JP7425447B2 - 膵臓癌の判定用マーカー - Google Patents
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Description
糖鎖は、生体内ではタンパク質や脂質と結合した複合糖質の形態で主に細胞表面に存在しており、細胞の増殖、細菌やウイルスの感染、神経の伸長、炎症、免疫等の生理作用に関与している。
糖鎖を有する膵臓癌等の疾患の診断用マーカーとしては、例えば、CA19-9(carbohydrate antigen 19-9:膵臓癌マーカー)、ハプトグロビン(haptoglobin:膵臓癌マーカー)等が知られている(特許文献1)。
[1]
下記(1)~(5)から選ばれる糖鎖を含む、膵臓癌の判定用マーカー:
(1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3に存在する、下記式5で表される糖鎖、
(2)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインに存在する、下記式6で表される糖鎖、
(3)ビトロネクチンに存在する、下記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖、
(4)補体C4-Aに存在する、下記式4で表される糖鎖、
(5)チロキシン結合グロブリンに存在する、下記式3表される糖鎖。
(式1中、m1は0~2の整数を表す)
(式2中、m2は0又は1を表す)
(式3中、n1は0又は1を表す)
(式5中、n2は0又は1を表す)
[2]
前記糖鎖が、下記(1-1)~(5-1)の何れか1つで表される糖鎖である、[1]に記載のマーカー:
(1-1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3のアミノ酸配列のN末端より580番目のアスパラギン残基に結合している前記式5で表される糖鎖、
(2-1)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインのアミノ酸配列のN末端より186番目のアスパラギン残基に結合している前記式6で表される糖鎖、
(3-1)ビトロネクチンのアミノ酸配列のN末端より169番目のアスパラギン残基に結合している前記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖、
(4-1)補体C4-Aのアミノ酸配列のN末端より1328番目のアスパラギン残基に結合している前記式4で表される糖鎖、
(5-1)チロキシン結合グロブリンのアミノ酸配列のN末端より36番目のアスパラギン残基に結合している前記式3で表される糖鎖。
[3]
前記糖鎖が、インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3のアミノ酸配列のN末端より580番目のアスパラギン残基に結合している前記式5で表される糖鎖である、[1]又は[2]に記載のマーカー。
[4]
前記糖鎖が、ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインのアミノ酸配列のN末端より186番目のアスパラギン残基に結合している前記式6で表される糖鎖である、[1]~[3]の何れか1つに記載のマーカー。
[5]
試料中の、下記(1)~(5)から選ばれる糖鎖の量を測定し、得られた測定結果に基づいて膵臓癌を判定する、膵臓癌の判定方法:
(1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3に存在する、下記式5で表される糖鎖、
(2)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインに存在する、下記式6で表される糖鎖、
(3)ビトロネクチンに存在する、下記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖、
(4)補体C4-Aに存在する、下記式4で表される糖鎖、
(5)チロキシン結合グロブリンに存在する、下記式3で表される糖鎖。
(式1中、m1は0~2の整数を表す)
(式2中、m2は0又は1を表す)
(式3中、n1は0又は1を表す)
(式5中、n2は0又は1を表す)
[6]
前記糖鎖が、下記(1-1)~(5~1)の何れか1つで表される糖鎖である、[5]に記載の判定方法:
(1-1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3のアミノ酸配列のN末端より580番目のアスパラギン残基に結合している前記式5で表される糖鎖、
(2-1)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインのアミノ酸配列のN末端より186番目のアスパラギン残基に結合している前記式6で表される糖鎖、
(3-1)ビトロネクチンのアミノ酸配列のN末端より169番目のアスパラギン残基に結合している前記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖、
(4-1)補体C4-Aのアミノ酸配列のN末端より1328番目のアスパラギン残基に結合している前記式4で表される糖鎖、
(5-1)チロキシン結合グロブリンのアミノ酸配列のN末端より36番目のアスパラギン残基に結合している前記式3で表される糖鎖。
[7]
前記糖鎖が、インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3のアミノ酸配列のN末端より580番目のアスパラギン残基に結合している前記式5で表される糖鎖である、[5]又は[6]に記載の判定方法。
[8]
前記糖鎖が、ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインのアミノ酸配列のN末端より186番目のアスパラギン残基に結合している前記式6で表される糖鎖である、[5]~[7]の何れか1つに記載の判定方法。
[9]
前記試料が、全血、血清又は血漿である、[5]~[8]の何れか1つに記載の判定方法。
[10]
試料中の、下記(1)~(5)から選ばれる糖鎖の量を測定することによりなされる、膵臓癌の判定を行うためのデータを得る方法:
(1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3に存在する、下記式5で表される糖鎖、
(2)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインに存在する、下記式6で表される糖鎖、
(3)ビトロネクチンに存在する、下記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖、
(4)補体C4-Aに存在する、下記式4で表される糖鎖、
(5)チロキシン結合グロブリンに存在する、下記式3で表される糖鎖。
(式1中、m1は0~2の整数を表す)
(式2中、m2は0又は1を表す)
(式3中、n1は0又は1を表す)
(式5中、n2は0又は1を表す)
[11]
下記(1)~(5)から選ばれる糖鎖に親和性を有する物質を含む、膵臓癌の判定用キット:
