JPH0564597A - 発酵法によるリボフラビンの製造法 - Google Patents
発酵法によるリボフラビンの製造法Info
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- JPH0564597A JPH0564597A JP3227864A JP22786491A JPH0564597A JP H0564597 A JPH0564597 A JP H0564597A JP 3227864 A JP3227864 A JP 3227864A JP 22786491 A JP22786491 A JP 22786491A JP H0564597 A JPH0564597 A JP H0564597A
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- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P25/00—Preparation of compounds containing alloxazine or isoalloxazine nucleus, e.g. riboflavin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
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- C12R2001/125—Bacillus subtilis ; Hay bacillus; Grass bacillus
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 バチルス属に属し、５′−グアニル酸より
燐酸を遊離する活性が低下し、リボフラビン生産能を有
する変異株を液体培地中で培養し、培養液中にリボフラ
ビンを生成・蓄積せしめ、これを採取することを特徴と
する発酵法によるリボフラビンの製造法。 【効果】 本発明で使用する変異株は、親株に比べて
リボフラビンの生産能が向上しており、著量のリボフラ
ビンを培養液中に生成蓄積させることができるため、本
発明の方法は、安価かつ効率的な発酵法によるリボフラ
ビンの製造法として好適である。
燐酸を遊離する活性が低下し、リボフラビン生産能を有
する変異株を液体培地中で培養し、培養液中にリボフラ
ビンを生成・蓄積せしめ、これを採取することを特徴と
する発酵法によるリボフラビンの製造法。 【効果】 本発明で使用する変異株は、親株に比べて
リボフラビンの生産能が向上しており、著量のリボフラ
ビンを培養液中に生成蓄積させることができるため、本
発明の方法は、安価かつ効率的な発酵法によるリボフラ
ビンの製造法として好適である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は発酵法によるリボフラビ
ンの製造法に関する。リボフラビンは医薬、飼料添加
剤、食品用の着色剤等として有用な物質である。
ンの製造法に関する。リボフラビンは医薬、飼料添加
剤、食品用の着色剤等として有用な物質である。
【０００２】
【従来の技術】従来、発酵法によるリボフラビンの製造
法としては、エレモテシウム・アシュビイ、アシュビア
・ゴシッビイ、キャンディダ・フラレリイあるいはバチ
ルス・ズブチリス等を糖質含有培地中で培養して、培養
液中にリボフラビンを生成蓄積せしめる方法が知られて
いる（プログレス・インダストリアル・ミクロバイオロ
ジー、第１巻、１３９頁、１９５９年、ベルギー国特許
第８９０９１７号、特公昭５３−１０１５５号公報）。
しかし、これらの方法で使用される微生物はリボフラビ
ンの蓄積濃度あるいは生産速度が低く、リボフラビンの
工業生産において満足できるものではなかった。
