JP6532828B2 - 新生物の治療のための併用療法 - Google Patents

Description

本発明は、良性及び悪性腫瘍を含む新生物の薬剤治療に関する。

前立腺癌は、男性において診断される最も一般的な悪性腫瘍であり、西洋諸国における死亡の主要な原因である（米国癌協会、２０１０年（http://www.cancer.org/acs/groups/content/@epidemiologysurveilance/documents/document/acspc-026238.pdf））。アンドロゲン及びそれらの受容体アンドゲン受容体（ＡＲ）の刺激は、正常前立腺の発達及び機能並びに前立腺癌の発現及び進行に必須である（Basu S et al., Horm Cancer. 2010 Oct; 1(5):223-8.; Yadav N et al., Minerva Urol Nefrol. 2012 Mar; 64(1):35-49に総説されている）。転移性前立腺癌については、アンドロゲン枯渇療法が依然として標準治療となっている。最初は患者の９０％以上がアンドロゲン枯渇療法に反応するという事実にもかかわらず、臨床的利益は一時的であり、腫瘍は、不応性になり、アンドロゲン非依存性／去勢抵抗性前立腺癌（ＣＲＰＣ）に進行する（Rini Bi et al., Curr Treat Options Oncol. 2002 Oct;3(5):437-46.; Carles J et al., Clin Transl Oncol. 2012 Mar;14(3):169-76）。ＣＲＰＣは、ホルモン的去勢及び／又は現在入手可能な抗アンドロゲン薬による治療にもかかわらず、持続的なアンドロゲン受容体（ＡＲ）の活性化を伴う。前立腺癌の成長のアンドロゲン刺激及びアンドロゲン非依存性への切り替わりの分子レベルのメカニズムは、完全には明らかではない。アンドロゲン非依存性への進行は、スプライシング変異体の増幅、突然変異又は活性の変化などのアンドロゲン受容体の変化により説明することができる。他の可能なメカニズムは、アンドロゲンの腫瘍細胞による自律的産生、ＥＲＫ若しくはＡＫＴのようなキナーゼによるＡＲのリガンド非依存的活性化（Dutt SS et al., Future Oncol. 2009 Nov;5(9):1403-13及びAttar RM et al., Clin Cancer Res. 2009 May 15;15(10):3251-5に総説されている）又はアンドロゲンがペプチド成長因子及びそれらの同族受容体に関連する自己分泌ループを上方制御することにより前立腺癌の増殖を制御し得ること（De Bellis A et al., J Clin Endocrinol Metab 1996;81:4148-54）を含む。これらのすべてのメカニズムは、内分泌アンドロゲンへの非依存性をもたらす。

良性前立腺肥大（ＢＰＨ）は、加齢につれて圧倒的多数の男性で検出され得る（Parsons JK., Curr Bladder Dysfunct Rep. 2010 Dec;5(4):212-218）。ＢＰＨは、良性の間質細胞及びより少ない程度での上皮細胞の増殖に起因する前立腺の非癌性肥大と定義することができる（Foster CS. Prostate 2000;9:4-14）。これらの細胞型の両方において、テストステロンよりもアンドロゲン受容体からゆっくりと解離するので１０倍強力であるテストステロンの代謝物であるジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）は、核アンドロゲン受容体に結合して、上皮及び間質細胞に対して有糸分裂促進性である成長因子の転写をもたらす。前立腺において、テストステロンは、２型５α−レダクターゼ酵素によりＤＨＴに変換される。ＢＰＨの状態では、局所テストステロンレベルは、血清レベルの１００倍以上上昇してＤＨＴのアベイラビリティの増大をもたらし得る（Gat Y et al., Andrologia 2008 Oct;40(5):273-81）。フィナステリドなどの５α−レダクターゼ阻害薬による療法により、前立腺のＤＨＴ含量が著しく低下し、ひいては、前立腺体積及び多くの場合にＢＰＨ症状が低減する。アンドロゲンは、ＢＰＨが起こるのに必須であると考えられるが、該状態の唯一の原因であるとは思われない。

インスリン様成長因子（ＩＧＦｓ）及びそれらの結合タンパク質は、ＢＰＨを含む前立腺疾患の病因を理解するうえで重要な役割を果たし得る。いくつかの証拠により、ＢＰＨにおけるＩＧＦ軸の関与が裏付けられている。ＩＧＦリガンドは、前立腺に対する有糸分裂促進作用を有するが、ＩＧＦ結合タンパク質（ＩＧＦＢＰｓ）は、ＩＧＦｓ、他の成長因子及びステロイドホルモンのアベイラビリティを制御するそれらの能力のため増殖抑制性である（Pollak MN et al, Nat Rev 2004;4:505-518）。ＩＧＦＢＰ３は、ＢＰＨ組織における間質細胞において特に低いレベルで分泌され（Boudon C et al., J Clin Endocrinol Metab 1996;81:612-617）、これが過形成性増殖に有利であり、ＢＰＨの発現に役割を果たしている可能性がある。さらに、非常に高いレベルのＩＧＦ１並びに同時に低いレベルのテストステロン及びＤＨＴを有する、先端巨大症患者は、前立腺の肥大及び高い率のＢＰＨを示す（Colao A et al J Clin Endocrinol Metab 1999;84:1986-1991; Colao A et al, Eur J Endocrinol 2000;143:61-69）。

