JPH06298752A

JPH06298752A - 抗腫瘍性物質ｂｅ−２６６６８及びその製造法

Info

Publication number: JPH06298752A
Application number: JP11411593A
Authority: JP
Inventors: Takayoshi Okabe; 隆義岡部; Hidetoshi Ogino; 秀敏荻野; Masatake Kamiya; 正剛神谷; Akira Okuyama; 彬奥山; Hiroyuki Suda; 寛之須田
Original assignee: Banyu Phamaceutical Co Ltd
Current assignee: MSD KK
Priority date: 1993-04-16
Filing date: 1993-04-16
Publication date: 1994-10-25

Abstract

(57)【要約】【構成】構造式【化１】で表される化合物、その製法及びその用途並びに新規微
生物シュードロビラルダ・エスピー（Ｐｓｅｕｄｏｒｏ
ｂｉｌｌａｒｄａｓｐ．）に関する。【効果】本発明の化合物はカゼイン・キナーゼＩＩに
対する顕著な酵素阻害活性を示し、抗腫瘍剤として有用
である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は医薬の分野で有用であ
り、さらに詳細には蛋白質リン酸化酵素を阻害し、制癌
効果を発揮する新規化合物、その製法及びその用途並び
に新規微生物シュードロビラルダ・エスピー（Ｐｓｅｕ
ｄｏｒｏｂｉｌｌａｒｄａｓｐ．）に関する。

【０００２】

【従来の技術】癌化学療法の分野では、ブレオマイシン
（Ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ）及びアドリアマイシン（Ａｄｒ
ｉａｍｙｃｉｎ）等の多くの微生物代謝産物を臨床的に
応用することが試みられ、またこれらは実際に臨床にお
いて使用されている。しかしながら、様々な腫瘍に対し
てその効果は必ずしも充分ではなく、また臨床上これら
の薬剤に対する腫瘍細胞の耐性現象が明らかにされるに
つれ、その臨床的応用性は複雑化している［第４７回日
本癌学会総会記事、１２頁〜１５頁（１９８８年）参
照］。

【０００３】近年、細胞増殖関連酵素の研究が進み、蛋
白質リン酸化酵素が細胞増殖シグナルを細胞外から核内
に伝える上で重要な働きをすることが明らかになってき
た。細胞増殖シグナル伝達に係わる蛋白質リン酸化酵素
の一つとして、カゼイン・キナーゼＩＩ（ｃａｓｅｉｎ
ｋｉｎａｓｅＩＩ）は、そのリン酸化活性により癌
原遺伝子ｃ−ｆｏｓの発現を誘導し、細胞周期の進行を
促すことが示唆されている［セシール・ガウジャー−ル
ビエールら（Ｃ▲ｅ▼ｃｉｌｅＧａｕｔｈｉｅｒ−Ｒ
ｏｕｖｉ▲ｅ▼ｒｅｅｔａｌ）；ジ・エムボ・ジャ
ーナル（ＴｈｅＥＭＢＯＪｏｕｒｎａｌ）１０巻，２
９２１〜２９３０頁，１９９１年］。

【０００４】一方、カゼイン・キナーゼＩＩの特異的な
阻害剤の代表例としては、ヘパリンが知られている［ジ
ー・エム・ハーサウェイら（Ｇ．Ｍ．Ｈａｔｈａｗａｙ
ｅｔａｌ）；ジャーナル・オブ・バイオロジカル・
ケミストリー（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．）２５５巻、
８０３８〜８０４１頁，１９８０年］。しかしながら、
本発明のように低分子量の化合物を有効成分とする特異
的なカゼイン・キナーゼＩＩ阻害剤についての報告はな
い。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明が解決しようと
する課題は、既存の制癌物質が充分に効果を発揮できな
い種類の癌に対して有効性を有する物質を微生物代謝産
物中に探索し、カゼイン・キナーゼＩＩを特異的に阻害
する低分子量の物質を見い出すことにある。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決すべく、ブタ睾丸より精製したカゼイン・キナー
ゼＩＩを酵素とし、カゼインを基質として、カゼイン・
キナーゼＩＩの阻害活性を有する物質について微生物代
謝物を広くスクリーニングした結果、後記構造式［Ｉ］
で表される化合物が優れたカゼイン・キナーゼＩＩ阻害
作用を示すことを見い出して本発明を完成した。

