JPH09107983A - ヒドロキシメチルナフタレン類の製造法ならびにヒドロキシメチルメチルナフタレン類および／またはジヒドロキシメチルナフタレン類の製造法 - Google Patents
ヒドロキシメチルナフタレン類の製造法ならびにヒドロキシメチルメチルナフタレン類および／またはジヒドロキシメチルナフタレン類の製造法Info
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- JPH09107983A JPH09107983A JP29744795A JP29744795A JPH09107983A JP H09107983 A JPH09107983 A JP H09107983A JP 29744795 A JP29744795 A JP 29744795A JP 29744795 A JP29744795 A JP 29744795A JP H09107983 A JPH09107983 A JP H09107983A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 ヒドロキシメチルナフタレン類やジヒドロキ
シメチルナフタレン類等を、微生物を用いた酸化反応に
より選択性よく製造する方法を提供すること。 【解決手段】 メチルナフタレン類またはジメチルナフ
タレン類にバシラス属に属する微生物を作用させてメチ
ル基の酸化反応を行なう。
シメチルナフタレン類等を、微生物を用いた酸化反応に
より選択性よく製造する方法を提供すること。 【解決手段】 メチルナフタレン類またはジメチルナフ
タレン類にバシラス属に属する微生物を作用させてメチ
ル基の酸化反応を行なう。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明はヒドロキシメチルナ
フタレン類の製造法ならびにヒドロキシメチルメチルナ
フタレン類および／またはジヒドロキシメチルナフタレ
ン類の製造法に関する。本発明で得られるヒドロキシメ
チルナフタレン類、ヒドロキシメチルメチルナフタレン
類、ジヒドロキシメチルナフタレン類は染料、色素、香
料等の原材料やポリエステル原材料として利用できる。
フタレン類の製造法ならびにヒドロキシメチルメチルナ
フタレン類および／またはジヒドロキシメチルナフタレ
ン類の製造法に関する。本発明で得られるヒドロキシメ
チルナフタレン類、ヒドロキシメチルメチルナフタレン
類、ジヒドロキシメチルナフタレン類は染料、色素、香
料等の原材料やポリエステル原材料として利用できる。
【０００２】
【従来の技術】ヒドロキシメチルナフタレン類の製法と
しては、メチルナフタレン類を酢酸マンガン、酢酸鉛、
酢酸コバルトもしくは酢酸パラジウムで酸化する方法が
一般的である。しかし、これらの方法は、メチルナフタ
レン類と当量もしくは過剰の酢酸金属塩を用いなければ
ならず、不経済である。
しては、メチルナフタレン類を酢酸マンガン、酢酸鉛、
酢酸コバルトもしくは酢酸パラジウムで酸化する方法が
一般的である。しかし、これらの方法は、メチルナフタ
レン類と当量もしくは過剰の酢酸金属塩を用いなければ
ならず、不経済である。
【０００３】一方、微生物を用いた酸化反応は、微生物
があたかも空気中の酸素を活性化して酸化を行う触媒の
ように働くため経済的に有利であり、微生物の種類を選
択すれば工業的に有用な手段になりうる。たとえば、微
生物によるメチルナフタレン類の代謝の例としては、シ
ュードモナス（Pseudomonas ）属の菌の作用によりヒド
ロキシメチルナフタレン類を経由してナフタレンカルボ
ン酸類を生産する方法が知られている。しかしながら、
かかる方法ではヒドロキシメチルナフタレン類およびナ
フタレンカルボン酸類の両方を代謝産物として生成する
ため、ヒドロキシメチルナフタレン類の選択性は良好と
はいえない。さらに、シュードモナス属の菌を用いたジ
メチルナフタレン類の酸化においては、選択的に１つの
メチル基のみが酸化されるため、２つのメチル基を同時
に酸化してジヒドロキシメチルナフタレン類を生産でき
ない。
があたかも空気中の酸素を活性化して酸化を行う触媒の
ように働くため経済的に有利であり、微生物の種類を選
択すれば工業的に有用な手段になりうる。たとえば、微
生物によるメチルナフタレン類の代謝の例としては、シ
