JPH08258A - キャンディダ属に属する微生物およびそれを用いたイノシトールの製造方法 - Google Patents
キャンディダ属に属する微生物およびそれを用いたイノシトールの製造方法Info
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- JPH08258A JPH08258A JP17531794A JP17531794A JPH08258A JP H08258 A JPH08258 A JP H08258A JP 17531794 A JP17531794 A JP 17531794A JP 17531794 A JP17531794 A JP 17531794A JP H08258 A JPH08258 A JP H08258A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】イノシトールを菌体外に分泌する性質を有す
る、キャンディダ属に属する微生物およびそれを用いた
イノシトールの製造方法。 【効果】本発明の微生物を用い、本発明の発酵法および
菌体を用いた反応により、既存の方法と比較し、より経
済的なイノシトールの生産が可能となる。
る、キャンディダ属に属する微生物およびそれを用いた
イノシトールの製造方法。 【効果】本発明の微生物を用い、本発明の発酵法および
菌体を用いた反応により、既存の方法と比較し、より経
済的なイノシトールの生産が可能となる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】イノシトールは、高等動物におい
てビタミンの一種として重要な物質で、栄養食品、飼料
添加物、医薬品などに利用される。
てビタミンの一種として重要な物質で、栄養食品、飼料
添加物、医薬品などに利用される。
【０００２】
【従来の技術】従来イノシトールは、米糠、コーンステ
ィープリカーなどからの抽出（特開昭６１−５６１４２
号公報）、パン酵母を培養して製造する方法（Ｅｕｒ．
Ｐａｔ．５０６２８９（１９９２））などが知られてい
る。
ィープリカーなどからの抽出（特開昭６１−５６１４２
号公報）、パン酵母を培養して製造する方法（Ｅｕｒ．
Ｐａｔ．５０６２８９（１９９２））などが知られてい
る。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】米糠、コーンスティー
プリカーなどから抽出する方法は、イノシトール以外の
不純物が多く、精製が困難であり、経済的に問題があ
る。また、パン酵母を培養して製造する方法は、生産性
が低く、やはり経済的に問題があり、さらに工業的実績
もない。また、パン酵母以外にはイノシトールを菌体外
に分泌する微生物は、知られていない。
プリカーなどから抽出する方法は、イノシトール以外の
不純物が多く、精製が困難であり、経済的に問題があ
る。また、パン酵母を培養して製造する方法は、生産性
が低く、やはり経済的に問題があり、さらに工業的実績
もない。また、パン酵母以外にはイノシトールを菌体外
に分泌する微生物は、知られていない。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記問題
点を解決するため、パン酵母以外にイノシトールを生産
する潜在能力を持つ微生物を探索し、イノシトールを菌
体外に分泌する微生物を広く検討した結果、キャンディ
ダ属に属する微生物の変異株がイノシトールを菌体外に
分泌することを見い出した。通常の発酵法、すなわち、
炭素源および窒素源などを添加し、微生物が増殖しなが
ら、生産物を生成する方法で、イノシトールが菌体外に
生成蓄積されることは当然であるが、さらに通常の発酵
法とは異なり、培養によって得られた菌体または培養
物、もしくはそれらの処理物を用い、事実上微生物の増
殖が停止し、酵素反応のみが行われる条件（以後酵素法
と記す）で、炭素源からイノシトールを生成し、菌体外
に分泌することも見い出した。
点を解決するため、パン酵母以外にイノシトールを生産
する潜在能力を持つ微生物を探索し、イノシトールを菌
体外に分泌する微生物を広く検討した結果、キャンディ
