JPH0451544B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 本発明は、新規なイソプレノイド誘導体および
これを含有する５−リポキシゲナーゼ作用阻害剤
に関するものでる。本発明によつて提供されるイ
ソプレノイド誘導体は酵素である５−リポキシゲ
ナーゼの作用を阻害する活性を有する。アレルギ
ーの発症因子であるロイコトリエンC₄（LTC₄）、
ロイコトリエンD₄（LTD₄）と云つたロイコトリ
エン類は生体内でアラキドン酸から５−リポキシ
ゲナーゼの作用によつて生合成される。 最近ロイコトリエン類はアレルギーのみでなく
腎炎、肝炎、リウマチ、胃潰瘍といつた病態の発
症にかかわつていることが明らかにされている。 従つて、５−リポキシゲナーゼの作用阻害活性
を有する本発明のイソプレノイド誘導体はロイコ
トリエンの生合成を抑制し、アレルギー性の疾患
である喘息、鼻炎とともに腎炎、肝炎、リウマ
チ、胃潰瘍の治療に有用である。 本発明者らはイソプレノイド誘導体を種々合成
し、それらの５−リポキシゲナーゼの作用阻害活
性を鋭意研究した結果、本発明に係るイソプレノ
イド誘導体が強力な５−リポキシゲナーゼの作用
阻害活性を有することを見い出し本発明を完成す
るに至つた。 発明の目的 本発明は、新規なイソプレノイド誘導体および
これを含有する５−リポキシゲナーゼ作用阻害剤
を提供することを目的とする。 上記目的に沿う本発明は、一般式（） （式中Ｒは水素原子又はメチル基を示し、ｍは
０〜３の整数である）で示されるイソプレノイド
誘導体である。 また、本発明は一般式（） （式中Ｒは水素原子又はメチル基を示し、ｍは
０〜３の整数である）で示されるイソプレノイド
誘導体を含有する５−リポキシゲナーゼ作用阻害
剤である。 尚、本発明において５−リポキシゲナーゼ作用
阻害剤とは５−リポキシゲナーゼの作用を抑制す
る作用を有する製剤を意味する。 発明の具体的説明 本発明の前記式（）で示されるイソプレノイ
ド誘導体は下記式（）に示されるカルボン酸誘
導体 （式中、（Ｒ）^lは３，４−ジメトキシメチルオ
キシ基、３−メトキシ−４−メトキシメチルオキ
シ基、３，４−ジヒドロキシ基または３−メトキ
シ−４−ヒドロキシ基を表す。ｎはトランス配置
の二重結合の数を表し、２である。） と下記式（）で示されるイソプレニアルコー
ル （式中ｍは０ないし３の整数である）との縮合
反応及び脱保護基反応を行うことによつて得られ
る。 本発明のイソプレノイド誘導体は５−リポキシ
ゲナーゼ作用阻害剤として使用され、投与量は症
状による異なるが一般に成人１日量10〜2000mg、
好ましくは20〜600mgであり、症状に応じて必要
により１〜３回に分けて投与するのがよい。投与
方法は投与に適した任意の形態をとることがで
き、特に経口投与が望ましいが静注も可能であ
る。 本発明の化合物は有効成分若しくは有効成分の
１つとして単独又は通常の方法で製剤担体あるい
は賦形剤等と混合され、錠剤、糖衣錠、散剤、カ
プセル剤、顆粒剤、懸濁剤、乳剤、注射液等に製
剤化された種々の形態で適用できる。担体あるい
は賦形剤の例としては炭酸カルシウム、リン酸カ
ルシウム、でんぷん、ブドウ糖、乳糖、デキスト
リン、アルギン酸、マンニトール、タルク、ステ
アリン酸マグネシウム等があげられる。 次に実施例および試験例を示して本発明をさら
に具体的に説明するが、本発明はこれらに何ら限
定されるものではない。 比較例 アルゴン雰囲気下、フエルラ酸2.00ｇを塩化メ
チレン40mlに懸濁し、−10℃に冷却する。トリエ
チルアミン2.87ml、クロロ炭酸エチル2.03mlを加
え、30分攪拌後、プレノール0.87ｇを塩化メチレ
ン10mlに溶かした溶液を加え、−10〜０℃で３時
間攪拌する。反応混合物を水に注ぎクロロホルム
で抽出する。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水
硫酸ナトリウムで乾燥する。減圧下溶媒を留去
し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフイー
に付し、クロロホルム溶出画分より４−エトキシ
カルボニルオキシ−３−メトキシシンナム酸プレ
ニルエステル1.78ｇを得る。 ４−エトキシカルボニルオキシ−３−メトキシ
シンナム酸プレニルエステル1.78ｇをメタノール
60mlに溶解し、水15mlを加える。炭酸ナトリウム
0.56ｇを加え、４時間攪拌する。水100mlを加え
た後、1N−塩酸を加え、酸性にする。クロロホ
ルムで抽出し、有機層を水、飽和食塩水で洗浄
