JPH0732702B2 - 新規乳酸菌、その産生する抗菌物質、この乳酸菌を含有する発酵乳用スターター及びそれを用いた発酵乳の製造方法 - Google Patents
新規乳酸菌、その産生する抗菌物質、この乳酸菌を含有する発酵乳用スターター及びそれを用いた発酵乳の製造方法Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、ストレプトコッカス・
サリバリウス・サブスピーシーズ・サーモフィルス（St
reptococcus salivarius subsp. thermophilus）に属す
る新規な乳酸菌またはその変異株に関する。
サリバリウス・サブスピーシーズ・サーモフィルス（St
reptococcus salivarius subsp. thermophilus）に属す
る新規な乳酸菌またはその変異株に関する。
【０００２】また、本発明は、上記乳酸菌から得られる
新規な抗菌物質及びその含有物に関する。
新規な抗菌物質及びその含有物に関する。
【０００３】さらに、本発明は、上記乳酸菌を含む発酵
用スターター及びこの発酵用スターターを用いた貯蔵ま
たは輸送中、酸度上昇が低減された発酵乳の製造方法に
関する。
用スターター及びこの発酵用スターターを用いた貯蔵ま
たは輸送中、酸度上昇が低減された発酵乳の製造方法に
関する。
【０００４】
【従来の技術】サーモフィルス菌は牛乳及び乳製品に広
く存在し、ヨーグルトのスターター及びチーズスタータ
ーとして利用される有用な乳酸菌である。その中で、あ
る種のサーモフィルス菌は、分子量７００以下の低分子
の抗菌物質を産生することが知られている（Pulusani,
S.R. ら、Journal of Food Science 、第44巻、第575
頁、1979年) 。しかし、本発明のような蛋白質、ペプチ
ドまたはその複合体のような高分子の抗菌物質を産生す
ることはまだ知られていない。
く存在し、ヨーグルトのスターター及びチーズスタータ
ーとして利用される有用な乳酸菌である。その中で、あ
る種のサーモフィルス菌は、分子量７００以下の低分子
の抗菌物質を産生することが知られている（Pulusani,
S.R. ら、Journal of Food Science 、第44巻、第575
頁、1979年) 。しかし、本発明のような蛋白質、ペプチ
ドまたはその複合体のような高分子の抗菌物質を産生す
ることはまだ知られていない。
【０００５】なお、本発明でいう「サーモフィルス菌」
はストレプトコッカス・サリバリウス・サブスピーシー
ズ・サーモフィルスに属する公知の微生物の総称であ
り、「抗菌物質」は、乳酸などの有機酸、過酸化水素な
どの公知の抗菌活性を有する低分子化合物のことではな
く、ペプチド・蛋白質又はそれを含有する複合体からな
る物質の総称である。
はストレプトコッカス・サリバリウス・サブスピーシー
ズ・サーモフィルスに属する公知の微生物の総称であ
り、「抗菌物質」は、乳酸などの有機酸、過酸化水素な
どの公知の抗菌活性を有する低分子化合物のことではな
く、ペプチド・蛋白質又はそれを含有する複合体からな
る物質の総称である。
【０００６】一般に、乳酸菌の産生する抗菌物質は、あ
る種のラクトコッカス・ラクチス・サブスピーシーズ・
ラクチス（Lactococcus lactis subsp. lactis、旧名ス
トレプトコッカス・ラクチス・サブスピーシーズ・ラク
チス) が産生するナイシンに代表されるように、食品の
保存性を高めたり、雑菌が食品中で汚染されることによ
る食品の品質低下を防ぐ目的で利用されている。
る種のラクトコッカス・ラクチス・サブスピーシーズ・
ラクチス（Lactococcus lactis subsp. lactis、旧名ス
トレプトコッカス・ラクチス・サブスピーシーズ・ラク
チス) が産生するナイシンに代表されるように、食品の
保存性を高めたり、雑菌が食品中で汚染されることによ
る食品の品質低下を防ぐ目的で利用されている。
【０００７】一方、生きた菌体が製品中に存在するよう
な発酵食品は、製造直後の好ましい風味を保存流通期間
中一定に維持することは極めて困難である。例えば、生
きた菌体が製品中に存在することが特徴であるヨーグル
トは、保存流通期間中に酸度が上昇し、酸味が強くなる
という風味上の欠陥を生じる。ヨーグルト保存中の酸度
上昇を防止する方法として、これまで、さまざまな方法
が試みられたが、その効果が不十分であったり、製造法
が極めて煩雑になったり、製造コストが非常に高くつく
ような方法しかみられなかった。
な発酵食品は、製造直後の好ましい風味を保存流通期間
中一定に維持することは極めて困難である。例えば、生
きた菌体が製品中に存在することが特徴であるヨーグル
トは、保存流通期間中に酸度が上昇し、酸味が強くなる
という風味上の欠陥を生じる。ヨーグルト保存中の酸度
上昇を防止する方法として、これまで、さまざまな方法
が試みられたが、その効果が不十分であったり、製造法
が極めて煩雑になったり、製造コストが非常に高くつく
ような方法しかみられなかった。
【０００８】
【発明が解決しようとしている課題】上述のように、ヨ
ーグルト等の発酵食品は、製品中に生きた菌体が存在す
るので、保存中この生きた菌体が活動を続け、これが発
酵食品の保存中の風味を劣化させる原因となることがあ
る。このような原因に基づく発酵食品の風味劣化を防止
するには、従来の製造工程を変更することなく簡単な方
法によって風味劣化の原因となる菌の活動を阻止するこ
とが最も好ましい。
ーグルト等の発酵食品は、製品中に生きた菌体が存在す
るので、保存中この生きた菌体が活動を続け、これが発
酵食品の保存中の風味を劣化させる原因となることがあ
る。このような原因に基づく発酵食品の風味劣化を防止
するには、従来の製造工程を変更することなく簡単な方