ダ属に属する微生物の変異株がイノシトールを菌体外に
分泌することを見い出した。通常の発酵法、すなわち、
炭素源および窒素源などを添加し、微生物が増殖しなが
ら、生産物を生成する方法で、イノシトールが菌体外に
生成蓄積されることは当然であるが、さらに通常の発酵
法とは異なり、培養によって得られた菌体または培養
物、もしくはそれらの処理物を用い、事実上微生物の増
殖が停止し、酵素反応のみが行われる条件（以後酵素法
と記す）で、炭素源からイノシトールを生成し、菌体外
に分泌することも見い出した。
【０００５】すなわち、本発明は、イノシトールを菌体
外に分泌する性質を有する、キャンディダ属に属する微
生物およびそれを用いたイノシトールの製造方法であ
る。
外に分泌する性質を有する、キャンディダ属に属する微
生物およびそれを用いたイノシトールの製造方法であ
る。
【０００６】本発明に使用する微生物は、キャンディダ
属に属する微生物であるならばいずれでもよいが、特に
本発明者らが、樹液からメタノールを唯一の炭素源とし
て利用できる微生物として単離し、本発明者らの研究室
で保存されていた、キャンディダ・ボイディニイ（Ｃａ
ｎｄｉｄａ ｂｏｉｄｉｎｉｉ）ＴＲ−１（工業技術院
生命工学工業技術研究所寄託第１４２６１号）からイノ
シトールを分泌する変異株として取得されたキャンディ
ダ・ボイディニイ（Ｃａｎｄｉｄａ ｂｏｉｄｉｎｉ
ｉ）ＩＰ−２（工業技術院生命工学工業技術研究所寄託
第１４２６２号）であることが好ましい。イノシトール
を分泌する性質があれば、他に、薬剤に対する耐性、栄
養要求性などの性質があってもよく、イノシトールを分
泌するキャンディダ属に属する微生物はすべて本発明に
含まれるものである。
属に属する微生物であるならばいずれでもよいが、特に
本発明者らが、樹液からメタノールを唯一の炭素源とし
て利用できる微生物として単離し、本発明者らの研究室
で保存されていた、キャンディダ・ボイディニイ（Ｃａ
ｎｄｉｄａ ｂｏｉｄｉｎｉｉ）ＴＲ−１（工業技術院
生命工学工業技術研究所寄託第１４２６１号）からイノ
シトールを分泌する変異株として取得されたキャンディ
ダ・ボイディニイ（Ｃａｎｄｉｄａ ｂｏｉｄｉｎｉ
ｉ）ＩＰ−２（工業技術院生命工学工業技術研究所寄託
第１４２６２号）であることが好ましい。イノシトール
を分泌する性質があれば、他に、薬剤に対する耐性、栄
養要求性などの性質があってもよく、イノシトールを分
泌するキャンディダ属に属する微生物はすべて本発明に
含まれるものである。
【０００７】上記キャンディダ・ボイディニイ（Ｃａｎ
ｄｉｄａ ｂｏｉｄｉｎｉｉ）ＴＲ−１およびキャンデ
ィダ・ボイディニイ（Ｃａｎｄｉｄａ ｂｏｉｄｉｎｉ
ｉ）ＩＰ−２の菌学的性質を以下に示す。
ｄｉｄａ ｂｏｉｄｉｎｉｉ）ＴＲ−１およびキャンデ
ィダ・ボイディニイ（Ｃａｎｄｉｄａ ｂｏｉｄｉｎｉ
ｉ）ＩＰ−２の菌学的性質を以下に示す。
【０００８】（ａ）培養的、形態的性質 （１）麦芽汁液体培地での培養：黄色〜クリーム色で良
好に生育し、均一の懸濁状態となる。細胞の形は長い楕
円形でわずかに湾曲しているものもある。大きさは１．
５〜３．５Ｘ７〜１２ ミクロン （２）麦芽汁固体培地での培養：黄色〜クリーム色で光
沢はほとんどなく、コロニーは明瞭でよく盛り上がった
状態で、柔らかく、湿潤性である。
好に生育し、均一の懸濁状態となる。細胞の形は長い楕
円形でわずかに湾曲しているものもある。大きさは１．
５〜３．５Ｘ７〜１２ ミクロン （２）麦芽汁固体培地での培養：黄色〜クリーム色で光
沢はほとんどなく、コロニーは明瞭でよく盛り上がった
状態で、柔らかく、湿潤性である。
【０００９】（３）コーンミール寒天培地によるダルモ
ー平板培養：菌糸に類似した形状に、細胞が鎖状につな
がり、枝別れも見られる。
ー平板培養：菌糸に類似した形状に、細胞が鎖状につな
がり、枝別れも見られる。
【００１０】（ｂ）胞子形成 麦芽エキス寒天培地ほか数種の培地で胞子の形成は認め
られない。
られない。
【００１１】（ｃ）生理学的、化学分類学的性質 （１）最適生育条件pH３〜７、温度１５〜３７℃ （２）生成しうる条件pH２〜９、温度５〜４７℃ （３）死滅温度５０℃ （４）硝酸塩を資化する。