し、無水硫酸ナトリウムで乾燥する。減圧下溶媒
を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラ
フイーに付し、クロロホルム溶出画分より４−ヒ
ドロキシ−３−メトキシシンナム酸プレニルエス
テル（）1.02ｇを得る。このものの分光学的デ
ータは下記式（）の構造を支持する。 nmr（CDCl₃）δ：6.30（1H，ｄ，Ｊ＝15Hz），
4.70（2H，ｄ，Ｊ＝7Hz），4.30（2H，ｇ，
Ｊ＝7Hz），3.87（3H，Ｓ），1.8（6H，
DS），1.8（6H，DS），1.35（3H，ｔ，Ｊ＝
7Hz） 実施例 １ アルゴン雰囲気下、５−（３−メトキシ−４−
ヒドロキシフエニル）−２，４−ペンタジエン酸
（２ｇ）の塩化メチレン（50ml）懸濁溶液にジイ
ソプロピルエチルアミン（6.33ml）を加えて０℃
に冷却後、クロロメチルメチルエーテル（2.07
ml）を加え、3.5時間攪拌する。 反応混合物を水にあけ、さらに、1N−塩酸を
加え、塩化メチレンで２回抽出する。有機層を飽
和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸
マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮する。残渣を
シリカゲルカラムクロマトグラフイーに付し、ｎ
−ヘキサン−酢酸エチル（２：1v／ｖ）溶出画
分より、５−（３−メトキシ−４−メトキシメト
キシフエニル）−２，４−ペンタジエン酸メトキ
シメチルエステルを2.72ｇ得る。 ５−（３−メトキシ−４−メトキシメトキシフ
エニル）−２，４−ペンタジエン酸メトキシメチ
ルエステル（2.72ｇ）をメタノール（30ml）に溶
解し、水（５ml）および水酸化ナトリウム（0.47
ｇ）を加え、室温で67.5時間さらに60℃で１時間
攪拌する。 反応液を冷却後、水および1N−塩酸を加え
（PH１以下まで）、酢酸エチルで２回抽出する。有
機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウ
ムで乾燥後、減圧下濃縮する。残渣をシリカゲル
カラムクロマトグラフイーに付し、塩化メチレン
溶出画分より、５−（３−メトキシ−４−メトキ
シメトキシフエニル）−２，４−ペンタジエン酸
を1.97ｇ得る。 アルゴン雰囲気下、５−（３−メトキシ−４−
メトキシメトキシフエニル）−２，４−ペンタジ
エン酸を（1.97ｇ）および４−ジメチルアミノピ
リジン（0.09ｇ）を塩化メチレン（40ml）に溶解
する。０℃でＮ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジ
イミド（1.85ｇ）を加え10分間攪拌した後、プレ
ノール（1.49ml）を加え、室温で23.5時間攪拌す
る。 反応液を濾過し（エーテル洗浄）、濾液に水さ
らに1N−塩酸を加え塩化メチレンで２回抽出す
る。有機層を飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄し、
無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮す
る。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフイー
に付し、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（３：1v／
ｖ）溶出画分より、５−（３−メトキシ−４−メ
トキシメトキシフエニル）−２，４−ペンタジエ
ン酸プレニルエステルを2.23ｇ得た。 ５−（３−メトキシ−４−メトキシメトキシフ
エニル）−２，４−ペンタジエン酸プレニルエス
テル（2.23ｇ）をメタノール（20ml）に溶解し、
ｐ−トルエンスルホン酸（ミクロスパーテル２
杯）を加え、50℃で７時間攪拌する。 反応混合物を飽和食塩水と飽和炭酸水素ナトリ
ウム水溶液の混合液にあけ、酢酸エチルで２回抽
出する。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸
マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮する。残渣を
シリカゲルカラムクロマトグラフイーに付し、塩
化メチレン抽出画分より、５−（３−メトキシ−
４−ヒドロキシフエニル）−２，４−ペンタジエ
ン酸プレニルエステル（）を1.38ｇ得る。この
ものの分光学的データは下記式（）の構造を支
