JPH0555114B2 - - Google Patents
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
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- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
- C12P13/08—Lysine; Diaminopimelic acid; Threonine; Valine
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Description
産業上の利用分野
本発明は発酵法によるL−リジンの製造法に関
する。さらに詳しくは、本発明はコリネ型グルタ
ミン酸生産菌に属し、β−ナフトキノリンに抵抗
性を有し、かつL−リジン生産能を有する微生物
を培地に培養して、該培養物からL−リジンを採
取することを特徴とする発酵法によるL−リジン
の製造法に関する。 その目的とするところは必須アミノ酸の1つで
あり、医薬品あるいは飼料や食品への添加剤とし
て需要の大きいL−リジンを工業的に安価に製造
する方法を提供することにある。 従来の技術 従来、発酵法によるL−リジンの製造法に関し
てはコリネバクテリウム属、ブレビバクテリウム
属、アースロバクター属、バチルス属の細菌やそ
の他の微生物のホモセリン(またはメチオニンと
スレオニン)要求性変異株(特公昭36−6499号、
USP2979439)やその他要求性変異株〔特公昭48
−28677号、同51−21078号、同51−34477号、
(USP3825472)、同55−1040号、特開昭56−8692
号、同55−9784号〕を用いる方法、また各種薬剤
抵抗性変異株〔特公昭48−28078号
(USP3707441)、同53−1833号、同53−43591号、
同59−4993号、特開昭53−9394号、同55−9785
号、特公昭55−44597号(USP3687810)〕などを
用いる方法、あるいはこれらの組合せの性質を有
する微生物を用いる方法などが知られている。 発明が解決しようとする問題点 必須アミノ酸の1つであり、医薬品あるいは飼
料や食品への添加剤として需要の大きいL−リジ
ンを、工業的に安価に製造する方法の開発は常に
望まれている。 問題点を解決するための手段 本発明者は、L−リジンの生産性の改良された
菌株を得るため種々研究を重ねた結果、コリネ型
グルタミン酸生産菌に属するL−リジン生産菌株
にさらにβ−ナフトキノリン抵抗性を付与する
と、L−リジン生産性が飛躍的に向上することを
見出し、本発明を完成するに至つた。発酵法によ
りL−リジンの製造に際し、キノリン類に対する
耐性を付与することによつてリジン生産能が向上
することが知られている(特公昭59−4993号)
が、これらの薬剤による生育阻害はL−ロイシン
で解除されることが示されている。従つて、これ
らのキノリン類は、L−ロイシンアナログとして
作用していることが推定される。しかし、β−ナ
フトキノリンによる生育阻害は、L−ロイシンで
回復されないことから、β−ナフトキノリンは特
公昭59−4993号におけるキノリン類とは別の範疇
に属する物質であると考えられる。このような性
質をもつたβ−ナフトキノリンに抵抗性を有する
菌株を用いればL−リジンの生産性が飛躍的に改
善されることは本発明者によつてはじめて見出さ
れた知見である。 以下、本発明を詳細に説明する。 本発明は、コリネ型グルタミン酸生産菌に属
し、β−ナフトキノリンに抵抗性を有し、かつL
−リジン生産能を有する微生物を培地に培養し、
培養物中にL−リジンを生成蓄積させ、該培養物
からL−リジンを採取することを特徴とするL−
リジンの製造法を提供する。 本明細書において、コリネ型グルタミン酸生産
菌とは、コリネバクテリウム属、ブレビバクテリ
ウム属、ミクロバクテリウム属またはアースロバ
クター属に属する一群のグルタミン酸生産菌をい
う〔「発酵と工業」第40巻、102、1982年参照〕。 本発明で用いる微生物は、コリネ型グルタミン
酸生産菌に属し、β−ナフトキノリンに抵抗性を
有するL−リジン生産菌株であればいかなる菌株
をも用いることができる。すなわち、本発明では
コリネ型グルタミン酸生産菌に属し、L−リジン
生産能を有する菌株にβ−ナフトキノリン抵抗性
を付与させた菌株を用いてもよいし、コリネ型グ
ルタミン酸生産菌に属し、β−ナフトキノリン抵
抗性を有する菌株にL−リジン生産能を付与させ