【００１２】（５）ゼラチンを液化しない。
【００１３】（６）エタノールを唯一炭素源としてよく
生育する。
生育する。
【００１４】（７）カロチノイドを生産しない。
【００１５】（８）リトマスミルク反応はない。
【００１６】（９）エステルを生産しない。
【００１７】（１０）脂肪を分割しない。
【００１８】（１１）酸を生産する。
【００１９】（１２）デンプン類似物質を生産しない。
【００２０】（１３）ジアゾニウムブルーＢ反応マイナ
ス。
ス。
【００２１】（１４）糖の発酵：グルコース、ラクトー
ス、マンノースをよく発酵する。デンプン、トレハロー
ス、ラフィノースをきわめて微弱に発酵する。ガラクト
ース、マルトース、サッカロース、ラフィノース、イノ
シトールを発酵しない。
ス、マンノースをよく発酵する。デンプン、トレハロー
ス、ラフィノースをきわめて微弱に発酵する。ガラクト
ース、マルトース、サッカロース、ラフィノース、イノ
シトールを発酵しない。
【００２２】（１５）糖の資化：グルコース、フラクト
ース、ラクトース、マンノース、キシロース、マンニト
ールをよく資化する。ガラクトースをわずかに資化する
が、まましない場合がある。サッカロース、マルトー
ス、トレハロース、ラフィノース、デキストリン、デン
プン、イヌリン、アラビノース、ラフィノース、イノシ
トールは資化しない。
ース、ラクトース、マンノース、キシロース、マンニト
ールをよく資化する。ガラクトースをわずかに資化する
が、まましない場合がある。サッカロース、マルトー
ス、トレハロース、ラフィノース、デキストリン、デン
プン、イヌリン、アラビノース、ラフィノース、イノシ
トールは資化しない。
【００２３】（１６）炭素源の利用性 メタノール、エタノール、グリセリンをよく利用する。
ピルビン酸、フマール酸、α- ケトグルタル酸、イソプ
ロパノールを利用する。クエン酸、プロパノール、エチ
レングリコール、プロピレングリコール、エチレングリ
コール、アセトアルデヒド、グリシン、グルタミン酸、
アスパギン酸、L-アラニンをわずかに利用する。
ピルビン酸、フマール酸、α- ケトグルタル酸、イソプ
ロパノールを利用する。クエン酸、プロパノール、エチ
レングリコール、プロピレングリコール、エチレングリ
コール、アセトアルデヒド、グリシン、グルタミン酸、
アスパギン酸、L-アラニンをわずかに利用する。
【００２４】（１７）窒素源の利用性 ペプトン、硫安、塩安、硝安、硝酸ソーダ、尿素、チオ
尿素、L-グルタミン酸、グリシン、DL- アラニン、アス
パラギンを利用する。亜硝酸ソーダを利用しない。
尿素、L-グルタミン酸、グリシン、DL- アラニン、アス
パラギンを利用する。亜硝酸ソーダを利用しない。
【００２５】（１８）ビタミン要求性 ビオチンを要求
する。
する。
【００２６】（１９）アミノ酸要求性 なし。
【００２７】本件微生物は、したがって、ジャーナル・
オブ・ジェネラル・アンド・アプライド・マイクロバイ
オロジー（Ｊ．Ｇｅｎ．Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏ
ｌ．）２６，１３３−１５８（１９８０）（特に第１５
２ページ）において示されるようにキャンディダ・ボイ
ディニイであると同定された。
オブ・ジェネラル・アンド・アプライド・マイクロバイ
オロジー（Ｊ．Ｇｅｎ．Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏ
ｌ．）２６，１３３−１５８（１９８０）（特に第１５
２ページ）において示されるようにキャンディダ・ボイ
ディニイであると同定された。
【００２８】本発明で用いられるイノシトール分泌株の
代表的なものとして、キャンディダ・ボイディニイ Ｉ
Ｐ−２株があげられる。この変異株はキャンディダ・ボ
イディニイ ＴＲ−１株（野性株）を親株として、通常
の変異処理方法によって得られたもので、イノシトール
分泌性の変異株である。
代表的なものとして、キャンディダ・ボイディニイ Ｉ
Ｐ−２株があげられる。この変異株はキャンディダ・ボ
イディニイ ＴＲ−１株（野性株）を親株として、通常