法によって風味劣化の原因となる菌の活動を阻止するこ
とが最も好ましい。
【０００９】ヨーグルトの場合、主なヨーグルトのスタ
ーター菌であるラクトバチルス・デルブルッキー・サブ
スピーシーズ・ブルガリクスとサーモフィルス菌のう
ち、少なくとも保存流通期間中の酸度上昇の主な原因菌
は前者の菌であるので、保存中前者の菌の生育を抑え、
菌株の酸度の生成を直接抑えることができれば、保存流
通期間中の酸度上昇に基づく品質の低下を効率よく抑え
ることができる。
ーター菌であるラクトバチルス・デルブルッキー・サブ
スピーシーズ・ブルガリクスとサーモフィルス菌のう
ち、少なくとも保存流通期間中の酸度上昇の主な原因菌
は前者の菌であるので、保存中前者の菌の生育を抑え、
菌株の酸度の生成を直接抑えることができれば、保存流
通期間中の酸度上昇に基づく品質の低下を効率よく抑え
ることができる。
【００１０】本発明者らは、このような見地から発酵食
品のスターターとなる微生物とサーモフィルス菌との生
育に関する相互作用を研究していたところ、生牛乳中に
スターターの生育を阻害するサーモフィルス菌が存在す
ることを見出し、これを分離同定した。
品のスターターとなる微生物とサーモフィルス菌との生
育に関する相互作用を研究していたところ、生牛乳中に
スターターの生育を阻害するサーモフィルス菌が存在す
ることを見出し、これを分離同定した。
【００１１】そして、この分離した菌について検討した
ところ、この菌は新規なものであって、しかもこの菌が
抗菌物質を産生することを見出して本発明を完成するに
至った。
ところ、この菌は新規なものであって、しかもこの菌が
抗菌物質を産生することを見出して本発明を完成するに
至った。
【００１２】従って、本発明の課題は、抗菌物質を産生
する新規な乳酸菌を提供することにある。
する新規な乳酸菌を提供することにある。
【００１３】また、本発明の課題は、この新規な乳酸菌
の産生する抗菌物質を提供することにある。
の産生する抗菌物質を提供することにある。
【００１４】さらに、本発明の課題は、この新規な乳酸
菌を含有する発酵乳用スターターを提供することにあ
る。
菌を含有する発酵乳用スターターを提供することにあ
る。
【００１５】さらに、本発明の課題は、このようなスタ
ーターを用いて貯蔵あるいは輸送中の酸度上昇を低減し
た発酵乳の製造方法を提供することにある。
ーターを用いて貯蔵あるいは輸送中の酸度上昇を低減し
た発酵乳の製造方法を提供することにある。
【００１６】
【課題を解決するための手段】すなわち、本発明は、ス
トレプトコッカス・サリバリウス・サブスピーシーズ・
サーモフィルスに属する新規な乳酸菌に関する。
トレプトコッカス・サリバリウス・サブスピーシーズ・
サーモフィルスに属する新規な乳酸菌に関する。
【００１７】本発明の新規な乳酸菌は、以下に述べる方
法によって牛乳から分離されたものである。
法によって牛乳から分離されたものである。
【００１８】生牛乳を１１５℃で１５分間滅菌した１０
％（Ｗ／Ｗ）還元脱脂乳培地に５％添加し、４０℃〜４
５℃で凝固するまで培養した。さらに、同様の方法で２
〜３回凝固を繰り返した後、その一白金耳量を採取し、
入江ら（農芸化学会誌、第４５巻、第４２３頁、１９７
１年) の寒天培地 (ソイトン１．０％（Ｗ／Ｗ）、酵母
エキス０．５％（Ｗ／Ｗ）、乳糖１．０％（Ｗ／Ｗ）、
コハク酸ナトリウム１．０％（Ｗ／Ｗ）、リン酸二水素
カリウム０．２％（Ｗ／Ｗ）、リン酸水素二カリウム
０．２％（Ｗ／Ｗ）、粉末寒天１．５％（Ｗ／Ｗ）、ｐ
Ｈ６．８、以下「ＳＹＬ寒天培地」と略記する) に塗抹
し、４０℃で２〜３日培養し、生成した多数のコロニー
から、菌株を分離した。分離した菌株を、発酵乳のスタ
ーターとして用いられるラクトバチルス・ヘルベチカス
・サブスピーシーズ・ユーグルティを検定菌として、Ｓ
ＹＬ寒天培地を用いたカップ法で抗菌活性の認められた
菌株を選択し、さらに選択した菌株について入江ら (農
芸化学会誌、第４５巻、第４２３頁、１９７１年) の培
地(ソイトン１．０％（Ｗ／Ｗ）、酵母エキス０．５％
（Ｗ／Ｗ）、乳糖１．０％（Ｗ／Ｗ）、コハク酸ナトリ
ウム１．０％（Ｗ／Ｗ）、リン酸二水素カリウム０．２
％（Ｗ／Ｗ）、リン酸水素二カリウム０．２％（Ｗ／
Ｗ）、ｐＨ６．８、以下「ＳＹＬ培地」と略記する) を
用いた液体培地希釈法で抗菌活性を試験し、抗菌活性の
認められた菌株１株を選択した。そしてこの菌を保存し
た。
％（Ｗ／Ｗ）還元脱脂乳培地に５％添加し、４０℃〜４
５℃で凝固するまで培養した。さらに、同様の方法で２
〜３回凝固を繰り返した後、その一白金耳量を採取し、
入江ら（農芸化学会誌、第４５巻、第４２３頁、１９７
１年) の寒天培地 (ソイトン１．０％（Ｗ／Ｗ）、酵母
エキス０．５％（Ｗ／Ｗ）、乳糖１．０％（Ｗ／Ｗ）、
コハク酸ナトリウム１．０％（Ｗ／Ｗ）、リン酸二水素
カリウム０．２％（Ｗ／Ｗ）、リン酸水素二カリウム
０．２％（Ｗ／Ｗ）、粉末寒天１．５％（Ｗ／Ｗ）、ｐ
Ｈ６．８、以下「ＳＹＬ寒天培地」と略記する) に塗抹
し、４０℃で２〜３日培養し、生成した多数のコロニー
から、菌株を分離した。分離した菌株を、発酵乳のスタ
ーターとして用いられるラクトバチルス・ヘルベチカス
・サブスピーシーズ・ユーグルティを検定菌として、Ｓ
ＹＬ寒天培地を用いたカップ法で抗菌活性の認められた
菌株を選択し、さらに選択した菌株について入江ら (農
芸化学会誌、第４５巻、第４２３頁、１９７１年) の培
地(ソイトン１．０％（Ｗ／Ｗ）、酵母エキス０．５％
（Ｗ／Ｗ）、乳糖１．０％（Ｗ／Ｗ）、コハク酸ナトリ
ウム１．０％（Ｗ／Ｗ）、リン酸二水素カリウム０．２
％（Ｗ／Ｗ）、リン酸水素二カリウム０．２％（Ｗ／
Ｗ）、ｐＨ６．８、以下「ＳＹＬ培地」と略記する) を
用いた液体培地希釈法で抗菌活性を試験し、抗菌活性の
認められた菌株１株を選択した。そしてこの菌を保存し
