JPH03215418A - 発癌抑制剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は発癌プロモーター抑制作用を有し、発癌抑制剤
として有用な化合物に関するものである。

［従来の技術および課題コ 発癌はイニシエーションおよびプロモーションという２
つの異なったプロセスから起こるといわれており（発癌
二段階説）、それぞれのプロセスに関与する物質をイニ
シエーターおよびプロモーターという。イニシェークー
としては、７．１２−ジメチルベンズアントラセン（Ｄ
ＭＢＡ）等が、プロモーターとしては、ｌ２−０−テト
ラデカノイルホルボール−１３−アセテート（ＴＰＡ）
等がよく知られている。現在、このプロモーターによっ
て引き起こされるプロモーションの過程が、新しいタイ
プの制癌剤の開発という観点から重要視されてきている
。

そして、発癌プロモーターの作用を阻害する物質（発癌
プロモーター抑制剤）の探索か盛んに行われているか、
現在までのところ、まだ効果等の点で満足できろものは
なく、発癌プロモーター抑制剤の探索は遅れた領域とな
っている。

そこで、癌の治療その乙のとあいまって、癌の発生を予
防することを目的とする発癌プロモーター抑制剤の出現
が切望されていた。

［課題を解決するための手段廖 本発明者らは、上記の課題を解決すべく鋭意検討を行っ
た結果、下記式ｔで表される化合物に発癌プロモーター
抑制作用があることを見いだし、本発明を完成するに至
った。

すなわち、本発明は下記に示すごとくである。

下記式ｌ Ｒ （たたし、Ｒ１およびＲ２は同じからしくは異なって−
ＯＣＨ３、−ＯＨまたはＲ，とＲ２は一緒になって一〇
ＣＨ２０−を示し、Ｒ３は−ＯＣＨ３または−ＯＨを示
し、Ｒ４およびＲ５は同じかもしくは異なって−ＯＣＨ
３、−ＯＨまたはＲ４とＲ５は一緒になって一〇ＣＨ２
０−を示し、Ｒ６は−Ｉ｛または（Ｏ　Ｃ　Ｏ　Ｃ　ｅ
　Ｈ　ａを示し、Ｒ７は４Ｈ１１聞Ｃ　Ｈ　３、（ＯＨ
または１曲ＯＨを示し、Ｒ８、Ｒ，およびＲは（Ｈ．（
ＣＨ３または冊ＣＨ３を示す。）で表される化合物を有
効成分とする発癌抑制剤。

以下、式Ｉで表される化合物を式の化合物と称する。

一般に式の化合物は、ジヘンゾンク口オクタジェン型リ
グナン類と呼ばれ、例えば古来より強精、強壮薬として
用いられている生薬五味子等から単離することができろ
。

また最近の研究により、式の化合物に腎障害改善作用、
血圧降下作用を有することが見いだされている。しかし
、式の化合物が発癌プロモーター抑制作用を有すること
は、従来全く知られていなかったことである。

式の化合物を得るには、例えば以下のようにすればよい
。

すなわち、式の化合物含有植物を低級炭化水素類で抽出
し、抽出液より溶剤および揮発性成分を除去し、その残
留物をクロマトグラフィ〜処理して得ることができる。

抽出は式の化合物含有植物を粉砕したものを石油エーテ
ル、ｎ−ヘキサン、ヘンゼン等の低級炭化水素に添加混
合し、３０℃〜使用した溶媒の沸点の温度で、好ましく
は還流下に行う。数回抽出を行って抽出液を合併し、低
級炭化水素類を留去し、濃縮してエキスを得る。このエ
キスを水蒸気蒸留して揮発性成分（精油等）を除去する
。

次いでこのようにして得た残留物（低級炭化水素類に可
溶の非精油部分）を例えばンリカゲル、アルミナ、フロ
リジル、ポリアミド、セライト等の吸着剤を用いるカラ
ムクロマトグラフィーに付し、ｎ−ヘキサン、ベンゼン
、クロロホルム、アセトン、エーテル、酢酸エチル、エ
タノール、メタノール等の有機溶剤またはこれらの混合
溶剤を用いてノベンゾンク口オクタジエン型リグナン類
を溶出し、溶出液から溶剤を除去して目的とする式の化
合物を得る。