の変異処理方法によって得られたもので、イノシトール
分泌性の変異株である。
【００２９】変異株の誘導は親株を紫外線照射するか、
あるいは変異誘発剤（例えばＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ
−Ｎ−ニトロソグアニジン、エチルメタンスルホン酸
等）で処理した後、公知の方法でイノシトール分泌性の
変異株を得ることができる。例えば親株を変異誘発処理
の後、天然培地などの良好に生育する寒天培地に生育さ
せ、生育したコロニーを、あらかじめイノシトール要求
性の菌株の菌体懸濁液を広げておいた、イノシトールを
含まなく、キャンディダ・ボイディニイが生育すること
が可能でかつイノシトールが存在すればイノシトール要
求性の菌株が生育するような寒天培地へレプリカする。
数日間培養した後、イノシトール分泌性の変異株の周り
には、イノシトール要求性の菌株の生育が認められ、レ
プリカした元の寒天培地から、純粋な変異株として分離
することが可能である。
あるいは変異誘発剤（例えばＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ
−Ｎ−ニトロソグアニジン、エチルメタンスルホン酸
等）で処理した後、公知の方法でイノシトール分泌性の
変異株を得ることができる。例えば親株を変異誘発処理
の後、天然培地などの良好に生育する寒天培地に生育さ
せ、生育したコロニーを、あらかじめイノシトール要求
性の菌株の菌体懸濁液を広げておいた、イノシトールを
含まなく、キャンディダ・ボイディニイが生育すること
が可能でかつイノシトールが存在すればイノシトール要
求性の菌株が生育するような寒天培地へレプリカする。
数日間培養した後、イノシトール分泌性の変異株の周り
には、イノシトール要求性の菌株の生育が認められ、レ
プリカした元の寒天培地から、純粋な変異株として分離
することが可能である。
【００３０】本発明の発酵法における培養方法について
説明する。イノシトール生産用の培地は、炭素源、窒素
源、無機イオンおよび必要に応じてその他の有機微量成
分を含有する通常の培地が使用できる。
説明する。イノシトール生産用の培地は、炭素源、窒素
源、無機イオンおよび必要に応じてその他の有機微量成
分を含有する通常の培地が使用できる。
【００３１】炭素源としては、グルコース、フラクトー
ス、でんぷんおよびセルロースの加水分解物、糖蜜など
の糖類、フマール酸、クエン酸、コハク酸のごとき有機
酸、メタノール、エタノール、グリセロールのごときア
ルコール類などを１〜１５％、窒素源として、酢酸アン
モニウムのごとき有機アンモニウム塩、硫酸アンモニウ
ム、塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム、硝酸アン
モニウム、のごとき無機アンモニウム塩、アンモニアガ
ス、アンモニア水、尿素等を０．１〜４．０％、有機微
量成分としては、ビオチン等の被要求性物質が０．００
０００１％〜０．１％、また必要に応じて、コーンステ
ィープリカー、ペプトン、酵母エキス等０〜５％をそれ
ぞれ適当に含有する培地が好ましく用いられる。これら
の他に、リン酸カリウム、硫酸マグネシウム、塩化カル
シウム、塩化ナトリウム、硫酸亜鉛、硫酸銅、硫酸第１
鉄、等が微量成分として添加されるのが好ましい。また
好ましくは消泡剤なども添加し、培養条件の安定化をは
かる。
ス、でんぷんおよびセルロースの加水分解物、糖蜜など
の糖類、フマール酸、クエン酸、コハク酸のごとき有機
酸、メタノール、エタノール、グリセロールのごときア
ルコール類などを１〜１５％、窒素源として、酢酸アン
モニウムのごとき有機アンモニウム塩、硫酸アンモニウ
ム、塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム、硝酸アン
モニウム、のごとき無機アンモニウム塩、アンモニアガ
ス、アンモニア水、尿素等を０．１〜４．０％、有機微
量成分としては、ビオチン等の被要求性物質が０．００
０００１％〜０．１％、また必要に応じて、コーンステ
ィープリカー、ペプトン、酵母エキス等０〜５％をそれ
