KR20080043793A

KR20080043793A - 방부 효능을 갖는 정맥 프로포폴 에멀젼 조성물

Info

Publication number: KR20080043793A
Application number: KR1020087004739A
Authority: KR
Inventors: 가우탐 비노드 다프타리; 스리칸 안나파 파이; 기리쉬 나라심하 샨바그; 산기타 하누르메쉬 리반카르
Original assignee: 바라트 쎄럼스 앤드 백신스 리미티드
Priority date: 2005-08-05
Filing date: 2006-08-04
Publication date: 2008-05-19
Also published as: BRPI0614084A2; EP1922060A2; JP2009503059A; WO2007052288A2; ZA200801227B; ES2318802T3; AU2006310113A1; ATE420625T1; IL189310A0; WO2007052288A3; CA2618026A1; CN101304728A; US8759404B2; EP1922060B1; MX2008001746A; EA200800258A1; US20070249730A1; DE602006004887D1

Abstract

본 발명은 트리글리세리드 오일; 정제된 및/또는 변형된 천연 인지질로 부터 선택된 유화제; 물; 긴장성 조절제; 및 라우르산의 모노글리세릴 에스테르(모노라우린) 및 다음으로부터 선택되는 요소들로 이루어진 방부 시스템을 포함하는 무균의, 정맥 투여가능한, 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물을 제공한다:

(a) 카프르산 및/또는 그것의 가용성 알카리 염 또는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린)

(b) 에데트산 및

(c) 카프르산 및/또는 그것의 가용성 알카리 염 또는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린) 및 에데트산.

Description

방부 효능을 갖는 정맥 프로포폴 에멀젼 조성물{INTRAVENOUS PROPOFOL EMULSION COMPOSITIONS HAVING PRESERVATIVE EFFICACY}

본 발명은 방부효능을 갖는 정맥내 투여를 위한 안정한 프로포폴 수중유(oil-in water) 에멀젼 조성물에 관한 것이다.

프로포폴(Propofol)은 성인 환자 및 3살 이상의 소아과 환자의 일반적인 마취 유발; 성인 환자 및 2개월 이상된 소아과 환자의 일반적인 마취상태의 유지; 및 관을 삽입하고 기계적으로 혈관에 산소를 공급하는 중증환자를 위한 집중 치료 단위(intensive care unit "ICU")진정작용을 통한 치료를 위해 사용된 단시간 작용하는 정맥내 마취제이다. 사용단위는 1% 프로포폴 에멀젼의 20ml 앰플이다.

최초의 임상시도는 크레모퍼 EL에 용해되는 형태로 1977년에 시도되었으나 과민성 반응으로 인해 임상실험에서 제외되었다. 그 후에 지질 내에 수성 에멀젼으로서 다시 제형화되어 상품명 “Diprivan"으로 AstraZeneca에 의해 1986년에 임상에 다시 시도되었다. 현재의 제제는 10% 대두유에 용해되는 1% 프로포폴이고, 1.2% 정제된 달걀 인지질, 2.25% 글리세롤을 함유하고 6.0 내지 8.5의 pH 및 11의 pKa를 갖는다. Diprivan은 항균제로서 EDTA를 함유한다. 새로운 타입의 일반적인 제제는 소듐 메타비설파이트 또는 벤질 알코올을 함유한다.

프로포폴은 50개 이상의 국가에서 마취의 유발 및 유지를 위해 승인되었다.

마취 유발투여시 수반하는 고혈압 및 일시적인 질식을 제외하고, 가장 빈번한 부작용 중의 하나는 주입시에, 특히 정맥 내 주입시에 고통이다. 이러한 고통은 정맥내 리도케인(lidocaine)으로 선처리하거나 또는 혼합하여 경감시킬 수 있다. 한편 중간-사슬 트리글리세리드의 큰 비율을 갖는 제제는(지질내에서와는 반대로) 아마도 유리 수용성 프로포폴의 낮은 농도로 인해 주입시에 고통을 감소시키는 것으로 나타났다(참조 :Wikipedia).

프로포폴의 주입은 통상적으로 오일 중에 프로포폴을 희석하여 수행되고, 그 다음 수중유 타입의 에멀젼으로 제조된다. 프로포폴의 조성물은 오일상과 혼합되고, 정맥내 투여용 수중유 에멀젼으로 제조된다.

프로포폴/대두유 에멀젼은 마취의 유발 및/또는 유지, 조절된 마취 치료의 유지 및 집중치료단위(ICU)에 진정작용을 위해 폭넓게 사용되어 왔다. 마취효과의 빠른 개시 및 빠른 회복시간 모두를 갖는 것이 유리하다. 그러나, 식물성유 및 인지질의 존재는 미생물 성장의 위험을 높이는 경향이 있다.

정맥내 프로포폴 에멀젼 조성물은 특히 연속적으로 주입되는 ICU에 심각하게 질병이 걸린 환자의 진정을 위해 점차적으로 증가하여 사용되고 있다. 병원성(병원에서 감염된) 감염은 ICU 환자에서 자주 관찰되었다. 그러므로, 정맥 내 투여 세트는 적어도 매 6시간 또는 12시간마다 자주 교체할 것을 권유하고 있다. 연속적인 주입은 미생물이 성장하기 쉬운 생성물을 만든다.

억제되지 않은 미생물 성장의 위험을 감소시키기 위해, 정맥 내 프로포폴 에 멀젼 조성물속에 여러 가지 잠재력이 있는 방부제의 추가가 시도되었다. 잠재력이 있는 제제 중의 몇몇은 에멀젼의 불안정성을 일으키는 것으로 발견되었다. 다른 잠재력이 있는 제제는 추구하는 수준의 항미생물 활성을 제공하는데 실패하였다. 가능한한 물리적인 불안정성에 대한 잠재력을 최소화하고, 관련된 독성을 최소화하도록 낮은 농도에서 항미생물 활성의 필요로 하는 수준을 제공하는 방부제를 조성물에 제공할 필요가 있다.

EP-A-0814787(1998년 1월 7일자 공개;1998년 2월 3일자 발행된 미국특허출원 5714520호에 대응하는)는 항미생물제로서 에데트산(edetate)을 함유하는 프로포폴의 수중유 에멀젼을 발표하였다. 에데트산의 양은 바람직하게는 0.1중량%이하이나, 각각의 유기체의 세척된 현탁액이 20-25℃의 온도에서 ml 당 대략적으로 50 내지 250 클로니-형성 단위에서 상기 조성물의 분리된 분획에 가해지고, 상기 온도범위에서 배양하고 그리고 24시간 후 상기 유기체의 생존수를 측정하는 시험에 의해 측정함으로써 포도상구균(ATCC 6538), 대장균(ATCC 8739), 녹농균(ATCC9027), 및 칸디다균(ATCC 10231)의 각각이 적어도 24시간 동안에 10배 이하로 성장의 증가를 억제할 정도로 충분하다. 현재 시판되고 있는 제제는 1% w/v 프로포폴, 10% w/v 대두유, 유화제로서 1.2% w/v 달걀 인지질, 2.25% w/v 글리세롤 및 0.0055% w/v 에데트산 디나트륨, 주입용 수산화나트륨 및 물을 포함한다.

에데트산은 미생물 성장을 지연시키는 것으로 제시되었으나 프로포폴 에멀젼 중에 미생물 성장의 발현을 억제하지는 못한다(참조 WO-A-00/24376,아래부분). 프로포폴 에멀젼 조성물은 장기간 주입을 위해 5배(1:4)까지 희석될 필요가 있다. 희 석시에 에데트산의 농도는 0.0011%로 감소되어 얻어진다. 에데트산 단독 사용은 0.0025% 및 그 이하의 농도에서 넓은 범위의 미생물 성장에서 적어도 10배 이상의 증가를 억제하는데 비효율적인 것으로 발견되었다(참고 US-A-6028108; 아래 부분).

WO-A-99/39696(1999년 8월 12일자 공개; 2002년 10월 22일자 발행된 US-A-6469069호에 대응하는)는 항미생물제로서 설파이트를 함유하는 프로포폴의 수중유 에멀젼을 발표하였다. 바람직하게는 설파이트의 양은 0.0075% 내지 0.66중량%의 범위이고, 각각의 유기체의 세척된 현탁액이 30-35℃의 온도에서 ml 당 대략적으로 50 내지 250 클로니-형성 단위에서 상기 조성물의 분리된 분획에 가해지고, 배양하고 그리고 24시간 후 상기 유기체의 생존수를 측정하는 시험에 의해 측정함으로써 적어도 24시간 동안에 포도상구균(ATCC 6538), 대장균(ATCC 8739), 녹농균(ATCC9027), 및 칸디다균(ATCC 10231)의 각각의 성장이 적어도 10배 증가하는 것을 억제할 정도로 충분하다. 이러한 설파이트의 사용은 2가지 문제점을 가지고 있다;(a)에멀젼의 안정성이 영향을 받고 그리고(b) 약간 높은 투여 수준에서 잠재적으로 독성물질이다.