また式の化合物は、式の化合物含有植物をメタノール、
エタノール等の低級アルコールを用いて抽出することに
より得ることもできる。この場合には、低級アルコール
類による抽出液を濃縮し、得られたエキスを水に溶解し
、セライト、セルロース末などの吸着剤に吸着させ、ｎ
−ヘキサン、石油エーテル、ベンゼン、クロロホルム、
エーテル等で溶出し、この溶出液を濃縮して得ｆこエキ
スを上記したクロマトクラフィー処理することにより目
的とする式の化合物を得ることができる。

次に式の化合物の製造の具体例を示す。

具体例Ｉ Ｒ１とＲ２が一緒になって−Ｏ　Ｃ　Ｈ　ｔｏ　　　Ｒ
　３、ｒｔ　．およびＲ，が−ＯＣＨ３、Ｒ８が−ＨＳ
　Ｒ？が禰ＯＨ，Ｒ．およびＲｌｏがｕｍ　（：，　Ｈ
　３、Ｒ，か４Ｈである化合物はゴミンンＡと称される
。

北五味子１．３８＆９を粉砕したものを石油エーテル３
ａで８時間還流抽出し、これを４回繰り返した。抽出液
を合併し、石油エーテルを減圧下で留去して石油エーテ
ルエキスｌ８８９を得た。このエキスを水４５０ＲＱに
懸濁させ、水蒸気蒸留を３時間行い精油を除去した。残
留物をエーテル２　０　０　ＲＱで４回抽出した後、エ
ーテル抽出液を合併し、エーテルを留去すると石油エー
テル可溶の非精油部分１７９９ＣＡ画分という）が得ら
れた。

次に石浦エーテルで抽出した後の北五味子をメタノール
３ｇを用いて８時間ずつ３回温時抽出した後、メタノー
ル抽出液を合併し、濃縮するとメタノール性エキス３８
３ｇが得られた。このエキスを水５８０ｄに溶解し、酢
酸エチル８５０−で３回振とう抽出した。酢酸エチル抽
出液を合併し、減圧下で濃縮すると７８９のエキスが得
られた。

このエキスをメタノールに溶解し、セライト５３５（Ｊ
ｏｈｎｓ−Ｍａｎｖｉｌｌｅ社製）３００ｇにまぶし、
カラムクロマトグラフィーに付した。ｎ−ヘキサン２ｅ
で展開し、溶出液を減圧下で濃縮すると２０．８９のエ
キス（Ｂ画分という）が得られた。

Ａ画分（１７９９）とＢ画分（２０．８９）を合併し、
シリカゲル１　２　０　０９を用いたカラムクロマトグ
ラフィーに付し、最初ｎ−ヘキサン、２番目にベンゼン
、３番目にペンゼンーアセトン混合溶剤で展開した。ペ
ンゼンーアセトン（４：１）とベンゼンアセトン（３：
Ｉ）の溶出部を合併し、濃縮すると２３　５ｇの残留物
が得られるが、この残留物を再びンリカゲル４８０９を
用いたカラムクロマトグラフィーに付し、ベンゼン−エ
ーテル混合溶剤で展開した。ベンゼンーエーテル（４：
１）の溶出部をメタノールで結晶化させた。この結晶（
３．０４ｇ）の理化学的性質は、文献［Ｃｈｅｍ．　Ｐ
ｈａｒｍ．　Ｂｕｌｌ，（ＴＯＫＹＯ），２３巻，　３
２９６（１９７５）］記載のゴミシンＡの理化学的性質
と一致した。

具体例２ 式の化合物のうち、Ｒ，およびＲ５が−ＯＨ、Ｒ２、Ｒ
３およびＲ４が−Ｏ　Ｃ　Ｈ　，ｌ，　Ｒ　ｅがーＨ　
，　Ｒ　７およびＲ９が１聞ＣＨ３、Ｒ８およびＲＩＧ
が４Ｈである化合物はゴミシンＪと称される。

北五味子４。６７ｋｇを粉砕したのち、石油エーテル（
沸点３７〜３９℃のもの）ｌ　２１２と混合して８時間
還流抽出を３回行った。この抽出液を合併し、エーテル
を減圧で留去してエキス５４６ｇを得た。このエキスを
水Ｉ．２１２に懸濁させ、水蒸気蒸留を３時間行って精
油を除去した。この残留物をエーテルで６回抽出した後
、エーテル抽出液を合併し、エーテルを留去して石油エ
ーテル可溶の非精油部分４９ｌ９を得た。

