JPH0597715A - コンアルブミンが結合した光学異性体分離剤 - Google Patents

コンアルブミンが結合した光学異性体分離剤

Info

Publication number
JPH0597715A
JPH0597715A JP3289517A JP28951791A JPH0597715A JP H0597715 A JPH0597715 A JP H0597715A JP 3289517 A JP3289517 A JP 3289517A JP 28951791 A JP28951791 A JP 28951791A JP H0597715 A JPH0597715 A JP H0597715A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
conalbumin
optical isomer
carrier
column
separating agent
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP3289517A
Other languages
English (en)
Other versions
JP3121072B2 (ja
Inventor
Nariyasu Mano
成康 真野
Yoshiya Oda
吉哉 小田
Toshinobu Miwa
敏紳 三輪
Naoki Asakawa
直樹 浅川
Yutaka Yoshida
豊 吉田
Tadashi Sato
忠 里
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Eisai Co Ltd
Original Assignee
Eisai Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority to JP03289517A priority Critical patent/JP3121072B2/ja
Application filed by Eisai Co Ltd filed Critical Eisai Co Ltd
Priority to PCT/JP1992/001320 priority patent/WO1993007104A1/ja
Priority to DE69225215T priority patent/DE69225215T2/de
Priority to US08/070,434 priority patent/US5900144A/en
Priority to AT92921288T priority patent/ATE165322T1/de
Priority to CA002097719A priority patent/CA2097719A1/en
Priority to EP92921288A priority patent/EP0562121B1/en
Publication of JPH0597715A publication Critical patent/JPH0597715A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP3121072B2 publication Critical patent/JP3121072B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
    • B01J20/29—Chiral phases
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/02—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising inorganic material
    • B01J20/10—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising inorganic material comprising silica or silicate
    • B01J20/103—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising inorganic material comprising silica or silicate comprising silica
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
    • B01J20/286—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3202—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
    • B01J20/3204—Inorganic carriers, supports or substrates
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3202—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
    • B01J20/3206—Organic carriers, supports or substrates
    • B01J20/3208—Polymeric carriers, supports or substrates
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3214—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating
    • B01J20/3217—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond
    • B01J20/3219—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond involving a particular spacer or linking group, e.g. for attaching an active group
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
    • B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
    • B01J20/3248—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
    • B01J20/3251—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such comprising at least two different types of heteroatoms selected from nitrogen, oxygen or sulphur
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
    • B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
    • B01J20/3248—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
    • B01J20/3255—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such comprising a cyclic structure containing at least one of the heteroatoms nitrogen, oxygen or sulfur, e.g. heterocyclic or heteroaromatic structures
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
    • B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
    • B01J20/3257—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one of the heteroatoms nitrogen, oxygen or sulfur together with at least one silicon atom, these atoms not being part of the carrier as such
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
    • B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
    • B01J20/3257—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one of the heteroatoms nitrogen, oxygen or sulfur together with at least one silicon atom, these atoms not being part of the carrier as such
    • B01J20/3263—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one of the heteroatoms nitrogen, oxygen or sulfur together with at least one silicon atom, these atoms not being part of the carrier as such comprising a cyclic structure containing at least one of the heteroatoms nitrogen, oxygen or sulfur, e.g. an heterocyclic or heteroaromatic structure
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3268—Macromolecular compounds
    • B01J20/3272—Polymers obtained by reactions otherwise than involving only carbon to carbon unsaturated bonds
    • B01J20/3274—Proteins, nucleic acids, polysaccharides, antibodies or antigens
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3268—Macromolecular compounds
    • B01J20/328—Polymers on the carrier being further modified
    • B01J20/3282—Crosslinked polymers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B57/00—Separation of optically-active compounds
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
    • B01J2220/50—Aspects relating to the use of sorbent or filter aid materials
    • B01J2220/54—Sorbents specially adapted for analytical or investigative chromatography
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
    • B01J2220/50—Aspects relating to the use of sorbent or filter aid materials
    • B01J2220/58—Use in a single column

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Dental Preparations (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)