ュードモナス（Pseudomonas ）属の菌の作用によりヒド
ロキシメチルナフタレン類を経由してナフタレンカルボ
ン酸類を生産する方法が知られている。しかしながら、
かかる方法ではヒドロキシメチルナフタレン類およびナ
フタレンカルボン酸類の両方を代謝産物として生成する
ため、ヒドロキシメチルナフタレン類の選択性は良好と
はいえない。さらに、シュードモナス属の菌を用いたジ
メチルナフタレン類の酸化においては、選択的に１つの
メチル基のみが酸化されるため、２つのメチル基を同時
に酸化してジヒドロキシメチルナフタレン類を生産でき
ない。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、ヒドロキシ
メチルナフタレン類やジヒドロキシメチルナフタレン類
等を、微生物を用いた酸化反応により選択性よく製造す
る方法を提供することを目的とする。
メチルナフタレン類やジヒドロキシメチルナフタレン類
等を、微生物を用いた酸化反応により選択性よく製造す
る方法を提供することを目的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、前記課題
を解決すべく、メチルナフタレン類等に作用させる微生
物について鋭意検討を重ねた結果、バシラス属に属する
微生物により前記目的を達成できることを見出した。
を解決すべく、メチルナフタレン類等に作用させる微生
物について鋭意検討を重ねた結果、バシラス属に属する
微生物により前記目的を達成できることを見出した。
【０００６】すなわち、本発明は、メチルナフタレン類
にバシラス属に属する微生物を作用させてメチルナフタ
レン類のメチル基の酸化反応を行なう工程および反応液
からヒドロキシメチルナフタレン類を採取する工程を含
んでなるヒドロキシメチルナフタレン類の製造法、並び
にジメチルナフタレン類にバシラス属に属する微生物を
作用させて、ジメチルナフタレン類のメチル基の１つま
たは２つの酸化反応を行なう工程ならびに反応液からヒ
ドロキシメチルメチルナフタレン類および／またはジヒ
ドロキシメチルナフタレン類を採取する工程を含んでな
るヒドロキシメチルメチルナフタレン類および／または
ジヒドロキシメチルナフタレン類の製造法に関する。
にバシラス属に属する微生物を作用させてメチルナフタ
レン類のメチル基の酸化反応を行なう工程および反応液
からヒドロキシメチルナフタレン類を採取する工程を含
んでなるヒドロキシメチルナフタレン類の製造法、並び
にジメチルナフタレン類にバシラス属に属する微生物を
作用させて、ジメチルナフタレン類のメチル基の１つま
たは２つの酸化反応を行なう工程ならびに反応液からヒ
ドロキシメチルメチルナフタレン類および／またはジヒ
ドロキシメチルナフタレン類を採取する工程を含んでな
るヒドロキシメチルメチルナフタレン類および／または
ジヒドロキシメチルナフタレン類の製造法に関する。
【０００７】
【発明の実施の形態】本発明において基質として用いら
れるメチルナフタレン類とは、ナフタレンのα位または
β位にメチル基を有する化合物であり、たとえば、α−
メチルナフタレン、β−メチルナフタレンがあげられ
る。またジメチルナフタレン類とは、一般式（１）：
れるメチルナフタレン類とは、ナフタレンのα位または
β位にメチル基を有する化合物であり、たとえば、α−
メチルナフタレン、β−メチルナフタレンがあげられ
る。またジメチルナフタレン類とは、一般式（１）：
【０００８】
【化１】
【０００９】（式中、Ｒ1 〜Ｒ6 はいずれも水素原子ま
たはメチル基であり、Ｒ1 〜Ｒ6 の２つはメチル基であ
る）で表される化合物であり、たとえば、２，６−ジメ
チルナフタレン、１，５−ジメチルナフタレン等があげ
られる。
たはメチル基であり、Ｒ1 〜Ｒ6 の２つはメチル基であ
る）で表される化合物であり、たとえば、２，６−ジメ
チルナフタレン、１，５−ジメチルナフタレン等があげ
られる。
【００１０】本発明に使用されうる微生物は、バシラセ
アエ（Bacillaceae ）科のバシラス属に属するグラム陽
性の有芽胞桿菌であり、好ましくはバシラス セレウス
（Bacillus cereus ）、特に好ましくは平成６年３月７
日に工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託した、受