た菌株を用いてもよい。 コリネ型グルタミン酸生産菌に属するL−リジ
ン生産能を有する菌株としては、各種の栄養(例
えばホモセリン、メチオニン、スレオニン、ヒス
チジン、プロリン、アラニン、ロイシン、イソロ
イシン、バリン、セリン、グルタミン酸、パント
テン酸、ニコチン酸アミド、酢酸、アデニン、ヒ
ポキサンチン、イノシトールおよびこれらの組合
せ)要求性、各種のアミノ酸アナログ(例えばリ
ジン、スレオニン、メチオニン、ロイシン、イソ
ロイシン、バリン、アスパラギン酸、トリプトフ
アンあるいはヒスチジンのアナログおよびこれら
の組合せ)抵抗性、その他薬剤(例えば各種抗生
物質、サルフア剤、各種有機酸、キノン化合物、
キノリン化合物およびこれらの組合せ)抵抗性の
1つあるいはこれらの組合せの性質を有するL−
リジン生産菌株が挙げられる。 したがつて、上記のようなL−リジン生産菌株
に、さらにβ−ナフトキノリン抵抗性を付与する
ことによつて本発明に使用する菌株を得ることも
できるし、コリネ型グルタミン酸生産菌に属し、
β−ナフトキノリン抵抗性を有する菌株に上記の
ような各種栄養要求性、各種アミノ酸アナログ抵
抗性、またはその他薬剤の抵抗性を付与すること
によつて得られるL−リジン生産菌株を本発明で
使用することもできる。また、本発明に用いる菌
株は上記のような性質の他にL−リジン生産に寄
与するいかなる性質を備えていてもさしつあえな
い。 本発明の変異株を誘導する際に用いられる親株
としては、コリネ型グルタミン酸生産菌として知
られている下記微生物があげられる。例えば、コ
リネバクテリウム・グルタミクムATCC13032、
コリネバクテリウム・グルタミクムH−3149
(FERM BP−158)、コリネバクテリウム・アセ
トアシドフイラムATCC13870、ブレビバクテリ
ウム・ラクトフエルメンタムATCC13869、ブレ
ビバクテリウム・フラバムATCC14067などがあ
る。 本発明における変異株の誘導は、紫外線照射や
N−メチル−N′−ニトロ−N−ニトロソグアニ
ジンなどによる化学処理など、通常用いられる変
異処理方法により行うことができる。 変異処理した菌株から本発明の変異株を分離す
るには、親株が生育阻害を示す濃度のβ−ナフト
キノリン(40μg/ml以上)を含む最少培地寒天
平板上に生育する変異株を取得すれよい。 本発明に使用する微生物のうち、β−ナフトキ
ノリン抵抗性菌株の具体的一例として、コリネバ
クテリウム・グルタミクムH−4412の取得例を以
下に示す。 コリネバクテリウム・グルタミクムH−3149
(FERM BP−158)(チアリジン抵抗性、リフア
ンピシン抵抗性、ストレプトマイシン抵抗性、6
−アザウラシル抵抗性)を親株として用いる。こ
の親株を0.1Nトリス−マレイン酸緩衝液(PH6.0)
中に108細胞/mlの濃度に懸濁し、ここにN−メ
チル−N′−ニトロ−N−ニトロソグアニジンを
最終濃度0.2mg/mlになるように添加し、室温で
30分間静置する。親株が生育阻害を示す濃度のβ
−ナフトキノリン(例えば40μg/mlを含む下記
のような組成を有する最少培地寒天平板上に塗抹
し、生育するコロニーの中から変異株を選択す
る。その1株がH−4412であり、β−ナフトキノ
リン抵抗性を有する点で第1表に示すように、親
株のH−3149と明らかに区別できる。 最少培地寒天平板培地組成: グルコース10g/、NN4Cl 1g/、尿素2
g/、KH2PO41g/、K2HPO43g/、
MgSO4・7H2O 0.4g/、FeSO4・7H2O 10
mg/、MnSO4・4H2O4mg/、ビオチン50μ
g/、ニコチン酸5mg/、ZnSO4・7H2O1
mg/、CuSO4・5H2O1mg/
(NH4)6Mo7O24・4H2O、1mg/、寒天2%、
PH7.0
する。さらに詳しくは、本発明はコリネ型グルタ
ミン酸生産菌に属し、β−ナフトキノリンに抵抗
性を有し、かつL−リジン生産能を有する微生物
を培地に培養して、該培養物からL−リジンを採
取することを特徴とする発酵法によるL−リジン
の製造法に関する。 その目的とするところは必須アミノ酸の1つで
あり、医薬品あるいは飼料や食品への添加剤とし
て需要の大きいL−リジンを工業的に安価に製造
する方法を提供することにある。 従来の技術 従来、発酵法によるL−リジンの製造法に関し
てはコリネバクテリウム属、ブレビバクテリウム
属、アースロバクター属、バチルス属の細菌やそ
の他の微生物のホモセリン(またはメチオニンと
スレオニン)要求性変異株(特公昭36−6499号、