Abstract

(57)【要約】 【目的】光学異性体分離能を有する担体及び高速液体ク
ロマトグラフィ−用カラムを提供する。 【構成】コンアルブミンをシリカゲル、合成ポリマ−等
の担体に化学結合して光学異性体分離剤を得、該分離剤
を充填して高速液体クロマトグラフィ−用カラムを得
る。コンアルブミンは、グルタ−ル化、アシル化等の化
学修飾を行うことができる。 【効果】従来の光学異性体分離剤では不可能であった、
光学異性体の分離が可能である。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はコンアルブミンが担体に
結合した光学異性体用分離剤及び該担体を充填した高速
液体クロマトグラフィ−用カラムに関する。
【０００２】
【従来の技術】自然界においては、ラセミ体を構成する
光学異性体のうち１つのものだけが存在したり、生理活
性を有することが知られている。近年、医薬品の分野に
おいてもラセミ体を構成する一方の光学異性体のみが顕
著な薬理作用を有したり、毒性が低い場合のあることが
見いだされ、分離された光学異性体による医薬品開発の
重要性が増している。光学異性体の分離については、従
来から、数多くの分離方法が知られているが、工業的規
模で実施できるものは少なく、簡便で安価に分離できる
方法が望まれていた。最近では、高速液体クロマトグラ
フィ−の進歩により、光学異性体を分離する方法が一般
に知られるようになり、種々の性能を有した分離カラム
が報告されている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】しかし、光学異性体を
有する化合物の種類は非常に多いのに対し、それらを分
離するカラムの種類は少なく、必ずしもすべての光学異
性体が効率的に分離できるわけではない。したがって、
新しい分離カラムが望まれている。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、新たな分
離能を有した光学異性体分離剤を開発すべく鋭意検討し
た結果、次に示す構成により、上記目的を達成できるこ
とを見いだし本発明を完成した。すなわち、本発明は、
コンアルブミンまたは化学修飾したコンアルブミンを担
体に結合した固定相からなることを特徴とする光学異性
体分離剤である。また、本発明は、コンアルブミンまた
は化学修飾したコンアルブミンを担体に結合した固定相
からなることを特徴とする光学異性体分離剤を充填した
高速液体クロマトグラフィ−用カラムである。
【０００５】本発明によると、従来不可能あるいは不十
分であった光学異性体の分離を効果的に行うことができ
る。したがって、本発明の目的は、新たな光学異性体分
離能を有した新たな光学異性体分離剤及びそれを充填し
た高速液体クロマトグラフィ−用カラムを供給すること
である。
【０００６】本発明において担体とは、コンアルブミン
が化学的に結合することができる微細な支持体を意味
し、例えばシリカゲル、ガラス、セルロ−ス、合成ポリ
マ−またはアミノプロピルシリカゲルを挙げることがで
きる。コンアルブミンは、アルブミンに属するタンパク
質であり、分子量は７００００（８７０００とする説も
ある）である。等電点ｐＨは５．８である。卵白中に存
在し、鶏卵中の卵白タンパク質の１３．８％に相当す
る。コンアルブミンは、市販のものを利用しても良い
し、公知の方法（化学大辞典３、ｐ．７４４、昭和５２
年）により卵白から調製しても良い。
【０００７】コンアルブミンを担体に結合するには、固
定相を形成するために通常行われている方法によること
ができる。例えば、アミノプロピルシリカゲルを担体と
した場合には、Ｎ，Ｎ−ジサクシニミジルカ−ボネ−ト
を架橋剤として、コンアルブミンを結合することがで
き、更に、シリカゲルを担体とした場合には、３−グリ
シドオキシプロピルトリメトキシシランを架橋剤として
コンアルブミンを結合することができる。
【０００８】本発明における化学修飾したコンアルブミ
ンとは、グルタ−ル化、ジオ−ル化、アシル化、還元さ
れたグルタ−ル化等により、コンアルブミンの一部を化
学的に変換したコンアルブミンを意味する。化学修飾の
方法は、例えばグルタ−ル化の場合、コンアルブミン及
びグルタ−ルアルデヒドをｐＨ６．８のリン酸緩衝液に
入れ、３０℃で１５時間撹拌してグクタ−ル化コンアル
ブミンを得る。更に、水素化ホウ素ナトリウムを用いて
ｐＨ６．８のリン酸緩衝液中で、４℃１２時間撹拌して
還元型コンアルブミンを得ることができる。次に、スク
シンイミジルスベレイトをアセトニトリルに溶解し、炭
酸水素ナトリウム緩衝液とアミノプロピルシリカゲルを
加え反応させる。有機溶媒をよく洗浄後、炭酸水素ナト
リウム緩衝液中で上記の化学修飾したコンアルブミンを
反応させ、化学修飾したコンアルブミンが結合した担体
を得ることができる。化学修飾したコンアルブミンが結
合した担体は、コンアルブミンが結合した担体を化学修
飾することによっても得ることができる。
【０００９】本発明において、光学異性体とは、分子内
に不整炭素原子を有するキラル化合物を意味し、多くの
化合物があるが、医薬品分野の例を挙げれば、クロルプ
