JPH06306074A - 抗腫瘍性物質ｂｅ−３２０３０類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【構成】一般式（Ｉ）で表される化合物又はその薬学的
に許容し得る塩、ノカルディア属に属し一般式（Ｉ）の
化合物を産生する能力を有する微生物を培養し、その培
養物から当該化合物を採取することよりなる一般式
（Ｉ）で表される化合物の製造方法、当該化合物又はそ
の薬学的に許容し得る塩を有効成分とする抗腫瘍剤並び
に、一般式（Ｉ）の化合物を産生する能力を有するノカ
ルディア属に属する微生物又はその変異株。 ［式中、Ｒ^１はＨ又はＯＨを；Ｒ^２は基−（ＣＨ_２）_ｐ
ＣＨ_３又は−（ＣＨ_２）_ｑＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ_２）_７ＣＨ
_３を；ｐは１０あるいは１２を；ｑは３あるいは５を；
それぞれ示す］ 【効果】一般式（Ｉ）で表されるＢＥ−３２０３０類化
合物は、マウス及びヒトの癌細胞に対し、強い増殖抑制
効果を示すことから、医薬の分野で癌の治療剤として有
用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は医薬の分野で有用であ
り、さらに詳細には腫瘍細胞の増殖を阻害し、制癌効果
を発揮する新規化合物、その製法及びその用途並びに新
規微生物ノカルディア エスピー（Ｎｏｃａｒｄｉａ
ｓｐ．）に関する。

【０００２】

【従来の技術】癌化学療法の分野では、すでに多数の化
合物が医薬品として実用化されている。しかしながら、
さまざまな種類の腫瘍に対してその効果は必ずしも充分
ではなく、またこれらの薬剤に対する腫瘍細胞の耐性の
問題も臨床上の使用法を複雑にしている［第４７回 日
本癌学会総会記事、１２頁〜１５頁（１９８８年）参
照］。このような状況下、癌治療の分野においては常に
新規制癌物質の開発が求められている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】既存の制癌物質が充分
に効果を発揮できない種類の癌に対しても優れた制癌活
性を有する化合物を見出すことが本発明が解決しようと
する課題である。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決すべく、抗腫瘍活性を有する物質について微生物
代謝産物を広くスクリーニングした結果、後記一般式で
表される化合物が優れた抗腫瘍作用を示すことを見出し
て本発明を完成した。

【０００５】即ち、本発明は、新規な一般式

【０００６】

【化４】 ［式中、Ｒ¹は水素原子又は水酸基を示し、Ｒ²は基： （ＣＨ₂）₁₀ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₁₂ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₅ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₁₀ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₃ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇ＣＨ₃ を示す］で表される化合物又はその薬学的に許容しうる
塩、その製法及びその用途並びに一般式［Ｉ］の化合物
を産生する能力を有するノカルディア（Ｎｏｃａｒｄｉ
ａ）属に属する微生物に関するものである。

【０００７】次に、本明細書で言及される各種の用語及
び定義について説明する。

【０００８】一般式［Ｉ］の化合物は、その抗腫瘍性効
果及び産生菌株（Ａ３２０３０株）に因んで、抗腫瘍性
物質ＢＥ−３２０３０類と命名された。抗腫瘍性物質Ｂ
Ｅ−３２０３０類とは、具体的には、例えば下記のＢＥ
−３２０３０Ａ、ＢＥ−３２０３０Ｂ、ＢＥ−３２０３
０Ｃ、ＢＥ−３２０３０Ｄ及びＢＥ−３２０３０Ｅ等が
挙げられる。

【０００９】即ち、一般式［Ｉ］において、Ｒ¹が水素
原子を示し、Ｒ²が基：（ＣＨ₂）₁₀ＣＨ₃を示す化合物
は、ＢＥ−３２０３０Ａであり、Ｒ¹が水素原子を示
し、Ｒ²が基：（ＣＨ₂）₁₂ＣＨ₃を示す化合物は、ＢＥ
−３２０３０Ｂであり、Ｒ¹が水素原子を示し、Ｒ²が
基：（ＣＨ₂）₅ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇ＣＨ₃を示す化合
物は、ＢＥ−３２０３０Ｃであり、Ｒ¹が水酸基を示
し、Ｒ²が基：（ＣＨ₂）₁₀ＣＨ₃を示す化合物は、ＢＥ
−３２０３０Ｄであり、Ｒ¹が水酸基を示し、Ｒ²が基：
（ＣＨ₂）₃ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇ＣＨ₃を示す化合物
は、ＢＥ−３２０３０Ｅである。