(1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3に存在する、下記式5で表される糖鎖、
(2)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインに存在する、下記式6で表される糖鎖、
(3)ビトロネクチンに存在する、下記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖、
(4)補体C4-Aに存在する、下記式4で表される糖鎖、
(5)チロキシン結合グロブリンに存在する、下記式3で表される糖鎖。
(式1中、m1は0~2の整数を表す)
(式2中、m2は0又は1を表す)
(式3中、n1は0又は1を表す)
(式5中、n2は0又は1を表す)
本発明の膵臓癌の判定用マーカー(以下、本発明のマーカーと略記する場合がある)は、下記(1)~(5)から選ばれる糖鎖を含むものである。
(1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3に存在する、上記式5で表される糖鎖(以下、本発明のマーカー(1)と略記する場合がある)、
(2)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインに存在する、上記式6で表される糖鎖(以下、本発明のマーカー(2)と略記する場合がある)、
(3)ビトロネクチンに存在する、上記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖(以下、本発明のマーカー(3)と略記する場合がある)、
(4)補体C4-Aに存在する、上記式4で表される糖鎖(以下、本発明のマーカー(4)と略記する場合がある)、
(5)チロキシン結合グロブリンに存在する、上記式3で表される糖鎖(以下、本発明のマーカー(5)と略記する場合がある)。
尚、本発明のマーカーは、本発明のマーカー(1)~(5)の何れかを単独で含むものでも、或いは複数種を含むものであってもよい。
本発明のマーカー(1)は、インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3に存在する、下記式5で表される糖鎖を含むものである。
(式5中、n2は0又は1を表す)
尚、上記式5における、NeuNAcはN-アセチルノイラミン酸、Galはガラクトース、GlcNAcはN-アセチルグルコサミン、Manはマンノース、Fucはフコースを表す。
以下、本明細書において同じ意味を表す。
尚、本発明のマーカー(1)としては、上記式5で表される何れかの糖鎖を単独で使用しても、複数種を組み合わせて使用してもよい。
また、該インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3のアミノ酸配列は、例えば、Uniprot(アクセッション番号:Q06033)等のデータベースに登録されている。
本発明のマーカー(1)に係るインターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3は、上記データベースに登録されているもののみならず、生体内で生じ得る変異体等も含む。例えば、該インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3において1~5個、好ましくは1又は2個のアミノ酸が欠失、置換又は/及び付加されたものであって多型性や突然変異等により生じるものである。
但し、変異体等であっても、後述する本発明のマーカー(1)における式5で表される糖鎖と該インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3との結合部位である、該インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3のアミノ酸配列のN末端より580番目のアミノ酸残基(アスパラギン残基)が保存されているものが好ましい。
以下に、本発明のマーカー(1)における式5で表される糖鎖について説明する。
(式5中、n2は0又は1を表す)
上記式5におけるn2は、0又は1を表し、式5はそれぞれ、n2が0の場合、下記式5-1を表し、n2が1の場合、下記式5-2を表す。
上記式5としては、下記式5-1で表されるもの、又は下記式5-1で表されるものと下記式5-2で表されるものとの組み合わせが好ましい。
また、上記式5-1及び5-2で表される糖鎖としては、具体的には、例えば、下記式5-1’、5-1’’、5-2’、5-2’’等で表されるものが挙げられ、下記式5-1’で表されるものと下記式5-1’’で表されるものとの組み合わせ又は下記式5-1’で表されるものと、下記式5-1’’で表されるものと、下記式5-2’で表されるものと、下記式5-2’’で表されるものとの組み合わせが好ましい。
尚、上記ペプチド断片とは、式5で表される糖鎖とインターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3との結合部位である、インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3のアミノ酸配列のN末端より580番目のアミノ酸残基(アスパラギン残基)を少なくとも有する任意の断片であるのが好ましい。該ペプチド断片としては、具体的には、例えば、生体内で生じるものや、インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3をトリプシン、リシルエンドペプチダーゼ、AspN等のプロテアーゼ処理に付した結果生じるものが挙げられ、より具体的には、例えば、2~50個のアミノ酸残基からなるもの等が挙げられ、配列番号3(アクセッション番号Q06033:572番~584番)で表されるものが好ましい。
本発明のマーカー(2)は、ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインに存在する、下記式6で表される糖鎖を含むものである。
尚、本発明のマーカー(2)としては、上記式6で表される何れかの糖鎖を単独で使用しても、複数種を組み合わせて使用してもよい。
本発明のマーカー(2)に係るロイシンリッチアルファ2グリコプロテインは、上記データベースに登録されているもののみならず、生体内で生じ得る変異体等も含む。例えば、該ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインにおいて1~5個、好ましくは1又は2個のアミノ酸が欠失、置換又は/及び付加されたものであって多型性や突然変異等により生じるものである。
但し、変異体等であっても、後述する本発明のマーカー(2)における式6で表される糖鎖と該ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインとの結合部位である、該ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインのアミノ酸配列のN末端より186番目のアミノ酸残基(アスパラギン残基)が保存されているものが好ましい。
