JPH04500513A - 低骨髄毒性マイトマイシン誘導体、その製造方法およびその使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 低骨髄毒性マイトマイシン誘導体、その製造方法およびその使用発明の分野 本発明は医薬品およびその使用に関する。

発明の背景 マイトマイシンは一般式（■）： で示される一群の化合物である。

マイトマインンＡ、ＢおよびＣは以下の表１に示すように互いに関連性が有り、 式Ｉ申のＸ、Ｙおよび２は、各々、表１のものを意味する。

表１ マイトマイシン　ｘ　ｙ　ｚ Ａ　、　−０ＣＨｘ　−０ＣＨ３Ｈ Ｂ　−ＯＣＨｓ　−ＯＨ−ＣＨｓ Ｃ−Ｎ　Ｈｚ　−ＯＣＨｓ　−Ｈ マイトマイシンは以下の骨組構造（■）：を有するマイトサン（ｍｉ　ｔｏｓａ ｎｅ）がら得られる。

該マイトサンは、人工的に制御されｔ；条件下、液体栄養培地中、細菌であるス トレプトマイセス・セスビトサス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｃａｅｓｐｉ　ｔ ｏｓｕｓ）の培養中に形成される。ハタら（）Ｉａｔａ　ｅｔ　ａｌ、）に対す る米国特許＄３，６６０，５７８号に開示されるように、得られた菌糸を分離し た後、活性炭、あるいは、好ましくは非イオン交換樹脂吸着、有機溶媒抽出また はアルミナ上でのクロマトグラフィーにより種々のマイトマインンが単離される 。

マイトサンは優れた抗生物質であるが、そのヒト血液に対する毒性のために用途 が限られる［マツイら（ｍａｔｓｕｉ　ｅｔ　ａｌ、）に対する米国特許第３． ４５０，７０５号参照〕。比較的高い毒性を有する化合物ゆえに、抗生物質作用 活性を増大し、毒性を減少させるためマイトマイシンの誘導体の研究がすすんだ 。

例えば、マツイら、米国特許第３．４５０．７０５号は、その７位がアミノ、低 級アルキルアミノ、フェニルアミノまたはピリジルでＲ換さり、かつ、そのＩａ 位がハロアルカノイル、ハロベンゾイル、ニトロベンゾイル、アルケノイル、ア セチルグリシノ呟ソルボイルまたはアセチルメチオニルで置換されたマイトマイ シン化合物を開示している。

マツイら、米国特許第３．５５８，６５１号は、１ａ−アシル−７−アジルオキ シー９ａ−メトキシ化合物であるマイトサン誘導体を開示している。

まＩ；、ある種のマイトマイシンおよびマイトマイシン誘導体は抗！！Ｉ瘍活性 を有する。オオポンら（Ｏｂｏｓｈｉ　ｅｔ　ａｌ、）　、癌（Ｇａｎｎ、）、 ５８：３１５−３２１（１９６７）；ウスブチら（ｌｌｓｕｂｕｃｈｉ　ｅｔ　 ａｌ、）、癌、５８　：　３０７〜３１３　（１９６７）；マツイら、ジャーナ ル・オブ・アンティバイオティックス（Ｊ、　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ）　Ｘ　 Ｔｌ　：　ｌ　８９〜１９８　（１９６８）；マツイらに対する日本国特許第６ ８０６６２７号［ケミカル・アフ′ストラクツ（Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ａｂｓｔａ ｒｃｔｓ）　］；およびチェンら（Ｏｉｅｎｇ　ｅｔ　ａｌ、）　、ジャーナル ・オブ・メディカル・ケミストリー（Ｊ、　Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｍ、）、２０ニア ６７〜７７０　（）９７７）参照。

一方、マイトマイシンＣは比較的広域の抗菌スペクトルを有する実験腫瘍に対し て活性であり、その毒性および骨髄抑制作用は臨床用途での使用を制限する［マ イトマイシンＣの現状および新規開発カーク−ら（Ｃａｒｔｅｒ　ｅｔ　ａｌ、 ）発行、アカデミツク・プレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ）、米国ニュー ヨーク州（１９７９）］、前臨床および臨床学的研究において、マイトマイシン Ｃは種々のネズミおよびヒト新生物に対して活性を有するが、激し１１遅延型骨 髄毒性をも有する。ゴールディン・エイら（Ｇｏｌｄｉｎ　Ａ、　ｅｔ　ａｌ、 ）　、マイトマイシンＣのＮＣＩ−ＥＯＲＴＣシンポジウム、ベルギー国、ブリ ュッセル（１９８１）］。

他の研究では、５−フルオロウラシル、アドリアマイシンおよびマイトマイシン Ｃの組合せが進行した胃癌および直腸癌を有する患者に有効であることが判明し た。２ケ月毎に１回の投与法によるマ　。

イ１マインンＣの投与に、この投与法を組み込むことにより、化合物の治療制限 遅型延骨髄抑制作用を減少させる。シエイン・ビイ・ニスら（Ｓｃｈｅｉｎ、　 Ｐ、Ｓ、　ｅＬ　ａｌ、）、マイトマイシンＣの現状および新開発、１３３〜１ ４３、カーターら発行、アカデミツク・プレス、米国ニューヨーク州（１９７９ ）。

改良された治療特性を有する化合物を得るため、マイトマイシンＣの多くの合成 誘導体が製造された。これらの誘導体としては、アジリジン環、カルバモイル上 の置換反応、ヒドロキシメチル側鎖上のアンル基置換反応、および他の官能基、 特に置換アミンでのキノリン環の７位置換基の置換が挙げられる。しかし、レマ ーズによって米国特許第４，２６８，６７６号に開示されるように、日本におけ る最近の研究にも見られるマイトマイシンＣの７位ヒドロキシ類似体を除いて、 これらの類似体は臨床薬として現れなかった。この類似体はマイトマイシンＣよ り白血球減少が少ないことが判明したが、効力が少ない。またレマーズら、前掲 に開示されるように、これらは主に抗菌活性のグこめに製造されたマイトサンタ イプの合成マイトマイシン類似体である［モットら（Ｍｏｔｔ　ｅｉ　ａｌ、） 　、ジャーナル・オブ・メディカル・ケミスｉ・リ−１２１：４９３　（１９７ ８）］。

キ／シタら（Ｋｉｎｏｓｈｉｔａ　ｅｔ　ａｌ、）　、ジャーナル・オブ・メデ ィカル・ケミストリー、１４　：１０３−１２　（１９７１）は、その１ａｘ７ および９ａ位が置換されたマイトマイシンの多くの誘導体を開示している。特に 、その１８位がスルホニル、オルト−置換ベンゾイルで置換された化合物および アシル誘導体が報告された。

イユンガー・ビー・ニスら（！ｙｅｎｇｅｒ　Ｂ、Ｓ、　ｅｔ　ａｌ、）　、ジ ャーナル・オブ・、メディカル・ケミストリー、２４＋９７５〜９８１（１９８ ］）は一連の３１個のマイトマイシンＣ並びに７位および１８位に種々の置換基 を有するポルフィロマイシン類似体を開示している。最も有効な７位の置換基と しては、アジリジン、２−メチルアジリジン、プロパルギルアミン、フルフリル アミン、メチルグリシネートおよび３−アミノピリジンが挙げられる。

イエンガー・ビーら、ジャーナル・オブ・メディカル・ケミストリー、２６：１ ６〜２０　（１９８３）は一連の７位置換マイトマイシンＣおよびポルフィロマ イシン誘導体、並びに、それらの標準の抗腫瘍系でのスクリーニングを開示して いる。著者らは７位がキノリン環の減少を制御し、これは、７位の置換反応を変 えることにより標準細胞とある種の癌細胞の選択能力を得ることができることを 示唆すると報告している。

イユンガー・ビー・ニスら、ジャーナル・オブ・メディカル・ケミストリー、２ ６：１４５３〜１４５７　（１９８３）は、その７位が第二アミンで置換された ２０個のマイトマイシン誘導体を開示している。これらの類似体のうちの１．１ 個は、Ｐ３８３３ネズミ自血病に対してマイトマイシンＣより活性であり、これ ら１１個のうちの２個は非常に白血球減少が僅かであった。著者らは、類似体の 抗腫瘍活性と物理化学的性質は全く量的関係がないが、キノリン減少の相対的な 容易性は活性に関係すると報告している。

イエンガー・ビー・ニスら、ジャーナル・オブ・メディカル・ケミストリー、２ ９：］８６４〜１８６８　（１９８６）は、７位置換アミノ１．２−アジリジノ マイトセンの製造を開示している。著者らは、アジリジン窒素上のメチル基によ り効力が付与されると報告した。ヒドロキロリンを減少させるのが困難である７ 位アミノマイトセン誘導体は実質的に不活性である。