【００１０】以下に、本発明化合物の理化学的性状を示
す。

【００１１】性状： ＢＥ−３２０３０Ａ 無色飴状 ＢＥ−３２０３０Ｂ 無色飴状 ＢＥ−３２０３０Ｃ 無色飴状 ＢＥ−３２０３０Ｄ 無色飴状 ＢＥ−３２０３０Ｅ 無色飴状 分子式： ＢＥ−３２０３０Ａ Ｃ₃₉Ｈ₆₁Ｏ₁₀Ｎ₅ ＢＥ−３２０３０Ｂ Ｃ₄₁Ｈ₆₅Ｏ₁₀Ｎ₅ ＢＥ−３２０３０Ｃ Ｃ₄₃Ｈ₆₇Ｏ₁₀Ｎ₅ ＢＥ−３２０３０Ｄ Ｃ₃₉Ｈ₆₁Ｏ₁₁Ｎ₅ ＢＥ−３２０３０Ｅ Ｃ₄₁Ｈ₆₃Ｏ₁₁Ｎ₅ 比旋光度： ＢＥ−３２０３０Ａ ［α］²⁰ _D −４０．３（Ｃ
１．００ ＣＨＣｌ₃） ＢＥ−３２０３０Ｂ ［α］²⁰ _D −３７．４（Ｃ
１．００ ＣＨＣｌ₃） ＢＥ−３２０３０Ｃ ［α］²⁰ _D −３８．９（Ｃ
１．００ ＣＨＣｌ₃） ＢＥ−３２０３０Ｄ ［α］²⁰ _D −２１．６（Ｃ
１．００ ＣＨＣｌ₃） ＢＥ−３２０３０Ｅ ［α］²⁰ _D −２１．０（Ｃ
１．００ ＣＨＣｌ₃） マススペクトル：高分解能ＦＡＢ−ＭＳ ＢＥ−３２０３０Ａ ｍ／ｚ ７６０．４４９８［Ｍ
＋Ｈ］⁺ ＢＥ−３２０３０Ｂ ｍ／ｚ ７８８．４８０７［Ｍ
＋Ｈ］⁺ ＢＥ−３２０３０Ｃ ｍ／ｚ ８１４．４９８６［Ｍ
＋Ｈ］⁺ ＢＥ−３２０３０Ｄ ｍ／ｚ ７７６．４４３７［Ｍ
＋Ｈ］⁺ ＢＥ−３２０３０Ｅ ｍ／ｚ ８０２．４５９８［Ｍ
＋Ｈ］⁺ ＵＶスペクトル：λ［ＭｅＯＨ，ｍａｘ，ｎｍ（ε）］ ＢＥ−３２０３０Ａ ２４２（１１０００），２４８
（１１０００），２５８（ｓｈ，６３００），３０５
（４３００） ＢＥ−３２０３０Ｂ ２４２（９７００），２４８
（１００００），２５８（ｓｈ，５４００），３０５
（３８００） ＢＥ−３２０３０Ｃ ２４２（１０７００），２４８
（１１０００），２５８（ｓｈ，６２００），３０５
（４３００） ＢＥ−３２０３０Ｄ ２５０（１００００），２５６
（１００００），３１５（２６００） ＢＥ−３２０３０Ｅ ２５０（９８００），２５６
（９３００），３１５（２４００） ＩＲスペクトル（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）： ＢＥ−３２０３０Ａ ３３０３，３１９７，２９２
７，２８５６，１７３５，１６４１，１５２５，１４９
２，１４５６，１３６５，１３０７，１２５７，１２２
４，１０６４，９６８，７５６ ＢＥ−３２０３０Ｂ ３３０３，３１８０，２９２
５，２８５６，１７３５，１６４１，１５２５，１４９
２，１４５６，１３６５，１３０７，１２５９，１２２
４，１０６６，９６８，７５６ ＢＥ−３２０３０Ｃ ３３１１，２９２７，２８５
８，１７３７，１６４１，１５２９，１４９６，１４５
２，１３６３，１３０７，１２５７，１２２０，１１２
８，１０６４，９７１，７５４ ＢＥ−３２０３０Ｄ ３３０１，２９２７，２８５
６，１７３３，１６３９，１５２５，１４７３，１３７
８，１３５７，１３１７，１２６３，１２１６，１１２
８，１０６６，９９３，７４４ ＢＥ−３２０３０Ｅ ３３０１，２９２７，２８５
６，１７３５，１６３９，１５２９，１４８３，１３７
８，１３５７，１３１７，１２５９，１２１６，１１２
８，１０６６，９９１，７４２¹ Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＤＭＳＯ−ｄ₆，δｐｐｍ）： ＢＥ−３２０３０Ａ １１．５（１Ｈ，ｓ），９．６
８（１Ｈ，ｓ），９．４６（１Ｈ，ｓ），８．２９（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），８．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
７．０Ｈｚ），７．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈ
ｚ），７．４５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），６．９
９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），６．９２（１Ｈ，
ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），５．１１（１Ｈ，ｍ），４．６
４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），４．４６（１Ｈ，
ｍ），４．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），４．１
４（１Ｈ，ｍ），３．８５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．
９，１１．０Ｈｚ），３．４７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１
５．９，４．５Ｈｚ），３．４１（２Ｈ，ｍ），２．４
９（１Ｈ，溶媒のピークに重なる），２．４３（１Ｈ，
ｄｄ，Ｊ＝１４．３，７．６Ｈｚ），２．２６（２Ｈ，
ｍ），１．８０（１Ｈ，ｍ），１．６０−１．７６（５
Ｈ，ｍ），１．５２（３Ｈ，ｓ），１．３４−１．５２
（６Ｈ，ｍ），１．２１（１８Ｈ，ｍ），１．１６（３
Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），０．８３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝
６．８Ｈｚ） ＢＥ−３２０３０Ｂ １１．５（１Ｈ，ｂｒ ｓ），
９．６８（１Ｈ，ｂｒ ｓ），９．４６（１Ｈ，ｂｒ
ｓ），８．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），８．０
８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．６２（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．４５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．
８Ｈｚ），６．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），
６．９２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），５．１１（１
Ｈ，ｍ），４．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），
４．４６（１Ｈ，ｍ），４．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．
６Ｈｚ），４．１４（１Ｈ，ｍ），３．８５（１Ｈ，ｄ
ｄ，Ｊ＝１０．６，１５．６Ｈｚ），３．４７（１Ｈ，
ｄｄ，Ｊ＝４．５，１５．６Ｈｚ），３．４０（２Ｈ，
ｍ），２．４９（１Ｈ，溶媒のピークに重なる），２．
４３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．３，１４．３Ｈｚ），２．
２６（２Ｈ，ｍ），１．８０（１Ｈ，ｍ），１．６０−
１．７６（５Ｈ，ｍ），１．５２（３Ｈ，ｓ），１．３
０−１．５３（６Ｈ，ｍ），１．２２（２２Ｈ，ｍ），
１．１６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），０．８４（３
Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）， ＢＥ−３２０３０Ｃ １１．５（１Ｈ，ｓ），９．６
８（１Ｈ，ｓ），９．４６（１Ｈ，ｓ），８．２９（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），８．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
７．４Ｈｚ），７．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈ
ｚ），７．４４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），６．９
９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），６．９２（１Ｈ，
ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），５．３０（２Ｈ，ｍ），５．１
２（１Ｈ，ｍ），４．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈ
ｚ），４．４６（１Ｈ，ｍ），４．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝８．５Ｈｚ），４．１４（１Ｈ，ｍ），３．８４（１
Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．９，１１．６Ｈｚ），３．４７
