JP6602964B2 - 半フッ素化化合物およびその組成物 - Google Patents

Description

本発明は、半フッ素化化合物を含む組成物および経眼投与におけるその使用の分野に関する。

半フッ素化アルカンは、少なくとも１つの非フッ素化炭化水素部分と少なくとも１つの過フッ素化炭化水素部分とからなる化合物である。各部分の炭素原子数をｎおよびｍで表した一般式ＣＦ_３（ＣＦ_２）_ｎ（ＣＨ_２）_ｍＣＨ_３の直鎖非分岐型半フッ素化アルカンは、様々な用途のための記載、例えば、商用では網膜を広げて再貼付するための記載、硝子体液代用物として長期止血するための記載（Ｈ．Ｍｅｉｎｅｒｔら、Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ、第１０（３）巻、１８９−１９７頁、２０００）、および硝子体網膜手術後に残留シリコン油を洗い落とす溶液としての記載がなされている。

式ＣＦ_３（ＣＦ_２）_ｎ（ＣＨ_２）_ｍＣＨ_３の半フッ素化アルカンは、その他の用途で記載がなされている。

ＷＯ２０１１／０７３１３４には、エタノールなどの共溶媒を場合により存在させた式ＣＦ_３（ＣＦ_２）_ｎ（ＣＨ_２）_ｍＣＨ_３の半フッ素化アルカン中のシクロスポリンの溶液が開示されており、この場合、半フッ素化アルカンは乾性角結膜炎の局所処置のためのシクロスポリンの液体薬送達用ビヒクルとして機能している。

ＷＯ２０１４／０４１０５５には、式ＣＦ_３（ＣＦ_２）_ｎ（ＣＨ_２）_ｍＣＨ_３（あるいはＦ（ＣＦ_２）_ｎ（ＣＨ_２）_ｍＨとして表され得る）の半フッ素化アルカンの混合物が記載されている。これらの混合物は、涙膜代用物として、またはドライアイ症候群および／もしくはマイボーム腺機能不全の患者を処置するために、眼に適用されることが記載されている。

直鎖非分岐部分を有する半フッ素化化合物によく使用されている命名法は、ＦｎＨｍであり、式中、Ｆは過フッ素化炭化水素部分を意味し、Ｈは非フッ素化部分を意味し、ｎおよびｍはそれぞれの部分の炭素原子数を示す。例えば、Ｆ３Ｈ３は、過フッ素プロピルプロパン、ＣＦ_３（ＣＦ_２）_２（ＣＨ_２）_２ＣＨ_３、すなわち１−パーフルオロプロピルプロパンを表すために使用される。

しかしながら、式ＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３の半フッ素化アルカンならびにＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３とＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とを含む組成物は、とりわけ眼科用途のための記載がなされたことがない。それゆえ、本発明の目的は、そのような化合物を含む組成物を、とりわけ眼科用途に使用するための組成物におけるそれらの使用に関して、提供することである。

第１の形態において、本発明は、ＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３とＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とを含む組成物に関する。詳しくは、本発明は、約８０ｗｔ％のＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３を含むそのような組成物に関し、別の態様では、約２５ｗｔ％以下のＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３を含むそのような組成物に関する。

別の態様において、本発明は、透明な液体溶液の形態の、上記化合物を含む組成物に関する。

また別の態様では、本発明は、ドライアイ疾患および／またはマイボーム腺機能不全ならびにそれらの症候に関連する任意の症候または症状を処置するための、ＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３とＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とを含む組成物の使用を提供する。

さらなる態様において、本発明は、ドライアイ疾患および／またはマイボーム腺機能不全ならびにそれらの関連する任意の症候または症状を処置する方法であって、上記組成物を局所的に涙嚢、下眼瞼内、眼表面または眼組織に投与することを含む、方法を提供する。

また別の態様では、本発明は、眼または眼組織への組成物の局所投与に適合した分注手段を備えた容器内に保持された本発明の組成物を含むキットを提供する。

図１は、ＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３とＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とから構成される組成物の蒸発時間を組成物中の後者の化合物の割合の関数として描写するグラフである。

図２は、ＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３とＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とから構成される組成物について決定した屈折率を組成物中の後者の化合物の割合の関数として描写するグラフである。

