誘導体を開示する。この錯体の全電荷を変化させることでインビボ生局在化を変えることができる。この錯体は診断用コントラスト剤として有用である。

Description

【発明の詳細な説明】 コントラスト剤として使用するための２−ピリジルメチレンポリアザマクロ シクロホスホン酸、それらの錯体および誘導体 本発明は、磁気共鳴画像形成（Ｍａｇｎｅｔｉｃ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ ｉｍ ａｇｉｎｇ）（ＭＲＩ）におけるコントラスト剤として使用するための２−ピリ ジルメチレンポリアザマクロシクロホスホン酸、それらの錯体および誘導体であ るリガンドに関する。本発明のより良好な理解を得る目的で、ＭＲＩに関する簡 単な背景を以下のセクションに示す。 ＭＲＩは、動物の体、好適には人の体内軟組織の充分に解像された断面画像を 作り出す非侵入性診断技術である。この技術は、かけられた磁場内で整列する磁 気モーメントを有する特定の原子核（例えば水プロトン）が示す特性［数学方程 式で定義される如き；Ｇ．Ｍ．Ｂａｒｒｏｗ、Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓ ｔｒy、第３版、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ、ＮＹ（１９７３）参照］を基礎にし ている。整列後、この磁場による整列からプロトンを外す外部無線周波数（ＲＦ ）パルスをかけることによってその平衡状態を乱すことができる。ＲＦパルスを 停止すると、その核は平衡状態に戻り、そしてこれが起こるに必要な時間が緩和 時間（ｒｅｌａｘａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ）として知られている。この緩和時間は スピン−格子（Ｔ１）およびスピン−スピン（Ｔ２）緩和として知られる２つの パラメーターから成り、そしてこれが、分子の編成度合に関する情報およびプロ トンとそれを取り巻く環境との相互作用に関する情報を与える緩和測定値である 。 生きている組織の水分含有量は大きく、そして組織の種類間で含有量および環 境が変化することから、プロトンの密度および緩和時間を反映 した生物有機体の診断画像が得られる。検査する組織内に存在しているプロトン の緩和時間（Ｔ１およびＴ２）の差が大きければ大きいほど、その得られる画像 のコントラストが大きくなる［例えばＪ．Ｍａｇｎｅｔｉｃ Ｒｅｓｏｎａｎｃ ｅ ３３、８３−１０６（１９７９）］。 並列した水プロトンのＴ１およびＴ２緩和率は対称電子基底状態を有する常磁 性キレート物の影響を顕著に受ける可能性があり、そしてこれに関する上記キレ ート物の有効度は、部分的に、磁気モーメントを生み出す不対電子の数に相関す ることが知られている［例えば、Ｍａｇｎｅｔｉｃ Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ Ａｎ ｎｕａｌ、２３１−２６６、Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ（１９８５）］。ま た、この種類の常磁性キレート物を生きている動物に投与した時にこれが種々の 組織のＴ１およびＴ２に対して示す効果は、磁気共鳴（ＭＲ）画像で直接観察可 能であり、ここでは、このキレート物が局在する領域内で増大するコントラスト を観察することができることも示されている。従って、毒性のない安定な常磁性 キレート物を動物に投与してＭＲＩで得られる診断情報を高めることが提案され た［例えば、Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｏｆ Ｂｉｏｌ．Ｅｎｅｒｇｅｔｉｃｓ １ 、７５２−７５９（１９７８）：Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２５、５０６−５１３ （１９８４）；Ｐｒｏｃ．ｏｆ ＮＭＲ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｓｙｍｐ．（１９８ ０年１０月２６−２７）；Ｆ．Ａ．Ｃｏｔｔｏｎ他、Ａｄｖ．Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈ ｅｍ．６３４−６３９（１９６６）］。この様式で用いられる常磁性金属キレー ト物はコントラスト増強剤またはコントラスト剤と呼ばれる。 ＭＲＩコントラスト剤の設計を行う時に考慮に入れることができる常磁性金属 イオン類は数多く存在している。しかしながら、実際上最も有 用な常磁性金属イオン類は、ガドリニウム（Ｇｄ⁺³）、鉄（Ｆｅ⁺³）、マンガン （Ｍｎ⁺²）および（Ｍｎ⁺³）およびクロム（Ｃｒ⁺³）である、と言うのは、これ らのイオン類は大きな磁気モーメントを有することで水プロトンに対して最も大 きな影響を及ぼすからである。非錯体形態（例えばＧｄＣｌ₃）の場合、この金 属イオンは動物に対して毒性を示すことから簡単な塩形態では用いられない。従 って、有機キレート剤（またリガンドとも呼ぶ）の基本的な役割は、常磁性金属 が動物に対して示す毒性をなくす一方、取り巻く水プロトンがＴ１およびＴ２緩 和率に対して示す望ましい影響を保持することにある。 ＭＲＩ分野における技術は極めて広範なことから、徹底的に示すことを意図し ない以下の要約は単にこの分野の再吟味そして恐らくは構造的に類似していると 思われる他の化合物に関する再吟味として示すものである。米国特許第４，８９ ９，７５５号には、Ｆｅ⁺³−エチレン−ビス（２−ヒドロキシフェニルグリシン ）錯体およびそれの誘導体を用いて動物の肝臓または胆汁管におけるプロトンＮ ＭＲ緩和時間を交互にする（ａｌｔｅｒｎａｔｉｎｇ）方法が開示されており、 これは、他の多様な化合物の中でピリジンマクロシクロメチレンカルボン酸が使 用可能であることを提案している。米国特許第４，８８０，００８号（米国特許 第４，８９９，７５５号のＣＩＰ）にはラット肝臓組織の追加的画像形成データ が開示されているが、追加的錯体は全く示されていない。米国特許第４，９８０ ，１４８号には、非環状化合物であるＭＲＩ用ガドリニウム錯体が開示されてい る。Ｃ．Ｊ．Ｂｒｏａｎ他［Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ． 、１７３９−１７４１（１９９０）］は、二官能マクロ環状ホスフィン酸化合物 を数種記述している。Ｃ．Ｊ． Ｂｒｏａｎ他［Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．、１７３８− １７３９（１９９０）］はトリアザビシクロ化合物である化合物を記述している 。Ｉ．Ｋ．Ａｄｚａｍｌｉ他［Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３２、１３９−１４４（ １９８９）］は、ＮＭＲ画像形成用ガドリニウム錯体の非環状ホスホネート誘導 体を記述している。 米国で現在入手可能な市販コントラスト剤は、ガドリニウムとジエチレントリ アミンペンタ酢酸の錯体［ＤＴＰＡ−Ｇｄ⁺³、Ｓｃｈｒｉｎｇ製Ｍａｇｎｅｖｉ ｓｔ（商標）］およびＤＯ３Ａ誘導体［１，４，７−トリス（カルボキシメチル ）−１０−（２−ヒドロキシプロピル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロ ドデカナト］ガドリニウム［Ｓｑｕｉｂｂ製Ｐｒｏｈａｎｃｅ（商標）］のみで ある。