託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１４２１０である。バシラスセ
レウスは土壌常在の通性嫌気性菌で、耕地、河川、公
園、山林などあらゆる土壌中に芽胞の状態で分布してお
り、周毛性べん毛を有し、運動性を示すグラム陽性の有
芽胞桿菌であって菌体の中央またはやや中央に楕円形の
芽胞が存在する。
アエ（Bacillaceae ）科のバシラス属に属するグラム陽
性の有芽胞桿菌であり、好ましくはバシラス セレウス
（Bacillus cereus ）、特に好ましくは平成６年３月７
日に工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託した、受
託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１４２１０である。バシラスセ
レウスは土壌常在の通性嫌気性菌で、耕地、河川、公
園、山林などあらゆる土壌中に芽胞の状態で分布してお
り、周毛性べん毛を有し、運動性を示すグラム陽性の有
芽胞桿菌であって菌体の中央またはやや中央に楕円形の
芽胞が存在する。
【００１１】前記微生物の培養には、通常、微生物の培
養に用いられる栄養源を含む液体培地が使用されうる。
前記栄養源は、炭素源および窒素源として肉エキス、ペ
プトンなどが用いられる。さらに、たとえばリン、マグ
ネシウム、鉄、マンガン、NaClなどの無機物質およびビ
タミン類などが適宜混合されうる。そのような培地の例
としては、たとえば蒸留水に魚（カツオ）肉エキス、ポ
リペプトン、NaClを溶解した液体培地があげられる。培
地は滅菌することが必要である。滅菌は通常の高圧蒸気
滅菌などにより行なうことができる。
養に用いられる栄養源を含む液体培地が使用されうる。
前記栄養源は、炭素源および窒素源として肉エキス、ペ
プトンなどが用いられる。さらに、たとえばリン、マグ
ネシウム、鉄、マンガン、NaClなどの無機物質およびビ
タミン類などが適宜混合されうる。そのような培地の例
としては、たとえば蒸留水に魚（カツオ）肉エキス、ポ
リペプトン、NaClを溶解した液体培地があげられる。培
地は滅菌することが必要である。滅菌は通常の高圧蒸気
滅菌などにより行なうことができる。
【００１２】前記微生物は、本発明の製造法に用いる前
に、通常の条件、たとえば、ｐＨ５〜９程度、好ましく
はｐＨ６．５〜７．５にて、１５〜４０℃程度、好まし
くは２５〜３５℃の温度で所望の濁度となるまで、１２
〜４８時間程度、前培養を行なってもよい。前培養を行
なった培養物の中に直接基質を加えて反応を行なっても
よいし、基質を入れた反応用の溶液中に前記培養物を適
量加えてもよいし、または前培養後に遠心分離によって
菌体を集めて反応に用いてもよい。
に、通常の条件、たとえば、ｐＨ５〜９程度、好ましく
はｐＨ６．５〜７．５にて、１５〜４０℃程度、好まし
くは２５〜３５℃の温度で所望の濁度となるまで、１２
〜４８時間程度、前培養を行なってもよい。前培養を行
なった培養物の中に直接基質を加えて反応を行なっても
よいし、基質を入れた反応用の溶液中に前記培養物を適
量加えてもよいし、または前培養後に遠心分離によって
菌体を集めて反応に用いてもよい。
【００１３】反応の際に用いられる液体の種類はとくに
限定されないが、蒸留水、前記した液体培地などを用い
てもよい。希釈された液体培地を用いると反応の収率が
上昇するので好ましい。
限定されないが、蒸留水、前記した液体培地などを用い
てもよい。希釈された液体培地を用いると反応の収率が
上昇するので好ましい。
【００１４】本発明における「希釈された培地」および
「希釈培地」とは、通常用いられる量の栄養源を含有す
る液体培地を希釈してえられる培地を意味するが、少な
くとも炭素源が通常用いられる量より少なく含有され
る。好ましくは１／２〜１／２０量、より好ましくは１
／５〜１／１０量含有される培地をも含みうる。前記液
体培地の培地１０００ｍｌ中に栄養源の含有量はたとえ
ば魚肉（カツオ）エキス（和光純薬社製、魚肉エキス
（（カツオ製）、水分３０％含有）１０ｇ、ポリペプト
ン（日本製薬社製、総窒素１２．５〜１４．５％、アミ
ノ酸窒素５．０〜６．５％含有）１０ｇ、NaCl２ｇであ
る。希釈された液体培地は、好ましくは２〜２０倍程
度、より好ましくは５〜１０倍に滅菌水を用いて希釈さ
れたものである。