図３は、ＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３とＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３との組成物、ヒアルロン酸標準対照、および０．０１％ＢＡＣ陽性対照についての生体外での眼刺激試験（ＥＶＥＩＴ）の比較から得られた結果を表すグラフである。

発明の詳細な説明

第１の形態において、本発明は、ＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３とＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とを含む組成物に関する。

化合物ＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３は、元の炭化水素アルカンに基づいて２−パーフルオロヘキシルオクタンとも呼ばれ得る。この化合物は、２−アルキル位の立体中心を特徴とする。本明細書において理解されるように、一般式は、両方のエナンチオマー、２つのエナンチオマーの富化混合物、およびラセミ混合物を包含する。化合物ＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３は、代わりに、１−パーフルオロヘキシルオクタン、または命名法ＦｎＨｍに従ってＦ６Ｈ８と呼んでもよく、式中、ｎは直鎖非分岐型の過フッ素化部分の炭素原子数を表す整数であり、ｍは直鎖非分岐型の炭化水素部分の炭素原子数を表す整数である。

本発明の特に好ましい組成物は、少なくとも約８０ｗｔ％のＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３を含む組成物である。他の実施形態において、組成物は、少なくとも約９０ｗｔ％または少なくとも約９５ｗｔ％または少なくとも９７ｗｔ％のＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３を含む。本発明の別の好ましい実施形態において、組成物は、約２５ｗｔ％以下のＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３を含む。他の実施形態において、組成物は、約１０ｗｔ％、または約５ｗｔ％以下、または約３ｗｔ％以下の化合物ＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３を含む。

本明細書において使用する場合、ｗｔ％という用語は、全体として決まる組成物の重量のうちの百分率での割合としての成分の重量を指す。ｗｔ％などのパラメータに先行する約という用語は、まさにその値だけでなく、パラメータの測定および決定（当該技術分野において既知の標準的な技術および機器を含む）において通常みられる変動性の度合いの範囲内に入る任意の値も含む。

さらなる好ましい実施形態では、本発明の組成物は、約９７ｗｔ％のＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３と、約３ｗｔ％以下のＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とを含む。別のさらなる実施形態では、組成物は、約９８ｗｔ％のＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３と、約１ｗｔ％以下のＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とを含み得る。

上で定義したこれらの半フッ素化アルカンを含む組成物は、好ましくは液状であり、かつ好ましくは透明な液体溶液として投与されるために調合される。この文脈において、透明とは、濁りの原因となる分散した固体または液体の粒子が存在しないことを意味する。言い換えれば、そのような透明な溶液は、微小かつ技術的に重要でない量の微粒子不純物が存在していてもよいことを別とすれば純粋に単相液体系である。

場合により選択される実施形態において、組成物は、ゲル、懸濁液、マイクロエマルジョンまたはスプレーとして投与されるために調合され得る。組成物は、滅菌状態で提供されることが好ましい。

さらに、組成物は、室温（ＲＴ）で１．３３３である水の屈折率に近い屈折率を示す液体溶液として調合されることが好ましい。特に好ましい実施形態において、液体溶液の屈折率は、屈折計で測定した場合に２０℃で約１．３０〜約１．３５の範囲にある。

上で定義した組成物はまた、必要に応じて、または便宜上、他の賦形剤、例えば１つ以上の酸、塩基、電解質、緩衝剤、溶質、酸化防止剤、安定化剤および（必要に応じて）保存剤を含んでいてもよい。１つの好ましい実施形態では、本明細書に記載の組成物は、水を実質的に含まず、かつ／または保存剤、例えば塩化ベンザルコニウムを実質的に含まない。

本発明の別の実施形態では、上記の組成物は、下記を実質的に含まない：（ａ）ポリマー、（ｂ）過フッ素化化合物、および／または、（ｃ）半フッ素化アルカンでない溶解した薬理活性成分。そのような組成物はまた、透明な液体溶液として調合されることが好ましい。別の実施形態では、本明細書においていずれかの実施形態に記載されている組成物は、半フッ素化アルカンでない薬理活性成分をいかなる形態でも含まないものであり得る。