ザミーー、Ｚスら（Ｓａ＋ｏｉ、　Ｓ　ｅｔ　ａｌ、）　、ジャーナル・オブ・ メディカル・ケミストリー、２７：７０１〜７０８　（１９８４）は一連の３０ 個のＮ７−７工ニルー置換マイトマイシンＣ類似体を開示している。７位にピラ ゾリルまたはアミノピリジル置換基を有する２個の化合物が、Ｐ３８３８ネズミ 白血病に対する活性においてマイトマイシンＣより明らかに優れていることが開 示されＩ：。

サミー・ティーら（Ｓａｍｉ、　Ｔ　ｅｔ　ａｔ、）、ジャーナル・オブーメデ ィカル・ケミストリー、２２：２４７〜２５０（１９７９）は、マウスの白血病 １２１Ｏに対して強い抗腫瘍活性を示す３個の二糖類誘導体を含むグルコシルア ミンのＮ−（２−クロロエチル）−Ｎ−二トロソ力ルボニル誘導体を開示してい る。また、Ｎ−ニトロン尿素のグルコビラノース誘導体は免疫抗原性および骨髄 節約作用特性（ｍａｒｒｏｗ−ｓｐａｒｉｎｇ　ｐｒｏｐｅ’ｒｔｉｅｓ）を有 する。アンダーノンら（Ａｎｄｅｒｓｏｎ　ｅｔ　ａｌ、）　、キャンサー・リ サーチ（Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ）３５　：　７６１−７６５　；バナ ・／シら（Ｐａｎａｓｃｉ　ｅｔ　ａｌ、）　、ジャーナル・オブ・クリニカル ・インベステイゲーション（Ｊ、　Ｃ１１ｎ。

Ｉｎｖｅｓｔ、）、６４：１１０３−１１１１　（１９７９）。

米国特許第４．７２０．５４３号では、以下の一般式（■）：［式中、Ｒ１はＮ Ｈ３、炭素数１〜４のアルコキシおよびグリコジル残基よりなる群から選択され る基；およびＲ２は水素、炭素数１〜４のアルキルおよびグリコジル残基よりな る群から選択される基を意味し；ただし、Ｒ１とＲ２のいずれか一方がグリコジ ル残基を有する〕 で示される化合物が開示されている。

発明の概要 本発明は以下の一般式（■）： ［式中、ｎは０またはｌ； Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノ ／ル、セロビオシル、ラクトシル、グルコピラノシル、ヤルトンルおよび２−ア ミノ−１，３−ンクロヘキサンジオール、またはそれらのヒドロキシルー保護ベ ルアセテート誘導体よりなる群から選択される基； Ｒは水素： Ｒ１は水素、炭素数１〜４のアルキルまたはフェニルにより置換された炭素数１ 〜４のアルキル、ヒドロキシフェニル、インドリル、メルカプト、炭素数１〜４ のアルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、グアニジノ、イミダゾール あるいはカルバミルを意味し；あるいは ＲおよびＲ１は一緒になって５または６員の窒素含有環を形成する］ で示されるマイトマイノン誘導体に関する。

また、本発明は以下の構造式（■）： ［式中、ｎ、Ｒ，Ｒ’８よびＹは前記と同意義、Ｒ２はＮＨ，−またはＣＨ，Ｏ −を意味する］ で示されるマイトマイシン誘導体に関する。

また、本発明は、 以下の構造式（■）： ［式中、Ｒ２は前記と同意義：および Ｒ３は２−　（３−シアノ−４−モルホリニル）−２−デオキシピラノシルサツ カリドまｔ二は２−（４−モルホリニルシピラノシルサツカリドを意味する］ で示されるマイトマイシン誘導体に関する。

また、本発明は、 （ａ）Ｎ−保護アミノ酸とアルコールを、脱水剤の存在下で縮合して活性化エス テルとし、 （ｂ）工程（ａ）で得られた活性化ニスチルとアミノ化合物を縮合して保護アミ ノ酸−アミノ化合物共役体とし、（ｃ）二〇（ｂ）で得られｊ；保護アミノ酸− アミノ化合物共役体の保護基を除去してアミノ酸−アミノ化合物共役体とし、つ いで、（ｄ）工程（Ｃ）で得られたアミノ酸−アミノ化合物共役体をマイトマイ シンＡと縮合してマイトマイシン誘導体を得ることを特徴とする、式（■）： ［式中、ｎは］； Ｙはグルコピラノジノ呟ガラクトピラノジノ呟マンノピラノシル、キ／ロビラノ シル、七ロビオンル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシルおよび２−ア ミノ−１，３−シクロヘキサンＣ゛オール、またはそれらのヒドロキシル−保護 ベルアセテート誘導体よすする群から選択される基： Ｒは水素： Ｒ’は水素、炭素数１〜４のアルキルまたはフェニルにより置換された炭素数１ 〜４のアルギル、ヒドロキシフェニル、インドリル、メルカプト、炭素数１〜４ のアルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、グアニジノ、イミダゾール あるいはカルバミルを意味し：あるいは Ｒ８よびＲ１は一緒ｔこなって５または６員の窒素含有環を形成する］ で示されるマイトマイシン誘導体の製造方法に関する。

また、本発明は、 （ａ）ビス（アセトアルデヒド−２−イル）エーテルと２−アミノ−２−デオキ シサツカリドを、ホウ水素化シアノの塩の存在下で縮合して２−デオキシ−２− （３−シアノ−４−モルホリニル）サツカリドおよび２−チオキレ−４−モルホ リニルサツカリドとし、（ｂ）工程（ａ）で得られた２−デオキシ−４−モルホ リニルサンカリドから２−デオキシ−２　−（３　−　：シアノ−４−モルポリ ニルサツカリドを分離し、 （ｃ）工程（ｂ）で得られた２−デオキシ−２−（３−シアノ−４−モルホリニ ル）サツカリドとハロゲン化アセチルを反応させて２−デオキシ−１−ハロー２ −（３−シアノ−４−モルホリニル）ベルアセチルサツカリドとし、 （ｄ）工程（ｃ）で得られた２−デオキシ−１−ハロー２−（３−シアノ−４− モルホリニル）ペルアセチルサツカリドをチオシアン酸銀で処理してサツカリド −ｌ−チオシアネートとし、（ｅ）工程（ｄ）で得られ！；サツカリドー１ーチ オシアネートとマイトマイシンＣまたはマイトマイシンＡと反応させてマイトマ イシンＣ−またはマイトマイシンＡ−サツカリドペルアセテートカルボチオアミ ドとし、ついで、 （ｆ）工程（ｅ）で得られたマイトマイシン−・Ｃ−サツカリドベルアセテート を加水分解してマイトマイシン誘導体を得るこトラ特徴とする、式（■）： 口 ［式中、Ｒ２はＮＨ，−またはＣＨｓＯ−、およびＲ１は２−（３−シアノ−４ −モルホリニル）−２−デオキシサツカリドを意味する］ で示されるマイトマイシン誘導体の製造方法に関する。

また、本発明は、 （ａ）ビス（アセトアルデヒド−２−イル）エーテルと２−アミノ−２−デオキ シサツカリドを、ホウ水素化シアノの塩の存在下で縮合して２−デオキシ−２− （３−シアノ−４−モルホリニル）サツカリドおよび２−デオキシ−２（４−モ ルホリニル）サツカリドとし、 （ｂ）工程（ａ）で得られた２−デオキシ−２−（３−シアノ−４−モルホリニ ル）サツカリドから２−デオキシ−２−（４−モルホリニル）サツカリドを分離 し、 （Ｃ）工程（ｂ）で得られた２−デオキシ−２−（４−モルホリニル）サツカリ ドとハロゲン化アセチルを反応させて２−デオキシ−１−ハロー２−（４−モル ホリニル）ベルアセチルサツカリドとし、 （ｄ）工程（ｃ）で得られた２−デオキシ−１−ハロー２−（４−モルホリニル ）ベルアセチルサツカリドをチオシアン酸銀で処理してサツカリド−１−チオシ アネートとし、（ｅ）工程（ｄ）で得られたサツカリド−１−チオシアネートと マイトマイシンＡまたはマイトマイシンＣと反応させてマイトマイシンＡ−また はマイトマイシンＣ−サツカリドベルアセテートカルボチオアミドとし、ついで 、 ＜ｒ）工程（ｅ）で得られたマイトマイシン−〇−サツカリドベルアセテートを 加水分解してマイトマイシン誘導体を得ることを特徴とする、以下の式（■）： ［式中、Ｒ’ｌ；！ＮＨ！−またｌ：ＩＣＨｓＯ−；　およびＲ３は（４−モル ホリニル）−２−デオキシサツカリドを意味する］ で示されるマイトマイシン誘導体の製造方法に関する。