Ｍａｇｎｅｖｉｓｔ（商標）およびＰｒｏｈａｎｃｅ（商標）は非特異的 ／かん流剤であると考えられている、と言うのは、これらは自由に細胞外流体内 に分布した後、腎系を通して有効に除去されるからである。Ｍａｇｎｅｖｉｓｔ （商標）は脳病変の診断で極めて価値有ることが確かめられている、と言うのは 、血液／脳関門の破壊を伴ってこのコントラスト剤がその影響を受けた領域の中 にかん流し得るからである。Ｇｕｅｒｂｅｔは、Ｍａｇｎｅｖｉｓｔ（商標）に 加えて、マクロ環状かん流剤［１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチ ル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカナト］ガドリニウム（Ｄｏｔ ａｒｅｍ（商標）を市販しており、ヨーロッパで現在入手可能なのはこれのみで ある。Ｐｒｏｈａｎｃｅ（商標）の方がＭａｇｎｅｖｉｓｔ（商標）よりも副作 用が少ないことが分かっている。他に可能性のある多数のコントラスト剤が種々 の開発段階にある。 本発明は新規なリガンドに向けたものであり、これらは、式 ［式中、 Ｔは、独立して、 であり、 ここで、 Ｒは、ＯＨ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキルまたは−Ｏ−（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）であり、 Ｒ¹は、ＯＨまたはＯＣＨ₃であり、 Ｒ²は、ＮＯ₂、ＮＨ₂、イソチオシアナト、セミカルバジド、チオセミカルバジ ド、マレイミド、ブロモアセトアミドまたはカルボキシルであるが、但しＴ部分 が （ここで、Ｒ¹およびＲ²を上と同様に定義する） であるのは１つのみであることを条件とする］ で表される２−ピリジルメチレンポリアザマクロ環状化合物およびそれらの誘導 体またはそれらの薬学的に許容される塩類である。 上の式（Ｉ）に関して、 全てのＴがＰ（Ｏ）ＲＯＨ［ここで、ＲはＯＨである］に等しい式（Ｉ）で表 されるリガンドまたはそれらの薬学的に許容される塩類を本明細書ではＰＤ３Ｐ と呼び、 全てのＴがＣＯＯＨに等しい式（Ｉ）で表されるリガンドまたはそれらの薬学 的に許容される塩類を本明細書ではＰＤ３Ａと呼び、 全てのＴがＰ（Ｏ）ＲＯＨ［ここで、Ｒは−Ｏ−（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）である ］に等しい式（Ｉ）で表されるリガンドまたはそれらの薬学的に許容される塩類 を本明細書ではＰＤ３（Ｏ−Ａｌｋ）Ｐと呼び、そして 全てのＴがＰ（Ｏ）ＲＯＨ［ここで、ＲはＣ₁−Ｃ₅アルキルである］に等しい 式（Ｉ）で表されるリガンドまたはそれらの薬学的に許容される塩類を本明細書 ではＰＤ３（Ａｌｋ）Ｐと呼ぶ。 インビボ生局在化および画像コントラストに有利な影響を与える特定の全電荷 を得るように本発明の錯体を設計することができる。例えば、金属イオンが＋３ である場合、下記を得ることができる： −３の全電荷［式（Ｉ）がＰＤ３Ｐの場合］、これは石灰化（ｃａｌｃｉｆｉ ｃ）組織用コントラスト剤として有用である； −２の全電荷［式（Ｉ）が有する２つのＴが−ＣＨ₂−ＰＯ₃Ｈ₂に等しくそし て１つのＴにＣＯＯＨ基が存在している場合］、これは石灰化組織用コントラス ト剤として有用である； −１の全電荷［式（Ｉ）が有する１つのＴが−ＣＨ₂−ＰＯ₃Ｈ₂に等しくそし てその他のＴにＣＯＯＨ基が存在している場合］、これは石灰化組織用コントラ スト剤として有用である； ０の全中性電荷［式（Ｉ）が有する１つのＴが−ＣＨ₂−ＰＯ₃ＨＲ（ここで、 Ｒは−Ｏ−（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）またはＣ₁−Ｃ₅アルキルである）に等しくそし て２つのＴにＣＯＯＨ基が存在しているか、或は３つのＴ全部が−ＣＨ₂−ＰＯ₃ ＨＲ（ここで、Ｒは−Ｏ−（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）またはＣ₁−Ｃ₅アルキルである ）に等しいか、或は３つのＴ全部が−ＣＨ₂−ＣＯＯＨに等しい（ＰＤ３Ａ）場 合］、これは一般的なかん流、血液プール、脳または肝臓用コントラスト剤とし て有用である。 この錯体は動物に投与するに適した薬学的に許容される形態に調合可能である 。 １つのＴ項が ［ここで、 Ｒ¹およびＲ²を上と同様に定義する］ である場合、この化合物は、Ｒ²を通して生物活性分子に連結する二官能リガン ド／錯体である。 命名の目的で、式（Ｉ）で表される化合物に として番号を付ける。 本発明の１つの面は、常磁性キレート剤を合成的に修飾してコントラスト剤を 部位特異的に所望組織に搬送することができるようにしたコントラスト剤を開発 することに関する。この利点は、非特異的かん流で現れるコントラスト（これは 細胞外薬剤を用いて明確にすることが可能であるか或は可能でない）とは対照的 に、組織親和力を基にしてその興味の持たれる領域のコントラストを強める点で ある。式（Ｉ）で表されるリガンドが示す特異性は、この錯体の全電荷および親 油性を調整することによって調節可能である。この錯体が有する電荷の範囲全体 は上に示したように−３から０である。例えば、ＰＯ₃Ｈ₂基を３個有する錯体（ ＰＤ３Ｐ）の場合、その全電荷は高い負電荷であり、骨吸収が期待される一方、 この錯体の全電荷が０である場合（従って中性、ＰＤ３Ａ、ＰＤ３（Ｏ−Ａｌｋ ）ＰおよびＰＤ３（Ａｌｋ）Ｐ）、この錯体は血液脳関門を横切る能力を有し、 正常な脳吸収を可能にし得る。予想外に、全電荷が０の錯体［ＰＤ３（Ｏ−Ｐｒ ）Ｐ］の場合、この錯体は肝臓吸収を示す。 理論で範囲を限定することを望むものでないが、本発明の帯電錯体（例えば、 恐らくは骨用では−３、肝臓用では−１、または心臓用では＋１） を製造する場合、そのキレートイオン電荷の変化が生局在化に影響を与え得ると 考えている。 また、所望標的組織に特異性を示す、天然に存在しているか或は合成した分子 に、このキレート物をイオン結合または共有結合させることでも（例えばＲ²を 通して）、組織特異性を実現化することができる。このようなアプローチの１つ の可能な用途はキレート接合モノクローナル抗体を用いることによる用途であり 、この抗体が該常磁性キレート物を病気組織に輸送することでこれをＭＲＩで可 視化することが可能になる。加うるに、巨大分子に常磁性キレート物を結合させ ることで更にコントラスト剤の効率を高めることができ、その結果として、未結 合キレート物に対するコントラストが改良される。Ｌａｕｆｆｅｒによる最近の 研究（米国特許第４，８８０，００８号および４，８９９，７５５号）により、 親油性を変化させる結果として組織に特異的な薬剤を得ることができそして親油 性を高めると血液蛋白質との非共有相互作用が助長される結果として緩和度が高 まることが示された。 非配位Ｎ置換基が存在している典型的なＤＯ３Ａ誘導体は中性のランタニドキ レート物を生じるが、これらは酸性条件下で動力学的に不安定であることが確認 されている。