BRPI0614084A2

BRPI0614084A2 - composição estável de emulsão de óleo-em-água de propofol, administrável por via intranovesa; e processo de preparação de uma composição

Info

Publication number: BRPI0614084A2
Application number: BRPI0614084-0A
Authority: BR
Inventors: Gautam Vinod Daftary; Srikanth Annappa Pai; Girish Narasimha Shanbhag; Sangeeta Hanurmesh Rivankar
Original assignee: Bharat Serums & Vaccines Ltd
Priority date: 2005-08-05
Filing date: 2006-08-04
Publication date: 2011-03-09
Also published as: ATE420625T1; US8759404B2; EP1922060A2; WO2007052288A3; ZA200801227B; JP2009503059A; KR20080043793A; MX2008001746A; EP1922060B1; DE602006004887D1; US20070249730A1; CN101304728A; WO2007052288A2; ES2318802T3; CA2618026A1; AU2006310113A1; EA200800258A1; IL189310A0

Abstract

COMPOSIçAO ESTAVEL DE EMULSAO DE óLEO-EM-AGUA DE PROPOFOL, ADMINISTRáVEL POR VIA INTRANOVESA; E PROCESSO DE PREPARAçãO DE UMA COMPOSIçAO A invenção apresenta uma composição estável intravenosa de emulsão de óleo-em-água de propofol com conservantes mistos de baixa toxicidade, que é capaz de suportar contaminação acidental de bactérias e fungos. O sistema conservante empregado compreende éster monoglicerilco de ácido láurico (monolaurina) e um elemento selecionado de (a) ácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éster monoglicerilico (monocaprina); (b) edetato; e (c) ácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éster monoglicerílico (monocaprina) e edetato.

Description

"COMPOSIÇÃO ESTÁVEL DE EMULSÃO DE ÓLEO-EM-ÃGUA DEPROPOFOL, ADMINISTRÁVEL POR VIA INTRANOVESA; E PROCESSO DEPREPARAÇÃO DE UMA COMPOSIÇÃO"

CAMPO DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a composições deemulsão de óleo-em-água de Propofol estáveis paraadministração intravenosa, com eficácia conservante.

FUNDAMENTOS E TÉCNICA ANTERIOR

Propofol é um agente anestésico intravenoso decurta ação, usado para a indução de anestesia geral empacientes adultos e pacientes pediátricos com mais de 3 anosde idade; manutenção de anestesia geral em pacientes adultose pacientes pediátricos com mais de 2 meses de idade; esedação em unidades de terapia intensiva (UTI) para adultosintubados e mecanicamente ventilados. Ampola de 20 mL deemulsão de propofol a 1%.

Os ensaios clínicos iniciais foram em 1977, em umaforma solubilizada em Cremophor EL, mas, devido a reaçõesanafiláticas, foi retirado do mercado. Foi subseqüentementereformulado como uma emulsão aquosa em intralipídio erelançado em 1986 pela AstraZeneca com o nome comercial"Diprivan". A atual preparação é de propofol a 1%solubilizado em óleo de soja a 10% e contém 1,2% defosfolipídio de ovo purificado, 2,25% de glicerol e tem umpH entre 6,0 e 8,5 e um pKa de 11. Diprivan contém EDTA comoum agente antimicrobiano. Formulações genéricas mais novascontêm metabissulfito de sódio ou álcool benzílico.O propofol é aprovado para a indução e manutençãode anestesia em mais de 50 países.

Além da hipotensão e apnéia transitória após asdoses de indução, um dos efeitos colaterais mais freqüentesé a dor ã injeção, particularmente em veias menores. Essador pode ser mitigada por um pré-tratamento ou misturaçãocom lidocaína intravenosa. Formulações alternativas com umamaior proporção de triglicerídeos de cadeia média (emoposição ao Intralipídio) parecem ter menos dor à injeção,possivelmente devido às menores concentrações de propofolaquoso livre (Fonte: Wikipedia).

Injeções de propofol normalmente são preparadaspor diluição de propofol em óleos e, então, formuladas ememulsões do tipo óleo-em-água. As composições do propofolsão incorporadas na fase oleosa e preparadas com emulsões deóleo-em-água para administração intravenosa.

Uma emulsão de propofol/óleo de soja ganhou amplouso para a indução e/ou manutenção de anestesia, para amanutenção de cuidados de anestesia monitorizados e parasedação na Unidade de Terapia Intensiva (UTI). É vantajosapelo fato de que possui tanto um rápido inicio de anestesia,quanto um curto tempo de recuperação. Entretanto, a presençade óleos vegetais e fosfolipidios torna a emulsão altamentepropensa ao risco de crescimento microbiano.

Composições de emulsão de propofol intravenosassão cada vez mais usadas para sedação de pacientesgravemente doentes, particularmente em UTI, onde é infundidacontinuamente. Há infecções nosocômicas (isto é, adquiridasem hospital) observadas muito freqüentemente em pacientes deUTI. Portanto, recomenda-se que os conjuntos de adminis-tração intravenosa sejam trocados freqüentemente, pelo menosa cada 6 ou 12 horas. A infusão continua torna o produtosuscetível ao crescimento microbiano.

Para reduzir o risco de crescimento microbianodescontrolado, foram tentadas adições de vários conservantesem potencial em composições de emulsão de propofol intra-venosas. Verificou-se que alguns dos agentes em potencialcausam instabilidade da emulsão. Outros agentes em potencialforam incapazes de proporcionar o nível de atividadeantimicrobiana buscado. É necessário conservar as composi-ções com conservantes que proporcionem os níveis requeridosde atividade antimicrobiana a uma concentração tão baixaquanto possível, para minimizar o potencial de instabilidadefísica e para minimizar preocupações com toxicidade.

O EP-A-0814787 (publicado em 7 de janeiro de 1998;correspondendo ao US-A-5714520, expedido em 3 de fevereirode 1998) apresenta uma emulsão de óleo-em-água de propofolcontendo um edetato como agente antimicrobiano. A quantidadede edetato é, de preferência, de no máximo 0,1% em peso, masé suficiente para prevenir um aumento de no máximo 10 vezesno crescimento de cada um dentre Staphylococcus aureus (ATCC6538), Escherichia coli (ATCC 8739), Pseudomonas aeruginosa(ATCC 9027) e Candida albicans (ATCC 10231) durante pelomenos 24 horas, conforme medido por um teste em que umasuspensão lavada de cada organismo seja adicionada a umaalíquota separada da dita composição a aproximadamente 50 a250 unidades formadoras de colônia por mL, a uma temperaturana faixa de 20-25°C, incubados nessa faixa de temperatura etestados quanto a contagens viáveis dos ditos organismosapós 24 horas. A formulação atualmente comercializadacompreende 1% p/v de propofol, 10% p/v de óleo de soja, 1,2%p/v de fosfatidios de ovo como emulsif icador, 2,25% deglicerol e 0,0055% p/v de edetato de dissódio, hidróxido desódio e água para injeção.

Demonstrou-se que o edetato retarda, mas nãoprevine, o inicio do crescimento microbiano em emulsões depropofol (veja WO-A-OO/24376, infra). Composições de emulsãode propofol precisam ser diluídas até 5 vezes (1:4) parainfusão de longo prazo. Com a diluição, a concentração deedetato fica reduzida a 0,0011%. Apenas edetato se mostraineficaz na prevenção de um aumento de no máximo 10 vezes nocrescimento de amplo espectro de micróbios a concentraçõesde 0,0025% e abaixo (veja US-A-6028108; infra).

O WO-A-99/39696 (publicado em 12 de agosto de1999; correspondendo ao US-A-6469069, expedido em 22 deoutubro de 2002) apresenta uma emulsão de óleo-em-água depropofol contendo um sulfito como agente antimicrobiano. Aquantidade de sulfito está, de preferência, na faixa de0, 0075% a 0,66% em peso e é suficiente para prevenir umaumento de no máximo 10 vezes no crescimento de cada umdentre Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Escherichia coli(ATCC 8739), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 9027) e Candidaalbicans (ATCC 10231) durante pelo menos 24 horas, conformemedido por um teste em que uma suspensão lavada de cadaorganismo seja adicionada a uma alíquota separada da ditacomposição a aproximadamente 50 a 250 unidades formadoras decolônia por mL e incubados a uma temperatura na faixa de 30-35°C e testados quanto a contagens viáveis dos ditosorganismos após 24 horas. O uso de sulfito tem doisproblemas, a saber, (a) a estabilidade da emulsão é afetada,e (b) é um material potencialmente tóxico a um nível de doseum pouco maior.