法としては、エレモテシウム・アシュビイ、アシュビア
・ゴシッビイ、キャンディダ・フラレリイあるいはバチ
ルス・ズブチリス等を糖質含有培地中で培養して、培養
液中にリボフラビンを生成蓄積せしめる方法が知られて
いる（プログレス・インダストリアル・ミクロバイオロ
ジー、第１巻、１３９頁、１９５９年、ベルギー国特許
第８９０９１７号、特公昭５３−１０１５５号公報）。
しかし、これらの方法で使用される微生物はリボフラビ
ンの蓄積濃度あるいは生産速度が低く、リボフラビンの
工業生産において満足できるものではなかった。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、リボ
フラビンの生産能の向上した菌株を得ることにより、安
価かつ効率的な発酵法によるリボフラビンの製造法を提
供することである。
フラビンの生産能の向上した菌株を得ることにより、安
価かつ効率的な発酵法によるリボフラビンの製造法を提
供することである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、リボフラ
ビンを効率よく発酵生産する方法を開発するために鋭意
研究を重ねた結果、バチルス属に属し、５′−グアニル
酸（以下、５′−ＧＭＰと記す）より燐酸を遊離する活
性が低下し、リボフラビン生産能を有する変異株の使用
がその目的に適合し得ることを見いだし、この知見に基
づいて本発明を完成させるに至った。
ビンを効率よく発酵生産する方法を開発するために鋭意
研究を重ねた結果、バチルス属に属し、５′−グアニル
酸（以下、５′−ＧＭＰと記す）より燐酸を遊離する活
性が低下し、リボフラビン生産能を有する変異株の使用
がその目的に適合し得ることを見いだし、この知見に基
づいて本発明を完成させるに至った。
【０００５】すなわち、本発明は、バチルス属に属し、
５′−ＧＭＰより燐酸を遊離する活性が低下し、リボフ
ラビン生産能を有する変異株を液体培地中で培養し、培
養液中にリボフラビンを生成蓄積せしめ、これを採取す
ることを特徴とする発酵法によるリボフラビンの製造法
を提供するものである。
５′−ＧＭＰより燐酸を遊離する活性が低下し、リボフ
ラビン生産能を有する変異株を液体培地中で培養し、培
養液中にリボフラビンを生成蓄積せしめ、これを採取す
ることを特徴とする発酵法によるリボフラビンの製造法
を提供するものである。
【０００６】本発明で使用する変異株は、バチルス属に
属し、５′−ＧＭＰより燐酸を遊離する活性が低下し、
リボフラビン生産能を有する変異株である。また、これ
らの性質に加えて、核酸塩基アナログ耐性等、リボフラ
ビンの生産能を高めることが従来知られている他の性質
（特公昭５３−１０１５５号公報参照）を付与すること
により、更に生産能の高い変異株を得ることもできる。
属し、５′−ＧＭＰより燐酸を遊離する活性が低下し、
リボフラビン生産能を有する変異株である。また、これ
らの性質に加えて、核酸塩基アナログ耐性等、リボフラ
ビンの生産能を高めることが従来知られている他の性質
（特公昭５３−１０１５５号公報参照）を付与すること
により、更に生産能の高い変異株を得ることもできる。
【０００７】本発明で使用する変異株を具体的に例示す
れば以下のものがある。 バチルス・ズブチリス ＡＪ１２６４４（ＦＥＲＭ Ｐ
−１２４５５） （アデニン要求性、ＧＭＰレダクターゼ欠損、（プリン
＋８−アザキサンチン）耐性、５′−ＧＭＰより燐酸を
遊離する活性低下）
れば以下のものがある。 バチルス・ズブチリス ＡＪ１２６４４（ＦＥＲＭ Ｐ
−１２４５５） （アデニン要求性、ＧＭＰレダクターゼ欠損、（プリン
＋８−アザキサンチン）耐性、５′−ＧＭＰより燐酸を
遊離する活性低下）
【０００８】このような変異株を得る際に使用される親
株としては、バチルス属に属する菌株を使用することが