ぞれ適当に含有する培地が好ましく用いられる。これら
の他に、リン酸カリウム、硫酸マグネシウム、塩化カル
シウム、塩化ナトリウム、硫酸亜鉛、硫酸銅、硫酸第１
鉄、等が微量成分として添加されるのが好ましい。また
好ましくは消泡剤なども添加し、培養条件の安定化をは
かる。
【００３２】培養は通常、好気条件で行う。培養の間、
培地のｐＨ３〜８に、温度は２０〜３５℃に調節し、２
４〜９６時間振とうまたは通気撹拌培養すれば好ましい
結果が得られる。
培地のｐＨ３〜８に、温度は２０〜３５℃に調節し、２
４〜９６時間振とうまたは通気撹拌培養すれば好ましい
結果が得られる。
【００３３】次に本発明における酵素法でのイノシトー
ルの生産方法について説明する。前記発酵法における培
地と同様に培養し、菌体を得る。この菌体をそのまま反
応に用いてもよいが、好ましくは公知の方法で原形質分
離（プラスモリシス）化処理を行う。
ルの生産方法について説明する。前記発酵法における培
地と同様に培養し、菌体を得る。この菌体をそのまま反
応に用いてもよいが、好ましくは公知の方法で原形質分
離（プラスモリシス）化処理を行う。
【００３４】反応原料としては、一般にしられているイ
ノシトール生合成の前駆体である、グルコース−６−リ
ン酸あるいはさらにグルコース−６−リン酸の前駆体で
あるグルコースを使用することができる。反応はニコチ
ンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ）、アンモニ
ウムイオン、の存在下で行なうのが好ましく、グルコー
スを前駆体とする場合には、さらにマグネシウム、アデ
ノシン−３−リン酸もしくはその前駆体を添加すること
が好ましい。なお、これらのイノシトール生合成に必要
な化合物群は、各々単独に添加してもよいが、これらを
含む天然由来の混合物をかわりに使用することも可能で
ある。また、ＳＨ基保護剤など反応を安定化するための
添加物を含んでもよい。反応の間、反応液のｐＨ３〜８
に、温度は２０〜３５℃に調節し、１０〜７２時間振と
うまたは通気撹拌すれば好ましい結果が得られる。
ノシトール生合成の前駆体である、グルコース−６−リ
ン酸あるいはさらにグルコース−６−リン酸の前駆体で
あるグルコースを使用することができる。反応はニコチ
ンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ）、アンモニ
ウムイオン、の存在下で行なうのが好ましく、グルコー
スを前駆体とする場合には、さらにマグネシウム、アデ
ノシン−３−リン酸もしくはその前駆体を添加すること
が好ましい。なお、これらのイノシトール生合成に必要
な化合物群は、各々単独に添加してもよいが、これらを
含む天然由来の混合物をかわりに使用することも可能で
ある。また、ＳＨ基保護剤など反応を安定化するための
添加物を含んでもよい。反応の間、反応液のｐＨ３〜８
に、温度は２０〜３５℃に調節し、１０〜７２時間振と
うまたは通気撹拌すれば好ましい結果が得られる。
【００３５】培養液あるいは反応液に蓄積されたイノシ
トールは、そのまま単離精製することなく、飼料などに
用いることができる。また、培養液あるいは反応液から
イノシトールを単離採取するには公知の方法で可能であ
る。例えば、菌体を遠心分離などで除去した後、カチオ
ンおよびアニオン交換樹脂でイオン性の物質を除き、濃
縮すれば結晶を取得することができる。
トールは、そのまま単離精製することなく、飼料などに
用いることができる。また、培養液あるいは反応液から
イノシトールを単離採取するには公知の方法で可能であ
る。例えば、菌体を遠心分離などで除去した後、カチオ
ンおよびアニオン交換樹脂でイオン性の物質を除き、濃
縮すれば結晶を取得することができる。
【００３６】
【実施例】以下、実施例により本発明を具体的に説明す
る。
る。
【００３７】実施例１ （イノシトール分泌変異株の分離）キャンディダ・ボイ
ディニイＴＲ−１の菌体を常法によりＮ−メチル−Ｎ’
−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン処理（３００μg ／
ml）、３０℃１０分）した後、この細胞を適当に希釈