持する。 NMR（CDCl₃）δ：1.73（6H，Ｓ），3.87（3H，
Ｓ），4.63（2H，ｄ，Ｊ＝7Hz），5.87（1H，
ｄ，Ｊ＝15Hz） 実施例 ２ アルゴン雰囲気下、プロトカテキユアルデヒド
（1.93ｇ）の塩化メチレン懸濁溶液（50ml）にジ
イソプロピルエチルアミン（9.74ml）を加えて０
℃に冷却後、クロロメチルメチルエーテル（3.18
ml）を加え、3.5時間攪拌する。 反応混合物を水にあけ、塩化メチレンで２回抽
出する。有機層を食塩水で洗浄し、無水硫酸マグ
ネシウムで乾燥後、減圧下濃縮する。残渣をシリ
カゲルカラムクロマトグラフイーに付し、ｎ−ヘ
キサン−酢酸エチル（３：1v／ｖ）溶出画分よ
り、３，４−ジメトキシメトキシベンズアルデヒ
ドを2.95ｇ得る。 アルゴン雰囲気下、ポタシウムtert−ブトキシ
ド（1.91ｇ）の無水テトラヒドロフラン（30ml）
溶液に−15℃でトリエチル４−ホスホノクロトネ
ート〔80％〕（4.25ml）を滴下し、−15〜−10℃で
35分間攪拌する。さらに、３，４−ジメトキシメ
トキシベンズアルデヒド（2.89ｇ）の無水テトラ
ヒドロフラン（15ml）溶液を滴下した後、室温で
２時間攪拌する。 反応混合物に、飽和塩化アンモニウム水溶液お
よび1N−塩酸を加え、酢酸エチルで２回抽出す
る。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液さら
に飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで
乾燥後、減圧下濃縮する。残渣をシリカゲルカラ
ムクロマトグラフイーに付し、ｎ−ヘキサン−酢
酸エチル（１：1v／ｖ）溶出画分より、５−
（３，４−ジメトキシメトキシフエニル）−２，４
−ペンタジエン酸エチルエステルを3.96ｇ得る。 ５−（３，４−ジメトキシメトキシフエニル）−
２，４−ペンタジエン酸エチルエステル（3.96
ｇ）をメタノール（30ml）に溶解し、水（５ml）
および水酸化カリウム〔86％〕（1.04ｇ）を加え、
室温で2.5時間さらに60℃で３時間攪拌する。 反応液を冷却後、水および1N−塩酸を加え
（PH１以下まで）酢酸エチルで３回抽出する。有
機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウ
ムで乾燥後、減圧下濃縮する。残渣をシリカゲル
カラムクロマトグラフイーに付し、塩化メチレン
溶出画分より、５−（３，４−ジメトキシメトキ
シフエニル）−２，４−ペンタジエン酸を3.26ｇ
得る。 アルゴン雰囲気下、５−（３，４−ジメトキシ
メトキシフエニル）−２，４−ペンタジエン酸
（3.23ｇ）および４−ジメチルアミノピリジン
（0.13ｇ）を塩化メチレン（50ml）に溶解する。
０℃で、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミ
ド（2.72ｇ、を加え５分間攪拌した後、プレノー
ル（1.32ml）を加え、室温で21時間攪拌する。 反応混合物を水にあけ、塩化メチレンで２回抽
出する。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸
マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮する。残渣を
シリカゲルカラムクロマトグラフイーに付し、ｎ
−ヘキサン−酢酸エチル（２：1v／ｖ）溶出画
分より、５−（３，４−ジメトキシメトキシフエ
ニル）−２，４−ペンタジエン酸プレニルエステ
ルを3.24ｇ得る。 ５−（３，４−ジメトキシメトキシフエニル）−
２，４−ペンタジエン酸プレニルエステルを
（3.24ｇ）をメタノール−水（４：１）（25ml）に
溶解し、ｐ−トルエンスルホン酸（ミクロスパー
テル２杯）を加え、50℃で５時間攪拌する。 反応混合物を飽和食塩水と飽和炭酸水素ナトリ
ウム水溶液の混合液にあけ、酢酸エチルで２回抽
出する。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸
マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮する。残渣を
シリカゲルカラムクロマトグラフイーに付し、塩
化メチレン〜塩化メチレン−メタノール（200：
１）溶出画分より、５−（３，４−ジヒドロオキ
シフエニル）−２，４−ペンタジエン酸プレニル
エステル（）を1.29ｇ得る。 このものの分光学的データは下記式（）の構