できる。具体的に例示すると次のようなリボフラビン生
産菌が用いられる。 バチルス・ズブチリス ＡＪ１２６４３（ＦＥＲＭ Ｐ
−１２４５６） （アデニン要求性、ＧＭＰレダクターゼ欠損、（プリン
＋８−アザキサンチン）耐性）
株としては、バチルス属に属する菌株を使用することが
できる。具体的に例示すると次のようなリボフラビン生
産菌が用いられる。 バチルス・ズブチリス ＡＪ１２６４３（ＦＥＲＭ Ｐ
−１２４５６） （アデニン要求性、ＧＭＰレダクターゼ欠損、（プリン
＋８−アザキサンチン）耐性）
【０００９】親株を変異処理する方法は、例えばＸ線や
紫外線の照射あるいはＮ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−
ニトロソグアニジン等の変異誘導剤に接触せしめる等の
通常の変異処理法が適用できる。
紫外線の照射あるいはＮ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−
ニトロソグアニジン等の変異誘導剤に接触せしめる等の
通常の変異処理法が適用できる。
【００１０】本発明の変異株の取得のより具体的な実験
例を以下に示す。
例を以下に示す。
【００１１】バチルス・ズブチリス ＡＴＣＣ１３９５
２より誘導したアデニン要求性、ＧＭＰレダクターゼ欠
損、（プリン＋８−アザキサンチン）耐性のリボフラビ
ン生産菌バチルス・ズブチリス ＡＪ１２６４３（ＦＥ
ＲＭ Ｐ−１２４５６）を、可溶性でんぷん２．５％、
酵母エキス０．３％、ポリペプトン０．３％、塩化ナト
リウム０．１％（ｐＨ７．０）を含む液体栄養培地に接
種し、３４℃で１６時間振とう培養して得た培養液１ｍ
ｌを同様の栄養培地４ｍｌに接種し、３４℃で振とう培
養を行った。培養液の５６２ｎｍにおける濁度が０．８
になった時点で遠心集菌し、得られた菌体を５０ｍＭ燐
酸緩衝液（ｐＨ７．０）で洗浄した。次いで洗浄菌体を
同緩衝液５ｍｌに懸濁し、Ｎ−メチル−Ｎ′−ニトロ−
Ｎ−ニトロソグアニジン５００μｇ／５０ｍＭ燐酸緩衝
液（ｐＨ７．０）５ｍｌを添加して氷冷下で４０分静置
した。処理後の菌体を同緩衝液で洗浄した後５ｍｌの同
緩衝液に懸濁し、上記組成の栄養培地の寒天平板培地に
塗抹した。３４℃で２日間培養してコロニーの生育を確
認した後、４−ニトロフェニル燐酸二ナトリウム溶液／
５０ｍＭトリス緩衝液（ｐＨ８．８）に浸した濾紙をプ
レートにのせ、室温で５分間放置した。５′−ＧＭＰよ
り燐酸を遊離する活性が強い菌株のコロニーは生成した
４−ニトロフェノールにより黄色く発色するため、黄色
の発色が弱いコロニーを５′−ＧＭＰより燐酸を遊離す
る活性が低下した菌株として選択した。
２より誘導したアデニン要求性、ＧＭＰレダクターゼ欠
損、（プリン＋８−アザキサンチン）耐性のリボフラビ
ン生産菌バチルス・ズブチリス ＡＪ１２６４３（ＦＥ
ＲＭ Ｐ−１２４５６）を、可溶性でんぷん２．５％、
酵母エキス０．３％、ポリペプトン０．３％、塩化ナト
リウム０．１％（ｐＨ７．０）を含む液体栄養培地に接
種し、３４℃で１６時間振とう培養して得た培養液１ｍ
ｌを同様の栄養培地４ｍｌに接種し、３４℃で振とう培
養を行った。培養液の５６２ｎｍにおける濁度が０．８
になった時点で遠心集菌し、得られた菌体を５０ｍＭ燐
酸緩衝液（ｐＨ７．０）で洗浄した。次いで洗浄菌体を
同緩衝液５ｍｌに懸濁し、Ｎ−メチル−Ｎ′−ニトロ−
Ｎ−ニトロソグアニジン５００μｇ／５０ｍＭ燐酸緩衝
液（ｐＨ７．０）５ｍｌを添加して氷冷下で４０分静置
した。処理後の菌体を同緩衝液で洗浄した後５ｍｌの同
緩衝液に懸濁し、上記組成の栄養培地の寒天平板培地に
塗抹した。３４℃で２日間培養してコロニーの生育を確
認した後、４−ニトロフェニル燐酸二ナトリウム溶液／
５０ｍＭトリス緩衝液（ｐＨ８．８）に浸した濾紙をプ