「希釈培地」とは、通常用いられる量の栄養源を含有す
る液体培地を希釈してえられる培地を意味するが、少な
くとも炭素源が通常用いられる量より少なく含有され
る。好ましくは１／２〜１／２０量、より好ましくは１
／５〜１／１０量含有される培地をも含みうる。前記液
体培地の培地１０００ｍｌ中に栄養源の含有量はたとえ
ば魚肉（カツオ）エキス（和光純薬社製、魚肉エキス
（（カツオ製）、水分３０％含有）１０ｇ、ポリペプト
ン（日本製薬社製、総窒素１２．５〜１４．５％、アミ
ノ酸窒素５．０〜６．５％含有）１０ｇ、NaCl２ｇであ
る。希釈された液体培地は、好ましくは２〜２０倍程
度、より好ましくは５〜１０倍に滅菌水を用いて希釈さ
れたものである。
【００１５】反応液中の微生物の菌体量は、菌体が基質
および反応液に適切に接触しうるように選択するとよ
く、１〜１０ｇ菌体／１００ｍｌ反応液、好ましくは２
〜５ｇ菌体／１００ｍｌ反応液で行なうとよい。菌体の
量が少ないと基質との接触の効率が低く、また菌体の量
が多すぎると菌体による反応の効率が低下する。
および反応液に適切に接触しうるように選択するとよ
く、１〜１０ｇ菌体／１００ｍｌ反応液、好ましくは２
〜５ｇ菌体／１００ｍｌ反応液で行なうとよい。菌体の
量が少ないと基質との接触の効率が低く、また菌体の量
が多すぎると菌体による反応の効率が低下する。
【００１６】菌体は、前記の前培養された菌体をそのま
ま用いてもよいが、支持体に固定化された菌体を用いる
と繰り返し利用でき、また、プロダクトインヒビション
の原因となりうる生産されたヒドロキシメチルナフタレ
ン類等を流通循環法、回分法（バッチ法）または半回分
法などによって反応液から除くことができ、さらに連続
的に多量のメチルナフタレン類等の基質を反応させるこ
とができるので好ましい。支持体用材料としてはたとえ
ばカラギーナン、アルギン酸、寒天類などの、海藻から
えられた多糖類を含む種々のゲル化基剤、またはポリア
クリルアミド、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸
（塩）等のゲル化能を有する吸水性ポリマーがあげられ
る。これら支持体用材料のうちとくにカラギーナン、ア
ルギン酸を用いることが好ましい。支持体の形状は特に
限定されないが好ましくは球状である。たとえば、ゲル
化にともなって菌体を固定化する手順として、支持体
用材料を含む液体を加熱して溶解したのち冷却し、ゲ
ル化時に菌体を加える、支持体用材料を溶液としたのち
菌体を加え、ナトリウム塩、カルシウム塩などの金属塩
溶液中に滴下してゲル化させる、等があげられる。支持
体用材料のゲル化にともなって菌体を固定化する際、ア
セトン、ジメチルスルホキシドなどの有機溶媒が添加さ
れる。前記においては支持体用材料を含む液体を加熱
溶解ののち、熱による菌体への影響および熱によって前
記有機溶媒が蒸発することを考慮して、固定化を３０〜
５５℃にて行なうことが好ましい。前記支持体用材料と
してカラギーナンを用いての手順を行なうばあい、固
定化は以下の方法にしたがって行なうとよい。蒸留水１
２０ｍｌに対してκ−カラギーナン１．０〜２．０ｇ程
度、好ましくは１．２〜１．６ｇを添加して４５〜５５
℃にて溶解し、菌体２〜５ｇを加える。この液に０．１
〜２．０ｍｌ程度、好ましくは０．５〜１．５ｍｌ、よ
り好ましくは１．０ｍｌのアセトンを加えたのち、２１
〜２５ゲージ、好ましくは２１〜２２ゲージの注射針を
取付けた注射器を用いて２〜３％塩化カリウム水溶液５
００〜１０００ｍｌ中に滴下し、最大直径が１〜５ｍ
ｍ、好ましくは２〜４ｍｍ、とくに好ましくは約３ｍｍ
である粒状の菌体固定化物をうる。
ま用いてもよいが、支持体に固定化された菌体を用いる
と繰り返し利用でき、また、プロダクトインヒビション
の原因となりうる生産されたヒドロキシメチルナフタレ
ン類等を流通循環法、回分法（バッチ法）または半回分
法などによって反応液から除くことができ、さらに連続
的に多量のメチルナフタレン類等の基質を反応させるこ
とができるので好ましい。支持体用材料としてはたとえ
ばカラギーナン、アルギン酸、寒天類などの、海藻から
えられた多糖類を含む種々のゲル化基剤、またはポリア
クリルアミド、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸
（塩）等のゲル化能を有する吸水性ポリマーがあげられ
る。これら支持体用材料のうちとくにカラギーナン、ア
ルギン酸を用いることが好ましい。支持体の形状は特に
限定されないが好ましくは球状である。たとえば、ゲル
化にともなって菌体を固定化する手順として、支持体
用材料を含む液体を加熱して溶解したのち冷却し、ゲ
ル化時に菌体を加える、支持体用材料を溶液としたのち
菌体を加え、ナトリウム塩、カルシウム塩などの金属塩
溶液中に滴下してゲル化させる、等があげられる。支持
体用材料のゲル化にともなって菌体を固定化する際、ア
セトン、ジメチルスルホキシドなどの有機溶媒が添加さ
れる。前記においては支持体用材料を含む液体を加熱
溶解ののち、熱による菌体への影響および熱によって前
記有機溶媒が蒸発することを考慮して、固定化を３０〜
５５℃にて行なうことが好ましい。前記支持体用材料と
してカラギーナンを用いての手順を行なうばあい、固
定化は以下の方法にしたがって行なうとよい。蒸留水１
２０ｍｌに対してκ−カラギーナン１．０〜２．０ｇ程
度、好ましくは１．２〜１．６ｇを添加して４５〜５５
℃にて溶解し、菌体２〜５ｇを加える。この液に０．１
〜２．０ｍｌ程度、好ましくは０．５〜１．５ｍｌ、よ
り好ましくは１．０ｍｌのアセトンを加えたのち、２１
〜２５ゲージ、好ましくは２１〜２２ゲージの注射針を
取付けた注射器を用いて２〜３％塩化カリウム水溶液５
００〜１０００ｍｌ中に滴下し、最大直径が１〜５ｍ
ｍ、好ましくは２〜４ｍｍ、とくに好ましくは約３ｍｍ
である粒状の菌体固定化物をうる。
【００１７】基質であるメチルナフタレン類等に前記微
生物を反応させる際、メチルナフタレン類等を粉砕した
ものをそのまま添加してもよいが、メチルナフタレン類
等は水に難溶性であるため、有機溶媒を少量用いて（１
〜１０ｍｌ有機溶媒／１００ｍｌ反応液、１〜５０ｍｇ
基質／ｍｌ有機溶媒、好ましくは４〜５ｍｇ基質／ｍｌ
有機溶媒）溶解した後に添加するとよい。有機溶媒はメ
タノール、アセトニトリルのような親水性が高いものを
用いたばあいには、ヒドロキシメチルナフタレン等が生
成しにくいので、親水性の低いもの、たとえばアセト
ン、ジメチルスルホキシドなどが好ましい。基質は反応
初期に一括して添加しても、分割して添加してもよい。
基質は反応液中１％（ｗ／ｖ）以下程度、好ましくは
０．０１〜０．１％（ｗ／ｖ）程度となるよう添加する
とよい。加える基質濃度が高すぎてもまた低すぎても、
反応率は低下する。反応はたとえばＬ字管または坂口フ
ラスコなどを用いて、通常１５〜４０℃程度、好ましく
は２５〜３５℃にて、反応産物量が一定値に達するまで
５〜３０時間程度、好ましくは１２〜２４時間行なう。
固定化菌体を用いたばあい、反応は４８〜９６時間程
度、好ましくは６０〜８０時間行なう。反応産物量は、
おそらくはプロダクトインヒビションにより一定値にと
どまると考えられるので、反応産物を反応液中から逐次
採取しながら反応を継続することにより、さらに高い収
率がえられる。
生物を反応させる際、メチルナフタレン類等を粉砕した
ものをそのまま添加してもよいが、メチルナフタレン類
等は水に難溶性であるため、有機溶媒を少量用いて（１
〜１０ｍｌ有機溶媒／１００ｍｌ反応液、１〜５０ｍｇ
基質／ｍｌ有機溶媒、好ましくは４〜５ｍｇ基質／ｍｌ
有機溶媒）溶解した後に添加するとよい。有機溶媒はメ
タノール、アセトニトリルのような親水性が高いものを
用いたばあいには、ヒドロキシメチルナフタレン等が生
成しにくいので、親水性の低いもの、たとえばアセト
ン、ジメチルスルホキシドなどが好ましい。基質は反応
初期に一括して添加しても、分割して添加してもよい。
基質は反応液中１％（ｗ／ｖ）以下程度、好ましくは
０．０１〜０．１％（ｗ／ｖ）程度となるよう添加する
とよい。加える基質濃度が高すぎてもまた低すぎても、
反応率は低下する。反応はたとえばＬ字管または坂口フ
ラスコなどを用いて、通常１５〜４０℃程度、好ましく
は２５〜３５℃にて、反応産物量が一定値に達するまで
５〜３０時間程度、好ましくは１２〜２４時間行なう。
固定化菌体を用いたばあい、反応は４８〜９６時間程
度、好ましくは６０〜８０時間行なう。反応産物量は、
おそらくはプロダクトインヒビションにより一定値にと
どまると考えられるので、反応産物を反応液中から逐次
採取しながら反応を継続することにより、さらに高い収