た。
【００１９】この菌について菌学的性質を試験したとこ
ろ、次のような性質を有することが判明した。 (a) 形態 ＳＹＬ培地において次の形態を示す。 細胞の形及び大きさ単球または双球で、菌の大きさ
は０．８〜１．０μm グラム染色性 陽性 (b) 次の生理学的性質を示す 脱脂乳の凝固性 ＋ アンモニア生成 − カタラーゼ生成 − 生育の範囲 (i) 温度 １０℃生育 − ４５℃生育 ＋ (ii) 食塩耐性 ２％食塩耐性 ＋ ６．５％食塩耐性 − (iii) ｐＨ ｐＨ９．６耐性 − (iv) ０．１％メチレンブルー耐性 − ＶＰテスト − 炭水化物の分解性 (i) アラビノース − (ii) キシロース − (iii) グルコース ＋ (iv) マンノース ＋ (v) フラクトース ＋ (vi) ガラクトース ＋ (vii) マルトース − (viii) シュークロース ＋ (ix) ラクトース ＋ (x) トレハロース − (xi) ソルビトール − (xii) マンニトール − (xiii) グリセロール − (xiv) デンプン − (xv) ラフィノース − (xvi) サリシン − (xvii) セロビオース − (xviii) デキストリン − (xix) イヌリン − 抗生物質の産生 ＋
ろ、次のような性質を有することが判明した。 (a) 形態 ＳＹＬ培地において次の形態を示す。 細胞の形及び大きさ単球または双球で、菌の大きさ
は０．８〜１．０μm グラム染色性 陽性 (b) 次の生理学的性質を示す 脱脂乳の凝固性 ＋ アンモニア生成 − カタラーゼ生成 − 生育の範囲 (i) 温度 １０℃生育 − ４５℃生育 ＋ (ii) 食塩耐性 ２％食塩耐性 ＋ ６．５％食塩耐性 − (iii) ｐＨ ｐＨ９．６耐性 − (iv) ０．１％メチレンブルー耐性 − ＶＰテスト − 炭水化物の分解性 (i) アラビノース − (ii) キシロース − (iii) グルコース ＋ (iv) マンノース ＋ (v) フラクトース ＋ (vi) ガラクトース ＋ (vii) マルトース − (viii) シュークロース ＋ (ix) ラクトース ＋ (x) トレハロース − (xi) ソルビトール − (xii) マンニトール − (xiii) グリセロール − (xiv) デンプン − (xv) ラフィノース − (xvi) サリシン − (xvii) セロビオース − (xviii) デキストリン − (xix) イヌリン − 抗生物質の産生 ＋
【００２０】この菌学的性質に基づいて、Ｂｅｒｇｅ
ｙ’ｓｍａｎｕｌ ｏｆ ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ｂａ
ｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ．２（Ｐ．Ｈ．Ａ．Ｓｎ
ｅａｔｈ、Ｎ．Ｓ．Ｍａｉｒ、Ｍ．Ｅ．Ｓｈａｒｐｅ
＆ Ｊ．Ｇ．Ｈｏｌｔ共編、第１０６９〜１０７０頁、
Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｋｉｎｓ、Ｂａｌｔｉｍｏ
ｒｅ Ｕ．Ｓ．Ａ．、１９８６年）によって検索したと
ころ、この菌は、ストレプトコッカス・サリバリウス・
サブスピーシーズ・サーモフィルスに属する微生物であ
って、抗菌物質を産生する点で、従来の菌と相違する新
規な菌株であると同定された。
ｙ’ｓｍａｎｕｌ ｏｆ ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ｂａ
ｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ．２（Ｐ．Ｈ．Ａ．Ｓｎ
ｅａｔｈ、Ｎ．Ｓ．Ｍａｉｒ、Ｍ．Ｅ．Ｓｈａｒｐｅ
＆ Ｊ．Ｇ．Ｈｏｌｔ共編、第１０６９〜１０７０頁、
Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｋｉｎｓ、Ｂａｌｔｉｍｏ
ｒｅ Ｕ．Ｓ．Ａ．、１９８６年）によって検索したと
ころ、この菌は、ストレプトコッカス・サリバリウス・
サブスピーシーズ・サーモフィルスに属する微生物であ
って、抗菌物質を産生する点で、従来の菌と相違する新
規な菌株であると同定された。
【００２１】本発明者らは、この微生物をストレプトコ
ッカス・サリバリウス・サブスピーシーズ・サーモフィ
ルスＳＢＴ １２７７と命名し、平成元年１２月１１日
付で工業技術院微生物工業技術研究所に寄託し、微工研
菌寄第１１１５５号なる受託番号を得た。そして、この
微生物の寄託を国際寄託に移管し、微工研条寄第３２３
４号（ＦＥＲＭ ＢＰ−３２３４）なる受託番号を得て
いる。また、この微生物は、紫外線などの放射線あるい
はＮ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン
（ＮＴＧ）等の化学薬品などの一般的な変異処理によっ
て変異され得る。本発明では、この乳酸菌から誘導され
た変異株も包含する。
ッカス・サリバリウス・サブスピーシーズ・サーモフィ
ルスＳＢＴ １２７７と命名し、平成元年１２月１１日
付で工業技術院微生物工業技術研究所に寄託し、微工研
菌寄第１１１５５号なる受託番号を得た。そして、この
微生物の寄託を国際寄託に移管し、微工研条寄第３２３
４号（ＦＥＲＭ ＢＰ−３２３４）なる受託番号を得て
いる。また、この微生物は、紫外線などの放射線あるい
はＮ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン
（ＮＴＧ）等の化学薬品などの一般的な変異処理によっ
て変異され得る。本発明では、この乳酸菌から誘導され
た変異株も包含する。
【００２２】次に、本発明は、上記した本発明の乳酸菌
の産生する抗菌物質に関する。
の産生する抗菌物質に関する。