상기문헌은 수중유 에멀젼의 물에 섞이지 않는 용매가 모노-, 디- 또는 트리글리세리드인 조건에서 수행되었다. 용매의 바람직한 양은 5 내지 25중량%이다.

WO-A-99/39696/US-A-6469069에 따른 바람직한 조성물의 주입은 24시간 동안 50㎍/kg/분의 속도에서 독성 수준에 접근하는 설파이트 농도를 초래할 것이다. 더욱더, 조성물은 설파이트 분자와 조성물이 노출시에 물리적으로 및 화학적으로 불안정한 것으로 보고되었기 때문에 알레르기성 반응을 일으킬 수 있다(참고, Han J 등의 International Journal of Pharmaceutics 2002, 215(1-2):207-220 및 Baker MT 등의 Anesthesiology 2002, 97(5):1162-1167).

WO-A-00/24376(2000년 5월 4일자 공개; 2000년 10월 31일자 발행된 US-A-6140373 및 US-A-6140374호에 해당하는)는 (a)벤질알코올 단독으로 또는 바람직하게는 에데트산 나트륨 또는 나트륨 벤조산염과 함께 그리고 (b)염화 벤즈에토늄으로부터 선택된 항미생물제를 함유하는 프로포폴의 수중유 에멀젼을 발표하였다. 바람직하게는 조성물은 프로포폴 0.1-5.0중량%; 식물성유, 바람직하게는 대두유 1-30중량%; 계면활성제, 바람직하게는 달걀 인지질 0.2 내지 2중량%; 글리세롤 2-3중량%; 및 (i)벤질 알코올 0.0175-0.9중량%, (ii)벤질 알코올 0.07-0.9중량% 및 에데트산 나트륨 0.005중량%, (iii)염화 벤즈에토늄 0.01% 내지 0.1중량% 및 가장 바람직하게는 (iv)벤질알코올 0.0175-0.9중량% 및 나트륨 벤조산염 0.07중량%로부터 선택된 항미생물제를 포함한다.

상기문헌은 수중유 에멀젼의 물과 섞이지 않는 용매가 중간 또는 긴사슬 지방산의 에스테르, 예시하면 모노-, 디- 또는 트리글리세리드인 조건에서 수행된다. 용매의 바람직한 양은 10 내지 20중량%이다.

장기간 사용을 위해서, 벤질 알코올 및 염화 벤즈에토늄과 같은 항염증제는 이들이 독성이 있음으로서 권장되지 않는다.

WO-A-00/59471(2000년 10월 12일자 공개; 2000년 8월 8일자 발행된 US-A-6100302호에 대응하는)는 감소된 규모의 대두유, 지방 또는 트리글리세리드를 갖는 정맥내 마취 프로포폴 에멀젼을 발표하였다. 제제는 바람직하게는 160 내지 200 나 노메터 범위의 직경을 갖는 인지질-피복된 미세소적으로 구성된다. 이러한 미세소적은 인지질의 안정한 층에 의해 둘러쌓여진 식물성유와 같은 용매중에 용해되는 프로포폴의 구를 포함한다. 이러한 제제는 장시간에 걸쳐 안정하게 진정작용을 제공할 수 있고, 프로포폴을 함유하는 낮은 농도 에멀젼이 안정한 수중유 에멀젼을 제공하고, 기대하지 않게 방부제를 함유하는 물에 섞이지 않는 높은 용매 농도와 유사한 항미생물성질을 나타내는 것을 보고하고 있다.

대표적으로 상기 특허출원 명세서 중의 조성물은 0.1 내지 5중량%, 바람직하게는 1 내지 2중량%의 프로포폴을 포함한다. 물과 섞이지 않는 용매, 바람직하게는 대두유는 조성물 중에 0.1 내지 3중량%, 바람직하게는 1 내지 3중량%의 양으로 적절히 존재한다. 그러나 오일함량의 감소는 수용액 상에서 유리 프로포롤로 인해 주입시에 더 많은 고통을 일으킨다.

본 발명의 목적은 종래 조성물의 문제점들을 극복하기 위한 것으로서, 방부 시스템을 갖는 정맥 내 투여가능한 무균의, 안정한 제약학적 수중유 에멀젼 조성물을 제공하는 것이다.

더욱 바람직하게는 본 발명의 목적은 우발적인 외부의 오염 후, 녹농균 ( pseudomonas aeruginosa ) , 대장균( escherichia coli ) , 포도상구균( Staphylococcus aureus ) 그리고 칸디다균 (Candida albicans) 의 각각이 적어도 24시간 동안 10배 이하로 성장될 정도의 방부 효능을 갖는 프로포폴의 수중유 에멀젼 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명은 트리글리세리드 오일; 정제된 및/또는 변형된 천연 인지질로부터 선택된 유화제; 물; 긴장성 조절제; 및 라우르산의 모노글리세릴 에스테르(모노라우린) 및 다음으로부터 선택되는 요소들로 이루어지는 방부 시스템을 포함하는 무균의, 정맥 투여가능한, 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물을 제공한다:

(a) 카프르산(capric acid) 및/또는 그것의 가용성 알카리 염 또는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린)

(b) 에데트산(edetate) 및

프로포폴 수중유 에멀젼 조성물은, 우발적인 외부의 오염 후, 녹농균(pseudomonas aeruginosa; ATCC 9027), 대장균(escherichia coli; ATCC 8739), 포도상구균(staphylococcus aureus; ATCC 6538), 칸디다균(candida albicans; ATCC 10231)의 각각이 적어도 24시간 동안에 10배 이하로 성장의 증가를 억제할 정도의 농도로 방부 시스템이 존재한다.

발명의 상세한 설명:

A. 성분:

본 발명에 개시된 조성물에 사용되는 성분들은 하기에 기술되었다. 물, 나트륨, 수산화물 용액과 같은 일반적인 성분은 기술되지 않았다.

프로포폴: 2, 6-비스(1-메틸에틸)-페놀 또는 2, 6-디이소프로필페놀

CAS 번호 2078-54-8; C₁₂H₁₈O; 몰. 중량. 178.273

약물류(pharmacopoeia): 유럽 의약회(Ph, Eur) 세부사항에 따른 프로포폴이 사용될 수 있다. 프로포폴의 함량은 조성물의 0.1 내지 2%w/v, 바람직하게는 0.5 내지 2%w/v, 더욱 바람직하게는 약 1 내지 2%w/v이고, 그리고 가장 바람직하게는 에멀젼 조성물의 약 1%w/v 또는 약 2%w/v이다.

트리글리세리드 오일: 트리글리세리드 오일은 식물성 트리글리세리드 오일 및/또는 합성 트리글리세리드 오일로부터 선택된다. 식물성 트리글리세리드 오일은 대두유, 참기름, 홍화유, 올리브 오일과 같은 일반적인 식물성 오일이다. 전형적으로 합성 트리글리세리드 오일은 화학적 및/또는 물리적 변형 및/또는 정제된 식물성 오일로부터 제조되었다. MCT 오일은 합성 오일의 대표적 예시이며 Cocos micifera L. 의 배유(endosperm)의 단단한, 건조 분획으로부터 추출된 일정한(fixed) 오일로부터 얻는다. 고정 오일의 가수분해는, 대략적으로 2:55:42:1의 비율로 카프로산(C₆), 카프릴산(C₈), 카프르산(C₁₀) 및 라우르산(C₁₂)의 주요 글리세롤 에스테르인 MCT 오일(중간 사슬 트리글리세리드)을 제조하기 위해 재에스테르화된 필수 지방산의 증류율에 따른다(출처: http :www.pdrhealth.com).

일반적으로 트리글리세리드 오일은 조성물의 30%w/v 이하이고, 바람직하게는 조성물의 5% 내지 20%w/v, 더욱 바람직하게는 조성물의 약 10%w/v이다. 또한, 본 발명은 하나 또는 그 이상의 식물성 오일 및/또는 합성 오일의 어떠한 결합을 포함할 수 있다. 대두유는 본 발명의 조성물로 바람직하게 사용되는 식물성 오일이다. 이러한 조성물에 사용되는 대두유는 바람직하게는 정제되고, 표백되며, 탈취되었고, 그리고 바람직하게는 중금속 오염물질이 없다. 유럽 의약회(Ph, Eur) /미국 의약회(USP) 세부사항에 따른 대두유가 바람직하다.

포스파타이드 :

본원 발명의 수중유 에멀젼 조성물은, 정제되거나 및/또는 변형된 천연의 포스파타이드가 수중유 에멀젼의 안정화를 위하여 유화제로서 사용된다. 사용되는 바람직한 천연의 포스파타이드는 정제된 달걀 레시틴 또는 정제된 소야 레시틴 또는 이들의 혼합물이다. 더욱 바람직하게는 사용되는 천연의 포스파타이드는 정제된 달걀 레시틴이다. 상기 정제된 천연의 포스파타이드의 함량은 조성물의 0.1%w/v 내지 3%w/v, 바람직하게는 약 1.2%w/v이다.

