JPH06228121A - 抗腫瘍性物質ｂｅ−２６５５４類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 式 【化１】 ［式中、Ｒは基： 【化２】 を示す］で表される化合物、その製法及びその用途並び
に新規微生物ストレプトミセス・エスピー（Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ．）に関する。 【効果】 本発明の化合物は腫瘍細胞に対して強い増殖
阻止作用を示し、抗腫瘍剤として有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は医薬の分野で有用であ
り、さらに詳細には腫瘍細胞の増殖を阻害し、制癌効果
を発揮する新規化合物、その製法及びその用途並びに新
規微生物ストレプトミセス・エスピー（Ｓｔｒｅｐｔｏ
ｍｙｃｅｓ ｓｐ．）に関する。

【０００２】

【従来の技術】癌化学療法の分野では、ブレオマイシン
（Ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ）及びアドリアマイシン（Ａｄｒ
ｉａｍｙｃｉｎ）等の多くの微生物代謝産物を臨床的に
応用することが試みられ、またこれらは実際に臨床にお
いて使用されている。しかしながら、様々な腫瘍に対し
てその効果は必ずしも充分ではなく、また臨床上これら
の薬剤に対する腫瘍細胞の耐性現象が明らかにされるに
つれ、その臨床的応用性は複雑化している［第４７回日
本癌学会総会記事、１２頁〜１５頁（１９８８年）参
照］。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明が解決しようと
する課題は、既存の制癌物質が充分に効果を発揮できな
い種類の癌に対して有効性を有する物質を微生物代謝産
物中に探索し、種々の耐性癌に対して制癌作用を有する
物質を見い出すことにある。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決すべく、抗腫瘍活性を有する物質について微生物
代謝物を広くスクリーニングした結果、後記一般式で表
される化合物が優れた抗腫瘍作用を示すことを見い出し
て本発明を完成した。

【０００５】即ち、本発明は、新規な一般式

【０００６】

【化７】 ［式中、Ｒは基：

【０００７】

【化８】 を示す］で表される化合物又はその薬学的に許容しうる
塩、その製法及びその用途並びに一般式［Ｉ］の化合物
を産生する能力を有するストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｍｙｃｅｓ）属に属する微生物に関するものであ
る。

【０００８】次に、本明細書で言及される各種の用語及
び定義について説明する。

【０００９】一般式［Ｉ］の化合物は、その抗腫瘍性効
果及び産生菌株（Ａ２６５５４株）に因んで、抗腫瘍性
物質ＢＥ−２６５５４類と命名された。

【００１０】「抗腫瘍性物質ＢＥ−２６５５４類」と
は、具体的には、例えば下記のＢＥ−２６５５４Ａ、Ｂ
Ｅ−２６５５４Ｂ−１、ＢＥ−２６５５４Ｂ−２、ＢＥ
−２６５５４Ｂ−３、ＢＥ−２６５５４Ｂ−４、ＢＥ−
２６５５４Ｃ及びＢＥ−２６５５４Ｄ等が挙げられる。

【００１１】即ち、一般式［Ｉ］において、Ｒが基：

【００１２】

【化９】 を示す化合物は、ＢＥ−２６５５４Ａであり、Ｒが基：

【００１３】

【化１０】 を示す化合物は、ＢＥ−２６５５４Ｂ−１であり、Ｒが
基：

【００１４】

【化１１】 を示す化合物は、ＢＥ−２６５５４Ｂ−２であり、Ｒが
基：

【００１５】

【化１２】 を示す化合物は、ＢＥ−２６５５４Ｂ−３であり、Ｒが
基：

【００１６】

【化１３】 を示す化合物は、ＢＥ−２６５５４Ｂ−４であり、Ｒが
基：

【００１７】

【化１４】 を示す化合物は、ＢＥ−２６５５４Ｃであり、Ｒが基：

【００１８】

【化１５】 を示す化合物は、ＢＥ−２６５５４Ｄである。

【００１９】以下に、本発明化合物の理化学的性状を示
す。ａ）ＢＥ−２６５５４Ａの理化学的性状 性状：黄橙色アモルファス状固体又は結晶 分子式：Ｃ₂₁Ｈ₁₄Ｏ₆ マススペクトル：高分解能ＦＡＢ−ＭＳ；ｍ／ｚ ３６
３．０８７５［Ｍ＋Ｈ］⁺ ＵＶスペクトル：λ［ＭｅＯＨ，ｍａｘ，ｎｍ］ ２４
０，２６５，２８５（ｓｈ），４１０¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ，ｄ−クロロホ
ルム，δｐｐｍ）：１２．８（１Ｈ，ｓ），８．０６
（１Ｈ，ｓ），７．８０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．３，
１．０Ｈｚ），７．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，
７．３Ｈｚ），７．３５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，
１．０Ｈｚ），６．５１（１Ｈ，ｓ），３．５４（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
５．９Ｈｚ），３．００（３Ｈ，ｓ），１．８７（３
Ｈ，ｓ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（７５ＭＨｚ，ｄ−クロロホル
ム，δｐｐｍ）：１８６．８（ｓ），１８１．４
（ｓ），１７８．６（ｓ），１６６．０（ｓ），１６
２．４（ｓ），１５６．１（ｓ），１４９．６（ｓ），
１３６．２（ｄ），１３５．９（ｓ），１３２．０
（ｓ），１２６．３（ｓ），１２５．７（ｄ），１２
５．２（ｄ），１１９．６（ｓ），１１９．２（ｄ），
１１６．６（ｓ），１１０．６（ｄ），５５．８
（ｔ），５４．０（ｓ），２４．１（ｑ），１８．０
（ｑ） 溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド等の有機溶
媒に溶け、水に溶けにくい。