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．９，４．５Ｈｚ），３．４１
（２Ｈ，ｍ），２．４９（１Ｈ，溶媒のピークに重な
る），２．４２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４．３，７．３Ｈ
ｚ），２．２６（２Ｈ，ｍ），１．９５（４Ｈ，ｍ），
１．８０（１Ｈ，ｍ），１．６０−１．７６（５Ｈ，
ｍ），１．５２（３Ｈ，ｓ），１．３０−１．５２（６
Ｈ，ｍ），１．２１（１８Ｈ，ｍ），１．１５（３Ｈ，
ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），０．８３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．
８Ｈｚ） ＢＥ−３２０３０Ｄ １１．５（１Ｈ，ｂｒ ｓ），
９．６８（１Ｈ，ｓ），９．４７（１Ｈ，ｓ），９．１
７（１Ｈ，ｓ），８．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈ
ｚ），８．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．０
７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８，１．５Ｈｚ），６．９６
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８，１．５Ｈｚ），６．７２
（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），５．１１（１Ｈ，
ｍ），４．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），４．４
５（１Ｈ，ｍ），４．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈ
ｚ），４．１４（１Ｈ，ｍ），３．８５（１Ｈ，ｄｄ，
Ｊ＝１５．５，１１．６Ｈｚ），３．４７（１Ｈ，ｄ
ｄ，Ｊ＝１５．５，４．５Ｈｚ），３．４２（２Ｈ，
ｍ），２．４９（１Ｈ，溶媒のピークに重なる），２．
４３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４．０，７．３Ｈｚ），２．
２７（２Ｈ，ｍ），１．８１（１Ｈ，ｍ），１．６０−
１．７７（５Ｈ，ｍ），１．５１（３Ｈ，ｓ），１．３
０−１．５１（６Ｈ，ｍ），１．２１（１８Ｈ，ｍ），
１．１６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），０．８４（３
Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ） ＢＥ−３２０３０Ｅ １１．５（１Ｈ，ｂｒ ｓ），
９．６８（１Ｈ，ｓ），９．４８（１Ｈ，ｓ），９．１
７（１Ｈ，ｓ），８．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈ
ｚ），８．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．０
７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８，１．２Ｈｚ），６．９５
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８，１．２Ｈｚ），６．７２
（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），５．３１（２Ｈ，
ｍ），５．１２（１Ｈ，ｍ），４．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝８．８Ｈｚ），４．４６（１Ｈ，ｍ），４．２６（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），４．１４（１Ｈ，ｍ），
３．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．８，１１．９Ｈ
ｚ），３．４７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．８，４．５Ｈ
ｚ），３．４１（２Ｈ，ｍ），２．４９（１Ｈ，溶媒の
ピークに重なる），２．４３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４．
３，７．６Ｈｚ），２．２６（２Ｈ，ｍ），１．９６
（４Ｈ，ｍ），１．８０（１Ｈ，ｍ），１．６０−１．
７６（５Ｈ，ｍ），１．５１（３Ｈ，ｓ），１．３０−
１．５１（６Ｈ，ｍ），１．２２（１４Ｈ，ｍ），１．
１６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），０．８３（３Ｈ，
ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトル（ＤＭＳＯ−ｄ₆，δｐｐ
ｍ）： ＢＥ−３２０３０Ａ １７２．８（ｓ），１７２．６
（ｓ），１７０．９（ｓ），１６８．７（ｓ），１６
８．０（ｓ），１６４．０（ｓ），１５９．０（ｓ），
１３３．９（ｄ），１２８．０（ｄ），１１８．９
（ｄ），１１６．６（ｄ），１１０．０（ｓ），７４．
６（ｔ），７３．８（ｓ），６８．６（ｄ），５２．３
（ｔ），５２．３（ｄ），５０．７（ｄ），４６．８
（ｔ），４１．２（ｔ），３１．６（ｔ），３１．３
（ｔ），３０．５（ｔ），２９．８（ｔ），２８．７−
２８．９×６（ｔ），２７．０（ｔ），２５．８
（ｑ），２５．８（ｔ），２５．５（ｔ），２４．２
（ｔ），２２．６（ｔ），２２．１（ｔ），１９．３
（ｑ），１３．９（ｑ） ＢＥ−３２０３０Ｂ １７２．７（ｓ），１７２．６
（ｓ），１７０．９（ｓ），１６８．７（ｓ），１６
８．０（ｓ），１６４．０（ｓ），１５９．０（ｓ），
１３３．９（ｄ），１２８．０（ｄ），１１８．９
（ｄ），１１６．６（ｄ），１１０．０（ｓ），７４．
６（ｔ），７３．８（ｓ），６８．６（ｄ），５２．３
（ｔ），５２．３（ｄ），５０．７（ｄ），４６．８
（ｔ），４１．３（ｔ），３１．６（ｔ），３１．２
（ｔ），３０．５（ｔ），２９．８（ｔ），２８．７−
２９．０×８（ｔ），２７．０（ｔ），２５．８
（ｑ），２５．８（ｔ），２５．５（ｔ），２４．２
（ｔ），２２．６（ｔ），２２．０（ｔ），１９．３
（ｑ），１３．９（ｑ） ＢＥ−３２０３０Ｃ １７２．８（ｓ），１７２．６
（ｓ），１７０．９（ｓ），１６８．７（ｓ），１６
８．０（ｓ），１６４．０（ｓ），１５９．０（ｓ），
１３３．９（ｄ），１２９．６（ｄ），１２９．５
（ｄ），１２８．０（ｄ），１１８．９（ｄ），１１
６．６（ｄ），１１０．０（ｓ），７４．６（ｔ），７
３．８（ｓ），６８．６（ｄ），５２．３（ｔ），５
２．３（ｄ），５０．７（ｄ），４６．８（ｔ），４
１．３（ｔ），３１．６（ｔ），３１．２（ｔ），３
０．５（ｔ），２９．８（ｔ），２９．１（ｔ），２
９．０（ｔ），２８．８（ｔ），２８．６×２（ｔ），
２８．４（ｔ），２７．０（ｔ），２６．６（ｔ），２
６．５（ｔ），２５．８（ｑ），２５．８（ｔ），２
５．５（ｔ），２４．２（ｔ），２２．６（ｔ），２
２．０（ｔ），１９．３（ｑ），１３．９（ｑ） ＢＥ−３２０３０Ｄ １７２．８（ｓ），１７２．６
（ｓ），１７０．９（ｓ），１６８．７（ｓ），１６
７．９（ｓ），１６４．６（ｓ），１４８．１（ｓ），
１４５．７（ｓ），１１９．３（ｄ），１１８．６
（ｄ），１１７．９（ｄ），１１０．３（ｓ），７４．
６（ｔ），７３．６（ｓ），６８．６（ｄ），５２．２
（ｔ），５２．２（ｄ），５０．７（ｄ），４６．８
（ｔ），４１．２（ｔ），３１．６（ｔ），３１．２
（ｔ），３０．５（ｔ），２９．８（ｔ），２８．７−
２８．９×６（ｔ），２６．９（ｔ），２５．８
（ｑ），２５．８（ｔ），２５．５（ｔ），２４．２
（ｔ），２２．５（ｔ），２２．０（ｔ），１９．３
（ｑ），１３．９（ｑ） ＢＥ−３２０３０Ｅ １７２．８（ｓ），１７２．６
（ｓ），１７０．９（ｓ），１６８．７（ｓ），１６
８．０（ｓ），１６４．６（ｓ），１４８．１（ｓ），
１４５．７（ｓ），１３０．１（ｄ），１２９．１
（ｄ），１１９．４（ｄ），１１８．６（ｄ），１１
７．９（ｄ），１１０．３（ｓ），７４．７（ｔ），７
３．７（ｓ），６８．６（ｄ），５２．３（ｔ），５
２．３（ｓ），５０．７（ｄ），４６．８（ｔ），４
１．２（ｔ），３１．２（ｔ），３１．１（ｔ），３
０．５（ｔ），２９．９（ｔ），２８．６−２８．９×
４（ｔ），２６．９（ｔ），２６．６（ｔ），２６．３
（ｔ），２５．８（ｑ），２５．８（ｔ），２５．５
（ｔ），２４．２（ｔ），２２．５（ｔ），２２．０
（ｔ），１９．３（ｑ），１３．９（ｑ） 溶解性（ＢＥ−３２０３０Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及びＥに共
通）：メタノール、クロロホルム、ジメチルスルホキシ
ド等の有機溶媒に溶け易く、水に溶けにくい。