포스파타이드는 수성 매질로 수화되면 리포좀을 형성하는 것으로 잘 알려져 있다. 그러나 본원발명에서는 리포좀 조성물을 형성하는데 사용되지 않는다. 그들은 본 발명에서 유화제로서 에멀젼의 안정화를 위하여 사용된다.

긴장성 조절제( tonicity modifying agent ): 본 발명의 조성물은 바람직하게는 글리세린, 덱스트로오스, 또는 만니톨과 같은 적합한 긴장성 조절제(tonicity modifying agent)를 혼합함으로써 혈액을 등장(等張)시킨다. 글리세린은 바람직한 긴장성 조절제이다.

방부제:

본 발명에 사용되는 방부 시스템은 라우르산의 모노글리세릴 에스테르(모노라우린) 및 다음으로부터 선택되는 요소들을 포함하는 방부 시스템을 포함한다:

(b) 에데트산 및

라우르산의 모노글리세릴 에스테르( 모노라우린 )

글리세롤의 히드록실 그룹의 하나가 지방산으로 에스테르화될 때, 그것은 모노아실글리세롤 또는 모노글리세라이드로 불려진다. 글리세롤 분자의 어느 말단에서 OH 그룹 하나가 라우르산으로 에스테르화될 때, 그것은 라우르산(1-모노라우린)의 1-모노글리세릴 에스테르를 형성한다. 글리세롤 분자의 중간 또는 2번째 위치에서 OH 그룹이 라우르산으로 에스테르화될 때, 그것은 라우르산(2-모노라우린)의 2-모노글리세릴 에스테르를 형성한다. 이러한 두 모노라우린 중에서 1-모노라우린이 본 발명에서 방부제로서 바람직하다. 본 명세서에서 사용되는 모노라우린이란 용어는 분자식 C₁₅H₃₀O₄ 및 분자량 약 274.4를 갖는 모든 제약학적으로 수용 가능한 글리세릴 에스테르를 나타내고, 그것은 에톡실레이티드 또는프로폭실 레이티드 모노라우린을 포함하지 않는다. 또한, 상업적으로 이용 가능한 모노라우린은 "rac-1-라우로일글리세롤", "1-모노도데카노일-rac-글리세롤", "l-모노라우로일-rac-글리세롤", "rac-글리세롤 1-라우레이트", 그리고 "DL-α-라우린"과 같은 다른 이름으로 알려져 있다.

또한, 1 및 2 모노글리세라이드의 혼합물, 또는 라우르산의 2-모노글리세라이드는 모노라우린이다. 모노라우린은 일부 라우르산의 디글리세라이드를 함유할 수 있다. 모노라우린의 순도는 임계적이지 않으며, C₁₂ (라우릭) 지방산이 풍부해야 하지만, 그러나 C₁₀, C₁₄ 등 지방산의 소량의 존재는 수용 가능하다.

모노라우린은 동질이상(polymorphism)을 나타낸다. α-형, β' 형 및 β 형은 각각 44℃, 59.5℃ 및 63℃의 녹는점을 갖는 것으로 보고되었다. 본 발명에 사용되는 모노라우린의 형태는 본 발명에 사용되는데 제한되지는 않는다.

카프르산 또는 에데트산 또는 카프르산 및 에데트산 모두로 결합하여 사용될 때, 모노라우린은 상기 언급한 것으로서 우발적 외부 오염의 경우에 적어도 24시간 동안 미생물의 현저한 성장을 방지하는 요건을 만족시키는데 충분하다. 용량의 요건은, 어느 정도까지는, 사용되는 모노라우린의 성질에 의존하고, 그리고 1-모노라우린은 본 실험에서 바람직하다. 따라서 양은 엄격히 한정될 수 없고, "약"이라는 용어는 이러한 양에 접두사로서 붙였다.

모노라우린은 수성 매질에 불용성이나, 클로로포름, 벤젠, 에탄올, 또는 아세톤과 같은 이른바 지방 용매에는 매우 가용성이다. 모노라우린의 HLB 값은 10 이하이며, 따라서 수중유 에멀젼이 아니라 유중수 에멀젼(water-in-oil)을 위해서만 유화제 또는 가용화제(solubiliser)로서 적합하다. 이것은 본원 발명에서 방부제로서 소량이 사용되며 유화제 또는 가용화제로 사용되는 것이 아니다.

쥐에서 모노라우린이 경구로 투여되는 경우, LD₅₀은 약 53,000 mg/kg 체중인 것으로 보고되었다.

카프르산 :

카프르산은 오일 및 지방에서 발견된 천연의 C₁₀ 탄소 원자를 함유하는 포화된 지방산이다. 또한, 카프르산은 분자식 C₁₀H₂₀O₂ 그리고 분자량 172.27을 갖는 데칸산-CAS 번호 334-48-5로서 알려져 있다. 카프르산은 모노라우린보다 더 좋은 항-진균 특성을 갖는다. 쥐에서 경구로 투여되는 경우 LD₅₀은 약 10,000 mg/kg 체중 이상이다.

정제된 카프르산이 바람직하다. 그러나, C₈ 또는 C₁₂ 또는 C₁₄ 또는 이들의 지방산들의 소량으로 존재하는 것은 수용가능하다.

프로포폴 조성물에 사용될 때, pH는 수산화나트륨으로 조정될 때, 카프르산 나트륨 염이 형성될 수 있고, 수용성 염으로 이온화되거나, 카프르산과 같이 반응될 수 있다. 한편, 카프르산 나트륨, 즉 카프리산의 나트륨염은 pH를 조절하는 카프르산의 필요한 양을 제공하기위해 사용될 수 있다.

카프르산의 염:

어떠한 제약학적으로 수용될 수 있는 용융성 알카리 염이 유용하다. 나트륨 염이 바람직하다.

카프르산의 나트륨 염은 물에 용해되고, 그리고, CH₃(CH₂)₈COONa의 분자량을 갖고, 그리고 일반적으로 나트륨 데카노에이트로서 알려져 있다.

카프르산의 모노글리세릴 에스테르( 모노카프린 )

또한, 카프르산의 모노글리세릴 에스테르- 모노카프레이트(모노카프린)는 카프르산 필요량을 제공하기 위해 사용될 수 있지만, 유리 카프르산이 바람직하다. 모노카프린은 카프르산의 모노글리세릴 에스테르이다. 글리세롤의 한 히드록시 그룹이 1-히드록시 또는 3-히드록시 그룹에서 카프르산으로 에스테르화될 때, 1-모노카프린이 얻어졌다. 글리세롤의 2-히드록시 그룹에서 글리세롤이 카프르산으로 에스테르화될 때, 2-모노카프린이 얻어졌다. 본 발명에서 두 모노카프린 모두가 유용하지만, 1-모노카프린이 바람직하다.

카프르산 염 또는 카프르산(모노카프린)의 모노글리세릴 에스테르의 양은 명세서에 카프르산으로서 표현되었다.

에데트산 :

본 명세서에서 언급된 에테트산은 에틸렌디아민 테트라아세트산 및 이들의 유도체를 포함한다. 디나트륨 에테트산은 본 발명에서 바람직한 에데트산이지만, 그러나 테트라 나트륨 염과 같은 다른 염들이 소량으로 존재하는 것을 수용할 수 있다.

에테트산은 금속 킬레이트제이고 그리고 소량으로 방부제로서 사용되었다. 이러한 프로포폴 에멀젼에 사용되는 트리글리세리드 오일들은 방부제를 비활성화시키는 미량의 금속으로 오염되었다. 에데트산은 오일 내에서 금속 오염물을 킬레이트하도록 돕고, 방부제의 효율을 증가시킨다.

에데트산의 양적 특성을 위해 분자식 C₁₀H₁₆N₂O₈Na₂, CAS 번호. 6381-92-6 을 갖는 에데트산 디나트륨으로서 표현하였다. 쥐에서 경구로 투여되는 경우 LD₅₀은 약 20,000 mg/kg 체중이다.

본 발명의 조성물에 사용된 에데트산의 농도는 방부제로서 작용하는데 충분하지 못하다(참조: 미국 특허 6028108A). 이론적으로 결정되어 있지 않지만, 본 발명자들은 에데트산의 소량이 모노라우린의 방부제 활성을 상승시키는데 유용할 것을 믿는다.

B. 프로포폴 조성물:

본 발명의 조성물 중의 다른 성분들과 결합하여 사용된 방부제의 성분을 갖는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물은 녹농균(Pseudomonas aeruginosa; ATCC 9027), 대장균(escherichia coli; ATCC 8739), 포도상구균(Staphylococcus aureus; ATCC 6538), 칸디다균(candida albicans; ATCC 10231)의 각각의 미생물 배양에 있어서 적어도 24시간 동안에 10배 이하로 성장을 억제하는데 충분히 효과적인 조성물이고, 안정적이고, 정맥 내 투여가능한 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명의 조성물은 프로포폴을 고 함량으로 함유하는 농축액으로서 만들어질 수 있으며, 그 다음 예를 들어 덱스트로오스 용액으로 적절하게 희석되었다.

본 발명의 몇몇 바람직한 조성물은 표 1에 제공되었다.