以下に、本発明のマーカー(2)における式6で表される糖鎖について説明する。
尚、上記ペプチド断片とは、式6で表される糖鎖とロイシンリッチアルファ2グリコプロテインとの結合部位である、ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインのアミノ酸配列のN末端より186番目のアミノ酸残基(アスパラギン残基)を少なくとも有する任意の断片である。該ペプチド断片としては、具体的には、例えば、生体内で生じるものや、ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインをトリプシン、リシルエンドペプチダーゼ、AspN等のプロテアーゼ処理に付した結果生じるものが挙げられ、より具体的には、例えば、2~50個のアミノ酸残基からなるもの等が挙げられ、配列番号4(アクセッション番号P02750:179番~191番)で表されるものが好ましい。
本発明のマーカー(3)は、ビトロネクチンに存在する、下記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖を含むものである。
(式1中、m1は0~2の整数を表す)
(式2中、m2は0又は1を表す)
(式3中、n1は0又は1を表す)
尚、本発明のマーカー(3)としては、上記式1~3で表される何れかの糖鎖を単独で使用しても、複数種を組み合わせて使用してもよい。組み合わせる場合には、上記式1~3から組み合わせても、上記式1のみの組み合わせ、上記式2のみの組み合わせ又は上記式3のみの組み合わせでもよい。
本発明のマーカー(3)に係るビトロネクチンは、上記データベースに登録されているもののみならず、生体内で生じ得る変異体等も含む。例えば、該ビトロネクチンにおいて1~5個、好ましくは1又は2個のアミノ酸が欠失、置換又は/及び付加されたものであって多型性や突然変異等により生じるものである。
但し、変異体等であっても後述する本発明のマーカー(3)における式1~3で表される糖鎖と該ビトロネクチンとの結合部位である、該ビトロネクチンのアミノ酸配列のN末端より169番目のアミノ酸残基(アスパラギン残基)が保存されているものが好ましい。
以下に、本発明のマーカー(3)における式1~3で表される糖鎖についてそれぞれ説明する。
(式1中、m1は0~2の整数を表す)
上記式1におけるm1は、0~2の整数を表し、式1はそれぞれ、m1が0の場合、下記式1-1を表し、m1が1の場合、下記式1-2を表し、m1が2の場合、下記式1-3を表す。
上記式1としては、m1が0の場合、即ち、下記式1-1で表されるものが好ましい。
また、上記式1-1、1-2及び1-3で表される糖鎖としては、具体的には、例えば、下記式1-1’、1-2’、1-3’等で表されるものが挙げられ、下記式1-1’で表されるものが好ましい。
(式1-1’、1-2’及び1-3’中、α2-3/6は、α2-3グリコシド結合又はα2-6グリコシド結合を表す。以下、本明細書にて同じ意味を表す)
(式2中、m2は0又は1を表す)
上記式2におけるm2は、0又は1を表し、式2はそれぞれ、m2が0の場合、下記式2-1を表し、m2が1の場合、下記式2-2を表す。
また、上記式2-1及び2-2で表される糖鎖としては、具体的には、例えば、下記式2-1’、2-1’’、2-2’等で表されるものが挙げられ、下記式2-1’で表されるもの又は式2-1’で表されるものと式2-1’’で表されるものとの組み合わせが好ましい。
(式3中、n1は0又は1を表す)
上記式3におけるn1は、0又は1を表し、式3はそれぞれ、n1が0の場合、下記式3-1を表し、n1が1の場合、下記式3-2を表す。
上記式3としては、n1が1の場合、即ち、下記式3-2で表されるものが好ましい。
また、上記式3-1及び3-2で表される糖鎖としては、具体的には、例えば、下記式3-1’、3-2’等で表されるものが挙げられ、下記式3-2’で表されるものが好ましい。
尚、上記ペプチド断片とは、式1~3で表される糖鎖とビトロネクチンとの結合部位である、ビトロネクチンのアミノ酸配列のN末端より169番目のアミノ酸残基(アスパラギン残基)を少なくとも有する任意の断片であるのが好ましい。該ペプチド断片としては、具体的には、例えば、生体内で生じるものや、ビトロネクチンをトリプシン、リシルエンドペプチダーゼ、AspN等のプロテアーゼ処理に付した結果生じるものが挙げられ、より具体的には、例えば、2~50個のアミノ酸残基からなるもの等が挙げられ、配列番号1(アクセッション番号P04004:169番~176番)で表されるものが好ましい。
本発明のマーカー(4)は、補体C4-Aに存在する、下記式4で表される糖鎖を含むものである。
尚、本発明のマーカー(4)としては、上記式4で表される何れかの糖鎖を単独で使用しても、複数種を組み合わせて使用してもよい。
本発明のマーカー(4)に係る補体C4-Aは、上記データベースに登録されているもののみならず、生体内で生じ得る変異体等も含む。例えば、該補体C4-Aにおいて1~5個、好ましくは1又は2個のアミノ酸が欠失、置換又は/及び付加されたものであって多型性や突然変異等により生じるものである。
但し、変異体等であっても、後述する本発明のマーカー(4)における式4で表される糖鎖と該補体C4-Aとの結合部位である、該補体C4-Aのアミノ酸配列のN末端より1328番目のアミノ酸残基(アスパラギン残基)が保存されているものが好ましい。
以下に、本発明のマーカー(4)における式4で表される糖鎖について説明する。
尚、上記ペプチド断片とは、式4で表される糖鎖と補体C4-Aとの結合部位である、補体C4-Aのアミノ酸配列のN末端より1328番目のアミノ酸残基(アスパラギン残基)を少なくとも有する任意の断片であるのが好ましい。該ペプチド断片としては、具体的には、例えば、生体内で生じるものや、補体C4-Aをトリプシン、リシルエンドペプチダーゼ、AspN等のプロテアーゼ処理に付した結果生じるものが挙げられ、より具体的には、例えば、2~50個のアミノ酸残基からなるもの等が挙げられ、配列番号2(アクセッション番号P0C0L4:1326番~1336番)で表されるものが好ましい。
本発明のマーカー(5)は、チロキシン結合グロブリンに存在する、下記式3で表される糖鎖を含むものである。
(式3中、n1は0又は1を表す)
尚、本発明のマーカー(5)としては、上記式3で表される何れかの糖鎖を単独で使用しても、複数種を組み合わせて使用してもよい。
本発明のマーカー(5)に係るチロキシン結合グロブリンは、上記データベースに登録されているもののみならず、生体内で生じ得る変異体等も含む。例えば、該チロキシン結合グロブリンにおいて1~5個、好ましくは1又は2個のアミノ酸が欠失、置換又は/及び付加されたものであって多型性や突然変異等により生じるものである。
但し、変異体等であっても後述する本発明のマーカー(5)における式3で表される糖鎖と該チロキシン結合グロブリンとの結合部位である、該チロキシン結合グロブリンのアミノ酸配列のN末端より36番目のアミノ酸残基(アスパラギン残基)が保存されているものが好ましい。
