JPH07258103A - 抗血栓剤及びその製造方法 - Google Patents
抗血栓剤及びその製造方法Info
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- JPH07258103A JPH07258103A JP6218778A JP21877894A JPH07258103A JP H07258103 A JPH07258103 A JP H07258103A JP 6218778 A JP6218778 A JP 6218778A JP 21877894 A JP21877894 A JP 21877894A JP H07258103 A JPH07258103 A JP H07258103A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 優れた血栓形成原因を遮断する作用と安定性
を持つ抗血栓剤、血栓形成抑制剤又は血栓形成原因抑制
剤とその製造方法を提供する。 【構成】 薬理的に許容される緑茶抽出物を有効成分と
して含有し通常の賦形剤、稀釈剤、抗酸化剤、及びその
他薬学的製剤の製造に通常使用される補助剤を含有する
抗血栓剤及びその製造方法。
を持つ抗血栓剤、血栓形成抑制剤又は血栓形成原因抑制
剤とその製造方法を提供する。 【構成】 薬理的に許容される緑茶抽出物を有効成分と
して含有し通常の賦形剤、稀釈剤、抗酸化剤、及びその
他薬学的製剤の製造に通常使用される補助剤を含有する
抗血栓剤及びその製造方法。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は抗血栓剤、血栓形成抑制
剤又は血栓形成原因抑制剤に関するものである。
剤又は血栓形成原因抑制剤に関するものである。
【０００２】更に詳細に説明すれば、優れた血栓形成原
因を遮断する作用と安定性を持ち、新規で又進歩性のあ
る改良された製法に依り、薬理的に許容される緑茶葉エ
キスの粉末を有効成分としてなされる抗血栓剤、血栓形
成抑制剤又は血栓形成原因抑制剤に関するものである。
（以下、抗血栓剤、血栓形成抑制剤及び血栓形成原因抑
制剤を通称して“抗血栓剤”と称す。）
因を遮断する作用と安定性を持ち、新規で又進歩性のあ
る改良された製法に依り、薬理的に許容される緑茶葉エ
キスの粉末を有効成分としてなされる抗血栓剤、血栓形
成抑制剤又は血栓形成原因抑制剤に関するものである。
（以下、抗血栓剤、血栓形成抑制剤及び血栓形成原因抑
制剤を通称して“抗血栓剤”と称す。）
【０００３】
【従来の技術】緑茶は中国、日本等を中心にした極東地
域において日常の嗜好品として位置を占めている飲料で
健康に対する効用性が伝えられている。
域において日常の嗜好品として位置を占めている飲料で
健康に対する効用性が伝えられている。
【０００４】緑茶の葉に存在する成分としては緑茶タン
ニン類、カペイン、アスコルビン酸、トコペロル類、フ
ラボノル類、多糖類及びベタカロテン等が含まれてい
る。この内カヘイン、アスコルビン酸及び緑茶タンニン
類等が主成分として構成されている。この内カペイン及
びアスコルビン酸は他の植物由来の茶にも含まれている
が、カテキン類で代表される緑茶タンニン類は緑茶だけ
に求め得る固有の成分で主としてエピカテキン（epicat
echin）、エピカテキン ガレート（epicatechingallat
e）、エピガロカテキン（epigallocatechin）そしてエ
ピガリカテキンガレート（epigallicatechin gallate）
の４種類が主成分として知られている。その他弗素、亜
鉛、カルシウム塩の無機物等が含まれている。
ニン類、カペイン、アスコルビン酸、トコペロル類、フ
ラボノル類、多糖類及びベタカロテン等が含まれてい
る。この内カヘイン、アスコルビン酸及び緑茶タンニン
類等が主成分として構成されている。この内カペイン及
びアスコルビン酸は他の植物由来の茶にも含まれている
が、カテキン類で代表される緑茶タンニン類は緑茶だけ
に求め得る固有の成分で主としてエピカテキン（epicat
echin）、エピカテキン ガレート（epicatechingallat
e）、エピガロカテキン（epigallocatechin）そしてエ
ピガリカテキンガレート（epigallicatechin gallate）
の４種類が主成分として知られている。その他弗素、亜
鉛、カルシウム塩の無機物等が含まれている。
【０００５】緑茶カテキン類の主効能としては脂質過酸
化の抑制作用をはじめ、各種の疾病に関与していると思
われる活性酸素作用の抑制、発癌物質の変異原性の抑
制、コレステロル再吸収抑制作用、抗菌抗バイラス抑制
作用、虫歯の予防及び消臭作用等数多くの効果が知られ
ている。特に、１９９０年代に入って、これらの成分中
エピカロカテキン ガレートに依る発癌物質の発生（in
itiation）過程及び発癌促進者（promotor）に対する抑
制作用が知られる等、多角的に肯定的結果が報告されて
いるので緑茶カテキン類から抗癌治療剤の開発が有力視
されている。
化の抑制作用をはじめ、各種の疾病に関与していると思
われる活性酸素作用の抑制、発癌物質の変異原性の抑
制、コレステロル再吸収抑制作用、抗菌抗バイラス抑制
作用、虫歯の予防及び消臭作用等数多くの効果が知られ
ている。特に、１９９０年代に入って、これらの成分中
エピカロカテキン ガレートに依る発癌物質の発生（in
itiation）過程及び発癌促進者（promotor）に対する抑
制作用が知られる等、多角的に肯定的結果が報告されて
いるので緑茶カテキン類から抗癌治療剤の開発が有力視
されている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、優れた血栓
形成原因を遮断する作用と安定性をもつ抗血栓剤とその
製造方法を提供することを目的とする。
形成原因を遮断する作用と安定性をもつ抗血栓剤とその
製造方法を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者等は緑茶成分の
薬理学的考証に関し長い間研究を行った結果緑茶成分は
卓越した抗血栓効果を持っている驚くべき事実を発見し
て本発明を完成した。従って、本発明は、緑茶の抽出物
を有効成分として含有し通常の賦形剤、稀釈剤、抗酸化
剤、及びその他薬学的製剤の製造に通常使用される補助
剤を含有する抗血栓剤に関するものである。
薬理学的考証に関し長い間研究を行った結果緑茶成分は
卓越した抗血栓効果を持っている驚くべき事実を発見し
て本発明を完成した。従って、本発明は、緑茶の抽出物
を有効成分として含有し通常の賦形剤、稀釈剤、抗酸化
剤、及びその他薬学的製剤の製造に通常使用される補助
剤を含有する抗血栓剤に関するものである。
【０００８】本発明はまた、緑茶の抽出物を有効成分と
して含有し通常の賦形剤、稀釈剤、抗酸化剤及びその他
薬学的製剤の製造に通常使用される補助剤を含有する抗
血栓剤の製造方法を提供することである。
して含有し通常の賦形剤、稀釈剤、抗酸化剤及びその他
薬学的製剤の製造に通常使用される補助剤を含有する抗
血栓剤の製造方法を提供することである。
【０００９】緑茶のカテンキン類の分離過程は１）．抽
出過程、２）．除去過程及び３）．精製の３段階に分け
ることが出来る。従来報告された抽出過程は熱水、冷
水、ペタノール又はエタノール及びこれらの適切な混合
物を利用して抽出した。抽出液から有効成分以外の他の
成分を除去する過程は主として水と混じわらない有機溶
媒で抽出除去効果を最大にする為主として極性の大きい
クロロフォルム、エチルアセテート又はジエチレテート
等を使用した。最終的精製過程は有機溶媒の互いに異な
る極性の差異を利用した分配抽出法が主として利用され
ており、最近に至ってコラムクロマトグラフィーに依る
方法、又は高速液体クロマトグラフィーに依る精製過程
が行われている。分配抽出法に依る精製過程は抽出操作
に時間がかかり、クロロフォルム、メチルイソブチルケ
トン等の有機溶媒を多量使用するので分離操作の際経済
性及び安定性に問題がある。クロマトグラフィー法に依
る精製方法はセファデキス又はポリマ系統の樹脂を通じ
た精製方法が使用されており、溶媒の溶出条件が単純で
なく溶出時間及び多くの人力を必要とする点が改善され
るべきである。一方、高速液体クロマトグラフィーに依
る精製法は迅速な効率性及び純粋に精製出来るという点
が長所である。測定装置の購入及び溶出溶媒の高価、そ
して分離コラムの裂化等の問題点もある。
出過程、２）．除去過程及び３）．精製の３段階に分け
ることが出来る。従来報告された抽出過程は熱水、冷
水、ペタノール又はエタノール及びこれらの適切な混合
物を利用して抽出した。抽出液から有効成分以外の他の
成分を除去する過程は主として水と混じわらない有機溶
媒で抽出除去効果を最大にする為主として極性の大きい
クロロフォルム、エチルアセテート又はジエチレテート
等を使用した。最終的精製過程は有機溶媒の互いに異な