프로포폴 수중유 에멀젼 조성물 양(%w/v)

조성물번호 -> 성분↙	ⅰ	ⅱ	ⅲ	ⅳ	ⅴ	ⅵ
프로포폴	1	1	1	1	1	1
대두유	10	10	10	10	10	10
정제된 달걀 레시틴	약 1.2	약 1.2	약 1.2	약 1.2	약 1.2	약 1.2
글리세린	약 2.25	약 2.25	약 2.25	약 2.25	약 2.25	약 2.25
모노라우린	0.05	0.025	0.05	0.05	0.025	0.05
카프르산	0.05	-	0.05	0.025	0.05	0.025
에데트산 디나트륨	-	0.0025	0.001	0.0025	0.001	0.001
수산화 나트륨 용액*	pH 5 내지 8.5로 조정할 수 있는 양
도입된 물	100부피%가 될 때까지 채워짐

* 본 발명의 정맥 내 투여가능한 조성물은 적절한 용량의 알칼리 예를 들면 수산화 나트륨의 존재에 의하여 알맞게 조정된 5 내지 8.5, 바람직하게는 6 내지 8.5의 pH를 갖는다. 한편, 카프르산의 나트륨염 단독으로 또는 알칼리와 결합하여 pH의 조절을 위해 사용할 수 있다.

프로포폴, 오일, 유화제의 양은 상기 기술된 성분들의 범위 내에서 다양하게 변화될 수 있고, 방부제의 결합물도 똑같이 중요하다. 예를 들면, 프로포폴은 조성물의 0.1 내지 2% w/v일 수 있고, 트리글리세리드 오일은 조성물의 30% w/v 이하일 수 있고, 그리고 정제되거나 및/또는 변형된 천연 포스파타이드는 조성물들의 0.1 내지 3% w/v일 수 있다. 긴장성 조절제를 포함하는 이러한 다른 성분들과 결합된 방부 시스템에 대한 성분들의 몇몇 유용한 변형예는 표 2에 나타내었다.

C. 방부 시스템의 조성물

본 발명의 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물에 사용되는 방부 시스템은 라우르산의 모노글리세릴 에스테르(모노라우린) 및 다음으로부터 선택되는 요소들을 포함한다:

(b) 에데트산 및

최종 조성물에서 개개의 방부제 농도는 사용되는 방부제의 특정 결합에 의존하여 변할 것이다. 이러한 결합물은 프로포폴 수중유 에멀젼 또는 어떠한 다른 수중유 에멀젼에 유용한 방부 시스템으로서 알려져있지 않았었다.

본 발명의 방부 시스템 중에 각각의 성분들의 특히 바람직한 양은 표 2에 요약되어있다.

방부시스템의 조성물

(a): 모노라우린+카프르산;(에데트산 디나트륨-Nil)- 최종 프로포폴 에멀젼 조성물의 % w/v 양

성분	넓은 범위	바람직한 범위	가장 바람직한 범위
모노라우린	0.001-0.1%	0.01-0.05%	약0.05%
카프르산	0.001-0.1%	0.01-0.05%	약0.05%

(b): 모노라우린+에데트산 디나트륨;(카프르산-Nil)

최종 프로포폴 에멀젼 조성물의 % w/v 양

성분	넓은 범위	바람직한 범위	가장 바람직한 범위
모노라우린	0.001-0.1%	0.01-0.05%	약0.05%
에데트산 디나트륨	0.001-0.0025%	약0.0025%	약0.0025%

(c): 모노라우린+카프르산+에데트산 디나트륨

최종 프로포폴 에멀젼 조성물의 % w/v 양

성분	넓은 범위	바람직한 범위	가장 바람직한 범위
모노라우린	0.001-0.1%	0.01-0.05%	약0.025%
카프르산	0.001-0.1%	0.01-0.05%	약0.025%
에데트산 디나트륨	0.001-0.0025%	약0.0025%	약0.0025%

표 3은 방부 시스템의 몇몇 조성물을 보여준다.

방부 시스템의 몇몇 조성물 - 최종 프로포폴 에멀젼 조성물의 % w/v양

조성물	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12
모노라우린	0.05	0.025	0.05	0.025	0.05	0.05	0.025	0.025	0.05	0.05	0.1	0.05
카프르산	0.05	0.025	-	-	0.05	0.025	0.05	0.025	0.025	0.025	0.025	-
에데트산 디나트륨	-	-	0.0025	0.0025	0.001	0.0025	0.001	0.0025	-	0.001	-	0.001

따라서, 프로포폴, 트리글리세리드, 오일, 포스파타이드와 같은 프로포폴 수중유 에멀젼 성분의 양의 변화 이외에 방부시스템의 조성물의 변화가 많이 있다. 몇몇 바람직한 변화는 다음과 같다:

i) 방부 시스템은 라우르산 0.001 내지 0.1% w/v와 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 에멀젼 조성물의 카프르산 0.001% 내지 0.1% w/v로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린), 및 존재하지 않는 에데트산 디나트륨으로서 에데트산을 포함한다.

ii) 또 다른 방부 시스템은 라우르산 0.025 내지 0.1% w/v와 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 에멀젼 조성물의 카프르산 0.025% 내지 0.1% w/v로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린), 및 에데트산 디나트륨 0.001% 내지 0.0025% w/v 로서 표현되는 에데트산을 포함한다.

iii) 또 다른 방부 시스템은 라우르산 약 0.05% w/v와 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 에멀젼 조성물의 카프르산 0.025% 내지 0.1% w/v로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린), 및 에데트산 디나트륨 0.001% 내지 0.0025% w/v 로서 표현되는 에데트산을 포함한다.

iv) 또 다른 방부 시스템은 라우르산 0.025 내지 0.1% w/v와 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 에멀젼 조성물의 카프르산 약 0.025% 로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린), 및 에데트산 디나트륨 0.001% 내지 0.0025% w/v 로서 표현되는 에데트산을 포함한다.

v) 또 다른 방부 시스템은 라우르산 0.025 내지 0.1% w/v와 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 에멀젼 조성물의 카프르산 0.025% 내지 0.1% w/v 로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린), 및 에데트산 디나트륨 약 0.0025% w/v 로서 표현되는 에데트산을 포함한다.

vi) 또 다른 방부 시스템은 라우르산 0.025 내지 0.1% w/v와 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 에멀젼 조성물의 카프르산 0.025% 내지 0.1% w/v 로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린), 및 에데트산 디나트륨 약 0.001% w/v 로서 표현되는 에데트산을 포함한다.

방부 시스템(c)은 모노라우린, 카프르산 및 에데트산에 의해 대표되는 모든 세개의 성분들이 상기에 기재된 것으로서 존재하는 것으로 기재될 수 있다. 방부 시스템(a)은 에데트산이 없고, 방부 시스템(b)은 카프르산이 없다.

D. 에멀젼 조성물 제조 공정

방부 시스템의 여러가지 결합 모드들이 어떠한 이로운 방법들을 제공할 수 있는 지 보기 위해, 본 발명의 정맥 내 투여가능한 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물의 제조 공정을 연구하였다. 이러한 결합들은 표 4에 나타내었다. 이러한 방법의 변화는 전형적인 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물을 위해 실시예 1(하단)에 기술되어졌다.

수중유 에멀젼 조성물에서 방부 시스템의 결합 모드

방부 시스템	수상	유상
모노라우린+카프르산	모노라우린	카프르산
	카프르산	모노라우린
	카프르산+모노라우린	-
	-	카프르산+모노라우린
	카프르산+모노라우린	카프르산+모노라우린
	카프르산+모노라우린	모노라우린
	카프르산+모노라우린	카프르산
	모노라우린	카프르산+모노라우린
	카프르산	카프르산+모노라우린
모노라우린+에데트산 디나트륨	모노라우린+에데트산 디나트륨	-
	에데트산 디나트륨	모노라우린
	모노라우린+에데트산 디나트륨	모노라우린
모노라우린+카프르산+에데트산 디나트륨	모노라우린+에데트산 디나트륨	카프르산
	모노라우린+에데트산 디나트륨	모노라우린
	카프르산+모노라우린+에데트산 디나트륨	-
	에데트산 디나트륨	카프르산+모노라우린
	카프르산+모노라우린+에데트산 디나트륨	카프르산+모노라우린
	카프르산+모노라우린+에데트산 디나트륨	모노라우린
	카프르산+모노라우린+에데트산 디나트륨	카프르산
	모노라우린+에데트산 디나트륨	카프르산+모노라우린
	카프르산+에데트산 디나트륨	카프르산+모노라우린

각각의 상기 방부 시스템을 함유하는 조성물들은 다른 방법들에 의해 준비될 수 있었고, 여기에서 포스파타이드는 각각의 수상 또는 유상 또는 부분적으로 수상 및 부분적으로 유상에 결합되었다.

본 발명의 공정에 있어서, 긴장성 조절제는 수상에 결합되었다. 수상의 pH는 그것을 유상에 첨가하기 이전에 적절하게 조정되었다. 선택적으로 이멀젼의 pH는 균질화 이전에 또는 균질화 이후 중에 적절하게 조정되었다.