尚、本発明のマーカー(5)における式3で表される糖鎖については、前述の通りであり、その具体例は同じであるが好ましい例としては、式上記3-1で表されるものが挙げられ、より好ましい例としては、上記式3-1’で表されるものが挙げられる。
尚、上記ペプチド断片とは、式3で表される糖鎖とチロキシン結合グロブリンとの結合部位である、チロキシン結合グロブリンのアミノ酸配列のN末端より36番目のアミノ酸残基(アスパラギン残基)を少なくとも有する任意の断片であるのが好ましい。該ペプチド断片としては、具体的には、例えば、生体内で生じるものや、チロキシン結合グロブリンをトリプシン、リシルエンドペプチダーゼ、AspN等のプロテアーゼ処理に付した結果生じるものが挙げられ、より具体的には、例えば、2~50個のアミノ酸残基からなるものが挙げられ、配列番号5(アクセッション番号P05543:27番~41番)で表されるものが好ましい。
本発明に係る膵臓癌とは、膵臓から発生した癌のことである。
本発明に係る膵臓癌には、具体的には、例えば、浸潤性膵管癌、膵腺房細胞癌、膵管内乳頭粘液性腫瘍等の外分泌性膵臓癌、神経内分泌腫瘍等の内分泌性膵臓癌等が含まれる。
本発明の膵臓癌の判定方法(以下、本発明の判定方法と略記する場合がある)は、試料中の、下記(1)~(5)から選ばれる糖鎖の量を測定し(以下、本発明に係る測定工程と略記する場合がある)、得られた測定結果に基づいて膵臓癌を判定する(以下、本発明に係る判定工程と略記する場合がある)ことによりなされる。
(1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3に存在する、上記式5で表される糖鎖(本発明のマーカー(1))、
(2)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインに存在する、上記式6で表される糖鎖(本発明のマーカー(2))、
(3)ビトロネクチンに存在する、上記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖(本発明のマーカー(3))、
(4)補体C4-Aに存在する、上記式4で表される糖鎖(本発明のマーカー(4))、
(5)チロキシン結合グロブリンに存在する、上記式3で表される糖鎖(本発明のマーカー(5))
尚、本発明の判定方法としては、本発明のマーカー(1)~(5)の何れか単独を用いてなされても、或いは複数種を用いてなされてもよい。
本発明に係る試料としては、被検動物由来のものであればよく、例えば、血清、血漿、全血、尿、唾液、脳脊髄液、組織液、汗、涙、羊水、骨髄液、胸水、腹水、間接液、眼房水、硝子体液等の生体由来試料が挙げられ、血清、血漿、全血等の血液由来試料が好ましく、血清がより好ましい。
上記被検動物としては、ヒト、サル、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ブタ、ウサギ、チンパンジー等の哺乳動物が挙げられ、ヒト、サル、マウス又はラットが好ましく、ヒトがより好ましい。
尚、上記試料は、被検動物から得られた(採取された)直後のものであっても、該試料を保存したものであってもよい。試料を保存する方法としては、通常この分野で行われている方法であれば何れでもよい。
本発明に係る測定工程は、下記(1)~(5)から選ばれる糖鎖の量を測定することによりなされる。
(1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3に存在する、上記式5で表される糖鎖、
(2)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインに存在する、上記式6で表される糖鎖、
(3)ビトロネクチンに存在する、上記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖、
(4)補体C4-Aに存在する、上記式4で表される糖鎖、
(5)チロキシン結合グロブリンに存在する、上記式3で表される糖鎖
尚、本発明に係る測定工程としては、本発明のマーカー(1)~(5)の何れか単独を測定することによりなされても、或いは複数種を測定することによりなされてもよい。
上記本発明のマーカーにおけるタンパク質とは、本発明のマーカーにおける糖鎖以外の部分を意味し、本発明のマーカー(1)であれば、インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3を意味し、本発明のマーカー(2)であれば、ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインを意味し、本発明のマーカー(3)であれば、ビトロネクチンを意味し、本発明のマーカー(4)であれば、補体C4-Aを意味し、本発明のマーカー(5)であれば、チロキシン結合グロブリンを意味する。
尚、上記「量」とは、容量、質量等の絶対値又は濃度、イオン強度、吸光度、蛍光強度、濁度、ピーク面積等から算出された値等の相対値の何れであってもよい。
以下に、上記(A)及び(B)についてそれぞれ具体的に説明する。
本発明のマーカーに対して親和性を有する物質を用いる方法としては、具体的には、例えば、酵素結合免疫吸着測定法(ELISA法)、酵素免疫測定法(EIA法)、放射免疫測定法(RIA法)、蛍光免疫測定法(FIA法)、化学発光酵素免疫測定法(CLEIA法)、電気化学発光免疫測定法(ECLEIA法)、免疫比濁法、免疫比ろう法、ラテックス凝集法、イムノクロマト法、ウェスタンブロット法、Luminescent Oxygen ChannelingImmunoassay(LOCI法)、Liquid-phase Binding Assay-ElectroKinetic Analyte Transport Assay(LBA-EATA法)等の免疫学的測定法に準じた方法が挙げられる。
上記抗体は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体の何れであってもよく、これらを単独で或いは組み合わせて用いてもよい。
上記抗体は、Fab、F(ab’2)、Fv、sFv等の抗体フラグメントやダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ等の合成抗体等であってもよい。
また、上記抗体は、市販の抗体を用いても、自体公知の方法に従って調製したものを用いてもよい。
尚、自体公知の方法に従って、上記抗体を調製する場合には、例えば、「免疫測定法」(生物化学的測定研究会編集、講談社、2014年)等に記載の方法に従ってなされればよい。
尚、上記標記物質を抗体に結合させる方法としては、自体公知の方法に従ってなされればよい。
また、上記標識物質をレクチンに結合させる方法としては、自体公知の方法に従ってなされればよい。
尚、上記方法の具体的な手法については、自体公知の手法に従ってなされればよい。
尚、下記説明において、本発明のマーカーにおけるタンパク質(又はペプチド断片)を「標的タンパク質(又は標的ペプチド断片)」、本発明のマーカーにおける糖鎖を「標的糖鎖」と表記する。