【００２０】酸性、中性、塩基性物質の区別：弱酸性物
質 薄層クロマトグラフィー（メルク社製、キーゼルゲル６
０Ｆ₂₅₄） Ｒｆ値：０．６［展開溶媒：クロロホルム／メタノール
（５０：１）］ 呈色反応：過マンガン酸カリウム反応 陽性、硫酸反応
陽性ｂ）ＢＥ−２６５５４Ｂ−１の理化学的性状 性状：黄橙色アモルファス状固体又は結晶 分子式：Ｃ₂₂Ｈ₁₅Ｏ₇Ｃｌ マススペクトル：高分解能ＦＡＢ−ＭＳ；ｍ／ｚ ４２
７．０５８５［Ｍ＋Ｈ］⁺ ＵＶスペクトル：λ［ＭｅＯＨ，ｍａｘ，ｎｍ］ ２４
０，２６５，２８５（ｓｈ），４１０¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ，ｄ₆−ジメチル
スルホキシド，δｐｐｍ）：１２．７（１Ｈ，ｓ），
８．００（１Ｈ，ｓ），７．８２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
８．３，７．３Ｈｚ），７．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
７．３，１．０Ｈｚ），７．４４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
８．３，１．０Ｈｚ），６．４０（１Ｈ，ｓ），６．０
５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），４．７０（１Ｈ，
ｍ），３．９５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．２，４．４Ｈ
ｚ），３．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．２，７．８Ｈ
ｚ），３．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．２
２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），２．９１（３Ｈ，
ｓ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（７５ＭＨｚ，ｄ₆−ジメチル
スルホキシド，δｐｐｍ）：１８６．９（ｓ），１８
１．３（ｓ），１７８．０（ｓ），１６４．６（ｓ），
１６１．４（ｓ），１５５．７（ｓ），１４８．３
（ｓ），１３６．８（ｄ），１３５．９（ｓ），１３
２．１（ｓ），１２５．９（ｓ），１２５．１（ｄ），
１２４．８（ｄ），１１９．８（ｓ），１１８．８
（ｄ），１１６．６（ｓ），１１０．２（ｄ），６８．
８（ｄ），５８．９（ｓ），５２．４（ｔ），４６．０
（ｔ），２３．５（ｑ） 溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド等の有機溶
媒に溶け、水に溶けにくい。

【００２１】酸性、中性、塩基性物質の区別：弱酸性物
質 薄層クロマトグラフィー（メルク社製、キーゼルゲル６
０Ｆ₂₅₄） Ｒｆ値：０．３４［展開溶媒：クロロホルム／メタノー
ル（５０：１）］ 高速液体クロマトグラフィー カラム：Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ^TM ＯＤＳ ４．６×
２５０ｍｍ（富士デヴィソン化学社製） 移動相：８０％メタノール 流速：１ｍｌ／分 検出：ＵＶ ２４０ｎｍ 保持時間：１１．７分 呈色反応：過マンガン酸カリウム反応 陽性、硫酸反応
陽性ｃ）ＢＥ−２６５５４Ｂ−２の理化学的性状 性状：黄橙色アモルファス状固体又は結晶 分子式：Ｃ₂₂Ｈ₁₅Ｏ₇Ｂｒ マススペクトル：高分解能ＦＡＢ−ＭＳ；ｍ／ｚ ４７
１．００４７［Ｍ＋Ｈ］⁺ ＵＶスペクトル：λ［ＭｅＯＨ，ｍａｘ，ｎｍ］ ２４
０，２６５，２８５（ｓｈ），４１０¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ，ｄ₆−ジメチル
スルホキシド，δｐｐｍ）：１２．７（１Ｈ，ｓ），
８．００（１Ｈ，ｓ），７．８２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
８．３，７．５Ｈｚ），７．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
７．５，１．３Ｈｚ），７．４３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
８．３，１．３Ｈｚ），６．４０（１Ｈ，ｓ），６．０
６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），４．７２（１Ｈ，
ｍ），３．８５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．０，４．１Ｈ
ｚ），３．６０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．０，８．５Ｈ
ｚ），３．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），３．２
３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），２．９１（３Ｈ，
ｓ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（７５ＭＨｚ，ｄ₆−ジメチル
スルホキシド，δｐｐｍ）：１８６．６（ｓ），１８
１．１（ｓ），１７７．７（ｓ），１６４．３（ｓ），
１６１．２（ｓ），１５５．５（ｓ），１４８．１
（ｓ），１３６．６（ｄ），１３５．７（ｓ），１３
１．９（ｓ），１２５．８（ｓ），１２４．９（ｄ），
１２４．６（ｄ），１１９．６（ｓ），１１８．６
（ｄ），１１６．７（ｓ），１１０．２（ｄ），６８．
６（ｄ），５８．９（ｓ），５２．６（ｔ），３４．９
（ｔ），２３．５（ｑ） 溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド等の有機溶
媒に溶け、水に溶けにくい。