本明細書において理解されるように、組成物の構成要素に関して、「実質的に含まない」という用語は、上記構成要素が痕跡量以下でしか存在しないことおよび、当該構成要素が痕跡量で存在するとしても組成物に対して技術的に寄与しないことを指す。

本発明の組成物中に存在しないことが好ましいポリマーの例としては、シリコーンポリマー（重合シロキサン）、ポリエーテルポリマーおよび、それらのフッ素化または過フッ素化誘導体が挙げられる。

過フッ素化化合物、すなわち、全ての水素原子がフッ素で置換されており、本発明の組成物中には存在していないことが好ましい化合物の例としては、パーフルオロデカリンなどのパーフルオロアルカン、およびパーフルオロオクチルブロマイドなどのハロゲン化パーフルオロアルカンが挙げられる。

本発明の組成物はまた、半フッ素化アルカンでない溶解した薬理活性成分を実質的に含まない。本明細書において使用する場合、「薬理活性成分」という用語は、任意の種類の薬理活性な化合物または薬剤、すなわち、薬理作用を生み、それゆえに症状または疾患の防止、診断、安定化、処置または概して言うところの管理に有用となり得るものを指す。

好ましい実施形態では、本発明に係る組成物は、ＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３とＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とから本質的に構成される。 好ましくは、組成物は、約９７ｗｔ％のＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３と、約３ｗｔ％以下のＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とから本質的に構成される。

本明細書において使用する場合、「から本質的に構成される」という用語は、いわゆる閉鎖形式の用語であり、言及した構成要素のみが存在していることを意味する。 これに対し、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含んでいる」という用語は、本明細書ではいわゆる開放形式の用語であり、さらなる構成要素が存在していてもよいことを意味する。

しかしながら、本発明の化合物およびこれを含む組成物は、たとえ薬理活性成分を含んでいなくとも投与部位において有益な治療効果を有する。

上で定義した組成物は、標準の周囲温度および周囲圧力（２５℃、１ａｔｍ）の下で測定して１０ｍＰａ・ｓ以下、好ましくは４ｍＰａ・ｓ以下の絶対粘度を有するように調合されることが好ましい。好ましくは、組成物は１〜４ｍＰａ・ｓの絶対粘度を有する。組成物の粘度は、当該技術分野において既知の任意の標準的粘度計装置、例えばガラス管粘度計または毛管粘度計を使用して測定され得る。

本明細書に記載の組成物は、医学用途において、特に、眼科で使用するため、特に、眼（例えば、涙嚢、下眼瞼内、眼表面または、局所投与のために利用可能にされ得る眼関連の任意の眼組織もしくは解剖学的構造）に対する局所投与において、使用され得る。

本発明の組成物は、涙膜および涙膜脂質層の安定化ならびに眼表面の潤滑化による恩恵を受けるであろう疾患および症状の処置に使用するのに有益であることが判明した。それゆえ、本発明の組成物は、ドライアイ疾患（乾性角結膜炎）および／またはマイボーム腺機能不全（ＭＧＤ）ならびにそれらに関連したそれらの任意の症候の処置に特に適している。

ドライアイ疾患は、乾性角結膜炎としても知られているが、２つの種類、すなわち水分欠乏型ドライアイ疾患と蒸発亢進型ドライアイ疾患とに区別される。これらの症状は必ずしも相互に排他的であるというわけではない。水分欠乏型ドライアイは、典型的にはシェーグレン症候群を患っている患者または涙腺機能不全、涙道閉塞もしくは反射性分泌不全を患っている患者にみられる。 他方、蒸発亢進型ドライアイ疾患は、様々な根本原因を有し、例えばマイボーム腺障害、眼瞼開口障害、まばたき障害または眼表面障害に起因した涙膜の増大した／異常な蒸発喪失に関連している。

ドライアイ疾患の症候としては、例えば、眼の乾燥、掻痒感、ゴロゴロ感、異物感または違和感；痛み、ひりつき、チクチク感または熱感；痒み、まばたきをする必要性の増大、眼精疲労、羞明、霧視、眼組織の赤みおよび炎症、粘液の過剰放出および痂皮形成／凝固、コンタクトレンズ不耐性、ならびに過度の反射流涙が挙げられる。