し、表１に示した培地に１５g ／l の濃度に寒天を加え
た平板培地に塗布し、３０℃で２日間培養した。一方サ
ッカロマイセス・セレビシアエＡＴＣＣ３４８９３を、
表１に示した培地５mlに１白金耳植菌し、１日間３０℃
で振とう培養し、生理食塩水で洗浄後、適当量を表２に
示した培地（平板培地）に塗布した。表１に示した培地
に生育してきた変異処理したキャンディダ・ボイディニ
イＴＲ−１のコロニーを、常法によりサッカロマイセス
・セレビシアエＡＴＣＣ３４８９３を塗布した表２に示
した培地（平板培地）にレプリカし、３０℃で２日間培
養した。レプリカされたコロニーのまわりに、サッカロ
マイセス・セレビシアエＡＴＣＣ３４８９３の生育の認
められるコロニーを確認し、元の平板培地（表１）か
ら、純粋な変異株として単離し、キャンディダ・ボイデ
ィニイＩＰ−２を取得した。
ディニイＴＲ−１の菌体を常法によりＮ−メチル−Ｎ’
−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン処理（３００μg ／
ml）、３０℃１０分）した後、この細胞を適当に希釈
し、表１に示した培地に１５g ／l の濃度に寒天を加え
た平板培地に塗布し、３０℃で２日間培養した。一方サ
ッカロマイセス・セレビシアエＡＴＣＣ３４８９３を、
表１に示した培地５mlに１白金耳植菌し、１日間３０℃
で振とう培養し、生理食塩水で洗浄後、適当量を表２に
示した培地（平板培地）に塗布した。表１に示した培地
に生育してきた変異処理したキャンディダ・ボイディニ
イＴＲ−１のコロニーを、常法によりサッカロマイセス
・セレビシアエＡＴＣＣ３４８９３を塗布した表２に示
した培地（平板培地）にレプリカし、３０℃で２日間培
養した。レプリカされたコロニーのまわりに、サッカロ
マイセス・セレビシアエＡＴＣＣ３４８９３の生育の認
められるコロニーを確認し、元の平板培地（表１）か
ら、純粋な変異株として単離し、キャンディダ・ボイデ
ィニイＩＰ−２を取得した。
【００３８】
【表１】
【００３９】
【表２】
【００４０】実施例２ （発酵法によるイノシトール分泌変異株の培養およびイ
ノシトールの生産）表４に示す菌株をそれぞれ、表１に
示した培地で３０℃２４時間振とうして前培養した後、
あらかじめ１１５℃１０分上記滅菌した表３に示した組
成の培地５０mlを含む５００ml溶三角フラスコに植え継
ぎ、１８０rpm 、振幅３０cmの条件下で４８時間培養し
た。
ノシトールの生産）表４に示す菌株をそれぞれ、表１に
示した培地で３０℃２４時間振とうして前培養した後、
あらかじめ１１５℃１０分上記滅菌した表３に示した組
成の培地５０mlを含む５００ml溶三角フラスコに植え継
ぎ、１８０rpm 、振幅３０cmの条件下で４８時間培養し
た。
【００４１】培養終了後、菌体、炭酸カルシウムを除去
したろ液中のイノシトール濃度を用いたバイオアッセイ
法で定量したところ、表４に示すような結果を得た。
したろ液中のイノシトール濃度を用いたバイオアッセイ
法で定量したところ、表４に示すような結果を得た。
【００４２】
【表３】
【００４３】
【表４】
【００４４】実施例３ （酵素法によるイノシトール分泌変異株の培養およびイ
ノシトールの生産）表９および表１０に示す菌株をそれ
ぞれ、表１に示した培地で３０℃２４時間振とうして前
培養した後、あらかじめ１１５℃１０分上記滅菌した表
５および表６に示した組成の培地１０mlを含む２５mm経
の試験管に植え継ぎ、３０℃２４時間振とう培養した。
分離酵母菌体８０g ／l （乾燥重量換算）を蒸留水に分
散せしめ、４５分間３７℃でかつ静止状態で放置した。
しかる後に、４ｍｏｌ／ｌのＤ−ソルビトール水溶液を
加え、最終濃度１．５ｍｏｌ／ｌのＤ−ソルビトール濃
度とし、１０分間３７℃で静止状態で放置した。
ノシトールの生産）表９および表１０に示す菌株をそれ
ぞれ、表１に示した培地で３０℃２４時間振とうして前
培養した後、あらかじめ１１５℃１０分上記滅菌した表
５および表６に示した組成の培地１０mlを含む２５mm経
の試験管に植え継ぎ、３０℃２４時間振とう培養した。
分離酵母菌体８０g ／l （乾燥重量換算）を蒸留水に分
