JPH04159280A - ヒドロキシスチルベン系化合物を有効成分とする５―リポキシゲナーゼ阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は５−リポキシゲナーゼ阻害作用を有し、抗アレ
ルギー剤、抗炎症剤等の医薬として有用なヒドロキシス
チルベン系化合物に関するものである。

［従来の技術および課題］ 近年、我が国の公害問題や環境変化に伴い、気前文喘息
や花粉症等のアレルギー性疾患の密書が増加し、大きな
社会問題になっている。

５−リボキンゲナーゼはアラキドン酸の５位を酸化する
酵素で、その阻害剤は抗アレルギー作用や抗炎症作用等
に関係しているとされている。そのたぬ、５−リポキン
ゲナーゼ阻害作用を指標とする抗炎症、抗アレルギー作
用を有する薬物の検索および開発が行われている。

［課題を解決するための手段］ 本発明者等は、アレルギー性疾患等の治療に有効な５−
リポキンゲナーゼ阻害作用を有する化合物を求めて鋭意
研究を重ねた結果、カヤツリグサ科のウキャガラ（Ｓｃ
ｉｒｐｕｓ　ｆｌｕｖｉａｔｉｌｉｓ　Ａ、ＧＲＡＹｖ
ａｒ、ｙａｇａｒａ　０１１またはＢｏｌｂｏｓｃｈｏ
ｅｎｕｓｆｌｕｖｉａｔｉｌｉｓ　（ＴＯＲＲＥＹ）Ｔ
ＪＯＹＡＭＡ）またはその他同属植物に含まれるヒドロ
キシスチルベン系化合物類が５−リポキシゲナーゼ阻害
作用を有することを見いだし、本発明を完成するに至っ
た。

すなわち本発明は、下記式Ｉまたは下記式１１（式中、
Ｒ１およびＲ３はαβ−Ｈ，Ｒ，およびＲ４はβα−Ｈ
である。） ■ （式中、Ｒ６は水素原子または水酸基を示す。）で表さ
れるヒドロキンスチルヘン系化合物を有効成分とする５
−リボキンゲナーセ阻害剤（以下、式の化合物という）
である。

式の化合物を得るには例えば次のような方法か挙げられ
る。

式の化合物は、ウキャガラ塊茎をジエチルエーテル、酢
酸エチル、アセトン、メタノール、エタノールより選ば
れる少なくとも一つの溶媒で抽出し、得られた抽出液か
ら溶媒を除去して得た残渣をヘキサン、ベンゼン、ジエ
チルエーテル、石油エーテル、酢酸エチル、クロロホル
ム、アセトン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、
メタノール、エタノール、水、酢酸より選ばれる少なく
とも一つの溶媒を溶出溶媒として、ダイヤイオンＨＰ−
２０、Ｍ（ｌゲルＣＨＰ　２０　Ｐなどのポーラスポリ
マー、セファデックスＬＨ−２０などのセファデックス
、逆相系シリカゲル、シリカゲル、ポリアミドまたはセ
ルロース等を担体に用いたカラムクロマトグラフィー、
薄層クロマトグラフィーまたは高速液体クロマトグラフ
ィーに１回または数回付すことにより得ることができる
。

次に式の化合物の製造の具体例を示す。

具体例１ 粉砕したウキャガラ塊茎３　ｋｇをメタノール１２０Ｑ
で抽出し、得られた抽出液より溶媒を除去してメタノー
ルエキス２３６ｇを得た。このメタノールエキスにブタ
ノール４Ｑおよび水２ｇを加え、分配抽出しブタノール
エキス１６２ｇを得た。

このブタノールエキスのうちクロロホルムに不溶でジエ
チルエーテルに可溶なエキス７３ｇを得た。

該エキスをダイヤイオンＨＰ−２０を用いたカラムクロ
マトグラフィーに付し、最初は水、逐次メタノールを増
やして溶出し、水−メタノール（４：６）、（３・７）
および（２：、８）で溶出する両分それぞれＡ、Ｂおよ
びＣを得た。