ＤＯ３Ａ誘導体であるＰＲＯＨＡＮＣＥ（商標）の場合、金属イオ ンに配位し得るペンダント型ヒドロキシル部分を持たせることで動力学的安定性 が加えられているが、このキレート物のイオン性全体が変化し得る。 それとは対照的に、本発明は、キレート物のイオン性全体が変化することなく 配位結合を形成するペンダント型２−ピリジン部分を持たせた式（Ｉ）で表され る群のＤＯ３Ａ誘導体に関する。加うるに、この２− ピリジル置換基を持たせるとこのキレート物が酸性条件下（約７以下のｐＨ）で 示す動力学安定性が高くなることをここに見い出した。連結部分がＰＯ₃ＨＲ［ ここで、Ｒは−Ｏ−（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）である］である本発明のキレート物は 肝臓用画像形成剤として効力を有することを実証した。 式（Ｉ）および本発明で用いる言葉を更に下記の如く定義する。 「Ｃ₁−Ｃ₅アルキル」は直鎖および分枝鎖両方のアルキル基を含む。 「動物」は温血哺乳動物、好適には人を含む。 「錯体」は、本発明の化合物の錯体、例えば金属イオンと一緒に錯形成してい る式（Ｉ）などを表し、ここでは、少なくとも１個の金属原子がキレート化合物 を形成しているか或は金属封鎖されている（ｓｅｑｕｅｓｔｅｒｅｄ）。 「生物活性材料」はデキストランまたはペプチドを指すか、或はレセプタに特 異的な親和性を示す分子、好適には抗体または抗体フラグメントを指す。 「抗体」は、何らかのポリクローナル、モノクローナル、キメラ抗体またはヘ テロ抗体、好適にはモノクローナル抗体を指し、「抗体フラグメント」には、Ｆ ａｂフラグメントおよびＦ（ａｂ’）₂フラグメント、並びに所望のエピトープ またはエピトープ類に特異性を示す抗体の一部いずれもが含まれる。用語「放射 性金属キレート／抗体接合体」または「接合体」を用いる時の「抗体」は、抗体 全体および／または抗体フラグメントを包含することを意味し、これは、それら の半合成もしくは遺伝工学処理した変異体を包含する。可能な抗体は１１１６− ＮＳ−１９−９（抗結腸直腸癌）、１１１６−ＮＳ−３ｄ（抗ＣＥＡ）、７０３ Ｄ ４（抗ヒト肺癌）、７０４Ａ１（抗ヒト肺癌）、ＣＣ４９、ＣＣ８３およびＢ７ ２．３である。ハイブリドーマ細胞系１１１６−ＮＳ−１９−９、１１１６−Ｎ Ｓ−３ｄ、７０３Ｄ４、７０４Ａ１、ＣＣ４９、ＣＣ８３およびＢ７２．３はそ れぞれＡＴＣＣ ＨＢ ８０５９、ＡＴＣＣ ＣＲＬ ８０１９、ＡＴＣＣ Ｈ Ｂ ８３０１、ＡＴＣＣ ＨＢ ８３０２、ＡＴＣＣ ＨＢ ９４５９、ＡＴＣ Ｃ ＨＢ ９４５３およびＡＴＣＣ ＨＢ ８１０８の取得番号でＡｍｅｒｉｃ ａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎに寄託されている。 本明細書に記述する二官能キレート剤［式（Ｉ）で表される］を用いて金属イ オンをキレートまたは封鎖することで金属イオンキレート物（本明細書では「錯 体」とも呼ぶ）を生じさせることができる。この錯体には官能化部分［式（Ｉ） ではＲ²で表される］が存在していることから、これは生物活性材料、例えばデ キストラン、またはレセプタに特異的親和性を示す分子などに共有結合し得る、 好適には抗体または抗体フラグメントに共有結合し得る。従って、本明細書に記 述する錯体は、抗体または抗体フラグメントに共有結合し得るか或はレセプタに 特異的親和性を示し、これらを本明細書では「接合体」と呼ぶ。 本明細書で用いる如き「薬学的に許容される塩類」は、動物、好適には哺乳動 物の診断で用いるに有用であるに充分なほど無毒である式（Ｉ）で表される化合 物の塩または塩混合物いずれかを意味する。従って、これらの塩類は本発明に従 って有用である。有機および無機両方の給源から標準的な反応で生じる塩類の代 表的なものには、例えば硫酸、塩酸、燐酸、酢酸、こはく酸、クエン酸、乳酸、 マレイン酸、フマル酸、パルミチン酸、コール酸、パルモイックアシッド（ｐａ ｌｍｏｉｃ）、ムチ ン酸、グルタミン酸、グルコン酸、ｄ−樟脳酸、グルタル酸、グリコール酸、フ タル酸、酒石酸、蟻酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サリチル酸、メタンスルホ ン酸、ベンゼンスルホン酸、ソルビン酸、ピクリン酸、安息香酸、桂皮酸および 他の適切な酸類の塩類が含まれる。また、有機および無機両方の給源、例えばア ンモニウムまたは１−デオキシ−１−（メチルアミノ）−Ｄ−グルシトール、ア ルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオンおよび他の同様なイオン類から標準 的な反応で生じる塩類も包含される。特に好適なものは、塩がカリウム、ナトリ ウムまたはアンモニウムである式（Ｉ）で表される化合物の塩類である。また上 記塩類の混合物も包含される。 種々の方法を用いて式（Ｉ）で表される化合物の製造を行う。このような方法 に対する典型的な一般的合成アプローチを以下に示す反応図式で示す。 不活性有機溶媒、例えばクロロホルムなどの中で２−クロロメチルピリジンを 用いた１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（「シクレン」）のアルキ ル化を室温で行うことで、これらの図式に示す式（ＩＩ）で表される出発材料を 製造する。 図式１では、全てのＴ部分が−ＣＨ₂−ＣＯＯＨである式（Ｉ）で表される化 合物を製造する。 この水系塩基はアルカリ金属の水酸化物、例えば水酸化ナトリウムまたは水酸 化カリウムである。この反応のｐＨを約８−１２に維持する。温度を約６０−９ ０℃の範囲にし、そして圧力は重要でないことから周囲圧力を用いる。 図式２では、全てのＴ部分が ［ここで、ＲはＯＨである］ である式（Ｉ）で表される化合物を製造する。 公知の水系酸条件、例えば３から１２Ｍの塩酸などを用いて、図式２の加水分 解を行う。この反応のｐＨを３以下に維持する。温度を還流温度にする。圧力は 重要でないことから周囲圧力を用いる。また、この反応を１段階で行う場合、亜 燐酸、塩酸および過剰量のホルムアルデヒドを用いる。この反応のｐＨを２以下 にする。温度を還流温度にする。圧力は重要でないことから周囲圧力を用いる。 図式３では、全てのＴ部分が ［ここで、Ｒは−Ｏ−（Ｃ₁−Ｃ₅アルキルである］ である式（Ｉ）で表される化合物を製造する。 ［ここで、Ｒは−Ｏ−（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）である］ 公知の水系塩基条件下、例えば過剰量のアルカリ金属水酸化物、例えば水酸化 ナトリウムもしくはカリウムなどを用いて、図式３の加水分解を行う。この反応 のｐＨを９以上にする。温度を還流温度にする。圧力は重要でないことから周囲 圧力を用いる。 図式４では、全てのＴ部分が ［ここで、ＲはＣ₁−Ｃ₅アルキルである］ である式（Ｉ）で表される化合物を製造する。 図式４では、Ｒがメチルである式（Ｉ）で表される化合物の製造を示す。 公知の水系塩基条件下、例えば過剰量のアルカリ金属水酸化物、例えば水酸化 ナトリウムもしくはカリウムなどを用いて、図式４の加水分解を行う。この反応 のｐＨを９以上にする。温度を還流温度にする。圧力は重要でないことから周囲 圧力を用いる。 図式５では、Ｒがエチルである式（Ｉ）で表される化合物の製造を示す。 塩酸を用いた酸性条件下で図式５の反応を行う。この反応のｐＨを３以下にす る。温度を還流温度にする。