【０００７】即ち、本発明は、新規な構造式

【０００８】

【化４】で表される化合物又はその薬学的に許容しうる塩、その
製法及びその用途並びに構造式［Ｉ］の化合物を産生す
る能力を有するシュードロビラルダ（Ｐｓｅｕｄｏｒｏ
ｂｉｌｌａｒｄａ）属に属する微生物に関するものであ
る。

【０００９】次に、本明細書で言及される各種の用語及
び定義について説明する。

【００１０】構造式［Ｉ］の化合物は、その抗腫瘍性効
果及び産生菌株（Ｆ２６６６８株）に因んで、抗腫瘍性
物質ＢＥ−２６６６８と命名された。

【００１１】以下に、本発明化合物の理化学的性状を示
す。ＢＥ−２６６６８の理化学的性状性状：淡黄色固体分子式：Ｃ₁₃Ｈ₁₀Ｏ₅ マススペクトル：高分解能ＦＡＢ−ＭＳ；ｍ／ｚ２４
７．０５７７［Ｍ＋Ｈ］⁺ ＵＶスペクトル：λ［ＭｅＯＨ，ｍａｘ，ｎｍ（ε）］
２７２（１８，５００），３４８（４，９３０）ＩＲスペクトル ν_max（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）：３１６
６，１７２８，１６３８，１５０６，１４７６，１４３
７，１３９２，１２９６，１２０３，１１６１，９８４¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ，（ＣＤ₃）₂Ｃ
Ｏ，δｐｐｍ）：２．７７（３Ｈ，ｓ），３．９３（３
Ｈ，ｓ），６．４６（１Ｈ，ｓ），６．８４（１Ｈ，
ｓ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１００ＭＨｚ，（ＣＤ₃）₂Ｃ
Ｏ，δｐｐｍ）：２１．９，５５．４，９８．０，９
９．３，１１１．０，１１８．４，１２５．４，１３
３．４，１３８．２，１４７．０，１５５．８，１５
８．１，１６５．２溶解性：アセトン、メタノール、酢酸エチルに溶け易
く、クロロホルム、水に溶け難い。ヘキサンに不溶であ
る。

【００１２】酸性、中性、塩基性物質の区別：酸性物質Ｒｆ値：０．４３（メルク社製キーゼルゲル６０Ｆ₂₅₄
使用，展開溶媒：クロロホルム／メタノール（１０：
１））呈色反応：ヨウ素反応陽性りんモリブデン酸反応陽性ニンヒドリン反応陰性次に、ＢＥ−２６６６８の製造法を説明する。

【００１３】本発明者らは、ＢＥ−２６６６８を群馬県
和田峠の山林土壌より分離された分生子果不完全菌綱に
属するかびの一種Ｆ２６６６８株の培養物より単離し
た。

【００１４】以下にこの生産菌の菌学的性状を説明す
る。１．形態分生子殻は、球形から亜球形、黒色で、隔壁は、比較的
薄く、そのサイズは２００−４００×２００−２８０μ
ｍである。分生子形成細胞は、透明、円筒状の細胞で、
分生子柄はない。分生子は、無色からオリーブ色、楕円
形の２細胞性胞子で、その一端に３本に分枝した付属糸
を持つ。分生子のサイズは、９．２−１３．１（−１
６．９）×２．７−３．９μｍ、付属糸の長さは、１
９．３−２９．３μｍである。また、分生子細胞内には
油滴が見られる。２．各種寒天平板培地における培養性状各種寒天培地を用い、Ｆ２６６６８株を２５℃で７日間
培養した場合の生育的特徴を第１表に示す。表中の色は
メツエンハンドブックオブカラー［（Ｍｅｔｈｕｅｎ
ＨａｎｄｂｏｏｋｏｆＣｏｌｏｕｒ）第３版，１９
８４年］による色名を基準にした。

【００１５】

【表１】いずれの培地でも分泌液は認められない。また、いずれ
の培地でも分生子殻は形成されるが、バレイショニンジ
ン寒天培地上での分生子形成が最も良好である。３．生理的、生態的性質最適生育条件本菌株の至適生育温度は、２４〜２７℃の範囲であり、
至適生育ｐＨは６．５〜７．５の範囲である。生育の範囲本菌株は、９〜３１℃の温度範囲及び４．８〜８．３の
ｐＨ範囲で生育可能である。