る極性の差異を利用した分配抽出法が主として利用され
ており、最近に至ってコラムクロマトグラフィーに依る
方法、又は高速液体クロマトグラフィーに依る精製過程
が行われている。分配抽出法に依る精製過程は抽出操作
に時間がかかり、クロロフォルム、メチルイソブチルケ
トン等の有機溶媒を多量使用するので分離操作の際経済
性及び安定性に問題がある。クロマトグラフィー法に依
る精製方法はセファデキス又はポリマ系統の樹脂を通じ
た精製方法が使用されており、溶媒の溶出条件が単純で
なく溶出時間及び多くの人力を必要とする点が改善され
るべきである。一方、高速液体クロマトグラフィーに依
る精製法は迅速な効率性及び純粋に精製出来るという点
が長所である。測定装置の購入及び溶出溶媒の高価、そ
して分離コラムの裂化等の問題点もある。
【００１０】本発明者等は、このような問題点を解決す
る為広範なる研究を遂行し熱水抽出液を遠心分離法に依
り残存物を一次的に完全に除去し、コラムクロマトグラ
フィー用セファデキスＬＨ−２０を使用し、分離溶媒を
単純化して、１５％水−アセトン又はジオキサン混合溶
液で一回洗浄に依って水溶性であるカペイン、ユリアミ
ノ酸類及び糖類だけでなくタペノイド類及び着色成分を
完全に洗い落とすことが出来た。従って、既存の方法の
ような脱カペイン作業が別に必要でなくなり、クロロフ
ォルム、メチルイソブチルケトン等のような有機溶媒を
使用することに依り最終的製品で現れる有機溶媒、又は
有機溶媒から由来する汚染物質の混入を防止出来る。そ
の結果、赤黄色部分だけがコラムの先端に存在するよう
になり、これは肉眼で容易に観察できる。一方、残って
いる赤黄色部分は６０％水−アセトン又はジオキサン混
合溶媒に依り一度に溶離して活性成分を最大限の収率で
得ることが出来、本発明の方法で公知の方法の欠点から
完全に脱することが出来た。このような発見を基礎とし
て広範囲の研究を重ねた結果本発明を完成するようにな
った。
る為広範なる研究を遂行し熱水抽出液を遠心分離法に依
り残存物を一次的に完全に除去し、コラムクロマトグラ
フィー用セファデキスＬＨ−２０を使用し、分離溶媒を
単純化して、１５％水−アセトン又はジオキサン混合溶
液で一回洗浄に依って水溶性であるカペイン、ユリアミ
ノ酸類及び糖類だけでなくタペノイド類及び着色成分を
完全に洗い落とすことが出来た。従って、既存の方法の
ような脱カペイン作業が別に必要でなくなり、クロロフ
ォルム、メチルイソブチルケトン等のような有機溶媒を
使用することに依り最終的製品で現れる有機溶媒、又は
有機溶媒から由来する汚染物質の混入を防止出来る。そ
の結果、赤黄色部分だけがコラムの先端に存在するよう
になり、これは肉眼で容易に観察できる。一方、残って
いる赤黄色部分は６０％水−アセトン又はジオキサン混
合溶媒に依り一度に溶離して活性成分を最大限の収率で
得ることが出来、本発明の方法で公知の方法の欠点から
完全に脱することが出来た。このような発見を基礎とし
て広範囲の研究を重ねた結果本発明を完成するようにな
った。
【００１１】本発明において初段階である緑茶を熱水で
抽出した後抽出液の濃縮過程は有効成分が抗酸化効果の
有るという点を考慮して必ずｎ−ブタノールを抽出液の
１／４程度加えて、抽出液が濃縮の際上部の空気に露出
され酸化して変化しないよう常にｎ−ブタノールの容積
を維持しながら濃縮した。一方、最終的に出た有効成分
の濃縮作業は凍結乾燥方式に依り実施した。完全に水分
を除去できたのは勿論、濃縮液の組成と凍結乾燥後の有
効成分の組成比は殆ど変化が無かった。
抽出した後抽出液の濃縮過程は有効成分が抗酸化効果の
有るという点を考慮して必ずｎ−ブタノールを抽出液の
１／４程度加えて、抽出液が濃縮の際上部の空気に露出
され酸化して変化しないよう常にｎ−ブタノールの容積
を維持しながら濃縮した。一方、最終的に出た有効成分
の濃縮作業は凍結乾燥方式に依り実施した。完全に水分
を除去できたのは勿論、濃縮液の組成と凍結乾燥後の有
効成分の組成比は殆ど変化が無かった。
【００１２】乾燥された有効成分の粉末は黄褐色で、水
によく溶け、６か月以上保管の際も吸収性が無く極めて
安定であった。従って、乾燥した粉末は容易に薬学的製
剤に製造され得る。
によく溶け、６か月以上保管の際も吸収性が無く極めて
安定であった。従って、乾燥した粉末は容易に薬学的製
剤に製造され得る。
【００１３】上記の方法を反復して実施した結果、各回
分（batch）に伴う活性成分を含有した製品の各成分組
成が殆ど一致した。この活性分劃の組成を調査した結
果、ポリペノル類３０％、エピガロカテキンガレートと
エピカテキンの混合物６０％が含有されており、６％以
下のエピガロカテキンの存在が認められた。
分（batch）に伴う活性成分を含有した製品の各成分組
成が殆ど一致した。この活性分劃の組成を調査した結
果、ポリペノル類３０％、エピガロカテキンガレートと
エピカテキンの混合物６０％が含有されており、６％以
下のエピガロカテキンの存在が認められた。
【００１４】本発明方法の緑茶抽出物の一般的抽出方法
は下記の各方法に依り説明する。
は下記の各方法に依り説明する。
【００１５】抽出方法 出発物質である乾燥した緑茶葉をそのまま又は parched
green tea を７０−９０℃の熱水で１０分以上抽出す
る。生成混合物を望ましくは攪拌しながら沸騰しない範
囲で抽出を終える。抽出液中の不溶性の物質は加圧濾
過、吸引濾過又は遠心分離濾過のような公知の方法に依
り濾過して濾過液を収得する。
green tea を７０−９０℃の熱水で１０分以上抽出す
る。生成混合物を望ましくは攪拌しながら沸騰しない範
囲で抽出を終える。抽出液中の不溶性の物質は加圧濾
過、吸引濾過又は遠心分離濾過のような公知の方法に依
り濾過して濾過液を収得する。
【００１６】抽出に使用された熱水は緑茶重量当５−１
００倍、望ましくは１０−３０倍の量で使用し得る。熱
水の抽出溶媒の組成は５−５０％程度のアルコール性溶
媒を混合して使用することも出来る。抽出時間は抽出温
度に依って異なる。一般的に３０秒乃至１時間、望まし
くは５−２０分である。
００倍、望ましくは１０−３０倍の量で使用し得る。熱
水の抽出溶媒の組成は５−５０％程度のアルコール性溶
媒を混合して使用することも出来る。抽出時間は抽出温
度に依って異なる。一般的に３０秒乃至１時間、望まし
くは５−２０分である。
【００１７】減圧下での濃縮方法 熱水を抽出溶媒として使用する時、収得した熱水抽出物
に約１０−５０％（Ｖ／Ｖ）、望ましくは２０％程度の
ｎ−ブタノールを加えて減圧下濃縮操作が完全に終わる
までこの比率を維持させて、抽出物の沸騰を防止する一
方、熱水抽出物の上層に存在するようにして抽出物内の
有効成分の空気と直接接触を防止して、成分組成の変化
を防止した。
に約１０−５０％（Ｖ／Ｖ）、望ましくは２０％程度の
ｎ−ブタノールを加えて減圧下濃縮操作が完全に終わる
までこの比率を維持させて、抽出物の沸騰を防止する一
方、熱水抽出物の上層に存在するようにして抽出物内の
有効成分の空気と直接接触を防止して、成分組成の変化
を防止した。
【００１８】濃縮は約５０−７０℃で加熱しながら減圧
下、例えば、１０−７０ｍｍＨｇで遂行して出た粘性抽
出物［水含量約１０−３０％（Ｗ／Ｗ）］を製造する。
下、例えば、１０−７０ｍｍＨｇで遂行して出た粘性抽
出物［水含量約１０−３０％（Ｗ／Ｗ）］を製造する。
【００１９】減圧下の濃縮に必要な時間は減圧の程度に
依り異なるが、約３０分−２時間である。減圧下の濃縮
方法において、温度は抽出物中の成分の損失又は破壊を
防止する為９０℃以上には上昇させてはならない。
依り異なるが、約３０分−２時間である。減圧下の濃縮
方法において、温度は抽出物中の成分の損失又は破壊を
防止する為９０℃以上には上昇させてはならない。
【００２０】凍結乾燥方法 コラムから得た精製液を減圧下濃縮方法に依って、熱を
加えない常温で濃縮した後、急速に冷凍させて保管す
る。凍結乾燥方法−１００℃以下の冷媒に依り極低温状
態で真空状態に試料を定置して、昇華性の有る物質と残
留する水を完全に除去することが出来る。乾燥時間は試
料の量、表面的、冷媒温度及び真空ポンプの容量に従っ
て左右されるが約１２−２４時間以内に完全に乾燥品を
得ることが出来る。
加えない常温で濃縮した後、急速に冷凍させて保管す
る。凍結乾燥方法−１００℃以下の冷媒に依り極低温状
態で真空状態に試料を定置して、昇華性の有る物質と残
留する水を完全に除去することが出来る。乾燥時間は試
料の量、表面的、冷媒温度及び真空ポンプの容量に従っ
て左右されるが約１２−２４時間以内に完全に乾燥品を
得ることが出来る。
【００２１】上記の工程に依り収得された乾燥粉末には
緑茶葉に含まれている有効成分の一つである次の一般
式：
緑茶葉に含まれている有効成分の一つである次の一般
式：
【００２２】
【化１】 のエピガロカテキン ガレート（ＥＧＣＧ）が抽出物に
含有された量の約５０−７０％（Ｗ／Ｗ）比率で本発明
の生成物に残っている。