石油エーテル可溶の非精油部分をシリカゲル力ラムクロ
マトグラフィーに付し、最初ｎ−ヘキサンで、次にヘン
ゼンで展開して脂肪油等を溶出させた後、さらにベンゼ
ン−アセトン（８Ｂ＋１２）、（８５：１５）および（
８０：２０）で溶出する部分より溶剤を除去した。この
残留物を再度シリカゲル力ラムクロマトグラフィーに付
し、ベンゼンーエーテル（８２：１８）、（８０：２０
）、（７０：３０）で溶出するフラクションを合併した
。これより溶剤を除去した残留物を再びシリカゲル力ラ
ムクロマトグラフィーに付し、■−ヘキサンー酢酸エチ
ル混合溶剤で展開した。ｎ−ヘキサンー酢酸エチル（８
３：１７）の溶出部を合併し、これより溶剤を除去した
。この残留物をさらにシリカゲル分取薄層クロマトグラ
フィーに付し、ベンゼンーエタノール（９：Ｉ）で展開
し、紫外線ランプ（２　５　３　６人）照射下、Ｒｆ値
０．５８を示す部分をかきとり、クロロホルム−メタノ
ール混液で抽出して得た化合物７　２　４　Ｍ９の理化
学的性質は、文献［Ｃｈｅｍ．　Ｐｈａｒｍ．Ｂｕ１１
．，２７（７），１５８３−１５８８（１９７９）］記
載のゴミシンＪの理化学的性質と一致した。

具体例３ 式の化合物のうち、Ｒ，とＲ２が一緒になってＯ　Ｃ　
Ｈ　２　０　　　Ｒ　３、Ｒ４およびＲ，か−Ｏ　Ｃ　
Ｈ　３、Ｒ６がーＨ，Ｒ，およびＲ８か冊ＣＨ３、Ｒ８
およびＲ．Ｏｈ＜４４Ｈである化合物はゴミンンＮと称
される。

具体例２て得た石油エーテル可溶の非精油部分を、あら
かじめｎ−ヘキサンに膨潤させｆこンリカケル５　ｋｇ
を、径＋２，、長さ１１０，のガラス管に充填したカラ
ムの上から投入し、最初ｎ−ヘキサン、２番目にベンゼ
ン、３番目にベンゼン−アセトン混合溶剤で展開した。

ベンゼン−アセトン（４７３）とペンセンーアセトン（
４６：４）で溶出してくる部分を合併し、溶剤を減圧下
で留去し、残留物をｎ−ヘキサン−エーテル混液で熱時
溶解させ、常温下に放置して結晶を析出さけ、濾別して
結晶１４９を得た。この結晶の理化学的性質は、文献［
Ｃｈｅｍ．　Ｐｈａｒｍ．　Ｂｕ１１．，２７（１１）
２６９５−２７０９（１９７９）］記載のゴミシンＮの
理化学的性質と一致した。

具体例４ 式の化合物のうち、Ｒ．　　Ｒ，、Ｒ３、Ｒ４およびＲ
５が−ＯＣＨ３、ＲｅがーＨ，Ｒ７か４０ｌ］、Ｒ８お
よびＲＩＯか冊Ｃ　Ｈ　３、Ｒ８かｎ　Ｉ−｛てある化
合物はノザンドリンと称される。

具体例１における１回目のソリ力ゲル力ラムクロマトグ
ラフィーにおいてベンゼン−アセトン（７：３）とペン
ゼンーアセトン（３：２）の溶出部を合併し、濃縮する
と８．３９の残留物が得られるが、これを１８０９のシ
リカゲルを用いて再びカラムクロマトグラフィーに付し
、ｎ−ヘキサンーアセトン混合溶剤で展開した。ｎ−ヘ
キサン−アセトン（２２３）の溶出部をｎ−ヘキサンー
エーテルで結晶化させた。この結晶Ｃ３．５９）の理化
学的性質は、文献［Ｚｈ．　Ｏｂｓｈｃｈ　Ｋｈｉｍ．
，３１巻．３４５４（１９６１）］記載のシザンドリン
の理化学的性質と一致した。

具体例５ 式の化合物のうち、Ｒ，　　Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ
，が−Ｏ　Ｃ　Ｈ　３、Ｒ８がーＨ　，　Ｒ　７および
Ｒ８が４ＨＳＲ８およびＲ，。がｕ＋ｕ　ＣＨ　３であ
る化合物はデオキシシザンドリンと称される。