マイボーム腺機能不全（ＭＧＤ）は、マイボーム腺が十分な油を分泌しない症状、または油性分泌物の質が低いかもしくは異常になっている症状を指す。油腺開口部は、詰まるかまたは閉塞することがあり、その結果として腺から分泌される油が少なくなる。 腺から分泌される油は、粒状（痂皮状）あるいは異常になる可能性があり、眼および眼組織への刺激を引き起こす可能性がある。早期の段階では、患者は無症候であることが多いが、未処置のまま放置されるとＭＧＤはドライアイ症候および眼瞼炎症を引き起こすかまたは悪化させる可能性がある。油腺は厚い分泌物によって遮断される。慢性的に凝固した腺は、最終的には油を分泌できなくなり、それによって涙膜の永久的変化およびドライアイが生じることがある。

マイボーム腺機能不全の症候としては、例えば、乾燥、熱感、痒み、べとつき／痂皮状化、流涙性光感受性、充血眼、違和感、霰粒腫／麦粒腫、または間欠性霧視が挙げられる。

好ましい実施形態では、上記の本発明の組成物は、蒸発亢進型ドライアイ疾患および／またはマイボーム腺機能不全（ＭＧＤ）の局所眼処置、ならびにそれらに関連するいずれか１つの症候または症状の処置または防止のために使用される。別の実施形態において、本明細書に記載の組成物は、ドライアイ疾患に関連する１つ以上の症候を緩和し、かつ眼表面を潤わせるために、眼表面の潤滑剤として使用され得る。

本発明の別の好ましい実施形態では、上記の化合物およびその組成物は、角膜損傷の局所眼処置のために使用される。例えば、上記の化合物および組成物は、角膜びらんなどの角膜損傷の角膜治癒過程を能動的に支援することになる。

さらなる実施形態において、上記の症状（例えば、角膜損傷）および疾患ならびにそれらの関連する症候の処置は、上にも記載したが、それを必要とする患者にＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３とＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とを含む上記の組成物であって例えば約２５ｗｔ％のＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３を含む組成物を有効量投与する方法によって行うことが好ましい。

上記の化合物および組成物の、本発明によるそれらの使用との関連における利点は、眼科用途に特に適したそれらの特性に関係していると考えられる。本発明の化合物の屈折率が水のそれに極めて近いことは、投与時に霧視を生じさせる可能性のある油性キャリア系の眼用組成物とは異なり、投与後に患者の視界に対する影響が全くないかまたは最小限となるであろうことを意味する。概して低い粘度および低い表面張力ならびに、特にこれらの化合物の高い湿潤能および拡散能も、眼の表面に対する投与に際してそれらが迅速に供給されて適合することを確実なものにする。

以下の実施例においてより明らかとなるように、本発明の組成物が生体適合性でありかつ明確な細胞毒性作用を呈しないことが判明した。さらに、これらの組成物は、眼内で十分に耐容性を有し、かつ視力への影響がないことだけでなく、ドライアイ疾患および／またはドライアイ疾患に関連する軽度〜中等度の症候を有する患者の症候の緩和のかたちで眼の潤滑化および涙膜の安定化に関して有益な効果をたらすことも立証された。ドライアイ疾患および／または機能不全マイボーム腺を有する患者は、涙膜中の異常な脂質層につながる可能性のある不透明なより濃いマイバムを発現することが多い。理論に拘泥することは望まないが、本発明の組成物の特徴である化合物の物理化学的属性は、涙膜の脂質層を例えば特定の脂質成分の可溶化によって安定化させる役割、または脂質層の流動性を向上させる役割を果たす可能性があると同時に、眼に対して潤滑化作用をもたらす可能性がある、と考えられる。

さらなる態様において、本発明は、ドライアイ疾患およびそれに関連する任意の症候または症状を処置する方法であって、本発明の組成物を局所的に涙嚢、下眼瞼内、眼表面または眼組織に投与することを含む、方法を提供する。好ましくは、上記組成物は１日あたり４回を上限として眼または眼組織に投与することができる。

さらに、本発明は、上記の組成物のいずれか１つと、上記組成物を保持するための容器とを含むキットを提供する。上記容器は、涙嚢、眼の下眼瞼または眼組織への組成物の局所投与に適合した分注手段、例えば点眼器を含むことが好ましい。