含有された量の約５０−７０％（Ｗ／Ｗ）比率で本発明
の生成物に残っている。
【００２３】このように収得された乾燥粉末は吸湿性が
無く比容積の小さい粉末なので、公知の方法に従って粉
末、微細顆粒、顆粒又は錠剤のような薬学的製剤に製造
するのに適当である。
無く比容積の小さい粉末なので、公知の方法に従って粉
末、微細顆粒、顆粒又は錠剤のような薬学的製剤に製造
するのに適当である。
【００２４】又、このように収得された乾燥粉末は毒性
が少なく、経口投与が出来る。乾燥された粉末は薬学的
に許容し得る賦形剤、（例、穀物の粉末、ラクトース、
炭酸カルシウム、燐酸カルシウム等）、結合剤（例、穀
物粉末、アラビアゴム、カルボキシメチルセルローズ、
ヒドロキシメチルセルローズ、結晶性セルローズ等）、
潤滑剤（例、マグネシウムステアレート、滑石等）及び
分解剤（カルボキシメチルセルローズ、カルシウム、滑
石、合成アルミニウム、シリケート等）、稀釈剤（水、
直物類等）と混合することに依りカプセル、粉末、顆
粒、微細顆粒又は錠剤、ソフトカプセル、及び液剤のよ
うな薬学的製剤に製造することが出来る。
が少なく、経口投与が出来る。乾燥された粉末は薬学的
に許容し得る賦形剤、（例、穀物の粉末、ラクトース、
炭酸カルシウム、燐酸カルシウム等）、結合剤（例、穀
物粉末、アラビアゴム、カルボキシメチルセルローズ、
ヒドロキシメチルセルローズ、結晶性セルローズ等）、
潤滑剤（例、マグネシウムステアレート、滑石等）及び
分解剤（カルボキシメチルセルローズ、カルシウム、滑
石、合成アルミニウム、シリケート等）、稀釈剤（水、
直物類等）と混合することに依りカプセル、粉末、顆
粒、微細顆粒又は錠剤、ソフトカプセル、及び液剤のよ
うな薬学的製剤に製造することが出来る。
【００２５】下記の実施例は本発明をより詳細に説明す
るものであり、本発明を制限するものではない。
るものであり、本発明を制限するものではない。
【００２６】
＜実施例 １＞緑茶葉の乾燥物、parched green tea 又
は市販の緑茶２００ｇを７０−９０℃の熱水４，０００
ｍｌで２０分間抽出する。得た抽出液は一次濾過して不
溶物を篩い上げた後、濾液を再び２０００ｒｐｍで１０
分間遠心分離して沈殿した残滓を除去する。上層の濾液
（約３，５００ｍｌ）を集めて真空回転蒸発器で７０℃
で約４００ｍｌになるまで減圧濃縮する。クロロフォル
ム４００ｍｌで抽出して非極性化合物を完全に除去す
る。上記の抽出は３回以上実施する。次いで水層をエチ
ルアセテート４００ｍｌで３回反復抽出して得た有機溶
媒層約１，２００ｍｌを真空回転蒸発器で５０℃で５０
ｍｌまで濃縮する。濃縮液にアセトン又はジオキサン２
００ｍｌを加え再び濃縮して２０ｍｌにする。濃縮液２
０ｍｌをセファデキスＬＨ−２０コラム（内径３５ｍｍ
ｘ ｒ 長さ５００ｍｍ，セファデキス純重量２００
ｇ）の上部に注入する。まず、水−アセトン又は水−ジ
オキサン（８４：１５，容積比）の溶液３，０００ｍｌ
で十分洗ってコラム内の緑黄色及び褐色層が完全に溶出
したと判断した後、水−アセトン又は水−ジオキサン
（４０：６０，容積比）溶液で溶出し始めてコラム上層
部に吸着されていた黄褐色乃至黄色帯（band）がコラム
の先端に溶出し始めたらその分劃を受けて真空蒸発乾燥
器で７０℃で５０ｍｌまで濃縮する。濃縮液は−２０℃
以下で１日保管した後、少量ずつ凍結乾燥機で完全に乾
固させて８．６ｇの乾燥粉末を得る（ＥＧＣＧ 残留
比：７０％）。
は市販の緑茶２００ｇを７０−９０℃の熱水４，０００
ｍｌで２０分間抽出する。得た抽出液は一次濾過して不
溶物を篩い上げた後、濾液を再び２０００ｒｐｍで１０
分間遠心分離して沈殿した残滓を除去する。上層の濾液
（約３，５００ｍｌ）を集めて真空回転蒸発器で７０℃
で約４００ｍｌになるまで減圧濃縮する。クロロフォル
ム４００ｍｌで抽出して非極性化合物を完全に除去す
る。上記の抽出は３回以上実施する。次いで水層をエチ
ルアセテート４００ｍｌで３回反復抽出して得た有機溶
媒層約１，２００ｍｌを真空回転蒸発器で５０℃で５０
ｍｌまで濃縮する。濃縮液にアセトン又はジオキサン２
００ｍｌを加え再び濃縮して２０ｍｌにする。濃縮液２
０ｍｌをセファデキスＬＨ−２０コラム（内径３５ｍｍ
ｘ ｒ 長さ５００ｍｍ，セファデキス純重量２００
ｇ）の上部に注入する。まず、水−アセトン又は水−ジ
オキサン（８４：１５，容積比）の溶液３，０００ｍｌ
で十分洗ってコラム内の緑黄色及び褐色層が完全に溶出
したと判断した後、水−アセトン又は水−ジオキサン
（４０：６０，容積比）溶液で溶出し始めてコラム上層
部に吸着されていた黄褐色乃至黄色帯（band）がコラム
の先端に溶出し始めたらその分劃を受けて真空蒸発乾燥
器で７０℃で５０ｍｌまで濃縮する。濃縮液は−２０℃
以下で１日保管した後、少量ずつ凍結乾燥機で完全に乾
固させて８．６ｇの乾燥粉末を得る（ＥＧＣＧ 残留
比：７０％）。
【００２７】乾燥粉末でＥＧＣＧの残留比率は下の方程
式により計算する。
式により計算する。
【００２８】ＥＧＣＧの残留比率（％）＝ＥＧＣＧ 該
当 ピーク面積／全体ピーク面積×１００ 上記の方法に依って得られた乾燥粉末５．０ｍｇを精密
に取ってメタノール５．０ｍｇに溶かし、此のうち５μ
ｌを高速液体クロマトグラフィーに入れてＥＧＣＧの含
量を測定する。
当 ピーク面積／全体ピーク面積×１００ 上記の方法に依って得られた乾燥粉末５．０ｍｇを精密
に取ってメタノール５．０ｍｇに溶かし、此のうち５μ
ｌを高速液体クロマトグラフィーに入れてＥＧＣＧの含
量を測定する。
【００２９】＜高速液体クロマトグラフィー測定条件＞ 測定機器：高速液体クロマトグラフィー（Ｐ−６３０
０，日本日立工業社） 溶離条件：アセトニトリル−エチルアセテート−０．０
５％燐酸（１２：２：８６，Ｖ／Ｖ）混合溶媒 分離コラム：Cosmosil ５Ｃ１８（４．６ｍｍ ｉ．
ｄ．ｘ １５０ｍｍ Ｌ）（日本Ｎakalai Tesque社） コラム温度：４０℃ 測定波長：２８０ｎｍ このような条件の下でＥＧＣＧの残留時間は６．９分で
ある。
０，日本日立工業社） 溶離条件：アセトニトリル−エチルアセテート−０．０
５％燐酸（１２：２：８６，Ｖ／Ｖ）混合溶媒 分離コラム：Cosmosil ５Ｃ１８（４．６ｍｍ ｉ．
ｄ．ｘ １５０ｍｍ Ｌ）（日本Ｎakalai Tesque社） コラム温度：４０℃ 測定波長：２８０ｎｍ このような条件の下でＥＧＣＧの残留時間は６．９分で
ある。
【００３０】上記の試験の結果、ＥＧＣＧの残留比率は
７０％である。
７０％である。
【００３１】実施例２−６で収得された乾燥粉末のＥＧ
ＣＧの残留比率も上記と同一なる方法で評価する。
ＣＧの残留比率も上記と同一なる方法で評価する。
【００３２】＜実施例 ２＞緑茶葉乾燥物、parched gr
een tea 又は市販の緑茶１．５ｋｇを７０℃の水−エタ
ノール（９０：１０，容積比）混合溶液２０．０リット
ルで２０分抽出する。得られた抽出液は濾紙を使用して
一次濾過をなし不溶物は篩い出す。濾液（約１９．０リ
ットル）を集めて真空回転蒸発器で７０℃で減圧濃縮し
て粘性抽出物を得る。粘性抽出物を再び温水２リットル
に溶かした後、５００ｍｌずつ分けてクロロフォルム−
ｎ−ヘキサン混合溶媒（８０：２０，容積比）５００ｍ
ｌで抽出して非極性化合物等を完全に除去する。上記の
抽出除去作業は３回以上実施する。次いで、水層をエチ
ルアセテート５００ｍｌで３回反復抽出して得た有機層
約１，５００ｍｌを真空回転蒸発器で５０℃で完全に乾
燥する。乾燥物にアセトン５００ｍｌを加え再び濃縮し
て５０ｍｌにする。濃縮液５０ｍｌをセパデキスＬＨ−
２０コラム（内径７０ｍｍ ｘ 長さ５００ｍｍ，セパ
デキス純重量４００ｇ）の上部に注入する。先ず、水
４．０リットルで水溶性物質を除去した後、水−アセト
ン（７０：３０，容積比）の溶液３．０リットルで十分
に洗浄しながらコラム内の緑黄色及び褐色層が完全に溶
出されたと判断した後、水−アセトン（４０：６０，容
積比）溶液で溶出し始めて、コラム上層部に吸着されて
いた黄褐色乃至黄色帯がコラム先端に溶出し始めたらそ
の分劃を受けて真空蒸発乾燥器で７０℃で１００ｍｌま
で濃縮する。濃縮液は−２０℃以下で１日保管した後少
量ずつ凍結乾燥器で完全に乾燥させて４３．８ｇの乾燥
粉末を得る（ＥＧＣＧ残留比 ５４％）。
een tea 又は市販の緑茶１．５ｋｇを７０℃の水−エタ
ノール（９０：１０，容積比）混合溶液２０．０リット
ルで２０分抽出する。得られた抽出液は濾紙を使用して
一次濾過をなし不溶物は篩い出す。濾液（約１９．０リ
ットル）を集めて真空回転蒸発器で７０℃で減圧濃縮し
て粘性抽出物を得る。粘性抽出物を再び温水２リットル
に溶かした後、５００ｍｌずつ分けてクロロフォルム−
ｎ−ヘキサン混合溶媒（８０：２０，容積比）５００ｍ
ｌで抽出して非極性化合物等を完全に除去する。上記の
抽出除去作業は３回以上実施する。次いで、水層をエチ
ルアセテート５００ｍｌで３回反復抽出して得た有機層