また、本発明は、 （ａ）マイトマイシンＣと無水コハク酸を塩基性条件下で縮合してマイトマイシ ンＣ−１ａ−コハク酸エステルとし、（ｂ）工程（ａ）で得られたマイトマイシ ンＣ−１ａ−コハク酸エステルと、式（■）： ［式中、Ｒ，Ｒ’およびｎは前記と同意義Ｙ　ｐはグルフビラノシノ呟ガラクト ピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル 、グルコフラノシル、マルトシルおよび１゜３−シクロヘキサンジオール−２− イルのヒドロキシル−保護誘導体よりなる群から選択されるヒドロキシル−保護 サツカリドを意味する］ で示される化合物を縮合し、ついで、 （Ｃ）ヒドロキシル保護基を除去してマイトマイシン誘導体を得ることを特徴と する、以下の式（Ｖ）：［式中、ｎは０またはｌ； Ｙはグルコ７ラノシル、ガラクトピラノシｌし、マンノピラノシル、キシロピラ ノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコ７ラノシルマルトシル、ｌ，３−シ クロヘキサンジオール−２−イルよりなる群から選択される基： Ｒは水素： Ｒ１は水素、炭素数１〜４のアルキルまたはフエニＪしで置換された炭素数１〜 ４のアルキル、ヒドロキシフェニル、インドリル、メルカプト、炭素数１〜４の アルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ、アミへグアニジへイミダゾールあるい はカル／＜ミル；あるし１１マ、ＲおよびＲ１は一緒になって５まＩ；は６員の 窒素含有環を形成しＲ２はＮＨ２を意味する］ で示されるマイトマイシン誘導体の製造方法に関する。

まｔ；、本発明は、 （ａ）マイトマイシンＡと無水コノ・り酸を塩基性条件下で縮合してマイトマイ シンＡ−１ａーコハク酸エステＪしとし、（ｂ）工程（ａ）で得られたマイトマ イシンＡ−１ａ−コハク酸エステルと、式（■）： ［式中、Ｒ，Ｒ’およびｎは前記と同意義、Ｙ２はグルコピラノシル、ガラクト ピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル 、グルコ７ラノシル、マルトシルおよびｌ。

３−シクロヘキサンジオールのヒドロキシル−保護誘導体よりなる群から選択さ れるヒドロキシルー保護サツカリドを意味する１で示される化合物を縮合し、つ いで、 （Ｃ）ヒドロキシル保護基を除去してマイトマイシン誘導体を得ることを特徴と する、式（Ｖ）： ［式中、ｎはＯまたはｌ； Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノ シル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、］、］３ー シクロヘキサンジオールー２イルよりなる群から選択される基； Ｒは水素： ＲＩは水素、炭素数１〜４のアルキルまたはフェニルで置換された炭素数１〜４ のアルキル、ヒドロキシフェニル、インドリル、メルカプト、炭素数１〜４のア ルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、グアニジノ、イミダゾールある いはカルバミル：あるいは、ＲおよびＲＩは一緒になって５または６員の窒素含 有環を形成しＲ２はＣ）１．０−を意味する〕 で示されるマイトマイシン誘導体の製造方法に関する。

また、本発明は、本発明の医薬組成物を動物に投与することを特徴とする細菌感 染の治療方法に関する。

また、本発明は、本発明の医薬組成物を動物に投与することを特徴とする成長抑 制を受け易い癌細胞の成長抑制による癌の治療方法に関する。

好ましい具体例の詳説 本発明のマイトマイシン誘導体の合成製剤は、その出発時点でマイトマイシンＣ を含有する。マイトマイシンＣは、一般にチャンら、ジャーナル・オブ・メディ カル・ケミストリー、２０　＋　７６７〜７７０（１９７７）に開示される方法 により製造される。また、マイトマイシンＣは、マツイ・エムら、ジャーナル・ オブ・アンティバイオティックス、Ｘｎ：　１８９　（１９６８）に記載のよう に、マイトマイシンＡをメタノール−アンモニア溶液で処理することによりマイ トマイシンＡから得ることができる。

ｎがＯＣＸ）である式（■）のマイトマイシン誘導体は、塩基性条件下、極性溶 媒中でマイトマイシンＡ（■）のメトキシ基を、アミノ化合物、例えば、グルコ サミン（Ｙ−ＮＨｚ；　（ｆｆ））のアミノ基と置換してＮ’−１を換マイトマ イシ〉誘導体（Ｘ）とすることにより得られる（以下の反応式１参照）。

７位が置換されてもよいアミノ化合物（Ｙ−ＮＨ，）としては、それらに限定す るものではないが、グルコサミン、ガラクトサミン、マンノサミン、キシロサミ ン、七ロビオサミン、マルトサミンおよび２−アミノ−１，３−シクロヘキサン ジオール並びにそれらのヒドロキシルー保護ベルアセテート誘導体が挙げられる 。好ましくは、置換基「Ｙ」を有するサツカリドは、その２位がアミノ基で置換 されている。本発明を実施するのに用いてもよい極性有機溶媒としては、メタノ ール、エタノール、プロパツール、ジメチルスルホキシドおよびジメチルホルム アミドが挙げられる。反応の塩基性条件を付与する好適な塩基としては、炭素数 １〜３のトリアルキルアミン、ジイソプロピルユチルアミン、１．８−ジアザビ シクロ［５，４，０］ウンデク−７−ニン（ＤＢＬＩ）等のアルキルアミンが挙 げられる。

一般に、マイトマイシンＡおよびアミン誘導体は１：１０モル比で存在するか、 過剰のアミ、ノ誘導体が存在してもよい。十分な塩基が反応混合物中に存在して 反応がずっと塩基性を維持することを保証する。

式Ｘで示される好ましいマイトマイシン誘導体としては、Ｎ７−（２−デオキシ グルコビラノシル）マイトマイシンＣ，Ｎ’−（２−デオキ、５カラクトオビラ ノシル）マイトマイシンＣ８よびＮ′−（テトラアセ千ルー２−デオキシガラク トピラノシル）マイトマイシンＣが挙１″Ｉられる。

７５式１ ｎが１である式（ＴＶ）のアミノ酸結合マイトマイシン誘導体は、Ｎ−保護アミ ノ酸、例えば、Ｎ−ヒドロキシカルボニル誘導体（ＸＩ）と、活性化エステルを 生じさせることができるＮ−ヒドロキシスクシンアミド等のアルコールおよび脱 水剤を縮合して活性化エステル（１１１）とすることによりマイトマイシンＡか ら製造してもよい（反応式■）。このプロセスで用いる脱水剤としては、それら Ｉ：＠定するするものではないが、ジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ） 、シュチルアゾ、゛カルボキシレート（Ｄ　Ｅ　Ａ　Ｄ）およびトリフェニルホ スフィンか挙げられる。活性化エステル（ＩＩ）を前記のいずれかのアミン化合 物（ＩＩ）で処理すると保護アミノ酸−アミノ化合物共役体（ＸＩ［Ｉ）が得ら れる。例えば、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル基を水添分解することにより保護 基を除去すると遊離アミノ誘導体（Ｘ　ＩＶ）が得られる。ついで、前記のよう に、−０ＣＨｓの置換により化合物（ＸＩＶ）をマイトマイシンＡと縮合すると アミノ酸結合マイトマイ、ン誘導体（ＩＶ）が得られる。

ｎが１、Ｒ’がＨ，ＲがＨである式（ＴＶ）で示される好ましいマイトマイシン 誘導体としては、Ｎ’−［［ｒ（２−デオキシ−２−グルコピラノシル）アミノ 〕カルボニル］メチル］マイトマイシンＣおよびＮ’−［［〔（テトラアセチル −２−デオキシ−２−グルコピラノシル）アミノ］カルボニル］メチル］マイト マイシンｃが挙げられる。

反応式■ Ｒ１がＮＨ，、ｎがＯである式（Ｖ）で示されるマイトマイシン誘導体は、マイ トマイシンＣ（ＸＶＩ）と無水コハク酸を縮合してアミド（Ｘ■）とし、前記の いずれかの脱水剤を用いてヒドロキシル−保護アミノ誘導体Ｙ’−ＮＨ，（Ｘ■ ）と縮合し、ついで脱保護して（Ｘ　Ｖ）とすることにより製造される（反応式 ■参照）。

式（Ｘ　Ｖ）で示される好ましいマイトマイシン誘導体としては、Ｎ’−［Ｒ２ −［［（２−デオキシ−２−グルコピラノシル）アミノ〕カルボニル］エチル］ カルボニル］マイトマイシンＣが挙げられる。