【００１２】酸性、中性、塩基性物質の区別： ＢＥ−３２０３０Ａ 酸性物質 ＢＥ−３２０３０Ｂ 酸性物質 ＢＥ−３２０３０Ｃ 酸性物質 ＢＥ−３２０３０Ｄ 酸性物質 ＢＥ−３２０３０Ｅ 酸性物質 Ｒｆ値（メルク社製 キーゼルゲル６０使用，展開溶
媒：クロロホルム／メタノール（１０：１））： ＢＥ−３２０３０Ａ ０．５９ ＢＥ−３２０３０Ｂ ０．５２ ＢＥ−３２０３０Ｃ ０．５１ ＢＥ−３２０３０Ｄ ０．３４ ＢＥ−３２０３０Ｅ ０．３４ 呈色反応（ＢＥ−３２０３０Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及びＥに共
通）： 硫酸反応 陽性 塩化鉄（ＩＩＩ）反応 陽性ＢＥ−３２０３０類の生物学的活性 抗腫瘍性物質ＢＥ−３２０３０類のマウス実験腫瘍細胞
に対する増殖阻止作用を決定するため、ｉｎ ｖｉｔｒ
ｏで試験を行った。Ｐ３８８腫瘍細胞に対するｉｎ ｖ
ｉｔｒｏの抗腫瘍作用試験は、ＢＥ−３２０３０類をジ
メチルスルホキシドに溶解した後、ＣＭＦ−ＰＢＳ（Ｃ
ａ²⁺，Ｍｇ²⁺ ｆｒｅｅ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆ
ｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ）で逐次希釈し、３．０×１
０³個の腫瘍細胞を含む細胞培養培地（牛胎児血清１０
％含有ＲＰＭＩ−１６４０培地）１００μｌに対し１０
μｌを加えた。３７℃で７２時間、５％ＣＯ₂下で培養
した後、ＭＴＴ測定法により、対照群と比較した。その
結果、ＢＥ−３２０３０類はＰ３８８腫瘍細胞に対し、
強い増殖阻止活性を示し、その腫瘍細胞の増殖を５０％
阻止する濃度は第１表の通りであった。ＢＥ−３２０３
０類のヒト癌細胞に対する増殖阻止作用を決定するた
め、ｉｎ ｖｉｔｒｏで試験を行った。細胞は、ヒト大
腸癌細胞ＤＬＤ−１、ヒト肺癌細胞ＰＣ−１３及びヒト
胃癌細胞ＭＫＮ−４５を使用した。細胞培養用培地は両
癌細胞共に牛胎児血清１０％含有ＲＰＭＩ−１６４０培
地を用いた。ＢＥ−３２０３０類をまずジメチルスルホ
キシドに溶解し、次にＰＢＳ（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂ
ｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ）で逐次希釈して検液と
した。癌細胞増殖阻害の検定は、３×１０³個の癌細胞
を含む細胞培養用の培地１００μｌを９６穴のマイクロ
プレートに分注し、３７℃で２４時間、５％ＣＯ₂下で
培養した後、上記検液１０μｌを加え、３７℃で更に７
２時間培養した後、細胞を５０％トリクロロ酢酸で固定
し、０．４％スルホローダミンＢで染色した。染色され
た細胞から１０ｍＭトリス液を用いて色素を抽出し、４
５０ｎｍを対照波長として５４０ｎｍに於ける吸光度を
測定して対照群と比較した。