Faz-se referência ao fato de o solvente imiscívelem água da emulsão de óleo-em-água ser um mono-, di- outriglicerídeo. A quantidade preferida de solvente é de 5 a25% em peso.

A infusão de composições preferidas de acordo comWO-A-99/39696/US-A-64 69069 a uma taxa de 50 μg/kg/min,durante 24 horas, resulta em concentrações de sulfito que seaproximam dos níveis tóxicos. Além disso, as composiçõespodem causar reações alérgicas por causa da molécula desulfito, e se relatou que as composições são física equimicamente instáveis por exposição (veja Han J. et al.,International Journal of Pharmaceutics 2001, 215(1-2): 207-202, e Baker MT et al., Anesthesiology 2002, 97(5): 1162-1167).

0 WO-A-00/24376 (publicado em 4 de maio de 2000;correspondendo aos US-A-6140373 e US-A-6140374, ambosexpedidos em 31 de outubro de 2000) apresenta uma emulsão deóleo-em-água de propofol contendo um agente antimicrobianoselecionado de (a) apenas álcool benzílico ou, de preferên-cia, juntamente com edetato de sódio ou benzoato de sódio e(b) cloreto de benzetônio. De preferência, a composiçãocompreende propofol a 0,1-5,0% em peso; óleo vegetal, depreferência óleo de soja, a 1-30% em peso; surfatante, depreferência fosfatidio de ovo, a 0,2 a 2% em peso; glicerola 2-3% em peso; e agente antimicrobiano selecionado de (i)álcool benzilico a 0,0175-0,9% em peso, (ii) álcoolbenzilico a 0,07-0,9% em peso e edetato de sódio a 0,005% empeso, (iii) cloreto de benzetônio a 0,01% a 0,1% em peso e,o mais preferivelmente, (iv) álcool benzilico a 0,0175-0,9%em peso e benzoato de sódio a 0,07% em peso.

Faz-se referência ao fato de o solvente imiscivelem água da emulsão de óleo-em-água ser um éster de um ácidograxo de cadeia média ou longa, exemplificado como um mono-,di- ou tiglicerideo. A quantidade preferida de solvente é de10 a 20% em peso.

Para uso a longo prazo, os agentes antimicrobianoscomo álcool benzilico e cloreto de benzetônio não sãorecomendados, pois são tóxicos.

O WO-A-00/59471 (publicado em 12 de outubro de2000; correspondendo ao US-A-6100302, expedido em 8 deagosto de 2000) apresenta emulsões anestésicas intravenosasde propofol com níveis diminuídos de óleo de soja, gordurasou triglicerídeos. A formulação consiste, de preferência, emmicrogotículas revestidas com fosfolipídio variando de 160 a200 nanômetros de diâmetro. Essas microgotículas contêm umaesfera de propofol dissolvida em um solvente, como óleovegetal, envolvida por uma camada estabilizadora de umfosfolipídio. Relata-se que essa formulação pode propor-cionar com segurança uma sedação durante períodos de tempoprolongados, e que a emulsão a baixa concentração de óleocontendo propofol fornece uma emulsão de óleo-em-águaestável e exibe, inesperadamente, propriedades antimicro-5 bianas comparáveis a emulsões a concentrações de solventeimiscível em água mais elevadas contendo conservantes.

Tipicamente, a composição no relatório de patenteacima compreende de 0,1 a 5% em peso, de preferência de 1% a2% em peso, de propofol. 0 solvente imiscível em água, depreferência óleo de soja, está adequadamente presente em umaquantidade que é de 0,1 a 3% e, mais adequadamente, de 1 a3% em peso da composição. Entretanto, a redução do teor deóleo torna a injeção mais dolorosa, por causa do propofollivre na fase aquosa.

OBJETO

O principal objeto da presente invenção é apresen-tar uma composição farmacêutica de emulsão de óleo-em-águaestável e estéril de propofol para administraçãointravenosa, com um sistema conservante que supere asdesvantagens das composições da técnica anterior.

Mais particularmente, o objeto da presenteinvenção é apresentar composições de emulsão de óleo-em-águade propofol com eficácia conservante, na medida em que hajaum aumento de no máximo 10 vezes, durante pelo menos 24horas, no crescimento de cada um dentre Pseudomonas aerugi-nosa, Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Candidaalbicans após contaminação extrínseca adventícia.SUMÁRIO DA INVENÇÃO

De acordo com a presente invenção, apresenta-seuma composição de emulsão de óleo-em-água de propofolestável, administrável por via intravenosa, compreendendoóleos de triglicerideos; emulsificadores selecionados defosfatidios naturais purificados e/ou modificados; água;agentes modificadores de tonicidade; e um sistema conser-vante compreendendo éster monoglicerilico de ácido láurico(monolaurina) e um elemento selecionado de:

(a) ácido cáprico e/ou seus sais alcalinossolúveis ou seu éster monoglicerilico (monocaprina) ;

(b) edetato; e

(c) ácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solú-veis ou seu éster monoglicerilico (monocaprina) e edetato.

Na composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, o sistema conservante está presente em umaconcentração suficiente para prevenir um aumento de nomáximo 10 vezes no crescimento de cada um dentre Pseudomonasaeruginosa (ATCC 9027), Escherichia coli (ATCC 8739),Staphylococcus aureus (ATCC 6538) e Candida albicans (ATCC10231), durante pelo menos 24 horas, após contaminaçãoextrinseca adventicia.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO:

A. Ingredientes:

Os ingredientes usados nas composições apresen-tadas na presente invenção são aqui descritas. Ingredientescomuns, como água, solução de hidróxido de sódio, não sãodescritas.Propofol: 2,6-bis(1-metiletil)-fenol ou 2,6-diisopropilf enol, CAS No. 2078-54-8; Ci2Hi8O; P.M. 178, 273.Farmacopéia: pode-se usar propofol de acordo com asespecificações da Farmacopéia Européia (Ph. Eur.). 0 teor depropofol é de 0,1 - 2% p/v da composição, de preferência 0,5- 2% p/v, mais preferivelmente de cerca de 1 - 2% p/v e, omais preferivelmente, de cerca de 1% p/v ou cerca de 2% p/vda composição de emulsão.

Óleos de triglicerideos: o óleo de triglicerideo éselecionado de óleos de triglicerideos vegetais e/ou óleosde triglicerideos sintéticos. Óleos de triglicerideosvegetais são óleos vegetais comuns, como óleo de soja, óleode gergelim, óleo de açafroa, azeite de oliva. 0 óleo detriglicerideo sintético é tipicamente fabricado a partir deum óleo vegetal, que seja química e/ou fisicamente modifi-cado e/ou purificado. 0 óleo MCT é um exemplo típico de óleosintético e é obtido a partir do óleo fixo extraído dafração dura e seca do endosperma de Cocos nucifera L. Ahidrólise do óleo fixo, seguida por destilação, fornece osácidos graxos requeridos, que são, então, reesterifiçadospara produzir óleo MCT (triglicerideos de cadeia média), quesão principalmente ésteres de glicerol de ácido capróico(C6), caprílico (C8), cáprico (Ci0) e láurico (Ci2) , em umarazão de aproximadamente 2:55:42:1 (fonte: http://www.pdrhealth.com)

Em geral, o óleo de triglicerideo é de no máximo30% p/v da composição. De preferência, é de 5%-20% p/v dacomposição, mais preferivelmente é de cerca de 10% p/v dacomposição. A presente invenção também pode compreenderqualquer combinação de um ou mais óleos vegetais e/ou óleossintéticos. 0 óleo de soja é o óleo vegetal preferido parauso nas composições da presente invenção. 0 óleo de sojausado nessas composições é, de preferência, refinado,alvejado, desodorizado e, de preferência, livre de metaispesados contaminantes. Prefere-se óleo de soja de acordo comas especificações da Farmacopéia Européia (Ph. Eur.)/Farmacopéia Norte-americana (USP).