画分Ｂをセファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）Ｌ　Ｈ−
２０［ファルマシア（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）社製、以下
同じ］を用いたカラムクロマトグラフィーに付し、メタ
ノール−クロロホルム（４：６）で３５０１１１から４
５０７までに溶出した両分を得た。

該画分をＹＭしｐａｃｋ　Ｄ−ＯＤＳ−１Ｏ５−１０１
２０Ａ　０ＤＳ（山村化学研究新製、以下同じ）を用い
た高速液体クロマトグラフィーに付し、テトラヒドロフ
ラン〜アセトニトリル〜水（３，３・１４）で２　＋　
０１Ｉｆ！から２９０−までに溶出する画分を、さらに
ソリ力ゲルｉ：５ｉｌｉｃａ　ｇｅｌ　６０Ｆ　２５４
（メルク社製）］を用いた分取薄層クロマトグラフィー
に付し、ベンゼン−アセトン（１：１）で溶出する淡褐
色不定形品０．７１９を得た。

この淡褐色不定形品は、その理化学的性質から文献［Ｋ
、Ｎａｋａｊｉｍａ、Ｈ，Ｔａｇｕｃｈｉ、Ｔ、Ｅｎｄ
ｏ、１．Ｙｏｓｉｏｋａ。

Ｃｈｅａ、Ｐｈａｒｍ、Ｂｕｌｌ、、２６．３０５０（
１９７８）］記載のサーバシンＡ　（ｓｃｉｒｐｕｓｉ
ｎ　Ａ　）、すなわち式■中Ｒ５が水素原子である（２
Ｒ９，３Ｒ８）−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル
）−３−（３，５−ジヒドロキシフェニル）−４−［（
Ｅ　）−２−（４−ヒドロキシフェニル）エチニル］−
２，３−ジヒドロベンゾフランであると決定した。

具体例２ 具体例１のセファデックスＬＨ−２０を用いたカラムク
ロマトグラフィーのメタノール−クロロホルム（４・６
）で４５０−から７００−までに溶出する画分をＹＭＣ
ｐａｃｋ　Ｄ−ＯＤＳ−１Ｏ５−１０１２０ＡＯＤＳを
用いた高速液体クロマトグラフィーに付し、テトラヒド
ロフラン−アセトニトリル−水（３３：３３：１３４）
で１９０７から２２０−までに溶出する淡褐色不定形品
０２３９を得た。

この淡褐色不定形品は、その理化学的性質から文献［Ｋ
、Ｎａｋａｊｉｍａ、Ｈ，Ｔａｇｕｃｈｉ、Ｔ、Ｅｎｄ
ｏ、　１．Ｙｏｓｉｏｋａ。

Ｃｈｅｍ、Ｐｈａｒｍ、Ｂｕｌｌ、　、２６．３０５０
（１９７８）ｌ記載のサーバシンＢ　（ｓｃｉｒｐｕｓ
ｉｎ　Ｂ）、すなわち式■中Ｒ５か水酸基である（２Ｒ
９，３ＲＳ）−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）
−３−（３，５−ジヒドロキシフェニル）＝４−［（Ｅ
　）−２−（３、４−ジヒドロキノフェニル）エチニル
］−２，３−ジヒドロヘンシフランであると決定した。

具体例３ 具体例１のＹＭＣｐａｃｋ　Ｄ−ＯＤＳ−１０５−１０
１２０Ａ　ＯＤＳを用いた高速液体クロマトグラフィー
において、テトラヒドロフラン−アセトニトリル−水（
３・３：＋４）で２９０７から５００７までに溶出する
淡褐色不定形品１．４３９を得た。

この淡褐色不定形品は、下記に示す理化学的性質および
本発明の化合物の完全メチル化体のエックス線結晶構造
解析により、式Ｉの化合物、すなわち（２ＲＳ、３ＲＳ
、５ＲＳ、６．ＲＳ）−２，６−ビス（３，４−ジヒド
ロキシフェニル）−３，５−ビス（３゜５−ジヒドロキ
シフェニル）−４−［（Ｅ　）−２−（４−ヒドロキシ
フェニル）エチニル］−２，３，５，６−チトラヒドロ
ベンゾ［１，２−ｂ：５．４−ｂ’］シフランであると
決定した。