約１，５００ｍｌを真空回転蒸発器で５０℃で完全に乾
燥する。乾燥物にアセトン５００ｍｌを加え再び濃縮し
て５０ｍｌにする。濃縮液５０ｍｌをセパデキスＬＨ−
２０コラム（内径７０ｍｍ ｘ 長さ５００ｍｍ，セパ
デキス純重量４００ｇ）の上部に注入する。先ず、水
４．０リットルで水溶性物質を除去した後、水−アセト
ン（７０：３０，容積比）の溶液３．０リットルで十分
に洗浄しながらコラム内の緑黄色及び褐色層が完全に溶
出されたと判断した後、水−アセトン（４０：６０，容
積比）溶液で溶出し始めて、コラム上層部に吸着されて
いた黄褐色乃至黄色帯がコラム先端に溶出し始めたらそ
の分劃を受けて真空蒸発乾燥器で７０℃で１００ｍｌま
で濃縮する。濃縮液は−２０℃以下で１日保管した後少
量ずつ凍結乾燥器で完全に乾燥させて４３．８ｇの乾燥
粉末を得る（ＥＧＣＧ残留比 ５４％）。
【００３３】＜実施例 ３＞緑茶葉乾燥物、parched gr
een tea 又は市販の緑茶２００ｇを７０−９０℃の熱
水、４，０００ｍｌで２０分間抽出する。得た抽出液は
一次濾過して不溶物を篩い出した後、濾液を再び２，０
００ｒｐｍで１０分間遠心分離して沈殿した残渣除去す
る。上層の濾液（約３，５００ｍｌ）を集めて真空回転
蒸発器で７０℃で約４００ｍｌになるまで減圧濃縮す
る。次いで、水層をエチルアセテート４００ｍｌで３回
反復抽出して得た有機溶媒層約１，２００ｍｌを真空回
転蒸発器で５０℃で５０ｍｌまで濃縮する。濃縮液にイ
ソプロパノール２００ｍｌを加え再び濃縮して２０ｍｌ
にする。濃縮液２０ｍｌをセパデキスＬＨ−２０コラム
（内径３５ｍｍ ｘ 長さ５００ｍｍ，セパデキス純重
量 ２００ｇ）の上部に注入する。先ず、水−アセトン
（８５：１５，容積比）の溶液３，０００ｍｌで十分洗
浄しながらコラム内の緑黄色及び褐色層が完全に溶出さ
れたと判断した後、水−アセトン（５５：４５，容積
比）溶液５．０リットルで溶出し始めて、コラム上層部
に吸着していた黄褐色乃至黄色帯がコラム先端に溶出し
始めればその分劃を受けて真空蒸発乾燥器で７０℃で５
０ｍｌまで濃縮する。セパデキスＬＨ−２０コラムはア
セトン２．０リットルでコラム内に残留する非極性物質
を溶出させた後再使用出来る。濃縮液は−２０℃以下で
１日保管した後、少量ずつ凍結乾燥器で完全に乾固させ
て１４．７ｇの乾燥粉末を得る（ＥＧＣＧ 残留比 ６
２％）。
een tea 又は市販の緑茶２００ｇを７０−９０℃の熱
水、４，０００ｍｌで２０分間抽出する。得た抽出液は
一次濾過して不溶物を篩い出した後、濾液を再び２，０
００ｒｐｍで１０分間遠心分離して沈殿した残渣除去す
る。上層の濾液（約３，５００ｍｌ）を集めて真空回転
蒸発器で７０℃で約４００ｍｌになるまで減圧濃縮す
る。次いで、水層をエチルアセテート４００ｍｌで３回
反復抽出して得た有機溶媒層約１，２００ｍｌを真空回
転蒸発器で５０℃で５０ｍｌまで濃縮する。濃縮液にイ
ソプロパノール２００ｍｌを加え再び濃縮して２０ｍｌ
にする。濃縮液２０ｍｌをセパデキスＬＨ−２０コラム
（内径３５ｍｍ ｘ 長さ５００ｍｍ，セパデキス純重
量 ２００ｇ）の上部に注入する。先ず、水−アセトン
（８５：１５，容積比）の溶液３，０００ｍｌで十分洗
浄しながらコラム内の緑黄色及び褐色層が完全に溶出さ
れたと判断した後、水−アセトン（５５：４５，容積
比）溶液５．０リットルで溶出し始めて、コラム上層部
に吸着していた黄褐色乃至黄色帯がコラム先端に溶出し
始めればその分劃を受けて真空蒸発乾燥器で７０℃で５
０ｍｌまで濃縮する。セパデキスＬＨ−２０コラムはア
セトン２．０リットルでコラム内に残留する非極性物質
を溶出させた後再使用出来る。濃縮液は−２０℃以下で
１日保管した後、少量ずつ凍結乾燥器で完全に乾固させ
て１４．７ｇの乾燥粉末を得る（ＥＧＣＧ 残留比 ６
２％）。
【００３４】＜実施例 ４＞緑茶乾燥物、parched gree
n tea 又は市販の緑茶１００ｇを７０−９０℃の熱水、
１．０リットルで１０分間抽出する。得た抽出液は一次
濾過して不溶物を篩い出した後、濾液を再び２，０００
ｒｐｍで１０分間遠心分離して沈殿した残渣を除去す
る。上層の濾液（約０．８リットル）を集めて真空回転
蒸発器で７０℃で約１００ｍｌになるまで減圧濃縮す
る。次いで、水層をエチルアセテート１００ｍｌで３回
反復抽出して得た有機溶媒層約２８０ｍｌを真空回転蒸
発器で５０℃で粘稠状態まで濃縮する。濃縮液にメタノ
ール１５０ｍｌ加え再び濃縮して１５ｍｌにする。濃縮
液１５ｍｌをセパデキスＬＨ−２０コラム（内径 ３５
ｍｍｘ ｒ 長さ５５０ｍｍ，セパデキス純重量２００
ｇ）の上部に注入する。先ず、水−メタノール（８５：
１５，容積比）の溶液４．０リットルで十分洗ってコラ
ム内の緑黄色及び褐色層が完全に溶出されたと判断した
後、水−メタノール（３０：７０，容積比）溶液で溶出
し始めて、コラム上層部に吸着していた黄褐色乃至黄色
帯がコラム先端に溶出し始めると、その分劃を受けて真
空蒸発乾燥器で７０℃で３０ｍｌまで濃縮する。濃縮液
は−２０℃以下で１日保管した後少量ずつ凍結乾燥器で
完全に乾固させて５．５ｇの乾燥粉末を得る（ＥＧＣＧ
残留比 ５８％）。
n tea 又は市販の緑茶１００ｇを７０−９０℃の熱水、
１．０リットルで１０分間抽出する。得た抽出液は一次
濾過して不溶物を篩い出した後、濾液を再び２，０００
ｒｐｍで１０分間遠心分離して沈殿した残渣を除去す
る。上層の濾液（約０．８リットル）を集めて真空回転
蒸発器で７０℃で約１００ｍｌになるまで減圧濃縮す
る。次いで、水層をエチルアセテート１００ｍｌで３回
反復抽出して得た有機溶媒層約２８０ｍｌを真空回転蒸
発器で５０℃で粘稠状態まで濃縮する。濃縮液にメタノ
ール１５０ｍｌ加え再び濃縮して１５ｍｌにする。濃縮
液１５ｍｌをセパデキスＬＨ−２０コラム（内径 ３５
ｍｍｘ ｒ 長さ５５０ｍｍ，セパデキス純重量２００
ｇ）の上部に注入する。先ず、水−メタノール（８５：
１５，容積比）の溶液４．０リットルで十分洗ってコラ
ム内の緑黄色及び褐色層が完全に溶出されたと判断した
後、水−メタノール（３０：７０，容積比）溶液で溶出
し始めて、コラム上層部に吸着していた黄褐色乃至黄色
帯がコラム先端に溶出し始めると、その分劃を受けて真
空蒸発乾燥器で７０℃で３０ｍｌまで濃縮する。濃縮液
は−２０℃以下で１日保管した後少量ずつ凍結乾燥器で
完全に乾固させて５．５ｇの乾燥粉末を得る（ＥＧＣＧ
残留比 ５８％）。
【００３５】＜実施例 ５＞緑茶葉乾燥物、parched gr
een tea 又は市販の緑茶２００ｇを７０−９０℃の熱
水、４，０００ｍｌで２０分間抽出する。得た抽出液は
一次濾過して不溶物を篩い出した後、濾液を再び２，０
００ｒｐｍで１０分間遠心分離して沈殿した残渣を除去
する。上層の濾液（約３，５００ｍｌ）を集めて真空回
転蒸発器で７０℃約４００ｍｌになるまで減圧濃縮す
る。次いで、水層をエチルアセテート４００ｍｌで３回
反復抽出して得た有機溶媒層約１，２００ｍｌを真空回
転蒸発器で５０℃で５０ｍｌまで濃縮する。濃縮液にイ
ソプロパノール２００ｍｌを加え再び濃縮して２０ｍｌ
にする。濃縮液２０ｍｌをセパデキスＬＨ−２０コラム
（内径 ３５ｍｍ ｘ 長さ５５０ｍｍ，セパデキス純
重量２００ｇ）の上部に注入する。先ず、水−イソプロ
パノール（９０：１０，容積比）の溶液２．５リットル
で十分に洗ってコラム内の緑黄色及び褐色層が完全に溶
出されたと判断した後、水−イソプロパノール（５０：
５０，容積比）溶液で溶出し始め、コラム上層部に吸着
していた黄褐色乃至黄色帯がコラム先端に溶出し始めれ
ばその分劃を受けて真空蒸発乾燥器で７０℃で４０ｍｌ
まで濃縮する。濃縮液は−２０℃以下で１日保管した後
少量ずつ凍結乾燥器で完全に乾固させて１０．２ｇの乾
燥粉末を得る（ＥＧＣＧ 残留比 ７０％）。
een tea 又は市販の緑茶２００ｇを７０−９０℃の熱
水、４，０００ｍｌで２０分間抽出する。得た抽出液は
一次濾過して不溶物を篩い出した後、濾液を再び２，０
００ｒｐｍで１０分間遠心分離して沈殿した残渣を除去
する。上層の濾液（約３，５００ｍｌ）を集めて真空回
転蒸発器で７０℃約４００ｍｌになるまで減圧濃縮す
る。次いで、水層をエチルアセテート４００ｍｌで３回
反復抽出して得た有機溶媒層約１，２００ｍｌを真空回
転蒸発器で５０℃で５０ｍｌまで濃縮する。濃縮液にイ
ソプロパノール２００ｍｌを加え再び濃縮して２０ｍｌ
にする。濃縮液２０ｍｌをセパデキスＬＨ−２０コラム
（内径 ３５ｍｍ ｘ 長さ５５０ｍｍ，セパデキス純
重量２００ｇ）の上部に注入する。先ず、水−イソプロ
パノール（９０：１０，容積比）の溶液２．５リットル
で十分に洗ってコラム内の緑黄色及び褐色層が完全に溶
出されたと判断した後、水−イソプロパノール（５０：
５０，容積比）溶液で溶出し始め、コラム上層部に吸着
していた黄褐色乃至黄色帯がコラム先端に溶出し始めれ
ばその分劃を受けて真空蒸発乾燥器で７０℃で４０ｍｌ
まで濃縮する。濃縮液は−２０℃以下で１日保管した後