Fosfatidios:

Nas composições de emulsões de óleo-em-água dapresente invenção, usa-se fosfatidio purificado e/ou modifi-cado como um emulsificador para a estabilização da emulsãode óleo-em-água. 0 fosfatidio natural preferencialmenteusado é lecitina de ovo purificada ou lecitina de sojapurificada ou uma mistura desses. Mais preferivelmente, ofosfatidio natural usado é lecitina de ovo purificada. Aquantidade do dito fosfatidio natural purificado é de 0,1% -3% p/v, de preferência, é de cerca de 1,2% p/v.

Fosfatidios são bem conhecidos para a formação delipossomos quando hidratados com meios aquosos. Entretanto,não são usados na presente invenção para a formação decomposições lipossomais. São empregados na presente invençãocomo emulsificador e para estabilizar a emulsão.

Agentes modificadores de tonicidade: A composiçãoda presente invenção é tornada isotônica com o sangue porincorporação de um agente modificador de tonicidade adequado,como glicerina, dextrose ou manitol. A glicerina é o agentemodificador de tonicidade preferido.

Conservantes:

O sistema conservante usado na presente invençãocompreende éster monoglicerilico de ácido láurico (monolau-rina) e um elemento selecionado de:

(a) ácido cáprico e/ou seus sais alcalinossolúveis ou seu éster monoglicerilico (monocaprina);

(b) edetato; e

(c) ácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solúveisou seu éster monoglicerilico (monocaprina) e edetato.

Éster Monoglicerilico de Ácido Láurico (Monolaurina)

Quando um dos grupos hidroxila do glicerol éesterificado com ácidos graxos, é chamado de monoacilgli-cerol ou monoglicerideo. Quando um grupo OH em qualquerextremidade da molécula de glicerol é esterificado com ácidoláurico, forma éster 1-monogliceríIico de ácido láurico (1-monolaurina). Quando o grupo OH no meio ou na 2a posição damolécula de glicerol é esterificado com ácido láurico, formaéster 2-monoglicerílico de ácido láurico (2-monolaurina).

Dessas duas monolaurinas, a 1-monolaurina é preferida comoconservante na presente invenção. 0 termo monolaurina,conforme usado neste relatório, refere-se a todos osmonoésteres glicerilicos farmaceuticamente aceitáveis deácido láurico com a fórmula molecular Ci5H30O4 e um pesomolecular de cerca de 273,3 e não inclui monolaurinasetoxiladas ou propoxiladas. monolaurina comercialmentedisponível também é conhecida por outros nomes, como "rac-1-lauroilglicerol", "1-monododecanoil-rac-glicerol", "1-monolauroil-rac-glicerol", "rac-glicerol 1-laurato" e "DL-a-laurina".

Uma mistura de 1 e 2 monoglicerideos ou 2-monogli-cerídeos de ácido láurico também são monolaurinas. A mono-laurina pode conter alguns diglicerideos de ácido láurico. 0grau de pureza da monolaurina não é crucial, deve ser ricaem ácido graxo Ci2 (láurico), mas a presença de pequenasquantidades de ácidos graxos Cio, Ci4 e outros é aceitável.

A monolaurina exibe polimorfismo: forma a, formaβ' e forma β. Relatou-se que têm os pontos de fusão de 44°C,59,5°C e 63°C, respectivamente. A forma de monolaurina usadanesta invenção não é critica para seu uso nesta invenção.

A monolaurina, quando usada em combinação comácido cáprico ou edetato ou tanto ácido cáprico, quantoedetato, atende às exigências de prevenção de um crescimentosignificativo de microorganismos durante pelo menos 24 horasno caso de contaminação extrinseca adventicia, conformeacima mencionado. As exigências das quantidades podem, emcerta medida, depender da natureza da monolaurina usada, ese prefere a 1-monolaurina com relação a isso. Portanto, asquantidades não podem ser definidas com precisão, e aexpressão "cerca de" é prefixada a essas quantidades.

A monolaurina é insolúvel em meios aquosos, mas éaltamente solúvel nos chamados solventes de gorduras, comoclorofórmio, benzeno, etanol ou acetona. O valor de HLB damonolaurina é menor que 10 e, conseqüentemente, só éadequada como um emulsificador ou solubilizador para prepararemulsões de água-em-óleo, e não emulsões de óleo-em-água. Éusada em pequenas quantidades na presente invenção como umconservante, e não como um emulsif icador ou como umsolubilizador.

Em ratos, quando se administra monolaurina por viaoral, a DL50 foi relatada como sendo de cerca de 53.000mg/kg de peso corporal.

Ácido Cáprico:O ácido cáprico é um ácido graxo saturado contendoC10 átomos de carbono naturalmente encontrado em óleos egorduras. 0 ácido cáprico também é conhecido como ácidodecanóico - CAS No. 334-48-5, com a fórmula molecularC10H20O2 e um peso molecular de 172, 27. O ácido cáprico tempropriedades antifúngicas melhores que a monolaurina. A DL50oral em ratos é de mais de 10.000 mg/kg.

Prefere-se o ácido cáprico purificado. Entretanto,a presença de pequenas quantidades de ácidos graxos Cs ou C12ou Ci4 ou outros é aceitável.

Quando usado em composições de propofol, quando opH é ajustado com hidróxido de sódio, pode-se formar o salsódico de ácido cáprico, que é um sal solúvel em águaionizável e age como o ácido cáprico. Alternativamente,caprato de sódio, isto é, o sal sódico de ácido cáprico,também pode ser usado para fornecer a quantidade requeridade ácido cáprico, que também controlará o pH.

Sais de Ácido Cáprico:

Quaisquer sais alcalinos solúveis farmaceutica-mente aceitáveis são utilizáveis. Prefere-se o sal sódico.O sal sódico de ácido cáprico é solúvel em água etem um peso molecular de CH3(CH2)SCOONa e é comumenteconhecido como decanoato de sódio.

Éster Monoglicerilico de Ácido Cáprico (Monocaprina):

Esteres monoglicerilicos de ácido cáprico-monoca-prato (monocaprina) também podem ser usados para atender àsexigências de ácido cáprico, mas o ácido cáprico livre épreferido. A monocaprina é o éster monogliceríIico de ácidocáprico. Quando um grupo hidroxila de glicerol éesterificado com ácido cáprico no grupo 1-hidroxila ou 3-hidroxila, obtém-se 1-monocaprina. O glicerol, quandoesterificado com ácido cáprico no grupo 2-hidroxila doglicerol, gera 2-monocaprina. Embora qualquer monocaprinaseja utilizável nesta invenção, prefere-se a 1-monocaprina.

As quantidades de sais de ácido cáprico ou éstermonoglicerilico de ácido cáprico (monocaprina) são expressascomo ácido cáprico no relatório.

Edetato:

O edetato, sempre que citado neste relatório,inclui ácido etilenodiamina tetraacético e seus derivados. Oedetato de dissódio é o edetato preferido nesta invenção;entretanto, a presença de pequenas quantidades de outrossais, como o sal tetrassódico, é aceitável.

O edetato é um agente quelante de metais e é usadocomo conservante em baixa concentração. Os óleos de trigli-cerideos usados nesta emulsão de propofol estão contaminadoscom quantidades residuais de metais, que desativam osconservantes. O edetato ajuda a quelar os contaminantesmetálicos no óleo e, dessa forma, aumenta a eficiência dosconservantes.

Para aspectos quantitativos, o edetato é expressocomo edetato de dissódio, que tem a fórmula molecularCi0H16N2O8Na2, CAS No. 6381-92-6. A DL50 oral em ratos é de2.000 mg/kg.

A concentração de edetato usada na composição dapresente invenção não é suficiente para torná-lo um conser-vante (veja a patente norte-americana n° 6028108A). Semlimitação a uma teoria, acredita-se que a pequena quantidadede edetato ajude a reforçar a atividade conservante damonolaurina.

B. Composição de propofol:

A composição de emulsão de óleo-em-água de propo-foi, com os ingredientes do conservante usados em combinaçãocom outros ingredientes da composição na presente invenção,tornam a composição suficientemente eficaz na prevenção deum aumento de mais de 10 vezes no crescimento de culturasmicrobianas de Candida albicans ATCC 10231, Pseudomonasaeruginosa ATCC 9027, Escherichia coli ATCC 8739 eStaphylococcus aureus ATCC 6538 durante pelo menos 24 horasapós a incoluação e fornece uma composição estável, adminis-trável por via intravenosa.