圧力は重要でないことから周囲圧力を用いる。 図式６では、Ｔが二官能部分を有する式（Ｉ）で表される化合物の製造を示す 。 図式７では、１つのＴがＰＯ₃ＨＲ［ここで、Ｒを式（Ｉ）と同様に定義する ］でありそして他の２つのＴがＣＯＯＨである式（Ｉ）で表される化合物の製造 を示す。 図式７では、上の図式に記述したのと同様に加水分解段階を行う。ホルムアル デヒド／重亜硫酸塩付加錯体反応を水系塩基条件下で行うことで４，１０位に選 択的アルキル化を起こさせる。次に、７位にホスホネート基を選択的に導入する 。 上に示した図式において、一般的な方法の説明は、所望反応段階の達 成で使用可能な特定段階の説明である。上記方法段階の一般的な説明は下記の通 りである。 塩基性の水系条件下でクロロ−もしくはブロモ−酢酸を用いた通常のアルキル 化手順により、図式１に記述したカルボキシレート誘導体を調製する。 最初にトリアルキルホスファイトとパラホルムアルデヒドを用いて該アミンの アルキル化を行うことで可溶有機パーエステルを生じさせることを通して、図式 ２に概略を示したホスホン酸誘導体を調製することができる。次に、このエステ ルの加水分解を酸性の還流条件下で行うことで所望のアミノホスホン酸を生じさ せる。また、ホルムアルデヒドおよび塩酸と組み合わせて亜燐酸を用いることで このホスホン酸を酸性条件下で調製することができる。 図式３に示す如く、最初にジアルキルホスホネートエステルを生じさせた後、 塩基性条件下で加水分解を行うことにより、ホスホネートの半エステルを調製す る。塩基を用いた加水分解で排他的に半エステルへの変換が生じる。 図式４は、パラホルムアルデヒドおよび求核剤としてジエトキシメチルホスフ ィンを用いてメチルホスフィネート誘導体を合成する方法論を説明している。テ トラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジオキサン、 アセトニトリルまたはアルコール系媒体などの如き溶媒中で縮合を実施すること ができる。次に、その結果として生じるホスフィネートエステルの加水分解を酸 性条件下（例えば６ＮのＨＣｌを用い８０−１００℃）または塩基性条件下（過 剰量で塩基を用い４０−１００℃）で行うことによって相当するメチルホスホン 酸が得ら れる。また、図式５に概略を示したように、Ａ．Ｄ．Ｓｈｅｒｒｙ他が考案した 、エチルホスホン酸をインサイチューで生じさせる方法（Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ ．、１９９１年提起）を用いることでも、高い親油性を示すホスフィネート誘導 体を得ることができる。 図式６は式（Ｉ）で表される二官能化合物の製造を説明しており、これを次に 生物活性材料に結合させることができる。 図式７はホルムアルデヒド／重亜硫酸塩付加化合物を用いた４，１０位の選択 的アルキル化の一般的手順を示している。その結果として生じる中間体を相当す るニトリルに変化させた後、その７位にホスホネート部分を導入する。酸または 塩基を用いた加水分解を行うことで、加水分解した相当する最終生成物が得られ る。 本発明の錯体生成で使用する金属イオンはＧｄ⁺³、Ｍｎ⁺²、Ｆｅ⁺³であり、こ れらは例えばＡｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙから商業的に 入手可能である。存在させるアニオンはハロゲン化物、好適には塩化物であるか 、或は塩を存在させない（金属酸化物）。 本発明の「常磁性核種」は、スピン角運動量および／または軌道角運動量を示 す金属イオンを意味する。この２種類の運動量を一緒にすることで、不対電子を 有する原子に大きく依存しそして上記原子の環境に低い度合で依存する様式で観 察される常磁性モーメントが得られる。本発明の実施で有用であることを確認し た常磁性核種はガドリニウム（Ｇｄ⁺³）、鉄（Ｆｅ⁺³）およびマンガン（Ｍｎ⁺² ）であり、Ｇｄ⁺³が好適である。 本技術分野でよく知られている方法を用いてこの錯体の製造を行う。従って、 例えば「Ｃｈｅｌａｔｉｎｇ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｍｅｔ ａｌ Ｃｈｅｌａｔｅｓ」、Ｄｗｙｅｒ ＆ Ｍｅｌｌｏｒ、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ（１９６４）の７章を参照のこと。また、「Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ」（Ｋａｍｅｋｏ他編集）、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ（ １９７４）の中のアミノ酸製造方法も参照のこと。錯体製造の例は、ｐＨが５か ら７の水系条件下でビシクロポリアザマクロシクロホスホン酸と金属イオンとを 反応させることを伴う。この生じる錯体は化学的結合によるものであり、それに よって安定な常磁性核種組成物がもたらされ、これは例えばこのリガンドから常 磁性核種が脱会合することに関して安定である。 リガンド：金属のモル比が少なくとも約１：１、好適には１：１から３：１、 より好適には１：１から１．５：１になるように本発明の錯体を投与する。リガ ンドを大過剰で用いると、錯形成していないリガンドが動物に対して毒性を示す か或は心停止または血清石灰減少痙攣をもたらし得ることから望ましくない。 従って、生理学的に許容される担体、賦形剤またはベヒクルと一緒に本発明を 利用する。このような調合物を調製する方法はよく知られている。この調合物は 懸濁液、注射可能溶液または他の適切な調合形態であってもよい。生理学的に許 容される懸濁用媒体をアジュバントの有り無しで使用することができる。 診断ではこの調合物を「有効量」で用いる。この用量は動物の病気および物理 的パラメーター、例えば体重などに応じて変化することになるであろう。また、 本発明の調合物を用いたインビボ診断もまた考えられる。 本発明のキラント（ｃｈｅｌａｎｔｓ）数種に関する他の使用には、体からの 望ましくない金属（即ち鉄）の除去、種々の目的でポリマー支持体への結合（例 えば診断剤として）、および選択的抽出による金属イオンの除去などが含まれ得 る。少なくとも２個のＲ項においてＴが−ＣＨ₂−Ｐ（Ｏ）Ｒ¹ＯＨに等しい式（ Ｉ）で表されるリガンドは、スケール抑制剤として、金属イオンを制御する目的 で使用可能である。本リガンドのいくつかは、化学量論的量よりも少ない量で使 用可能である。米国特許第２，６０９，３９０号、３，３３１，７７３号、３， ３３６，２２１号および３，４３４，９６９号に記述されている化合物に類似し た使用が認識される。 本発明を純粋に例示することを意図する以下の実施例を考慮することで本発明 が更に明らかになるであろう。 以下の実施例で用いるいくつかの用語を下記の如く定義する。 ＬＣ＝液体クロマトグラフィー、手で充填したＱ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（商標） アニオン交換カラム（２３ｘ２ｃｍ）を取り付けたＤｉｏｎｅｘ ２０１０シス テムを用いて精製を低圧で実施した。 ＤＭＦ＝ジメチルホルムアルデヒド。 ＡｃＯＨ＝酢酸。 ｇ＝グラム。 ｍｇ＝ミリグラム。 ｋｇ＝キログラム。 ｍＬ＝ミリリットル。 μＬ＝ミクロリットル。