造を支持する。 NMR（CDCl₃）δ：1.74（6H，Ｓ），4.63（2H，
ｄ，Ｊ＝7Hz），5.84（1H，ｄ，Ｊ＝15Hz） 実施例 ３ 窒素雰囲気下、クロロ炭酸エチル1.74mlを乾燥
塩化メチレン60mlに溶解し、氷冷下５−（４−ヒ
ドロキシ−３−メトキシフエニル）−２，４−ペ
ンタジエン酸のトリエチルアミン2.53ml、乾燥塩
化メチレン20mlの溶液を30分間かけて滴下し、更
に45分間攪拌した後、ゲラニオール1.58mlの乾燥
塩化メチレン溶液10mlを加えた。室温で2.5時間
攪拌した後水を加え、分液後塩化メチレン層を飽
和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥
後、溶媒を減圧留去し、オイル状の生成物を得
た。 先の操作で得られた残渣1.23ｇをメタノール40
mlに溶解し、水10ml、炭酸ナトリウム280mgを加
え、室温で５時間攪拌した。1N塩酸で中和後、
溶媒を減圧留去し、塩化メチレンで２回抽出し
た。塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄後無水硫
酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去して得
られる残渣を分取用薄層クロマトグラフイーに付
し、クロロホルム−メタノール（100：１）で展
開し、主なるバンドを５％メタノール−クロロホ
ルムで溶離し、目的の５−（４−ヒドロキシ−３
−メトキシフエニル）−２，４−ペンタジエン酸
ゲラニルエステル（）670mgを得た。このもの
の分光学的データは下記式（）の構造を支持す
る。 H′NMR（CDCl₃，60MHz）δ：1.48〜1.84
（9H），1.93〜2.22（4H），3.82（3H），4.71
（2H），4.94〜5.62（2H），5.93（1H），6.56
〜7.68（6H） 実施例 ４ 窒素雰囲気下、クロロ炭酸エチル0.83mlを乾燥
塩化メチレン75mlに溶解し、氷冷下５−（３，４
−ジメトキシメトキシフエニル）−２，４−ペン
タジエン酸2.50ｇのトリエチルアミン1.18ml、乾
燥塩化メチレン20mlの溶液を30分間かけて滴下
し、更に45分間攪拌した後、ゲラニオール1.48ml
の乾燥塩化メチレン溶液10mlを加えた。室温で５
時間攪拌後、水を加え、分液後塩化メチレン層を
飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順
次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒
を減圧留去し、オイル状の生成物を得た。 先の操作で得られた残渣をメタノール50mlに溶
解し、ｐ−トルエンスルホン酸−水和物を触媒量
加え、50℃で６時間攪拌した。メタノールを減圧
留去し得られた残渣を５％メタノール−クロロホ
ルムに溶解し、飽和食塩水で洗浄後無水硫酸マグ
ネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去して得られた
残渣を分取用薄層クロマトグラフイーに付し、ク
ロロホルム−メタノール（100：１）で展開し、
主なるバンドを５％メタノール−クロロホルムで
溶離し、目的の５−（３，４−ジヒドロキシフエ
ニル）−２，４−ペンタジエン酸ゲラニルエステ
ル（）580mgを得た。このものの分光学的デー
タは下記式（）の構造を支持する。 H′NMR（CDCl₃，DMSO−d₆ 60MHz）δ：
1.52〜1.80（9H），1.93〜2.26（4H），4.60
（2H），4.86〜5.53（2H），5.87（1H），6.49
〜7.63（6H） 実施例 ５ アルゴン雰囲気下５−（４−ヒドロキシ−３−
メトキシフエニル）２，４−ペンタジエン酸0.45
ｇを塩化メチレン10mlに懸濁し、−10℃に冷却す
る。トリエチルアミン0.58mlクロロ炭酸エチル
0.39mlを加える。30分攪拌後フエルネソール0.41
ｇを塩化メチレンに溶かした溶液を加え−10℃〜
０℃で３時間攪拌する。反応混合物を水に注ぎク
ロロホルムで抽出する。有機層を飽和食塩水で洗
浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥する。減圧下溶
媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグ
ラフイーに付し、クロロホルム溶出画分より５−
（４−エトキシカルボニルオキシ−３−メトキシ
フエニル）−２，４−ペンタジエン酸フアルネシ