五味子（チョウセンゴミン）の乾燥粉末９，３４ｋ９に
石油エーテル２４Ｃを加え、３６６Ｃで６時間加熱還流
し、冷後抽出液を濾過した。抽出残渣をさらに同様の方
法で２回抽出し、合計３回の抽出液を合わせ、石油エー
テルを減圧下で除去して抽出乾燥エキス１．１５＆９を
得た。

この抽出乾燥エキス１．ｌ５Ｊｃｇをシリカゲル力ラム
クロ？トグラフィ（Ｋｉｅｓｅｌｇｅ１　６０，７０−
２３０メソシュ．メルク社製．ｌＯｋ９）に付し、ベン
ゼンとアセトンの混合溶媒でアセトンの混合比率を順次
増加させて溶出させた。ベンゼン：アセトン（９２：８
）の混合溶媒５Ｑで溶出したフラクノヨンを分取し、溶
媒を除去して粗分画乾燥エキスＩ２９．８９を得１こ。

粗分画乾燥エキスのうち２５．４９を分取薄層クロマト
グラフィ−［薄層板；Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ　ＰＦ２５４
（メルク社製）、展開溶媒，ベンゼン：エーテル−５　
１］に付し、展開後、紫外線（２５４７）ｚ）照射下で
吸収を示すＲｆ値０．７１の部分を剥離し、クロロホル
ム・メタノール＝４＝１の混合溶媒で抽出し、抽出液よ
り混合溶媒を除去して残渣を得た。この残渣をさらに精
製するために、再び分取薄層クロマトクラフィ−［薄層
板：同上、展開溶媒．ｎ−ヘキサン酢酸エチル−４・ｌ
］に付し、展開後、紫外線（２５４ｎｍ）照射下で吸収
を示すＲｒ値０．４４の部分を剥離し、クロロホルム　
メタノール−４・ｌの混合溶媒で抽出した。抽出液より
混合溶媒を除去して得た残渣を、ｎ−ヘキサンとエーテ
ルを用いて再結晶し、無色プリズム晶を得た。この無色
プリズム晶の理化学的性質は、文献［Ｃｈｅｍ．Ｐｈａ
ｒｍ．Ｂｕｌｌ２７（１１）．２６９５−２７０９（１
９７９）］記載のデオキシノザンドリンの理化学的性質
と一致した。

具体例６ 式の化合物のうち、Ｒ，とＲ，が一緒になって−ＯＣＨ
２０−Ｒ３、Ｒ４およびＲ５が−ＯＣＨ３、ＲＩｌがー
Ｈ　，　Ｒ　７およびＲ９が（　Ｈ　，　Ｒ　ｅおよび
Ｒが冊ＣＨ３てある化合物はガンマーンザンドリンと称
される。

具体例５で得た粗分画乾燥エキス１２９．８９をｎ−ヘ
キサンとエーテルの混合溶媒を用いて再結晶し、無色プ
リズム結晶１５．４４ｉＪを得た。さらにこの無色プリ
ズム結晶をメタノールから３回再結晶を繰り返し、無色
プリズム結晶１．１０９を得た。

この無色プリズム結晶の理化学的性質は文献［Ｃｈｅｍ
．　Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．　，　３０（１）　．　１
３２−１３９（１９８２）］記載のカンマーンザンドリ
ンの理化学的性質と一致した。

具体例７ 式の化合物のうち、ＲｌとＲ２が一緒になって−ＯＣＨ
２０−Ｒ，が−ＯＣＨ．、Ｒ４とＲ５が一緒になって−
Ｏ　Ｃ　Ｈ　ｔ　Ｏ　　　Ｒ　ｅがーＨＳＲ７およびＲ
８か１曲Ｃ　Ｈ　３、ＲｌｌおよびＲ１ｏが４Ｈである
化合物はウーエイジースー・シー（Ｗｕｗｅｉｚｉｓｕ
　Ｃ）と称される。

五味子（チョウセンゴミシ）の乾燥粉末４．６７ｋ！？
に石浦エーテル１２ρを加え、３６℃で６時間加熱還流
し、冷後抽出液を濾過した。抽出残渣をさらに同様の方
法で２回抽出し、合計３回の抽出液を合わせ、石油エー
テルを減圧下で除去して抽出乾燥エキス５４６９を得た
。