ｐＨ安定性の一般的手順 ２ｍＬの３ｘ１０^-4Ｍ ＧｄＣｌ₃担体溶液に、０．１ＮのＨＣｌに入ってい る３ｘ１０^-4Ｍの¹⁵⁹ＧｄＣｌ₃を２μＬ加えることで、¹⁵⁹ＧｄＣｌ₃（または^{15 3} ＳｍＣｌ₃）のストック溶液を調製した。次に、適切なリガンド溶液を脱イオン 水中で調製した。次に、該リガンド（１００−５００μＬの脱イオン水に溶解さ せた）を２ｍＬの上記¹⁵⁹ＧｄＣｌ₃ストック溶液と一緒にした後、完全混合して 酸性溶液（ｐＨ＝２）を生じさせることによって、リガンド／金属が１：１の錯 体を調製した。次に、０．１ＮのＮａＯＨを用いて上記溶液のｐＨを７．０に上 昇させた。次に、この錯体溶液のサンプルをＳｅｐｈａｄｅｘ（商標）Ｇ−５０ カラムに通して４：１の食塩水（８５％のＮａＣｌ／ＮＨ₄ＯＨ）で溶離させ、 ３ｍＬの画分を２つ集めることによって、錯体としての金属パーセントを測定し た。次に、この一緒にした溶離液内の放射線量を、樹脂上に残存している放射線 量（錯形成していない金属がその樹脂上に保持される）と比較した。１ＭのＮａ ＯＨまたは１ＭのＨＣｌを用いて上記錯体溶液一定分量のｐＨを調整し、そして 上に記述したイオン交換方法を用いて、錯体として存在する金属のパーセントを 測定することにより、ｐＨ安定性プロファイルを作成する。実験比較により、本 発明のリガンドが示す錯形成および生分布に関してＳｍの結果も同じであること を確認した。リガンドの合成 一般的材料および方法 全ての試薬を商業的供給業者から入手してさらなる精製を行うことなく受け取 ったまま用いた。特に明記しない限り、多核４プローブ（¹Ｈ、¹³Ｃ、³¹Ｐおよ び¹⁹Ｆ）を取り付けたＢｒｕｋｅｒ ＡＣ−２５０ Ｍ Ｈｚ分光測定装置を用い２９７°ＫでＮＭＲスペクトルを記録した。溶媒抑制パ ルスシーケンス（ｓｏｌｖｅｎｔ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｕｌｓｅ ｓｅ ｑｕｅｎｃｅ）（「ＰＲＥＳＡＴ」、ホモ核前飽和（ｈｏｍｏ−ｎｕｃｌｅａｒ ｐｒｅｓａｔｕｒａｔｉｏｎ））を用いＤ₂Ｏ中で¹Ｈスペクトルを記録した。¹ Ｈスペクトルではδ７．２６の所にある残存クロロホルム（ＣＤＣｌ₃中）また はδ３．５５の所にある外部ジオキサン（Ｄ₂Ｏ中）を基準にする。記録される^{1 3} Ｃおよび³¹Ｐスペクトルは不対プロトンである（幅広い帯）。ＤＥＰＴ（分極 移動による歪みなし増強（Ｄｉｓｔｏｒｔｉｏｎｌｅｓｓ Ｅｎｈａｎｃｅｍｅ ｎｔ ｂｙ Ｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ Ｔｒａｎｓｆｅｒ）実験で¹³Ｃ｛¹Ｈ ｝化学シフトの帰属を補助した。¹³Ｃ｛¹Ｈ｝スペクトルではδ７７．００の所 にあるＣＤＣｌ₃の中心ピーク（ＣＤＣｌ₃中）およびδ６６．６６の所にある外 部ジオキサン（Ｄ₂Ｏ中）を基準にする。³¹Ｐ｛¹Ｈ｝スペクトルではδ０．００ の所にある外部８５％Ｈ₃ＰＯ₄を基準にした。毛細管溶融方法を用いて融点を測 定し、補正を行わなかった。手で充填したＱ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（商標）（ア ニオン交換）またはＳＰ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（商標）（カチオン交換）ガラス カラムおよび溶離液監視用のオンラインＵＶ検出器（２６３ｎｍ）を取り付けた 標準的ガラスカラムを用いた半調製用イオン交換クロマトグラフィー分離を低圧 （＜６００ｐｓｉ）で実施した。Ｈｅｗｌｅｔｔ Ｐａｃｋａｒｄ ５８９０Ａ ガスクロマトグラフィー５９７０ Ｍａｓｓ Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ Ｄｅｔｅｃ ｔｏｒを用いてＧＣ／ＭＳスペクトル測定を実施した。出発材料 実施例Ａ Ｎ−（２−ピリジルメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカンの 製造 塩酸２−ピコリルクロライドが１．０３ｇ（６．３ミリモル）入っている水溶 液３ｍＬを塩基性にしてｐＨ＞１４にし、クロロホルムの中に抽出することによ って、クロロホルム中の２−ピコリルクロライド溶液を調製した。１，４，７， １０−テトラアザシクロドデカンが２．０３ｇ（１１．８ミリモル）入っていて 撹拌しているクロロホルム溶液に、その調製したクロロホルム中の２−ピコリル クロライド溶液を１０ｍＬ一度に加えた。室温で３０分間撹拌した後、この反応 混合物を真空中で濃縮することで残渣が得られ、これをシリカゲル使用クロマト グラフィーにかけ（カラム２．５ｘ２０ｃｍ）、ＣＨＣｌ₃：ＣＨ₃ＯＨ：ＮＨ₂ ＯＨ（１０：４：１）を用いて溶離させた（ＳｉＯ₂板上Ｒ₁＝０．２９）。溶離 液の濃縮を行った後、モノアルキル化された生成物を濃密な淡黄色液体として単 離し、これを放置すると固化してオフホワイトの粉末が１．１７ｇ得られ（２− ピコリルクロライドを基準にして７２％）、これを更に下記で特徴づける：¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ２．５４−２．８２（ｍ，１６Ｈ）、３．７５（ｓ，２Ｈ）、７．１１−７． １４（ｍ，１Ｈ）、７．４２−７．４６（ｍ，１Ｈ）、７．６４−７．６５（ｍ ，１Ｈ）、８．４６−８．４８（ｍ，１Ｈ）；及び¹³Ｃ｛¹Ｈ｝ＮＭＲ（ＣＤＣ ｌ₃） δ４５．０２、４６．３１、４７．０４、５１．５１、６１．０３、１２２．０ ４、１２２．８７、１３６．６１、１４８．８３、１５０．５ ３。実施例Ｂ Ｎ−（２−ピリジルメチル）−Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’”−トリス（メチレンジエチル ホスホネート）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカンの製造 実施例Ａで調製した３３１ｍｇ（１．２７ミリモル）のＮ−（２−ピリジルメ チル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカンを、２２９ｍｇ（７．６ ３ミリモル、過剰量）のパラホルムアルデヒドおよび１．２７ｇ（１．３ｍＬ、 ７．６２ミリモル、過剰量）のトリエチルホスファイトと一緒にした。この混合 物を穏やかに１０分間撹拌することで充分に混合されたスラリーを得た後、これ を９０℃に１時間加熱した。過剰量の試薬および副生成物を真空（１２５℃／０ ．０１ｍｍＨｇ）中で除去することにより、所望生成物が黄色油状物として８９ ６ｍｇ（９９％）得られ、これを更に下記で特徴づける：¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ１．２５−１．３９（ｍ，１８Ｈ）、２．６６−２．９５（ｍ，２２Ｈ）、３ ．７１（ｓ，２Ｈ）、４．０１−４．２２（ｍ，１２Ｈ）、７．１０−７．１５ （ｍ，１Ｈ）、７．５７−７．６５（ｍ，２Ｈ）、８．４６−８．５２（ｍ，１ Ｈ）¹³ Ｃ｛¹Ｈ｝ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ１６．３８、１６．４６、５０．４５、５０．６７、５２．４１、５３．１９ 、５３．２９、５３．４８、５３．５８、６１．３７、６１．４７、６１．５２ 、１２１．６７、１２３．