As composições da presente invenção também podemser preparadas como um concentrado contendo quantidades maiselevadas de propofol e, então, apropriadamente diluídas, porexemplo, com solução de dextrose.Algumas composições preferidas da presenteinvenção são dadas na Tabela 1.

Tabela 1: Composição de emulsão de óleo-em-água de propofolQuantidade (% p/v)

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*A composição administrável por via intravenosa dainvenção tem um pH de 5-8,5 e, de preferência, 6-8,5,convenientemente ajustado pela presença de uma quantidaderelevante de álcali, por exemplo, hidróxido de sódio. Alter-nativamente, sal sódico de ácido cáprico isoladamente ou emcombinação com álcali também pode ser usado para ajuste dopH.

Deve-se notar que as quantidades de propofol, óleoe emulsificador podem ser variadas dentro dos limites acimaapresentados na descrição dos ingredientes, e que ascombinações dos conservantes são igualmente importantes. Porexemplo, o propofol pode ser de 0,1-2% p/v da composição; oóleo de triglicerideo pode ser de até 30% p/v da composição,e os fosfatidios naturais purificados e/ou modificados podemser de 0,1-3% p/v da composição. Algumas variações utilizá-veis nos ingredientes do sistema conservante em associaçãocom esses outros ingredientes, incluindo agentes modifica-dores de tonicidade, são mostradas na Tabela 2.

C. Composições dos sistemas conservantes

Os sistemas conservantes utilizados nas composi-ções de emulsão de óleo-em-água de propofol da presenteinvenção compreendem éster monoglicerilico de ácido láurico(monolaurina) e um elemento selecionado de:

(b) edetato; e

A concentração dos conservantes individuais nacomposição final variará dependendo da combinação particulardos conservantes empregados. Essas combinações não foramensinadas como sistemas conservantes utilizáveis em emulsãode óleo-em-água de propofol ou quaisquer outras emulsões deóleo-em-água.

Uma quantidade particularmente preferida dosingredientes individuais no sistema conservante da presenteinvenção é resumida na Tabela 2.Tabela 2: Composições de Sistema Conservante(a): Monolaurina + Ácido cáprico; (Edetato de dissódio-nenhum)Quantidades em % p/v da composição de emulsão de propofol final

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(b) : Monolaurina + Edetado de dissódio; (Ácido cáprico-nenhum)Quantidades em % p/v da composição de emulsão de propofol final

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A Tabela 3 mostra algumas composições do sistemaconservante.Tabela 3: Algumas Composições do Sistema ConservanteQuantidades em % p/v da composição de emulsão de propofol final

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Assim, além de variações nas quantidades dosingredientes da emulsão de óleo-em-água de propofol, comopropofol, óleo de triglicerideo, fosfatidio, são muitas asvariações na composição do sistema conservante. Algumasvariações preferidas são:

i) O sistema conservante compreende éster mono-glicerílico de ácido laúrico a 0,001-0,1% p/v e ácidocáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico a0,001%-0,1% p/v da composição de emulsão, e edetato expressocomo nenhum edetato de dissódio.

ii) Outro sistema conservante compreende éstermonoglicerilico de ácido láurico a 0,025-0,1% p/v e ácidocáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis e/ou seu éstermonoglicerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico a0,025%-0,l% p/v e edetato expresso como edetato de dissódioa 0,001%-0,0025% p/v da composição de emulsão.

iii) Outro sistema conservante compreende éstermonoglicerilico de ácido láurico a cerca de 0,05% p/v eácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerílico (monocaprina) expresso como ácido cáprico a0,025%-0,l% p/v e edetato expresso como edetato de dissódioa 0,001%-0,0025% p/v da composição de emulsão.

iv) Outro sistema conservante compreende éstermonoglicerílico de ácido láurico a 0,025-0,1% p/v e ácidocáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerílico (monocaprina) expresso como ácido cáprico acerca de 0, 025% p/v e edetato expresso como edetato dedissódio a 0,001%-0,0025% p/v da composição de emulsão.

v) Outro sistema conservante compreende éstermonoglicerílico de ácido láurico a 0,025-0,1% p/v e ácidocáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerílico (monocaprina) expresso como ácido cáprico acerca de 0,025%-0,l% p/v e edetato expresso como edetato dedissódio a 0,0025% p/v da composição de emulsão.

vi) Outro sistema conservante compreende éstermonoglicerílico de ácido láurico a 0,025-0,1% p/v e ácidocáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerílico (monocaprina) expresso como ácido cáprico acerca de 0,025%-0,l% p/v e edetato expresso como edetato dedissódio a 0,001% p/v da composição de emulsão.

Pode-se notar que, no sistema conservante (c),todos os três ingredientes representados por monolaurina,ácido cáprico e edetato estão presentes conforme acimacitado. No sistema conservante (a), o edetato está ausentee, no sistema conservante (b), o ácido cáprico está ausente.D. Processo de preparação da composição de emulsâo

O processo de preparação de uma composição deemulsão de óleo-em-água de propofol, administrável por viaintravenosa, da presente invenção foi estudado para seobservar se diferentes modos de incorporação do sistemaconservante proporcionariam qualquer método vantajoso. Essascombinações são mostradas na Tabela 4. Essa variação deprocesso foi descrita no Exemplo I (abaixo) para uma compo-sição típica de emulsão de óleo-em-água de propofol.

Tabela 4: Modos de incorporação do sistema conservante naemulsão de óleo-em-água

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As composições contendo cada um dos sistemasconservantes acima poderiam ser preparadas por diferentesprocessos, em que o fosfatidio fosse incorporado na faseaquosa ou na fase oleosa ou parcialmente na fase aquosa eparcialmente na fase oleosa.

No processo da presente invenção, o agentemodificador de tonicidade é incorporado na fase aquosa. O pHda fase aquosa é adequadamente ajustado antes da adição dafase oleosa a ela. Alternativamente, o pH da emulsão éadequadamente ajustado antes da homogeneização ou após ahomogeneização.

Também é possível adicionar a mistura de sistemaconservante a uma emulsão pré-formada. Nesses casos, a mono-laurina é dispersada em uma pequena quantidade de água (1 em10) a 55°C-60°C. Essa é bem misturada e adicionada à emulsãopré-formada sob agitação. O ácido cáprico é, de preferência,adicionado a uma emulsão pré-formada sob agitação depois deser derretido em um banho de água (30°C-35°C).

Nos aspectos de processo acima mencionados, épreferível que a homogeneização seja realizada a um tamanhode glóbulo médio de menos de 500 nanômetros; a composiçãohomogeneizada seja filtrada; o filtrado resultante sejacolocado em recipientes, seguido por cobertura com uma camadade nitrogênio e fechamento dos recipientes cheios; e o ditofiltrado nos recipientes fechados seja esterilizado emautoclave.

Um processo para a preparação das composições deemulsão de óleo-em-água de propofol da presente invenção édescrito abaixo:

i) preparação de uma fase oleosa em óleo detriglicerídeo mantida a cerca de 75°C pela adição depropofol;

ii) preparação de uma fase aquosa em água a cercade 70°C por adição de glicerol e solução de hidróxido desódio, para torná-la alcalina;

iii) adição do emulsificador e ingredientes indi-viduais do sistema conservante de acordo com a reivindicação1 na fase oleosa total ou parcialmente e adição do restantena fase aquosa;

iv) adição da dita fase oleosa obtida na etapa i)à dita fase aquosa obtida na etapa ii) sob agitação, paraproduzir uma emulsão grosseira;ν) homogeneização da dita emulsão grosseiraobtida na etapa iv) até um tamanho de glóbulo médio menorque 500 nanômetros;

vi) filtração da dita composição obtida ao términoda etapa v);

vii) colocação do dito filtrado obtido ao términoda etapa vi) em recipientes, como frascos, ampolas, sob umacamada de nitrogênio e fechamento dos recipientes cheios;

viii) esterilização do dito filtrado nos ditosrecipientes fechados em autoclave.