レートにのせ、室温で５分間放置した。５′−ＧＭＰよ
り燐酸を遊離する活性が強い菌株のコロニーは生成した
４−ニトロフェノールにより黄色く発色するため、黄色
の発色が弱いコロニーを５′−ＧＭＰより燐酸を遊離す
る活性が低下した菌株として選択した。
【００１２】次に親株であるバチルス・ズブチリス Ａ
Ｊ１２６４３と得られた変異株のそれぞれを上記組成の
液体栄養培地に接種し、３４℃で１６時間振とう培養し
た。生育した菌体を遠心集菌し生理食塩水で洗浄した
後、菌体懸濁液を２００Ｗ、７分の条件で超音波破砕し
た。この菌体破砕液を４０ｍＭ（最終濃度）５′−ＧＭ
Ｐ溶液／２００ｍＭＭＯＰＳ緩衝液（ｐＨ７．０）に加
えて３４℃で２時間反応させ、生成したグアノシンをＨ
ＰＬＣ（カラム：三菱化成工業社製ＣＰＫ−０８、溶離
液：３％ギ酸リチウム（ｐＨ４．７５）、検出法：ＵＶ
２６０ｎｍ）で定量することにより５′−ＧＭＰより燐
酸を遊離する活性を測定した。また、これらの菌株を上
述の液体栄養培地４ｍｌに接種し３４℃で１６時間培養
して得た培養液を、表１に示す組成のリボフラビン生産
培地に５％の植菌量で接種して３４℃で３日間培養を行
い、各菌株のリボフラビンの生産能を測定した。
Ｊ１２６４３と得られた変異株のそれぞれを上記組成の
液体栄養培地に接種し、３４℃で１６時間振とう培養し
た。生育した菌体を遠心集菌し生理食塩水で洗浄した
後、菌体懸濁液を２００Ｗ、７分の条件で超音波破砕し
た。この菌体破砕液を４０ｍＭ（最終濃度）５′−ＧＭ
Ｐ溶液／２００ｍＭＭＯＰＳ緩衝液（ｐＨ７．０）に加
えて３４℃で２時間反応させ、生成したグアノシンをＨ
ＰＬＣ（カラム：三菱化成工業社製ＣＰＫ−０８、溶離
液：３％ギ酸リチウム（ｐＨ４．７５）、検出法：ＵＶ
２６０ｎｍ）で定量することにより５′−ＧＭＰより燐
酸を遊離する活性を測定した。また、これらの菌株を上
述の液体栄養培地４ｍｌに接種し３４℃で１６時間培養
して得た培養液を、表１に示す組成のリボフラビン生産
培地に５％の植菌量で接種して３４℃で３日間培養を行
い、各菌株のリボフラビンの生産能を測定した。
【００１３】
【表１】
【００１４】その結果、表２に示すように、親株である
バチルス・ズブチリス ＡＪ１２６４３に比べて、得ら
れた変異株ではいずれも５′−ＧＭＰより燐酸を遊離す
る活性が低下している一方、培養液中に蓄積したリボフ
ラビンの量は変異株の方が明らかに向上していた。
バチルス・ズブチリス ＡＪ１２６４３に比べて、得ら
れた変異株ではいずれも５′−ＧＭＰより燐酸を遊離す
る活性が低下している一方、培養液中に蓄積したリボフ
ラビンの量は変異株の方が明らかに向上していた。
【００１５】
【表２】
【００１６】次いで上記の操作により得られた５′−Ｇ
ＭＰより燐酸を遊離する活性が低下した変異株の一つで
あるバチルス・ズブチリスＮｏ．１８９に同様の方法で
変異処理を行い、５′−ＧＭＰより燐酸を遊離する活性
がさらに低下した変異株バチルス・ズブチリス ＡＪ１
２６４４（ＦＥＲＭ Ｐ−１２４５５）を取得した。バ
チルス・ズブチリス ＡＪ１２６４４とその親株である
Ｎｏ．１８９の５′−ＧＭＰより燐酸を遊離する活性と
培養液中に蓄積したリボフラビンの量は表３の通りであ
る。
ＭＰより燐酸を遊離する活性が低下した変異株の一つで
あるバチルス・ズブチリスＮｏ．１８９に同様の方法で
変異処理を行い、５′−ＧＭＰより燐酸を遊離する活性
がさらに低下した変異株バチルス・ズブチリス ＡＪ１
２６４４（ＦＥＲＭ Ｐ−１２４５５）を取得した。バ
チルス・ズブチリス ＡＪ１２６４４とその親株である
Ｎｏ．１８９の５′−ＧＭＰより燐酸を遊離する活性と
培養液中に蓄積したリボフラビンの量は表３の通りであ
る。
【００１７】
【表３】
【００１８】リボフラビンは５′−ＩＭＰ、５′−ＧＭ
Ｐ、５′−ＧＴＰ等のヌクレオチドを経由して生合成さ