２８、１３６．１９、１４８．６１、１５９．９０； 及び³¹ Ｐ｛¹Ｈ｝ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、２９７°Ｋ） δ２６．２１；³¹ Ｐ｛¹Ｈ｝ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、２１７°Ｋ） δ２４．１８（ＩＰ）、２４．３２（２Ｐ）。実施例Ｃ Ｎ−（２−ピリジルメチル）−Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’”−トリス（メチレンジプロピ ルホスホネート）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカンの製造 実施例Ａで調製した４４５ｍｇ（１．７１ミリモル）のＮ−（２−ピリジルメ チル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカンを、１５４ｍｇ（５．１ ２ミリモル、過剰量）のパラホルムアルデヒドおよび３．２０ｇ（３．５ｍＬ、 ５．１２ミリモル、過剰量）のトリプロピルホスファイトと一緒にした。この混 合物を穏やかに１０分間撹拌することで充分に混合されたスラリーを得た後、こ れを１００℃に３０分間加熱した。過剰量の試薬および副生成物を真空（１６０ ℃／０．０１ｍｍＨｇで４時間）中で除去することにより、所望生成物が濃密な 黄色油状物として１．３６ｇ（定量的）得られ、これを更に下記で特徴づける：¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ０．９１−１．００（ｍ，１８Ｈ）、１．６０−１．７６（ｍ，１２Ｈ）、２ ．６７−２．９９（ｍ，２２Ｈ）、３．７３（ｓ，２Ｈ）、３．９４−４．０８ （ｍ，１２Ｈ）、７．１２−７．１５（ｍ，１Ｈ）、７．４６−７．６７（ｍ， ２Ｈ）、８．４８−８．５２（ｍ，１Ｈ）；¹³ Ｃ｛¹Ｈ｝ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ９．９３、１０．２１、２３．７１、２３．８０、５０．１７、５０． ４４、５２．３８、５３．０９、５３．４４、６１．４４、６６．７９、６６． ８３、１２１．６１、１２３．２３、１３６．１４、１４８．５４、１５９．９ ２；及び³¹ Ｐ｛¹Ｈ｝ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ２６．２０（１Ｐ）、２６．２３（２Ｐ）。最終生成物 リガンド：図式１に示した如きジメチレンカルボン酸の製造実施例１ Ｎ−（２−ピリジルメチル）−Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’”−トリ酢酸−１，４，７，１ ０−テトラアザシクロドデカン（ＰＤ３Ａ）の製造 実施例Ａの手順で調製したＮ−（２−ピリジルメチル）−１，４，７，１０− テトラアザシクロドデカンが２０１．４ｍｇ（０．５１ミリモル）入っている水 溶液２ｍＬに、３５０ｍｇ（２．５２ミリモル、６５％過剰量）のブロモ酢酸を 加えた後、ｐＨを＞１１に維持するにもはや苛性を必要としなくなるまで（〜３ ０分）、濃水酸化ナトリウムを少量加えることで上記反応混合物のｐＨを１１以 上に維持した。次に、この反応混合物を１時間加熱した（６０℃）。この反応混 合物を室温に冷却した後、この反応混合物のｐＨを７に調整し、そしてこの中性 溶液をカチオン交換（ＳＰ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（商標））カラム（１．５ｘ５ ０ｃｍ）使用クロマトグラフィーにかけ、最初に脱イオン水で溶離させた後１Ｍ の塩酸で溶離させた。生成物が入っている酸性画分を蒸発乾固させた後、新しい 脱イオン水（３ｘ２ｍＬ）を用いて共蒸発（共沸）させることで過剰量の塩酸を 除去した。この水溶液の凍結乾燥を行うことで最終生成物を白色固体として単離 し、これを更に下記で特徴づける：¹ ＨＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ） δ２．７９−４．１３（ｍ，２４Ｈ）、７．８８−８．０１（ｍ，２Ｈ）、８． ３５−８．４２（ｍ，１Ｈ）、８．６３−８．６６（ｍ，１Ｈ）及び¹³Ｃ｛¹Ｈ ｝ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ） δ５１．０４、５１．２５、５３．７３、５５．４７、５６．００、５６．９０ 、５７．５２、１２９．８６、１３１．２１、１４５．４９、１５０．８２、１ ５３．５４、１７１．６１、１７８．７６。 リガンド：図式３に示した如きジメチレンホスホネート半エステルの製造実施例２ Ｎ−（２−ピリジルメチル）−Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’”−トリス（メチレンホスホン 酸エチルエステル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（ＰＤ３Ｅ Ｐ）の製造 実施例Ｂで調製した１０２．７ｍｇ（０．１４ミリモル）のＮ−（２−ピリジ ルメチル）−Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’”−トリス（メチレンジエチルホスホネート）− １，４，７，１０−テトラアザシクロドデカンを１ｍＬの０．１Ｍ水酸化カリウ ムと一緒にして９０℃で６時間加熱した。室温に冷却した後、この水溶液の凍結 乾燥を行うことで黄褐色の固体が得られ、これをアニオン交換（Ｑ−Ｓｅｐｈａ ｒｏｓｅ（商標））カラム（１．５ｘ５０ｃｍ）使用クロマトグラフィーにかけ 、最初に脱イオン水で溶離させた後１Ｍの塩酸で溶離させた。この溶離液の凍結 乾燥を行うことで生成物を褐色固体として単離し、これを更に下記で特徴づける ： 実施例２¹ ＨＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ、３３８°Ｋ） δ１．４１−１．５７（ｍ，９Ｈ）、３．２８−３．８９（ｍ，２２Ｈ）、４． ０９−４．６４（ｍ，８Ｈ）、８．２２−８．２６（ｍ，２Ｈ）、８．７０−８ ．７５（ｍ，１Ｈ）、９．００−９．１２（ｍ，１Ｈ）；及び¹³ Ｃ｛¹Ｈ｝ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ，３３８°Ｋ） δ１９．４１、１９．５１、５２．５８、５３．００、５２．３１、５３．７５ 、５３．８２、５６．０４、５９．５３、６４．６０、６４．７６、１２９．８ ６、１３１．４１、１４７．３１、１４９．０６、１５４．３４；及び³¹ Ｐ｛¹Ｈ｝ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ，３３８°Ｋ） δ９．６４（２Ｐ）、１９．７９（１Ｐ）。実施例３ Ｎ−（２−ピリジルメチル）−Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’”−トリス（メチレンホスホン 酸プロピルエステル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（ＰＤ３ ＰＰ）の製造 実施例Ｃで調製した０．７１ｇ（０．