JPH0339093A - ソルビン酸の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野コ 本発明はプルブアルデヒドを微生物学的に酸化してソル
ビン酸を製造する方法に関する。

［従来の技術］ ソルビン酸或はその塩はいずれも抗カビ力が優れている
ので食品保存剤として貫層されているが、その工業的な
製造法としては通常クロトンアルデヒドとケテンとを反
応させて中間的に形成されたβ−ラクトンを経てそのポ
リエステルを製造し、次いで該ポリエステルを熱分解、
酸分解或はイオン交換樹脂分解してソルビン酸を生成さ
せる方法が実施されている。

しかしながら、かかる方法においてはポリエステル分解
後のソルビン酸の回収或は精製操作が面倒で工程が長く
、複雑な工程管理を必要とする等製造面、経済面におい
て必ずしも有利であるとは言えない。

［発明が解決しようとする課題］ かかる解決策として最近、プルブアルデヒドを特定の微
生物で処理してソルビン酸を製造する方法が提案された
（特開昭６３−１５２９９０号公報）がソルビン酸の収
率面で工業的規模での実施には未だ問題が残っていると
言える。

［課題を解決するための手段］ 本発明者等は微生物学的処理により、ソルビン酸を製造
する方法について鋭意研究を重ねた結果、プルブアルデ
ヒドをアグロバクテリウム属、アゾトバクタ−属、エル
ビニア属、スタフィロコッカス属から選ばれる微生物の
少なくとも１種で処理する場合、収率良くソルビン酸が
得られることを見出し、本発明を完成するに至った。

プルブアルデヒド（別称２．４−へキサジェナール）を
酸化するために用いられる微生物を具体的に例示すれば
、アグロバクテリウムラジオバクター（Ａｇｒｏｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ　ｒａｄｉｏｂａｃｔｅｒ、　　Ｉ　ＦＯ
ｌ　２６０７）　、アゾトバクタ−ビネランディ（Ａｚ
ｏｔｏｂａｃｔｅｒ　ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉＳＡ　Ｔ　
ＣＣ４７８）、エルビニア　カロトボラ（Ｅｒｗｉｎｉ
ａ　ｃａｒｏｔｏｖｏｒａ、　　Ｉ　Ｆ　Ｏ３８３０）
　、スタフィロコッカス　エビデルミゾイス（Ｓｔａｐ
ｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ｅｐｉｄｓｒｍｉｄｉｓ、　　
ｒ　Ｆ　０３７６２）等がある。

上記、微生物を培養するための培地としては炭素源、窒
素源等を含有し微生物が生育するものであればいずれで
も良い。

炭素源としては、微生物のもつソルビン酸生産活性を阻
害しない化合物であれば任意に使用でき、例えばグルコ
ース、シュークロース、エタノール、エチレングリコー
ル、プロピレングリコール、１．４−ブタンジオール、
グリセリン、アセトアルデヒド、酢酸、プロピオン酸な
どが挙げられる。又、窒素源としては肉エキス、ペプト
ン、コーンステイープリカー、尿素、硫酸アンモニウム
、塩化アンモニウム、硝酸ナトリウムなどを用いること
が出来る。更に、必要に応じてリン酸塩、マグネシウム
塩、カルシウム塩、鉄塩、銅塩、亜鉛塩などの無機塩類
や微生物の生育に必要な栄養物質を培地に適宜加えるこ
とができる。

プルブアルデヒドを処理するに当たっては、上記の増殖
した微生物を含む培地をそのまま使用しても、又、且該
培地から集菌し、これを水或は生理食塩水、バッファー
に懸濁したものを使用しても良い。

反応液に対してプルブアルデヒドは系中濃度が０．０１
〜ｌＯ％好ましくは０．０５〜５％程度の範囲で添加さ
れる。仕込み方式は一括、分割、連続等任意に変更可能
であるが、実用上は逐次仕込方式が有利である。

菌体は懸濁液ｌＱ当たり０．５〜２０ｇ（乾燥菌）程度
用いられる。

反応時ζこは撹拌を行い好気的条件を採用する。かかる
条件に設定するには系内に空気や酸素或は必要に応じて
他のガスを混合した混合ガスを吹き込むが、溶液中の酵
素濃度を１　ｐｐｍ以上とするのが望ましい。

反応温度は１０〜７０℃好ましくは４〜９、反応時間は
０．１〜２００時間程度の範囲が有利である。

又、反応液へ必要に応じてＰＱＱやＮＡＤ　（Ｐ）等の
補酵素、界面活性剤、有機溶媒等を適宜添加することも
可能である。

更に、反応は増殖期の微生物を用いる培養法と休止菌体
による反応を組合せたり、他の固定化菌体、菌体抽出処
理物を用いる反応を単独もしくは上記方法と組合せて行
う等種々の態様が可能である。

反応終了後、ソルビン酸を常法に従って、精製して目的
物を得る。

［作　　用］ 本発明においては特定の微生物を用いてプルブアルデヒ
ドを酸化することによって、収率良く高純度のソルビン
酸を製造することが出来る。

［実施例］ 次に実例を挙げて本発明の方法を更に具体的に説明する
。

実施例１ 普通栄養培地（肉エキス３９、ペプトン１０ｇ、食塩５
９、水１１２、ＰＨ７）１０ｔｘｌをＬ字型試験管に入
れ、滅菌処理後、アグロバクテリウム　ラジオバクター
（ＩＰＯ１２６０７）をｌ白金耳接種して３７℃、２４
時間往往復上う培養した。培養後遠心分離法にて集菌し
、菌体をＰＨ７，０，０，１Ｍリン酸バッファーにて２
回洗浄し、ｄｒｙ換算で１８ｍ９の菌体を得た。

次に大型試験管にｄｒｙ換算で２０岬の菌体を入れ、Ｐ
Ｈ７，０，０，１，Ｍリン酸バッファーを５鵬ｌ加えて
菌体を懸濁した後にプルブアルデヒド５畔を添加して反
応を開始した。反応は３０℃にて２０分間行い、１分間
に２００回往復振トウして反応液を撹拌した。

反応終了後、遠心分離法によって反応液の上澄み液を分
取し、これを塩酸でＰＨ２としたのち、ガスクロマド分
析法にてソルビン酸の収率を測定した。

ソルビン酸生成率は４５％であった。

尚、ガスクロマド分析の条件は次の通りである。

装　　置；ヒユーレット　パラカード　５８９０型カ　
ラム；メチルシリコン系ワイドボアカラム０．５３ｇｍ
Ｘｌ５鑵 カラム温度；８０℃、８分〜昇温（１５℃／分）〜２１
Ｑ℃、４分 検　　　出、ＦＩＤ 実施例２〜４、 対照例１ 実施例Ｉの菌株の代わりに下表に示す菌株を用いた以外
は実施例１と同様に反応を行った。

結果を表に示す。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. ソルブアルデヒドをアグロバクテリウム属、アゾトバク
   ター属、エルビニア属、スタフィロコッカス属から選ば
   れる微生物の少なくとも１種で処理することを特徴とす
   るソルビン酸の製造方法。