【００２３】本発明の抗菌物質は、本発明の乳酸菌をＳ
ＹＬ培地で３０℃、２４時間培養し、その培養物を硫安
分画することにより３０〜７０％の硫安分画沈澱物から
得ることができるペプチド、蛋白質またはこれらを含有
する複合体である。
ＹＬ培地で３０℃、２４時間培養し、その培養物を硫安
分画することにより３０〜７０％の硫安分画沈澱物から
得ることができるペプチド、蛋白質またはこれらを含有
する複合体である。
【００２４】本発明の抗菌物質の抗菌スペクトルを表
１、表２及び表３に示す。
１、表２及び表３に示す。
【００２５】
【表１】
【表２】
【表３】 表１〜表３からわかるように、グラム陽性菌に対しての
み抗菌活性を示し、その範囲は狭く、典型的なバクテリ
オシンの性質を示している。
み抗菌活性を示し、その範囲は狭く、典型的なバクテリ
オシンの性質を示している。
【００２６】なお、表１〜表３の抗菌スペクトルは、次
の方法によって作成した。
の方法によって作成した。
【００２７】市販の滅菌済み９６穴マイクロプレート上
で、上記した３０〜７０％の硫安分画沈澱物の２倍希釈
系列の検体５０μl に、対象とする菌を１％接種した液
体培地（それぞれの対象とする菌の生育に適した培地）
２００μl を加え、混合し、それぞれの対象とする菌の
生育に適した所定の温度で培養した。各培養液中の対象
とする菌の生育の有無を定性的に判定し、生育の抑えら
れた培養液に添加した硫安分画沈澱物の最小濃度を最小
生育阻止濃度とした。
で、上記した３０〜７０％の硫安分画沈澱物の２倍希釈
系列の検体５０μl に、対象とする菌を１％接種した液
体培地（それぞれの対象とする菌の生育に適した培地）
２００μl を加え、混合し、それぞれの対象とする菌の
生育に適した所定の温度で培養した。各培養液中の対象
とする菌の生育の有無を定性的に判定し、生育の抑えら
れた培養液に添加した硫安分画沈澱物の最小濃度を最小
生育阻止濃度とした。
【００２８】また、本発明の上記した硫安分画沈澱物に
ついて熱安定性、トリプシン及びホスホリパーゼＤ消化
性を測定し、従来乳酸球菌が産生するとして知られてい
る公知のバクテリオシン (ナイシン、ラクトストレプシ
ン、ディプロコクシン) のそれと対比した。その結果を
表４に示す。
ついて熱安定性、トリプシン及びホスホリパーゼＤ消化
性を測定し、従来乳酸球菌が産生するとして知られてい
る公知のバクテリオシン (ナイシン、ラクトストレプシ
ン、ディプロコクシン) のそれと対比した。その結果を
表４に示す。
【００２９】
【表４】 表４より乳酸球菌の産生する既知のバクテリオシンと、
熱安定性、トリプシン及びホスホリパーゼＤ消化性の点
で異なった性質を示しており、本発明の抗菌物質は、明
らかに新規物質と判断できる。
熱安定性、トリプシン及びホスホリパーゼＤ消化性の点
で異なった性質を示しており、本発明の抗菌物質は、明
らかに新規物質と判断できる。
【００３０】なお、耐熱性試験、トリプシン消化性及び
ホスホリパーゼＤ消化性試験は次の方法により実施し
た。 1) 耐熱性試験 上記の硫安分画沈澱物をｐＨ８．０の緩衝液に溶解し、
沸騰浴中で３０分間加熱した。冷却後、ラクトバチルス
・ヘルベチカス・サブスピーシーズ・ユーグルティを検
定菌としたカップ法*)を用いて、阻止円の「有」「無」
により「耐性」「感受性」をそれぞれ判定した。
ホスホリパーゼＤ消化性試験は次の方法により実施し
た。 1) 耐熱性試験 上記の硫安分画沈澱物をｐＨ８．０の緩衝液に溶解し、
沸騰浴中で３０分間加熱した。冷却後、ラクトバチルス
・ヘルベチカス・サブスピーシーズ・ユーグルティを検
定菌としたカップ法*)を用いて、阻止円の「有」「無」
により「耐性」「感受性」をそれぞれ判定した。
【００３１】2) トリプシン消化性及びホスホリパーゼ
Ｄ消化性 上記の硫安分画沈澱物をｐＨ７．０の緩衝液に溶解し、
トリプシンまたはホスホリパーゼＤ酵素を最終濃度５mg
／mlとなるよう添加し、２５℃で１時間反応させた。ラ
クトバチルス・ヘルベチカス・サブスピーシーズ・ユー
グルティを検定菌としたカップ法*)を用いて、阻止円の
「有」「無」により「耐性」「感受性」をそれぞれ判定
した。
Ｄ消化性 上記の硫安分画沈澱物をｐＨ７．０の緩衝液に溶解し、
トリプシンまたはホスホリパーゼＤ酵素を最終濃度５mg
／mlとなるよう添加し、２５℃で１時間反応させた。ラ
クトバチルス・ヘルベチカス・サブスピーシーズ・ユー
グルティを検定菌としたカップ法*)を用いて、阻止円の
「有」「無」により「耐性」「感受性」をそれぞれ判定
した。
【００３２】カップ法*)：あらかじめラクトバチルス・
ヘルベチカス・サブスピーシーズ・ユーグルティを混釈
した寒天平板（接種量１％）上にカップシリンダーを置
き、カップシリンダー内に試料１００μl を入れ、３７
℃、１６時間培養し、阻止円の直径を測定する方法。
ヘルベチカス・サブスピーシーズ・ユーグルティを混釈
した寒天平板（接種量１％）上にカップシリンダーを置
き、カップシリンダー内に試料１００μl を入れ、３７
℃、１６時間培養し、阻止円の直径を測定する方法。
【００３３】本発明の抗菌物質は、上記した方法によっ
て得ることができ、またペプチド、蛋白質またはその複
合体であって、トリプシンで消化され、ホスホリパーゼ
Ｄで消化されず、１００℃、３０分間、ｐＨ８．０で安
定を示すものである。
て得ることができ、またペプチド、蛋白質またはその複
合体であって、トリプシンで消化され、ホスホリパーゼ
Ｄで消化されず、１００℃、３０分間、ｐＨ８．０で安
定を示すものである。
【００３４】また、このような抗菌物質の含有物も本発
明には含まれる。抗菌物質の含有物の例として培地、培
養液、その上清等を挙げることができる。
明には含まれる。抗菌物質の含有物の例として培地、培
養液、その上清等を挙げることができる。