【００１３】その結果、ＢＥ−３２０３０類はＤＬＤ−
１、ＰＣ−１３及びＭＫＮ−４５癌細胞の増殖を強く阻
止し、そのＩＣ₅₀は第１表の通りであった。

【００１４】

【表１】 上述したようにＢＥ−３２０３０類は、、マウス及びヒ
トの癌細胞に対し顕著な増殖阻止作用を示す。従って、
本発明はヒトをはじめとする哺乳動物の腫瘍の治療剤と
して有用である。

【００１５】ＢＥ−３２０３０類の製造法について説明
する。

【００１６】本発明者らはＢＥ−３２０３０を、沖縄県
石垣島の草地より分離採取されたノカルディア属に属す
る放線菌の培養物より単離した。

【００１７】以下に、この生産菌の菌学的性状を述べ
る。 １．形態 Ａ３２０３０株は、単純分岐する基生菌糸と気菌糸を形
成し、基生菌糸には分断が、気菌糸上には胞子の連鎖
（１０個以上）が認められた。胞子は表面が平滑で大き
さが１．３×０．７〜０．９×０．５μｍ位であった。
また、胞子のう、鞭毛胞子及び菌核等の特殊な器官は観
察されなかった。 ２．各種寒天平板培地における培養性状 各種寒天平板培地において、２８℃、１４日間培養した
結果を第２表に示す。

【００１８】

【表２】 ３．生育温度（イースト・麦芽寒天培地、１４日間培
養） １０℃： 生育せず １３℃： 生育及び気菌糸形成不良 １７℃： 生育及び気菌糸形成良好 ２０℃： 生育及び気菌糸形成非常に良好 ２８℃： 生育及び気菌糸形成非常に良好 ３３℃： 生育及び気菌糸形成非常に良好 ３８℃： 生育良好、気菌糸形成僅少 ４３℃： 生育せず ４．生理学的諸性質 （１）ゼラチンの液化 陽性 （グルコース・ペプトン・ゼラチン培地） （２）スターチの加水分解 陰性 （スターチ・無機塩寒天培地） （３）脱脂粉乳の凝固 陰性 （スキムミルク培地） （４）脱脂粉乳のペプトン化 陰性 （スキムミルク培地） （５）メラニン様色素の生成 陰性 （６）食塩耐性 食塩含有量７％以下で生育 （イースト・麦芽寒天培地） ５．炭素源の利用能 プリドハム・ゴドリーブ寒天を基礎培地とし、下記各種
糖を添加して２８℃１４日間培養した。その結果を第３
表に示す。

【００１９】

【表３】 ６．菌体成分 細胞壁からはｍｅｓｏ−ジアミノピメリン酸、アラビノ
ース及びガラクトースが検出されたが、グリシンは認め
られず、細胞壁タイプはＩＶ型であることが示唆され
た。全菌体主要糖成分はアラビノース及びガラクトース
が検出され、糖パターンはＡ型、リン脂質タイプはＰＩ
Ｉであった。また、ミコール酸が検出され、主要メナキ
ノンはＭＫ−８（Ｈ₄）であり、菌体脂肪酸組成は直
鎖、不飽和及び１０−メチル脂肪酸が認められ、直鎖
モノ不飽和型であった。 ７．分解能