USP2979439)やその他要求性変異株〔特公昭48
−28677号、同51−21078号、同51−34477号、
(USP3825472)、同55−1040号、特開昭56−8692
号、同55−9784号〕を用いる方法、また各種薬剤
抵抗性変異株〔特公昭48−28078号
(USP3707441)、同53−1833号、同53−43591号、
同59−4993号、特開昭53−9394号、同55−9785
号、特公昭55−44597号(USP3687810)〕などを
用いる方法、あるいはこれらの組合せの性質を有
する微生物を用いる方法などが知られている。 発明が解決しようとする問題点 必須アミノ酸の1つであり、医薬品あるいは飼
料や食品への添加剤として需要の大きいL−リジ
ンを、工業的に安価に製造する方法の開発は常に
望まれている。 問題点を解決するための手段 本発明者は、L−リジンの生産性の改良された
菌株を得るため種々研究を重ねた結果、コリネ型
グルタミン酸生産菌に属するL−リジン生産菌株
にさらにβ−ナフトキノリン抵抗性を付与する
と、L−リジン生産性が飛躍的に向上することを
見出し、本発明を完成するに至つた。発酵法によ
りL−リジンの製造に際し、キノリン類に対する
耐性を付与することによつてリジン生産能が向上
することが知られている(特公昭59−4993号)
が、これらの薬剤による生育阻害はL−ロイシン
で解除されることが示されている。従つて、これ
らのキノリン類は、L−ロイシンアナログとして
作用していることが推定される。しかし、β−ナ
フトキノリンによる生育阻害は、L−ロイシンで
回復されないことから、β−ナフトキノリンは特
公昭59−4993号におけるキノリン類とは別の範疇
に属する物質であると考えられる。このような性
質をもつたβ−ナフトキノリンに抵抗性を有する
菌株を用いればL−リジンの生産性が飛躍的に改
善されることは本発明者によつてはじめて見出さ
れた知見である。 以下、本発明を詳細に説明する。 本発明は、コリネ型グルタミン酸生産菌に属
し、β−ナフトキノリンに抵抗性を有し、かつL
−リジン生産能を有する微生物を培地に培養し、
培養物中にL−リジンを生成蓄積させ、該培養物
からL−リジンを採取することを特徴とするL−
リジンの製造法を提供する。 本明細書において、コリネ型グルタミン酸生産
菌とは、コリネバクテリウム属、ブレビバクテリ
ウム属、ミクロバクテリウム属またはアースロバ
クター属に属する一群のグルタミン酸生産菌をい
う〔「発酵と工業」第40巻、102、1982年参照〕。 本発明で用いる微生物は、コリネ型グルタミン
酸生産菌に属し、β−ナフトキノリンに抵抗性を
有するL−リジン生産菌株であればいかなる菌株
をも用いることができる。すなわち、本発明では
コリネ型グルタミン酸生産菌に属し、L−リジン
生産能を有する菌株にβ−ナフトキノリン抵抗性
を付与させた菌株を用いてもよいし、コリネ型グ
ルタミン酸生産菌に属し、β−ナフトキノリン抵
抗性を有する菌株にL−リジン生産能を付与させ
た菌株を用いてもよい。 コリネ型グルタミン酸生産菌に属するL−リジ
ン生産能を有する菌株としては、各種の栄養(例
えばホモセリン、メチオニン、スレオニン、ヒス
チジン、プロリン、アラニン、ロイシン、イソロ
イシン、バリン、セリン、グルタミン酸、パント
テン酸、ニコチン酸アミド、酢酸、アデニン、ヒ
ポキサンチン、イノシトールおよびこれらの組合
せ)要求性、各種のアミノ酸アナログ(例えばリ
ジン、スレオニン、メチオニン、ロイシン、イソ
ロイシン、バリン、アスパラギン酸、トリプトフ
アンあるいはヒスチジンのアナログおよびこれら
の組合せ)抵抗性、その他薬剤(例えば各種抗生
物質、サルフア剤、各種有機酸、キノン化合物、
キノリン化合物およびこれらの組合せ)抵抗性の
1つあるいはこれらの組合せの性質を有するL−
リジン生産菌株が挙げられる。 したがつて、上記のようなL−リジン生産菌株
に、さらにβ−ナフトキノリン抵抗性を付与する
ことによつて本発明に使用する菌株を得ることも
できるし、コリネ型グルタミン酸生産菌に属し、
β−ナフトキノリン抵抗性を有する菌株に上記の
ような各種栄養要求性、各種アミノ酸アナログ抵
抗性、またはその他薬剤の抵抗性を付与すること
によつて得られるL−リジン生産菌株を本発明で
使用することもできる。また、本発明に用いる菌
株は上記のような性質の他にL−リジン生産に寄
与するいかなる性質を備えていてもさしつあえな
い。 本発明の変異株を誘導する際に用いられる親株
としては、コリネ型グルタミン酸生産菌として知