マススペクトル ＨＲ−ＦＡＢ−ＭＳ　　ｍ／ｚ　： 計算値［Ｃ１ｔＨ３ｔＯＩＩ（［Ｍ＋　Ｈ］’］）ニア
１３．２０１３ 実測値ニア１３．２０３５ 赤外線吸収スペクトル　ν　Ｚ２”ｘＣ’ｌｌ−”３２
５０．１６０５，１５１２，１４４６゜１１５６．９９
８．９６０．８１０ 紫外線吸収スペクトル　λ　重言＋４ア（ｌｏｇε）２
８６．２（４，３１）、３１４．０（ｓｈ　４．３０）
。

３２５．２（４，３４） プロトン核磁気共鳴スペクトル （δ　ｐｐｍ　ｉｎ　ａｃｅｔｏｎｅ−ｄｅ）４．５５
（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ）。

５．３９（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ）。

６．１９（２Ｈ，ｔ、Ｊ＝２．２Ｈｚ）。

６．２６　（４Ｈ，ｄ　、Ｊ　＝　２．２　Ｈｚ）。

６．４６（Ｉ　Ｈ，ｓ）。

６．５６（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１７．０Ｈｚ）。

６．６２（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ）。

６．６９（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝　１７．０Ｈｚ）。

６．７６（２Ｈ，ｄｄ、Ｊ＝８．０，２．０Ｈｚ）。

６．８３　（２Ｈ，ｄ　、Ｊ　＝　８．０　Ｈｚ）。

６．９０（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ）。

６．９６（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ）１３ｃ−核磁気
共鳴スペクトル （δ　ｐｐａ＋　ｉｎ　ａｃｅｔｏｎｅ−ｄａ）：５８
．０（ｄ）、９１．２（ｄ）、９４．１（ｄ）。

１　０　２．１　　（ｄ）、１　０　６．９（ｄ）。

１　１　３．５（ｄ）、１　１　６．１（ｄ）。

１　１　６．１　　（ｄ）ｌ　　＋　　８．２（ｄ）。

１　１　９．９（ｓ）、１　２　２．２（ｄ）。

１　２　８．６（ｄ）、、１　３　０．１　　（ｓ）。

１３３．４（ｓ）、１３３．９（ｄ）。

＋３４．８（ｓ）、１４５．９（ｓ）。

１　４　６．０　（ｓ　）、　１　４　７．４　（ｓ　
）。

１　５　８．１　　（ｓ）、１　５　９．８（ｓ）。

１６２．６（ｓ） 次に式の化合物か優れた５−リボキンゲナーゼ阻害作用
を有し、抗アレルギー剤、抗炎症剤として有用であるこ
とについて実験例を挙げて説明する。

実験例 ＲＢＬＩ培養細胞を５Ｘ１０Ｉ′細胞１Ｍ１となるよう
にＩ　ｗＭエチレンノアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）および
１０％エチレングリコールを含む５０鱈リン酸緩衝液（
ｐＨ７，４）に浮遊し、超音波処理後、１０．０００×
Ｇ％　１０分間さらに１０５．０００×Ｇ、６０分間遠
心しｆ二上清を５−リボキノゲナーゼ酵素標品とした。

基質として１０４１Ｍアラキドン酸、上記のように調製
して得ｆ二酵素標品および具体例で得た化合物の種々の
濃度のアセトン溶液を試験管にとり、３７℃、１０分間
反応させた。内部標準として０２５Ｍのブチル−３，５
−ジニトロヘンゾエート１０ｄを添加し、ヘキサン１．
８−で抽出した。

この中の５−ＨＥＴＥの量を高速液体クロマトグラフィ
ー［カラム、ＴＳＫｇｅｌ　ＯＤＳ−８０ＴＭ（ＴＯＹ
Ｏ５ＯＤＡ）：移動相、テトラヒドロフラン　アセトニ
トリル、１％酢酸（５：５　：９　）；流速、１１１１
．／分：検出、紫外線（２３５ｒｍ）］により測定した
。