【００２０】

【表４】 ８．酸産生能

【００２１】

【表５】 ９．有機酸塩利用能

【００２２】

【表６】 １０．窒素利用能

【００２３】

【表７】 １１．耐性

【００２４】

【表８】 １２．５０℃、８時間における生存能 ＋ 以上の菌学的諸性質より、Ａ３２０３０株は放線菌ノカ
ルディア属に属すると考えられる。従って、Ａ３２０３
０株をノカルディア エスピー Ａ３２０３０（Ｎｏｃ
ａｒｄｉａ ｓｐ．Ａ３２０３０）と称することとし
た。

【００２５】なお、本菌株は通商産業省工業技術院微生
物工業技術研究所に寄託されており、その微工研受託番
号は微工研菌寄第１３３９５号（ＦＥＲＭ Ｐ−１３３
９５）である。

【００２６】本発明で使用する抗腫瘍性物質ＢＥ−３２
０３０類を産生する微生物の変異株は、例えばＸ線若し
くは紫外線等の照射処理、例えばナイトロジェン・マス
タード、アザセリン、亜硝酸、２−アミノプリン若しく
はＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン
（ＮＴＧ）等の変異誘起剤による処理、ファージ接触、
形質転換、形質導入又は接合等の通常用いられる菌種変
換処理方法によりＢＥ−３２０３０類産生菌を変異させ
た微生物である。

【００２７】本発明のＢＥ−３２０３０類を製造するに
あたり、ＢＥ−３２０３０類の生産菌株Ａ３２０３０株
を栄養源含有培地に接種して好気的に発育させることに
より、ＢＥ−３２０３０類を含む培養物が得られる。栄
養源としては、放線菌の栄養源として公知のものが使用
できる。例えば、炭素源としては、市販されているブド
ウ糖、グリセリン、麦芽糖、デンプン、庶糖、糖蜜又は
デキストリンなどが単独又は混合物として用いられる。
窒素源としては、市販されている大豆粉、コーングルテ
ンミール、コーンスティープリカー、肉エキス、酵母エ
キス、綿実粉、ペプトン、小麦胚芽、魚粉、無機アンモ
ニウム塩又は硝酸ナトリウムなどが単独又は混合物とし
て用いられる。無機塩としては、市販されている炭酸カ
ルシウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸マグネ
シウム又は各種リン酸塩などを使用することができる。
その他必要に応じて、鉄、マンガン、モリブデン、銅又
は亜鉛などの重金属塩を微量添加してもよい。また、発
泡の著しい時には、消泡剤として、例えば大豆油又は亜
麻仁油等の植物油、オクタデカノール等の高級アルコー
ル類、各種シリコン化合物等を適宜添加しても良い。こ
れらのもの以外でも、該生産菌が利用し、ＢＥ−３２０
３０類の生産に役立つもの例えば３−（Ｎ−モルホリ
ノ）プロパンスルホン酸又はホウ酸ナトリウムなどであ
れば、いずれも使用することができる。

【００２８】培養方法としては、一般の微生物代謝産物
の生産方法と同様に行えばよく、固体培養でも液体培養
でもよい。液体培養の場合は、静置培養、撹拌培養、振
盪培養又は通気培養などのいずれを実施してもよいが、
特に振盪培養又は深部通気撹拌培養が好ましい。培養温
度は２０℃〜３７℃が適当であるが、好ましくは２５℃
〜３０℃である。好ましい培地のｐＨは４〜８の範囲
で、培養時間は４８時間〜１４４時間、好ましくは７２
時間〜１２０時間である。

【００２９】培養物から目的とするＢＥ−３２０３０類
を採取するには、微生物の生産する代謝物の培養物から
採取するのに通常使用される分離手段が適宜利用され
る。ＢＥ−３２０３０類は培養濾液中及び菌体中に存在
するので、培養濾液又は菌体より通常の分離手段、例え
ば溶媒抽出法、イオン交換樹脂法又は吸着若しくは分配
クロマトグラフィー法及びゲル濾過法等を単独又は組合
せて行うことにより精製できる。また高速液体クロマト
グラフィーや薄層クロマトグラフィーなども抽出精製に
利用可能である。

【００３０】本発明化合物を抗腫瘍剤として使用する際
に、本発明の化合物は薬学的に許容しうる塩としても使
用される。薬学的に許容しうる塩の典型例としては、例
えば苛性ソーダ、苛性カリ等の無機塩基との塩を挙げる
ことができる。

【００３１】本発明化合物を抗腫瘍剤として使用する際
の投与形態としては各種の形態を選択でき、例えば錠
剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤若しくは液剤等の経口
剤、又は例えば溶液若しくは懸濁液等の殺菌した液状の
非経口剤が挙げられる。