例えば、本発明のマーカー(1)を測定する場合、インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3が「標的タンパク質(又は標的ペプチド断片)」を、式5で表される糖鎖が「標的糖鎖」を意味し、本発明のマーカー(2)を測定する場合、ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインが「標的タンパク質(又は標的ペプチド断片)」を、式6で表される糖鎖が「標的糖鎖」、本発明のマーカー(3)を測定する場合、ビトロネクチンが「標的タンパク質(又は標的ペプチド断片)」、式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖が「標的糖鎖」を意味し、本発明のマーカー(4)を測定する場合、補体C4-Aが「標的タンパク質(又は標的ペプチド断片)」を、式4で表される糖鎖が「標的糖鎖」を意味し、本発明のマーカー(5)を測定する場合、チロキシン結合グロブリンが「標的タンパク質(又は標的ペプチド断片)」を、式3で表される糖鎖が「標的糖鎖」を意味する。
(工程1)試料から標的糖鎖が結合した標的タンパク質(本発明のマーカー)を分離する工程、
(工程2)前記工程1で分離された標的糖鎖が結合した標的タンパク質の量を測定する工程
尚、標識物質で標識された親和性を有する物質を用いる場合には、標的糖鎖が結合した標的タンパク質の分離は、標識物質で標識された親和性を有する物質と本発明のマーカーとの複合体の分離と言い換えてもよく、この場合、標識物質で標識された親和性を有する物質と本発明のマーカー以外の成分との複合体又は/及び遊離の標識物質で標識された親和性を有する物質とを分離すればよい。標識物質で標識された親和性を有する物質を構成成分として含まない成分との分離は不要である。
また、上記糖鎖に特異的に結合する親和性を有する物質及びタンパク質に特異的に結合する親和性を有する物質については、上述の通りであり、具体例等も同じである。
該断片化処理としては、具体的には、例えば、工程1を行う前に、試料にトリプシン、リシルエンドペプチダーゼ、AspN等のプロテアーゼを加えることによりなされればよく、工程1で標的糖鎖に結合する物質、及び標的ペプチド断片に結合する物質をそれぞれ用いて、標的糖鎖が結合した標的ペプチド断片と親和性を有する物質との複合体(標的ペプチド断片に特異的に結合する物質-本発明のマーカー-標的糖鎖に特的に結合する物質)を形成させ、該複合体を上述の如く分離した後、該複合体の量を測定すればよい。
具体的には、例えば、工程1で分離された標的糖鎖が結合した標的タンパク質を、グリカナーゼ、ヒドラジン等にて処理することにより標的糖鎖を分離した後、該糖鎖の量のみを上述の如く測定すればよい。
質量分析法を利用する方法としては、具体的には、例えば、液体クロマトグラフィー質量分析計(LC/MS)、キャピラリー電気泳動質量分析計(CE/MS)、ガスクロマトグラフィー質量分析計(GC/MS)、液体クロマトグラフィータンデム型質量分析計(LC/MS/MS)等を利用する方法が挙げられる。
上記方法としては、具体的には、例えば、液体クロマトグラフ等のクロマトグラフを有する分離部にて、試料中の成分を分離し、分離された種々の成分を質量分析部にてイオン化させ、更に質量電荷比(m/z)毎に分離することによりなされればよい。
尚、上記質量分析法を利用する方法における具体的な手法は自体公知の手法やWO2014/038524、WO2017/19588、WO2018/034346等に記載の手法に従ってなされればよい。
本発明に係る測定工程では、(i)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3に存在する、式5で表される糖鎖の量又は(ii)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインに存在する、式6で表される糖鎖の量を測定することが好ましく、(iii)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3に存在する、式5で表される糖鎖の量を測定することがより好ましく、(vi)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3のアミノ酸配列のN末端より580番目のアミノ酸残基(アスパラギン残基)に結合している式5で表される糖鎖の量を測定することが更に好ましい。
また、上記測定を行う場合には、本発明のマーカーに対して親和性を有する物質を用いる方法が好ましく、ELISA法、EIA法、RIA法、FIA法、CLEIA法、ECLEIA法、免疫比濁法、免疫比ろう法、ラテックス凝集法、イムノクロマト法、ウェスタンブロット法、LOCI法、LBA-EATA法等の免疫学的測定法に準じた方法がより好ましく、本発明のマーカーに対して親和性を有する物質と本発明のマーカーとを接触させて、本発明のマーカーに対して親和性を有する物質と本発明のマーカーとの複合体を形成させ、該複合体の量を測定する方法が更に好ましく、本発明のマーカーに対して親和性を有する物質と本発明のマーカーとを接触させて、本発明のマーカーに対して親和性を有する物質と本発明のマーカーとの複合体を形成させ、該複合体に結合した標識物質に由来するシグナルを検出する方法が特に好ましい。
本発明に係る判定工程は、本発明に係る測定工程により得られた測定結果に基づいて膵臓癌を判定する工程である。
即ち、(i)被検動物由来の値が、予め設定した基準値(カットオフ値等)以上の場合、「被検動物が膵臓癌に罹患しているおそれがある、或いは被検動物が膵臓癌に罹患しているおそれが高い」等の判定を下すことができ、(ii)被検動物由来の値が、予め設定した基準値(カットオフ値等)未満の場合、「被検動物が膵臓癌に罹患しているおそれはない、或いは膵臓癌に罹患しているおそれが低い」等の判定を下すことができる。
また、別の態様として、(i)被検動物由来の値が、予め設定した基準値(カットオフ値等)以下の場合、「被検動物が膵臓癌に罹患しているおそれがある、或いは被検動物が膵臓癌に罹患しているおそれが高い」等の判定を下すことができ、(ii)被検動物由来の値が、予め設定した基準値(カットオフ値等)超の場合、「被検動物が膵臓癌に罹患しているおそれはない、或いは膵臓癌に罹患しているおそれが低い」等の判定を下すことができる。
尚、上記基準値(カットオフ値等)は、膵臓癌に罹患している動物由来の試料を用いて本発明に係る測定工程により得られた測定値と健常動物由来の試料を用いて本発明に係る測定工程により得られた値(以下、健常動物由来の値と略記する場合がある)とを用いてROC(Receiver Operating Characteristic)曲線解析等の統計解析に基づいて決定することができる。
また、上記基準値(カットオフ値等)の感度又は/特異度は、例えば60%以上、好ましくは70%以上、より好ましくは80%以上、更に好ましくは90%以上である。
本発明の膵臓癌の判定を行うためのデータを得る方法(以下、本発明のデータを得る方法と略記する場合がある)は、試料中の下記(1)~(5)から選ばれる糖鎖の量を測定することによりなされる。
(1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3に存在する、上記式5で表される糖鎖、