この結果から、阻害率を次式により算出し、５０％阻害
濃度（ＩＣ５゜）を求めた。

Ｃ９実施例で得た化合物を含まない場 合の５−ＨＥ　Ｔ　Ｅのピーク面積 （内部標準により補正） Ｓ　実施例て得に化合物を添加した場 合の５−ＨＥＴＥのピーク面積 （内部標準により補正） 具体例て得１こ化合物のｒｃｓｏを第１表に示す。

第１表 以上の結果より式の化合物の５−リポキノゲナーゼ阻害
作用が確認された。

次に、式の化合物の投与量および製剤化について説明す
る。

式の化合物はそのまま、あるいは慣用の製剤担体と共に
動物および人に投与することができる。

投与形態としては、特に限定がなく、必要に応じ適宜選
択して使用され、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、
散剤等の経口剤、注射剤、半開等の非経口剤か挙げられ
る。

経口剤として所期の効果を発揮するためには、史書の年
令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で式の
化合物の重量として３０〜４５０Ｒ９を、１日数回に分
けての服用が適当と思われる。

本発明において錠剤、カプセル剤、顆粒剤等の経口剤は
、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルホキ
ジメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類等を用
いて常法に従って製造される。

この種の製剤には、適宜前記賦形剤の他に、結合剤、崩
壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着
色剤、香料等を使用することができる。それぞれの具体
例は以下に示すごとくである。

［結合剤］ デンプン、デキストリン、アラビアゴム末、ゼラチン、
ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、カル
ボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキンプロピ
ルセルロース、結晶セルロース、エチルセルロース、ポ
リビニルピロリドン、マクロゴール。

［崩壊剤］ デンプン、ヒドロキンプロピルスターチ、カルボキシメ
チルセルロースナトリウム、カルボキノメチルセルロー
スカルシウム、カルボキシメチルセルロース、低置換ヒ
ドロキシプロピルセルロース。

［界面活性剤］ ラウリル硫酸ナトリウム、大豆レンチン、ショ糖脂肪酸
エステル、ポリソルベート　８０゜［滑沢剤］ タルク、ロウ類、水素添加植物油、ショ糖脂肪酸エステ
ル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウ
ム、ステアリン酸アルミニウム、ポリエチレングリコー
ル。

［流動性促進剤］ 軽質無水ケイ酸、乾燥水酸化アルミニウムゲル、合成ケ
イ酸アルミニウム、ケイ酸マグネシウム。

また、式の化合物は、懸濁液、エマルジョン剤、シロッ
プ剤、エリキシル剤としても投与することができ、これ
らの各種剤形には、矯味矯臭剤、着色剤を含有してもよ
い。

非経口剤として所期の効果を発揮する１こめには、轡者
の年令、体重、疾密の程度により異なるか、通常成人で
式の化合物の重量として１日０１〜５０Ｒ９までの静注
、点滴静注、皮下注射、筋肉注射が適当と思われる。

この非経口剤は常法に従って製造され、希釈剤として一
般に注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射
用植物油、ゴマ油、ラッカセイ油、ダイズ油、トウモロ
コシ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコー
ル等を用いることができる。さらに必要に応じて、殺菌
剤、防腐剤、安定剤を加えてもよい。また、この非経口
剤は安定性の点から、バイアル等に充填後冷凍し、通常
の凍結乾燥技術により水分を除去し、使用直前に凍結乾
燥物から液剤を再調製することもできる。さらに、必要
に応じて適宜、等張化剤、安定剤、防腐剤、無痛化剤等
を加えても良い。

その他の非経口剤としては、外用液剤、軟膏等の塗布剤
、直腸内投与のための半開等が挙げられ、常法に従って
製造される。

以下に、実施例を示して本発明をさらに詳しく説明する
が、本発明はこれにより同等制限されるものではない。

実施例１ ■コーンスターチ　　　　　　４４９ ■結晶セルロース　　　　　　４０９ ■カルボキシメチル セルロースカルシウム　　　５９ ■軽質無水ケイ酸　　　　　　０．５９■ステアリン酸
マグネシウム　０．５ｇ■具体例１で得た化合物　　　
１０ｇ 計　　　　　１００ｇ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、打錠機にて
圧縮成型して一部２００ｑの錠剤を得た。