さらなる好ましい実施形態では、分注手段は、８〜１５μＬ、好ましくは約８〜１２μｌ、より好ましくは約１０μｌの体積を有する滴を分注するなどのための寸法を有する点眼器を含む。滴体積を小さくすることによって、眼への正確な投薬を成し遂げることができ、投与後に眼から組成物の相当な部分が過剰量排出されることを回避することができる。

本発明の組成物はさらに、１日あたり４回以下で；好ましくは用量あたり片目につき１滴（体積約８〜１５μＬ）で、眼または眼組織に投与することができる。処置は少なくとも６週間継続され得る。本発明の一実施形態において、組成物は、体積約８〜１５μＬ、好ましくは体積約１０μｌの１滴の用量で、各眼に対して１日あたり３〜４回投与する。

ＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３（２−パーフルオロヘキシル−オクタン、Ｃ_１４Ｆ_１３Ｈ_１７）の調製
化合物ＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３は、次のとおりに調製され得る：ラジカル開始剤の存在下でのヨウ化パーフルオロヘキシルを１−オクテンとラジカル付加させ（ここで、ヨウ化パーフルオロヘキシルを１−オクテンおよびＡＩＢＮとしてのラジカル開始剤と混合し、得られた溶液を８０度で３０分間維持し、そして冷却する）、その後、結果として生じるヨウ素付加物のヒドリド（すなわちＬｉＡＬＨ４）によるかまたは水素化（すなわち、Ｐｄ／Ｃなどの触媒の存在下での触媒的水素化）により還元して２−パーフルオロヘキシル−オクタンを形成し、その後、分留により精製する。
ＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３： １Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３， ４００ ＭＨｚ）： ２．１７−２．３３ （ｍ， １Ｈ， ＣＨ）， １．６７−１．７７ （ｍ， ２Ｈ， ＣＨ_２）， １．２５−１．４０ （ｍ， ８Ｈ， ＣＨ_２）， １．１５ （ｄ， ３Ｈ， ＣＨ_３）， ０．９ （ｔ， ３Ｈ， ＣＨ_３）

試験管内での細胞毒性試験
１．３ｗｔ％のＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３と９５．８ｗｔ％のＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３とを含む組成物の細胞毒性を、動物実験との良好な相関および高い感度で細胞毒作用または壊死作用を予測する細胞増殖阻害試験によって評価した。

撹拌下で約２４時間かけて組成物を細胞培養液（１０％のＦＢＳを補充したＤＭＥＭ）で抽出した次いで、結果として得られた抽出物をマウス細胞株Ｌ９２９細胞と共に６８〜７２時間インキュベートし、その後、細胞毒性の尺度としてＢＣＡ（ビシンコニン酸）試験を用いてタンパク質含有量を分析した。細胞増殖の阻害または細胞溶解は認められなかった。

２３．７ｗｔ％のＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３と約７５．６ｗｔ％のＦ６Ｈ８とを含む組成物について同様に試験管内での細胞毒性試験を行った。

涙膜分析研究
９８．３ｗｔ％のＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３と１．２ｗｔ％のＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とを含む組成物を、軽度〜中等度の蒸発亢進型ドライアイ疾患を有する患者における観察研究において試験した。１滴あたり約１０μｌを涙嚢内に分注するように寸法決めされた点眼器の備わった５ｍｌ瓶の中に無色透明の液体組成物を供給した。コンタクトレンズを装着している患者は研究から外した。インフォームドコンセントが得られた後、患者は、３０〜４０μｌの１日用量に換算して３〜４滴を毎日両眼に適用するよう勧められた。患者は５〜７週間後に経過観察のために戻った。ベースライン時、および５〜７週目の経過観察のための訪問の時に、２９人の患者の臨床データを収集した。

ａ） 涙膜分析
シルマーＩおよびＴＦＢＵＴにおける増加にみることができるとおり、研究期間を経て涙膜流体および涙膜安定性は改善された。遡及的統計解析はこの観察結果を裏付けている、というのも、ベースライン時と経過観察時とでのＴＦＢＵＴの差が非常に顕著であるからである（対になった両側ｔ検定：ｐ＝０．００２６（右眼）およびｐ＝０．０００６（左眼））。