率がえられる。
【００１８】反応時のｐＨは６．０〜９．０程度、好ま
しくはｐＨ６．５〜８．０に調製するとよい。６．０よ
り低いｐＨでは反応が充分に行なわれず、５．０より低
いｐＨで行なうと反応の効率は著しく低下する。反応は
通常、振とうまたは撹拌しながら行なう。反応終了後、
ヒドロキシメチルナフタレン類等を反応液から採取する
には、一般的な単離方法が採用されうる。すなわち、反
応液より遠心などによって菌体を除去したのち、エチル
エーテルまたは酢酸エチルなどを用いて２〜３回程度抽
出し、乾燥、減圧濃縮などを行う。えられた抽出物は、
カラム、好ましくはシリカゲルカラムに付して精製し、
ヒドロキシメチルナフタレン類等を単離する。シリカゲ
ルカラムにて精製する際、石油エーテル／ジエチルエー
テル＝８／２の溶媒を用いることが好ましい。精製、単
離した反応産物は、ＮＭＲ、質量分析、元素分析および
ＨＰＬＣなどの通常の分析方法により分析されうる。ま
た単離した産物の定量は、ＨＰＬＣなどを用いて行なう
ことができる。
しくはｐＨ６．５〜８．０に調製するとよい。６．０よ
り低いｐＨでは反応が充分に行なわれず、５．０より低
いｐＨで行なうと反応の効率は著しく低下する。反応は
通常、振とうまたは撹拌しながら行なう。反応終了後、
ヒドロキシメチルナフタレン類等を反応液から採取する
には、一般的な単離方法が採用されうる。すなわち、反
応液より遠心などによって菌体を除去したのち、エチル
エーテルまたは酢酸エチルなどを用いて２〜３回程度抽
出し、乾燥、減圧濃縮などを行う。えられた抽出物は、
カラム、好ましくはシリカゲルカラムに付して精製し、
ヒドロキシメチルナフタレン類等を単離する。シリカゲ
ルカラムにて精製する際、石油エーテル／ジエチルエー
テル＝８／２の溶媒を用いることが好ましい。精製、単
離した反応産物は、ＮＭＲ、質量分析、元素分析および
ＨＰＬＣなどの通常の分析方法により分析されうる。ま
た単離した産物の定量は、ＨＰＬＣなどを用いて行なう
ことができる。
【００１９】
【発明の効果】本発明によれば、メチルナフタレン類か
らヒドロキシメチルナフタレン類を選択性よく製造する
ことができ、ジメチルナフタレン類からはジヒドロキシ
メチルナフタレン類を製造することができる。
らヒドロキシメチルナフタレン類を選択性よく製造する
ことができ、ジメチルナフタレン類からはジヒドロキシ
メチルナフタレン類を製造することができる。
【００２０】つぎに実施例により本発明をより詳細に説
明するが、これら実施例はもとより本発明の範囲を限定
するものではない。なお、生成物の％は、基質に対する
モル％である。
明するが、これら実施例はもとより本発明の範囲を限定
するものではない。なお、生成物の％は、基質に対する
モル％である。
【００２１】実施例１ 坂口フラスコ（５００ｍｌ）に、魚肉エキス（（カツオ
製）、和光純薬社製）10ｇ、ポリペプトン（日本製薬社
製）１０ｇおよびNaCL２ｇを蒸留水１０００ｍｌ中に溶
解し、ｐＨ７．０に調製して１２０℃で２０分高圧蒸気
滅菌した培地をそれぞれ２５０ｍｌ入れ、バシラス セ
レウス（平成６年３月７日に工業技術院生命工学工業技
術院研究所に寄託した（受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１４
２１０））を一白金耳接種して、３０℃にて４８時間振
とう前培養し、充分に菌体を増殖させた。この培養液を
５ｍｌ取り、基質である２，６−ジメチルナフタレンを
２００μｇ／mlアセトンの溶液として調製し、それぞれ
０．５ｍｌ添加した。添加後、３０℃にて１２時間振と
うし、酸化反応を行なった。反応終了後、反応液を５ｍ
ｌの酢酸エチルで３回抽出した後、無水硫酸ナトリウム
で脱水し、溶媒を留去し、メタノール１ｍｌに溶解し
た。このメタノール溶液をＨＰＬＣ（カラムＣ−１８、
４ｍｍ φ ×150 ｍｍ、溶媒：メタノール／水（４０
／６０〜９５／５）グラジエント法、流速１ｍｌ／分、
検出波長２３０ｎｍ）により、２，６−ヒドロキシメチ
ルナフタレンおよび２−ヒドロキシメチル−６−メチル
ナフタレンの定量を行なった。その結果、２，６−ヒド
ロキシメチルナフタレン６．３％、２−ヒドロキシメチ
ル−６−メチルナフタレン１６．２％が得られているこ
とを確認した。なお、生成物の定量は、別途化学合成し