【００２２】酸性、中性、塩基性物質の区別：弱酸性物
質 薄層クロマトグラフィー（メルク社製、キーゼルゲル６
０Ｆ₂₅₄） Ｒｆ値：０．３４［展開溶媒：クロロホルム／メタノー
ル（５０：１）］ 高速液体クロマトグラフィー カラム：Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ^TM ＯＤＳ ４．６×
２５０ｍｍ（富士デヴィソン化学社製） 移動相：８０％メタノール 流速：１ｍｌ／分 検出：ＵＶ ２４０ｎｍ 保持時間：１２．８分 呈色反応：過マンガン酸カリウム反応 陽性、硫酸反応
陽性ｄ）ＢＥ−２６５５４Ｂ−３の理化学的性状 性状：黄橙色アモルファス状固体又は結晶 分子式：Ｃ₂₂Ｈ₁₅Ｏ₇Ｃｌ マススペクトル：高分解能ＦＡＢ−ＭＳ；ｍ／ｚ ４２
７．０６１５［Ｍ＋Ｈ］⁺ ＵＶスペクトル：λ［ＭｅＯＨ，ｍａｘ，ｎｍ］ ２４
０，２６５，２８５（ｓｈ），４１０¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ，ｄ₆−ジメチル
スルホキシド，δｐｐｍ）：１２．６（１Ｈ，ｓ），
７．９６（１Ｈ，ｓ），７．７８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
８．３，７．３Ｈｚ），７．６８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
７．３，１．０Ｈｚ），７．４０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
８．３，１．０Ｈｚ），６．５３（１Ｈ，ｓ），６．４
１（１Ｈ，ｓ），４．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈ
ｚ），４．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ），３．
６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．９，２．５Ｈｚ），２．９
１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．４，２．５Ｈｚ），２．９０
（３Ｈ，ｓ），２．７９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．４，
３．９Ｈｚ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（７５ＭＨｚ，ｄ₆−ジメチル
スルホキシド，δｐｐｍ）：１８６．８（ｓ），１８
１．２（ｓ），１７７．９（ｓ），１６６．７（ｓ），
１６１．３（ｓ），１５５．２（ｓ），１４８．４
（ｓ），１３６．７（ｄ），１３５．９（ｓ），１３
２．１（ｓ），１２５．５（ｓ），１２５．０（ｄ），
１２４．８（ｄ），１１９．８（ｓ），１１８．８
（ｄ），１１６．７（ｓ），１１１．５（ｄ），７３．
６（ｓ），５４．４（ｄ），４８．４（ｔ），４２．７
（ｔ），２３．４（ｑ） 溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド等の有機溶
媒に溶け、水に溶けにくい。

【００２３】 酸性、中性、塩基性物質の区別：弱酸性物質 薄層クロマトグラフィー（メルク社製、キーゼルゲル６
０Ｆ₂₅₄） Ｒｆ値：０．３４［展開溶媒：クロロホルム／メタノー
ル（５０：１）］ 高速液体クロマトグラフィー カラム：Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ^TM ＯＤＳ ４．６×
２５０ｍｍ（富士デヴィソン化学社製） 移動相：８０％メタノール 流速：１ｍｌ／分 検出：ＵＶ ２４０ｎｍ 保持時間：１４．４分 呈色反応：過マンガン酸カリウム反応 陽性、硫酸反応
陽性ｅ）ＢＥ−２６５５４Ｂ−４の理化学的性状 性状：黄橙色アモルファス状固体又は結晶 分子式：Ｃ₂₂Ｈ₁₅Ｏ₇Ｂｒ マススペクトル：高分解能ＦＡＢ−ＭＳ；ｍ／ｚ ４７
１．００５４［Ｍ＋Ｈ］⁺ ＵＶスペクトル：λ［ＭｅＯＨ，ｍａｘ，ｎｍ］ ２４
０，２６５，２８５（ｓｈ），４１０¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ，ｄ₆−ジメチル
スルホキシド，δｐｐｍ）：１２．６（１Ｈ，ｓ），
８．０１（１Ｈ，ｓ），７．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
８．３，７．８Ｈｚ），７．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
７．８，１．０Ｈｚ），７．４３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
８．３，１．０Ｈｚ），６．５２（１Ｈ，ｓ），６．４
０（１Ｈ，ｓ），４．４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈ
ｚ），３．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ），３．
６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．９，２．９Ｈｚ），２．９
３（３Ｈ，ｓ），２．８９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．４，
２．９Ｈｚ），２．７８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．４，
３．９Ｈｚ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（７５ＭＨｚ，ｄ₆−ジメチル
スルホキシド，δｐｐｍ）：１８６．５（ｓ），１８
１．０（ｓ），１７７．７（ｓ），１６６．７（ｓ），
１６１．１（ｓ），１５５．５（ｓ），１４８．２
（ｓ），１３６．５（ｄ），１３５．９（ｓ），１３
２．０（ｓ），１２５．３（ｓ），１２４．９（ｄ），
１２４．６（ｄ），１１９．７（ｓ），１１８．６
（ｄ），１１６．７（ｓ），１１１．２（ｄ），７３．
０（ｓ），５４．４（ｄ），４３．０（ｔ），３７．５
（ｔ），２３．４（ｑ） 溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド等の有機溶
媒に溶け、水に溶けにくい。