られている下記微生物があげられる。例えば、コ
リネバクテリウム・グルタミクムATCC13032、
コリネバクテリウム・グルタミクムH−3149
(FERM BP−158)、コリネバクテリウム・アセ
トアシドフイラムATCC13870、ブレビバクテリ
ウム・ラクトフエルメンタムATCC13869、ブレ
ビバクテリウム・フラバムATCC14067などがあ
る。 本発明における変異株の誘導は、紫外線照射や
N−メチル−N′−ニトロ−N−ニトロソグアニ
ジンなどによる化学処理など、通常用いられる変
異処理方法により行うことができる。 変異処理した菌株から本発明の変異株を分離す
るには、親株が生育阻害を示す濃度のβ−ナフト
キノリン(40μg/ml以上)を含む最少培地寒天
平板上に生育する変異株を取得すれよい。 本発明に使用する微生物のうち、β−ナフトキ
ノリン抵抗性菌株の具体的一例として、コリネバ
クテリウム・グルタミクムH−4412の取得例を以
下に示す。 コリネバクテリウム・グルタミクムH−3149
(FERM BP−158)(チアリジン抵抗性、リフア
ンピシン抵抗性、ストレプトマイシン抵抗性、6
−アザウラシル抵抗性)を親株として用いる。こ
の親株を0.1Nトリス−マレイン酸緩衝液(PH6.0)
中に108細胞/mlの濃度に懸濁し、ここにN−メ
チル−N′−ニトロ−N−ニトロソグアニジンを
最終濃度0.2mg/mlになるように添加し、室温で
30分間静置する。親株が生育阻害を示す濃度のβ
−ナフトキノリン(例えば40μg/mlを含む下記
のような組成を有する最少培地寒天平板上に塗抹
し、生育するコロニーの中から変異株を選択す
る。その1株がH−4412であり、β−ナフトキノ
リン抵抗性を有する点で第1表に示すように、親
株のH−3149と明らかに区別できる。 最少培地寒天平板培地組成: グルコース10g/、NN4Cl 1g/、尿素2
g/、KH2PO41g/、K2HPO43g/、
MgSO4・7H2O 0.4g/、FeSO4・7H2O 10
mg/、MnSO4・4H2O4mg/、ビオチン50μ
g/、ニコチン酸5mg/、ZnSO4・7H2O1
mg/、CuSO4・5H2O1mg/
(NH4)6Mo7O24・4H2O、1mg/、寒天2%、
PH7.0
【表】
:充分な生育、+:わずかに生育、
−;生育せず
H−3149を変異誘導することによつて得られた
β−ナフトキノリンに抵抗性を有するH−4412
は、昭和61年5月27日付で工業技術院微生物工業
技術研究所(微工研)にFERM BP−1069とし
て寄託されている。 本発明に使用する培地組成としては使用菌株の
利用しうる炭素源、窒素源、無機物その他の必要
な栄養素を程良く含有するものであれば合成培
地、天然培地のいずれも使用できる。 すなわち炭素源としてはグルコース、フラクト
ース、ソルビトール、グリセロール、蔗糖、澱
粉、澱粉加水分解物、糖蜜、果汁などの各種炭水
化物、酢酸、フマール酸、乳酸、コハク酸などの
有機酸、さらにエタノール、メタノールなどのア
ルコール類も使用できる。 窒素源としては、アンモニア、塩化アンモニウ
ム、硫酸アンモニウム、酢酸アンモニウム、リン
酸アンモニウムなどの各種無機酸のアンモニウム
塩、尿素、アミン類、その他含窒素化合物、なら
びにペプトン、肉エキス、酵母エキス、コーン・
スチープ・・リカー、カゼイン加水分解物、大豆
粕酸加水分解物、各種発酵菌体およびその消化物
などが使用できる。 さらに無機物としては、リン酸第一カリウム、
リン酸第二カリウム、リン酸マグネシウム、硫酸
マグネシウム、塩化ナトリウム、硫酸第一鉄、硫
酸マンガン、炭酸カルシウムなどが使用できる。 本発明に使用する微生物が生育のために特定の
栄養素を必要とする場合には、その栄養素を適当
量培地中に存在させなければならないが、これら
の物質は窒素源として例示した天然物に含まれて
添加される場合がある。また培地中に各種の添加
物、例えば各種抗生物質、α−アミノ酪酸、シス
テイン、ロイシン、ロイシン発酵液あるいはアス
パラギン酸、グルタミン酸などを添加することに
よりL−リジン生産量を増加させうる場合があ
る。 培養は振盪培養あるいは深部通気撹拌培養など
の好気的条件下で行う。培養温度は通常20〜40℃
の範囲である。培地のPHは3〜9の範囲で、好ま
しくは中性付近に保持することが望ましいが、こ
れ以外の条件下でも使用菌株が生育すれば実施で
きる。培地のPH調節は炭酸カルシウム、尿素、酸
あるいはアルカリ溶液、PH緩衝剤などによつて行
う。培養時間は通常1〜6日間で培養液中にL−