た２，６−ヒドロキシメチルナフタレンおよび２−ヒド
ロキシメチル−６−メチルナフタレンを標準試料として
同定するとともに内部標準法により行った。
製）、和光純薬社製）10ｇ、ポリペプトン（日本製薬社
製）１０ｇおよびNaCL２ｇを蒸留水１０００ｍｌ中に溶
解し、ｐＨ７．０に調製して１２０℃で２０分高圧蒸気
滅菌した培地をそれぞれ２５０ｍｌ入れ、バシラス セ
レウス（平成６年３月７日に工業技術院生命工学工業技
術院研究所に寄託した（受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１４
２１０））を一白金耳接種して、３０℃にて４８時間振
とう前培養し、充分に菌体を増殖させた。この培養液を
５ｍｌ取り、基質である２，６−ジメチルナフタレンを
２００μｇ／mlアセトンの溶液として調製し、それぞれ
０．５ｍｌ添加した。添加後、３０℃にて１２時間振と
うし、酸化反応を行なった。反応終了後、反応液を５ｍ
ｌの酢酸エチルで３回抽出した後、無水硫酸ナトリウム
で脱水し、溶媒を留去し、メタノール１ｍｌに溶解し
た。このメタノール溶液をＨＰＬＣ（カラムＣ−１８、
４ｍｍ φ ×150 ｍｍ、溶媒：メタノール／水（４０
／６０〜９５／５）グラジエント法、流速１ｍｌ／分、
検出波長２３０ｎｍ）により、２，６−ヒドロキシメチ
ルナフタレンおよび２−ヒドロキシメチル−６−メチル
ナフタレンの定量を行なった。その結果、２，６−ヒド
ロキシメチルナフタレン６．３％、２−ヒドロキシメチ
ル−６−メチルナフタレン１６．２％が得られているこ
とを確認した。なお、生成物の定量は、別途化学合成し
た２，６−ヒドロキシメチルナフタレンおよび２−ヒド
ロキシメチル−６−メチルナフタレンを標準試料として
同定するとともに内部標準法により行った。
【００２２】実施例２ 実施例１において、反応時間を２４時間とし、基質のア
セトン溶液を添加する前に培養液５ｍｌを遠心管にとり
菌体を遠心分離して蒸留水で洗浄した後、蒸留水を加え
る操作を行った他は実施例１と同様の操作を行った。そ
の結果、２，６−ヒドロキシメチルナフタレン２．７
％、２−ヒドロキシメチル−６−メチルナフタレン１
５．５％が得られていることを確認した。
セトン溶液を添加する前に培養液５ｍｌを遠心管にとり
菌体を遠心分離して蒸留水で洗浄した後、蒸留水を加え
る操作を行った他は実施例１と同様の操作を行った。そ
の結果、２，６−ヒドロキシメチルナフタレン２．７
％、２−ヒドロキシメチル−６−メチルナフタレン１
５．５％が得られていることを確認した。
【００２３】比較例１ 実施例１において、培養液５ｍｌの代わりに、実施例１
で用いた魚肉エキス（（カツオ製）、和光純薬社製）１
０ｇ、ポリペプトン（日本製薬社製）１０ｇおよびNaCl
１２ｇを蒸留水１０００ｍｌ中に溶解し、ｐＨ７．０に
調製して１２０℃で２０分高圧蒸気滅菌した培地５ｍｌ
加えることによって、酸化反応時に菌体を存在させなか
った他は実施例１と同様の操作を行った。その結果、
２，６−ヒドロキシメチルナフタレンおよび２−ヒドロ
キシメチル−６−メチルナフタレンのいずれも確認でき
なかった。
で用いた魚肉エキス（（カツオ製）、和光純薬社製）１
０ｇ、ポリペプトン（日本製薬社製）１０ｇおよびNaCl
１２ｇを蒸留水１０００ｍｌ中に溶解し、ｐＨ７．０に
調製して１２０℃で２０分高圧蒸気滅菌した培地５ｍｌ
加えることによって、酸化反応時に菌体を存在させなか
った他は実施例１と同様の操作を行った。その結果、
２，６−ヒドロキシメチルナフタレンおよび２−ヒドロ
キシメチル−６−メチルナフタレンのいずれも確認でき
なかった。
【００２４】比較例２ 実施例１において、基質である２，６−ジメチルナフタ
レンのアセトン溶液を加えなかった他は、実施例１と同
様の操作を行った。その結果、２，６−ヒドロキシメチ
ルナフタレンおよび２−ヒドロキシメチル−６−メチル
ナフタレンのいずれも確認できなかった。
レンのアセトン溶液を加えなかった他は、実施例１と同
様の操作を行った。その結果、２，６−ヒドロキシメチ
ルナフタレンおよび２−ヒドロキシメチル−６−メチル
ナフタレンのいずれも確認できなかった。
Claims (5)
- 【請求項１】 メチルナフタレン類にバシラス属に属す
る微生物を作用させてメチルナフタレン類のメチル基の
酸化反応を行なう工程および反応液からヒドロキシメチ