散せしめ、４５分間３７℃でかつ静止状態で放置した。
しかる後に、４ｍｏｌ／ｌのＤ−ソルビトール水溶液を
加え、最終濃度１．５ｍｏｌ／ｌのＤ−ソルビトール濃
度とし、１０分間３７℃で静止状態で放置した。
【００４５】処理菌体を用い表７および表８に示した組
成で３０℃２０時間振とうし反応した。反応終了後、菌
体を除去したろ液中のイノシトール濃度を用いたバイオ
アッセイ法で定量したところ、表９および表１０に示す
ような結果を得た。
成で３０℃２０時間振とうし反応した。反応終了後、菌
体を除去したろ液中のイノシトール濃度を用いたバイオ
アッセイ法で定量したところ、表９および表１０に示す
ような結果を得た。
【００４６】
【表５】
【００４７】
【表６】
【００４８】
【表７】
【００４９】
【表８】
【００５０】
【表９】
【００５１】
【表１０】
【００５２】実施例４ 実施例２での培養液１リットル分の上清をカチオン交換
樹脂ダイヤイオンＳＫ１Ｂに通液し、その素通り画分を
あつめ、さらにアニオン交換樹脂ダイヤイオンＰＡ３１
６に通液し、その素通り画分をあつめ、濃縮晶析し、純
度９７％以上のイノシトール結晶１g を得た。
樹脂ダイヤイオンＳＫ１Ｂに通液し、その素通り画分を
あつめ、さらにアニオン交換樹脂ダイヤイオンＰＡ３１
６に通液し、その素通り画分をあつめ、濃縮晶析し、純
度９７％以上のイノシトール結晶１g を得た。
【００５３】
【発明の効果】本発明の酵母を用い、本発明の発酵法お
よび菌体を用いた反応により、既存の方法と比較し、よ
り経済的なイノシトールの生産が可能となる。
よび菌体を用いた反応により、既存の方法と比較し、よ
り経済的なイノシトールの生産が可能となる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:72）
Claims (7)
- 【請求項１】イノシトールを菌体外に分泌する性質を有
する、キャンディダ属に属する微生物。 - 【請求項２】キャンディダ属に属する微生物がキャンデ
ィダ・ボイディニイであることを特徴とする請求項１記
載のキャンディダ属に属する微生物。 - 【請求項３】イノシトールを菌体外に分泌する性質を有
する、キャンディダ属に属する微生物を用いたイノシト
ールの製造方法。 - 【請求項４】キャンディダ属に属する微生物を培養して
培養液中にイノシトールを蓄積せしめることを特徴とす
る、発酵法によるイノシトールの製造方法。 - 【請求項５】キャンディダ属に属する微生物を培養して
培養液中にイノシトールを蓄積せしめ、該培養液からイ
ノシトールを単離採取することを特徴とする、発酵法に
よるイノシトールの製造方法。 - 【請求項６】キャンディダ属に属する微生物を培養し
て、得られた菌体または培養物、もしくはそれらの処理
物を用い、イノシトールを生成蓄積せしめる反応をおこ
なうことを特徴とする、イノシトールの製造方法。 - 【請求項７】キャンディダ属に属する微生物を培養し
て、得られた菌体または培養物、もしくはそれらの処理
物を用い、イノシトールを生成蓄積せしめる反応をおこ
ない、該反応物からイノシトールを単離採取することを
特徴とする、イノシトールの製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17531794A JPH08258A (ja) | 1994-04-19 | 1994-07-27 | キャンディダ属に属する微生物およびそれを用いたイノシトールの製造方法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8006494 | 1994-04-19 | ||
| JP6-80064 | 1994-04-19 | ||
| JP17531794A JPH08258A (ja) | 1994-04-19 | 1994-07-27 | キャンディダ属に属する微生物およびそれを用いたイノシトールの製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08258A true JPH08258A (ja) | 1996-01-09 |