インスリン様成長因子（ＩＧＦ）系は、正常組織及び癌の両方の増殖の刺激及び生存に重要な役割を果たす（LeRoith D, Roberts CT Jr., Cancer Lett 2003;195:127-37に総説されている）。高い循環ＩＧＦ−１濃度は、いくつかの臨床及び疫学研究において前立腺癌のリスクの増大と関連付けられた（Price AJ et al., Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 2012 Sep;21(9):1531-41; Roddam AW et al., Ann Intern Med 2008;149(7):461-71）。前立腺上皮細胞において、ＩＧＦ−１発現の増大は、より高い率の増殖及び／又はより低い率のアポトーシスをもたらすことが示された（Takahara K et al., Prostate. 2011 Apr;71(5):525-37）。ＩＧＦ−２遺伝子座の刷り込みの喪失及びＩＧＦ−２の発現の増大は、前立腺癌を含む多くの癌において認められ（Jarrard DF et al., Clinical Cancer Research 1995;1,1471-1478.; Fu VX et al., Cancer Research 2008;68,6797-6802）、前立腺癌を発現するリスクに関連している可能性がある（Belharazem D et al, Endocrine Connections 2012;1,87-94）。さらに、ＩＧＦ−１及びＩＧＦ−２の発現だけでなく、それらの受容体ＩＧＦ−１Ｒも、進行前立腺腫瘍において上昇することが示された（Cardillo, MR et al., Anticancer Res. 2003 23,3825-3835; Liao, Y et al., Hum. Pathol. 2005;36(11),1186-1196; Hellawell GO et al., Cancer Res. 2002 May 15;62(10):2942-50; Turney BW et al., BJU Int. 2011 May;107(9):1488-99; Krueckl SL et al., Cancer Res. 2004 Dec 1;64(23):8620-9; Figueroa, JA et al., Cancer Invest. 2001;19(1),28-34; Ryan, CJ et al., Urol. Oncol. 2007;25,134-140）。再発及びアンドロゲン非依存性癌において、ＡＫＴリン酸化の増加も示された（Graff JR et al.,. J. Biol. Chem 2000;275:24500-5; Murillo H et al., Endocrinology 2001;142:4795-805）。

去勢抵抗性前立腺癌は、アンドロゲン／ＡＲ軸の持続的操作に感受性であって、抵抗性ではないことが示された。アンドロゲン軸は、抗アンドロゲン薬（ニルタミド、エンザルタミド）、アンドロゲン合成阻害薬（ケトナゾール、アビラテロン酢酸塩）、コルチコステロイド（デキサメタゾン、プレドニゾン）又はストロゲン治療を用いて操作することができる。去勢不応性疾患の出現後、タキサンベースの化学療法が治療効果があり、生存期間を延長させることが示された。ドセタキセル投与で進行した患者は、副作用を抑制するためにグルココルチコイドとの共投与を必要とする選択的シトクロムＰ４５０ １７A１阻害薬であるアビラテロン酢酸塩から恩恵を受けることが示された。エンザルタミド（ＭＤＶ−３１００）は、現在入手できるＡＲ拮抗薬よりも効果的にＡＲシグナル伝達を遮断する新規なＡＲ拮抗薬であり（Tran et al., Science 2009;324(5928):787-790）、印象的な抗腫瘍活性及び全生存期間に対するアビラテロンと同様の影響を示した。

ＩＧＦの作用に対する拮抗薬及び癌療法におけるそれらの使用は、当技術分野で記載された。ＩＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害薬の開示については、国際公開第２００９／００９０１６号及び国際公開第２０１０／０９９１３９号を参照のこと。ＩＧＦ受容体に対する抗体の開示については、国際公開第２００２／５３５９６号、国際公開第２００３／０９３３１７号、国際公開第２００３／１０６６２１号、国際公開第２００６／０１３４７２号、国際公開第２００６／０６９２０２号を参照のこと。ＩＧＦリガンドに対する抗体の開示については、国際公開第２００３／０９３３１７号、国際公開第２００５／０２８５１５号、国際公開第２００７／０２２１７２号、国際公開第２００７／０７０４３２号、国際公開第２００８／１５５３８７号、国際公開第２００９／１３７７５８号、国際公開第２０１０／０６６８６８号を参照のこと。ＩＧＦ−１受容体抗体（国際公開第２００８／０９８９１７号、国際公開第２００９／１３７３７８号）及びＩＧＦリガンド抗体（国際公開第２００７／１１８２１４号、国際公開第２００８／１５５３８７号、国際公開第２００９／１３７７５８号、国際公開第２０１０／０６６８６８号）が、とりわけ、前立腺癌の治療における使用について提案されている。