ルナフタレン類を採取する工程を含んでなるヒドロキシ
メチルナフタレン類の製造法。 - 【請求項２】 ジメチルナフタレン類にバシラス属に属
する微生物を作用させて、ジメチルナフタレン類のメチ
ル基の１つまたは２つの酸化反応を行なう工程ならびに
反応液からヒドロキシメチルメチルナフタレン類および
／またはジヒドロキシメチルナフタレン類を採取する工
程を含んでなるヒドロキシメチルメチルナフタレン類お
よび／またはジヒドロキシメチルナフタレン類の製造
法。 - 【請求項３】 前記微生物がバシラス セレウスである
請求項１または２記載の製造法。 - 【請求項４】 前記酸化反応が希釈された培地中で行な
われる請求項１または２記載の製造法。 - 【請求項５】 前記培地が２〜２０倍に希釈された培地
である請求項４記載の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP29744795A JPH09107983A (ja) | 1995-10-20 | 1995-10-20 | ヒドロキシメチルナフタレン類の製造法ならびにヒドロキシメチルメチルナフタレン類および／またはジヒドロキシメチルナフタレン類の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP29744795A JPH09107983A (ja) | 1995-10-20 | 1995-10-20 | ヒドロキシメチルナフタレン類の製造法ならびにヒドロキシメチルメチルナフタレン類および／またはジヒドロキシメチルナフタレン類の製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09107983A true JPH09107983A (ja) | 1997-04-28 |
Family
ID=17846637
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP29744795A Pending JPH09107983A (ja) | 1995-10-20 | 1995-10-20 | ヒドロキシメチルナフタレン類の製造法ならびにヒドロキシメチルメチルナフタレン類および／またはジヒドロキシメチルナフタレン類の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH09107983A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2231040A1 (es) * | 2003-10-31 | 2005-05-01 | Institut Univ De Ciencia I Tecnologia | Procedimiento microbiologico para la preparacion de menadiona. |
| CN115073272A (zh) * | 2022-07-08 | 2022-09-20 | 云南中烟工业有限责任公司 | 一种杜松烷型倍半萜化合物、其制备方法和用途 |
-
1995
- 1995-10-20 JP JP29744795A patent/JPH09107983A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2231040A1 (es) * | 2003-10-31 | 2005-05-01 | Institut Univ De Ciencia I Tecnologia | Procedimiento microbiologico para la preparacion de menadiona. |
| WO2005042755A1 (es) * | 2003-10-31 | 2005-05-12 | Institut Univ De Ciència I Tecnologia | Procedimiento microbiológico para la preparación de menadiona |
| CN115073272A (zh) * | 2022-07-08 | 2022-09-20 | 云南中烟工业有限责任公司 | 一种杜松烷型倍半萜化合物、其制备方法和用途 |
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