れるが、５′−ヌクレオチドより燐酸を遊離する活性が
高いと脱燐酸してヌクレオシドに変換され菌体外に放出
されてしまうのに対し、本発明で使用される変異株では
５′−ヌクレオチドより燐酸を遊離する活性が低下した
結果、より多くのリボフラビン生合成の前駆体が供給さ
れ、リボフラビンの蓄積量の向上につながったものと考
えられる。
Ｐ、５′−ＧＴＰ等のヌクレオチドを経由して生合成さ
れるが、５′−ヌクレオチドより燐酸を遊離する活性が
高いと脱燐酸してヌクレオシドに変換され菌体外に放出
されてしまうのに対し、本発明で使用される変異株では
５′−ヌクレオチドより燐酸を遊離する活性が低下した
結果、より多くのリボフラビン生合成の前駆体が供給さ
れ、リボフラビンの蓄積量の向上につながったものと考
えられる。
【００１９】本発明の変異株を用いてリボフラビンを生
産せしめるには、炭素源、窒素源、無機塩類、その他必
要に応じて有機微量栄養素及び使用する微生物が要求す
る栄養物質を含有する通常の液体培地が使用される。炭
素源としては、使用する変異株が利用可能なものであれ
ばよく、例えばグルコース、シュクロース、糖蜜、デン
プン加水分解液等が使用される。また窒素源としては、
硫安、尿素、アンモニア等が使用できる。有機微量栄養
素としては、アミノ酸、ビタミン、脂肪酸、核酸、さら
にこれらのものを含有する酵母エキス、ペプトン、カザ
ミノ酸、大豆蛋白加水分解物等が使用される。
産せしめるには、炭素源、窒素源、無機塩類、その他必
要に応じて有機微量栄養素及び使用する微生物が要求す
る栄養物質を含有する通常の液体培地が使用される。炭
素源としては、使用する変異株が利用可能なものであれ
ばよく、例えばグルコース、シュクロース、糖蜜、デン
プン加水分解液等が使用される。また窒素源としては、
硫安、尿素、アンモニア等が使用できる。有機微量栄養
素としては、アミノ酸、ビタミン、脂肪酸、核酸、さら
にこれらのものを含有する酵母エキス、ペプトン、カザ
ミノ酸、大豆蛋白加水分解物等が使用される。
【００２０】培養方法は、発酵温度３０〜４０℃、好ま
しくは３４〜３７℃に制御しつつ通気培養を行う。培養
開始時及び培養中のｐＨは６．０〜７．５、好ましくは
６．５〜７．０に保つのがよく、ｐＨの調整には無機あ
るいは有機の酸性あるいはアルカリ性物質、更には尿
素、炭酸カルシウム、アンモニアガス等を使用すること
ができる。かくして１ないし５日間培養を行うことによ
り、培養液中に著量のリボフラビンが生成蓄積される。
しくは３４〜３７℃に制御しつつ通気培養を行う。培養
開始時及び培養中のｐＨは６．０〜７．５、好ましくは
６．５〜７．０に保つのがよく、ｐＨの調整には無機あ
るいは有機の酸性あるいはアルカリ性物質、更には尿
素、炭酸カルシウム、アンモニアガス等を使用すること
ができる。かくして１ないし５日間培養を行うことによ
り、培養液中に著量のリボフラビンが生成蓄積される。
【００２１】培養終了後の培養液からのリボフラビンを
採取する方法は公知の方法に従って行えばよい。例え
ば、培養液より菌体を除去した後、ハイドロサルファイ
トを適当量添加し、軽く撹拌して２０℃にて遠心分離し
てリボフラビンの還元型粗結晶を採取する。この粗結晶
を１Ｎ酢酸溶液に懸濁し加熱溶解した後、濾過により不
溶物を除去し冷却することにより結晶を析出させる。こ
の結晶を濾別し、乾燥させることによりリボフラビン結
晶を得ることができる。
採取する方法は公知の方法に従って行えばよい。例え
ば、培養液より菌体を除去した後、ハイドロサルファイ
トを適当量添加し、軽く撹拌して２０℃にて遠心分離し
てリボフラビンの還元型粗結晶を採取する。この粗結晶
を１Ｎ酢酸溶液に懸濁し加熱溶解した後、濾過により不
溶物を除去し冷却することにより結晶を析出させる。こ
の結晶を濾別し、乾燥させることによりリボフラビン結