【００３５】本発明の抗菌物質あるいはその含有物は、
必要ならば滅菌処理をほどこし、飲食品、飼料、餌料等
の保存料として用いることができる。
必要ならば滅菌処理をほどこし、飲食品、飼料、餌料等
の保存料として用いることができる。
【００３６】さらに、本発明は、本発明の乳酸菌を含有
する発酵乳用スターター及びそれを用いた発酵乳に関す
る。
する発酵乳用スターター及びそれを用いた発酵乳に関す
る。
【００３７】本発明では、上記乳酸菌を滅菌脱脂乳中に
接種して培養し、これを発酵乳用スターターとして用い
る。この発酵乳用スターターを、従来ヨーグルトのスタ
ーターとして用いられている乳酸菌、例えばサーモフィ
ルス菌、バチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ
・ブルガリクス、ラクトバチルス・ヘルベチカス・サブ
スピーシーズ・ユーグルティ、ビフィドバクテリウム・
ブレベ・サブスピーシーズ・ブレベと併用すると、本発
明の乳酸菌が産生する抗菌物質によってこれらの菌の生
育を阻害するため、これらの菌株が製品中に存在する発
酵食品の保存流通期間中の品質劣化を抑制することがで
きる。特に、一般的な発酵乳のスターターであるサーモ
フィルス菌及びラクトバチルス・デルブルッキー・サブ
スピーシーズ・ブルガリクスのうち、保存流通期間中の
品質劣化の原因である後者の生育を抑えることができる
ため、発酵乳の品質を高めることができる。
接種して培養し、これを発酵乳用スターターとして用い
る。この発酵乳用スターターを、従来ヨーグルトのスタ
ーターとして用いられている乳酸菌、例えばサーモフィ
ルス菌、バチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ
・ブルガリクス、ラクトバチルス・ヘルベチカス・サブ
スピーシーズ・ユーグルティ、ビフィドバクテリウム・
ブレベ・サブスピーシーズ・ブレベと併用すると、本発
明の乳酸菌が産生する抗菌物質によってこれらの菌の生
育を阻害するため、これらの菌株が製品中に存在する発
酵食品の保存流通期間中の品質劣化を抑制することがで
きる。特に、一般的な発酵乳のスターターであるサーモ
フィルス菌及びラクトバチルス・デルブルッキー・サブ
スピーシーズ・ブルガリクスのうち、保存流通期間中の
品質劣化の原因である後者の生育を抑えることができる
ため、発酵乳の品質を高めることができる。
【００３８】さらに、本発明の乳酸菌は、ヨーグルトば
かりではなく、発酵調整剤として、例えば乳酸飲料や発
酵乳の製品の品質を高めるために利用することができ
る。本発明の発酵乳用スターターはこのような発酵調整
剤としても用いられる。
かりではなく、発酵調整剤として、例えば乳酸飲料や発
酵乳の製品の品質を高めるために利用することができ
る。本発明の発酵乳用スターターはこのような発酵調整
剤としても用いられる。
【００３９】本発明の方法で製造される発酵乳には、ヨ
ーグルト（ハードタイプ、ソフトタイプ）あるいは乳酸
菌飲料を例示することができる。本発明で発酵乳を製造
する際には、本発明の乳酸菌と前記した発酵乳の製造に
使用される乳酸菌とを個々に順次発酵乳原料にスタータ
ーとして接種して発酵せしめるか、あるいは両者を併用
して発酵乳原料にスターターとして接種して発酵を行っ
て発酵乳を製造する。発酵乳の原料、スターターの添加
量、発酵各汁は従来法と同様の方法を実施することがで
きる。
ーグルト（ハードタイプ、ソフトタイプ）あるいは乳酸
菌飲料を例示することができる。本発明で発酵乳を製造
する際には、本発明の乳酸菌と前記した発酵乳の製造に
使用される乳酸菌とを個々に順次発酵乳原料にスタータ
ーとして接種して発酵せしめるか、あるいは両者を併用
して発酵乳原料にスターターとして接種して発酵を行っ
て発酵乳を製造する。発酵乳の原料、スターターの添加
量、発酵各汁は従来法と同様の方法を実施することがで
きる。
【００４０】本発明の実施例を挙げ、本発明をさらに具
体的に説明する。
体的に説明する。
【００４１】
【実施例１】ＳＹＬ培地 (ソイトン１％（Ｗ／Ｗ）、酵
母エキス０．５％（Ｗ／Ｗ）、乳糖１％（Ｗ／Ｗ）、コ
ハク酸ナトリウム１％（Ｗ／Ｗ）、リン酸二水素カリウ
ム０．２％（Ｗ／Ｗ）、リン酸水素二カリウム０．２％
（Ｗ／Ｗ）、ｐＨ６．８）５０ｌを１２１℃で１５分間
滅菌し、３０℃に冷却し、本発明の乳酸菌の前培養物５
００mlを接種し、３０℃で２４時間培養した。培養後４
℃に冷却し、遠心分離機（３０００rpm)により集菌し、
本発明の乳酸菌を湿菌体重量として１１７４ｇ得ること
ができた。
母エキス０．５％（Ｗ／Ｗ）、乳糖１％（Ｗ／Ｗ）、コ
ハク酸ナトリウム１％（Ｗ／Ｗ）、リン酸二水素カリウ
ム０．２％（Ｗ／Ｗ）、リン酸水素二カリウム０．２％
（Ｗ／Ｗ）、ｐＨ６．８）５０ｌを１２１℃で１５分間
滅菌し、３０℃に冷却し、本発明の乳酸菌の前培養物５
００mlを接種し、３０℃で２４時間培養した。培養後４
℃に冷却し、遠心分離機（３０００rpm)により集菌し、
本発明の乳酸菌を湿菌体重量として１１７４ｇ得ること
ができた。
【００４２】
【実施例２】ＳＹＬ培地 (ソイトン１％（Ｗ／Ｗ）、酵
母エキス０．５％（Ｗ／Ｗ）、乳糖１％（Ｗ／Ｗ）、コ
ハク酸ナトリウム１％（Ｗ／Ｗ）、リン酸二水素カリウ
ム０．２％（Ｗ／Ｗ）、リン酸水素二カリウム０．２％
（Ｗ／Ｗ）、ｐＨ６．８）１６ｌを１２１℃で１５分間
滅菌し、３０℃に冷却し、抗菌物質産生菌である本菌の
前培養物１６０mlを接種し、３０℃で２４時間培養し
た。培養後直ちに４℃に冷却し、遠心分離機（３０００
rpm)により菌体をとり除き、抗菌物質を含有した上清１
４．９ｌを得た。抗菌活性は１mlあたり８単位で、合計
１１９２００単位であった。なお、１単位は、ラクトバ
チルス・ヘルベチカス・サブスピーシーズ・ユーグルテ