少量ずつ凍結乾燥器で完全に乾固させて１０．２ｇの乾
燥粉末を得る（ＥＧＣＧ 残留比 ７０％）。
【００３６】＜実施例 ６＞緑茶葉乾燥物、parched gr
een tea，又は市販の緑茶２００ｇを４０−６５℃の水
−メタノール（５０：５０，容積比）混合溶液４．０リ
ットルで６０分間抽出する。得た抽出液は一次濾過して
不溶物を篩い出した後、濾液を再び２，０００ｒｐｍで
１０分間遠心分離して沈殿した残渣を除去する。上層の
濾液（約３．０リットル）を集めて真空回転蒸発器で７
０℃で完全に減圧濃縮する。濃縮乾固物を水−メタノー
ル（８０：２０，容積比）混合溶液５００ｍｌに加温し
ながら溶かした後、エチルアセテート４００ｍｌで３回
反復抽出して得た有機溶媒層約１，２００ｍｌを真空回
転蒸発器で５０℃で５０ｍｌまで濃縮する。濃縮液にジ
オキサン２００ｍｌを加え再び濃縮して２０ｍｌにす
る。濃縮液２０ｍｌをセパデキスＬＨ−２０コラム（内
径 ３５ｍｍ ｘ ｒ 長さ５５０ｍｍ，セパデキス純
重量２００ｇ）の上部に注入する。先ず、水−ジオキサ
ン（８５：１５，容積比）の溶液３，０００ｍｌで十分
に洗ってコラム内の緑黄色及び褐色層が完全に溶出され
たと判断した後、水−ジオキサン（４０：６０，容積
比）溶液で溶出し始めて、コラム上層部に吸着していた
黄褐色乃至黄色帯がコラム先端に溶出し始めればその分
劃を受けて真空蒸発乾燥器で７０℃で５０ｍｌまで濃縮
する。濃縮液は−２０℃以下で１日保管した後少量ずつ
凍結乾燥器で完全に乾固させて７．８ｇの乾燥粉末を得
る（ＥＧＣＧ 残留比）。
een tea，又は市販の緑茶２００ｇを４０−６５℃の水
−メタノール（５０：５０，容積比）混合溶液４．０リ
ットルで６０分間抽出する。得た抽出液は一次濾過して
不溶物を篩い出した後、濾液を再び２，０００ｒｐｍで
１０分間遠心分離して沈殿した残渣を除去する。上層の
濾液（約３．０リットル）を集めて真空回転蒸発器で７
０℃で完全に減圧濃縮する。濃縮乾固物を水−メタノー
ル（８０：２０，容積比）混合溶液５００ｍｌに加温し
ながら溶かした後、エチルアセテート４００ｍｌで３回
反復抽出して得た有機溶媒層約１，２００ｍｌを真空回
転蒸発器で５０℃で５０ｍｌまで濃縮する。濃縮液にジ
オキサン２００ｍｌを加え再び濃縮して２０ｍｌにす
る。濃縮液２０ｍｌをセパデキスＬＨ−２０コラム（内
径 ３５ｍｍ ｘ ｒ 長さ５５０ｍｍ，セパデキス純
重量２００ｇ）の上部に注入する。先ず、水−ジオキサ
ン（８５：１５，容積比）の溶液３，０００ｍｌで十分
に洗ってコラム内の緑黄色及び褐色層が完全に溶出され
たと判断した後、水−ジオキサン（４０：６０，容積
比）溶液で溶出し始めて、コラム上層部に吸着していた
黄褐色乃至黄色帯がコラム先端に溶出し始めればその分
劃を受けて真空蒸発乾燥器で７０℃で５０ｍｌまで濃縮
する。濃縮液は−２０℃以下で１日保管した後少量ずつ
凍結乾燥器で完全に乾固させて７．８ｇの乾燥粉末を得
る（ＥＧＣＧ 残留比）。
【００３７】この分劃で血小板凝集抑制能の活性を測定
した。血液の凝固現象は大別して血中の有効成分である
血小板が役割をする一次止血と有形成分を除いた所謂血
漿成分が関与する二次止血に区分される。このうち血栓
形成抑制及び血液凝固を防止する為には一次止血の遮断
剤の開発が根本的治療剤としての価値が有ると言える。
した。血液の凝固現象は大別して血中の有効成分である
血小板が役割をする一次止血と有形成分を除いた所謂血
漿成分が関与する二次止血に区分される。このうち血栓
形成抑制及び血液凝固を防止する為には一次止血の遮断
剤の開発が根本的治療剤としての価値が有ると言える。
【００３８】本発明の明細書中 parched green tea と
は緑茶葉の乾燥物を細切りして緑茶を製造する前の半加
工品を言う。
は緑茶葉の乾燥物を細切りして緑茶を製造する前の半加
工品を言う。
【００３９】＜一次止血に対する効果＞１．血小板凝集
抑制試験 抗血小板凝集効果は Aggrecorder II Pa-３２２０（Ky
oto Daiichi Kagaku Co.Ltd.）を使用してボーン（Bor
n）によるTurbidimetric methodで測定する。検査原理
は血小板豊富現象（platelets rich plasma;PRP）を作
って血小板数を２００，０００−４００，０００/ｍｍ3
程度に合わせ、ここに凝集促進物質（ＡＤＰ，エピネフ
リン（Epinephrine），コラゲン（Collagen），リスト
セチン（Ristocetin))を入れて凝集させながら凝集のた
め起こる吸光度（ＯＤ）の変化を記録したのである。検
査方法は血小板機能が正常で健康な人から抗凝固剤で
３．８％ソジウム シトレート（Sod.citrate）チュー
ブに１：９の比率で採血する。ＰＲＰを得る為に１６０
Ｇ（１，０００ｒｐｍ）で１０分間遠心分離した後、こ
の時の血小板数は２００，０００−４００，０００／ｍ
ｍ3になるよう調節する。血小板欠如現象（platelets p
oor plasma;PPP）を得るため２，０００Ｇ（３，４００
ｒｐｍ）で更に１０分間遠心分離する。Aggrecorder II
PA-３２２０を利用して試験する。温度は３７℃、回転
数は１，０００ｒｐｍに固定し、血小板欠如血漿で補正
する。血小板欠如血漿と試料を測定機器に移した後、３
−５分程度予め放置する。そして血小板凝集促進物質を
加えた後、１０分間凝集過程を測定する。血小板凝集促
進物質はＡＤＰ，エピネフリン、コラゲン、リストセチ
ンを使用する。
抑制試験 抗血小板凝集効果は Aggrecorder II Pa-３２２０（Ky
oto Daiichi Kagaku Co.Ltd.）を使用してボーン（Bor
n）によるTurbidimetric methodで測定する。検査原理
は血小板豊富現象（platelets rich plasma;PRP）を作
って血小板数を２００，０００−４００，０００/ｍｍ3
程度に合わせ、ここに凝集促進物質（ＡＤＰ，エピネフ
リン（Epinephrine），コラゲン（Collagen），リスト
セチン（Ristocetin))を入れて凝集させながら凝集のた
め起こる吸光度（ＯＤ）の変化を記録したのである。検
査方法は血小板機能が正常で健康な人から抗凝固剤で
３．８％ソジウム シトレート（Sod.citrate）チュー
ブに１：９の比率で採血する。ＰＲＰを得る為に１６０
Ｇ（１，０００ｒｐｍ）で１０分間遠心分離した後、こ
の時の血小板数は２００，０００−４００，０００／ｍ
ｍ3になるよう調節する。血小板欠如現象（platelets p
oor plasma;PPP）を得るため２，０００Ｇ（３，４００
ｒｐｍ）で更に１０分間遠心分離する。Aggrecorder II
PA-３２２０を利用して試験する。温度は３７℃、回転
数は１，０００ｒｐｍに固定し、血小板欠如血漿で補正
する。血小板欠如血漿と試料を測定機器に移した後、３
−５分程度予め放置する。そして血小板凝集促進物質を
加えた後、１０分間凝集過程を測定する。血小板凝集促
進物質はＡＤＰ，エピネフリン、コラゲン、リストセチ
ンを使用する。
【００４０】実験結果、緑茶抽出物は１ｍｇ／ｍｌで全
ての凝集促進物質による血小板凝集を強力に抑制する作
用を表した。ＡＤＰでは６０％の抑制効果、エピネフリ
ンでは９６．５％の抑制効果、コラゲンでは３５．３％
の抑制効果、リストセチンでは３６．５％の抑制効果を
表した。反面、対象薬物であるアスピリン（Aspirin）
（０．１ｍＭ）の場合はＡＤＰで１３．５％の抑制効
果、エピネフリンで７９．５％抑制効果、コラゲンでは
７２．６％抑制効果を表したが、リストセチンでは全く
抑制効果が無かった。
ての凝集促進物質による血小板凝集を強力に抑制する作
用を表した。ＡＤＰでは６０％の抑制効果、エピネフリ
ンでは９６．５％の抑制効果、コラゲンでは３５．３％
の抑制効果、リストセチンでは３６．５％の抑制効果を
表した。反面、対象薬物であるアスピリン（Aspirin）
（０．１ｍＭ）の場合はＡＤＰで１３．５％の抑制効
果、エピネフリンで７９．５％抑制効果、コラゲンでは
７２．６％抑制効果を表したが、リストセチンでは全く
抑制効果が無かった。
【００４１】第１図では凝集促進剤であるＡＤＰと本発
明の抗血栓剤を投与した時の凝集抑制効果を表したグラ
フであり、第２図は凝集促進剤であるエピネフリンと本
発明の抗血栓剤を投与した時の凝集抑制効果を表したグ
ラフであり第３図は凝集促進剤であるコラゲンと本発明
の抗血栓剤を投与した時の凝集抑制効果を表したグラフ
であり、第４図は凝集促進剤であるリストセチンと本発
明の抗血栓剤を投与した時の凝集抑制効果を表したグラ
フである。
明の抗血栓剤を投与した時の凝集抑制効果を表したグラ
フであり、第２図は凝集促進剤であるエピネフリンと本
発明の抗血栓剤を投与した時の凝集抑制効果を表したグ
ラフであり第３図は凝集促進剤であるコラゲンと本発明
の抗血栓剤を投与した時の凝集抑制効果を表したグラフ
であり、第４図は凝集促進剤であるリストセチンと本発