晶を得ることができる。
【００２２】
【実施例】次に実施例により本発明を更に詳細に説明す
る。
る。
【００２３】
【実施例１】表４に示す組成のリボフラビン生産培地を
５ｌ容発酵槽に２ｌ分注し、１２１℃、１５分加熱殺菌
した。この培地に、あらかじめ液体栄養培地で３４℃、
１６時間培養したバチルス・ズブチリス ＡＪ１２６４
４の種培養液１００ｍｌを接種し、発酵温度３４℃、通
気量０．５ｖｖｍ、撹拌数７００ｒｐｍの条件で、アン
モニアによりｐＨを６．５に制御しつつ３日間培養を行
った。その結果、リボフラビン１．０５ｇ／ｌを含む培
養液１．８ｌを得た。培養液より遠心分離により菌体を
除去した後、ハイドロサルファイトを２０ｇ添加し軽く
撹拌して遠心分離を行い、リボフラビン粗結晶１．８ｇ
を得た。この粗結晶を１Ｎ酢酸溶液５００ｍｌに懸濁
し、少量の飽和過マンガン酸溶液を加えて酸化した。次
いで煮沸溶解し熱時濾過し、放冷後析出してきた結晶を
濾過してリボフラビン結晶７５０ｍｇを採取した。これ
を更に再結することによりリボフラビンの純結晶５６０
ｍｇが得られた。
５ｌ容発酵槽に２ｌ分注し、１２１℃、１５分加熱殺菌
した。この培地に、あらかじめ液体栄養培地で３４℃、
１６時間培養したバチルス・ズブチリス ＡＪ１２６４
４の種培養液１００ｍｌを接種し、発酵温度３４℃、通
気量０．５ｖｖｍ、撹拌数７００ｒｐｍの条件で、アン
モニアによりｐＨを６．５に制御しつつ３日間培養を行
った。その結果、リボフラビン１．０５ｇ／ｌを含む培
養液１．８ｌを得た。培養液より遠心分離により菌体を
除去した後、ハイドロサルファイトを２０ｇ添加し軽く
撹拌して遠心分離を行い、リボフラビン粗結晶１．８ｇ
を得た。この粗結晶を１Ｎ酢酸溶液５００ｍｌに懸濁
し、少量の飽和過マンガン酸溶液を加えて酸化した。次
いで煮沸溶解し熱時濾過し、放冷後析出してきた結晶を
濾過してリボフラビン結晶７５０ｍｇを採取した。これ
を更に再結することによりリボフラビンの純結晶５６０
ｍｇが得られた。
【００２４】
【表４】
【００２５】
【発明の効果】本発明で使用する変異株は、親株に比べ
てリボフラビンの生産能が向上しており、著量のリボフ
ラビンを培養液中に生成蓄積させることができるため、
本発明の方法は、安価かつ効率的な発酵法によるリボフ
ラビンの製造法として好適である。
てリボフラビンの生産能が向上しており、著量のリボフ
ラビンを培養液中に生成蓄積させることができるため、
本発明の方法は、安価かつ効率的な発酵法によるリボフ
ラビンの製造法として好適である。
Claims (1)
- 【請求項１】 バチルス属に属し、５′−グアニル酸よ
り燐酸を遊離する活性が低下し、リボフラビン生産能を
有する変異株を液体培地中で培養し、培養液中にリボフ
ラビンを生成蓄積せしめ、これを採取することを特徴と
する発酵法によるリボフラビンの製造法。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3227864A JP2979767B2 (ja) | 1991-09-09 | 1991-09-09 | 発酵法によるリボフラビンの製造法 |
| DE69218700T DE69218700T2 (de) | 1991-09-09 | 1992-08-04 | Verfahren zur Herstellung von Riboflavin durch Fermentation |
| EP92113274A EP0531708B1 (en) | 1991-09-09 | 1992-08-04 | Process for producing riboflavin by fermentation |
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