또한, 미리 성형된 에멀젼에 방부 시스템의 혼합물을 첨가하는 것도 가능하다. 이러한 경우 모노라우린은 55℃ 내지 60℃에서 물(10 중의 1)의 소량에 분산되었다. 이것은 잘 혼합되고 또한 교반 하에 수행되는 에멀젼에 첨가되었다. 바람직하게는 카프르산은 수조(30℃ 내지 35℃)에서 녹인 후, 교반 하에 수행되는 에멀젼에 첨가되었다.

전술된 공정의 양상에서, 바람직하게는; 균질화는 500nm 이하의 평균 구체 크기로 수행되었다; 균질화된 조성물은 여과되었다; 여과된 결과물은 질소 블랭키팅을 따른 용기에 채워지고, 그리고 채워진 용기는 밀봉되었다; 그리고 상기 밀봉된 용기 내의 여과물은 고압멸균기(autoclave)에 의해 살균되었다.

본 발명의 프로포폴 수중유 조성물의 제조 공정은 다음의 단계들을 포함한다:

i) 약 75℃로 유지된 트리글리세리드 오일에 프로포폴을 첨가하여 유상을 제조하는 단계;

ⅱ) 알칼리를 만들기 위해 글리세롤 및 수산화 나트륨 용액을 약 70℃ 물에 첨가하여 수상을 제조하는 단계;

ⅲ) 유화제와 청구항 1의 방부 시스템의 각각의 성분들을 유상에 전체적으로 또는 부분적으로 첨가하고, 그리고 나머지는 수상에 첨가하는 단계;

ⅳ) 단계 ii)에서 얻어진 수상에, 단계 i)에서 얻어진 상기 유상을 교반하면서 첨가하여 거친 에멀젼을 제조하는 단계;

v) 단계 ⅳ)에서 얻어진 상기 거친 에멀젼을 500나노미터 이하의 평균 구체 크기로 균질화하는 단계;

ⅵ) 단계 v) 끝에서 얻어진 상기 조성물을 여과하는 단계 ;

ⅶ) 단계 ⅵ) 끝에서 얻어진 상기 여과액을 질소 블랭킷팅 하에서, 바이알, 앰플과 같은 용기에 충전하고, 상기 충전 용기를 밀봉하는 단계; 및

ⅷ) 상기 여과액이 충전된 밀봉 용기를 고압멸균기로 살균하는 단계.

본 발명의 프로포폴-함유 조성물을 제조하는 다른 공정은 다음의 단계들을 포함한다:

i) 프로포폴 및 유화제를 약 75℃로 유지된 트리글리세리드 오일에 녹여 유상을 제조하는 단계;

ⅱ) 글리세롤 및 수산화 나트륨 용액을 약 70℃ 물에 첨가하여 수상을 제조하는 단계;

ⅱi) 단계 ii)에서 얻어진 수상에, 단계 i)에서 얻어진 상기 유상을 교반하면서 첨가하여 거친 에멀젼을 제조하는 단계;

ⅳ) 단계 ⅱi)에서 얻은 거친 에멀젼을 500나노미터 이하의 평균 구체 크기로 균질화하는 단계;

v) 전술한 항 중 어느 한항에 기재된 것으로서 선택된 방부 시스템을 첨가하는 단계;

ⅵ) 단계 v) 끝에 얻은 상기 조성물을 여과하는 단계;

ⅶ) 단계 ⅵ) 끝에 얻은 상기 여과액을 질소 블랭킷팅 하에서, 바이알, 앰플과 같은 용기에 충전하고, 상기 충전 용기를 밀봉하는 단계; 및

본 발명은 이하에서 실시예에 의하여 상세히 설명될 것이다. 이들 실시예는 오로지 상세한 설명을 위한 것뿐이며 본 발명의 범위를 제한하지 않는다.

실시예에 사용된 물질과 장비:

프로포폴은 유럽 약전 (Ph.Eur.)의 설명에 따른다.

글리세린, 수산화나트륨, 도입된 물은 인도 약전 (IP.)/유럽 약전의 설명에 따른다.

대두유(콩기름)은 유럽 약전/U. S. P. 설명에 따른다.

정제된 달걀 레시틴(실시예에서 달걀 레시틴으로 지칭됨)은 M/s.Lipoid에 의하여 제조되었다.

모노라우린은 시그마/M/s. 리포이드로부터 입수한 라세미 혼합물이다.

카프르산은 시그마사로부터 입수한 것이다.

나트륨 디카노에이트는 시그마사로부터 입수한 것이다.

에데트산 디나트륨은 약전 설명에 따른다.

고속 혼합은 실험실의 레미 교반기를 사용하여 수행되었다. 에멀젼은 고압 APV 균질기(homogenizer)를 사용하여 균질화되었다. 실시예에서 설명된 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물들의 배치 크기는 300mL의 양이다.

실시예 IA , IB , IC 및 ID : 방부제 모노라우린 및 카프르산을 함유하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물

표 5에 나타낸 것으로서, 실시예 I의 조성물은 실시예 IA, IB, IC 및 ID 와 같이 4개의 다른 공정들에 의해 준비되었다.

실시예 I의 조성물

성분	%w/v
프로포폴	1
대두유	10
정제된 달걀 레시틴	약 1.2
글리세린	약 2.25
모노라우린	0.025
카프르산	0.025
에데트산 디나트륨	-
수산화나트륨	q.s.*
물	q.s.100%

* pH 조정용

실시예 IA :

유상 제조: 대두유가 70-75℃로 가열되었고, 카프르산 및 프로포폴이 첨가되고 혼합되었다.

수상 제조: 도입된 물에 모노라우린을 따르는 글리세린이 첨가되었고, 용해되도록 교반한다. 달걀 레시틴을 첨가했고, 그리고 수상에 분산되었다. 이후 pH가 수산화나트륨 용액으로 약 10.5로 조정되었다.

유화(Emulsification): 거친 에멀젼을 얻기 위하여 유상이 수상에 혼합되고 약 10분 동안 고속으로 교반되어 첨가되었다.

그 후 거친 에멀젼은 균질화되었고, 또한 평균 구체 크기가 500나노미터 이하로 얻어졌다.

이 에멀젼은 여과되었고, U.S.P. 타입 I 바이알에 충전되었으며, 그리고 질소 가스로 블랭켓팅된 후 밀봉되었다. 그 후, 이 바이알은 고압멸균기에 의해 살균되었다.

실시예 IB :

실시예 IA와 유사하다. 그러나, 정제된 달걀 레시틴이 유상에 첨가되었다.

실시예 IC :

실시예 IA와 유사하다. 그러나, 정제된 달걀 레시틴의 용량 중 반이 유상에 첨가되었고, 용량 중 반은 수상에 첨가되었다.

실시예 ID :

실시예 IA와 유사하다. 그러나, 모노라우린이 유상에서 용해되었고, 카프르산은 수상에서 용해되었다.

실시예 ⅡA:

실시예 IA, IB, IC 및 ID의 샘플들이 구체 크기로 시험되었고, 프로포폴과 분해 산물(degradation products)은 다음과 같은 방법을 만족시킨다:

1. 구체 크기: 구체 크기는 Coulter Counter로부터 N4-플러스 기구를 이용하여 측정되었다.

2. 프로포폴 및 분해 산물 함량: 프로포폴 및 분해 산물 함량은 HPLC로 측정된다. 세부사항은 다음과 같다:

칼럼 - 하이퍼실(Hypersil) ODS

검색기 - 자외선 검색기

검색 파장 - 270nm

이동 상 - 60:15:25 아세토니트릴:메탄올:1OmM

인산칼륨(포타슘 포스페이트) 완충액

샘플 농도 - 0.2mg/㎖

유속 - 1㎖ / 분.

실시예 ⅡB:

실시예 IA, IB, IC 및 ID의 조성물들이 분석되었고, 그 조성물들의 분석데이터는 표 6에 나타내었다:

실시예 I

시험		IA	IB	IC	ID
외양		WOL	WOL	WOL	WOL
pH		6.98	6.8	6.83	8.2
프로포폴 함량(mg/mL)		10.16	10.15	10.41	10.17
분해 산물 (프로포폴 양%)	벤조-퀴논	0.02	0.02	0.02	0.01
분해 산물 (프로포폴 양%)	비스-프로폴	0.15	0.043	0.044	0.17
평균 구체 크기(㎛)		0.18	0.19	0.20	0.19

WOL-하얀 불투명한 액체

실시예 IA, IB, IC 및 ID의 조성물들이 실시예 Ⅲ에 기재된 절차를 이용하여 방부 활성을 측정하기 위해 시험하였다.

실시예 Ⅲ: 실시예 IA, IB, IC 및 ID의 샘플 들의 방부 활성 측정

방부 활성 측정을 위한 절차

대략 ㎖당 50 - 250 콜로니 형성 단위 (cfu)㎖의 각각의 칸디다균 ATCC 10231, 녹농균 ATCC 9027, 대장균 ATCC 8739 및 포도상구균 ATCC 6538의, "항 미생물 유효성 테스트" 하에서 특정된 4가지의 표준 U. S. P. 미생물 배양액이 제품의 개별적 분액에 첨가되었으며 22±2℃에서 (진균 배양) 그리고 32℃±2℃ (박테리아 배양)에서 인큐베이션 되었다. 테스트 미생물의 생균수 측정은 24시간 및 48시간 후에 측정되었다.