この錠剤−錠には、具体例１で得た化合物２０友９が含
有されており、成人１日５〜１５錠を数回にわけて服用
する。

実施例２ ■結晶セルロース　　　　　８４５９ ■ステアリン酸マグネンウム　０５９ ■カルホキシメチル セルロースカルシウム　　　　５９ ■具体例２て得た化合物　　　１（Ｎｊ計　　　　　１
００ｇ 上記の処方に従って■、■および■の一部を均一に混合
し、圧縮成型した後、粉砕し、■および■の残量を加え
て混合し、打錠機にて圧縮成型して一部２００１ｇの錠
剤を得た。

この錠剤−錠には、具体例２で得た化合物２０句が含有
されており、成人１日５〜１５錠を数回にわけて服用す
る。

実施例３ ■結晶セルロース　　　　　４９．５９■１０％ヒドロ
キンプロピル セルロースエタノール溶液　３５ｇ ■カルホキンメチル セルロースカルシウム　　　５ｇ ■ステアリン酸マグネシウム　０．５ｇ■具体例３で得
几化合物　　　１０ｇ 計　　　　　１００９ 上記の処方に従って■、■および■を均一に混合し、常
法によりねつ和し、押し出し造粒機により造粒し、乾燥
・解砕した後、■および■を混合し、打錠機にて圧縮成
型して一部２００　ｘｔｉの錠剤を得た。

この錠剤−錠には、具体例３で得た化合物２０１９が含
有されており、成人１日５〜１５錠を数回にわけて服用
する。

実施例４ ■コーンスターチ　　　　　３４．５９■ステアリン酸
マグ不ンウム　５０ｇ ■カルホキンメチル セルロースカルシウム　　　５ｇ ■軽質無水ケイ酸　　　　　　０５ｇ ■具体例１で得た化合物　　　１０９ 計　　　　　１００ｇ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、圧縮成型機
にて圧縮成型後、破砕機により粉砕し、篩別して顆粒剤
を得た。

この顆粒剤１９には、具体例１で得た化合物１００１１
９が含有されており、成人１日１〜３ｇを数回にわけて
服用する。

実施例５ ■結晶セルロース　　　　　　５５ｇ ■ｌＯ％ヒドロキノプロピル セルロースエタノール溶液３５ｇ ■具体例２て得た化合物　　　１０９ 計　　　　　１００１ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、ねつ和した
。押し出し造粒機に上り造粒後、乾燥し、篩別して顆粒
剤を得た。

この顆粒剤１９には、具体例２で得た化合物１００１１
ｇが含有されており、成人１日１〜３ｇを数回にわけて
服用する。

実施例６ ■コーンスターチ　　　　　８９．５９■軽質無水ケイ
酸　　　　　　０．５ｇ■具体例３で得た化合物　　　
１０９ 計　　　　　　１００９ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、２００１１
９を２号カプセルに充填した。

このカプセル剤１カプセルには、具体例３で得た化合物
２０肩９が含有されており、成人１日５〜１５カプセル
を数回にわけて服用する。

実施例７ ■大豆油　　　　　　　　　　　５゜ ■注射用蒸留水　　　　　　８９．５ｇ■大豆リン脂質
　　　　　　　２．５ｇ■グリセリン　　　　　　　　
　２９ ■具体例１で得た化合物　　　　１ｇ 全量　　　　　　　１００９ 上記の処方に従って■を■および■に溶解し、これに■
と■の溶液を加えて乳化し、注射剤を得た。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）下記式 I ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＿１およびＲ＿３はαβ−Ｈ、Ｒ＿２および
   Ｒ＿４はβα−Ｈである。） で表されるヒドロキシスチルベン系化合物を有効成分と
   する５−リポキシゲナーゼ阻害剤。
2. （２）下記式II ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＿５は水素原子または水酸基を示す。）で表
   されるヒドロキシスチルベン系化合物を有効成分とする
   ５−リポキシゲナーゼ阻害剤。