【００２４】 酸性、中性、塩基性物質の区別：弱酸性物質 薄層クロマトグラフィー（メルク社製、キーゼルゲル６
０Ｆ₂₅₄） Ｒｆ値：０．３４［展開溶媒：クロロホルム／メタノー
ル（５０：１）］ 高速液体クロマトグラフィー カラム：Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ^TM ＯＤＳ ４．６×
２５０ｍｍ（富士デヴィソン化学社製） 移動相：８０％メタノール 流速：１ｍｌ／分 検出：ＵＶ ２４０ｎｍ 保持時間：１５．８分 呈色反応：過マンガン酸カリウム反応 陽性、硫酸反応
陽性ｆ）ＢＥ−２６５５４Ｃの理化学的性状 性状：黄橙色アモルファス状固体又は結晶 分子式：Ｃ₂₂Ｈ₁₈Ｏ₆ マススペクトル：高分解能ＦＡＢ−ＭＳ；ｍ／ｚ ４７
１．００５４［Ｍ］⁺ＵＶスペクトル：λ［ＭｅＯＨ，
ｍａｘ，ｎｍ］ ２４０，２６４，２８７（ｓｈ），４
１０¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ，ｄ₆−ジメチル
スルホキシド，δｐｐｍ）：１２．７（１Ｈ，ｓ），
７．９６（１Ｈ，ｓ），７．８０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
８．３，７．８Ｈｚ），７．７０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
７．８，１．５Ｈｚ），７．４２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
８．３，１．５Ｈｚ），６．４８（１Ｈ，ｓ），５．５
７（１Ｈ，ｓ），２．９２（３Ｈ，ｓ），２．０７（１
Ｈ，ｍ），１．８５（１Ｈ，ｍ），１．６１（３Ｈ，
ｓ），０．８４（３Ｈ，ｔ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（７５ＭＨｚ，ｄ₆−ジメチル
スルホキシド，δｐｐｍ）：１８７．１（ｓ），１８
１．５（ｓ），１７８．４（ｓ），１７３．９（ｓ），
１６１．４（ｓ），１５５．６（ｓ），１４８．３
（ｓ），１３６．７（ｄ），１３５．８（ｓ），１３
２．２（ｓ），１２５．５（ｓ），１２４．７（ｄ），
１２４．７（ｄ），１１９．９（ｓ），１１８．７
（ｄ），１１６．７（ｓ），１０９．０（ｄ），７２．
７（ｓ），３３．０（ｔ），２６．８（ｑ），２３．５
（ｑ），７．９（ｑ） 溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド等の有機溶
媒に溶け、水に溶けにくい。

【００２５】 酸性、中性、塩基性物質の区別：弱酸性物質 薄層クロマトグラフィー（メルク社製、キーゼルゲル６
０Ｆ₂₅₄） Ｒｆ値：０．３１［展開溶媒：クロロホルム／メタノー
ル（５０：１）］ 呈色反応：過マンガン酸カリウム反応 陽性、硫酸反応
陽性ｇ）ＢＥ−２６５５４Ｄの理化学的性状 性状：黄橙色アモルファス状固体又は結晶 分子式：Ｃ₂₂Ｈ₁₆Ｏ₇ マススペクトル：高分解能ＦＡＢ−ＭＳ；ｍ／ｚ ３９
３．０９５２［Ｍ＋Ｈ］⁺ ＵＶスペクトル：λ［ＭｅＯＨ，ｍａｘ，ｎｍ］ ２３
８，２６５，２８７（ｓｈ），４１０¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ，ｄ₆−ジメチル
スルホキシド，δｐｐｍ）：１２．７（１Ｈ，ｓ），
７．８８（１Ｈ，ｓ），７．７７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
８．３，７．３Ｈｚ），７．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
７．３，１．０Ｈｚ），７．４２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．
９Ｈｚ），７．４１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，１．０
Ｈｚ），６．５５（１Ｈ，ｓ），５．１８（１Ｈ，ｔ，
Ｊ＝５．４Ｈｚ），５．０７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈ
ｚ），４．４１（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．９，５．４Ｈ
ｚ），４．３０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），２．８
７（３Ｈ，ｓ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（７５ＭＨｚ，ｄ₆−ジメチル
スルホキシド，δｐｐｍ）：１８７．０（ｓ），１８
１．３（ｓ），１７８．６（ｓ），１６１．９（ｓ），
１６１．４（ｓ），１５５．６（ｓ），１４８．２
（ｓ），１４１．９（ｄ），１３６．７（ｄ），１３
５．８（ｓ），１３２．０（ｓ），１３０．２（ｓ），
１２５．５（ｓ），１２４．８（ｄ），１２４．７
（ｄ），１１９．６（ｓ），１１８．７（ｄ），１１
６．７（ｓ），１０９．８（ｄ），５８．０（ｔ），５
４．９（ｔ），２３．４（ｑ） 溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド等の有機溶
媒に溶け、水に溶けにくい。

【００２６】 酸性、中性、塩基性物質の区別：弱酸性物質 薄層クロマトグラフィー（メルク社製、キーゼルゲル６
０Ｆ₂₅₄） Ｒｆ値：０．４２［展開溶媒：クロロホルム／メタノー
ル（１０：１）］ 呈色反応：過マンガン酸カリウム反応 陽性、硫酸反応
陽性 次に、ＢＥ−２６５５４類の製造法を説明する。