진균 배양을 위한 방부 효능 측정 방법

1. 칸디다균(C.albicans)의 표준 배양액 0.1㎖의 l:10³ 희석 현탁액으로 시험 샘플을 접종하여, 상기 접종된 시험 샘플들은 50 - 250 cfu/㎖을 함유한다.

2. 상기 시험 샘플들을 24시간 동안 22±2℃에서 인큐베이션한다.

3. 표면-스프레드 방법에 의해 테스트 샘플에 접종된 세포 밀도를 측정한다.

4. 상기 시험 샘플들의 24시간 인큐베이션 이후에, 상기 시험 샘플들의 3회의 10-배 희석을 수행한다.

5. 3회 10-배 연속 희석 튜브와 테스트 샘플(희석되지 않은) 0.1㎖를 무균의 sabouraud 덱스트로오스 아가 페트리 플레이트 상에 표면-스프레드 한다.

6. 각각의 플레이트를 48시간 동안 22±2℃에서 인큐베이션한다.

7. 플레이트 당 콜로니 수를 세고, 시험 샘플에서의 세포 밀도를 측정한다(24시간의 접종 후).

8. 유사하게 시험 샘플들의 48 시간 인큐베이션 이후에, 무균의 sabouraud 덱스트로오스 아가 페트리 플레이트 상에 시험 샘플들의 0.1㎖의 표면 스프레드 된 시험 샘플들의 3회의 10-배 연속 희석을 수행하고, 48시간 동안 22±2℃에서 인큐베이션 하고, 이 샘플들의 세포 밀도를 측정한다(48시간의 접종 후)

이러한 시험 샘플들에서 세포 수 10배 이하의 증가는 시험 샘플들의 방부 효능을 나타낸다.

박테리아 배양을 위한 방부 효능 측정 방법

1.0.1㎖의 l:10³ 희석 현탁액으로 시험 샘플을 접종하여, 상기 접종된 시험 샘플들은 50 - 250 cfu/㎖을 함유한다.

2. 상기 시험 샘플들을 24시간 동안 32±2℃에서 인큐베이션한다.

5. 3회 10-배 연속 희석 튜브와 테스트 샘플(희석되지 않은) 0.1㎖를 무균 소야 빈-카제인 아가 페트리 플레이트 상에 표면-스프레드 한다.

6. 각각의 플레이트를 48시간 동안 32±2℃에서 인큐베이션한다.

8. 유사하게 시험 샘플들의 48 시간 인큐베이션 이후에, 무균 소야 빈-카제인 아가 페트리 플레이트 상에 시험 샘플들의 0.1㎖의 표면 스프레드 된 시험 샘플들의 3회의 10-배 연속 희석을 수행하고, 48시간 동안 32±2℃에서 인큐베이션 하고, 이 샘플들의 세포 밀도를 측정한다(48시간의 접종 후)

시험된 방부 시스템의 효능: 실시예 IA, IB, IC 및 ID의 조성물들은 24시간 동안 10배 이하의 성장을 보여주었다.

실시예 Ⅳ-Ⅸ

실시예 Ⅳ-Ⅸ의 조성물들은 표 7에 제공되었다.

프로포폴 수중유 에멀젼 조성물 (양/100ml)

실시예	Ⅳ	Ⅴ	Ⅵ	Ⅶ	Ⅷ	Ⅸ
프로포폴	1g	1g	1g	1g	1g	1g
모노라우린	0.05g	0.05g	0.05g	0.1g	0.025g	0.05g
카프르산	0.025g	-	-	0.025g	0.025g	0.05g
대두유	10g	10g	10g	10g	10g	10g
달걀 레시틴	1.2g	1.2g	1.2g	1.2g	1.2g	1.2g
글리세린	2.25g	2.25g	2.25g	2.25g	2.25g	2.25g
에데트산 디나트륨	-	0.0025g	0.001g	-	0.0025g	-
수산화나트륨(o.1N)※	q.s.	q.s.	q.s.	q.s.	q.s.	q.s.
도입된 물	q.s.to 100ml	q.s.to 100ml	q.s.to 100ml	q.s.to 100ml	q.s.to 100ml	q.s.to 100ml

※ pH 6 내지 8.5로 조정됨

실시예 Ⅳ

수상 제조: 도입된 물 65-70℃에 모노라우린을 따르는 글리세린이 첨가되었고 용해되도록 교반한다. 달걀 레시틴을 첨가했고, 그리고 수상에 분산되었다. 이후 pH가 수산화나트륨 용액으로 약 10.5로 조정되었다.

유화(Emulsification): 거친 에멀젼을 얻기 위하여 유상이 수상에 혼합되고 약 15분 동안 고속으로 교반되어 첨가되었다. 그 후 거친 에멀젼은 평균 구체 크기가 500나노미터 이하로 얻기 위해, 균질화되었다.

이 산물은 분석 결과 다음과 같은 조성물을 갖는다:

1. 프로포폴 함량 - 10.05mg/mL,

2. 모노라우린 함량 - 0.47mg/mL,

3. 카프르산 함량 - 0.26mg/mL,

4. pH - 7.05

5. 평균 구체 크기 - 190nm

실시예 Ⅴ

유상 제조: 대두유가 70-75℃로 가열되었고, 모노라우린 및 프로포폴이 첨가되고 혼합되었다.

수상 제조: 도입된 물 65-70℃에 글리세린을 따르는 에데트산 디나트륨이 첨가되었고 용해되도록 교반한다. 달걀 레시틴을 첨가했고, 그리고 수상에 분산되었다. 이후 pH가 수산화나트륨 용액으로 약 10.5로 조정되었다.

실시예 Ⅵ:

실시예 Ⅶ:

유상 제조: 대두유가 70-75℃로 가열되었고, 카프르산 및 프로포폴을 갖는 모노라우린의 반 용량이 첨가되었고 혼합되었다. 달걀 레시틴의 반 용량이 첨가되었고, 그리고 잘 혼합되었다.

수상 제조: 도입된 물 65-70℃에 모노라우린의 잔여 용량을 따르는 글리세린이 첨가되었고 용해되도록 교반한다. 남아있는 달걀 레시틴의 반 용량을 첨가했고, 그리고 수상에 분산되었다. 이후 pH가 수산화나트륨 용액으로 약 10.5로 조정되었다.

이 산물은 분석 결과 다음과 같은 조성물을 갖는다:

1. 프로포폴 함량 - 9.98mg/mL,

2. 모노라우린 함량 - 0.91mg/mL,

3. 카프르산 함량 - 0.23mg/mL,

4. pH - 8.02

5. 평균 구체 크기 - 198nm

실시예 Ⅷ:

수상 제조: 도입된 물 65-70℃에 글리세린과 모노라우린을 따르는 에데트산 디나트륨이 첨가되었다. 용해되도록 교반했다. 달걀 레시틴을 첨가했고, 그리고 수상에 분산되었다. 이후 pH가 수산화나트륨 용액으로 약 10.6로 조정되었다.

이 산물은 분석 결과 다음과 같은 조성물을 갖는다:

1. 프로포폴 함량 - 9.89mg/mL,

2. 모노라우린 함량 - 0.270mg/mL,

3. 카프르산 함량 - 0.254mg/mL,

4. pH - 7.96

5. 평균 구체 크기 - 190nm

실시예 Ⅸ:

유상 제조: 대두유가 첨가된 70-75℃로 유지되었다. 달걀 레시틴이 첨가되었고 혼합되었다.

수상 제조: 도입된 물 65-70℃에 글리세린이 첨가되었다. 이후 pH가 수산화나트륨 용액으로 약 10.5로 조정되었다.

유화(Emulsification): 거친 에멀젼을 얻기 위하여 유상이 수상에 혼합되고 첨가되었다. 그 후 거친 에멀젼은 평균 구체 크기가 500나노미터 이하로 얻기 위해, 균질화되었다.

방부제 첨가: 모노라우린의 필요량이 도입된 물 50℃-55℃에 분산되었고, 균질화된 에멀젼 벌크가 첨가되었다.

카프르산이 수조 30℃-35℃에 녹았고, 필요량이 균질화된 에멀젼 벌크에 첨가되었다. 잘 혼합되었다.