リジンが生成蓄積する。 培養終了後、培養液より菌体などの沈殿物を除
去し、公知のイオン交換処理法、濃縮法、吸着
法、塩析法などを併用することにより、培養液か
らL−リジンを回収することができる。 以下、実施例をあげて本発明を具体的に示す。 実施例 1 種菌としてコリネバクテリウム・グルタミクム
H−4412(FERM BP−1069)を使用した。 この菌株をグルコース40g/、尿素3g/
、KH2PO41.5g/、K2HPO40.5g/、
MgSO4・7H2O0.5g/、ビオチン50μg/、
ペプトン20g/、酵母エキス5g/からなる
種培地(PH7.2)20mlを含む3ml容三角フラスコ
に接種し、30℃で24時間培養した。この培養液2
mlを廃糖蜜100g/(グルコース換算)、硫酸ア
ンモニウム40g/、KH2PO40.5g/、
MgSO4・7H2O0.5g/、CaCO330g/から
なる発酵培地(PH7.2)20mlを含む300ml容三角フ
ラスコに接種し、32℃で4日間振盪培養
(220rpm)を行つた。培養終了後、L−リジンの
生成量を酸性銅ニンヒドリン反応を用いる比色法
によつて測定した。その結果、培養液中のL−リ
ジン生成量は塩酸塩として52g/であつた。対
照として、同一の条件で同様にして培養した親株
H−3149のL−リジン生成量は、塩酸塩として44
g/であつた。 H−4412株を用いて得た培養液1を遠心分離
し、得られた上清液を硫酸でPH1.5に調整した後、
強酸整イオン交換樹脂ダイヤイオンSK−1B(H
+型)(三菱化成工業社製)のカラムに通し、L
−リジンを吸着させ、カラムを水洗後、2規定の
アンモニア水で溶出して、L−リジン画分を集め
た。集めた画分を濃縮し、得られた濃縮液を塩酸
でPH2.0に調整した後、エタノールを添加しなが
ら冷却することによりL−リジン塩酸塩を晶出さ
せ、結晶41gを得た。 発明の効果 本発明方法によれば、L−リジンを工業的に安
価に供給することができる。
−;生育せず
H−3149を変異誘導することによつて得られた
β−ナフトキノリンに抵抗性を有するH−4412
は、昭和61年5月27日付で工業技術院微生物工業
技術研究所(微工研)にFERM BP−1069とし
て寄託されている。 本発明に使用する培地組成としては使用菌株の
利用しうる炭素源、窒素源、無機物その他の必要
な栄養素を程良く含有するものであれば合成培
地、天然培地のいずれも使用できる。 すなわち炭素源としてはグルコース、フラクト
ース、ソルビトール、グリセロール、蔗糖、澱
粉、澱粉加水分解物、糖蜜、果汁などの各種炭水
化物、酢酸、フマール酸、乳酸、コハク酸などの
有機酸、さらにエタノール、メタノールなどのア
ルコール類も使用できる。 窒素源としては、アンモニア、塩化アンモニウ
ム、硫酸アンモニウム、酢酸アンモニウム、リン
酸アンモニウムなどの各種無機酸のアンモニウム
塩、尿素、アミン類、その他含窒素化合物、なら
びにペプトン、肉エキス、酵母エキス、コーン・
スチープ・・リカー、カゼイン加水分解物、大豆
粕酸加水分解物、各種発酵菌体およびその消化物
などが使用できる。 さらに無機物としては、リン酸第一カリウム、
リン酸第二カリウム、リン酸マグネシウム、硫酸
マグネシウム、塩化ナトリウム、硫酸第一鉄、硫
酸マンガン、炭酸カルシウムなどが使用できる。 本発明に使用する微生物が生育のために特定の
栄養素を必要とする場合には、その栄養素を適当
量培地中に存在させなければならないが、これら
の物質は窒素源として例示した天然物に含まれて
添加される場合がある。また培地中に各種の添加
物、例えば各種抗生物質、α−アミノ酪酸、シス
テイン、ロイシン、ロイシン発酵液あるいはアス
パラギン酸、グルタミン酸などを添加することに
よりL−リジン生産量を増加させうる場合があ
る。 培養は振盪培養あるいは深部通気撹拌培養など
の好気的条件下で行う。培養温度は通常20〜40℃
の範囲である。培地のPHは3〜9の範囲で、好ま
しくは中性付近に保持することが望ましいが、こ
れ以外の条件下でも使用菌株が生育すれば実施で
きる。培地のPH調節は炭酸カルシウム、尿素、酸
あるいはアルカリ溶液、PH緩衝剤などによつて行
う。培養時間は通常1〜6日間で培養液中にL−
リジンが生成蓄積する。 培養終了後、培養液より菌体などの沈殿物を除
去し、公知のイオン交換処理法、濃縮法、吸着
法、塩析法などを併用することにより、培養液か
らL−リジンを回収することができる。 以下、実施例をあげて本発明を具体的に示す。 実施例 1 種菌としてコリネバクテリウム・グルタミクム