【００３２】固体の製剤は、そのまま錠剤、カプセル
剤、顆粒剤又は粉末の形態として製造することもできる
が、適当な添加物を使用して製造することもできる。そ
のような添加物としては、例えば乳糖若しくはブドウ糖
等の糖類、例えばトウモロコシ、小麦若しくは米等の澱
粉類、例えばステアリン酸等の脂肪酸、例えばメタケイ
酸アルミン酸マグネシウム若しくは無水リン酸カルシウ
ム等の無機塩、例えばポリビニルピロリドン若しくはポ
リアルキレングリコール等の合成高分子、例えばステア
リン酸カルシウム若しくはステアリン酸マグネシウム等
の脂肪酸塩、例えばステアリルアルコール若しくはベン
ジルアルコール等のアルコール類、例えばメチルセルロ
ース、カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース
若しくはヒドロキシプロピルメチルセルロース等の合成
セルロース誘導体、その他、水、ゼラチン、タルク、植
物油、アラビアゴム等通常用いられる添加物が挙げられ
る。

【００３３】これらの錠剤、カプセル剤、顆粒剤及び粉
末等の固形製剤は一般的には０．１〜１００重量％、好
ましくは５〜１００重量％の有効成分を含む。

【００３４】液状製剤は、水、アルコール類又は例えば
大豆油、ピーナツ油若しくはゴマ油等の植物由来の油等
液状製剤において通常用いられる適当な添加物を使用
し、懸濁液、シロップ剤若しくは注射剤等の形態として
製造される。

【００３５】特に、非経口的に筋肉内注射、静脈内注射
又は皮下注射で投与する場合の適当な溶剤としては、例
えば注射用蒸留水、塩酸リドカイン水溶液（筋肉内注射
用）、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、エタノール、静脈
内注射用液体（例えばクエン酸及びクエン酸ナトリウム
等の水溶液）若しくは電解質溶液（点滴静注及び静脈内
注射用）等、又はこれらの混合溶液が挙げられる。

【００３６】又、これらの注射剤は予め溶解したものの
他、粉末のまま或いは適当な添加物を加えたものを用時
溶解する形態もとり得る。これらの注射液は、通常０．
１〜１０重量％、好ましくは１〜５重量％の有効成分を
含む。又、経口投与の懸濁剤又はシロップ剤等の液剤
は、０．５〜１０重量％の有効成分を含む。

【００３７】本発明の化合物の実際に好ましい投与量
は、使用される化合物の種類、配合された組成物の種
類、適用頻度及び治療すべき特定部位、宿主及び腫瘍に
よって変化することに注意すべきである。例えば、一日
当りの成人一人当りの投与量は、経口投与の場合、１０
ないし５００ｍｇであり、非経口投与、好ましくは静脈
内注射の場合、１日当り１０ないし１００ｍｇである。
なお、投与回数は投与方法及び症状により異なるが、１
回ないし５回である。

【００３８】

【実施例】以下に実施例を挙げて本発明をより具体的に
説明するが、本発明はこれら実施例のみに限定されるも
のではない。 実施例１ 斜面寒天培地に培養したＡ３２０３０株をグルコース
０．５％、デキストリン３．０％、コハク酸ナトリウム
０．２％、グルタミン酸ナトリウム１．０％、酵母エキ
ス０．１％、硫酸アンモニウム０．０５％、硝酸ナトリ
ウム０．１％、硫酸マグネシウム０．０５％、塩化カリ
ウム０．０５％、リン酸水素二カリウム０．１％、炭酸
カルシウム０．３％、塩化カルシウム０．０００２％、
硫酸第一鉄０．００００２％、塩化第二銅０．００００
０４％、塩化マンガン０．０００００４％、塩化コバル
ト０．０００００４％、硫酸亜鉛０．０００００８％、
モリブデン酸アンモニウム０．００００２４％からなる
培地（ｐＨ７．２）１００ｍｌを含む５００ｍｌ容の培
養用三角フラスコ３本に接種し、２８℃で７２時間、回
転振盪機（毎分１８０回転）上で培養した。この培養液
２ｍｌずつを上記培地１００ｍｌを含む５００ｍｌ容の
培養用三角フラスコ１００本に接種し，２８℃で１２０
時間、回転振盪機（毎分１８０回転）上で培養した。

【００３９】培養によって得られた培養液（約１０Ｌ）
を濾過し、菌体を得た。菌体にメタノール２Ｌを加え、
室温で３０分間攪拌した後、菌体を濾去し、メタノール
抽出液を得た。メタノール抽出を再度行い、合わせて約
４Ｌのメタノール抽出液を減圧下に約５００ｍｌに濃縮
した。この濃縮液を酢酸エチル１Ｌを３回に分けて用い
て抽出し、得られた酢酸エチル抽出液約３Ｌを減圧濃縮
乾固することにより、ＢＥ−３２０３０類を含む粗物質
２．５４ｇを得た。この粗物質にメタノール１０ｍｌを
加えて沈殿物を濾去した後、このメタノール溶液をセフ
ァデックスＬＨ−２０のカラムクロマトグラフィー
（２．５×８９ｃｍ，ファルマシア社製）にかけ、メタ
ノールを用いて溶出を行い、ＢＥ−３２０３０類を含む
分画を得た。次にこの分画をコスモシール７５Ｃ₁₈−Ｏ
ＰＮ^TMのカラムクロマトグラフィー（３．０×２９ｃ
ｍ，ナカライテスク社製）にかけ、メタノール／水 ８
０：２０（１Ｌ）、８５：１５（１Ｌ）、９０：１０
（１Ｌ）で順次溶出して、ＢＥ−３２０３０Ａを含む分
画、ＢＥ−３２０３０Ｂを含む分画、ＢＥ−３２０３０
Ｃを含む分画、ＢＥ−３２０３０Ｄ及びＥを含む分画を
得た。ＢＥ−３２０３０Ｂを含む分画（約７８０．３ｍ
ｇ）をメタノール８ｍｌに溶解し、ＯＤＳカラム（Ｃｈ
ｒｏｍａｔｏｒｅｘ^TM−ＯＤＳ，２０φ×２５０ｍｍ）
を用い、移動相として９５％メタノールを毎分１０ｍｌ
で送液して分取高速液体クロマトグラフィーを行った。
その結果、得られたＢＥ−３２０３０Ｂを含む分画を減
圧濃縮乾固して無色飴状のＢＥ−３２０３０Ｂ ３８１
ｍｇを得た。ＢＥ−３２０３０Ａ、ＢＥ−３２０３０
Ｃ、ＢＥ−３２０３０Ｄ、ＢＥ−３２０３０Ｅの精製も
ＢＥ−３２０３０Ｂと同様の操作を行い、ＢＥ−３２０
３０Ａを含む分画（１６９ｍｇ）からＢＥ−３２０３０
Ａを１３０ｍｇ、ＢＥ−３２０３０Ｃを含む分画（１９
４ｍｇ）からＢＥ−３２０３０Ｃを１２６ｍｇ、ＢＥ−
３２０３０Ｄ及びＥを含む分画（１８１．４ｍｇ）から
ＢＥ−３２０３０Ｄを９１ｍｇ、ＢＥ−３２０３０Ｅを
８２ｍｇ得た。