主観的なドライアイ質問紙票（眼表面疾患指数、ＯＳＤＩ）からは、経過観察時のより低いスコアおよび遡及的統計解析（対になった両側ｔ検定：ｐ＝０．０００１）から分かるとおり、９８．３ｗｔ％のＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３と１．２ｗｔ％のＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とを含む組成物を５〜７週の期間にわたって使用した後に患者の主観的な症候の重度が減少したことが明らかとなった。

ｂ） 角膜染色（オックスフォード採点方式）
角膜フルオレセイン染色は、角膜損傷（細胞間接合の喪失）の指標である。ベースライン時に評価１または２と診断された患者の数が経過観察時に評価０へと移っていることから分かるように、データは処置５〜７週間後での角膜損傷の軽減を指し示している。損傷の初期レベル（ｉｎｔｉａｌ ｌｅｖｅｌ）に対するこの差は、ウィルコクソンの符号順位検定：ｐ＝０．００１３（右眼）およびｐ＝０．００４１（左眼）で示されているとおり統計学的に顕著である。

ｃ） 医師による症候評価
患者は、ベースライン時と経過観察のための訪問時との両方において、典型的なドライアイ症候を現在患っているか否かを医者から質問された。下表から分かるように、５〜７週間の処置の後にはＤＥＤ関連の症候の数がより少なく報告された。

ｄ） マイバム分泌分析
健常な眼ではマイバムはマイボーム腺から透明液体として分泌される。より不透明なより濃いマイバムは、マイボーム腺の機能不全の指標である。ベースライン時と経過観察のための訪問時との両方において、患者のマイバムを記述的に検査した。得られたデータによれば、マイバムの質は数々の事例において改善した。７つの事例において、処置は、表現できるマイバムの低減をもたらした（透明なマイバムから無へと変化した）。

ｅ） 安全性パラメータ
視力または眼圧のどちらにおいても変化は見られず、９８．３ｗｔ％のＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３と１．２ｗｔ％のＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とを含む組成物の５〜７週間にわたる使用が安全であり、これらの眼科パラメータに影響を与えないということが指し示された。

示差走査熱量測定
示差走査熱力測定（ＤＳＣ１、Ｍｅｔｔｌｅｒ Ｔｏｌｅｄｏ、Ｇｒｅｉｆｅｎｓｅｅ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を用いてＣＦ_３（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３との混合物の構造および相挙動を評価する。ＤＳＣは、１℃／分の加熱速度での昇温走査による遷移に関するデータを得るために採用した。密閉された標準的なアルミニウム坩堝（４０μｌ、Ｍｅｔｔｌｅｒ Ｔｏｌｅｄｏ）を使用した。

ＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３（Ｆ６Ｈ８）の混合物中のＣＦ_３（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３の存在は、融解温度の著しい低下をもたらした。融解エンタルピーも減少しており、それは、この半フッ素化アルカンが結晶性でないことを示唆している。そのような差異は、眼に対するこの化合物の涙膜代用物または潤滑剤としての適用に関して；例えば、涙膜脂質層と混ざり合って涙膜脂質層を調節するこの化合物の能力に関して、有益な効果を有するであろう。しかもそのような効果は、本発明の眼用組成物中のこの化合物の量を変化させることによって好適に調節することができる。

２３．７４ｗｔ％のＣＦ_３（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３およびＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３と、テトラデカン（Ｃ１４）との一連の混合物のＤＳＣ測定も行った。昇温走査（加熱速度０．２、０．５および１℃／分）により遷移時のデータを得た。３つの測定結果の平均を使用して開始温度を決定する一方、０℃／分の加熱速度への外挿を用いて終了温度を決定した。テトラデカンと純粋なＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３との混合物と比較した場合に融解エンタルピーの減少が観察され、テトラデカンの一部がＣＦ_３（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３の液体画分に溶解すること、およびこの化合物がＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３よりも強い可溶化能を有することが示唆された。