(2)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインに存在する、上記式6で表される糖鎖、
(3)ビトロネクチンに存在する、上記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖、
(4)補体C4-Aに存在する、上記式4で表される糖鎖、
(5)チロキシン結合グロブリンに存在する、上記式3で表される糖鎖
即ち、本発明のデータを得る方法は、本発明のマーカー、言い換えると、本発明のマーカー(1)~(5)から選ばれるものを測定することによりなされる。
尚、本発明のデータを得る方法としては、本発明のマーカー(1)~(5)の何れか単独を用いてなされても、或いは複数種を用いてなされてもよい。
尚、本発明のデータを得る方法における、本発明のマーカー、該マーカーの測定、膵臓癌及び試料については、<本発明のマーカー>及び<本発明の判定方法>にて説明した通りであり、具体例、好ましい例等も同じである。
本発明の膵臓癌の判定用キット(以下、本発明のキットと略記する場合がある)は、下記(1)~(5)から選ばれる糖鎖に親和性を有する物質を含むものである。
(1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3に存在する、上記式5で表される糖鎖、
(2)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインに存在する、上記式6で表される糖鎖、
(3)ビトロネクチンに存在する、上記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖、
(4)補体C4-Aに存在する、上記式4で表される糖鎖、
(5)チロキシン結合グロブリンに存在する、上記式3で表される糖鎖
本発明のキットは、本発明のマーカー、言い換えると、本発明のマーカー(1)~(5)にそれぞれ親和性を有する物質を含むものである。
尚、本発明のキットにおける、本発明のマーカー及び膵臓癌については、<本発明のマーカー>及び<本発明の判定方法>にて説明した通りであり、具体例、好ましい例等も同じである。
上記親和性を有する物質については、<本発明の判定方法>にて説明した通りであり、具体例、好ましい例等も同じである。
尚、上記レクチン固定化固相、抗体固定化固相、抗原固定化固相等の固定化固相における素材については、自体公知の方法により製造されたものを用いても、市販のものを用いてもよい。例えば、自体公知の方法により上記磁性シリカ粒子等の磁性粒子を製造する場合、WO2012/173002に記載の方法により製造することができる。
尚、上記標識物質で標識された二次抗体又はその抗体断片における、標識物質及び標識物質を結合させる方法については、<本発明の判定方法>にて説明した通りであり、好ましい例、具体例等も同じである。
本発明に係る膵臓癌の判定を行うための装置(以下、本発明に係る判定装置と略記する場合がある)は、少なくとも(1)測定部を備えている。更に、(2)判定部、(3)出力部及び(4)入力部を備えていてもよい。
尚、要すれば、(1)測定部では、測定された測定値に基づいて、上記本発明のマーカー(1)~(5)の量を算出するように構成されていてもよい。
本発明に係る膵臓癌の判定を補助する方法(以下、本発明に係る補助方法と略記する場合がある)は、試料中の上記本発明のマーカー(1)~(5)から選ばれる糖鎖の量を測定し、得られた測定結果に基づいて膵臓癌の判定を補助することによりなされる。
本発明に係る補助方法は、医師等による膵臓癌の診断を補助する方法として用いることができる。
尚、本発明に係る補助方法における試料、マーカー、測定、判定等については、<本発明の判定方法>にて説明した通りであり、好ましい例、具体例等も同じである。
本発明に係る膵臓癌を判定し、治療する方法(以下、本発明に係る治療方法と略記する場合がある)は、試料中の本発明のマーカー(1)~(5)から選ばれる糖鎖の量を測定し、得られた測定結果に基づいて膵臓癌を判定し、その判定結果に基づいて膵臓癌のおそれがある又は膵臓癌のおそれが高いと判定された患者に適切な治療を施すことによりなされる。
尚、本発明に係る治療方法における試料、マーカー、測定、判定等については、<本発明の判定方法>にて説明した通りであり、好ましい例、具体例等も同じである。
本発明に係る治療方法における適切な治療としては、具体的には、例えば、膵頭十二指腸切除術、膵体尾部切除術、膵全摘術、バイパス手術等の外科療法、化学放射線療法等の放射線治療、ユーエフティ(商品名)等の薬剤を投与することによりなされる薬物療法等が挙げられる。
[(1)検体(サンプル)]
横浜市立大学センター病院及び横浜市立大学先端医科学研究センターバイオバンクより提供された、膵臓癌患者由来の血清(10検体)及び健常者由来の血清(11検体)を検体(サンプル)として用いた。
上記(1)の膵臓癌患者由来の血清及び健常者由来の血清 10μLを、High-Select Top14 Abundant Protein Depletion Resin(ThermoFisher Scientific社製)にそれぞれ入れ、25℃で10分間インキュベートすることにより、albumin、immunoglobulin等の血清中に存在する夾雑タンパク質を除去した。次いで、アセトン 40μLをそれぞれ加え、-20℃で16時間インキュベートした後、14000rpmで遠心分離した。上清を除去後、沈殿物に8M尿素含有50mMトリス塩酸バッファー(pH8.0) 50μLをそれぞれ加え溶解し、プロテインアッセイBCAキット(富士フイルム和光純薬社製)にてタンパク質濃度をそれぞれ測定した。測定後、タンパク質試料 20μgに、500mMジチオスレイトール 1μLをそれぞれ加え、37℃で30分間インキュベートした。次いで、500mMヨードアセトアミド 2.8μLをそれぞれ加え、37℃で30分間インキュベートすることにより、還元アルキル化を行った(尚、該還元アルキル化は、500mMジチオスレイトール 0.5μLを加えることにより、その反応を停止させた)。その後、Zeba Spin Desalting column(0.5mL;ThermoFisher Scientific社製)にて50mMトリス塩酸バッファー(pH8.0) 130μLに溶媒置換し、変性剤及び還元剤をそれぞれ除去した。次いで、タンパク質試料 1μgに、Trypsin/Lys-C Mix(プロメガ社製)をそれぞれ加え、37℃で16時間インキュベートした。その後、Oasis PRiME HLB固相抽出カラム(Waters社製)にて脱塩を行い、遠心エバポレーターにて乾固し、糖ペプチドを得た。
上記(2)で調製した21検体分(膵臓癌患者:10検体、健常者:11検体)の各糖ペプチド 10μgについて、下記手順に従い、濃縮した。
(A)WO2017/195887記載の糖ペプチド濃縮カラムに、0.1%TFA溶液 100μLを入れ、200μLチップ専用の卓上遠心機にセットし、該溶液をカラムに通過させ、ポリマー性ポリオール層を洗浄した。