反応式： Ｂ２が一０ＣＨ１、ｎが０である式（Ｖ）で示されるマイトマイシン誘導体（以 下の式（Ｘｌり　’）は、無水メタノール中でマイトマイシンＣ（ＸＮ’ｌ）を メトキシドナトリウムで処理してマイトマイシンＡ（■）とし、ついで、無水コ ハク酸で縮合してマイトマイシンＡ−１ａ−コハク厳エステル（ＸＸ）とするこ とにより製造される（図式■参照）。前記のように、（ＸＸ）のカルボン酸基と ヒドロキシル−保護アミノ酸誘導体Ｙ’−ＮＨ，（Ｘ■）を縮合し、ついで、脱 保護して（Ｘ　［）を得る。

式（Ｘ■）で示される好ましいマイトマイシン誘導体としては、Ｎ’−［［２− ｆ　［（２−デオキシ−２−グルコピラノシル）アミベカルポニル１ユチル］カ ルボニル］マイトマイシンＡが挙げられる。

反応式へ゛ 式（Ｖｌ）のマイトマイシン誘導体は反応酸Ｖで示された順序に従って製造され る。３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン（ＸＩＩ）を、極性有機溶媒中、 水性過ヨウ化ナトリウムで処理してビス（アセトアルデヒド−２−イル）エーテ ル（Ｘｎ）とし、それをホウ水素化シアノの塩の存在下で２−アミノ−２−デオ キシ−サツカリド（ＸＸＩＩＩ）と縮合して２−デオキシ−２−（３−シアノ− ４−モルホ’Ｊ／）　サラカリＦ　（（ＸＸｒＶａ）　、Ｑ−−ＣＮ）および２ −デオ＊シー４−モルホ！Ｊニルサッカ！Ｊド（（ＸＸＩＶｂ）、Ｑ−−Ｈ）と し、ついで、例えば、カラムクロマトグラフィーにより分離する。

ホウ水素化シアノの塩としては、ホウ水素化シアノのアルカリ金属塩が挙げられ 、好ましくはシアン化ホウ水素化ナトリウムである。

サツカリド誘導体（ＸＸＩＶａ）をハロゲン化アセチルで処理して２−デオキシ −１−ハロー（４−モルホリニル）ベルアセチルサツカリドとし、チオシアン酸 銀と反応させてｌ−チオシアネートサツカリド（ＸＸＶ）を得る。チオシアネー ト（ＸＸＶ）をマイトマイシンＣ（ＸＶＩ）と縮合してマイトマイシンＣ−サツ カリドペルアセテートカルボチオアミド（ＸＸ■）を得る。（Ｘ　Ｘ　Ｖｌ）を 、例えば、メタノール性アンモニアで脱アシル化して（ＶＩ）（Ｑ−−ＣＮまた はＨ）を得る。

式（Ｖｌ）で示される好ましいマイトマイシン誘導体としては、２−（３−シア ノ−４−モルホリニル）２−デオキシグルコピラノシルマイトマイノン−１ａ− カルボチオアミドおよび２−（３−シアノ−４−モルホリニル）−２−デオキシ ガラクトピラノシルマイトマイシン−１８−カルボチオアミドが挙げられる。

反応式＼。

本発明の化合物は医薬上許容される塩として存在してもよい。好ましいアニオン としては、塩素、臭素、ヨウ素等の（ハロゲン酸から得られｔ：）ハロゲン化物 が挙げられる。他のアニオンとしては、スルホネートまｔ；はｐ−１ルエンスル ホネートが挙げられる。

抗生物質として、本発明の化合物は親化合物の抗菌作用を受け易いすべての細菌 に対して有効であり、該細菌としては、それらに限ロコッカスＣ４＞　、ストレ プトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、コリネバクテリウム（Ｃｏｒｙ ｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｏ＋）　、へげられる。本発明の化合物で治療できる特定 の細菌としては、シニス・シトレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ｃｉｔ ｒｅｕｓ）　、サルシナ・ルテア（Ｓａｒｃｉｎａ　１ｕｔｅａ）　、ディグロ コツカス・ニューモニエ（Ｄｉ　１ｏｃｏｃｃｕｓ　ｎｅｕｍｏｎｉａｅ）　、 ストレプトフッカス−へモリティカス（Ｓｔｒｅ　ｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｈｅｍｏ ｌｙｔｉｃｕｓ）　、ストレプトコッカス・ラクテ７）、プロテウス・ブルガリ ス（Ｐｒｏｔｅｕｓ　ｖｕｌｇａｒｉｓ）　ｓす（Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ａｂｏｒ ｔｕｓ）　、プルセラ拳メガセリウム（Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｍｅｇａｔｈｅｒｉ ｕｍ）　、プルセラ・マイコイデス（Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｍｙｃｏｉｄｅｓ）　 、プルセラーアンスラシラス（Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ａｎｔｈｒａｃｉｕｓ）、ミ クロバクテリウム（Ｍｙｃｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）ＡＴＣＣ６０７、ミクロバ クテリウム・アビアム（Ｍｙｃｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ肛」徂）、ミクロバクテ リウム・７レイ（Ｍｙｃｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｐｈｌｅｉ）、ノカルジア・ アステロイデス（Ｎｏｃａｒｄｉａ　ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ）　、サツカロ本発 明のマイトマイシン誘導体はインビトロで防腐薬として、例えば殺菌に有用であ る。また、該化合物は例えば、ブドウ球菌性皮膚炎、細菌性肺炎、レグトスピラ 症、リケッチャ症、サルモネラ症等の際に病原細菌と戦う治療薬として局所的か つ内的に有用である。

典型的に、局所適用の場合、本発明のマイトマイシンは０．０　］〜】０００μ ／ｒａＱの濃度を有する組成物で適用される。

抗腫瘍剤として、本発明の化合物は親化合物により細胞成長抑制を受け易い癌等 、種々の癌の治療に有用である。親化合物による癌の治療は以下の文献に記載さ れている。

ドウリスコル・ジエー・ニスら（Ｄｒｉｓｔｏｌｌ、　Ｊ、Ｓ、　ａｔ　ａｌ、 ）、キャンサー・ケモセラビー・レポート（Ｃａｎｃｅｒ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ ａｐｙ　Ｒｅｐ、）、４：］　（１９７４）； コジマ・アールら（Ｋｏｊｉｍａ、　Ｒ，ｅｔ　ａｌ、）、キャンサー・ケモセ ラソピー・レポート、３＋ｌ１１　（１９７２）；スギウラ・ケイら（Ｓｕｇｉ ｕｒａ、　Ｋ、　ｅｔ　ａｌ、）、キャンサー・リサーチ（Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ ｓ、）、１９：４３８（１９５９）；オーポジ・ニスら（Ｏｂｏｓｈｉ、　Ｓ　 ｅｔ　ａｌ、）、癌、５８：３１５（１９６７）； スギウラ・ケイら、キャンサー・ケモテラビー・レポート、１３：５１　（１９ ６１）； ベンゾ４−／ティ”ジエイ・エムら（Ｖｅｎｄｉｔｔｉ、　Ｊ、　Ｍ、　ｅｔ　 ａｌ、）、アドバンス・イン・キャンサー・ケモセラピー、２０１〜２０９　（ １９７８）、エイチ・ウメザワら（Ｈ，Ｌｌｍｅｚａｖａ　ｅｔ　ａｌ、）発行 、ジャパン・ソサイエティー・プレス（Ｊａｐａｎ　Ｓｏｃ、　Ｐｒｅｓｓ）、 東京大学、パーク・プレス、バルチモア）； ウスブチ・アイら（ＬＩｓｕｂｕｃｈＬ　Ｉ　ｅｔ　ａｌ、）、癌、５８：３０ ７（１９６７）。

本発明のマイトマイシン誘導体により治療される典型的な癌としては、それらに 限定しないが、胃癌およびすい臓新生物が挙げられる［ンヤイ）・ビー・ニスら （Ｓｃｈｅｉｎ、　Ｐ、　Ｓ、　ｅｔ　ａｌ、）、マイトマイシンＣの現況およ び開発、］３３〜１４３、カーターら（Ｃａｒｔｅｒｅｔ　ａｌ、）発行、アカ デミツク・プレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ　ｐｒｅｓｓ）、米国ニューヨーク州（］ ９７９）］ｅ本発明の化合物を用いて治療される他の癌としては、肺癌、乳癌、 直腸癌、頭部癌および脛部癌並びにメラノーマが挙げられる。