レナリン、アスコルビン酸、アンピシリン、トコフェロ
−ル、エピネフリン、エフェドリン、キニ−ネ、フェニ
レフリン、プロプラノロ−ル、メタンフェタミン、スコ
ポラミン、メチルド−パ、アゼラスチン、ベラパミル等
である。
【００１０】本発明による光学異性体分離剤は、主とし
てカラムに充填後、高速液体クロマトグラフィ−に接続
することにより使用される。したがって、光学異性体の
分離は、ＨＰＬＣに関する通常の操作により、目的物質
の性質に応じて適宜移動相組成等の分析条件を選択して
行えば良い。
【００１１】
【実施例】次に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明
するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではな
い。 実施例１ アミノプロピルシリカゲル３ｇおよびＮ，Ｎ−ジサクシ
ニミジルカ−ボネ−ト２ｇを０．１Ｍ炭酸水素ナトリウ
ム緩衝液（ｐＨ６．８）１００ｍｌに入れ、一夜撹拌
し、ガラスフィルタ−上に取り、水洗して活性化アミノ
プロピルシリカゲルの懸濁液を用意した。別に、コンア
ルブミン２ｇを０．１Ｍ炭酸水素ナトリウム緩衝液（ｐ
Ｈ６．８）３０ｍｌに溶解した溶液を用意し、それを前
記懸濁液に加え、本発明分離剤を得た。
【００１２】実施例２ 実施例１で得た分離剤をスチ−ルカラムに充填し、光学
異性体分離用カラムを得た。 実施例３ シリカゲル１０ｇを１４０℃で２４時間乾燥し、冷却
後、トルエン１４０ｍｌに懸濁し、３−グリシドオキシ
プロピルトリメトキシシラン１５ｍｌを加え、過熱還流
し、５時間後に上部より低沸点留分を除き、ガラスフィ
ルタ−上に取り、トルエン、テトラヒドロフラン、メタ
ノ−ルで順次洗浄し、６０℃で２時間乾燥して、エポキ
シ活性化シリカゲルを得た。この５ｇをｐＨ８．５のホ
ウ酸緩衝液５０ｍｌに懸濁し、これにコンアルブミン５
００ｍｇを加え、室温で２４時間反応後、ガラスフィル
タ−上に取り、水洗して本発明分離剤を得た。
【００１３】実施例４ 実施例３で得た分離剤を２０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ
７．０）に懸濁し、カラムに充填して光学異性体分離用
カラムとした。 実施例５ 実施例１で得た担体２ｇ及びグルタ−ルアルデヒド０．
１ｇを０．０６Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）３０ｍｌ
に入れ、３０℃で１５時間撹拌し、グルタ−ル化された
コンアルブミン（非還元型）が結合した担体を得た。更
に、０．２ｇの水素化ホウ素ナトリウムを加え、４℃で
１２時間撹拌、還元しグルタ−ル化されたコンアルブミ
ン（還元型）が結合した担体を得た。 実施例６ 実施例５で得た担体をカラムに充填し、光学異性体分離
用カラムとした。
【００１４】
【効果】以下の実験例により本発明の効果を示す。 実験例１ 実施例２で得られた光学異性体分離用カラムを用いて、
アゼラスチンの分離を行った。 ＨＰＬＣ条件 移動相 ８％エタノ−ル含有５０ｍＭリン酸緩衝液
（ｐＨ５．０） 流速 １．０ｍｌ／ｍｉｎ 検出 ２３０ｎｍ 結果を図１に示す。
【００１５】
【図１】保持時間１９分のピ−クはｄ体であり、２５分
のピ−クはｌ体である。図１より、本発明分離剤によ
り、アゼラスチンの光学異性体が分離されることが明ら
かである。
【００１６】比較例１ 糖タンパク質の一種であるオボムコイドを用いた市販の
オボムコイドカラム（商品名ＵＬＴＲＯＮ ＥＳ−ＯＶ
Ｍ）を使用してアゼラスチンの光学異性体分離を行っ
た。図２及び３には、移動相として２％及び１％のテト
ラヒドロフラン／２０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ４．８）
を用いたときのクロマトグラムを示す。
【図２】
【図３】図２、３より、アゼラスチンの光学異性体は分
離されないことが分かる。移動相にメタノ−ル、アセト
ニトリルを用いても同様に分離されなかった。
【００１７】実験例２ 実施例２で得られた光学異性体分離用カラムを用いて、
ベラパミルの分離を行った。 ＨＰＬＣ条件 移動相 ５％エタノ−ル含有５０ｍＭリン酸緩衝液
（ｐＨ４．５） 流速 １．０ｍｌ／ｍｉｎ 検出 ２３０ｎｍ 結果を図４に示す。
【図４】保持時間２．５分のピ−クはｄ体であり、３．
５分のピ−クはｌ体である。図４より、本発明分離剤に
より、ベラパミルの光学異性体が分離されることが明ら
かである。
【００１８】
【図面の簡単な説明】
図１は本発明にかかるカラムを用いた時のｄ，ｌ−アゼ
ラスチンの液体クロマトグラムを表す。図２、３は、オ
ボムコイドカラムを用いたときのｄ，ｌ−アゼラスチン
の液体クロマトグラムを示す。図４は本発明にかかるカ
ラムを用いたときのｄ，ｌ−ベラパミルの液体クロマタ
グラムを表す。図１、図４共に、左がｄ体、右がｌ体で
ある。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 吉田 豊 埼玉県本庄市本庄４−５−18 (72)発明者 里 忠 千葉県我孫子市つくし野７−20−10