８９ミリモル）のＮ−（２−ピリジルメ チル）−Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’”−トリス（メチレンジプロピルホスホネート）−１ ，４，７，１０−テトラアザシクロドデカンを３ｍＬの０．１Ｍ水酸化カリウム と一緒にして還流下で１８時間加熱した。室温に冷却した後、この水溶液を濾過 し凍結乾燥を行うことで褐色残渣が得られ、これをＣＨ₂Ｃｌ₂／Ｃ₂Ｈ₅ＯＨ（９ ５：５）の中に再溶解させて濾過した。溶媒を蒸発させて真空中で濃縮を行った 後、生成物を褐色固体として単離し、これを更に下記で特徴づける：¹ ＨＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ、３５３°Ｋ） δ１．２４−１．３６（ｍ，９Ｈ）、１．９５−２．０４（ｍ，６Ｈ）、３．０ ３−３．２９（ｍ，２２Ｈ）、４．１０−４．２５（ｍ，８Ｈ）、７．７４−７ ．９２（ｍ，２Ｈ）、８．２３−８．２９（ｍ，１Ｈ）、８．８７−８．９６（ ｍ，１Ｈ）；及び¹³ Ｃ｛¹Ｈ｝ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ，３５３°Ｋ） δ１３．１５、２７．２０、５０．４３、５３．８９、５４．４８、５４．９８ 、５５．４２、６４．３３、６９．４１、１２６．３８、１２８．３０、１４１ ．２４、１５２．４６、１６１．４５；及び³¹ Ｐ｛¹Ｈ｝ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ，３５３°Ｋ） δ２１．６１（２Ｐ），２１．９５（１Ｐ）。 錯体：生分布試験用金属／リガンド錯体の製造一般的手順 金属リガンド錯体を種々の方法で調製した。この方法は、金属とリガンドを水 溶液中で混合した後、そのｐＨを所望値に調整することを伴っていた。塩および ／または緩衝剤に加えて水が入っている溶液内で錯形成を行った。時には溶液を 加熱した方が周囲温度で錯形成を行うよりも高い錯体収率が得られることを確認 した。 例えば、該リガンドを脱イオン水の中に溶解させることでこのリガンドの溶液 を調製する（ｐＨ＝約２）。次に、このリガンド溶液をトレーサー¹⁵³ＳｍＣｌ₃ が入っているＳｍＣｌ₃・Ｈ₂Ｏ水溶液（０．０１ＮのＨＣｌ中３ｘ１０^-4Ｍ）と 一緒にすることによって、リガンド／金属錯体を調製した。完全混合した後、こ の錯体溶液のサンプルをＳｅｐｈａｄｅｘ（商標）カラムに通して４：１食塩水 （０．８５％のＮａＣｌ／ＮＨ₄ＯＨ）で溶離させ、３ｍＬの画分を２つ集める ことによって、錯 体としての金属パーセントを測定した。次に、この一緒にした溶離液内の放射線 量をその樹脂上に残存している放射線量と比較した。このような条件下、錯体は その溶離液と一緒に取り出され、そして錯形成していない金属はその樹脂上に保 持される。この方法で測定した錯形成は通常約９５％またはそれ以上であった。 上記手順を用いて下記のサマリウム錯体を製造した： Ｎ−（２−ピリジルメチル）−Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’”−トリ酢酸−１，４，７，１ ０−テトラアザシクロドデカン（ＰＤ３Ａ） Ｎ−（２−ピリジルメチル）−Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’”−トリス（メチレンホスホン 酸エチルエステル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（ＰＤ３Ｅ Ｐ） Ｎ−（２−ピリジルメチル）−Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’”−トリス（メチレンホスホン 酸プロピルエステル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（ＰＤ３ ＰＰ） Ｎ−（２−ピリジルメチル）−Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’”−トリ（メチレンホスホン酸 ）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（ＰＤ３Ｐ）。ガドリニウム 錯体の製造も同様な様式で行う。 以下の表は、ＰＤ３Ａ、ＰＤ３ＰＰおよびＰＤ３ＥＰから誘導されるＳｍ錯体 が動力学的に不活性であることを説明している。 生分布 一般的手順 Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットを５日間環境に慣らした後、尾の静脈を 通して錯体溶液を１００μＬ注入した。ラットの体重は注入時１５０から２００ ｇの間であった。３０分後、首脱きゅうでラットをと殺して解剖を行った。マル チチャンネル分析装置に連結させたＮａｌシンチレーションカウンターで計数測 定を行うことによって、各組織内の放射線量を測定した。この計数を１００μＬ 標準内の計数と比較することによって、各組織または器官内の線量パーセントを 測定した。 血液量は全体重の６．５％であると仮定して血液内の線量パーセントを見積も った。大腿骨における線量パーセントに２５を掛けることによって、骨における 線量パーセントを見積もった。筋肉量は全体重の４３％であると仮定して筋肉に おける線量パーセントを見積もった。使用した ラットの数は平均でｎである。 ホスホネート類はヒドロキシアピタイト（ｈｙｄｒｏｘｙａｐｉｔｉｔｅ）に 結合する能力を有することが知られていることから、器官の生分布に加えて骨局 在化の効率に関しても式（Ｉ）で表される化合物のキレート物を評価した。この 試験結果を以下に示す。実施例Ｉ 錯体である¹⁵³Ｓｍ［Ｎ−（２−ピリジルメチル）−Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’”−ト リス（メチレンホスホン酸エチルエステル）−１，４，７，１０−テトラアザシ クロドデカン］（¹⁵³Ｓｍ−ＰＤ３ＥＰ）を評価し、その結果を以下の表Ｉに示 す。数値は、注入して２時間後のデータ点における最少で２匹のラットに関する 平均を示している。 実施例ＩＩ 錯体である¹⁵³Ｓｍ［Ｎ−（２−ピリジルメチル）−Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’”−ト リス（メチレンホスホン酸プロピルエステル）−１，４，７，１０−テトラアザ シクロドデカン］（¹⁵³Ｓｍ−ＰＤ３ＰＰ）を評価し、その結果を以下の表ＩＩ に示す。数値は、注入して２時間後および２４時間後のデータ点における最少で ３匹のラットに関する平均を示している。 本明細書または本明細書に開示した発明の実施を考慮することで本発明の他の 態様が本分野の技術者に明らかになるであろう。