【００２７】本発明者らは、ＢＥ−２６５５４類を山梨
県北沢峠の腐葉より分離採取されたストレプトミセス属
に属する放線菌Ａ２６５５４株の培養物より単離した。

【００２８】以下にこの生産菌の菌学的性状を説明す
る。 １．形態 Ａ２６５５４株は気菌糸の形成が良好ではなく、輪生岐
及び菌糸の分断は認められない。気菌糸上には胞子の連
鎖を作り、その形態は不完全な螺旋状である。胞子の表
面はほぼ平滑あるいはややしわ状で、大きさが１．０×
０．８〜０．８×０．６μｍ位の卵形であり、胞子の
う、鞭毛胞子及び菌核等の特殊な器官は観察されない。 ２．各種寒天平板培地における培養性状 各種寒天平板培地において、２８℃、１４日間培養した
結果を第１表に示す。

【００２９】

【表１】 ３．生育温度（イースト・麦芽寒天培地、１４日間培
養） １０℃： 生育せず １４℃： 生育不良、気菌糸形成せず １７℃： 生育不良、気菌糸形成せず ２０℃： 生育良好、気菌糸形成せず ２４℃： 生育良好、気菌糸形成僅少 ２９℃： 生育良好、気菌糸形成僅少 ３４℃： 生育せず ４．生理学的諸性質 （１）ゼラチンの液化 陽性
（弱い） （グルコース・ペプトン・ゼラチン培地） （２）スターチの加水分解 陽性
（弱い） （スターチ・無機塩寒天培地） （３）脱脂粉乳の凝固 陰性 （スキムミルク培地） （４）脱脂粉乳のペプトン化 陽性 （スキムミルク培地） （５）メラニン様色素の生成 陰性 （６）食塩耐性 食塩含
有量２％以下で生育 （イースト・麦芽寒天培地） ５．炭素源の利用能 プリドハム・ゴドリーブ寒天を基礎培地とし、下記各種
糖を添加して２８℃１４日間培養した。炭素源の利用能
の結果を第２表に示す。

【００３０】

【表２】 ６．細胞壁組成 ＬＬ−ジアミノピメリン酸が検出された。

【００３１】以上の菌学的諸性質より、Ａ２６５５４株
は放線菌ストレプトミセス属に属すると考えられる。し
たがって、Ａ２６５５４株をストレプトミセス・エスピ
ー・Ａ２６５５４（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ．
Ａ２６５５４）と称することとした。

【００３２】なお、本菌株は通商産業省工業技術院微生
物工業技術研究所に寄託されており、その微工研受託番
号は微工研菌寄第１３２９１号（ＦＥＲＭ Ｐ−１３２
９１）である。

【００３３】本発明で使用される微生物は、ストレプト
ミセス属に属し、抗腫瘍性物質ＢＥ−２６５５４類を産
生する能力を有する放線菌であればいずれのものでもよ
いが、好ましくはストレプトミセス・エスピー Ａ２６
５５４又はその変異株が挙げられる。該変異株として
は、例えばＸ線若しくは紫外線等の照射処理、例えばナ
イトロジェン・マスタード、アザセリン、亜硝酸、２−
アミノプリン若しくはＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−
ニトロソグアニジン（ＮＴＧ）等の変異誘起剤による処
理、ファージ接触、形質転換、形質導入又は接合等の通
常用いられる菌種変換処理方法等によりＢＥ−２６５５
４類産生菌を変異させた微生物が挙げられる。

【００３４】本発明のＢＥ−２６５５４類は、ＢＥ−２
６５５４類の生産菌株Ａ２６５５４株又はその変異株を
栄養源含有培地に接種して好気的に培養させることによ
り、その培養液及びその菌体からＢＥ−２６５５４類を
採取し、要すれば薬学的に許容しうる塩とすることによ
り製造することができる。

【００３５】栄養源としては、放線菌の栄養源として公
知のものが使用でき、炭素源としては、例えば市販され
ているブドウ糖、グリセリン、麦芽糖、デンプン、庶
糖、糖蜜、デキストリン等が単独又は混合物として用い
られる。窒素源としては、例えば市販されている大豆
粉、コーングルテンミール、コーンスティープリカー、
肉エキス、脱脂肉骨粉、ミートミール、酵母エキス、乾
燥酵母、綿実粉、ペプトン、小麦胚芽、脱脂米糠、魚
粉、無機アンモニウム塩、硝酸ナトリウム等が単独又は
混合物として用いられる。無機塩としては、例えば市販
されている炭酸カルシウム、塩化カルシウム、塩化ナト
リウム、臭化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸マグネシ
ウム、各種リン酸塩等が単独又は混合物として使用する
ことができる。その他要すれば、鉄、マンガン、コバル
ト、モリブデン、銅、亜鉛等の重金属塩を微量添加して
もよい。また、発泡の著しい時には、消泡剤として、例
えば大豆油、亜麻仁油等の植物油、例えばオクタデカノ
ール等の高級アルコール類、各種シリコン化合物等を適
宜添加してもよい。これらのもの以外でも、該生産菌が
利用し、ＢＥ−２６５５４類の生産に役立つものを適宜
使用することができ、例えば３−（Ｎ−モルホリノ）プ
ロパンスルホン酸、ホウ酸ナトリウム等が挙げられる。

【００３６】培養方法は、一般の微生物代謝産物の生産
方法と同様に行うことができ、固体培養でも液体培養で
もよい。液体培養の場合は、静置培養、撹拌培養、振盪
培養、通気培養等のいずれの培養方法を実施してもよい
が、特に振盪培養又は深部通気撹拌培養等が好ましい。
培養温度は２０℃〜３０℃が適当であるが、好ましくは
２５℃〜３０℃である。培地のｐＨは４〜９の範囲、好
ましくは４〜８で、培養時間は４８時間〜１６８時間、
好ましくは９６時間〜１４４時間である。