屈折率および蒸発時間
半フッ素化アルカンＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３とＣＦ_３（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３との混合物の蒸発時間を評価した。各混合物の体積１０μＬの滴を室温のガラス表面に置いた。蒸発までの時間をビデオ監視により記録した。

半フッ素化アルカンＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３の割合の増加は混合物の蒸発時間を減少させることが認められた（図１）。混合物中のこの半フッ素化アルカンの量を変化させることによって、組成物を、例えば眼表面での組成物の残留時間の延長または短縮に関して、意図される眼科での使用の要件に適合させて微調節することは、妥当であり得る。

混合物の屈折率も測定した。局所適用される眼用組成物の場合、組成物の屈折率は、眼およびレンズの屈折率に対して好ましくは同程度とするかまたは適合させるべきであり、例えば、生理学的涙流体の屈折率にできるだけ近くせねばならない。組成物の屈折率が同程度でないと、眼の表面に適用されたときに患者は、かすみ、または視覚障害を被り得る。半フッ素化アルカンＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３の量は屈折率に対して影響を与えることが認められる（２−パーフルオロヘキシルオクタンの含有量の増加に伴う屈折率値の増加を描写している図２を参照）。混合物中のこの半フッ素化アルカンの量を変化させることによって、組成物を、意図される眼科での使用の要件に適合させること、例えば、涙流体組成および屈折率が眼の症状および／または年齢のために変化した患者に適合させることは、妥当であり得る。

生体外での眼刺激試験（ＥＶＥＩＴ）
Ｍ．Ｆｒｅｎｔｓら、Ａｌｔｅｒｎ．ｔｏ Ｌａｂ．Ａｎｉｍ．、２００８（３６）ｐ２５−３２；およびＮ．Ｓｃｈｒａｇｅら、Ｇｒａｅｆｅｓ Ａｒｃｈ Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ ２０１２（２５０）、１３３０−１３４０）に記載のあるものと同様の生体外での眼刺激試験（ＥＶＥＩＴ）を用い、ヒアルロン酸（ＨＹＬＯ−ＣＯＭＯＤ（登録商標）を参照とし、０．０１％のＢＡＣ（塩化ベンザルコニウム）を陽性対照として、ＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３を含む２つの組成物、すなわち半フッ素化アルカンＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３とＣＦ_３（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３との混合物から構成される組成物（組成物ＡはＣＦ_３（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３を０．１７ｗｔ％含み、組成物ＢはＣＦ_３（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３を６４ｗｔ％含む）について角膜治癒過程に関する比較を行った。

方法．ウサギ角膜を入手し、栄養のためにアール塩およびＨＥＰＥＳ緩衝剤を含有する無血清最小必須培地（イーグルＭＥＭ）で緩く満たされた人工前眼房内に配置した。眼の生理学的状態を模倣すべく培地を微小ポンプで定常的に補充した。培養房は、ＣＯ２補充無しで通常の空気および相対湿度＞９５％の下で３２℃に保持した。１試験物質あたり５つの角膜（ｎ＝５）を使用した（２つの角膜（ｎ＝２）を試験した陽性対照は除く）。

培養房における１２時間の安定化の後に角膜を顕微鏡で評価し、無傷の上皮組織を有しかつ混濁のない角膜を選択した。選択した角膜の表面に角膜ドリルで４つの小さい擦り傷（２．３〜４．３ｍｍ^２）をつけた。全ての欠陥をフルオレセインナトリウム染色（０．１７％水溶液）および顕微鏡により監視した。

試験物質を、角膜びらんの誘導から１時間後に投与し、さらに、毎日６回角膜の頂部に適用した（４時間ごとに３０〜５０μＬ）。連続吸引状態のソフトチップカニューレを培養チャンバ内の角強膜領域の最下部に配置して過剰な流体を除去した。適用の３日後に実験を終了した。位相差顕微鏡一体型カメラ（Ｚ１６ ＡＰＯ顕微鏡（Ｗｅｔｚｌａｒ、ＤＥ）に搭載されたＫＹ−Ｆ１０３０Ｕ、ＪＶＣ、（Ｂａｄ Ｖｉｌｂｅｌ、ＤＥ））を使用して角膜治癒過程の記録を作成するために毎日、角膜の生体顕微鏡画像を撮った。黄緑色の蛍光によって上皮血管の領域を指し示すフルオレセインナトリウム染色（０．１７％水溶液）により、全ての欠陥を監視した。顕微鏡のソフトウェアツール（ＤＩＳＫＵＳ）を使用してびらんの大きさを決定した。３日目の最後に実験を終了し、全ての角膜を３．７％のホルムアルデヒド中に固定し、顕微鏡評価のためにヘマトキシリン−エオシン染料で染色した。角膜の代謝活性を監視するために、前眼房から排出された培地におけるグルコースおよび乳酸塩の濃度を測光法で定量した。