ィ106 個の生育を阻害する抗菌物質量とした。
母エキス０．５％（Ｗ／Ｗ）、乳糖１％（Ｗ／Ｗ）、コ
ハク酸ナトリウム１％（Ｗ／Ｗ）、リン酸二水素カリウ
ム０．２％（Ｗ／Ｗ）、リン酸水素二カリウム０．２％
（Ｗ／Ｗ）、ｐＨ６．８）１６ｌを１２１℃で１５分間
滅菌し、３０℃に冷却し、抗菌物質産生菌である本菌の
前培養物１６０mlを接種し、３０℃で２４時間培養し
た。培養後直ちに４℃に冷却し、遠心分離機（３０００
rpm)により菌体をとり除き、抗菌物質を含有した上清１
４．９ｌを得た。抗菌活性は１mlあたり８単位で、合計
１１９２００単位であった。なお、１単位は、ラクトバ
チルス・ヘルベチカス・サブスピーシーズ・ユーグルテ
ィ106 個の生育を阻害する抗菌物質量とした。
【００４３】本発明において培養時間と培養液の抗菌活
性との関係を示すと図１のとおりとなる。抗菌活性は、
培養６時間以降から急激に上昇し、８時間前後で最高値
となる。この挙動は、菌体量を示す波長６６０nmの吸光
度と比べて遅れている。
性との関係を示すと図１のとおりとなる。抗菌活性は、
培養６時間以降から急激に上昇し、８時間前後で最高値
となる。この挙動は、菌体量を示す波長６６０nmの吸光
度と比べて遅れている。
【００４４】
【実施例３】エリッカー寒天培地（トリプトン２％（Ｗ
／Ｗ）、酵母エキス０．５％（Ｗ／Ｗ）、ゼラチン０．
２５％（Ｗ／Ｗ）、デキストロース０．５％（Ｗ／
Ｗ）、ラクトース０．５％（Ｗ／Ｗ）、シュークロース
０．５％（Ｗ／Ｗ）、塩化ナトリウム０．４％（Ｗ／
Ｗ）、酢酸ナトリウム０．１５％（Ｗ／Ｗ）、アスコル
ビン酸０．０５％（Ｗ／Ｗ）、寒天１．５％（Ｗ／
Ｗ）、ｐＨ６．８）を１２１℃で１５分間滅菌し、培地
が溶解している状態で滅菌シャーレに２０mlずつ分注
し、冷却して固化させ寒天平板を作成した。ＳＹＬ培地
(ソイトン１％（Ｗ／Ｗ）、酵母エキス０．５％（Ｗ／
Ｗ）、乳糖１％（Ｗ／Ｗ）、コハク酸ナトリウム１％
（Ｗ／Ｗ）、リン酸二水素カリウム０．２％（Ｗ／
Ｗ）、リン酸水素二カリウム０．２％（Ｗ／Ｗ）、pH
６．８）で培養した本発明の乳酸菌を寒天平板上に白金
耳で画線し、３０℃、２４時間培養して抗菌物質を産生
させた。その寒天平板を紫外線殺菌燈に１時間さらし、
画線した本菌を殺菌した。エリッカー培地で培養した被
検菌０．１mlと、溶解して４５℃に冷却したエリッカー
ソフト寒天培地（エリッカー寒天培地の寒天濃度を０．
７％（Ｗ／Ｗ）にした培地）とを混合したものをその寒
天平板上に重層した。被検菌は発酵乳のスターターとし
て使用されているサーモフィルス菌４５株及びラクトバ
チルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリ
クス２７株とした。この重層した寒天平板を３７℃、２
４時間で培養し、阻止帯の有無を判定した。その結果、
サーモフィルス菌は４３株、ラクトバチルス・デルブル
ッキー・サブスピーシーズ・ブルガリクスは７株阻止帯
が認められた。
／Ｗ）、酵母エキス０．５％（Ｗ／Ｗ）、ゼラチン０．
２５％（Ｗ／Ｗ）、デキストロース０．５％（Ｗ／
Ｗ）、ラクトース０．５％（Ｗ／Ｗ）、シュークロース
０．５％（Ｗ／Ｗ）、塩化ナトリウム０．４％（Ｗ／
Ｗ）、酢酸ナトリウム０．１５％（Ｗ／Ｗ）、アスコル
ビン酸０．０５％（Ｗ／Ｗ）、寒天１．５％（Ｗ／
Ｗ）、ｐＨ６．８）を１２１℃で１５分間滅菌し、培地
が溶解している状態で滅菌シャーレに２０mlずつ分注
し、冷却して固化させ寒天平板を作成した。ＳＹＬ培地
(ソイトン１％（Ｗ／Ｗ）、酵母エキス０．５％（Ｗ／
Ｗ）、乳糖１％（Ｗ／Ｗ）、コハク酸ナトリウム１％
（Ｗ／Ｗ）、リン酸二水素カリウム０．２％（Ｗ／
Ｗ）、リン酸水素二カリウム０．２％（Ｗ／Ｗ）、pH
６．８）で培養した本発明の乳酸菌を寒天平板上に白金
耳で画線し、３０℃、２４時間培養して抗菌物質を産生
させた。その寒天平板を紫外線殺菌燈に１時間さらし、
画線した本菌を殺菌した。エリッカー培地で培養した被
検菌０．１mlと、溶解して４５℃に冷却したエリッカー
ソフト寒天培地（エリッカー寒天培地の寒天濃度を０．
７％（Ｗ／Ｗ）にした培地）とを混合したものをその寒
天平板上に重層した。被検菌は発酵乳のスターターとし
て使用されているサーモフィルス菌４５株及びラクトバ
チルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリ
クス２７株とした。この重層した寒天平板を３７℃、２
４時間で培養し、阻止帯の有無を判定した。その結果、
サーモフィルス菌は４３株、ラクトバチルス・デルブル
ッキー・サブスピーシーズ・ブルガリクスは７株阻止帯
が認められた。
【００４５】
【実施例４】本発明の乳酸菌を滅菌脱脂乳中に接種し３
３℃で培養して発酵乳用スターターＡとする。市販のサ
ーモフィルス菌及びラクトバチルス・デルブルッキー・
サブスピーシーズ・ブルガリクスの混合スターターを滅
菌脱脂乳中に接種し４２℃で培養して発酵乳用スタータ
ーＢとする。このそれぞれのスターターを同一の殺菌ヨ
ーグルトミックス（脱脂粉乳を強化した殺菌牛乳）に
１．５％ずつ接種し、４２℃で乳酸酸度０．８％となる
まで培養し、直ちに冷却し本発明の乳酸菌を含む培養物
であるヨーグルトを得た。
３℃で培養して発酵乳用スターターＡとする。市販のサ
ーモフィルス菌及びラクトバチルス・デルブルッキー・
サブスピーシーズ・ブルガリクスの混合スターターを滅
菌脱脂乳中に接種し４２℃で培養して発酵乳用スタータ
ーＢとする。このそれぞれのスターターを同一の殺菌ヨ
ーグルトミックス（脱脂粉乳を強化した殺菌牛乳）に
１．５％ずつ接種し、４２℃で乳酸酸度０．８％となる
まで培養し、直ちに冷却し本発明の乳酸菌を含む培養物
であるヨーグルトを得た。
【００４６】本実施例によるヨーグルトは製造後ヨーグ