この抽出乾燥エキス５４６ｇをシリカゲルヵラムクロマ
トグラフ！　　（Ｋｉｅｓｅｌｇｅ１　６０，７０−２
３０メッノユ，メルク社製，ｌＯｋｇ）に付し、ｎ−ヘ
キサン．ベンゼン（１：Ｉ）４Ｌｎ−ヘキサン：ベンゼ
ン（９：Ｉ）３＆，ベンゼン６．５ｇ、次いでベンゼン
：アセトンの混合溶媒でアセトンの混合比率を順次増加
させて溶出させた。ベンゼンで溶出したフラクション６
．５Ｑとベンゼン：アセトン（９８：２）の混合溶媒で
溶出したフラクション５Ｑとベンゼン：アセトン（９６
・４）の混合溶媒で溶出したフラクション５Ｑをそれぞ
れ分取し、合併し、溶媒を除去して粗分画乾燥エキス１
１４．０９を得た。この粗分画乾燥エキス１１４．０ｇ
をンリカゲルカラムクロマトグラフィ−　（Ｋｉｅｓｅ
ｌｇｅ１　６０，７０−２３０メッシュ，メルク社製，
　２　ｋ９　）に付し、ｎ−ヘキサンと酢酸エチルの混
合溶媒で酢酸エチルの混合比率を順次増加させて溶出さ
せ、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル（９２：８）の混合溶媒
で溶出したフラクション２Ｑを分取し、溶媒を除去して
６．７３９の残渣を得た。この残渣６．７３９をメタノ
ールから再結晶し、無色プリズム結晶３．３４６９を得
た。この無色プリズム結晶の理化学的性質は、文献［Ｃ
ｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，３０（９），３２０
７−３２１１（１９８２）］記載のウーエイジースー・
ンーの理化学的性質と一致した。

具体例８ 式の化合物のうち、ＲいＲ，およびＲ３か一Ｏ　Ｃ　Ｈ
　３、Ｒ４とＲ５が一緒になって−Ｏ　Ｃ　Ｈ　２　０
Ｒ，がｎＯｃＯｃＢＨ５、Ｒ７が冊ＯＨ，Ｒ＄が４ＣＨ
３、Ｒ，が冊ＣＨ３、ＲＩｏが４Ｈである化合物はゴミ
ノンＧと称される。

具体例２において石油エーテル可溶の非精油部分をノリ
カゲルカラムク口マトグラフィーに付し、最初ｎ−ヘキ
サンで、次にベンゼンで展開して脂肪油等を溶出させｆ
こ後、さらにベンゼンーアセトン（８８：１２）、（８
５：１５）および（８０：２０）での溶出郎を再度ノリ
カゲルカラムク口マトグラフィーに付し、ベンゼン−エ
ーテル（８６：１４）で溶出した部分より溶媒を除去し
て得られた残留物をシリカゲル分取薄層クロマトグラフ
ィーに付した。

ｎ−ヘキサンーアセトン（７：３）で展開し、Ｒｆ値０
．２９を示す部分をかきとり、クロ口ホルムーメタノー
ル（４　ｌ）で抽出し、抽出液より溶媒を留去して得ら
れた化合物７　２　４　７１ｆｌの理化学的性質は、文
献［Ｃｈｅｍ．　Ｐｈａｒｍ．　Ｂｕ１１．，２７（６
）．１３８３−１３９４（１９７９）コ記載のゴミシン
Ｇの理化学的性質と一致した。

具体例９ 式の化合物のうち、Ｒ，、Ｒ２、Ｒ４およびＲ，が一Ｏ
ＣＨ３、Ｒ３が−ＯＨ，Ｒ．がーＨ，Ｒ７が（ＯＨ，Ｒ
．およびＲＩＧが曲１ｃＨ３、Ｒ８が４Ｈである化合物
はゴミシンＨと称される。

具体例２において石浦エーテル可溶の非精油部分をシリ
カゲルカラムクロマトグラフィーに付し、最初ｎ−ヘキ
サンで、次にベンゼンで展開して脂肪油等を溶出させた
後、さらにペンゼンーアセトンの混合溶剤で展開した。