明の抗血栓剤を投与した時の凝集抑制効果を表したグラ
フである。
【００４２】本実験の結果から本発明の抗血栓剤は卓越
した血小板凝集抑制効果のあることが明らかとなった。
した血小板凝集抑制効果のあることが明らかとなった。
【００４３】２．抗血栓作用の測定 実験的血栓の誘導はジミノ（Dimino）等の実験方法に準
じて実施する。この時使用するマウスは体重約２０−３
０ｇ程度の雄ＩＣＲマウスであり、血栓の誘発は血小板
凝集促進物質（エピネフリン、コラゲン）をマウスの尾
静脈に注射して微小血管内に急速に形成されるように
し、使用された凝集促進物質は１５μgのコラゲンと４
００μＭ濃度のエピネフリンが生理食塩水１００μｌに
含有されるように調剤しマウスの体重２０ｇ当たり１０
０μｌの容量で尾静脈に注射する。緑茶抽出物の抗血栓
効果を調べる為実験開始２時間前にマウスの体重ｋｇ当
１００ｍｇと１０ｍｇずつの試料を投与し、この時、投
与の全体容量は０．４ｍｌ以下にする。緑茶抽出物の抗
血栓効果は血小板凝集促進物質の投与に因って発生する
マウス後足の麻痺や死から保護された実験動物の数の百
分率で計算し、ここで、麻痺は１５分以上後足の機能を
喪失するか又は震える状態が持続する時を基準にする。
じて実施する。この時使用するマウスは体重約２０−３
０ｇ程度の雄ＩＣＲマウスであり、血栓の誘発は血小板
凝集促進物質（エピネフリン、コラゲン）をマウスの尾
静脈に注射して微小血管内に急速に形成されるように
し、使用された凝集促進物質は１５μgのコラゲンと４
００μＭ濃度のエピネフリンが生理食塩水１００μｌに
含有されるように調剤しマウスの体重２０ｇ当たり１０
０μｌの容量で尾静脈に注射する。緑茶抽出物の抗血栓
効果を調べる為実験開始２時間前にマウスの体重ｋｇ当
１００ｍｇと１０ｍｇずつの試料を投与し、この時、投
与の全体容量は０．４ｍｌ以下にする。緑茶抽出物の抗
血栓効果は血小板凝集促進物質の投与に因って発生する
マウス後足の麻痺や死から保護された実験動物の数の百
分率で計算し、ここで、麻痺は１５分以上後足の機能を
喪失するか又は震える状態が持続する時を基準にする。
【００４４】エピネフリンとコラゲンの適正な血栓誘発
容量を確認する実験で１５μｇのコラゲンと４００μＭ
のエピネフリンが１００μｌの生理食塩水に含まれるよ
うにして静脈内注射した結果９５％の血栓を誘発させる
ことが出来た。血栓生成の与否は血小板凝集促進物質を
投与した後、致死の与否と後足の麻痺が１５分以上持続
した場合で判定し、後足の麻痺は足を引きずって這い回
るか震えの現象を伴う状態を判定の基準とした。体重ｋ
ｇ当たり１００ｍｇの緑茶抽出物を腹腔内投与した場合
６６％の予防効果を見せ、１０ｍｇを腹腔内投与した場
合４４％の予防効果を見せた。一方、対象薬物であるア
スピリン（Aspirin）（１００ｍｇ／ｋｇ）では４５％
の予防効果を見せた。
容量を確認する実験で１５μｇのコラゲンと４００μＭ
のエピネフリンが１００μｌの生理食塩水に含まれるよ
うにして静脈内注射した結果９５％の血栓を誘発させる
ことが出来た。血栓生成の与否は血小板凝集促進物質を
投与した後、致死の与否と後足の麻痺が１５分以上持続
した場合で判定し、後足の麻痺は足を引きずって這い回
るか震えの現象を伴う状態を判定の基準とした。体重ｋ
ｇ当たり１００ｍｇの緑茶抽出物を腹腔内投与した場合
６６％の予防効果を見せ、１０ｍｇを腹腔内投与した場
合４４％の予防効果を見せた。一方、対象薬物であるア
スピリン（Aspirin）（１００ｍｇ／ｋｇ）では４５％
の予防効果を見せた。
【００４５】第５図は凝集促進剤であるエピネフリンと
コラゲンを投与し本発明の抗血栓剤を投与した時の血栓
抑制効果を表したグラフである。
コラゲンを投与し本発明の抗血栓剤を投与した時の血栓
抑制効果を表したグラフである。
【００４６】本実験に依り本発明の抗血栓剤は卓越した
抗血栓効果のあることが確認され、この効果はアスピリ
ンの約１／１０の容量でアスピリンと同等な効果の有る
ことが明らかとなった。
抗血栓効果のあることが確認され、この効果はアスピリ
ンの約１／１０の容量でアスピリンと同等な効果の有る
ことが明らかとなった。
【００４７】３．血液凝固試験 （１）．出血時間（Bleeding Time）の測定。 体重１８０−２２０ｇの雄スプラグドーリ（Sprague-Da
wley）白鼠に１日１回１０日間試料を投与する。白鼠に
ソジウム ペントバルビタル（Sodium pentobarbital：
４００ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内投与して麻酔させ、尾先部
分から５mmのところを切って尾もとから５cmのところま
でを、３７．５℃の生理食塩水溶液に浸して止血する迄
の時間を測定する。
wley）白鼠に１日１回１０日間試料を投与する。白鼠に
ソジウム ペントバルビタル（Sodium pentobarbital：
４００ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内投与して麻酔させ、尾先部
分から５mmのところを切って尾もとから５cmのところま
でを、３７．５℃の生理食塩水溶液に浸して止血する迄
の時間を測定する。
【００４８】実験結果、対照群で出血時間が６５．０±
１２．９秒であるのに反し試料投与群では１０ｍｇ／ｋ
ｇで１１３．２±１９．６秒、１００ｍｇ／ｋｇで２５
０．７±１１７．３秒、３００ｍｇ／ｋｇで５０９．８
±７１．６秒で顕著にそして容量依存的に増加した。反
面対照薬物であるアスピリン（１００ｍｇ／ｋｇ）では
１６５．１±３４．３で対照薬物より優秀なものと表れ
た。その結果は第６図に表す。第６図は本発明の抗血栓
剤と対照薬物であるアスピリンを投与した時の出血時間
を表したグラフである。
１２．９秒であるのに反し試料投与群では１０ｍｇ／ｋ
ｇで１１３．２±１９．６秒、１００ｍｇ／ｋｇで２５
０．７±１１７．３秒、３００ｍｇ／ｋｇで５０９．８
±７１．６秒で顕著にそして容量依存的に増加した。反
面対照薬物であるアスピリン（１００ｍｇ／ｋｇ）では
１６５．１±３４．３で対照薬物より優秀なものと表れ
た。その結果は第６図に表す。第６図は本発明の抗血栓
剤と対照薬物であるアスピリンを投与した時の出血時間
を表したグラフである。
【００４９】（２）．全血凝固時間（Whole blood clot
ting time）の測定 出血時間を測定して１日経過した後白鼠をエーテルで麻
痺させ３．１３％ソジウム シトレート溶液０．５ｍｌ
を予め入れたプラスチック注射器で血液を心臓から採取
して５ｍｌになるようにする。採取した血液を静かに混
合した後注射器に集め、血液１mlをガラス試験管に入れ
１．７％ ＣａＣｌ2 ２Ｈ2Ｏ ２００μｌを加え室温
で静かに振りながら血凝塊が生じるまで時間を測定す
る。
ting time）の測定 出血時間を測定して１日経過した後白鼠をエーテルで麻
痺させ３．１３％ソジウム シトレート溶液０．５ｍｌ
を予め入れたプラスチック注射器で血液を心臓から採取
して５ｍｌになるようにする。採取した血液を静かに混
合した後注射器に集め、血液１mlをガラス試験管に入れ
１．７％ ＣａＣｌ2 ２Ｈ2Ｏ ２００μｌを加え室温
で静かに振りながら血凝塊が生じるまで時間を測定す
る。
【００５０】実験結果対照群で全血凝固時間が１０９．
４±１４．０秒であるのに反し試料投与群では１０ｍｇ
／ｋｇで１３０．１±２０．５秒、１００ｍｇ／ｋｇで
１４０．９±１４．２秒、３００ｍｇ／ｋｇで１５０．
６±１７．６秒で、容量依存的に若干ずつ増加した。反
面に対照薬物であるアスピリン（１００ｍｇ／ｋｇ）で
は１３７．２±１９．４に表れた。その結果は第７図に
表す。第７図は本発明の薬物とアスピリンを投与した時
の全血凝固時間を比較したグラフである。
４±１４．０秒であるのに反し試料投与群では１０ｍｇ
／ｋｇで１３０．１±２０．５秒、１００ｍｇ／ｋｇで
１４０．９±１４．２秒、３００ｍｇ／ｋｇで１５０．
６±１７．６秒で、容量依存的に若干ずつ増加した。反
面に対照薬物であるアスピリン（１００ｍｇ／ｋｇ）で
は１３７．２±１９．４に表れた。その結果は第７図に
表す。第７図は本発明の薬物とアスピリンを投与した時
の全血凝固時間を比較したグラフである。
【００５１】（３）．血漿凝固時間（plasma clotting
time）の測定。
time）の測定。
【００５２】上で得た血液の一部を２５，０００ｒｐｍ
で遠心分離して血漿を得、血漿 １００μｌ，生理食塩
水 １００μl 及び ５ｎＭ ＣａＣｌ2 ５０μｌを
ガラス試験管に入れ３７℃で静かに振ってやりながら塊
（clot）が生じるまでの時間を測定する。
で遠心分離して血漿を得、血漿 １００μｌ，生理食塩
水 １００μl 及び ５ｎＭ ＣａＣｌ2 ５０μｌを
ガラス試験管に入れ３７℃で静かに振ってやりながら塊
（clot）が生じるまでの時間を測定する。
【００５３】実験の結果、対照群で血漿の凝固時間が１