H−4412(FERM BP−1069)を使用した。 この菌株をグルコース40g/、尿素3g/
、KH2PO41.5g/、K2HPO40.5g/、
MgSO4・7H2O0.5g/、ビオチン50μg/、
ペプトン20g/、酵母エキス5g/からなる
種培地(PH7.2)20mlを含む3ml容三角フラスコ
に接種し、30℃で24時間培養した。この培養液2
mlを廃糖蜜100g/(グルコース換算)、硫酸ア
ンモニウム40g/、KH2PO40.5g/、
MgSO4・7H2O0.5g/、CaCO330g/から
なる発酵培地(PH7.2)20mlを含む300ml容三角フ
ラスコに接種し、32℃で4日間振盪培養
(220rpm)を行つた。培養終了後、L−リジンの
生成量を酸性銅ニンヒドリン反応を用いる比色法
によつて測定した。その結果、培養液中のL−リ
ジン生成量は塩酸塩として52g/であつた。対
照として、同一の条件で同様にして培養した親株
H−3149のL−リジン生成量は、塩酸塩として44
g/であつた。 H−4412株を用いて得た培養液1を遠心分離
し、得られた上清液を硫酸でPH1.5に調整した後、
強酸整イオン交換樹脂ダイヤイオンSK−1B(H
+型)(三菱化成工業社製)のカラムに通し、L
−リジンを吸着させ、カラムを水洗後、2規定の
アンモニア水で溶出して、L−リジン画分を集め
た。集めた画分を濃縮し、得られた濃縮液を塩酸
でPH2.0に調整した後、エタノールを添加しなが
ら冷却することによりL−リジン塩酸塩を晶出さ
せ、結晶41gを得た。 発明の効果 本発明方法によれば、L−リジンを工業的に安
価に供給することができる。
Claims (1)
- 1 コリネ型グルタミン酸生産菌に属し、β−ナ
フトキノリンに抵抗性を有し、かつL−リジン生
産能を有する微生物を培地に培養し、培養物中に
L−リジンを生成蓄積させ、該培養物からL−リ
ジンを採取することを特徴とするL−リジンの製
造法。
Priority Applications (6)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP15677586A JPS6312292A (ja) | 1986-07-03 | 1986-07-03 | L−リジンの製造法 |
MX711587A MX168303B (es) | 1986-07-03 | 1987-06-29 | Un procedimiento para producir l-lisina |
CN 87104553 CN1022931C (zh) | 1986-07-03 | 1987-07-01 | 一种生产l-赖氨酸的方法 |
FR8709309A FR2601035B1 (fr) | 1986-07-03 | 1987-07-01 | Procede de preparation de l-lysine |
HU300487A HU200797B (en) | 1986-07-03 | 1987-07-02 | Process for producing l-lysine |
AU75059/87A AU597387B2 (en) | 1986-07-03 | 1987-07-02 | A process for producing L-lysine |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP15677586A JPS6312292A (ja) | 1986-07-03 | 1986-07-03 | L−リジンの製造法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS6312292A JPS6312292A (ja) | 1988-01-19 |
JPH0555114B2 true JPH0555114B2 (ja) | 1993-08-16 |
Family
ID=15635042
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP15677586A Granted JPS6312292A (ja) | 1986-07-03 | 1986-07-03 | L−リジンの製造法 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS6312292A (ja) |
CN (1) | CN1022931C (ja) |
AU (1) | AU597387B2 (ja) |
FR (1) | FR2601035B1 (ja) |