Family
ID=26421099
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP17531794A Withdrawn JPH08258A (ja) | 1994-04-19 | 1994-07-27 | キャンディダ属に属する微生物およびそれを用いたイノシトールの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH08258A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013073483A1 (ja) | 2011-11-14 | 2013-05-23 | 旭化成ケミカルズ株式会社 | ミオイノシトール及びミオイノシトール誘導体の製造方法 |
| WO2013115012A1 (ja) | 2012-02-02 | 2013-08-08 | 旭化成ケミカルズ株式会社 | シロ‐イノシトールの製造方法 |
| WO2018004307A1 (ko) | 2016-06-30 | 2018-01-04 | 씨제이제일제당 (주) | 고농도 마이오-이노시톨의 효소적 제조방법 |
-
1994
- 1994-07-27 JP JP17531794A patent/JPH08258A/ja not_active Withdrawn
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013073483A1 (ja) | 2011-11-14 | 2013-05-23 | 旭化成ケミカルズ株式会社 | ミオイノシトール及びミオイノシトール誘導体の製造方法 |
| KR20140048334A (ko) | 2011-11-14 | 2014-04-23 | 아사히 가세이 케미칼즈 가부시키가이샤 | 미오이노시톨 및 미오이노시톨 유도체의 제조 방법 |
| EP2921558A1 (en) | 2011-11-14 | 2015-09-23 | Asahi Kasei Chemicals Corporation | Method for producing myo-inositol and myo-inositol derivative |
| US9365603B2 (en) | 2011-11-14 | 2016-06-14 | Asahi Kasei Chemicals Corporation | Method for producing myo-inositol and myo-inositol derivative |
| US9994871B2 (en) | 2011-11-14 | 2018-06-12 | Asahi Kasei Chemicals Corporation | Method for producing myo-inositol and myo-inositol derivative |
| WO2013115012A1 (ja) | 2012-02-02 | 2013-08-08 | 旭化成ケミカルズ株式会社 | シロ‐イノシトールの製造方法 |
| US9505795B2 (en) | 2012-02-02 | 2016-11-29 | Asahi Kasei Chemicals Corporation | Method for producing scyllo-inositol |
| WO2018004307A1 (ko) | 2016-06-30 | 2018-01-04 | 씨제이제일제당 (주) | 고농도 마이오-이노시톨의 효소적 제조방법 |
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| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A761 | Written withdrawal of application |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A761 Effective date: 20041201 |