ベンゼンーアセトン（７５：２５）で溶出した部分をさ
らにシリカゲル分取薄層クロマトグラフィーに付し、ク
ロロホルムーメタノール混合溶剤（１９：１）で展開し
、紫外線ランプ（２　５　３　６人）照射下、ＲｆｉＯ
．５２を示す部分をかきとり、クロロホルム−メタノー
ル混液で抽出した。抽出物をシリカゲル分取薄層クロマ
トグラフィーに付し、酢酸エチルーｎ−ヘキサン混合溶
剤（２：Ｉ）で展開し、Ｒｆ値０．５１を示す部分をか
きとり、クロロホルムーメタノール混液で抽出した。抽
出物をさらにシリカゲル分取薄層クロマトグラフィーに
付し、アセトン一〇−ヘキサン混合溶剤（２：３）で展
開し、Ｒｆ値０．３０１を示す部分をかきとり、クロロ
ホルムーメタノール混液で抽出した。抽出物をエーテル
ーｎ−ヘキサン混合溶媒で再結晶し、７１ｆｆ９の結晶
を得た。この結晶の理化学的性質は、文献［Ｃｈｅｍ．
　Ｐｈａｒｍ．　Ｂｕｌｌ．，２７（７），１５７６−
１５８２（１９７９）］記載のゴミシンＨの理化学的性
質と一致した。

次に実験例を挙げて、式の化合物の発癌プロモーター抑
制作用について説明する。

実験例１ 室温（２３±１’Ｃ）、湿度５０±５％の部屋で７時よ
り１９時まで照明をつけて飼育した７週齢のＩＣＲ系雌
性マウス（静岡実験動物農業共同組合より購入）の右内
・外耳殻に式の化合物２ｊ！９、ｌＲｇ、０．５〜およ
び０　．　１　Ｑの各用量をクロロホルムーメタノール
に溶解し、エッペンドルフピペツト４７ＩＯクリスタル
を用いて塗布した。式の化合物を塗布し、３０分後、１
２−０−テトラデカノイルホルホール−１３−アセテー
ト（１２−Ｏｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌｐｈｏｒｂｏ
ｌ−１３−ａｃｅｔａｔｅ，以下ＴＰＡと略す）ｌＡＩ
９を２０ｕｆｌのアセトン溶液として、エッペンドルフ
ピペット４７ｌＯクリスタルを用いて塗布し、最高腫張
時である塗布８時間後の耳殻腫張を測定した。式の化合
物を塗布せず、あとは同様の操作を行ったものを対照群
とし、対照群との比よりＴＰＡの誘発する炎症に対する
式の化合物の効果を検討した。式の化合物の各用量での
抑制率（％）を第１表に、５０％有効濃度（ＥＤ５０）
を第２表に示した。

第２表 上記の結果から、式の化合物のＴＰＡの誘発する炎症に
対する抑制効果が確認された。

実験例２ マウス背部皮膚に、７．１２−ジメチルベンズ［α］ア
ントラセン（７，　１２−ｄｉｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚ［
１］ａｎｔｈｒａｃｅｎｅ，以下Ｄ　Ｍ　Ｂ　Ａと略す
。）５０ｍを１００度のアセトン溶液として塗布し、イ
ニシエートした。１週間後よりＴＰＡ２，５Ｉｓを１０
０−のアセトン溶液として、週２回の塗布を１３週間行
った。式の化合物は、ＴＰＡ塗布の３０分前に同一部位
に５μ一／マウスを１００ｄのアセトン溶液に溶解して
塗布した。式の化合物を塗布せず、あとは同様の操作を
行ったものを対照群とした。

抑制効果は、発生する腫瘍の数を調べ、対照群と比較し
た。なお、薬物の塗布には、ピペットマンＰ−２００を
用い、１群２０匹を用いて行った。

その結果を第１図および第２図に示した。第１図および
第２図から明らかなように、式の化合物は、マウス二段
階発癌実験においても顕著な発癌抑制効果が認められた
。

第１図において、対照群ではプロモーション開始後５週
間から腫瘍があらわれ始め、８週後にはすべてのマウス
に腫瘍が生じた。１３週後における腫瘍の発現は、対照
群が２０匹であったのに対し、具体例１で得た化合物塗
布群では１０匹であり、５０％の抑制効果が認められた
。また、平均発現腫瘍数については、第２図より、対照
群か１８，２個であったのに対し、具体例Ｉで得た化合
物塗布群では２．２個であり、８８％の抑制効果が認め
られた。