(B)カラムに、80%アセトニトリル/0.1%TFA溶液 100μLを入れ、200μLチップ専用の卓上遠心機にセットし、該溶液をカラムに通過させ、固相抽出担体相を洗浄した。
(C)カラムに、80%アセトニトリル/0.1%TFA溶液 100μLを入れ、200μLチップ専用の卓上遠心機にセットし、2秒間遠心することによりカラム内の空気を除いた。
(D)カラム内の80%アセトニトリル/0.1%TFA溶液に、上記(2)で調製した糖ペプチド試料 10μgを加え、200μLチップ専用の卓上遠心機にセットし、20秒間遠心した。
(E)カラムに、80%アセトニトリル/0.1%TFA溶液 100μLを加え、200μLチップ専用の卓上遠心機にセットし、20秒間遠心し、夾雑物を除去した。
(F)上記(E)を更に2回繰り返した。
(G)カラムに、0.1%TFA 100μLを加え、200μLチップ専用の卓上遠心機にセットし、30秒間遠心し、固相抽出担体相に糖ペプチドを濃縮させた。
(H)カラムに、80%アセトニトリル/0.1%TFA溶液 100μLを加え、アダプター付きのシリンジを用いて1.5mLチューブに糖ペプチドを溶出させた後、遠心エバポレーターにて乾燥し、濃縮した糖ペプチドを得た。
上記(3)で調製した濃縮糖ペプチド試料 5μgを、50mMリン酸ナトリウム緩衝液(pH7.4) 10μLに溶解し、1UのPNGase F(ロシュ社製) 1μL加え、37℃にて16時間インキュベートすることにより、N結合型糖鎖を切断した。次いで、Oasis PRiME HLB固相抽出カラム(Waters社製)にて脱塩した後、遠心エバポレーターで乾固し、脱糖鎖ペプチドを得た。
上記(3)で調製した濃縮糖ペプチドを、0.1%ギ酸 4μLに2.5μg/μLとなるようにそれぞれ溶解し、糖ペプチド試料とした。また、上記(4)で調製した脱糖鎖ペプチドを、0.1%ギ酸 4μLに1.25μg/μLとなるようにそれぞれ溶解し、脱糖鎖ペプチド試料とした。
上記糖ペプチド試料及び脱糖鎖ペプチド試料について、ナノ液体クロマトグラフィー質量分析(nanoLC/MS/MS)による解析(分離/分析)を行った。
具体的には、分析カラム(Nano HPLC capillary column;日京テクノス社製)を装着したナノ液体クロマトグラフ(EASY-nLC 1000;ThermoFisher Scientific社製)を、ハイブリッド四重極オービトラップ質量分析計(Q Exactive;ThermoFisher Scientific社製)に接続し、上記糖ペプチド試料 4μLを分析カラムにインジェクションした後、流速300nL/minで該糖ペプチド試料の分離を行った。
尚、A溶媒として、0.1%ギ酸水溶液、B溶媒として、0.1%ギ酸アセトニトリルを用い、0分~70分でB溶媒0%からB溶媒35%のリニアグラジエント、70分~75分でB溶媒35%からB溶媒100%のリニアグラジエントを用いた。また、全測定を通して、ポジティブイオンモード(印加電圧:1900V)とした。
上記脱糖鎖ペプチドについては、上記と同様にしてそれぞれ分離した後、Proteome Discoverer 1.4(ThermoFisher Scientific社製)を用いて該脱糖鎖ペプチドにおける糖鎖結合部位を同定した。
更に、上記情報を基に、糖ペプチドの質量と保持時間より、糖ペプチドの構造を確認した。
上記(1)~(5)により、下記表1に示す通り、ビトロネクチン、補体C4-A、インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3、ロイシンリッチアルファ2グリコプロテイン及びチロキシン結合グロブリンにそれぞれ由来する糖ペプチドA~Lが同定された。
また、上記糖ペプチドA~Lのピーク面積値について、健常者(11検体)の平均値及び膵臓癌患者(10検体)の平均値を図1~7にそれぞれ示す。
また、上記式1-1’、式1-2’及び式1-3’で表される糖鎖は、ビトロネクチンのアミノ酸配列のN末端より169番目のアスパラギン残基にそれぞれ結合していることを確認した。
また、上記式2-1’、式2-1’’及び式2-2’で表される糖鎖は、ビトロネクチンのアミノ酸配列のN末端より169番目のアスパラギン残基にそれぞれ結合していることを確認した。
また、上記式3-1’及び式3-2’で表される糖鎖は、ビトロネクチンのアミノ酸配列のN末端より169番目のアスパラギン残基にそれぞれ結合していることを確認した。
また、上記式4-1で表される糖鎖は、補体C4-Aのアミノ酸配列のN末端より1328番目のアスパラギン残基にそれぞれ結合していることを確認した。
また、上記式5-1’、式5-1’’、式5-2’及び式5-2’’で表される糖鎖は、インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3のアミノ酸配列のN末端より580番目のアスパラギン残基にそれぞれ結合していることを確認した。
また、上記式6-1で表される糖鎖は、ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインのアミノ酸配列のN末端より186番目のアスパラギン残基に結合していることを確認した。
また、上記式3-1’及び式3-2’で表される糖鎖は、チロキシン結合グロブリンのアミノ酸配列のN末端より36番目のアスパラギン残基にそれぞれ結合していることを確認した。
その結果を下記表2に示す。尚、AUC値については、0.75以上が好ましく、0.80以上となれば極めて高い判定能があると考える。
Claims (11)
- 下記(1)~(5)から選ばれる糖鎖を含む、膵臓癌の判定用マーカー:
(1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3に存在する、下記式5で表される糖鎖、
(2)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインに存在する、下記式6で表される糖鎖、
(3)ビトロネクチンに存在する、下記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖、
(4)補体C4-Aに存在する、下記式4で表される糖鎖、
(5)チロキシン結合グロブリンに存在する、下記式3で表される糖鎖。
(式1中、m1は0~2の整数を表す)
(式2中、m2は0又は1を表す)
(式3中、n1は0又は1を表す)
(式5中、n2は0又は1を表す)
- 前記糖鎖が、下記(1-1)~(5-1)の何れか1つで表される糖鎖である、請求項1に記載のマーカー:
(1-1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3のアミノ酸配列のN末端より580番目のアスパラギン残基に結合している前記式5で表される糖鎖、
(2-1)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインのアミノ酸配列のN末端より186番目のアスパラギン残基に結合している前記式6で表される糖鎖、
(3-1)ビトロネクチンのアミノ酸配列のN末端より169番目のアスパラギン残基に結合している前記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖、