【００１６】以上の結果より、本菌株をシュードロビラ
ルダフラグミティス（Ｐｓｅｕｄｏｒｏｂｉｌｌａｒ
ｄａｐｈｒａｇｍｉｔｉｓ）と同定し、シュードロビ
ラルダフラグミティス（Ｐｓｅｕｄｏｒｏｂｉｌｌａ
ｒｄａｐｈｒａｇｍｉｔｉｓ）Ｆ２６６６８と命名
した［ブリアンシーサットン（ＢｒｉａｎＣ．Ｓ
ａｔｔｏｎ）著、ザコエロミセテス（ＴｈｅＣｏｅ
ｌｏｍｙｃｅｔｅｓ）１９８０年、シーエムアイ
キュー（ＣＭＩＫｅｗ）社出版４１４頁参照］。

【００１７】なお、本菌株は通商産業省工業技術院微生
物工業技術研究所に寄託されており、その微工研受託番
号は、微工研菌寄第１３３２５号（ＦＥＲＭＰ−１３
３２５）である。

【００１８】本発明で使用される微生物は、シュードロ
ビラルダ属に属し、抗腫瘍性物質ＢＥ−２６６６８を産
生する能力を有する真菌であればいずれのものでもよい
が、好ましくはシュードロビラルダ・エスピーＦ２６
６６８又はその変異株が挙げられる。該変異株として
は、例えばＸ線若しくは紫外線等の照射処理、例えばナ
イトロジェン・マスタード、アザセリン、亜硝酸、２−
アミノプリン若しくはＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−
ニトロソグアニジン（ＮＴＧ）等の変異誘起剤による処
理、ファージ接触、形質転換、形質導入又は接合等の通
常用いられる菌種変換処理方法等によりＢＥ−２６６６
８産生菌を変異させた微生物が挙げられる。

【００１９】本発明のＢＥ−２６６６８は、ＢＥ−２６
６６８の生産菌株Ｆ２６６６８株又はその変異株を栄養
源含有培地に接種して好気的に培養させることにより、
その培養液及びその菌体からＢＥ−２６６６８を採取
し、要すれば薬学的に許容しうる塩とすることにより製
造することができる。

【００２０】栄養源としては、放線菌の栄養源として公
知のものが使用でき、炭素源としては、例えば市販され
ているブドウ糖、グリセリン、麦芽糖、デンプン、庶
糖、糖蜜、デキストリン等が単独又は混合物として用い
られる。窒素源としては、例えば市販されている大豆
粉、コーングルテンミール、コーンスティープリカー、
肉エキス、脱脂肉骨粉、ミートミール、酵母エキス、乾
燥酵母、綿実粉、ペプトン、小麦胚芽、脱脂米糠、魚
粉、無機アンモニウム塩、硝酸ナトリウム等が単独又は
混合物として用いられる。無機塩としては、例えば市販
されている炭酸カルシウム、塩化カルシウム、塩化ナト
リウム、臭化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸マグネシ
ウム、各種リン酸塩等が単独又は混合物として使用する
ことができる。その他要すれば、鉄、マンガン、コバル
ト、モリブデン、銅、亜鉛等の重金属塩を微量添加して
もよい。また、発泡の著しい時には、消泡剤として、例
えば大豆油、亜麻仁油等の植物油、例えばオクタデカノ
ール等の高級アルコール類、各種シリコン化合物等を適
宜添加してもよい。これらのもの以外でも、該生産菌が
利用し、ＢＥ−２６６６８の生産に役立つものを適宜使
用することができ、例えば３−（Ｎ−モルホリノ）プロ
パンスルホン酸、ホウ酸ナトリウム等が挙げられる。

【００２１】培養方法は、一般の微生物代謝産物の生産
方法と同様に行うことができ、固体培養でも液体培養で
もよい。液体培養の場合は、静置培養、撹拌培養、振盪
培養、通気培養等のいずれの培養方法を実施してもよい
が、特に振盪培養又は深部通気撹拌培養等が好ましい。
培養温度は９℃〜３１℃が適当であるが、好ましくは２
５℃〜３０℃である。培地のｐＨは４〜９の範囲、好ま
しくは４〜８で、培養時間は４８時間〜１９２時間、好
ましくは７２時間〜１４４時間である。