本明細書および実施例は単に例 示として見なされるべきであり、本発明の真の範囲および精神を以下の請求の範 囲で示すことを意図する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ Ｃ０７Ｆ 15/02 9450−4Ｈ Ｃ０７Ｆ 15/02 // Ｃ０７Ｂ 59/00 7419−4Ｈ Ｃ０７Ｂ 59/00 Ｃ０７Ｍ 5:00 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ， ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，Ｇ Ｂ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＧ ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ， ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＩ，ＳＫ，ＵＡ，ＵＺ，ＶＮ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 式 ［式中、 Ｔは、独立して、 であり、 ここで、 Ｒは、ＯＨ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキルまたは−Ｏ−（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）であり、 Ｒ¹は、ＯＨまたはＯＣＨ₃であり、 Ｒ²は、ＮＯ₂、ＮＨ₂、イソチオシアナト、セミカルバジド、チオセミカルバジ ド、マレイミド、ブロモアセトアミドまたはカルボキシルであるが、但しＴ部分 が （ここで、Ｒ¹およびＲ²を上と同様に定義する） であるのは１つのみであることを条件とする］ で表される２−ピリジルメチレンポリアザマクロ環状化合物またはそれらの薬学 的に許容される塩類。 ２． Ｔが−ＣＨ₂−Ｐ（Ｏ）ＲＯＨ［ここで、ＲはＯＨである］に等しい、 Ｎ−（２−ピリジルメチル）−Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’”−トリ（メチレンホスホン酸 ）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカンと呼ぶ請求の範囲第１項の化 合物またはそれらの薬学的に許容される塩類。 ３． Ｔが−ＣＨ₂−ＣＯＯＨに等しい、Ｎ−（２−ピリジルメチル）−Ｎ’ ，Ｎ”，Ｎ’”−トリ酢酸−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカンと呼 ぶ請求の範囲第１項の化合物またはそれらの薬学的に許容される塩類。 ４． Ｔが−ＣＨ₂−Ｐ（Ｏ）ＲＯＨ［ここで、Ｒは−Ｏ−（Ｃ₁−Ｃ₅アルキ ル）である］に等しい請求の範囲第１項の化合物またはそれらの薬学的に許容さ れる塩類。 ５． Ｒがエトキシである、Ｎ−（２−ピリジルメチル）−Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’ ”−トリス（メチレンホスホン酸エチルエステル）−１，４，７，１０−テトラ アザシクロドデカンと呼ぶ請求の範囲第４項の化合物またはそれらの薬学的に許 容される塩類。 ６． Ｒがプロポキシである、Ｎ−（２−ピリジルメチル）−Ｎ’，Ｎ”，Ｎ ’”−トリス（メチレンホスホン酸プロピルエステル）−１，４，７，１０−テ トラアザシクロドデカンと呼ぶ請求の範囲第４項の化合物またはそれらの薬学的 に許容される塩類。 ７． Ｔが−ＣＨ₂−Ｐ（Ｏ）ＲＯＨ［ここで、ＲはＣ₁−Ｃ₅アルキ ルである］に等しい請求の範囲第１項の化合物。 ８． １つのＴが ［ここで、Ｒ¹およびＲ²を請求の範囲第１項と同様に定義する］ でありそして他のＴ項を請求の範囲第１項と同様に定義する請求の範囲第１項の 化合物。 ９． Ｇｄ⁺³、Ｍｎ⁺²またはＦｅ⁺³から選択される金属イオンと一緒に錯形成 した式 ［式中、 Ｔは、独立して、 であり、 ここで、 Ｒは、ＯＨ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキルまたは−Ｏ−（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）であり、 Ｒ¹は、ＯＨまたはＯＣＨ₃であり、 Ｒ²は、ＮＯ₂、ＮＨ₂、イソチオシアナト、セミカルバジド、チオセミカルバジ ド、マレイミド、ブロモアセトアミドまたはカルボキシルであるが、但しＴ部分 が （ここで、Ｒ¹およびＲ²を上と同様に定義する） であるのは１つのみであることを条件とする］ で表されるポリアザマクロ環状化合物またはそれらの薬学的に許容される塩類を 含む錯体。 １０． 該金属がＧｄ⁺³である請求の範囲第９項の錯体。 １１． Ｔが−ＣＨ₂−Ｐ（Ｏ）ＲＯＨ［ここで、ＲはＯＨである］でありそ して該金属がＧｄ⁺³である請求の範囲第９項の錯体。 １２． Ｔが−ＣＨ₂−ＣＯＯＨでありそして該金属がＧｄ⁺³である 請求の範囲第９項の錯体。 １３． Ｔが−ＣＨ₂−Ｐ（Ｏ）ＲＯＨ［ここで、Ｒは−Ｏ−（Ｃ₁−Ｃ₅アル キル）である］でありそして該金属がＧｄ⁺³である請求の範囲第９項の錯体。 １４． Ｔが−ＣＨ₂−Ｐ（Ｏ）ＲＯＨ［ここで、ＲはＣ₁−Ｃ₅アルキルであ る］でありそして該金属がＧｄ⁺³である請求の範囲第９項の錯体。 １５． 薬学的に許容される担体と一緒に請求の範囲第９項の錯体を含む薬学 調合物。 １６． 動物における病気状態を診断する方法であって、上記動物に請求の範 囲第１５項の調合物を有効量で投与することを含む方法。 １７． 式 ［式中、 Ｔは、独立して、−ＣＨ₂−ＣＯＯＨまたは であり、 ここで、 Ｒは、ＯＨ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキルまたは−Ｏ−（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）であ る］ で表されるポリアザマクロ環状化合物またはそれらの薬学的に許容される塩類の 製造方法であって、下記： （Ａ）式 で表される化合物とＸ−ＣＨ₂−ＣＯＯＨ［ここで、Ｘは塩素または臭素原子で ある］とをアルカリ金属水酸化物水溶液の存在下約８−１０の範囲のｐＨおよび 約６０−９０℃の範囲の温度で反応させることによって、Ｔが−ＣＨ₂−ＣＯＯ Ｈに等しい上記式（Ｉ）で表される化合物を生じさせるか、或は （Ｂ）式 で表される化合物と亜燐酸とを塩酸および過剰量のホルムアルデヒド中で約２以 下のｐＨおよび還流温度で反応させることによって、Ｔが−ＣＨ₂−ＰＯ₃Ｈ₂に 等しい上記式（Ｉ）で表される化合物を生じさせるか、或は （Ｃ）式 で表される化合物とＰ（ＯＲ）₃［ここで、ＲはＣ₁−Ｃ₄アルキルである］とを ホルムアルデヒド中で反応させた後、３から１２Ｍの塩酸を用いた加水分解を約 ３以下のｐＨおよび還流温度で行うことによって、Ｔが−ＣＨ₂−ＰＯ₃Ｈ₂に等 しい上記式（Ｉ）で表される化合物を生じさせるか、或は （Ｄ）式 で表される化合物とＰ（ＯＲ）₃［ここで、ＲはＣ₁−Ｃ₄アルキルである］とを ホルムアルデヒド中で反応させた後、アルカリ金属の水酸化物を過剰量で用いた 加水分解を約１２以上のｐＨおよび還流温度で行うことによって、Ｔが−ＣＨ₂ −ＰＯ₃ＨＲ［ここで、Ｒは−Ｏ−（Ｃ₁−Ｃ₅アルキル）である］に等しい上記 式（Ｉ）で表される化合物を生じさせるか、或は （Ｅ）式 で表される化合物を、Ｈ₃Ｃ−Ｐ（ＯＥｔ）₂と、ホルムアルデヒドおよびテトラ ヒドロフラン中で反応させた後アルカリ金属の水酸化物を過剰量で用いた加水分 解を約１２以上のｐＨおよび還流温度で行うか、或はＨＰ（Ｏ）ＯＨ−Ｃ₂Ｈ₅と 、ホルムアルデヒドおよび塩酸中で約３以下のｐＨおよび還流温度で反応させる ことによって、Ｔが−ＣＨ₂−ＰＯ（ＯＨ）Ｒ［ここで、ＲはＣ₁−Ｃ₅アルキル である］に等しい上記式（Ｉ）で表される化合物を生じさせる、 いずれか１つを含む方法。