(4-1)補体C4-Aのアミノ酸配列のN末端より1328番目のアスパラギン残基に結合している前記式4で表される糖鎖、
(5-1)チロキシン結合グロブリンのアミノ酸配列のN末端より36番目のアスパラギン残基に結合している前記式3で表される糖鎖。 - 前記糖鎖が、インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3のアミノ酸配列のN末端より580番目のアスパラギン残基に結合している前記式5で表される糖鎖である、請求項1に記載のマーカー。
- 前記糖鎖が、ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインのアミノ酸配列のN末端より186番目のアスパラギン残基に結合している前記式6で表される糖鎖である、請求項1に記載のマーカー。
- 血液由来試料中の、下記(1)~(5)から選ばれる糖鎖の量を測定し、得られた測定結果が、膵臓癌を判定するために用いられる、膵臓癌の判定のための方法:
(1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3に存在する、下記式5で表される糖鎖、
(2)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインに存在する、下記式6で表される糖鎖、
(3)ビトロネクチンに存在する、下記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖、
(4)補体C4-Aに存在する、下記式4で表される糖鎖、
(5)チロキシン結合グロブリンに存在する、下記式3で表される糖鎖。
(式1中、m1は0~2の整数を表す)
(式2中、m2は0又は1を表す)
(式3中、n1は0又は1を表す)
(式5中、n2は0又は1を表す)
- 前記糖鎖が、下記(1-1)~(5~1)の何れか1つで表される糖鎖である、請求項5に記載の判定方法:
(1-1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3のアミノ酸配列のN末端より580番目のアスパラギン残基に結合している前記式5で表される糖鎖、
(2-1)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインのアミノ酸配列のN末端より186番目のアスパラギン残基に結合している前記式6で表される糖鎖、
(3-1)ビトロネクチンのアミノ酸配列のN末端より169番目のアスパラギン残基に結合している前記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖、
(4-1)補体C4-Aのアミノ酸配列のN末端より1328番目のアスパラギン残基に結合している前記式4で表される糖鎖、
(5-1)チロキシン結合グロブリンのアミノ酸配列のN末端より36番目のアスパラギン残基に結合している前記式3で表される糖鎖。 - 前記糖鎖が、インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3のアミノ酸配列のN末端より580番目のアスパラギン残基に結合している前記式5で表される糖鎖である、請求項5に記載の判定方法。
- 前記糖鎖が、ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインのアミノ酸配列のN末端より186番目のアスパラギン残基に結合している前記式6で表される糖鎖である、請求項5に記載の判定方法。
- 前記試料が、全血、血清又は血漿である、請求項5に記載の判定方法。
- 血液由来試料中の、下記(1)~(5)から選ばれる糖鎖の量を測定することによりなされる、膵臓癌の判定を行うためのデータを得る方法:
(1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3に存在する、下記式5で表される糖鎖、
(2)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインに存在する、下記式6で表される糖鎖、
(3)ビトロネクチンに存在する、下記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖、
(4)補体C4-Aに存在する、下記式4で表される糖鎖、
(5)チロキシン結合グロブリンに存在する、下記式3で表される糖鎖。
(式1中、m1は0~2の整数を表す)
(式2中、m2は0又は1を表す)
(式3中、n1は0又は1を表す)
(式5中、n2は0又は1を表す)
- 下記(1)~(5)から選ばれる糖鎖に親和性を有する物質を含む、膵臓癌の判定用キット:
(1)インターアルファトリプシンインヒビター重鎖H3に存在する、下記式5で表される糖鎖、
(2)ロイシンリッチアルファ2グリコプロテインに存在する、下記式6で表される糖鎖、
(3)ビトロネクチンに存在する、下記式1~3で表される少なくとも1つの糖鎖、
(4)補体C4-Aに存在する、下記式4で表される糖鎖、
(5)チロキシン結合グロブリンに存在する、下記式3で表される糖鎖。
(式1中、m1は0~2の整数を表す)
(式2中、m2は0又は1を表す)
(式3中、n1は0又は1を表す)
(式5中、n2は0又は1を表す)
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Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003004748A (ja) | 2001-06-26 | 2003-01-08 | Eisai Co Ltd | 膵臓癌診断用試薬 |
JP2008541060A (ja) | 2005-05-05 | 2008-11-20 | フィラデルフィア ヘルス アンド エデュケーション コーポレーション ディー/ビー/エー ドレクセル ユニバーシティー カレッジ オブ メディシン | タンパク質のグリコシル化の評価による肝臓病変の診断 |
WO2009136506A1 (ja) | 2008-05-09 | 2009-11-12 | 住友ベークライト株式会社 | N結合型糖鎖を利用した膵臓癌の診断方法 |
WO2011034182A1 (ja) | 2009-09-18 | 2011-03-24 | 三菱化学株式会社 | 肝細胞癌マーカー |
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Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR100475642B1 (ko) * | 2001-12-29 | 2005-03-10 | 한국생명공학연구원 | 암 발생 및 전이에 관여하는 단백질의 당쇄 변화를측정하여 암을 진단하는 방법 및 이를 이용한 진단킷트 |
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Patent Citations (5)
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