Outro processo para a preparação das composiçõesde emulsão de óleo-em-água de propofol da presente invençãoé descrito abaixo:

i) preparação de uma fase oleosa em óleo de tri-glicerideo mantida a cerca de 75°C por dissolução do propor-fol e emulsificador;

ii) preparação de uma fase aquosa em água a cercade 70°C por adição de glicerol e solução de hidróxido desódio;

iii) adição da dita fase oleosa obtida na etapa i)à dita fase aquosa obtida na etapa ii) sob agitação, paraproduzir uma emulsão grosseira;

iv) homogeneização da dita emulsão grosseiraobtida na etapa iii) até um tamanho de glóbulo médio menorque 500 nanômetros;

v) adição do sistema conservante escolhido deacordo com qualquer reivindicação precedente;vi) filtração da dita composição obtida ao términoda etapa v);

EXEMPLOS

A invenção será agora ilustrada por meio deexemplos. Os exemplos são apenas a titulo de ilustração e,de forma alguma, restringem o âmbito da invenção.

Materiais e equipamento usados nos exemplos:

O propofol está de acordo com as especificações daFarmacopéia Européia (Ph. Eur.), a glicerina, hidróxido desódio e água para injeção estão de acordo com a FarmacopéiaIndiana (I.P.)/Ph. Eur. O óleo de soja está de acordo com asespecificações da Ph. Eur./U.S.P. A lecitina de ovo puri-ficada (chamada de lecitina de ovo nos exemplos) é fabricadapela M/s.Lipoid. A monolaurina é uma mistura racêmica obtidana Sigma/M/s.Lipoid. 0 ácido cáprico é obtido na Sigma. 0decanoato de sódio é obtido na Sigma. 0 edetato de dissódiousado está de acordo com as especificações da farmacopéia. Amisturação a alta velocidade foi realizada usando-se umagitador laboratorial Remi. As emulsões foram homogeneizadasusando-se um homogeneizador APV de alta pressão. 0 tamanhoda batelada das composições de emulsão de óleo-em-água depropofol ilustradas nos exemplos é de quantidades de 300 mL.Exemplos IA, IB, IC e IP: Composições de emulsãode óleo-em-água de propofol contendo os conservantesmonolaurina e ácido cáprico.

A composição do Exemplo I conforme mostrada naTabela 5 foi preparada por 4 processos diferentes como

Exemplos IA, IB, IC e ID.

Tabela 5: Composição do Exemplo I

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*para ajuste do pH

Exemplo IA:

Preparação da fase oleosa: O óleo de soja foiaquecido a 70-75°C, o ácido cáprico e o propofol foram adi-cionados e misturados.

Preparação da fase aquosa: A água para injeção,adicionar glicerina, seguida por monolaurina e agitar atédissolver. A lecitina de ovo purificada foi adicionada edispersada na fase aquosa. O pH foi, então, ajustado a 10,5com solução de hidróxido de sódio.

Emulsificação: A fase oleosa foi adicionada à faseaquosa com misturação e agitada a alta velocidade durantecerca de 10 minutos, para se obter uma emulsão grosseira.A emulsão grosseira foi, então, homogeneizada, e otamanho de glóbulo médio obtido era menor que 500 nanô-metros.

A emulsão foi filtrada, colocada em 7frascosU.S.P. Tipo I e fechada após cobertura com uma camada denitrogê-nio. Os frascos foram, então, esterilizados emautoclave.

Exemplo IB:

Similar ao Exemplo IA. Entretanto, a lecitina deovo purificada foi adicionada na fase oleosa.

Exemplo IC:

Similar ao Exemplo IA. Entretanto, metade daquantidade de lecitina de ovo purificada foi adicionada nafase oleosa, e metade da quantidade foi adicionada na faseaquosa.

Exemplo IP:

Similar ao Exemplo IA. Entretanto, a monolaurinafoi dissolvida na fase oleosa, e o ácido cáprico foidissolvido na fase aquosa.

Exemplo IIA:

Amostras dos Exemplos IA, IB, IC e ID foramexaminadas quanto ao tamanho globular, e os teores depropofol e de produtos de degradação pelos métodos dadosabaixo:

1. Tamanho de glóbulo: O tamanho de glóbulo édeterminado usando-se o instrumento N4-Plus da CoulterCounter.2. Teores de propofol e de produtos de degradação:

Os teores de propofol e de produtos de degradação foramdeterminados por HPLC. Os detalhes são os seguintes:

Coluna - Hypersil ODS

Detetor - Detetor ultravioleta

Comprimento de onda de detecção - 270 nm

Fase móvel-60 : 15 : 25 de acetonitrila : metanol: tampão fosfato de potássio a 10 mM

Concentração da amostra - 0,2 mg/mL

Taxa de fluxo - 1 mL/min

Exemplo IIB:

As composições dos Exemplos IA, IB, IC e ID foramanalisadas, e os dados analíticos das composições obtidossão mostrados na Tabela 6.

Tabela 6 - Exemplo I

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LOB - Líquido opaco branco.

As composições dos Exemplos IA, IB, IC e ID foramtestadas para se determinar a atividade conservante usando-se o procedimento descrito no Exemplo III.

Exemplo III: Determinação da atividade conservante deamostras dos Exemplos IA, IB, IC e IP.

Procedimento para determinação da eficácia conservanteAproximadamente 50 a 250 unidades formadoras decolônias (ufc) por mL de cada um de Candida albicans ATCC10231, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Escherichia coliATCC 8739 e Staphylococcus aureus ATCC 6538, as quatroculturas de organismos U.S.P. padrões de acordo com o "Testede Eficácia Antimicrobiana", foram adicionadas a umaalíquota separada do produto e incubadas a 22 ± 2 0C (paraculturas fúngicas) e 32°C ± 2°C (para culturas bacterianas).

As contagens viáveis dos organismos de teste foram deter-minadas após 24 horas e 48 horas.

Método de Determinação da Eficácia Conservante

Para Cultura Fúngica

1. Inocular as amostras de teste com 0,1 mL deuma suspensão diluída a 1:103 de cultura padrão de C.albicans, de modo que as amostras de teste inoculadascontenham de 50 a 250 ufc/mL.

2. Incubar as amostras de teste durante 24 horasa 22°C ± 2°C.

3. Determinar a densidade celular inoculada nasamostras de teste pelo método de espalhamento pela superfície.

4. Depois de uma incubação de 24 horas dasamostras de teste, realizar 3 diluições seriadas de 10 vezesdas amostras de teste.

5. Espalhar pela superfície 0,1 mL das amostrasde teste (não diluídas) juntamente com os 3 tubos dediluições seriadas de dez vezes sobre placas de Petriestéreis de ágar dextrose Sabouraud.6. Incubar as placas de Petri durante 48 horas a 22°C ± 2°C.

7. Contar o número de colônias por placa edeterminar a densidade celular nas amostras de teste (após 24 horas de inoculação).

8. Da mesma forma, após 4 8 horas de incubaçãodas amostras de teste, realizar 3 diluições seriadas de dezvezes das amostras de teste, espalhar'pela superfície 0,1 mLdas amostras de teste sobre placas de Petri estéreis de ágardextrose Sabouraud, incubar durante 48 horas a 22°C ± 2°C edeterminar a densidade celular nas amostras de teste (após 48 horas de inoculação).

Um aumento de no máximo dez vezes nas contagenscelulares nas amostras de teste indica eficácia conservantedas amostras de teste.

Método de Determinação da Eficácia Conservante

Para Culturas Bacterianas

1. Inocular as amostras de teste com 0,1 mL deuma suspensão diluída a 1:103, de modo que as amostras deteste inoculadas contenham de 50 a 250 ufc/mL.

2. Incubar as amostras de teste durante 24 horasa 32°C ± 2°C.

3. Determinar a densidade celular inoculada nasamostras de teste pelo método de espalhamento pelasuperfície.

5. Espalhar pela superfície 0,1 mL das amostrasde teste (não diluídas) juntamente com os 3 tubos dediluições seriadas de dez vezes sobre placas de Petriestéreis de ágar soja-caseína.

6. Incubar as placas de Petri durante 24 horas a-320C ± 20C.

7. Contar o número de colônias por placa edeterminar a densidade celular nas amostras de teste (após-24 horas de inoculação).