Claims (5)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】コンアルブミンを担体に結合した固定相か
    らなることを特徴とする光学異性体分離剤。
  2. 【請求項２】担体がシリカゲル、ガラス、セルロ−ス、
    合成ポリマ−またはアミノプロピルシリカゲルである請
    求項１記載の光学異性体分離剤。
  3. 【請求項３】コンアルブミンが化学修飾したコンアルブ
    ミンである請求項１記載の光学異性体分離剤。
  4. 【請求項４】コンアルブミンの化学修飾がグルタ−ル化
    もしくはその還元化、ジオ−ル化またはアシル化である
    請求項３記載の光学異性体分離剤。
  5. 【請求項５】コンアルブミンまたは化学修飾したコンア
    ルブミンを担体に結合した固定相からなることを特徴と
    する光学異性体分離剤を充填した高速液体クロマトグラ
    フィ−用カラム。
JP03289517A 1991-10-09 1991-10-09 コンアルブミンが結合した光学異性体分離剤 Expired - Fee Related JP3121072B2 (ja)

Priority Applications (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP03289517A JP3121072B2 (ja) 1991-10-09 1991-10-09 コンアルブミンが結合した光学異性体分離剤
DE69225215T DE69225215T2 (de) 1991-10-09 1992-10-09 Trennungsmittel, welches gebundenes canalbumin enthält
US08/070,434 US5900144A (en) 1991-10-09 1992-10-09 Separating agent comprising bonded conalbumin
AT92921288T ATE165322T1 (de) 1991-10-09 1992-10-09 Trennungsmittel, welches gebundenes canalbumin enthält
PCT/JP1992/001320 WO1993007104A1 (fr) 1991-10-09 1992-10-09 Agent de separation comprenant de la conalbumine liee
CA002097719A CA2097719A1 (en) 1991-10-09 1992-10-09 Separating agent comprising bonded conalbumin
EP92921288A EP0562121B1 (en) 1991-10-09 1992-10-09 Separating agent comprising bonded conalbumin

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP03289517A JP3121072B2 (ja) 1991-10-09 1991-10-09 コンアルブミンが結合した光学異性体分離剤

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPH0597715A true JPH0597715A (ja) 1993-04-20
JP3121072B2 JP3121072B2 (ja) 2000-12-25

Family

ID=17744292

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP03289517A Expired - Fee Related JP3121072B2 (ja) 1991-10-09 1991-10-09 コンアルブミンが結合した光学異性体分離剤

Country Status (7)

Country Link
US (1) US5900144A (ja)
EP (1) EP0562121B1 (ja)
JP (1) JP3121072B2 (ja)
AT (1) ATE165322T1 (ja)
CA (1) CA2097719A1 (ja)
DE (1) DE69225215T2 (ja)
WO (1) WO1993007104A1 (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015199224A1 (ja) * 2014-06-26 2015-12-30 国立大学法人九州大学 イオン交換樹脂及び金属の吸着分離方法

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108693271A (zh) * 2018-06-01 2018-10-23 广西昌弘制药有限公司 一种含有麻黄的中药制剂及其盐酸麻黄碱的质量检测方法