また、本発明の化合物は以下の腫瘍系、すなわち、白血病Ｌ−１２１０、白血病 Ｐ３８８、Ｐ１５３４白血病、フレンドウィルス白血病、白血病Ｌ４９４６、メ ッカリンパ肉腫、ガードナーリンパ肉腫、リッジウェイ骨原性肉腫、肉［１１８ ０（腹水）、ワグナ−前原性肉腫、肉腫Ｔ２４１．リーバイス肺癌、癌７５５、 ＣＤ８Ｆ、乳癌、コロン３８、癌１０２５、二−リッヒ癌（腹水および固体）、 クラジス２癌（腹水）、バッシュホルド癌６３、腺癌ＥＯ７７１、Ｂ１６メラノ ーマ、ハーディングーバッセーメラノーマ、ギローマ２６、ミョナ腺癌、ウォー カー癌２５６、フレクスナーージョブリング癌、イエンセン肉腫、イグレシアス 肉腫、イグレシアス卵巣腫瘍、マルフィーースターンリンパ肉腫、ヨシタ肉臘、 タニンク白血病、ラウス鳥白血病およびクラブハムスター白血病に対して活性で ある。

本発明の医薬組成物は、その意図する目的を達成するためのいずれの手段によっ て投与してもよい。例えば、投与は非経口、皮下、静脈内、筋肉内、ＴｊＩ腔内 、経皮または口腔ルートで行ってもよい。

また、同時に投与は経口ルートで行ってもよい。用量は患者の年令、健簾状態お よび体重並びに実際の治療の種類、あるとすれば治療の頻度および所望の作用の 特性により異なる。

本発明の範囲に含まれる組成物としては、その意図する目的を達成するのに効果 的な量のマイトマイシン誘導体を含有するすべての組成物が挙げられる。個々の 必要性に応じ、各成分の有効量の最適範囲は当業者により決定される。典型的な 投与形は、動物１ｋｇあたり１０〜３００μモルのマイトマイシン誘導体または 等量の医薬上許容される塩を含をする。

医薬上有効な化合物に加え、新規医薬製剤は、有効化合物を医薬的に使用できる 製剤に加工するのを容易にする賦形剤および添加剤からなる好適な医薬上許容さ れる担体を含有してもよい。好ましくは、製剤、特に経口投与できかつ錠剤、糖 剤、カプセル剤等の好ましい投与形に使用できる製剤、少剤等の直腸投与できる 製剤並びに注射または経口投与用の好適な液剤は約０，０１〜９９％、好ましく は約２５〜７５％の有効化合物を賦形剤とともに含有する。

本発明の医薬製剤は自体公知の方法、例えば、通常の混合、造粒、糖衣形成、溶 解まｔ；は凍結乾燥プロセスにより製造される。がくして、経口用医薬製剤は、 有効化合物を固体賦形剤と混合し、所望により得られた混合物を粉砕して粒状混 合物に加工し、所望により適当な添加剤を加えて錠剤または糖衣錠とする。

好適な賦形剤としては、特に、糖類（例えば、ラクトースまたはスクロース、マ ンニトールまたはソルビトール、セルロース１ｌｉｎ）および／またはリン酸カ ルシウム類（例えば、リン酸三カルシ９ムまたはリン酸水素カルシウム）等の充 填剤、並びに、例えば、トウモロコシデンプン、小麦デンプン、コメデンプン、 ポテトデンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ヒドロキシプロ ピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムを用いるデンプンペー ストおよび／まｔ；はポリビニルピロリドン等の結合剤が挙げられる。所望によ り、前記デンプン類、カルボキシメチルスターチ、架橋ポリビニルピロリドン、 寒天まｔ；はアルギン酸、あるいはアルギン酸ナトリウムのような塩を崩壊剤と して添加してもよい。

添加剤としては、とりわけ、流動性調整剤および滑剤、例えば、シリカ、タルク 、ステアリン酸、あるいはステアリン酸マグネシウムまＩ；はステアリン酸カル シウム等の塩および／またはポリエチレングリコールが挙げられる。糖衣錠には 、所望により胃液に対して耐性を有する好適なコーティングが設けられる。この ｌ；め、濃糖液が用いられ、それは所望によりアラビアゴム、タルク、ポリビニ ルピロリドン、ポリエチレングリコールおよび／または二酸化チタン、ラッカー 溶液および適当な有機溶媒または溶媒混合物を含有してもよい。胃液に対して耐 性を存するコーティングを得るｔ；め、アセチルセルロースフタレートまたはヒ ドロキシプロピルメチルセルロース７タレート等の適当なセルロース製剤からな る溶液を用いる６識別または有効化合物用量の組合せを特徴ずけるため、色素ま たは顔料を錠剤まｌ；糖衣コーティングに添加してもよい。

経口で使用できる他の医薬製剤としては、ゼラチンがら作製された押込嵌めカプ セル、並びにゼラチンと、グリコールまたはソルビトール等の可塑剤から作製さ れた軟密閉カプセルが挙げられる。該押込嵌めカプセルは、ラクトース等の充填 剤、デンプン等の結合剤および／またはタルクまたはステアリン酸マグネシウム 等の滑剤、所望により安定化剤と混合される粒状形態の有効化合物を含有できる 。軟カプセル中では、有効化合物は、好ましくは、脂肪油まｔ；は液体パラフィ ン等の適当な液体中に溶解まｔ；は懸濁されている。また、安定化剤を添加して もよい。

直腸に使用できる医薬製剤としては、例えば、主剤が挙げられ、該止剤は有効化 合物と主剤基剤の組合せから構成される。好適な主剤基剤としては、例えば、天 然まｔ；は合成トリグリセリドあるいはパラフィン系炭化水素が挙げられる。ま た、有効化合物と基剤の組合せから構成されるゼラチン直腸カプセルを使用する ことも可能である。可能な基剤としては、例えば、液状トリグリセリド、ポリエ チレングリコールまたはパラフィン系炭化水素が挙げられる。

非経口投与用の好適な製剤としては、水溶性形態、例えば、水溶性塩での有効化 合物水溶液が挙げられる。また、適当な油状の注射用懸濁剤としての有効化合物 の懸濁剤を投与してもよい。好適な親油性溶媒または溶剤としては、ゴマ油等の 脂肪油、オレイン酸エチルまｔ：はトリグリセリド等の合成脂肪酸エステルが挙 げられる。水性の注射用懸濁剤は、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリ ウム、ソルビトールおよび／またはデキストラン等の懸濁液の粘度を増大させる 物質を含有してもよい。所望により、該懸濁剤は安定化剤を含有してもよい。

つぎに、寅施例により本発明の方法および組成物をさらに詳しく説明するが、そ れらに限定されるものではない。本発明の精神を逸脱することなく、通常、臨床 治療において遭遇する条件およびパラメーター！＝ついて、他の好適な変形Ｂよ び修飾を加えることができることは当業者に明らかであり、それらも本発明の範 囲のものである。

罠亙匹 マイトマイレンＣ（５０ｉ＋１ｇ、０．１５ミリモル）を５０％メタノールと５ ０％の０．ｌＮ−ＮａＯＨの溶液（３ｌ１ｌｆ２）中に溶解し、室温で１８時間 撹拌した。反応終了後（ＴＬＣ，ＣＨＣｌ、：ＭｅＯＨ＝　ｌ　Ｏ：　１）、、 反応混合物をドライアイスでクエンチし、水酸化ナトリウムを中和しｊ；。つい で、混合物を真空中で凍結乾燥し、メタノールでマイトマインン化合物を除去し た。メタノール溶液を真空中で濃縮乾燥し、残渣を少量のメタノール中に再溶解 し、エーテルで沈澱させて２０■の赤紫色の粉末を得ｔ；。これを酢酸エチル（ １５ｚｃ）中Ｉこ溶解し、５℃に冷却し、ジアゾメタン［アルントの方法、オー ガニック・シンセシイス（Ｏｒｇ、　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ）　、コレクティブ・ ボリューム（ＣｏｌｌｅｃＬｉｖｅ　Ｖｉｏｌｕｍｅ）、■、１６５−１６７頁 に従ってシ゛アゾメタンのエーテル溶液を調製した）］で処理し、２０分撹拌し た（ＴＬＣ，ＣＨＣ１３：ＭｅＯＨ−１０：　ｌ）　、反応終了後、溶媒をウォ ーター・アスピレータ−による減圧下で除去し、ついで、真空中で乾燥した。残 渣をエーテルから再結晶化して１８ｍｇの赤色針結晶を得た。融点１５９〜１６ ０℃。

ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：アセトン−１：１）により、Ｒｆ〜０．９１およびＲｆ− ０，４８（アセトン：ベンゼン−４＝１）を得１；。ＵＶ（メタノール）２１６ および３５８ｍｕ、　ＮＭＲ（アセトン−ｄ、、アセトンのミドルビーク２．１ ０）、δ、５．９４　（ｂｒ、２Ｈ）、４゜７６　（ｄｃｌ、ＩＨ）　、　３゜ ４１　（ｄ、ＩＨ）、３．３５　（ｄ、ＩＨ）。