４６．２±２６．５秒であるのに反し試料投与群では１
０ｍｇ／ｋｇで１７７．５±３７．６秒、１００ｍｇ／
ｋｇで２１９．８±５７．９秒、３００ｍｇ／ｋｇで２
３３．１±８３．２秒で容量依存的に増加した。反面、
対照薬物であるアスピリン（１００ｍｇ／ｋｇ）では２
２２．５±４０．２に表れた。その結果は第８図に表
す。第８図は本発明の薬物とアスピリンを投与した時の
血漿凝固時間を表したグラフである。
４６．２±２６．５秒であるのに反し試料投与群では１
０ｍｇ／ｋｇで１７７．５±３７．６秒、１００ｍｇ／
ｋｇで２１９．８±５７．９秒、３００ｍｇ／ｋｇで２
３３．１±８３．２秒で容量依存的に増加した。反面、
対照薬物であるアスピリン（１００ｍｇ／ｋｇ）では２
２２．５±４０．２に表れた。その結果は第８図に表
す。第８図は本発明の薬物とアスピリンを投与した時の
血漿凝固時間を表したグラフである。
【００５４】４．血小板内の脂質過酸化及び酵素の抑制
作用。
作用。
【００５５】ａ）．malondialdehyde（ＭＤＡ）生成抑
制効果の測定。 血小板浮遊液１ｍｌを３７℃で緑茶抽出物の等張液溶液
（最終濃度１ｍｇ／ｍｌ）を加えＣａ++及びコラゲンを
加える。ＴＢＡ試薬２mlを加え９０℃で２０分間加温し
た後、室温で冷却して３，０００ｒｐｍで１０分間遠心
分離する。沈降した血小板上部の赤色溶液の吸光度を５
３５で測定し、ＭＤＡ−ＴＲＡ抱合体のモル吸光係数を
１．５６×１０5で計算してＭＤＡ生成量を算出して緑
茶抽出物に対する脂質過酸化抑制活性を比較する。
制効果の測定。 血小板浮遊液１ｍｌを３７℃で緑茶抽出物の等張液溶液
（最終濃度１ｍｇ／ｍｌ）を加えＣａ++及びコラゲンを
加える。ＴＢＡ試薬２mlを加え９０℃で２０分間加温し
た後、室温で冷却して３，０００ｒｐｍで１０分間遠心
分離する。沈降した血小板上部の赤色溶液の吸光度を５
３５で測定し、ＭＤＡ−ＴＲＡ抱合体のモル吸光係数を
１．５６×１０5で計算してＭＤＡ生成量を算出して緑
茶抽出物に対する脂質過酸化抑制活性を比較する。
【００５６】ＭＤＡ生成量は脂質過酸化過程の第２次生
成物との反応で総脂質過酸化の尺度として使用出来る。
緑茶抽出物はフォスフォリパーゼＡ２抑制者（phosphol
ipase Ａ２ inhibitor）であるプリマキン（primaqui
ne），キナクリン（quinacrine）そしてオキシジェナゼ
（oxygenase）の活性を抑制するアスピリン（Aspirin）
と比較して見る時、同じ程度の準位（level）で脂質過
酸化に対する抑制効果を表した。 ３０ ｂ）．アラキドン酸放出活性の測定。
成物との反応で総脂質過酸化の尺度として使用出来る。
緑茶抽出物はフォスフォリパーゼＡ２抑制者（phosphol
ipase Ａ２ inhibitor）であるプリマキン（primaqui
ne），キナクリン（quinacrine）そしてオキシジェナゼ
（oxygenase）の活性を抑制するアスピリン（Aspirin）
と比較して見る時、同じ程度の準位（level）で脂質過
酸化に対する抑制効果を表した。 ３０ ｂ）．アラキドン酸放出活性の測定。
【００５７】血小板浮遊液１ｍｌを３７℃で培養しなが
ら（incubate）緑茶抽出物（最終濃度が１ｍｇ／ｍｌ）
を加えＣａ++とコラゲンを加える。３０分後膜濾過器
（membrance filter）で血小板を迅速に除去し、濾液を
pH３以下の酸性にする。これに２mlの抽出溶媒（クロロ
フォルム：メタノール＝１：１，Ｖ／Ｖ）で２回抽出し
た後、遠心分離して下部のクロロフォルム層を他の試験
管に移した後窒素気体で乾燥する。この乾燥物はジメチ
ルフォルムアミド（ＤＭＦ）５０μｌに溶かし、１２ｎ
Ｍモノダンシル カダベリン（monodanncyl cadaverin
e）のＤＭＦ溶液５０μｌ及びジエチルフォスフォロ
シアニデート（diethilphosphoro cyanidate）２μlを
加えて常温で１５分間放置してアラキドン酸を蛍光標識
する。
ら（incubate）緑茶抽出物（最終濃度が１ｍｇ／ｍｌ）
を加えＣａ++とコラゲンを加える。３０分後膜濾過器
（membrance filter）で血小板を迅速に除去し、濾液を
pH３以下の酸性にする。これに２mlの抽出溶媒（クロロ
フォルム：メタノール＝１：１，Ｖ／Ｖ）で２回抽出し
た後、遠心分離して下部のクロロフォルム層を他の試験
管に移した後窒素気体で乾燥する。この乾燥物はジメチ
ルフォルムアミド（ＤＭＦ）５０μｌに溶かし、１２ｎ
Ｍモノダンシル カダベリン（monodanncyl cadaverin
e）のＤＭＦ溶液５０μｌ及びジエチルフォスフォロ
シアニデート（diethilphosphoro cyanidate）２μlを
加えて常温で１５分間放置してアラキドン酸を蛍光標識
する。
【００５８】蛍光標識されたアラキドン酸は５０％メタ
ノール：アセトニトリルの直線勾配溶離に依り逆相コラ
ムで溶出し、励起波長３４０ｎＭ，蛍光波長５２０ｎＭ
で検出される。
ノール：アセトニトリルの直線勾配溶離に依り逆相コラ
ムで溶出し、励起波長３４０ｎＭ，蛍光波長５２０ｎＭ
で検出される。
【００５９】アラキドン酸の量的動態を見た結果、緑茶
抽出物に依るアラキドン酸の変化がプリマキン（primaq
uine）及びキナクリン（quinacrine）より少ない点から
見て、緑茶抽出物の血小板内での作用部位はフォスフォ
リパーゼ（phospholipase）Ａ２よりはシクロオキシジ
ェナゼ（cyclooxygenase）又はリポキシジェナゼ（lipo
xygenase）を抑制することにより脂質過酸化及び血小板
凝集抑制効果を表すものと推定される。
抽出物に依るアラキドン酸の変化がプリマキン（primaq
uine）及びキナクリン（quinacrine）より少ない点から
見て、緑茶抽出物の血小板内での作用部位はフォスフォ
リパーゼ（phospholipase）Ａ２よりはシクロオキシジ
ェナゼ（cyclooxygenase）又はリポキシジェナゼ（lipo
xygenase）を抑制することにより脂質過酸化及び血小板
凝集抑制効果を表すものと推定される。
【００６０】６．高脂血症の治療効果−抗過酸化作用
（in vitro） 鼠(Rat)の肝マイクロゾーム（microsome）分劃（１．５
ｍｇ protein/ｍｌ）に抽出物を加え、システーン（cy
stein）（最終濃度；５００μＭ），硫酸第一鉄（最終
濃度；５μＭ）を加え、３７℃で３０分間培養（incuba
tion）する。１０％ トリクロロ酢酸（trichloroaceti
c acid）３ｍｌを加え遠心分離して上層２ｍｌを取る。
これに０．６７％ＴＢＡ溶液を加え沸いている水で１５
分間反応させた後、冷却させて吸光度を測定する。
（in vitro） 鼠(Rat)の肝マイクロゾーム（microsome）分劃（１．５
ｍｇ protein/ｍｌ）に抽出物を加え、システーン（cy
stein）（最終濃度；５００μＭ），硫酸第一鉄（最終
濃度；５μＭ）を加え、３７℃で３０分間培養（incuba
tion）する。１０％ トリクロロ酢酸（trichloroaceti
c acid）３ｍｌを加え遠心分離して上層２ｍｌを取る。
これに０．６７％ＴＢＡ溶液を加え沸いている水で１５
分間反応させた後、冷却させて吸光度を測定する。
【００６１】７．生体機能性に対する探索−抗高血圧効
果（in vitro） ：アンジオテンシン変化酵素（Angiotensin converting
enzyme;ＡＣＥ抑制効果。
果（in vitro） ：アンジオテンシン変化酵素（Angiotensin converting
enzyme;ＡＣＥ抑制効果。
【００６２】アンジオテンシン変化酵素（ＡＣＥ）は生
体内の血圧及び体液、電解質の重要な調節を担当するレ
ニン−アンジオテンシン（renin-angiotensin）系に作
用する酵素である。本酵素はレニン（renin）から産生
するアンジオテンシンＩ（ＡＮＧ I）のＣ末端でジペ
プタイド（dipeptide）（His−Leu）を遊離させて活性
形であるインジオテンシンII（ＡＮＧ II）に変化させ
る。この酵素はハイパテンシブ システム（hypertensi
ve system）のＡＮＧ IIを生産すると同時にハイポテン
シブ システム（hypotensive system）のブラジキニン
（bradykinin）を不活性化させるので、生体の循環調節
に重要な役割をしている。
体内の血圧及び体液、電解質の重要な調節を担当するレ
ニン−アンジオテンシン（renin-angiotensin）系に作
用する酵素である。本酵素はレニン（renin）から産生
するアンジオテンシンＩ（ＡＮＧ I）のＣ末端でジペ
プタイド（dipeptide）（His−Leu）を遊離させて活性
形であるインジオテンシンII（ＡＮＧ II）に変化させ
る。この酵素はハイパテンシブ システム（hypertensi
ve system）のＡＮＧ IIを生産すると同時にハイポテン