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4061591A (en) * 1974-09-18 1977-12-06 Pierce Chemical Company Selective adsorbent for use in affinity chromatography
SE8202544L (sv) * 1982-04-23 1983-10-24 Larsson Per Olof Lektinhaltigt separationsmedel
JPS6041619A (ja) * 1983-06-08 1985-03-05 クロムテク　エ−ビ− 分離用物質およびその製造方法
US4525465A (en) * 1983-10-07 1985-06-25 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Water-insoluble biospecific absorbent containing argininal derivative
US4544485A (en) * 1984-08-31 1985-10-01 Purdue Research Foundation Chromatographic method and means
US4681870A (en) * 1985-01-11 1987-07-21 Imre Corporation Protein A-silica immunoadsorbent and process for its production
JPH0713030B2 (ja) * 1986-04-02 1995-02-15 エーザイ株式会社 光学異性体用分離剤
US5240602A (en) * 1987-06-08 1993-08-31 Chromatochem, Inc. Chromatographic material
JPH0819010B2 (ja) * 1987-06-24 1996-02-28 エーザイ株式会社 光学異性体用分離剤
SU1578138A1 (ru) * 1988-06-10 1990-07-15 Всесоюзный научно-исследовательский институт текстильно-галантерейной промышленности Способ получени сорбента дл аффинной хроматографии
US5045190A (en) * 1988-11-08 1991-09-03 Carbonell Ruben G Chromatography apparatus
US4980065A (en) * 1989-10-18 1990-12-25 Lehigh University Separation of mixtures by aqueous two-phase systems
JP2848903B2 (ja) * 1990-02-28 1999-01-20 エーザイ株式会社 光学異性体用分離剤

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015199224A1 (ja) * 2014-06-26 2015-12-30 国立大学法人九州大学 イオン交換樹脂及び金属の吸着分離方法
JP2016007601A (ja) * 2014-06-26 2016-01-18 国立大学法人九州大学 イオン交換樹脂及び金属の吸着分離方法
US9863018B2 (en) 2014-06-26 2018-01-09 Kyushu University, National University Corporation Ion exchange resin and method for adsorbing and separating metal

Also Published As

Publication number Publication date
US5900144A (en) 1999-05-04
ATE165322T1 (de) 1998-05-15
DE69225215D1 (de) 1998-05-28
EP0562121A4 (en) 1994-11-23
WO1993007104A1 (fr) 1993-04-15
EP0562121B1 (en) 1998-04-22
JP3121072B2 (ja) 2000-12-25
EP0562121A1 (en) 1993-09-29
DE69225215T2 (de) 1998-08-13
CA2097719A1 (en) 1993-04-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4322310A (en) Chiral supports for resolution of racemates
Goto et al. Separation and determination of naproxen enantiomers in serum by high-performance liquid chromatography
CA1292732C (en) Separation agent for optical isomers
WO2003006449A1 (en) Method for the preparation of escitalopram
JPH0597715A (ja) コンアルブミンが結合した光学異性体分離剤
JPH03110464A (ja) 液体クロマトグラフィー用充填剤
JP3597546B2 (ja) 光学異性体用分離剤
JP2947924B2 (ja) 光学異性体用分離剤
JPH0653763B2 (ja) セルロ−ス系カルバメ−ト誘導体
KR100387932B1 (ko) 키랄 의약품의 광학분할을 위한 lc 용 키랄 크라운 에테르 키랄 고정상 및 이들로 충진된 키랄 칼럼
JPH013129A (ja) 光学異性体用分離剤
JPH0819010B2 (ja) 光学異性体用分離剤
KR100454712B1 (ko) 키랄고정상, 이들로 충진된 키랄칼럼 및 이들의 제조방법
JPS63501507A (ja) 光学活性試薬および対掌体アミン化合物の測定法
JP2848903B2 (ja) 光学異性体用分離剤
JP3138513B2 (ja) 光学異性体用分離剤
JP2708466B2 (ja) 光学分割方法
JPS59122947A (ja) α−フエニル脂肪酸エステル類の鏡像異性体混合物の液体クロマトグラフイ−分析法
JP3591853B2 (ja) 光学異性体用分離剤
US5670629A (en) Ovoglycoprotein and agents for chromatographic separation containing same
JPH0780793B2 (ja) クロマト分離法
RU2136672C1 (ru) Высокомеченный тритием диметоморфолин и способ его получения
JP2869704B2 (ja) オボグリコプロテイン及びそれを含むクロマトグラフィー用分離剤並びに分離法
JP2912075B2 (ja) ガスクロマトグラフィー用充填剤
JPH06343857A (ja) 固定相

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Cancellation because of no payment of annual fees