３．９６　（ｄ、ＩＨ）、３．５４　（ｄｄ、ＩＨ）、３．４１　（ｄ、ＩＨ） 。

３．３５　（ｄ、］　ＩＨ，３，２５（ｓ、３Ｈ）、２．９９−２．２６４　（ ｍｍａ＋）　、　２．８４　（ｓ）　、１．６４０　（ｓ、　３Ｈ）。

実施例２　：　Ｎ’−（２−デオキシグルコビラソニル）ｙ（）ｙインンＣの製 造 マイトマイシンＡ（ｌｏｍｇ、０．０２８ミリモル）の無水ツタノール中溶液に 、グルコサミンＨＣＩ　（７０１１１？、０．３２５ミリモル）およびジイソプ ロピルエチルアミン（１００μｍ２）のメタノール溶液を添加した。この混合物 を、Ｎ２雰囲気下、室温で、ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：アセトン−］：ｌ）Ｉ：より 反応が終了して赤色が暗紫色に変わるまで撹拌した。溶液をＮ２気流で蒸発させ ることにより濃縮し、アセトン−酢酸エチル（１：　ｌ）で溶出された分取シリ カゲルプレート上でクロマトグラフィーに付した。残留する起源に近い紫色のバ ンドを削り取り、メタノールで溶出しＩ；。さらに、ＨＰＬＣ（Ｃ，Ｉ逆相、半 分取カラム、メタノール：　０．ＩＮリン酸緩衝液−１：１）により精製して紫 色の粉末を得た。

ＮＭＲ（Ｄ、Ｏ）δ５．３２　（ｄ、Ｉ　Ｈ，す・ツカリドアノマーＨ）；３− ８５　（ｓ、３Ｈ，９ａ　０ＣＨｓ）；４．０９で一重線消失［マツイら、ジャ ーナル・オブ・アンティバイオティックス（Ｊ、　Ａｎｔｉｂｉｏ＋、）　、２ １　：１８８９　（１９６８）　；チェノ・エルおよびレマーズ・ダブリュ・エ イ、ジャーナル・オブ・メディカル・ケミストリー、２０　：　７６７　（１９ ７７）；ピアス・ディー・エムら、ジャーナル・才ブ・オーガニック・ケミスト リー、５１：４３０７　（１９８６）］。

実施例３：　Ｎ−（２，６−シヒドロキシシクロヘキシル）グリシンアミドの製 造 Ｎ−ペンジルオキシ力ルポニルグリシン（３ｇ、１４．３ミリモル）のジオキサ ン中溶液にＮ−ヒドロキシスフフンイミド（１，６５ｇ、１４．３ミリモル）お よびＮ、Ｎ−ジシクロへキシルカルボジイミド（２，９６ｉ＋、１４．３ミリモ ル）を冷却しながら添加した。反応混合物を０〜５℃で１時間撹拌し、冷蔵下で 一夜保持した。尿素沈澱物を吸引濾過により除去し、濾液を真空中で濃縮乾燥し ｔ：。黄色の残渣を酢酸エチル−エーテルから再結晶化してグリシン活性化エス テル（収率８４％）を得た。融点１１２〜１１４℃。

ＮＭＲ（ＣＨＣＩｓ） 調製したグリシンの活性化エステル（２５ｇ、０．００８モル）を１５ｍＱの乾 燥ＤＭＦ　（ジメチルホルムアミド）中に溶解し、５℃以下に冷却し、Ｎ、雰囲 気下で撹拌しながらＤＭＦ中２−アミノ−１゜３−シクロ−・キサンジオール（ ２，１８ｇ、０．０１６モル）を滴下した。反応終了後（ＴＬＣ，ＣＨＣｌ：Ｍ ｅＯＨ＝１０　：　ｌ）　、減圧下でＤＭＦを除去し、得られた固体残渣を酢酸 エチルから結晶化して白色結晶（収率８４％）を得た。融点１７０−１７２℃。

ＮＭＲ（ＤｊＯ）：δ７．４５　（ｓ、５Ｈ，芳香族Ｈ）；　５．２０　（ｓ、 ２Ｈ。

ベンジリック−〇Ｈｚ）；　３−９５　（ｓ、２Ｈ，−Ｃｏ−ＣＨ，−ＮＨｚ） 　；　３．６　（ｔ、　ｌ　Ｈ，シクロヘキサン環のＣ＋Ｈ）；　３−４５（ｌ Ｉ１２Ｈ，シクロヘキサン環のＣ，ＨおよびＣ，Ｈ）；２．０．１゜８および１ ．３５　（＋ｏ、　ｍ、　ｍ、　２〜１〜３Ｈ；シクロヘキサンのＣ３＋Ｃ１お よびＣｓ水素）。生成物はＮ−（２，６−シヒドロキシシクロヘキシル）グリシ ンアミドのＮ−保護ベンジルオキシカルボニル誘導体からなる。

Ｎ−保護ベンジルオキシカルボニルＮ−（２，６−シヒドロキシシクロヘキシル ）グリシンアミド（３９，０，０９３モル）を１モル当量の１０％ＨＣＩを含有 する１００ｍ１２の無水エタノール中に溶解した。３０ｐｓｉで５％Ｐｄ／Ｃを 用いて水添分解し、セライト上で触媒を除去し、ついで、真空中で溶媒を蒸発さ せて淡褐色の固体を得、それをエーテルでトリスコ−ルし、酢酸エチルおよびエ ーテルから再結晶化した。融点２０７〜２１０℃。ＮＭＲ（ＤｚＯ）δ。

３．６５　（＋、３Ｈ，シクロヘキサン環のＣ＋Ｈ）　ｉ　３−５５　（ｍ。

２Ｈ，シクロヘキサンのＣ，ＨおよびＣ５Ｈ）；　３−４　（ｓ、２Ｈ。

−Ｃｏ−ＣＨ２−ＮＪ）；２．０５．１．８０および１．３８　（ｍ、　ｍ。

■、２〜１〜３Ｈ，シクロヘキサンのＣ，、Ｃ，およびＣ１水素）。

実施例２で製造した化合物であるＮ’−（２−デオキシグルコピラノシル）マイ トマイシンＣの、通常のマウスの骨髄に対するマウスＰ３８８白血病抗腫瘍活性 および毒性を評価した。

Ａ、マウス抗腫瘍活性の測定 メスのＤＢＡ／２マウスの腹腔内で維持されたマウスＰ３８８白血病系を用いて 腫瘍活性を評価した。この腫瘍は、親化合物であるマイトマイシンＣに対する感 受性が公知であるという理由で選択された［トリスコールら、キャンサー・ケモ セラビー・レボーツ、４：　ｌ　（１９７４））。Ｎ’−（２−デオキシグルコ ピラノシル）マイトマイシンＣを投与直前に殺菌水（４℃）中に溶解した。マイ トマイシンＣをエタノール中に溶解し、得られｌ；溶液を５％エタノール、９５ ％殺菌水に調整した。

ｌＸｌ０’個のＰ３８８白血病細胞を腹腔内移植して１日後、各化合物をオスの ＣＤ２Ｆ、マウスの群に腹腔内投与した。平均生存日数および増加寿命（ＩＬＳ ）％により被験化合物のＰ３８８抗腫瘍活性を評価した。ＩＬＳ％は以下の式： ％式％ ［式中、Ｔは治療マウスの生存日数、Ｃは未治療マウスの平均生存日数を意味す る］ により計算した。

Ｎ’−（２−デオキシグルコピラノシル）マイトマイシンＣのＰ３８８抗腫瘍活 性を親マイトマイシンＣと比較して表２に示す。

Ｎ’−（２−デオキシク４）−５°　４２％　１４．２ビラノンル）マイトマイ ノンＣＩ３．５　”　６１　％　１　６．１マイトマイシンＣ４，５１８１％　 １８．１対照’　Ｉ　Ｏ，０ ”：　ＬＤ、用量 ゝ：ＬＤ、、概算用量 ′：薬剤ビヒクルで処理 １３．５ｍｇ／ｋｇのＮ’−（２−デオキシグルコピラノシル）マイトマイシン Ｃまたは４．５ｍｇ／ｋｇのマイトマイシンＣの腹腔内投与の３日後に通常のオ スのＣＤ２Ｆ、マウスから得られた眼窩後方洞血液のサンプル２０μｇを用いて 抹消白血球（ＷＢＣ）数の測定を行った。得られた血液サンプルを９．９８ｍΩ の等張液（中性の等張緩衝溶液）中に希釈し、ザボグロビン（赤血球を溶解する が白血球を溶解しない酵素溶液）で溶解した後にクールター・カウンターＣＣｏ ｕ］ｔｅｒ　ｃｏｕｎｔｅｒ）で計数した。ＷＢＣ数は薬剤ビヒクルのみを受容 する対照マウスに対する割合％として表される。結果を以下の表３に示す。