結果．標準対照ヒアルロン酸組成物（ＨＹＬＯ−ＣＯＭＯＤ（登録商標）と比較して半フッ素化アルカンの混合物（上で言及した組成物ＡおよびＢ）はどちらも、角膜びらんの誘導後の角膜治癒過程に関して同程度の有望な効果を有することが認められた。

角膜びらんの大きさの測定結果／平均ｍｍ^２（ＳＤ）

３日目の組織学的所見

組成物の総重量を基準として６４ｗｔ％の半フッ素化アルカンＣＦ_３（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３を含む組成物Ｂと、組成物Ａとでは、有望な角膜治癒に関して顕著な差異は示されなかった。どちらの組成物でも、機械的に誘導された上皮びらんは基準組成物に関して著しく軽減され、処置の２日後には実質的に存在していないことが判明した。図３は、試験した組成物、参照および陽性対照に関して０〜３日間のＥＶＥＩＴ実験における角膜びらんの大きさの測定結果を描写する。

上表に記したとおり、３日目の実験の終了後における角膜の断面の顕微鏡による組織学的検査からは、組成物Ａ、Ｂおよび参照ＨＹＬＯ−ＣＯＭＯＤ（登録商標）で処置された角膜には著しく残存する欠陥または差異がなかったことが明らかとなった。

さらに、グルコース／乳酸塩測定により示される代謝活性に基づく角膜毒性はこれらの組成物において認められなかった。

大いに対照的なことに、０．０１％の保存剤ＢＡＣを含む陽性対照では、３日間の実験を通して、誘導された上皮病変の漸増が認められた。

Claims (15)

1. ＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３とＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とを含む眼科用組成物。
2. 少なくとも８０ｗｔ％のＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３を含む、請求項１に記載の眼科用組成物。
3. ２５ｗｔ％以下のＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３を含む、請求項１に記載の眼科用組成物。
4. ９７ｗｔ％のＣＦ_３（ＣＦ_２）_５（ＣＨ_２）_７ＣＨ_３と、３ｗｔ％以下のＣＦ_３−（ＣＦ_２）_５−ＣＨ（ＣＨ_３）−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３とを含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
5. 透明な液体溶液として調合されている、請求項１〜４のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
6. （ａ）ポリマー、
   （ｂ）過フッ素化化合物、および／または
   （ｃ）溶解した生理活性成分
   を実質的に含まない、請求項１〜５のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
7. 周囲温度および周囲圧力で１０ｍＰａ・ｓ以下の絶対粘度を有する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
8. 医薬として使用するための、請求項１〜７のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
9. 局所的に涙嚢、下眼瞼内、眼表面または眼組織に投与される、請求項８に記載の眼科用組成物。
10. １日あたり４回以下で前記組成物を投与することを含む、請求項９に記載の眼科用組成物。
11. 乾性角結膜炎および／もしくはマイボーム腺機能不全またはそれらに関連した症候もしくは症状の処置に使用するための、請求項８〜１０のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
12. 角膜損傷の処置に使用するための、請求項８〜１１のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
13. 眼表面の潤滑剤として使用するための、請求項８〜１１のいずれか１項に記載の眼科用組成物。
14. 請求項１〜１３のいずれか１項に記載の眼科用組成物と、前記組成物を保持するための容器とを含むキットであって、前記容器が、涙嚢、下眼瞼内、眼表面または眼組織への前記組成物の局所投与に適合した分注手段を備えている、キット。
15. 前記分注手段が、８〜１５μＬの体積を有する滴を分注するなどのための点眼器寸法を備えている、請求項１４に記載のキット。