【００２２】培養液及び菌体から目的とするＢＥ−２６
６６８を採取するには、微生物の生産する代謝物の培養
物から採取するのに通常使用される分離手段が適宜利用
される。ＢＥ−２６６６８は培養濾液中及び菌体中、主
に菌体中に存在するので、培養濾液又は菌体より通常の
分離手段、例えば溶媒抽出法、イオン交換樹脂法、吸着
又は分配クロマトグラフィー法、ゲル濾過法等を単独又
は組合せて行うことにより精製することができる。また
高速液体クロマトグラフィーや薄層クロマトグラフィー
なども抽出精製に適宜利用可能である。

【００２３】好ましい分離−精製の例としては次の方法
が挙げられる。まず培養液を濾過し、菌体を得る。得ら
れた菌体からメタノール又はアセトン等の有機溶媒を用
いて抽出する。抽出液を留去して得られた残渣を酢酸エ
チルに溶解し、酸性水で洗った後、濃縮する。ここで得
られた粗物質をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロ
ホルム／メタノール）、次いでゲル濾過カラムクロマト
グラフィー（メタノール）に付せば、ＢＥ−２６６６８
の淡黄色固体を得ることができる。

【００２４】次に、本発明の化合物の有用性を示すため
に、本発明化合物のカゼイン・キナーゼＩＩに対する酵
素阻害活性を測定した。ＢＥ−２６６６８の酵素阻害活性５０ｍＭモップス（ＭＯＰＳ）（ｐＨ７．５）、０．１
Ｍ塩化ナトリウム、５ｍＭ塩化マグネシウム、２ｍｇ／
ｍｌカゼイン、５０μＭＡＴＰ及び０．１μＣｉ［γ
−³²Ｐ］ＡＴＰよりなる基質液（３０μｌ）に検液３．
３μｌ及びブタ睾丸より精製したカゼイン・キナーゼＩ
Ｉ酵素液０．５μｌを加え、３７℃で３０分間反応させ
た後、３５０ｍＭリン酸１０μｌを加え反応を停止し
た。反応液をＰ８１イオン交換濾紙（ワットマン社製）
に吸着させ、濾紙を７５ｍＭリン酸で４回洗浄した後、
アセトンに浸し、脱水してから乾燥した。乾燥後、濾紙
に吸着した放射活性を液体シンチレーション・カウンタ
ーで測定した。

【００２５】その結果、ＢＥ−２６６６８のカゼイン・
キナーゼＩＩに対する５０％阻害濃度（ＩＣ₅₀）は３７
ｎｇ／ｍｌであった。

【００２６】上記の結果より、本発明化合物は、カゼイ
ン・キナーゼＩＩに特異的でかつ顕著な酵素阻害活性を
示す。従って本発明化合物はヒトをはじめとする哺乳動
物の腫瘍の治療剤として期待される。

【００２７】本発明化合物の治療効果が期待される好適
な腫瘍としては、例えばヒトの大腸癌等が挙げられる。

【００２８】本発明化合物は、抗腫瘍剤として使用され
る場合には、その薬学的に許容しうる塩としても使用す
ることができる。薬学的に許容しうる塩の典型例として
は、例えばナトリウム、カリウム等のアルカリ金属との
塩等を挙げることができる。

【００２９】本発明の化合物の薬学的に許容しうる塩の
製造法は、有機合成化学分野で通常用いられる方法を適
宜組み合わせて行うことができる。具体的には、本発明
化合物の遊離型の溶液をアルカリ溶液で中和滴定するこ
と等が挙げられる。

【００３０】本発明化合物を抗腫瘍剤として使用する際
の投与形態としては各種の形態を選択でき、例えば錠
剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、液剤等の経口剤、例え
ば溶液、懸濁液等の殺菌した液状の非経口剤等が挙げら
れる。

【００３１】固体の製剤は、そのまま錠剤、カプセル
剤、顆粒剤又は粉末の形態として製造することもできる
が、適当な添加物を使用して製造することもできる。該
添加物としては、例えば乳糖、ブドウ糖等の糖類、例え
ばトウモロコシ、小麦、米等の澱粉類、例えばステアリ
ン酸等の脂肪酸、例えばメタケイ酸ナトリウム、アルミ
ン酸マグネシウム、無水リン酸カルシウム等の無機塩、
例えばポリビニルピロリドン、ポリアルキレングリコー
ル等の合成高分子、例えばステアリン酸カルシウム、ス
テアリン酸マグネシウム等の脂肪酸塩、例えばステアリ
ルアルコール、ベンジルアルコール等のアルコール類、
例えばメチルセルロース、カルボキシメチルセルロー
ス、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセル
ロース等の合成セルロース誘導体、その他、水、ゼラチ
ン、タルク、植物油、アラビアゴム等通常用いられる添
加物等が挙げられる。