【００３７】培養液及び菌体から目的とするＢＥ−２６
５５４類を採取するには、微生物の生産する代謝物の培
養物から採取するのに通常使用される分離手段が適宜利
用される。ＢＥ−２６５５４類は培養濾液中及び菌体中
に存在するので、培養濾液又は菌体より通常の分離手
段、例えば溶媒抽出法、イオン交換樹脂法、吸着又は分
配クロマトグラフィー法、ゲル濾過法等を単独又は組合
せて行うことにより精製することができる。また高速液
体クロマトグラフィーや薄層クロマトグラフィーなども
抽出精製に適宜利用可能である。

【００３８】次に、本発明の化合物の有用性を示すため
に、本発明化合物の抗腫瘍性効果を測定した。ＢＥ−２６５５４類の生物学的活性 抗腫瘍性物質ＢＥ−２６５５４類のマウス実験腫瘍細胞
に対する増殖阻止作用を決定するため、ｉｎ ｖｉｔｒ
ｏで試験を行った。Ｐ−３８８腫瘍細胞に対するｉｎ
ｖｉｔｒｏの抗腫瘍作用試験は、試験化合物をジメチル
スルホキシドに溶解した後、２０％にジメチルスルホキ
シドを含む細胞培養用培地（２０％ＤＭＳＯ−ＲＰＭＩ
−１６４０培地）で逐次希釈し、２×１０⁴又は３×１
０⁴個の腫瘍細胞を含む細胞培養用培地（仔牛血清１０
％含有ＲＰＭＩ−１６４０培地）２００μｌに対し２μ
ｌを加えた。３７℃で７２時間、５％ＣＯ₂で培養した
後、コールターカウンターにて生存する細胞数をカウン
トし、対照群と比較した。その結果、本発明化合物は、
Ｐ−３８８腫瘍細胞に対して強い増殖阻止作用を示し
た。その代表例として、例えばＢＥ−２６５５４Ｂ−
１、ＢＥ−２６５５４Ｂ−２、ＢＥ−２６５５４Ｂ−３
及びＢＥ−２６５５４Ｂ−４について、Ｐ−３８８腫瘍
細胞の増殖を５０％阻止する濃度（ＩＣ₅₀）の結果を第
３表にまとめた。

【００３９】

【表３】 第３表に示したように、ＢＥ−２６５５４類は実験腫瘍
細胞に対して、顕著な増殖阻止作用を示す。従って本発
明はヒトをはじめとする哺乳動物の腫瘍の治療剤として
期待される。

【００４０】本発明化合物の治療効果が期待される好適
な腫瘍としては、例えばヒトの大腸癌等が挙げられる。

【００４１】本発明化合物は、抗腫瘍剤として使用され
る場合には、その薬学的に許容しうる塩としても使用す
ることができる。薬学的に許容しうる塩の典型例として
は、例えばナトリウム、カリウム等のアルカリ金属との
塩等を挙げることができる。

【００４２】本発明の化合物の薬学的に許容しうる塩の
製造法は、有機合成化学分野で通常用いられる方法を適
宜組み合わせて行うことができる。具体的には、本発明
化合物の遊離型の溶液をアルカリ溶液で中和滴定するこ
と等が挙げられる。

【００４３】本発明化合物を抗腫瘍剤として使用する際
の投与形態としては各種の形態を選択でき、例えば錠
剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、液剤等の経口剤、例え
ば溶液、懸濁液等の殺菌した液状の非経口剤等が挙げら
れる。

【００４４】固体の製剤は、そのまま錠剤、カプセル
剤、顆粒剤又は粉末の形態として製造することもできる
が、適当な添加物を使用して製造することもできる。該
添加物としては、例えば乳糖、ブドウ糖等の糖類、例え
ばトウモロコシ、小麦、米等の澱粉類、例えばステアリ
ン酸等の脂肪酸、例えばメタケイ酸ナトリウム、アルミ
ン酸マグネシウム、無水リン酸カルシウム等の無機塩、
例えばポリビニルピロリドン、ポリアルキレングリコー
ル等の合成高分子、例えばステアリン酸カルシウム、ス
テアリン酸マグネシウム等の脂肪酸塩、例えばステアリ
ルアルコール、ベンジルアルコール等のアルコール類、
例えばメチルセルロース、カルボキシメチルセルロー
ス、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセル
ロース等の合成セルロース誘導体、その他、水、ゼラチ
ン、タルク、植物油、アラビアゴム等通常用いられる添
加物等が挙げられる。

【００４５】これらの錠剤、カプセル剤、顆粒剤、粉末
等の固形製剤は、一般的には０．１〜１００重量％、好
ましくは５〜１００重量％の有効成分を含むことができ
る。

【００４６】液状製剤は、水、アルコール類又は例えば
大豆油、ピーナツ油、ゴマ油等の植物由来の油等液状製
剤において通常用いられる適当な添加物を使用し、懸濁
液、シロップ剤、注射剤等の形態として製造することが
できる。