실시예 Ⅸ의 조성물의 분석 데이터가 표 8에 제공되었다:

외양		흰색 불투명 액체
pH		6.60
프로포폴 함량(mg/mL)		9.89
분해 산물(프로포폴 함량의 %)	벤조-퀴논	0.067
	비스-프로포폴	0.075
무지방산(mEq/L)		<10
구체 크기(㎛)		0.20
모노라우린 함량(mg/mL)		0.47
카프르산 함량(mg/mL)		0.53
방부 효능	칸디다균	*2.0x10²	**1.3x10³
		지지체 성장 없음
	대장균	*9.3x10¹	**1.5x10¹
		지지체 성장 없음
	녹농균	*1.7x10²	**5.5x10¹
		지지체 성장 없음
	포도상구균	*1.2x10²	**7.0x10¹
		지지체 성장 없음

* 최초 셈

** 24시간 후 셈

실시예 Ⅹ:

실시예 Ⅸ의 샘플들이 화학 안정성 및 방부 효능 안정성을 위해 연구되었다. 3개월 동안 40℃ 및 25℃에서 관찰된 화학 안정성은 10주간 방부 효능을 따라표 9에 제공되었다.

시험		40℃-3개월	25℃-3개월
외양		흰색 불투명 액체	흰색 불투명 액체
pH		6.45	6.45
프로포폴 함량(mg/mL)		9.81	9.86
분해 산물(프로포폴 함량의%)	벤조-퀴논	0.067	0.065
분해 산물(프로포폴 함량의%)	비스-프로포폴	0.100	0.078
무지방산(mEq/L)		<10	<10
구체 크기(㎛)		0.21	0.21
모노라우린 함량(mg/mL)		0.46	0.47
카프르산 함량(mg/mL)		0.51	0.52

시험		40℃-10주		25℃-10주
10주째에서의 방부 효능	칸디다균	*68	**65	*68	**95
		DNSG		DNSG
	대장균	*75	**<10	*75	**55
		DNSG		DNSG
	녹농균	*69	**15	*69	**10
		DNSG		DNSG
	포도상구균	*120	**130	*120	**180
		DNSG		DNSG

* 최초 셈

** 24시간 후 셈

DNSG- 지지체 성장 없음

프로포폴의 분해 산물을 보여주는 모든 예들은 3개월 동안 제조되고 저장 후 받아들일 수 있는 한계이다. 다음과 같은 방법들이 모노라우린 및 카프르산 함량을 분석하기 위해 수행되었다:

모노라우린 및 카프르산 함량 측정: 모노라우린 및 카프르산 함량은 HPLC에 의해 측정되었다. 세부사항은 다음을 따른다:

크로마토그래픽 시스템:

액체 크로마토그래프는 RI 검색기 및 150mm×4.6mm×5μ, ODS 코스모실, 칼럼으로 장착되었다. 35℃±0.5℃에서 칼럼 온도가 유지되었다.

이동 상:

메탄올: 인산염 완충액 80:20

유속:

1mL/min

실시예 ⅩⅠ: 방부 활성 측정

실시예 IV 내지 IⅩ의 조성물은 방부 활성을 측정하기 위하여 다음 절차들을 이용하여 수행되었다:

대략 ㎖당 50 - 250 콜로니 형성 단위 (cfu)㎖의 각각의 칸디다균 ATCC 10231, 녹농균 ATCC 9027, 대장균 ATCC 8739 및 포도상구균 ATCC 6538의, "항 미생물 유효성 테스트" 하에서 특정된 4가지의 표준 U. S. P. 미생물 배양액이 제품의 개별적 분액에 첨가되었으며 22±2℃에서 인큐베이트 되었다. 시험 미생물의 생존 수는 24시간 및 48시간 후 측정되었다.

진균 배양에서의 방부 효능 측정 방법

3. 플레이트-카운트 방법으로 테스트 샘플에 접종된 세포 밀도를 측정한다.

칸디다균 용:

5. 22±2℃에서 72시간 동안 무균의 sabouraud 덱스트로오스 아가 페트리 플레이트를 인큐베이트하는 플레이트-카운트 방법에 의해 24시간의 인큐베이션 후, 접종된 시험 샘플들의 세포 밀도를 측정한다.

6. 유사하게 시험 샘플들의 48 시간 인큐베이션 이후에, 이 샘플들의 3회의 10-배 연속 희석을 수행하고, 접종 48시간 후, 이 샘플들의 세포 밀도를 측정한다.

녹농균 용 :

7. 32±2℃에서 48시간 동안 소야빈 카제인 페트리 플레이트를 인큐베이트하는 플레이트-카운트 방법에 의해 24시간의 인큐베이션 후, 접종된 시험 샘플들의 세포 밀도를 측정한다.

8. 유사하게 시험 샘플들의 48 시간 인큐베이션 이후에, 이 샘플들의 3회의 10-배 연속 희석을 수행하고, 접종 48시간 후, 이 샘플들의 세포 밀도를 측정한다.

이 연구는 실시예 IV 내지 IⅩ의 조성물이 24시간 동안 10배 이하의 성장을 보여준다는 것을 보여준다.

실시예 ⅩⅡ:

양/100ml

프로로폴	1g
모노라우린	50mg
나트륨 디카노에이트	56.5mg
대두유	10g
달걀 레시틴	1.2g
글리세린	2.25g
수산화 나트륨(0.1N)*	q.s.
도입된 물	q,s, to 100ml

실시예 IⅩ의 절차는 나트륨 디카노에이트의 측정된 양이 도입된 물에 용해되고, 균질화된 에멀젼 벌크에 첨가된 카프르산 대신에 "방부제의 첨가" 단계로 기대되어 수행되었다. 이 조성물의 분석 결과 프로포폴 9.97nmg/mL을 갖는 것으로 발견되었고, 평균 구체 크기 210nm, 그리고 나트륨 디카노에이트는 카프르산 0.52nmg/mL로 표현되었다.

본 발명은 위에 설명된 상세한 설명에 한정되지 않으며, 이하의 청구범위에서 정의된 바와 같은 본 발명에서 이탈함이 없이 수많은 변형 및 응용이 가능함이 이해될 것이다.

본 발명의 장점

본 발명의 방부 시스템을 갖는 프로포폴 수중유 조성물은 라우르 산(모노라우린 및 (a) 카프르산 및/또는 그것의 가용성 알카리 염 또는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린) (b) 에데트산 및 (c) 카프르산 및/또는 그것의 가용성 알카리 염 또는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린) 및 에데트산으로부터 선택되는 요소의 모노글리세릴 에스테르를 포함한다.

본 발명의 방부 시스템은 에디테이트, 나트륨 메타비설파이트 또는 벤질 알코올과 같은 단일 방부제를 이용한 종래의 산물보다 안정한 하나 이상의 방부제를 갖는다.

본 발명의 조성물의 다른 측면은 설파이트를 사용하는 조성물보다 안정하다. 왜냐하면, 설파이트는 오랜 기간 저장되면서 물리적 및 화학적으로 불안정한 산물은 만들기 때문이다. 설파이트는 프로포폴 에멀젼에서 지질의 과산화화를 지지하고, 또한 정맥내 투여시에 알레르기 반응을 일으키는 것으로 보고되어 있다. 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물은 설파이트를 사용하는 것보다 더 낫다.

Claims

트리글리세리드 오일; 정제된 및/또는 변형된 천연 인지질로부터 선택된 유화제; 물; 긴장성 조절제; 및 라우르산의 모노글리세릴 에스테르(모노라우린) 및 다음으로부터 선택되는 요소들로 이루어지는 방부 시스템을 포함하는 안정하고, 정맥 투여가능한, 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물:

(a) 카프르산 및/또는 그것의 가용성 알카리 염 또는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린);