ルトの酸が増加せず、安定に保存できた。
ルトの酸が増加せず、安定に保存できた。
【００４７】
【実施例５】生乳、脱脂粉乳、砂糖よりなるヨーグルト
ミックスに本発明のストレプトコッカス・サリバリウス
・サブスピーシーズ・サーモフィルスSBT 1277及びラク
トバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブル
ガリクス MRC-32-ROを各１．５％接種し、４２℃で培養
し、酸度０．７５％になるまで培養し、ヨーグルトを得
た。これを１０℃に冷蔵し、１４日間貯蔵した。この貯
蔵期間中の酸度上昇を図２に示す。
ミックスに本発明のストレプトコッカス・サリバリウス
・サブスピーシーズ・サーモフィルスSBT 1277及びラク
トバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブル
ガリクス MRC-32-ROを各１．５％接種し、４２℃で培養
し、酸度０．７５％になるまで培養し、ヨーグルトを得
た。これを１０℃に冷蔵し、１４日間貯蔵した。この貯
蔵期間中の酸度上昇を図２に示す。
【００４８】この図に見られるように１０℃において酸
度上昇はほとんど見られなかった。
度上昇はほとんど見られなかった。
【００４９】
【発明の効果】本発明は、ストレプトコッカス・サリバ
リウス・サブスピーシーズ・サーモフィルスに属する新
規な乳酸菌を提供するものである。本発明の新規乳酸菌
は、バクテリオシンタイプの抗菌物質を産生し、この抗
菌物質は飲食品、餌料、飼料等の保存料として使用する
ことができる。
リウス・サブスピーシーズ・サーモフィルスに属する新
規な乳酸菌を提供するものである。本発明の新規乳酸菌
は、バクテリオシンタイプの抗菌物質を産生し、この抗
菌物質は飲食品、餌料、飼料等の保存料として使用する
ことができる。
【００５０】また、本発明の乳酸菌は、発酵乳のスター
ターとして用い、発酵乳を製造することができる。特
に、ヨーグルトのスターターに用いると、ヨーグルトの
貯蔵及び輸送中の酸の生成を抑制し、酸の過剰生成に基
づくヨーグルトの品質の低下を防止することができる。
ターとして用い、発酵乳を製造することができる。特
に、ヨーグルトのスターターに用いると、ヨーグルトの
貯蔵及び輸送中の酸の生成を抑制し、酸の過剰生成に基
づくヨーグルトの品質の低下を防止することができる。
【図１】本発明の乳酸菌の培養時間と培地の抗菌活性及
び波長６６０nmにおける吸光度との関係を示す。
び波長６６０nmにおける吸光度との関係を示す。
【図２】実施例５によって製造したヨーグルトを１０℃
で貯蔵したときの酸の上昇を示す。
で貯蔵したときの酸の上昇を示す。
─●─ 抗菌活性 ─〇─ 吸光度
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 // Ｃ１２Ｐ 21/00 Ａ 9282−4Ｂ (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:46） (Ｃ１２Ｐ 21/00 Ｃ１２Ｒ 1:46） (72)発明者 豊田 修次 北海道札幌郡広島町広葉町１丁目１−３ (72)発明者 阿彦 健吉 北海道札幌市中央区宮の森１条９丁目４− 22
Claims (6)
- 【請求項１】 下記の性質を示す抗菌物質を産生するこ
とを特徴とするストレプトコッカス・サリバリウス・サ
ブスピーシーズ・サーモフィルス （Ｓｔｒｅｐｔｏｃ
ｏｃｃｕｓ ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ ｓｕｂｓｐ．ｔｈ
ｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）。 （イ）ペプチド、蛋白質またはそれを含有する複合体で
ある。 （ロ）トリプシンで消化される。 （ハ）ホスホリパーゼＤで消化されない。 （ニ）ｐＨ８．０，１００℃、３０分間の加熱に対し熱
安定性を示す。 - 【請求項２】 下記の性質を示す抗菌物質を産生するこ
とを特徴とするストレプトコッカス・サリバリウス・サ
ブスピーシーズ・サーモフィルスＳＢＴ １２７７（微
工研条寄第３２３４号）。（イ）ペプチド、蛋白質またはそれを含有する複合体で
ある。 （ロ）トリプシンで消化される。 （ハ）ホスホリパーゼＤで消化されない。 （ニ）ｐＨ８．０，１００℃、３０分間の加熱に対し熱
安定性を示す。 - 【請求項３】 請求項１または２のストレプトコッカス
・サリバリウス・サブスピーシーズ・サーモフィルスを
ＳＹＬ培地に培養し、その培養物を硫安３０〜７０％で
分画することによって沈澱として得ることができる、下
記の性質を有する抗菌物質またはその含有物。 （イ）ペプチド、蛋白質またはそれを含有する複合体で
ある。 （ロ）トリプシンで消化される。 （ハ）ホスホリパーゼＤで消化されない。 （ニ）ｐＨ８．０，１００℃で３０分間熱安定性を示
す。 - 【請求項４】 請求項１または２のストレプトコッカス
・サリバリウス・サブスピーシーズ・サーモフィルスを
含有する発酵乳用スターター。 - 【請求項５】 原料乳に、発酵乳製造において乳酸生成
に用いられている乳酸菌を含有する発酵乳スターターと
請求項４記載の発酵乳スターターとを接種し、培養を行
うことよりなる貯蔵または輸送中酸度上昇が低減された
発酵乳の製造方法。 - 【請求項６】 乳酸生成に用いられる乳酸菌がラクトバ
チルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリ
クス（Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricu
s）、ラクトバチルス・ヘルベチカス・サブスピーシー
ズ・ユーグルティ（Lactobacillus helveticus subsp.