【００４７】特に、非経口的に筋肉内注射、静脈内注
射、皮下注射で投与する場合の適当な溶剤としては、例
えば注射用蒸留水、塩酸リドカイン水溶液（筋肉内注射
用）、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、エタノール、静脈
内注射用液体（例えばクエン酸、クエン酸ナトリウム等
の水溶液）、電解質溶液（例えば点滴静注、静脈内注射
用）等又はこれらの混合溶液が挙げられる。

【００４８】又、これらの注射剤は予め溶解したものの
他、粉末のまま又は適当な添加物を加えたものを用時溶
解する形態もとることができる。これらの注射液は、通
常０．１〜１０重量％、好ましくは１〜５重量％の有効
成分を含むことができる。

【００４９】又、経口投与の懸濁剤又はシロップ剤等の
液剤は、０．５〜１０重量％の有効成分を含むことがで
きる。

【００５０】本発明の化合物の実際に好ましい投与量
は、使用される化合物の種類、配合された組成物の種
類、適用頻度及び治療すべき特定部位及び患者の病状に
よって適宜増減することができる。例えば、一日当りの
成人一人当りの投与量は、経口投与の場合、１０ないし
５００ｍｇであり、非経口投与、好ましくは静脈内注射
の場合、１日当り１０ないし１００ｍｇである。なお、
投与回数は、投与方法及び症状により異なるが、単回又
は２ないし５回に分けて投与することができる。

【００５１】

【実施例】以下に実施例を挙げて本発明をより具体的に
説明するが、本発明はこれら実施例のみに限定されるも
のではない。実施例１ 斜面寒天培地に培養したＡ２６５５４株をグルコース
０．２％、デキストリン２．０％、ミートミール０．５
％、脱脂米ヌカ０．５％、脱脂肉骨粉０．２％、乾燥酵
母０．１％、硫酸マグネシウム０．０５％、臭化ナトリ
ウム０．０５％、塩化ナトリウム０．５％、リン酸一水
素カリウム０．１％、塩化カルシウム０．２％、塩化第
一銅０．００４％、塩化マンガン０．００４％、塩化コ
バルト０．００４％、硫酸亜鉛０．００８％、ホウ酸ナ
トリウム０．００８％、モリブデン酸アンモニウム０．
０２４％、硫酸第一鉄０．０２％を含有する培地（ｐＨ
７．２）１００ｍｌを含む５００ｍｌ容の培養用三角フ
ラスコ４本に接種し、２８℃で７２時間、回転振盪機
（毎分１８０回転）上で培養した。この培養液２ｍｌず
つを上記培地１００ｍｌを含む５００ｍｌ容の三角フラ
スコ１００本に接種し、２８℃で１２０時間、回転振盪
機（毎分１８０回転）上で培養した。培養によって得ら
れた培養液（約１０Ｌ）を濾過し、菌体を得た。

【００５２】菌体にアセトン４Ｌを加え室温で３０分間
撹拌した後、菌体を濾去し、アセトン抽出液を得た。得
られたアセトン抽出液のアセトンを減圧下に留去し、残
渣に脱イオン水５００ｍｌ及びメチルエチルケトン１Ｌ
を加えて抽出する。水層にメチルエチルケトン０．５Ｌ
（×２）を加えて再び抽出し、合わせて約１．６Ｌのメ
チルエチルケトン抽出液を得た。メチルエチルケトン抽
出液を減圧下に濃縮乾固し、残渣にトルエン６５０ｍｌ
及びクロロホルム１０ｍｌを加えてシリカゲルのクロマ
ト塔（３．５×６５ｃｍ）にかけ、トルエン／アセトン
の混合溶媒（２００：１→１：１）で順次溶出した。溶
出した活性分画を減圧下に濃縮乾固し、ＢＥ−２６５５
４Ａ ３８．８ｍｇ、ＢＥ−２６５５４Ｂ複合体（ＢＥ
−２６５５４Ｂ−１、ＢＥ−２６５５４Ｂ−２、ＢＥ−
２６５５４Ｂ−３、ＢＥ−２６５５４Ｂ−４の複合体）
２１７．７ｍｇ、ＢＥ−２６５５４Ｂ複合体とＢＥ−２
６５５４Ｃの混合物１２７ｍｇを得た。更に上記のシリ
カゲルのクロマトグラフィーにおいてアセトン４００ｍ
ｌ及びメタノール１Ｌで溶出することによりＢＥ−２６
５５４Ｄを含む粗物質１２７．８ｍｇを得た。実施例２ 実施例１で得られたＢＥ−２６５５４Ｂ複合体１９ｍｇ
をジメチルホルムアミド０．５ｍｌとテトラヒドロフラ
ン０．５ｍｌに溶解し、ＯＤＳカラム（富士デヴィソン
化学社製、ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ^TM ＯＤＳ、２０×
２５０ｍｍ）にかけ、７５％メタノールを移動相とする
分取高速液体クロマトグラフィーに付し、ＢＥ−２６５
５４Ｂ−１を含む分画、ＢＥ−２６５５４Ｂ−２を含む
分画、ＢＥ−２６５５４Ｂ−３を含む分画及びＢＥ−２
６５５４Ｂ−４を含む分画を得た。