(b) 에데트산; 및

(c) 카프르산 및/또는 그것의 가용성 알카리 염 또는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린) 및 에데트산.
제1항에 있어서, 상기 방부 시스템은 우발적인 외부의 오염 후, 녹농균녹균(ATCC 9027), 대장균(ATCC 8739), 포도상구균(ATCC 6538), 칸디다균(ATCC 10231)의 각각이 적어도 24시간 동안에 10배 이하로 성장의 증가를 억제할 정도의 농도로 존재하는 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제1항에 있어서, 상기 방부 시스템은 라우르산 0.025 내지 0.1% w/v와 카프르산의 모노글리세릴 에스테르 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염 또는 그것의 에멀젼 조성물의 카프르산 0.025% 내지 0.1% w/v로서 표현되는 모노글리세릴 에스테 르(모노카프린), 및 에데트산 디나트륨 0.001% 내지 0.0025% w/v 로서 표현되는 에데트산을 포함하는 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제1항 또는 제3항에 있어서, 상기 방부 시스템은 라우르산 약 0.05% w/v와 카프르산의 모노글리세릴 에스테르 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염 또는 그것의 에멀젼 조성물의 카프르산 0.025% 내지 0.1% w/v로서 표현되는 모노글리세릴 에스테르(모노카프린), 및 에데트산 디나트륨 0.001% 내지 0.0025% w/v 로서 표현되는 에데트산을 포함하는 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제3항에 있어서, 상기 방부 시스템은 라우르산 0.025 내지 0.1% w/v와 카프르산의 모노글리세릴 에스테르 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염 또는 그것의 에멀젼 조성물의 카프르산 약 0.025% 로서 표현되는 모노글리세릴 에스테르(모노카프린), 및 에데트산 디나트륨 0.001% 내지 0.0025% w/v 로서 표현되는 에데트산을 포함하는 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제3항에 있어서, 상기 방부 시스템은 라우르산 0.025 내지 0.1% w/v와 카프르산의 모노글리세릴 에스테르 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염 또는 그것의 에멀젼 조성물의 카프르산 0.025% 내지 0.1% w/v 로서 표현되는 모노글리세릴 에스테르(모노카프린), 및 에데트산 디나트륨 약 0.0025% w/v 로서 표현되는 에데트산을 포함하는 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제3항에 있어서, 상기 방부 시스템은 라우르산 0.025 내지 0.1% w/v와 카프르산의 모노글리세릴 에스테르 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염 또는 그것의 에멀젼 조성물의 카프르산 0.025% 내지 0.1% w/v 로서 표현되는 모노글리세릴 에스테르(모노카프린), 및 에데트산 디나트륨 약 0.001% w/v 로서 표현되는 에데트산을 포함하는 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
전술한 항들 중 어느 한 항에 있어서, 상기 프로포폴의 양은 0.1% 내지 2% w/v 인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제8항에 있어서, 상기 프로포폴의 양은 0.5% 내지 2% w/v 인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제9항에 있어서, 상기 프로포폴의 양은 약 1% w/v 인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
전술한 항들 중 어느 한 항에 있어서, 상기 트리글리세리드 오일은 대두유, 참기름, 홍화유, 올리브 오일과 같은 식물성 오일 및/또는 중간 사슬 트리글리세리드(MCT) 오일과 같은 합성 오일로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제1항에 있어서, 상기 트리글리세리드 오일의 양은 상기 조성물의 30% w/v이하인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제12항에 있어서, 상기 트리글리세리드 오일의 양은 상기 조성물의 5% 내지 20% w/v인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제13항에 있어서, 상기 트리글리세리드 오일의 양은 상기 조성물의 약 10% w/v인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
전술한 항들 중 어느 한 항에 있어서, 상기 정제된 천연의 포스파타이드는 정제된 달걀 레시틴 또는 정제된 소야 레시틴인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제15항에 있어서, 상기 정제된 천연의 포스파타이드는 0.1 내지 3% w/v인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제16항에 있어서, 상기 정제된 천연의 포스파타이드는 약 1.2% w/v인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
전술한 항들 중 어느 한 항에 있어서, 상기 긴장설 조절제는 글리세린, 덱스트로오스 및 만니톨로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제18항에 있어서, 상기 긴장성 조절제는 글리세린인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
전술한 항들 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은

프로포폴 0.1 내지 2% w/v;

대두유 30% w/v 이하;

정제된 달걀 레시틴 0.1% 내지 3% w/v;

글리세린 약 2.25% w/v;

pH 6 내지 8.5로 조정될 정도의 수산화 나트륨 및 100부피% 채워질 수 있도록 도입된 물; 및

라우르산 0.001% 내지 0.1% w/v; 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 카프르산 0.001% 내지 0.1% w/v로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린); 및 존재하지 않는 에데트산 디나트륨으로 구성되는 방부 시스템을 포함하는 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
전술한 항들 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은

프로포폴 약 1% w/v;

대두유 약 10% w/v;

정제된 달걀 레시틴 약 1.2% w/v;

글리세린 약 2.25% w/v;

pH 6 내지 8.5로 조정될 정도의 수산화 나트륨 및 100부피%로 채워질 수 있도록 도입된 물; 및

라우르산 약 0.05% w/v; 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 카프르산 약 0.05% w/v로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린); 및 에데트산 디나트륨 약 0.001% w/v로 구성되는 방부 시스템을 포함하는 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제21항에 있어서,

상기 라우르산 약 0.05% w/v; 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 카프르산 약 0.025% w/v로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린); 및

에데트산 디나트륨 약 0.001% w/v의 양인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제21항에 있어서,

상기 라우르산 약 0.025% w/v; 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 카프르산 약 0.05% w/v로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린); 및

에데트산 디나트륨 약 0.001% w/v의 양인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제21항에 있어서,

상기 라우르산 약 0.05% w/v; 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 카프르산 약 0.05% w/v로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린); 및

존재하지 않는 에데트산 디나트륨인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제21항에 있어서,

상기 라우르산 약 0.05% w/v; 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 카프르산 약 0.025% w/v로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린); 및

에데트산 디나트륨 약 0.0025% w/v의 양인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제21항에 있어서,

상기 라우르산 약 0.05% w/v; 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 카프르산 약 0.025% w/v로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린); 및

에데트산 디나트륨 약 0.001% w/v의 양인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제21항에 있어서,

상기 라우르산 약 0.025% w/v; 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 카프르산 약 0.025% w/v로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린); 및

에데트산 디나트륨 약 0.0025% w/v의 양인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제21항에 있어서,

상기 라우르산 약 0.05% w/v; 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 존재하지 않는 카프르으로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린); 및

에데트산 디나트륨 약 0.0025% w/v의 양인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제21항에 있어서,

상기 라우르산 약 0.025% w/v; 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 존재하지 않는 카프르산으로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린); 및

에데트산 디나트륨 약 0.0025% w/v의 양인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제21항에 있어서,

상기 라우르산 약 0.025% w/v; 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 카프르산 약 0.025% w/v로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린); 및

존재하지 않는 에데트산 디나트륨인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
제21항에 있어서,

상기 라우르산 약 0.1% w/v; 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 카프르산 약 0.025% w/v로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린); 및

존재하지 않는 에데트산 디나트륨인 것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에 멀젼 조성물.
제21항에 있어서,

상기 라우르산 약 0.05% w/v; 카프르산 및/또는 그것의 용해되는 알칼리 염의 모노글리세릴 에스테르 또는 존재하지 않는 카프르산으로서 표현되는 그것의 모노글리세릴 에스테르(모노카프린); 및

에데트산 디나트륨이 약 0.001% w/v것을 특징으로 하는 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물.
다음의 단계들을 포함하는 전술한 항들 중 어느 한 항에 기재된 조성물 제조 공정:

i) 약 75℃로 유지된 트리글리세리드 오일에 프로포폴을 첨가하여 유상을 제조하는 단계;

ⅱ) 알칼리를 만들기위해, 글리세롤 및 수산화 나트륨 용액을 약 70℃ 물에 첨가하여 수상을 제조하는 단계;

ⅲ) 유화제와 제1항에 따른 방부 시스템의 각각의 성분들을 유상에 전체적으로 또는 부분적으로 첨가하고, 그리고 나머지를 수상에 첨가하는 단계;

ⅳ) 단계 ii)에서 얻어진 수상에, 단계 i)에서 얻어진 상기 유상을 교반하면서 첨가하여 거친 에멀젼을 제조하는 단계;

v) 단계 ⅳ)에서 얻어진 상기 거친 에멀젼을 500나노미터 이하의 평균 구체 크기로 균질화하는 단계;

ⅵ) 단계 v) 끝에서 얻어진 상기 조성물을 여과하는 단계 ;

ⅶ) 단계 ⅵ) 끝에서 얻어진 상기 여과액을 질소 블랭킷팅 하에서, 바이알, 앰플과 같은 용기에 충전하고, 상기 충전 용기를 밀봉하는 단계; 및

ⅷ) 상기 여과액이 충전된 밀봉 용기를 고압멸균기로 살균하는 단계.
다음의 단계들을 포함하는 전술한 항들 중 어느 한 항에 기재된 조성물 제조 공정:

i) 프로포폴 및 유화제를 약 75℃로 유지된 트리글리세리드 오일에 녹여 유상을 제조하는 단계;

ⅱ) 글리세롤 및 수산화 나트륨 용액을 약 70℃ 물에 첨가하여 수상을 제조하는 단계;

ⅱi) 단계 ii)에서 얻어진 수상에, 단계 i)에서 얻어진 상기 유상을 교반하면서 첨가하여 거친 에멀젼을 제조하는 단계;

ⅳ) 단계 ⅱi)에서 얻은 거친 에멀젼을 500나노미터 이하의 평균 구체 크기로 균질화하는 단계;

v) 전술한 항 중 어느 한항에 기재된 것으로서 선택된 방부 시스템을 첨가하는 단계;

ⅵ) 단계 v) 끝에 얻은 상기 조성물을 여과하는 단계;

ⅶ) 단계 ⅵ) 끝에 얻은 상기 여과액을 질소 블랭킷팅 하에서, 바이알, 앰플 과 같은 용기에 충전하고, 상기 충전 용기를 밀봉하는 단계; 및

ⅷ) 상기 여과액이 충전된 밀봉 용기를 고압멸균기로 살균하는 단계.
제34항에 따른 조성물을 준비하는 공정으로서, 상기 방부 시스템은 상기 에멀젼 조성물에 대하여 라우르산 약 0.05% w/v 및 카프르산 약 0.05% w/v의 모노글리세릴 에스테르를 포함하고, 에데트산은 포함하지 않는 것을 조성물 제조 공정.
안정적이고, 정맥 투여가능한, 프로포폴 수중유 에멀젼 조성물 및 상기 내용 및 예시들에 기술된 것과 같은 상기 조성물의 제조공정.