HU (1) | HU200797B (ja) |
MX (1) | MX168303B (ja) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP3006939B2 (ja) * | 1991-10-21 | 2000-02-07 | 協和醗酵工業株式会社 | L−リジンの製造法 |
JP3773955B2 (ja) * | 1995-05-19 | 2006-05-10 | 松下電器産業株式会社 | ガス安全管理システム |
KR100830289B1 (ko) * | 2007-01-18 | 2008-05-16 | 씨제이제일제당 (주) | L-아르기닌 생산 변이주 및 이의 제조방법 |
KR100830826B1 (ko) * | 2007-01-24 | 2008-05-19 | 씨제이제일제당 (주) | 코리네박테리아를 이용하여 글리세롤을 포함한탄소원으로부터 발효산물을 생산하는 방법 |
WO2011111073A2 (en) * | 2010-03-11 | 2011-09-15 | Anand Bhadalakar | PROCESS FOR BIOGENESIS OF L-LYSINE FROM ε-CAPROLACTAM OR ε-CAPROLACTAM DEGRADATION OR RELATED INTERMEDIATES |
CN102399834A (zh) * | 2011-11-03 | 2012-04-04 | 中粮生物化学(安徽)股份有限公司 | 一种赖氨酸的制备方法 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS594993B2 (ja) * | 1976-12-29 | 1984-02-02 | 味の素株式会社 | 発酵法によるl−リジンの製法 |
GB2103617B (en) * | 1981-08-10 | 1986-05-21 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Production of l-lysine by fermentation and new micro-organisms obtained by protoplast fusion |
-
1986
- 1986-07-03 JP JP15677586A patent/JPS6312292A/ja active Granted
-
1987
- 1987-06-29 MX MX711587A patent/MX168303B/es unknown
- 1987-07-01 FR FR8709309A patent/FR2601035B1/fr not_active Expired
- 1987-07-01 CN CN 87104553 patent/CN1022931C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1987-07-02 HU HU300487A patent/HU200797B/hu not_active IP Right Cessation
- 1987-07-02 AU AU75059/87A patent/AU597387B2/en not_active Expired
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN87104553A (zh) | 1988-05-04 |
AU7505987A (en) | 1988-01-07 |
JPS6312292A (ja) | 1988-01-19 |
AU597387B2 (en) | 1990-05-31 |
MX168303B (es) | 1993-05-17 |
HU200797B (en) | 1990-08-28 |
FR2601035B1 (fr) | 1989-12-08 |
FR2601035A1 (fr) | 1988-01-08 |
HUT44080A (en) | 1988-01-28 |
CN1022931C (zh) | 1993-12-01 |
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JPH0158953B2 (ja) |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
EXPY | Cancellation because of completion of term |