【００５３】ＢＥ−２６５５４Ｂ−１を含む分画を約２
０ｍｌまで減圧下に濃縮し、得られた濃縮液をクロロホ
ルム２０ｍｌを加えて抽出し、クロロホルム抽出液を減
圧下に濃縮乾固してＢＥ−２６５５４Ｂ−１の黄橙色粉
末１．８ｍｇを得た。同様にしてＢＥ−２６５５４Ｂ−
２を含む分画、ＢＥ−２６５５４Ｂ−３を含む分画及び
ＢＥ−２６５５４Ｂ−４を含む分画をそれぞれ約２０ｍ
ｌまで濃縮した後、クロロホルム２０ｍｌを加えて抽出
し、クロロホルム抽出液を濃縮乾固してＢＥ−２６５５
４Ｂ−２の黄橙色粉末１．３ｍｇ、ＢＥ−２６５５４Ｂ
−３の黄橙色粉末１．０ｍｇ及びＢＥ−２６５５４Ｂ−
４の黄橙色粉末１．１ｍｇを得た。実施例３ 実施例１で得られたＢＥ−２６５５４Ｂ複合体とＢＥ−
２６５５４Ｃの混合物６４ｍｇをクロロホルム５０ｍｌ
に溶解し、シリカゲルのクロマト塔（２×４５ｃｍ）に
かけ、クロロホルム／アセトンの混合溶媒（１００：１
→１０：１）で順次溶出して溶出される活性分画を減圧
下に濃縮乾固し、ＢＥ−２６５５４Ｂ複合体１１ｍｇ及
びＢＥ−２６５５４Ｃの黄橙色粉末３４ｍｇを得た。実施例４ 実施例１で得られたＢＥ−２６５５４Ｄを含む粗物質１
２７．８ｍｇをクロロホルム／メタノール混合溶媒２０
ｍｌに溶解し、シリカゲルのクロマト塔（３×４３ｃ
ｍ）にかけ、クロロホルム／メタノール（１００：１→
３：１）で順次溶出して溶出される活性分画を減圧下に
濃縮乾固すると橙色結晶が析出する。残渣にエタノール
３０ｍｌを加え橙色結晶を濾取することによりＢＥ−２
６５５４Ｄ ５．５ｍｇを得た。

【００５４】以下に本発明の化合物の製剤化例を示す
が、本発明の化合物の製剤化は、本製剤化例に限定され
るものではない。製剤化例１ 本物質（ＢＥ−２６５５４類） １０（部） 重質酸化マグネシウム １５ 乳糖 ７５ を均一に混合して３５０μｍ以下の粉末状又は細粒状の
散剤とする。この散剤をカプセル容器に入れてカプセル
剤とした。製剤化例２ 本物質（ＢＥ−２６５５４類） ４５（部） 澱粉 １５ 乳糖 １６ 結晶性セルロース ２１ ポリビニルアルコール ３ 蒸留水 ３０ を均一に混合した後、破砕造粒して乾燥し、次いで篩別
して１４１０〜１７７μｍの大きさの顆粒剤とした。製剤化例３ 製剤化例２と同様の方法で顆粒剤を作った後、この顆粒
剤９６部に対してステアリン酸カルシウム４部を加えて
圧縮成形し、直径１０ｍｍの錠剤を作製した。 製剤化例 ４ 製剤化例２の方法で得られた顆粒剤の９０部に対して結
晶性セルロース１０部及びステアリン酸カルシウム３部
を加えて圧縮成形し、直径８ｍｍの錠剤とした後、これ
にシロップゼラチン、沈降性炭酸カルシウム混合懸濁液
を加えて糖衣錠を作製した。製剤化例５ 本物質（ＢＥ−２６５５４類） ０．６（部） 非イオン系界面活性剤 ２．４ 生理的食塩水 ９７ を加温混合してからアンプルに入れ、滅菌を行って注射
剤を作製した。

【００５５】

【発明の効果】本発明のＢＥ−２６５５４類は、腫瘍細
胞に対して、顕著な増殖阻止作用を示すことから、医薬
の分野で抗腫瘍剤として有用である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 //(Ｃ１２Ｐ 17/06 Ｃ１２Ｒ 1:465） 7804−4Ｂ (Ｃ１２Ｐ 17/16 Ｃ１２Ｒ 1:465） 7804−4Ｂ (72)発明者 須田 寛之 茨城県つくば市大久保３番 萬有製薬株式 会社つくば研究所内

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】一般式 【化１】 ［式中、Ｒは基： 【化２】 を示す］で表される化合物又はその薬学的に許容しうる
   塩。
2. 【請求項２】ストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
   ｅｓ）属に属し、一般式［Ｉ］の化合物を産生する能力
   を有する微生物又はその変異株を培養し、その培養液及
   びその菌体から一般式［Ｉ］の化合物を採取し、要すれ
   ば薬学的に許容しうる塩とすることを特徴とする、一般
   式 【化３】 ［式中、Ｒは基： 【化４】 を示す］で表される化合物又はその薬学的に許容しうる
   塩の製法。
3. 【請求項３】微生物又はその変異株が、ストレプトミセ
   ス・エスピー Ａ２６５５４（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
   ｓ ｓｐ．Ａ２６５５４）である請求項２記載の製法。
4. 【請求項４】一般式 【化５】 ［式中、Ｒは基： 【化６】 を示す］で表される化合物又はその薬学的に許容しうる
   塩を有効成分とする抗腫瘍剤。
5. 【請求項５】一般式［Ｉ］の化合物を産生する能力を有
   するストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属
   に属する微生物又はその変異株。
6. 【請求項６】微生物が、ストレプトミセス・エスピー
   Ａ２６５５４（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ．Ａ２
   ６５５４）である請求項５記載の微生物又はその変異
   株。