最先端技術もさらなる刊行物において述べられている（Pollak MN et al., Cancer Metastasis Rev 1998;17:383-90; Djavan B et al., World J Urol 2001;19:225-33; Wolk A et al., J Natl Cancer Inst 1998;90:911-5; Jiang YG et al., Int. J. Urol. 2007;14:1034-9; Lin HK et al., Proc. Natl Acad. Sci. USA 2001;98:7200-5; Wen Y et al., Cancer Res. 2000;60:6841-5; Plymate SR et al., Prostate 2004;61:276-90; AA Lubic et al., Endocr Relat Cancer ERC-12-0250 2013, first published on 14 January; Nickerson T et al. Cancer Res. 2001;61(16),6276-6280; Pandini G et al., Cancer Res., 2005 March 1;65;1849; Bedolla R et al. Clin Cancer Res. 2007 Jul 1;13(13):3860-7; Carver BS et al., Cancer Cell 2011 May 17;19,575-586; Mulholland DJ et al., Cancer Cell, 2011 June 14;19,792-804）。

良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺癌、とりわけＣＲＰＣを含む前立腺新生物の早期検出及び治療が進歩したにもかかわらず、療法の改善がかなり必要である。

ＶＣａＰ、ＭＤＡ ＰＣａ ２ｂ及びＤＵＣａＰ細胞の増殖に対するＩＧＦ及びＡＲシグナル伝達遮断の抑制効果を示す図である。ＶｃａＰ、ＭＤＡ ＰＣａ ２ｂ及びＤＵＣａＰ細胞をＭＤＶ−３１００及びＩＧＦリガンド中和抗体により単剤として及び組合せで処理した。図１に１０％ＦＣＳ含有増殖培地中の前立腺癌由来のＶＣａＰ細胞（図１Ａ＋１Ｂ）、ＭＤＡ ＰＣａ ２ｂ細胞（図１Ｃ＋１Ｄ）及びＤＵＣａＰ細胞（図１Ｅ＋１Ｆ）の２次元増殖に対する単独及び組合せでのＩＧＦ ｍＡｂ＿１（図１Ａ＋１Ｃ＋１Ｅ）及びＩＧＦ ｍＡｂ＿２（図１Ｂ＋１Ｄ＋１Ｆ）抗体並びにＭＤＶ−３１００の抑制効果を示す。３つの細胞系すべてにおいて、ＩＧＦ抗体及びＭＤＶ−３１００の両方による単剤処理は、増殖の完全な抑制につながる両剤の組合せにより増大し得る細胞増殖の抑制をもたらした。 ＶＣａＰ、ＭＤＡ ＰＣａ ２ｂ及びＤＵＣａＰ細胞の増殖に対するＩＧＦシグナル伝達及びアンドロゲン合成遮断の抑制効果を示す図である。図２に１０％ＦＣＳ含有増殖培地中の前立腺癌由来のＶＣａＰ、ＭＤＡ ＰＣａ ２ｂ及びＤＵＣａＰ細胞の２次元及び３次元増殖に対する単剤としての並びに組合せでのＩＧＦ ｍＡｂ＿１及びＩＧＦ ｍＡｂ＿２抗体並びにアビラテロン酢酸塩（ＡＡ）の効果を示す。パネル（Ａ）に２次元細胞増殖アッセイにおけるＩＧＦ ｍＡｂ＿１によるＶＣａＰ細胞の処理の結果を示す。ＩＧＦ ｍＡｂ＿２は、（Ｂ）におけるＶＣａＰ細胞の処理のために用いた。パネルＣ（ＩＧＦ ｍＡｂ＿１）及びＤ（ＩＧＦ ｍＡｂ＿２）にＭＤＡ ＰＣａ ２ｂ細胞の結果を示す。ＩＧＦ ｍＡｂ＿１によるＤＵＣａＰ細胞の処理をパネルＥに、ＩＧＦ ｍＡｂ＿２によるそれをパネルＦに示す。