さらに、式の化合物をｄｄＹ系雄性マウスに１９／ｋ９
経口投与したところ死亡例は認められなかった。

以上のように、式の化合物はＴＰＡの誘発する炎症に対
する抑制効果およびマウスニ段階発癌実験におけろ発癌
抑制効果を有し、毒性か低く安全性か高いことから、発
癌抑制剤として有用であると考えられる。

次に、式の化合物の投与量および製剤化について説明す
る。

式の化合物はそのまま、あるいは慣用の製剤担体と共に
動物および人に投与することができる。

投与形態としては、特に限定がなく、必要に応じ適宜選
択して使用され、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、
散剤等の経口剤、注射剤、坐剤等の非経口剤が挙げられ
る。

経口剤として所期の効果を発揮するためには、小者の年
会、体重、疾ルの程度により異なるが、通常成人で式の
化合物の重量として１００〜４５０〜を、１日数回に分
けての服用が適当と思われる。

本発明において錠剤、カプセル剤、顆粒剤等の経口剤は
、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルポキ
ンメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類等を用
いて常法に従って製造される。

この種の製剤には、適宜萌記賦形剤の他に、結合剤、崩
壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着
色剤、香料等を使用することができる。それぞれの具体
例は以下に示すごとくである。

［結合剤］ デンブン、デキストリン、アラビアゴム末、ゼラチン、
ヒト口キシプ口ピルスターチ、メチルセルロース、カル
ボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキノプ口ピ
ルセルロース、結晶セルロース、エチルセルロース、ポ
リビニルピロリドン、マクロゴール。

［崩壊剤］ デンプン、ヒト口キシプ口ピルスターチ、カルホキンメ
チルセルロースナトリウム、カルボキノメチルセルロー
スカルシウム、カルポキンメチルセルロース、低置換ヒ
ドロキシブ口ピルセルロース。

［界而活性剤］ ラウリル硫酸ナトリウム、大豆レシチン、ノヨ糖脂肪酸
エステル、ポリソルヘート　８０。

［滑沢剤］ タルク、ロウ類、水素添加植物油、ンヨ糖脂肪酸エステ
ル、ステアリン酸マグネノウム、ステアリン酸カルシウ
ム、ステアリン酸アルミニウム、ポリエチレングリコー
ル。

［流動性促進剤］ 軽質無水ケイ酸、乾燥水酸化アルミニウムゲル、合成ケ
イ酸アルミニウム、ケイ酸マグネノウム。

マｆ二、式の化合物は、懸濁液、エマルンヨン剤、ノロ
ノプ剤、エリキノル剤としても投与することかでき、こ
れらの各種剤形には、矯味矯臭剤、着色剤を含有しても
よい。

非経口剤として所期の効果を発揮するためには、小者の
年令、体重、疾七の程度により異なるが、通常成人で式
の化合物の重量として１日２〜３０ｐｇまての静注、点
滴静注、皮下注射、筋肉注射が適当と思われる。

この非経口剤は常法に従って製造され、希釈剤として一
般に注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射
用植物油、ゴマ油、ラッカセイ油、ダイズ浦、トウモロ
コノ浦、プロピレングリコール、ポリエチレンクリコー
ル等を用いることができる。さらに必要に応じて、殺菌
剤、防腐剤、安定剤を加えてもよい。また、この非経口
剤は安定性の点から、バイアル等に充填後冷凍し、通常
の凍結乾燥技術により水分を除去し、使用直前に凍結乾
燥物から液剤を再調製することもできる。さらに、必要
に応じて適宜、等張化剤、安定剤、防腐剤、無痛化剤等
を加えても良い。

その他の非経口剤としては、外用液剤、軟膏等の塗布剤
、直腸内投与のための坐剤等が挙げられ、常法に従って
製造される。

以下に実施例を示して本発明をさらに詳しく説明するが
、本発明はこれにより何等制限されるものではない。

実施例ｌ ■コーンスターチ　　　　　　３’１ ■結晶セルロース　　　　　　３０９ ■カルボキシメチル セルロースカルシウム　　　５ｇ ■軽質無水ケイ酸　　　　　　０　５９■ステアリン酸
マグネシウム　０．５９■具体例１で得た化合物　　　
２５ 計　　　　　１　０　０９ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、打錠機にて
圧縮成型して一錠２０（ＩＩＦの錠剤を得た。