【００３２】これらの錠剤、カプセル剤、顆粒剤、粉末
等の固形製剤は、一般的には０．１〜１００重量％、好
ましくは５〜１００重量％の有効成分を含むことができ
る。

【００３３】液状製剤は、水、アルコール類又は例えば
大豆油、ピーナツ油、ゴマ油等の植物由来の油等液状製
剤において通常用いられる適当な添加物を使用し、懸濁
液、シロップ剤、注射剤等の形態として製造することが
できる。

【００３４】特に、非経口的に筋肉内注射、静脈内注
射、皮下注射で投与する場合の適当な溶剤としては、例
えば注射用蒸留水、塩酸リドカイン水溶液（筋肉内注射
用）、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、エタノール、静脈
内注射用液体（例えばクエン酸、クエン酸ナトリウム等
の水溶液）、電解質溶液（例えば点滴静注、静脈内注射
用）等又はこれらの混合溶液が挙げられる。

【００３５】又、これらの注射剤は予め溶解したものの
他、粉末のまま又は適当な添加物を加えたものを用時溶
解する形態もとることができる。これらの注射液は、通
常０．１〜１０重量％、好ましくは１〜５重量％の有効
成分を含むことができる。

【００３６】又、経口投与の懸濁剤又はシロップ剤等の
液剤は、０．５〜１０重量％の有効成分を含むことがで
きる。

【００３７】本発明の化合物の実際に好ましい投与量
は、使用される化合物の種類、配合された組成物の種
類、適用頻度及び治療すべき特定部位及び患者の病状に
よって適宜増減することができる。例えば、一日当りの
成人一人当りの投与量は、経口投与の場合、１０ないし
５００ｍｇであり、非経口投与、好ましくは静脈内注射
の場合、１日当り１０ないし１００ｍｇである。なお、
投与回数は、投与方法及び症状により異なるが、単回又
は２ないし５回に分けて投与することができる。

【００３８】

【実施例】以下に実施例を挙げて本発明をより具体的に
説明するが、本発明はこれら実施例のみに限定されるも
のではなく、実施例の修飾手段はもちろん、本発明によ
って明らかにされたＢＥ−２６６６８の性状に基づい
て、公知の手段を用いてＢＥ−２６６６８を生産、濃
縮、抽出、精製する方法すべてを包含する。実施例１斜面寒天培地に培養した真菌Ｆ２６６６８株をポリペプ
トン０．３％、グルコース１％、小麦胚芽１．０％、グ
ルテンミール０．５％、麦芽エキス０．３％、マルトー
ス３．０％、塩化ナトリウム０．２％、硝酸ナトリウム
０．１％、リン酸一カリウム０．１％、硫酸マグネシウ
ム０．０５％、硫酸第一鉄０．０００２％、塩化第二銅
０．００００４％、塩化マンガン０．００００４％、塩
化コバルト０．００００４％、硫酸亜鉛０．００００８
％、ホウ酸ナトリウム０．００００８％及びモリブデン
酸アンモニウム０．０００２４％からなる培地（ｐＨ
６．０）１００ｍｌを含む５００ｍｌ容の三角フラスコ
５本に接種し、２８℃で９６時間、回転振盪機（毎分１
８０回転）上で培養した。この培養液を２ｍｌずつ、上
記の培地を１００ｍｌ含む５００ｍｌ容の三角フラスコ
１９５本に接種し、２８℃で７２時間、回転振盪機（毎
分１８０回転）上で培養した。