（対照に対する割合％） Ｎ’−（２−デｔキシグ４ニー　１３．５Ｈ／ｋｙ　９４　％ピラノシル）マイ トマイツノＣ マイトマイシンＣ４，５ｍｇ／ｋｇ　５　５〜６　６　％結局、これらのインビ ボ研究により、抹消白血球（ＷＢＣ）数の抑制かられかるように、Ｎ’−（２− デオキシグルコピラノシル）マイトマイ−シンＣが、顕著な骨髄毒性を生じない 用量でマウスＰ３８８腫瘍系に対して顕著な活性を有することが示された。

寅施例５：　抗菌活性 親マイトマイシンＣと比較して、Ｎ’−（２−デオキシグルコピラノシル）マイ トマイシンＣのグラム陰性菌に対する活性を評価した。グラム陰性株の細菌（Ｈ ＢＩＯＩ）に対する最小阻害濃度（Ｍ。

１、Ｃ，）を、段階的濃度の薬剤を３７〜４０℃の寒天に添加する希釈法で評価 しｒ：、Ｎ’−（２−デオキシグルコピラノシル）マイトマイシンＣを４℃の５ ０％殺菌水−５０％エタノール中に溶解し、マイトマイシンＣをエタノール中に 溶解した。薬剤を含有する寒天を室温で急速に凝固させ、直ちに細菌を平板培養 した。３７℃で２４時間後、寒天平板Ｉこ細菌成長の阻害が認められた。結果を 表４に示す。

Ｎ’−（２−デオキシクルフ−１−６６−３，３ｗｃｇ／ｍＱピラノシル）マイ トマイツノＣ マイトマイシンＣ０，３〜０．５＋ｕｃ９／ｍｆｆ以上、本発明の好ましい具体 例について説明したが、本発明の精神を逸脱することなく種々の変形および修飾 を加えることができることは当業者ｊ：ＢｉＪらかであり、それらも本ｉｐ！明 の範囲のものである。

国際調査報告 ｌＩＩ′″′＃１ｌｌＡｓｅｌ−＋８１ｍ　ｐ、、　７　、、　ζ、　９．　ｎ 　、　、　、　。

Claims (34)