この錠剤一錠には、具体例１で得た化合物５０ｌｌ＋９
が含有されており、成人１日２〜９錠を数回にわけて服
用する。

実施例２ ■結晶セルロース　　　　　　６９９ ■ステアリン酸マグネンウム　　ｌ９ ■カルホキシメチル セルロースカルシウム　　　　５ｇ 具　　２で得た　ム物　　　２５ｇ 計　　　　　　１　０　０９ 上記の処方に従って■、■および■の一部を均一に混合
し、圧縮成型した後、粉砕し、■および■の残潰を加え
て混合し、打錠機にて圧縮成型して一錠２　０　０　ｍ
Ｗの錠剤を得た。

この錠剤一錠には、具体例２で得た化合物５０ｍｇが含
有されており、成人夏日２〜９錠を数回にわけて服用す
る。

実施例３ ■結晶セルロース　　　　　４４．５９■ＩＯ％ヒドロ
キンプロピル セルロースエタノール溶液　２５２ ■カルポキンメチル セルロースカルシウム　　　５ｇ ■ステアリン酸マグネシウム　０．５９体　　３で　　
た　　Ａ　　　　　　　　２５１？計　　　　　　１　
０　０９ 上記の処方に従って■、■および■を均一に混合し、常
法によりねつ和し、押し出し造粒機により造粒し、乾燥
・解砕し１こ後、■および■を混合し、打鍵機にて圧縮
成型して一錠２　０　０　ｍｙの錠剤を得１こ。

この錠剤一錠には、具体例３で得た化合物５０ｍ９が含
有されており、成人１日２〜９錠を数回にわけて服用す
る。

実施例４ ■結晶セルロース　　　　　　８５９ ■１０％ヒドロキシプ口ピル セルロースエタノール溶液　５９ 体例４で　た　ム　　　　１０ 計　　　　　１０　　０ｇ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、ねつ和した
。押し出し造粒機に上り造粒後、乾燥し、篩別して顆粒
剤を得た。

この顆粒剤ｌ９には、具体例４で得た化合物１　０　０
　ｍ９が含有されており、成人１日１〜４、５ｇを数回
にわけて服用する。

実施例５ ■コーンスターチ　　　　　７４．５＠■軽質無水ケイ
酸　　　　　　０．５ｇ体例５て得た化ム　　　　２５ 計　　　　　　１００９ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、２　０　０
　１１９を２号カプセルに充填した。

このカプセル剤ｌカプセルには、具体例５で得た化合物
５０〜か含宵されており、成人１日２〜９カプセルを数
回にわけて服用する。

実施例６ ■注射用蒸留水　　　　　　　　通量 ■ブドウ糖　　　　　　　　　２００肩２■具体例６で
得た化合物　　　　５１１ｇ全量　　　　　　　　　５
一 注射用蒸留水に■および■を溶解させた後、５最のアン
プルに注入し、１２１°Ｃ７１５分間加圧滅菌を行って
注射剤を得た。

【図面の簡単な説明】

第１図および第２図は、イニンエーターにＤＭＢＡ，プ
ロモーターにＴＰＡを用いたマウス皮膚二段階発癌実験
の結果である。 第１図はプロモーション期間に応じた腫瘍発現率を示し
、第２図は１匹のマウスに対する平均発現腫瘍数を示す
。 第１図 ０ ２ ４ ６ ８ １０ １２ １５ プロモーション期間（週） 対照詳 具体例１で得た化合物塗布群

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 下記式 I ▲数式、化学式、表等があります▼ （ただし、Ｒ＿１およびＲ＿２は同じかもしくは異なっ
   て−ＯＣＨ＿３、−ＯＨまたはＲ＿１とＲ＿２は一緒に
   なって−ＯＣＨ＿２Ｏ−を示し、Ｒ＿３は−ＯＣＨ＿３
   または−ＯＨを示し、Ｒ＿４およびＲ＿５は同じかもし
   くは異なって−ＯＣＨ＿３、−ＯＨまたはＲ＿４とＲ＿
   ５は一緒になって−ＯＣＨ＿２Ｏ−を示し、Ｒ＿６は−
   Ｈまたは■ＯＣＯＣ＿６Ｈ＿５を示し、Ｒ＿７は■Ｈ、
   ■ＣＨ＿３、■ＯＨまたは■ＯＨを示し、Ｒ＿８、Ｒ＿
   ９およびＲ＿１＿０は■Ｈ、■ＣＨ＿３または■ＣＨ＿
   ３を示す。）で表される化合物を有効成分とする発癌抑
   制剤。