8. Da mesma forma, após 48 horas de incubaçãodas amostras de teste, realizar 3 diluições seriadas de dezvezes das amostras de teste, espalhar pela superfície 0,1 mLdas amostras de teste sobre placas de Petri estéreis de ágarsoja-caseína, incubar durante 24 horas a 32°C ± 2°C edeterminar a densidade celular nas amostras de teste (após-48 horas de inoculação).

Eficácia do sistema conservante testado: Ascomposições dos Exemplos IA, IB, IC e ID mostraram um cres-cimento de no máximo 10 vezes ao término de 24 horas.

Exemplos IV - IX

As composições dos Exemplos IV - IX são dadas naTabela 7.

Tabela 7: Composições de emulsão de óleo-em-água de propofolQuantidade/100 Ml

<table>table see original document page 32</column></row><table><table>table see original document page 33</column></row><table>

*para ajustar o pH em 6-8,5

Exemplo IV:

Preparação da fase oleosa: 0 óleo de soja foiaquecido a 70-75°C, o ácido cáprico e o propofol foramadicionados e misturados.

Preparação da fase aquosa: A água para injeção a65-70°C, adicionou-se glicerina, seguida por monolaurina, ese agitou até dissolver. A lecitina de ovo purificada foiadicionada e dispersada na fase aquosa. 0 pH foi, então,ajustado a 10,5 com solução de hidróxido de sódio.

Emulsificação: A fase oleosa foi adicionada à faseaquosa sob agitação e misturada a alta velocidade durantecerca de 15 minutos para se obter uma emulsão grosseira. Aemulsão grosseira foi, então, homogeneizada para se obter otamanho de glóbulo médio de menos de 500 nanômetros.

A emulsão foi filtrada, colocada em frascos U.S.P.

Tipo I e fechada após cobertura com uma camada denitrogênio. Os frascos foram, então, esterilizados emautoclave.

Na análise, o produto tinha a seguinte composição:

1. Teor de propofol - 10,05 mg/mL2. Teor de monolaurina - 0,47 mg/mL

3. Teor de ácido cáprico - 0,2 6 mg/mL

4. pH - 7,05

5. Tamanho de glóbulo médio - 190 nm

Exemplo V

Preparação da fase oleosa: O óleo de soja foiaquecido a 70-75°C, a monolaurina e o propofol foramadicionados e misturados.

Preparação da fase aquosa: A água para injeção a65-70°C, adicionou-se edetato de dissódio, seguido porglicerina, e se agitou até dissolver. A lecitina de ovopurificada foi adicionada e dispersada na fase aquosa. O pHfoi, então, ajustado a 10,6 com solução de hidróxido desódio.

Emulsificação: A fase oleosa foi adicionada à faseaquosa sob agitação e misturada a alta velocidade durantecerca de 15 minutos para se obter uma emulsão grosseira.

A emulsão grosseira foi, então, homogeneizada parase obter o tamanho de glóbulo médio de menos de 500nanômetros.

A emulsão foi filtrada, colocada em frascos U.S.P.Tipo I e fechada após cobertura com uma camada denitrogênio. Os frascos foram, então, esterilizados emautoclave.

Exemplo VI

Preparação da fase oleosa: O óleo de soja foiaquecido a 70-75°C, a monolaurina e o propofol foram adicio-nados e misturados.Preparação da fase aquosa: A água para injeção a65-70°C, adicionou-se edetato de dissódio, seguida porglicerina, e se agitou até dissolver. A lecitina de ovopurificada foi adicionada e dispersada na fase aquosa. 0 pHfoi, então, ajustado a 10,6 com solução de hidróxido desódio.

A emulsão foi filtrada, colocada em frascos U.S.P.Tipo I e fechada após cobertura com uma camada de nitrogênio.Os frascos foram, então, esterilizados em autoclave.

Exemplo VII

Preparação de fase oleosa: O óleo de soja foiaquecido a 70-75°C, o ácido cáprico e metade da quantidadede monolaurina, juntamente com o propofol, foram adicionadose misturados. Adicionou-se metade da quantidade de lecitinade ovo, e se misturou bem.

Preparação da fase aquosa: A água para injeção a65-70°C, adicionou-se glicerina, seguida pela quantidaderestante da monolaurina, e se agitou até dissolver. Adicio-nou-se a metade restante da quantidade de lecitina de ovopurificada, e se dispersou na fase aquosa. 0 pH foi, então,ajustado a 10,5 com solução de hidróxido de sódio.

Na análise, o produto tinha a seguinte composição:

1. Teor de propofol - 9,98 mg/mL

2. Teor de monolaurina - 0,91 mg/mL

3. Teor de ácido cáprico - 0,23 mg/mL

4. pH - 8,02

5. Tamanho de glóbulo médio - 198 nm

Exemplo VIII

Preparação da fase aquosa: A água para injeção a65-70°C, adicionou-se edetato de dissódio, seguido porglicerina e monolaurina, e se agitou até dissolver. Alecitina de ovo purificada foi adicionada e dispersada nafase aquosa. O pH foi, então, ajustado a 10,6 com solução dehidróxido de sódio.

Emulsificação: A fase oleosa foi adicionada à faseaquosa sob agitação e misturada a alta velocidade durantecerca de 15 minutos para se obter uma emulsão grosseira. Aemulsão grosseira foi, então, homogeneizada para se obter otamanho de glóbulo médio de menos de 500 nanômetros.A emulsão foi filtrada, colocada em frascos U.S.P.Tipo I e fechada após cobertura com uma camada denitrogênio. Os frascos foram, então, esterilizados em auto-clave.

Na análise, o produto tinha a seguinte composição:

1. Teor de propofol - 9,8 9 mg/mL

2. Teor de monolaurina - 0,270 mg/mL

3. Teor de ácido cáprico - 0,254 mg/mL

4. pH - 7,96

5. Tamanho de glóbulo médio - 190 nm

Exemplo IX

Preparação da fase oleosa: O propofol foi adi-cionado a óleo de soja mantido a 70-75°C. A lecitina de ovopurificada foi adicionada e misturada.

Preparação da fase aquosa: A água para injeção a65 - 70°C, adicionou-se glicerina. O pH foi, então, ajustadoa 10,5 com solução de hidróxido de sódio.

Emulsificação: A fase oleosa foi adicionada à faseaquosa sob misturação para se obter uma emulsão grosseira. Aemulsão grosseira foi, então, homogeneizada para se obter otamanho de glóbulo médio de menos de 500 nanômetros.

Adição de conservantes: A quantidade requerida demonolaurina foi dispersada em água para injeção a 50°C-55°Ce adicionada à emulsão homogeneizada bruta.

Ácido cáprico foi derretido a 30°C-35°C em umbanho de água, e se adicionou à quantidade requerida àemulsão homogeneizada bruta. Misturou-se bem.A emulsão foi filtrada, colocada em frascos U.S.P.Tipo I e fechada após cobertura com uma camada de nitrogênio.

Os frascos foram, então, esterilizados em autoclave.

Os dados analíticos da composição do Exemplo IXsão apresentados na Tabela 8.

Tabela 8

<table>table see original document page 38</column></row><table>

*Contagem inicial**Contagem ao término de 24 horas

Exemplo X

Amostras do Exemplo IX foram estudadas quanto àestabilidade química e estabilidade da eficácia conservante.

As observações de estabilidade química ao término de 3 mesesa 40°C e 25°C são apresentadas na Tabela 9, juntamente com aeficácia conservante ao término de 10 semanas.Tabela 9

<table>table see original document page 39</column></row><table>

*Contagem inicial**Contagem ao término de 24 horas

NSC - Não sustenta o crescimento

Todos os Exemplos mostram que os produtos dedegradação de propofol estão dentro de limites aceitáveiscom a preparação e armazenamento durante 3 meses. Seguiu-seo método abaixo para analisar os teores de monolaurina eácido cáprico.

Determinação dos teores de monolaurina e ácidocáprico: Os teores de monolaurina e ácido cáprico foramdeterminados por HPLC. Os detalhes são os seguintes:■ Sistema cromatográfico:

Cromatógrafo líquido equipado com detetor RI ecoluna ODS Cosmosil de 150 mm χ 4,6 mm χ 5 μ. Manter atemperatura da coluna em 35°C ± 0,5°C.