【００３９】得られた培養液（約１９Ｌ）を９０℃で１
０分間加熱処理した後、リン酸を加えｐＨ３に調整後、
濾過法により濾過し、得られた菌体にアセトン（１２
Ｌ）を加え室温で１時間撹拌した。濾過法によってアセ
トン抽出液を得た。アセトン抽出液を減圧下に濃縮し、
アセトンを除去し、得られた濃縮液（約３．２Ｌ）をリ
ン酸でｐＨを３に調整した後、酢酸エチル２Ｌで抽出し
た。酢酸エチル層を無水硫酸ナトリウムを用いて脱水し
た後、濃縮乾固した。残渣をクロロホルム２５０ｍｌに
溶解し、濾過法により不溶物を除去した。濾液を２００
ｇのシリカゲル（メルク社製キーゼルゲル６０）のカラ
ムに吸着させ、クロロホルムでカラムを洗浄した後、ク
ロロホルム／メタノール（２０：１）の混液で溶出し
た。ＢＥ−２６６６８を含む分画を集め、濃縮乾固し、
得られた粗物質をメタノール１０ｍｌに溶解し、セファ
デックスＬＨ−２０（ファルマシア社製）のカラム
（２．０×９５ｃｍ）に付し、メタノールで展開した。
ＢＥ−２６６６８を含む分画を集め、濃縮乾固すること
により、３．５ｍｇのＢＥ−２６６６８を得た。

【００４０】以下に本発明の化合物の製剤化例を示す
が、本発明の化合物の製剤化は、本製剤化例に限定され
るものではない。製剤化例１本物質（ＢＥ−２６６６８）１０（部）重質酸化マグネシウム１５乳糖７５を均一に混合して３５０μｍ以下の粉末状又は細粒状の
散剤とする。この散剤をカプセル容器に入れてカプセル
剤とした。製剤化例２本物質（ＢＥ−２６６６８）４５（部）澱粉１５乳糖１６結晶性セルロース２１ポリビニルアルコール３蒸留水３０を均一に混合した後、破砕造粒して乾燥し、次いで篩別
して１４１０〜１７７μｍの大きさの顆粒剤とした。製剤化例３製剤化例２と同様の方法で顆粒剤を作った後、この顆粒
剤９６部に対してステアリン酸カルシウム４部を加えて
圧縮成形し、直径１０ｍｍの錠剤を作製した。製剤化例４製剤化例２の方法で得られた顆粒剤の９０部に対して結
晶性セルロース１０部及びステアリン酸カルシウム３部
を加えて圧縮成形し、直径８ｍｍの錠剤とした後、これ
にシロップゼラチン、沈降性炭酸カルシウム混合懸濁液
を加えて糖衣錠を作製した。製剤化例５本物質（ＢＥ−２６６６８）０．６（部）非イオン系界面活性剤２．４生理的食塩水９７を加温混合してからアンプルに入れ、滅菌を行って注射
剤を作製した。

【００４１】

【発明の効果】本発明のＢＥ−２６６６８は、カゼイン
・キナーゼＩＩに対して、顕著な蛋白質リン酸化酵素阻
害活性を示すことから、医薬の分野で抗腫瘍剤として有
用である。

フロントページの続き (72)発明者奥山彬茨城県つくば市大久保３番萬有製薬株式会社つくば研究所内 (72)発明者須田寛之茨城県つくば市大久保３番萬有製薬株式会社つくば研究所内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】構造式【化１】で表される化合物又はその薬学的に許容しうる塩。
【請求項２】シュードロビラルダ（Ｐｓｅｕｄｏｒｏｂ
ｉｌｌａｒｄａ）属に属し、構造式［Ｉ］の化合物を産
生する能力を有する微生物又はその変異株を培養し、そ
の培養液及びその菌体から構造式［Ｉ］の化合物を採取
し、要すれば薬学的に許容しうる塩とすることを特徴と
する、構造式【化２】で表される化合物又はその薬学的に許容しうる塩の製
法。
【請求項３】微生物又はその変異株が、シュードロビラ
ルダ・エスピーＦ２６６６８（Ｐｓｅｕｄｏｒｏｂｉ
ｌｌａｒｄａｓｐ．Ｆ２６６６８）である請求項２記
載の製法。
【請求項４】構造式【化３】で表される化合物又はその薬学的に許容しうる塩を有効
成分とする抗腫瘍剤。
【請求項５】構造式［Ｉ］の化合物を産生する能力を有
するシュードロビラルダ（Ｐｓｅｕｄｏｒｏｂｉｌｌａ
ｒｄａ）属に属する微生物又はその変異株。
【請求項６】微生物が、シュードロビラルダ・エスピー
Ｆ２６６６８（Ｐｓｅｕｄｏｒｏｂｉｌｌａｒｄａ
ｓｐ．Ｆ２６６６８）である請求項５記載の微生物又は
その変異株。