ルエステル0.38ｇを得た。 ５−（４−エトキシカルボニルオキシ−３−メ
トキシフエニル）２，４−ペンタジエン酸フアル
ネシルエステル0.38ｇをメタノール10mlに溶解
し、水２ml炭酸ナトリウム0.08ｇを加え３時間攪
拌する。反応混合物に水10mlを加える。1N−塩
酸に加え酸性にしたクロロホルムで抽出する。有
機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム
で乾燥する。減圧下溶媒で留去し、残渣をシリカ
ゲルカラムクロマトグラフイーに付し、クロロホ
ルム溶出画分より５−（４−ヒドロキシ−３−メ
トキシフエニル）２，４−ペンタジエン酸フアル
ネシルエステル（）0.22ｇを得た。このものの
分光学的データは下記式（）の構造を支持す
る。 nmr（CDCl₃）δ：5.93（1H，ｄ，Ｊ＝15Hz），
4.71（2H，ｄ，Ｊ＝7Hz），4.26（2H，ｇ，
Ｊ＝7Hz），3.87（3H，Ｓ），1.35（3H，ｔ，
Ｊ＝7Hz） 試験例 ５−リポキシゲナーゼの作用阻害活性 ラツト由来好塩基球性白血病、細胞株RBL−
１をイーグル（Eagle）の基本培地〔ギブコラポ
ラトリーズ（GibcoLaboretories）社製〕に10％
FCSを含む培養液中に懸濁５％CO₂インキユベー
ター内で37℃にて培養した後、培養液を４℃にて
遠心分離し細胞を集める。該細胞をPH7.4のリン
酸緩衝液に再浮遊し細胞密度1.0〜3.0×10⁷個／ml
とする。該浮遊を超音波細胞破砕機で処理したあ
と、30分間15000rpm4℃で遠心分離し、上清を５
−リポキシゲナーゼ酵素液とする。放射性標識ア
ラキドン酸（10μキユリー／ml）を20μl、および
試験する本発明に係るイソプレノイド誘導体をそ
れぞれ試験管に入れ、これにリン酸緩衝液0.40
ml、上記酵素液0.10ml、100mM CaCl₂（塩化カル
シウム）溶液５mlを加え、37℃で15分間反応させ
る。氷冷後1N−HCl（塩酸）1dropを加え、酢酸
エチル２mlで抽出する。抽出液を濃縮して得られ
る濃縮液をシリカゲル薄層プレート（Merck
60F₂₅₄）にスポツトし展開する。阻害活性の測定
は、ラジオ薄層クロマトスキヤナー〔u¨nnschicht
−Scanner LB2723、ベルスオルド
（Bertholdl）社製〕で検出される５−リポキシゲ
ナーゼ生成物である５−HETE（５−（Ｓ）−ヒド
ロキシ−６，８，11，14−エイコサテトラエン
酸）に相当する部分を集め、液体シンチレーシヨ
ンカウンターで放射能を測定することによつて行
う。前記５−リポキシゲナーゼ生成物の生産量の
減少により５−リポキシゲナーゼの作用阻害活性
が確認される。試験の結果、下記の表１に示す如
く著名な５−リポキシゲナーゼ作用阻害活性を見
い出した。また、表１に示さない本発明に係るイ
ソプレノイド誘導体についても同様な５−リポキ
シゲナーゼ作用阻害活性を有することが確認され
た。

【表】 尚、表中50％阻害濃度とは本発明に係るイソプ
レノイド誘導体を導入しない場合の５−HETE
の産生量を100％とした場合、該イソプレノイド
誘導体の導入により前記５−リポキシゲナーゼ生
成物の産生量を50％まで抑制する為に要したイソ
プレノイド誘導体濃度を意味する。 急性毒性 ICR系雄性マウス（５週令）を用いて経口投与
による急性毒性試験を行つた。本発明の化合物の
LD₅₀値はいずれも100mg／Kg以上であり、有効量
に比べて高い安全性が確認された。 発明の作用効果 本発明によれば、新規なイソプレノイド誘導体
およびこれを含有する５−リポキシゲナーゼ作用
阻害剤が提供される。 本発明の上記化合物は、５−リポキシゲナーゼ
の作用阻害活性を有することが明らかにされた。
即ち、上記化合物は５−リポキシゲナーゼの作用
を阻害することにより、５−リポキシゲナーゼの
作用によつて生成されるLTC₄，LTD₄と云つた
ロイコトリエン類の産生を抑制することができ
る。従つて、該イソプレノイド誘導体は５−リポ
キシゲナーゼ作用阻害剤としてアレルギー性疾患
である喘息、鼻炎とともに、胃炎、肝炎、リウマ
チ、胃潰瘍に対して有効に使用することができ
る。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 一般式（） （式中Ｒは水素原子又はメチル基を示し、ｍは
   ０〜３の整数である）で示されるイソプレノイド
   誘導体。 ２ 一般式（） （式中Ｒは水素原子又はメチル基を示し、ｍは
   ０〜３の整数である）で示されるイソプレノイド
   誘導体を含有する５−リポキシゲナーゼ作用阻害
   剤。