【００４０】以下に、本発明の化合物の製剤例を示す
が、本発明の化合物の製剤は本製剤例に限定されるもの
ではない。 製剤例１ 本物質（ＢＥ−３２０３０Ｂ） １０（部） 重質酸化マグネシウム １５ 乳糖 ７５ を均一に混合して、３５０μｍ以下の粉末状又は細粒状
の散剤とする。この散剤をカプセル容器に入れてカプセ
ル剤とした。 製剤例２ 本物質（ＢＥ−３２０３０Ｂ） ４５（部） 澱粉 １５ 乳糖 １６ 結晶性セルロース ２１ ポリビニルアルコール ３ 蒸留水 ３０ を均一に混合した後、破砕造粒して乾燥し、次いで篩別
して直径１４１０〜１７７μｍの大きさの顆粒剤とし
た。 製剤例３ 製剤例２と同様の方法で顆粒剤を作った後、この顆粒剤
９６部に対してステアリン酸カルシウム４部を加えて圧
縮成形し、直径１０ｍｍの錠剤を作製した。 製剤例４ 製剤例２の方法で得られた顆粒剤の９０部に対して結晶
性セルロース１０部及びステアリン酸カルシウム３部を
加えて圧縮成形し、直径８ｍｍの錠剤とした後、これに
シロップゼラチン、沈降性炭酸カルシウム混合けん濁液
を加えて糖衣錠を作製した。 製剤例５ 本物質（ＢＥ−３２０３０Ｂ） ０．６（部） 非イオン系界面活性剤 ２．４ 生理的食塩水 ９７ を加温混合してからアンプルに入れ、滅菌を行って注射
剤を作製した。

【００４１】

【発明の効果】本発明に記載するＢＥ−３２０３０類
は、マウス及びヒトの癌細胞に対し、強い増殖抑制効果
を示すことから、医薬の分野で癌の治療剤として有用で
ある。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｄ 223:00 7431−4Ｃ 263:00） 9283−4Ｃ (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｐ 17/16 Ｃ１２Ｒ 1:01） (72)発明者 鈴木 肇 茨城県つくば市大久保３番地 萬有製薬株 式会社つくば研究所内 (72)発明者 須田 寛之 茨城県つくば市大久保３番地 萬有製薬株 式会社つくば研究所内

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】一般式 【化１】 ［式中、Ｒ¹は水素原子又は水酸基を示し、Ｒ²は基： （ＣＨ₂）₁₀ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₁₂ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₅ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₁₀ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₃ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇ＣＨ₃ を示す］で表される化合物又はその薬学的に許容しうる
   塩。
2. 【請求項２】ノカルディア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）属に属
   し、一般式［Ｉ］の化合物を産生する能力を有する微生
   物又はその変異株を培養し、その培養物から一般式
   ［Ｉ］の化合物を採取し、要すれば薬学的に許容しうる
   塩とすることを特徴とする、一般式 【化２】 ［式中、Ｒ¹は水素原子又は水酸基を示し、Ｒ²は基： （ＣＨ₂）₁₀ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₁₂ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₅ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₁₀ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₃ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇ＣＨ₃ を示す］で表される化合物又はその薬学的に許容しうる
   塩の製法。
3. 【請求項３】微生物又はその変異株が、ノカルディア・
   エスピー Ａ３２０３０（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｐ．Ａ
   ３２０３０）である請求項２記載の製法。
4. 【請求項４】一般式 【化３】 ［式中、Ｒ¹は水素原子又は水酸基を示し、Ｒ²は基： （ＣＨ₂）₁₀ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₁₂ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₅ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₁₀ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₃ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇ＣＨ₃ を示す］で表される化合物又はその薬学的に許容しうる
   塩を有効成分とする抗腫瘍剤。
5. 【請求項５】一般式［Ｉ］の化合物を産生する能力を有
   するノカルディア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）属に属する微生
   物又はその変異株。
6. 【請求項６】微生物が、ノカルディア・エスピー Ａ３
   ２０３０（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｐ．Ａ３２０３０）で
   ある請求項５記載の微生物又はその変異株。