シブ システム（hypotensive system）のブラジキニン
（bradykinin）を不活性化させるので、生体の循環調節
に重要な役割をしている。
【００６３】従って、この酵素に対する緑茶抽出物の抑
制効果に対する検索で血圧上昇の抑制剤としての程度を
知ることが出来る。
制効果に対する検索で血圧上昇の抑制剤としての程度を
知ることが出来る。
【００６４】アスピリンは抗血圧凝固作用が極めて卓越
した薬物である。しかしアスピリンは胃腸障害が大変甚
だしいので、これを継続的に服用することは不可能であ
る。これに対しては本発明の抗血栓剤は胃腸障害が無い
のみならず、その効果の面に於いてもアスピリンと同等
以上の卓越した効果を持つ薬物であることが立証され
た。
した薬物である。しかしアスピリンは胃腸障害が大変甚
だしいので、これを継続的に服用することは不可能であ
る。これに対しては本発明の抗血栓剤は胃腸障害が無い
のみならず、その効果の面に於いてもアスピリンと同等
以上の卓越した効果を持つ薬物であることが立証され
た。
【００６５】以上の実験で確認されるように本発明の緑
茶抽出物は極めて卓越した抗血栓効果を持つ。
茶抽出物は極めて卓越した抗血栓効果を持つ。
【００６６】従って、本発明の緑茶抽出物は抗血栓剤、
血栓形成抑制剤又は血栓形成原因抑制剤として使用する
ことが出来る。
血栓形成抑制剤又は血栓形成原因抑制剤として使用する
ことが出来る。
【００６７】実験例 １ 急性毒性実験 緑茶抽出物の生理食塩水溶液をＩＣＲ形マウスの静脈内
及び経口的に各々投与して７２時間後の生死判断に依り
ＬＤ50を計算した。計算にはアップ アンドダウン（Up
and down）方法（１９６９年日本南山堂発行、高木、
小沢共編 ［薬物学実験］第２０４−２０５頁を使用し
た。その結果は次の通りである。 投与物資 投与方法 動物数 ＬＤ50 ｍｇ／ｋｇ 緑茶抽出物 静脈内投与 １０ ５００ 経口投与 １０ １０００ 以上の実験で確認されるように本発明の抗血栓剤は急性
毒性が極めて少ないことを知ることが出来る。
及び経口的に各々投与して７２時間後の生死判断に依り
ＬＤ50を計算した。計算にはアップ アンドダウン（Up
and down）方法（１９６９年日本南山堂発行、高木、
小沢共編 ［薬物学実験］第２０４−２０５頁を使用し
た。その結果は次の通りである。 投与物資 投与方法 動物数 ＬＤ50 ｍｇ／ｋｇ 緑茶抽出物 静脈内投与 １０ ５００ 経口投与 １０ １０００ 以上の実験で確認されるように本発明の抗血栓剤は急性
毒性が極めて少ないことを知ることが出来る。
【００６８】本発明の緑茶抽出物は患者や又は投与され
るべき人の年齢、性別又は症状や又は予防の目的に従っ
て体重 ｋｇ 当 １．００−２０００．００ｍｇを１
日１回乃至数回に分けて服用することが出来る。
るべき人の年齢、性別又は症状や又は予防の目的に従っ
て体重 ｋｇ 当 １．００−２０００．００ｍｇを１
日１回乃至数回に分けて服用することが出来る。
【００６９】本発明の緑茶抽出物は通常の賦形剤、結合
剤、潤活剤、崩解剤、稀釈剤等のような補助剤と混合し
て薬学的製剤を製造することが出来る。
剤、潤活剤、崩解剤、稀釈剤等のような補助剤と混合し
て薬学的製剤を製造することが出来る。
【００７０】次の製剤実施例を例示する。
【００７１】製剤実施例 １ 錠剤の製造 緑茶抽出物 １０ｍｇ 乳糖 ２０ｍｇ 澱粉 ２０ｍｇ ステアリン酸 マグネシウム 適当量 上記の成分を通常の錠剤の製造方法に従って５０ｍｇの
錠剤に打錠して錠剤を製造する。
錠剤に打錠して錠剤を製造する。
【００７２】製剤実施例 ２ カプセル剤の製造 緑茶抽出物 １０ｍｇ 乳糖 ２０ｍｇ 澱粉 １９ｍｇ タルク １ｍｇ ステアリン酸 適当量 上記の成分を通常のカプセル剤の製造方法に従って５０
ｍｇ容量のカプセルに充填する。
ｍｇ容量のカプセルに充填する。
【００７３】製剤実施例 ３ 液剤の製造 緑茶抽出物 １００ｍｇ 異性化糖 １０ｍｇ 蜂蜜 ５００ｍｇ ニコチン酸アマイド（薬典） ２０ｍｇ 無水カペイン（薬典） ３０ｍｇ 安息香酸ナトリウム ７０ｍｇ 上記の成分を通常の液剤の製造方法に従って製造し１０
０ｍｌ容量の褐色瓶に充填して密栓した後低温殺菌処理
する。
０ｍｌ容量の褐色瓶に充填して密栓した後低温殺菌処理
する。
【００７４】製剤実施例 ４ 注射剤の製造 緑茶抽出物 ５ｍｇ 滅菌精製水 適当量 上記の成分を通常の注射剤の製造方法に従って製造し２
mlのアンプルに充填して密封した後滅菌する。
mlのアンプルに充填して密封した後滅菌する。
【００７５】製剤実施例 ６ 軟質カプセル剤の製造 １）充填組成物 緑茶抽出物 １０ｍｇ ポリエチレングリコール ２３０ｍｇ グリセリン １３ｍｇ ２）乾燥した外皮組成物（重量％） ゼラチン ５２％ グリセリン ３２％ ANIDRISORB 35/70 １２％ 水 ５％ 上記の組成物を通常の軟質カプセル製造方法に従って軟
質カプセルを製造する。
質カプセルを製造する。
【００７６】製剤実施例 ７ 顆粒剤の製造 緑茶抽出物 １０ｍｇ 乳糖 ２５ｍｇ 上記の成分を通常の圧出組立器で圧出して顆粒剤に製造
する。
する。
【００７７】本発明の抗血栓緑茶抽出物は通常の他の薬
効を持つ薬理物質と混合した組成物として使用すること
もできる。このような組成物もまた本発明の範囲に属す
ることは勿論でる。
効を持つ薬理物質と混合した組成物として使用すること
もできる。このような組成物もまた本発明の範囲に属す
ることは勿論でる。
【００７８】
【発明の効果】本発明により優れた血栓形成原因を遮断
する作用と安定性を有する抗血栓剤が得られた。
する作用と安定性を有する抗血栓剤が得られた。
【図１】ＡＤＰで凝集させながら本発明の抗血栓剤を入
れて抗血栓効果を比較したグラフ。
れて抗血栓効果を比較したグラフ。
【図２】エピネフリンで凝集させながら本発明の抗血栓
剤を入れて抗血栓効果を比較したグラフ。
剤を入れて抗血栓効果を比較したグラフ。
【図３】コラゲンで凝集させながら本発明の抗血栓剤を
入れて抗血栓効果を比較したグラフ。
入れて抗血栓効果を比較したグラフ。
【図４】リストセチンで凝集させながら本発明の抗血栓
剤を入れて抗血栓効果を比較したグラフ。
剤を入れて抗血栓効果を比較したグラフ。
【図５】エピネフリンとコラゲンを併合投与し本発明の
抗血栓剤を入れて抗血栓効果を比較したグラフ。
抗血栓剤を入れて抗血栓効果を比較したグラフ。
【図６】本発明の抗血栓剤と対照薬物であるアスピリン
を投与した時の出血時間を表したグラフ。
を投与した時の出血時間を表したグラフ。
【図７】本発明の抗血栓剤とアスピリンを投与した時の
栓血凝固時間を比較したグラフ。
栓血凝固時間を比較したグラフ。
【図８】本発明の抗血栓剤とアスピリンを投与した時の
血漿凝固時間を表したグラフ。
血漿凝固時間を表したグラフ。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 李 鎔文 大韓民国 太田市 西區 内洞 31−６ (72)発明者 李 世昌 大韓民国 ソウル市 江南區 大峙洞 開 浦 １次 宇星 エーピーティー 10− 105 (72)発明者 朴 鍾凡 大韓民国 京畿道 安養市 虎計洞 日新 エーピーティー ５−603
Claims (10)
- 【請求項１】 緑茶抽出物を有効成分として含有し通常
の薬剤学的に使用される補助剤と通常の方法で通常の剤
形に製剤化して製造された抗血栓剤。 - 【請求項２】 製剤が散剤である請求項１記載の抗血栓
剤。 - 【請求項３】 製剤が錠剤である請求項１記載の抗血栓
剤。 - 【請求項４】 製剤がカプセル剤である請求項１記載の
抗血栓剤。 - 【請求項５】 製剤が液剤である請求項１記載の抗血栓
剤。 - 【請求項６】 製剤が軟質カプセル剤である請求項１記
載の抗血栓剤。 - 【請求項７】 製剤が注射剤である請求項１記載の抗血
栓剤。 - 【請求項８】 製剤が顆粒剤である請求項１記載の抗血
栓剤。 - 【請求項９】 緑茶抽出物を有効成分とし、これに通常
の薬剤学的に使用される補助剤と通常の方法で通常の剤
形に製剤化して抗血栓剤を製造する方法。 - 【請求項１０】 緑茶葉乾燥物、parched green tea
又は市販の緑茶を水又は水と低級アルコールの混合物で
熱水抽出し不溶物質を除去した溶液を濃縮した後再び水
に溶解させ有機溶剤で抽出して非極性化合物質を除去し
た後、水層を濃縮しコラムで分離した液を濃縮させて緑
茶抽出物を製造する方法。
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-
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- 1994-09-13 FR FR9410898A patent/FR2709965A1/fr active Pending
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