jugurti)及びビフィドバクテリウム・ブレベ・サブスピ
ーシーズ・ブレベ（Bifidobacterium breve subsp. bre
ve）よりなる群から選択される１種またはそれ以上の乳
酸菌である請求項５に記載の貯蔵または輸送中の酸度上
昇が低減された発酵乳の製造方法。
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3041443A JPH0732702B2 (ja) | 1990-02-23 | 1991-01-26 | 新規乳酸菌、その産生する抗菌物質、この乳酸菌を含有する発酵乳用スターター及びそれを用いた発酵乳の製造方法 |
| NZ237156A NZ237156A (en) | 1990-02-23 | 1991-02-19 | Lactic acid bacteria streptococcus salivarius subsp. thermophilus and its use in fermented milk products |
| EP91102425A EP0443543B1 (en) | 1990-02-23 | 1991-02-20 | Novel lactic acid bacteria, antibacterial substance produced by the bacteria, fermented milk starter containing the bacteria, and process for producing fermented milk by using the starter |
| DE69119110T DE69119110T2 (de) | 1990-02-23 | 1991-02-20 | Neue Milchsäurebakterien, antibakterielle Verbindungen aus diesen Bakterien hergestellt, diese Bakterien enthaltende fermentierte Milchstarter und Verfahren zur Herstellung fermentierter Milch unter Verwendung dieses Initiators |
| US07/919,458 US5338682A (en) | 1990-02-23 | 1992-07-27 | Lactic acid bacteria, antibacterial substance produced by the bacteria, fermented milk starter containing the bacteria, and process for producing fermented milk by using the starter |
| US07/987,082 US5482723A (en) | 1990-02-23 | 1992-12-07 | Lactic acid bacteria, antibacterial substance produced by the bacteria, fermented milk starter containing the bacteria, and process for producing fermented milk by using the starter |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4406790 | 1990-02-23 | ||
| JP2-44067 | 1990-02-23 | ||
| JP3041443A JPH0732702B2 (ja) | 1990-02-23 | 1991-01-26 | 新規乳酸菌、その産生する抗菌物質、この乳酸菌を含有する発酵乳用スターター及びそれを用いた発酵乳の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04211360A JPH04211360A (ja) | 1992-08-03 |
| JPH0732702B2 true JPH0732702B2 (ja) | 1995-04-12 |
Family
ID=26381062
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3041443A Expired - Lifetime JPH0732702B2 (ja) | 1990-02-23 | 1991-01-26 | 新規乳酸菌、その産生する抗菌物質、この乳酸菌を含有する発酵乳用スターター及びそれを用いた発酵乳の製造方法 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5338682A (ja) |
| EP (1) | EP0443543B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0732702B2 (ja) |
| DE (1) | DE69119110T2 (ja) |
| NZ (1) | NZ237156A (ja) |
Families Citing this family (42)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL9201089A (nl) * | 1992-06-19 | 1994-01-17 | Stichting Nl I Zuivelonderzoek | Werkwijze voor de bereiding van een gefermenteerd melkprodukt. |
| RU2031586C1 (ru) * | 1993-02-05 | 1995-03-27 | Тамара Георгиевна Извекова | Биологически активный кисломолочный продукт "ацидолакт-наринэ" и способ его получения |
| AU668023B2 (en) * | 1993-02-11 | 1996-04-18 | Dsm Ip Assets B.V. | Unit for the detection of residues of antibacterial compounds in liquids |
| ES2165860T3 (es) * | 1993-09-03 | 2002-04-01 | Nestle Sa | Bacteriocinas de streptococcus thermophilus. |
| US5676985A (en) * | 1994-10-12 | 1997-10-14 | Hsc Research And Development Limited Partnership | Antifreeze polypeptide-expressing microorganisms useful in fermentation and freezing of foods |
| US5518102A (en) * | 1994-11-07 | 1996-05-21 | Candid Logic Inc. | Diverter |
| US6297042B1 (en) | 1995-05-15 | 2001-10-02 | University Of Kentucky Research Foundation | Cheese making with bacteriophage resistant bacteria |
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| CA2281102A1 (en) | 1998-08-31 | 2000-02-29 | Kraft Foods, Inc. | Stabilization of cooked meat compositions using whey from nisin-producing cultures |
| CA2281052A1 (en) * | 1998-08-31 | 2000-02-29 | Kraft Foods, Inc. | Stabilization of fermented dairy compositions using whey from nisin producing cultures |
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| CA2566617C (en) * | 2004-05-14 | 2013-12-31 | Agtech Products, Inc. | Method and composition for reducing e.coli disease and enhancing performance using bacillus |
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| FR2888468B1 (fr) * | 2005-07-13 | 2010-08-27 | Gervais Danone Sa | Produits alimentaires fermentes contenant des souches probiotiques, et leur procede de preparation |
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