【特許請求の範囲】
1. １．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、ｎは０または１； Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノ シル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシルおよび２−ア ミノ−１，３−シクロヘキサンジオール、またはそれらのヒドロキシル−保護ア セテート誘導体よりなる群から選択される基； Ｒは水素； Ｒ１は水素、炭素数１〜４のアルキルまたはフェニル、ヒドロキシフェニル、イ ンドリル、メルカプト、炭素数１〜４のアルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ 、アミノ、グアニジノ、イミダゾールまたはカルバミルで置換された炭素数１〜 ４のアルキルを意味し；あるいは、 ＲおよびＲ１は窒素を含有する５または６員環を形成する］で示されるマイトマ イシン誘導体。
2. ２．Ｎ７−（２−デオキシグルコピラノシル）マイトマイシンＣである請求項１ 記載のマイトマイシン誘導体。
3. ３．Ｎ７−（２−デオキシガラクトピラノシル）マイトマイシンＣである請求項 １記載のマイトマイシン誘導体。
4. ４．Ｎ７−（テトラアセチル−２−デオキシグルコピラノシル）マイトマイシン Ｃである請求項１記載のマイトマイシン誘導体。
5. ５．Ｎ７−（テトラアセチル−２−デオキシガラクトピラノシル）マイトマイシ ンＣである請求項１記載のマイトマイシン誘導体。
6. ６．Ｎ７−［［［（テトラアセチル−２−デオキシ−２−グルコピラノシル）ア ミノ］カルボニル］メチル］マイトマイシンＣである請求項１記載のマイトマイ シン誘導体。
7. ７．Ｎ７−［［［（２−デオキシグルコピラノシル）アミノ］カルボニル］メチ ル］マイトマイシンＣである請求項１記載のマイトマイシン誘導体。
8. ８．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、ｎは０または１； Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノ シル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシルおよび２−ア ミノ−１，３−シクロヘキサンジオール、またはそれらのヒドロキシル−保護ア セテート誘導体よりなる群から選択される基； Ｒは水素； Ｒ１は水素、炭素数１〜４のアルキルまたはフェニル、アルキル、ヒドロキシフ ェニル、インドリル、メルカプト、炭素数１〜４のアルキルチオ、ヒドロキシ、 カルボキシ、アミノ、グアニジノ、イミダゾールまたはカルバミルで置換された 炭素数１〜４のアルキル；あるいは、 ＲおよびＲ１は窒素を含有する５または６員環を形成し；Ｒ２はＮＨ２−または ＣＨ３Ｏ−を意味する］で示されるマイトマイシン誘導体。
9. ９．Ｎ１−［［２−［［（２−デオキシグルコピラノシル）アミノ］カルボニル ］エチル］−カルボニル］マイトマイシンＣである請求項８記載のマイトマイシ ン誘導体。
10. １０．Ｎ１−［［２−［［（２−デオキシグルコピラノシル）アミノ］カルボニ ル］エチル］カルボニル］マイトマイシンＡである請求項８記載のマイトマイシ ン誘導体。
11. １１．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒ２はＮＨ２−またはＣＨ３Ｏ−；およびＲ３は３−シアノ−４−モル ホリニル−２−デオキシピラノシルサッカリドまたは４−モルホリニル−２−デ オキシピラノシルサッカリドを意味する］ で示されるマイトマイシン誘導体。
12. １２．２−（３−シアノ−４−モルホリニル）−２−デオキシグルコピラノシル −１ａ−カルボチオアミドマイトマイシンである請求項１１記載のマイトマイシ ン誘導体。
13. １３．２−（３−シアノ−４−モルホリニル）−２−デオキシガラクトピラノシ ル−１ａ−カルボチオアミドマイトマイシンである請求項１１記載のマイトマイ シン誘導体。
14. １４．２−（４−モルホリニル）−２−デオキシグルコピラノシル−１ａ−カル ボチオアミドマイトマイシンである請求項１１記載のマイトマイシン誘導体。
15. １５．請求項１、８または１１いずれか１項記載のマイトマイシン誘導体と、医 薬上許容される担体とからなることを特徴とする医薬組成物。
16. １６．請求項１、８または１１いずれか１項記載の抗菌量のマイトマイシン誘導 体と、医薬上許容される担体とからなる医薬組成物を動物に投与することを特徴 とする細菌感染の治療方法。
17. １７．エシェリキア、シュードモナス、サルモネラ、スタフィロコッカス、クレ ブシエラおよびリステリアよりなる群から選択される細菌により細菌感染が引き 起こされる請求項１６記載の方法。
18. １８．請求項１、８または１１いずれか１項記載の癌細胞成長抑制量のマイトマ イシン誘導体と、医薬上許容される担体とからなる医薬組成物を動物に投与する ことを特徴とする、動物中で成長抑制を受け易い癌細胞の成長抑制による癌の治 療方法。
19. １９．白血病、メラノーマ、肉腫および癌腫よりなる群から癌が選択される請求 項１８記載の方法。
20. ２０．マイトマイシンＡとアミノ化合物を、塩基性条件下、極性溶媒中で反応さ せてＮ７−置換マイトマイシンとすることを特徴とする、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、ｎは０；および Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノ シル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシルおよび２−ア ミノ−１，３−シクロヘキサンジオールまたはそれらのヒドロキシル−保護べル アセテート誘導体よりなる群から選択される基を意味する］ で示されるＮ７−置換マイトマイシン誘導体の製造方法。
21. ２１．グルコサミン、ガラクトサミン、マンノサミン、キシロサミン、セロビオ サミン、マルトサミンおよび２−アミノ−１，３−シクロヘキサンジオールより なる群からアミノ化合物が選択される請求項２０記載の方法。
22. ２２．Ｎ７−置換マイトマイシンがＮ７−（２−デオキシグルコピラノシル）マ イトマイシンＣである請求項２０記載の方法。
23. ２３．（ａ）Ｎ保護アミノ酸とアルコールを脱水剤の存在下で縮合して活性化エ ステルとし、 （ｂ）工程（ａ）で得られた活性化エステルとアミノ化合物を縮合して保護アミ ノ酸−アミノ化合物共役体とし、（ｃ）工程（ｂ）で得られた保護アミノ酸−ア ミノ化合物共役体のアミノ酸保護基を除去してアミノ酸−アミノ化合物共役体と し、ついで、 （ｄ）工程（ｃ）で得られたアミノ酸−アミノ化合物共役体とマイトマイシンＡ を縮合してマイトマイシン誘導体を得ることを特徴する、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、ｎは１； Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノ シル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシルおよび１，３ −シクロヘキサンジオール−２−イル、またはそれらのヒドロキシル−保護ペル アセチル誘導体よりなる群から選択される基； Ｒは水素； Ｒ１は水素、炭素数１〜４のアルキルまたはフェニル、ヒドロキシフェニル、イ ンドリル、メルカプト、炭素数１〜４のアルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ 、アミノ、グアニジノ、イミダゾールあるいはカルバミルで置換された炭素数１ 〜４のアルキルを意味し；あるいは、 ＲおよびＲ１は窒素を含有する５または６員環を形成する］で示されるマイトマ イシン誘導体の製造方法。
24. ２４．アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニ ン、トリプトファン、メチオニン、グリシン、セリン、トレオニン、システイン 、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リシ ン、アルギニンおよびヒスチジンのＮ−ベンジルオキシカルボニル誘導体よりな る群からＮ−保護アミノ酸が選択される請求項２３記載の方法。
25. ２５．アミノ酸保護基が水添分解により除去される請求項２３記載の方法。
26. ２６．ヒドロキシル−保護ハロ誘導体がグルコピラノ−スペルアセテート、グル コフラノ−スペルアセテート、ガラクトピラノ−スペルアセテート、マンノピラ ノ−スペルアセテート、キシルピラノ−スペルアセテート、セルビオ−スペルア セテート、ラクト−スペルアセテートまたはマルト−スペルアセテートの１−ブ ロモ、１−ヨードまたは１−クロロ誘導体である請求項２３記載の方法。
27. ２７．塩基がジイソプロピルエチルアミン、炭素数１〜３のトリアルキルアミン 、ＤＢＵまたはＤＭＡＰよりなる群から選択されるヒンダードアミンである請求 項２３記載の方法。
28. ２８．（ａ）ビス（アセトアルデヒド−２−イル）エーテルと２−アミノ−２− デオキシサッカリドを、ホウ水素化シアノの塩の存在下で縮合して２−デオキシ −２−（３−シアノ−４−モルホリノ）サッカリドおよび２−デオキシ−４−モ ルホリニルサッカリドとし、 （ｂ）工程（ａ）で得られた２−デオキシ−４−モルホリニルサッカリドから２ −デオキシ−２−（３−シアノ−４−モルホリニル）サッカリドを分離し、 （ｃ）工程（ｂ）で得られた２−デオキシ−２−（３−シアノ−４−モルホリニ ル）サッカリドとハロゲン化アセチルを反応させて２−デオキシ−１−ハロ−２ −（３−シアノ−４−モルホリニル）ペルアセチルサッカリドとし、 （ｄ）工程（ｃ）で得られた２−デオキシ−１−ハロ−２−（３−シアノ−４− モルホリニル）ペルアセチルサッカリドをチオシアン酸銀で処理してサッカリド −１−チオシアネートとし、（ｅ）工程（ｄ）で得られたサッカリド−１−チオ シアネートとマイトマイシンＣまたはマイトマイシンＡを反応させてマイトマイ シンＣ−またはマイトマイシンＡ−サッカリドペルアセテートカルボチオアミド とし、ついで、 （ｆ）工程（ｅ）で得られたマイトマイシン−Ｃ−サッカリドペルアセテートの アセテート基を加水分解してマイトマイシン誘導体を得ることを特徴とする、式 ： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒ２はＮＨ２−またはＣＨ３Ｏ−；およびＲ３は２−（３−シアノ−４ −モルホリニル）−２−デオキシサッカリドを意味する］ で示されるマイトマイシン誘導体の製造方法。
29. ２９．（ａ）ビス（アセトアルデヒド−２−イル）エーテルと２−アミノ−２− デオキシサッカリドを、ホウ水素化シアノの塩の存在下で縮合して２−デオキシ −２−（３−シアノ−４−モルホリニル）サッカリドおよび２−デオキシ−２− （４−モルホリニル）サッカリドとし、 （ｂ）工程（ａ）で得られた２−デオキシ−２−（３−シアノ−４−モルホリニ ル）サッカリドから２−デオキシ−２−（４−モルホリニル）サッカリドを分離 し、 （ｃ）工程（ｂ）で得られた２−デオキシ−２−（４−モルホリニル）サッカリ ドとハロゲン化アセチルを反応させて２−デオキシ−１−ハロ−２−（４−モル ホリニル）ペルアセチルサッカリドとし、 （ｄ）工程（ｃ）で得られた２−デオキシ−１−ハロ−２−（４−モルホリニル ）ペルアセチルサッカリドをチオシアン酸銀で処理してサッカリド−１−チオシ アネートとし、（ｅ）工程（ｄ）て得られたサッカリド−１−チオシアネートと マイトマイシンＡまたはマイトマイシンＣを反応させてマイトマイシンＡ−また はマイトマイシンＣ−サッカリドペルアセテートカルボチオアミドとし、ついで 、 （ｆ）工程（ｅ）で得られたマイトマイシン−Ｃ−サッカリドペルアセテートの アセテート基を加水分解してマイトマイシン誘導体を得ることを特徴とする、式 ： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒ２はＮＨ２−またはＣＨ３Ｏ−；およびＲ３は（４−モルホリニル） −２−デオキシサッカリドを意味する］ で示されるマイトマイシン誘導体の製造方法。
30. ３０．グルコサミン、ガラクトサミン、マンノサミン、キシロサミン、セロビオ サミンおよびマルトサミンよりなる群から２−アミノ−２−デオキシサッカリド が選択される請求項２８または２９記載の方法。
31. ３１．マイトマイシン誘導体が２−（３−シアノ−４−モルホリニル）−２−デ オキシグルコピラノシルマイトマイシン−１ａ−カルボチオアミドである請求項 ２８記載の方法。
32. ３２．マイトマイシン誘導体が２−（４−モルホリニル）−２−デオキシグルコ ピラノシルマイトマイシン−ｌａ−カルボチオアミドである請求項２９記載の方 法。
33. ３３．（ａ）マイトマイシンＣと無水コハク酸を縮合してマイトマイシンＣ−ｌ ａ−コハク酸エステルとし、（ｂ）工程（ａ）で得られたマイトマイシンＣ−ｌ ａ−コハク酸エステルと、グルコサミン、ガラクトサミン、マンノサミン、キシ ロサミン、セロビオサミン、マルトサミンおよび２−アミノ−１，３−シクロヘ キサンジオールよりなる群から選択されるヒドロキシル−保護アミノ誘導体を縮 合し、ついで、（ｃ）ヒドロキシル保護基を除去してマイトマイシン誘導体を得 ることを特徴とする、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、ｎは０； Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロオイラ ノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、１，３− シクロヘキサンジオール−２−イルよりなる群から選択される基； Ｒは水素； Ｒ１は水素、炭素数１〜４のアルキルまたはフェニル、ヒドロキシフェニル、イ ンドリル、メルカプト、炭素数１〜４のアルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ 、アミノ、グアニジノ、イミダゾールまたはカルバミルで置換された炭素数１〜 ４のアルキル；あるいは、ＲおよびＲ１は一緒になって５または６員の窒素含有 環を形成しＲ２はＮＨ２−またはＣＨ３Ｏ−を意味する］で示されるマイトマイ シン誘導体の製造方法。
34. ３４．（ａ）マイトマイシンＡと無水コハク酸を縮合してマイトマイシンＡ−ｌ ａ−コハク酸エステルとし、（ｂ）工程（ａ）で得られたマイトマイシンＡ−１ ａ−コハク酸エステルと、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒ、Ｒ１およびｎは前記と同意義、Ｙｐはグルコピラノシル、ガラクト ピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル 、グルコフラノシル、マルトシルおよび１，３−シクロヘキサンジオールのヒド ロキシル−保護誘導体よりなる群から選択されるヒドロキシル−保護サッカリド を意味する］で示されるヒドロキシル−保護アミノ酸−サッカリド共役体を縮合 し、（ｃ）ヒドロキシル保護基を除去してマイトマイシン誘導体を得ることを特 徴とする、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、ｎは０； Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロオイラ ノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、１，３− シクロヘキサンジオール−２−イルよりなる群から選択される基； Ｒは水素； Ｒ１は水素、炭素数１〜４のアルキルまたはフェニル、ヒドロキシフェニル、イ ンドリル、メルカプト、炭素数１〜４のアルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ 、アミノ、グアニジノ、イミダゾールまたはカルバミルで置換された炭素数１〜 ４のアルキル；あるいは、ＲおよびＲ１は互いに５または６員の窒素含有環を形 成し；Ｒ２はＮＨ２−またはＣＨ３Ｏ−を意味する］で示されるマイトマイシン 誘導体の製造方法。