■ Fase móvel:

Metano:tampão fosfato a 80:20

■ Taxa de fluxo:

1 mL/min

Exemplo XI: Determinação da atividade conservante

As composições dos Exemplos IV a IX foram testadaspara se determinar a atividade conservante usando-se oprocedimento a seguir.

Aproximadamente 50 a 250 unidades formadoras decolônias (ufc) por mL de cada um de Candida albicans ATCC10231, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Escherichia coliATCC 8739 e Staphylococcus aureus ATCC 6538, as quatroculturas de organismos U.S.P. padrões de acordo com o "Testede Eficácia Antimicrobiana", foram adicionadas a umaalíquota separada do produto e incubadas a 22 ± 2°C. Ascontagens viáveis dos organismos de teste foram determinadasapós 24 horas e 48 horas.

Método de Determinação da Eficácia Conservante Para CulturaFúngica

1. Inocular as amostras de teste individualmentecom 0,1 mL de uma suspensão diluída a 1:103 de culturapadrão de C. albicans, P. aeruginosa, S. aureus e E. coli,de modo que as amostras de teste inoculadas contenham de 50a 250 ufc/mL.2. Incubar as amostras de teste durante 24 horasa 220C ± 20C.

3. Determinar a densidade celular inoculada nasamostras de teste pelo método da contagem de placa.

Para C. albicans:

5. Determinar a densidade celular nas amostrasde teste inoculadas após 24 horas de incubação pelo métodode contagem de placa, incubando placas de Petri de ágardextrose Sabouraud durante 72 horas a 22°C ± 2°C.

6. Da mesma forma, após 48 horas de incubaçãodas amostras de teste, realizar 3 diluições seriadas de dezvezes das amostras de teste e determinar a densidade celularnas amostras de teste após 48 horas de inoculação.

Para P. aeruginosa:

7. Determinar a densidade celular nas amostrasde teste inoculadas após 24 horas de incubação pelo métodode contagem de placa, incubando placas de Petri de ágar sojacaseina durante 48 horas a 32°C ± 2°C.

8. Da mesma forma, após 48 horas de incubaçãodas amostras de teste, realizar 3 diluições seriadas de dezvezes das amostras de teste e determinar a densidade celularnas amostras de teste após 48 horas de inoculação.

Um aumento de no máximo dez vezes nas contagenscelulares nas amostras de teste indica eficácia conservantedas amostras de teste.O estudo realizado indicou que as composições dosExemplos IV a IX mostraram um crescimento de no máximo 10vezes ao término de 24 horas.

Exemplo XII

<table>table see original document page 42</column></row><table>

Segue-se o procedimento do Exemplo IX, exceto naetapa de "Adição de conservantes": em lugar do ácidocáprico, a quantidade pesada de decanoato de sódio édissolvida em água para injeção e adicionada à emulsãohomogeneizada bruta. Na análise, verificou-se que acomposição tem propofol a 9,97 mg/mL, um tamanho de glóbulomédio de 210 nm e decanoato de sódio, expresso como ácidocáprico, a 0,52 mg/mL.

Deve-se entender que a invenção não se restringeaos detalhes específicos acima descritos, mas que inúmerasmodificações e variações podem ser feitas sem sair dosensinamentos da invenção, conforme apresentada no relatório.

VANTAGENS DA INVENÇÃO

As composições de óleo-em-água de propofol com osistema conservante da presente invenção, compreendendoéster monoglicerílico de ácido láurico (monolaurina) e umelemento selecionado de (a) ácido cáprico e/ou seus ésteresou sais; (b) edetato; e (c) ácido cáprico e edetado, nãosustentam o crescimento microbiano no caso de contaminaçãoacidental.

O sistema conservante da presente invenção commais de um conservante é mais seguro que os produtosanteriores, que usam um único conservante, como edetato,metabissulfito de sódio ou álcool benzilico.

Em outro aspecto, as composições da presenteinvenção são mais estáveis do que composições que usamsulfitos, porque os sulfitos tornam o produto física equimicamente instável no armazenamento a longo prazo.Relatou-se que sulfitos sustentam a peroxidação de lipidiosna emulsão de propofol e também causam reações alérgicas naadministração intravenosa. As composições de emulsão deóleo-em-água de propofol são melhores que com o uso desulfitos.

Claims

1. Composição estável de emulsão de óleo-em-águade propofol, administrável por via intravenosa, CARACTERIZADApelo fato de compreender óleos de triglicerideos, emulsi-ficadores selecionados de fosfatidios naturais purificadose/ou modificados, agentes modificadores de tonicidade e umsistema conservante compreendendo éster monoglicerilico deácido láurico (monolaurina) e um elemento selecionado de:(a) ácido cáprico e/ou seus sais alcalinossolúveis ou seu éster monoglicerilico (monocaprina);(b) edetato; e(c) ácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solú-veis ou seu éster monoglicerilico (monocaprina) e edetato.

2. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADApelo fato de que o sistema conservante está presente em umaconcentração suficiente para prevenir um aumento de nomáximo 10 vezes no crescimento de cada um dentre Pseudomonasaeruginosa (ATCC 9027), Escherichia coli (ATCC 8739),Staphylococcus aureus (ATCC 6538) e Candida albicans (ATCC10231) durante pelo menos 24 horas após uma contaminaçãoextrinseca adventicia.

3. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADApelo fato de que o sistema conservante compreende éstermonoglicerilico de ácido láurico a 0,025-0,1% p/v e ácidocáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico a- 0,025%-0,1% ρ/ν e edetato expresso como edetato de dissódioa 0,001%-0,0025% p/v da composição de emulsão.

4. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com a reivindicação 1 ou 3, CARACTERIZADApelo fato de que o sistema conservante compreende éstermonoglicerilico de ácido láurico a 0,5% p/v e ácido cápricoe/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éster monogli-cerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico a 0,025%-- 0,1% p/v e edetato expresso como edetato de dissódio a- 0,001%-0,0025% p/v da composição de emulsão.

5. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com a reivindicação 3, CARACTERIZADApelo fato de que o sistema conservante compreende éstermonoglicerilico de ácido láurico a 0,025-0,1% p/v e ácidocáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico a- 0,025% p/v e edetato expresso como edetato de dissódio a- 0,001%-0,0025% p/v da composição de emulsão.

6. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com a reivindicação 3, CARACTERIZADApelo fato de que o sistema conservante compreende éstermonoglicerilico de ácido láurico a 0,025-0,1% p/v e ácidocáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico a- 0,025%-0,l% p/v e edetato expresso como edetato de dissódioa 0,0025% p/v da composição de emulsão.

7. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com a reivindicação 3, CARACTERIZADApelo fato de que o sistema conservante compreende éstermonoglicerilico de ácido láurico a 0,025-0,1% p/v e ácidocáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico a-0,025%-0,l% p/v e edetato expresso como edetato de dissódioa 0,001% p/v da composição de emulsão.

8. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesprecedentes, CARACTERIZADA pelo fato de que a quantidade depropofol é de 0,l%-2% p/v da composição.

9. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADApelo fato de que a quantidade de propofol é de 0,5%-2% p/v.

10. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com a reivindicação 9, CARACTERIZADApelo fato de que a quantidade de propofol é de cerca de 1% p/v.

11. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADApelo fato de que o dito óleo de triglicerideo é selecionadode óleos vegetais, como óleo de soja, óleo de gergelim, óleode açafroa, azeite de oliva e/ou óleos de triglicerideossintéticos, como óleo de triglicerideo de cadeia média (MCT).

12. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADApelo fato de que a quantidade do dito óleo de triglicerideoé de no máximo 30% p/v da composição.

13. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com a reivindicação 12, CARACTERIZADApelo fato de que a quantidade do dito óleo de triglicerideoé de 5%-20% p/v da composição.

14. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com a reivindicação 13, CARACTERIZADApelo fato de que a quantidade do dito óleo de triglicerideoé de cerca de 10% p/v da composição.

15. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesprecedentes, CARACTERIZADA pelo fato de que o dito fosfatidionatural purificado é lecitina de ovo ou lecitina de soja.

16. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com a reivindicação 15, CARACTERIZADApelo fato de que a quantidade do dito fosfatidio naturalpurificado é de 0,l%-3% p/v.

17. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com a reivindicação 16, CARACTERIZADApelo fato de que a quantidade do dito fosfatidio naturalpurificado é de cerca de 1,2% p/v.

18. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesprecedentes, CARACTERIZADA pelo fato de que o dito agentemodificador de tonicidade é selecionado de glicerina,dextrose e manitol.

19. Composição de emulsão de óleo-em-água depropofol, de acordo com a reivindicação 18, CARACTERIZADApelo fato de que o dito agente modificador de tonicidade éselecionado de glicerina.

20. Composição, de acordo com qualquer uma dasreivindicações precedentes, CARACTERIZADA pelo fato de que adita composição compreende propofol a 0,l%-2% p/v; óleo desoja até 30% p/v; lecitina de ovo purificada a 0,1% - 3%p/v; glicerina a cerca de 2,25% p/v; hidróxido de sódiosuficiente para levar o pH entre 6 e 8,5; e água parainjeção para completar 100% em volume; e o sistemaconservante compreende éster monoglicerilico de ácidoláurico a 0,001%-0,1% p/v; ácido cáprico e/ou seus saisalcalinos solúveis ou seu éster monoglicerilico (monocaprina)expresso como ácido cáprico a 0,001%-0,1% p/v; e nenhumedetato de dissódio.

21. Composição, de acordo com qualquer uma dasreivindicações precedentes, CARACTERIZADA pelo fato de que adita composição compreende propofol a cerca de 1% p/v; óleode soja a cerca de 10% p/v; lecitina de ovo purificada acerca de 1,2% p/v; glicerina a cerca de 2,25% p/v; hidróxidode sódio suficiente para levar o pH entre 6 e 8,5; e águapara injeção para completar 100% em volume; e o sistemaconservante compreende éster monoglicerilico de ácido láuricoa cerca de 0,05% p/v; ácido cáprico e/ou seus sais alcalinossolúveis ou seu éster monoglicerilico (monocaprina) expressocomo ácido cáprico a cerca de 0,05% p/v; e edetato dedissódio a cerca de 0,001% p/v.

22. Composição, de acordo com a reivindicação 21,CARACTERIZADA pelo fato de que a quantidade de éster mono-glicerílico de ácido láurico é de cerca de 0,05% p/v; a deácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico éde cerca de 0, 025% p/v; e a de edetato de dissódio é decerca de 0,001% p/v.

23. Composição, de acordo com a reivindicação 21,CARACTERIZADA pelo fato de que a quantidade de éster mono-glicerilico de ácido láurico é de cerca de 0,025% p/v; a deácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico éde cerca de 0,05% p/v; e a de edetato de dissódio é de cercade 0,001% p/v.

24. Composição, de acordo com a reivindicação 21,CARACTERIZADA pelo fato de que a quantidade de éster mono-glicerílico de ácido láurico é de cerca de 0,05% p/v; a deácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico éde cerca de 0,05% p/v; e a de edetato de dissódio é nenhuma.

25. Composição, de acordo com a reivindicação 21,CARACTERIZADA pelo fato de que a quantidade de éster mono-glicerilico de ácido láurico é de cerca de 0,05% p/v; a deácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico éde cerca de 0,025% p/v; e a de edetato de dissódio é decerca de 0,0025% p/v.

26. Composição, de acordo com a reivindicação 21,CARACTERIZADA pelo fato de que a quantidade de éster mono-glicerilico de ácido láurico é de cerca de 0,05% p/v; a deácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico éde cerca de 0, 025% p/v; e a de edetato de dissódio é decerca de 0,001% p/v.

27. Composição, de acordo com a reivindicação 21,CARACTERIZADA pelo fato de que a quantidade de éster mono-glicerilico de ácido láurico é de cerca de 0, 025% p/v; a deácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico éde cerca de 0, 025% p/v; e a de edetato de dissódio é decerca de 0,0025% p/v.

28. Composição, de acordo com a reivindicação 21,CARACTERIZADA pelo fato de que a quantidade de éster mono-glicerilico de ácido láurico é de cerca de 0,05% p/v; a deácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico énenhuma; e a de edetato de dissódio é de cerca de 0, 0025% p/v.

29. Composição, de acordo com a reivindicação 21,CARACTERIZADA pelo fato de que a quantidade de éster mono-glicerilico de ácido láurico é de cerca de 0,025% p/v; a deácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico énenhuma; e a de edetato de dissódio é de cerca de 0, 0025% p/v.

30. Composição, de acordo com a reivindicação 21,CARACTERIZADA pelo fato de que a quantidade de éster mono-glicerilico de ácido láurico é de cerca de 0,025% p/v; a deácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico éde cerca de 0, 025% p/v; e a de edetato de dissódio énenhuma.

31. Composição, de acordo com a reivindicação 21,CARACTERIZADA pelo fato de que a quantidade de éstermonoglicerilico de ácido láurico é de cerca de 0,1% p/v; ade ácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seuéster monoglicerilico (monocaprina) expresso como ácidocáprico é de cerca de 0,025% p/v; e a de edetato de dissódioé nenhuma.

32. Composição, de acordo com a reivindicação 21,CARACTERIZADA pelo fato de que a quantidade de éster mono-glicerilico de ácido láurico é de cerca de 0,05% p/v; a deácido cáprico e/ou seus sais alcalinos solúveis ou seu éstermonoglicerilico (monocaprina) expresso como ácido cáprico énenhuma; e a de edetato de dissódio é de cerca de 0,001%p/v.

33. Processo de preparação de uma composição, deacordo com qualquer uma das reivindicações precedentes,CARACTERIZADO pelo fato de que compreende:i) preparação de uma fase oleosa em óleo de tri-glicerideo mantida a cerca de 75°C pela adição de propofol;ii) preparação de uma fase aquosa em água a cercade 70°C por adição de glicerol e solução de hidróxido desódio, para torná-la aIcaIina;iii) adição do emulsificador e ingredientes indi-viduais do sistema conservante de acordo com a reivindicação-1 na fase oleosa total ou parcialmente e adição do restantena fase aquosa;iv) adição da dita fase oleosa obtida na etapa i)à dita fase aquosa obtida na etapa ii) sob agitação, paraproduzir uma emulsão grosseira;v) homogeneização da dita emulsão grosseiraobtida na etapa iv) até um tamanho de glóbulo médio menorque 500 nanômetros;vi) filtração da dita composição obtida ao términoda etapa v);vii) colocação do dito filtrado obtido ao términoda etapa vi) em recipientes, como frascos, ampolas, sob umacamada de nitrogênio e fechamento dos recipientes cheios;viii) esterilização do dito filtrado nos ditosrecipientes fechados em autoclave.

34. Processo de preparação de uma composição, deacordo com qualquer uma das reivindicações precedentes,CARACTERIZADO pelo fato de compreende:i) preparação de uma fase oleosa em óleo detriglicerideo mantida a cerca de 75°C por dissolução dopropofol e emulsificador;ii) preparação de uma fase aquosa em água a cercade 70°C por adição de glicerol e solução de hidróxido desódio;iii) adição da dita fase oleosa obtida na etapa i)à dita fase aquosa obtida na etapa ii) sob agitação, paraproduzir uma emulsão grosseira;iv) homogeneização da dita emulsão grosseiraobtida na etapa iii) até um tamanho de glóbulo médio menorque 500 nanômetros;v) adição do sistema conservante escolhido deacordo com qualquer reivindicação precedente;vi) filtração da dita composição obtida ao términoda etapa v) ;vii) colocação do dito filtrado obtido ao términoda etapa vi) em recipientes, como frascos, ampolas, sob umacamada de nitrogênio e fechamento dos recipientes cheios;viii) esterilização do dito filtrado nos ditosrecipientes fechados em autoclave.

35. Processo de preparação de uma composição, deacordo com a reivindicação 34, CARACTERIZADO pelo fato deque o sistema conservante escolhido compreende éster mono-glicerílico de ácido láurico (monolaurina) a cerca de 0,05%p/v e ácido cáprico a cerca de 0,05% p/v da composição deemulsão e não contendo edetato.

36. Composições estáveis de emulsão de óleo-em-água de propofol administráveis por via intravenosa eprocessos para preparação das composições CARACTERIZADOSpelo fato de serem substancialmente conforme aqui descritosno texto e nos exemplos.