ＩＧＦ ｍＡｂ＿１及びｍＡｂ＿２による単剤処理は、７０％〜９０％の細胞増殖の抑制をもたらした。アビラテロン酢酸塩処理は、完全な抑制のために必要なＡＡの用量を低下させる、いずれかの抗体との組合せにより増大し得るより高い濃度での細胞増殖の抑制をもたらした。３次元軟寒天細胞増殖アッセイ（Ｇ）において、ＶＣａＰ細胞をアビラテロン酢酸塩及びＩＧＦ ｍＡｂ＿２により処理した。２次元で観測された結果と同様に、ＩＧＦ ｍＡｂ＿２による単剤処理は、細胞増殖の９６％の抑制をもたらす。アビラテロン酢酸塩処理は、ＩＧＦ ｍＡｂ＿２との組合せにより増大し得るより高い濃度での細胞増殖の抑制をもたらした。 ＩＧＦ及びＡＲシグナル伝達阻害後のＶＣａＰ、ＭＤＡ ＰＣａ ２ｂ及びＤＵＣａＰ細胞におけるタンパク質解析を示す図である。図３にウエスタンブロット解析により評価したＶＣａＰ、ＭＤＡ ＰＣａ ２ｂ及びＤＵＣａＰ細胞におけるＩＧＦ−１Ｒ、ＡＲ及びＰＴＥＮレベル並びにＡＫＴリン酸化に対する単独及び組合せでのＩＧＦ ｍＡｂ＿１及びＭＤＶ−３１００の効果を示す。細胞を６ウェルプレートに播種し、２４時間処理した。（Ａ）処理済みＶＣａＰ細胞から調製した溶解物を、ＩＧＦ−１Ｒ、ＡＲ、ＰＴＥＮ及びＡＫＴのタンパク質発現並びにＡＫＴ−Ｓｅｒ４７３のリン酸化について無処理対照及び非感受性ＰＣ−３細胞と比較した。無処理及び処理ＭＤＡ ＰＣａ ２ｂ（Ｂ）及びＤＵＣａＰ（Ｃ）細胞のタンパク質発現及びＡＫＴリン酸化を評価し、ＶＣａＰ細胞のそれと比較した。無処理ＰＣ−３細胞を対照とした。重要なことに、ＶＣａＰ、ＭＤＡ ＰＣａ ２ｂ及びＤＵＣａＰ細胞は、非感受性細胞系ＰＣ−３と異なり、ＩＧＦ１−Ｒ、ＡＲ及びＰＴＥＮを発現することが示された。ＭＤＶ−３１００処理は、ＡＲタンパク質レベルをわずかに増加させ、これは、タンパク質の安定化に起因し得る。同時に、ＩＧＦ−１Ｒレベルは、ＭＤＶ−３１００処理によりもわずかに低下した。両剤の組合せは、抗体又はＭＤＶ−３１００処理単独よりもＡＫＴリン酸化の完全な抑制をもたらした。 ＩＧＦ ｍＡｂ＿１及びＭＤＶ−３１００の単剤及び組合せ処理後のＩＧＦシグナル伝達経路阻害を示す図である。図４に１２０時間の処理にわたるＶＣａＰ細胞におけるＩＧＦ−１Ｒレベル及びＡＫＴリン酸化に対する単剤として及び組合せで用いたＩＧＦ ｍＡｂ＿１及びＭＤＶ−３１００の効果を示す。ＶＣａＰ細胞を６ウェルプレートに播種し、単剤として又は組合せでＭＤＶ−３１００及びＧＦ ｍＡｂ＿１により２４、４８、７２、９６及び１２０時間にわたり処理した。処理済み細胞から調製した溶解物を、ＡＫＴ−Ｓｅｒ４７３のリン酸化について無処理対照と比較した。両剤の組合せは、抗体又はＭＤＶ−３１００処理単独よりもＡＫＴリン酸化のより長時間持続性抑制をもたらした。 ＩＧＦ ｍＡｂ＿１及びＭＤＶ−３１００の単剤及び組合せ処理後のＶＣａＰ細胞の増殖活性の低下を示す図である。Ｈ³−チミジン取込みアッセイを用いてＶＣAＰ細胞の増殖をモニターした。９６時間にわたる単剤としての１０μＭのＭＤＶ−３１００又は１μＭのＩＧＦ ｍＡｂ＿１による処理は、増殖活性を約５０％低下させた。ＩＧＦ ｍＡｂ＿１及びＭＤＶ−３１００の組合せは、無処理対照と比較してチミジン取込みを９５％以上減少させた。 ＩＧＦ ｍＡｂ＿１及びＭＤＶ−３１００の単剤及び組合せ処理後のＶＣａＰ細胞の増殖速度の低減を示す図である。（A）顕微鏡分析で観察された細胞形態及び細胞増殖に対する単剤として及び組み合わせて用いた１μＭのＩＧＦ ｍＡｂ＿１及び１０μＭのＭＤＶ−３１００の効果。（Ｂ）無処理対照と比較したＶＣａＰ細胞の世代時間に対する１０μＭのＭＤＶ−３１００の効果。 ＩＧＦ ｍＡｂ＿１及びＭＤＶ−３１００の組合せ処理がＶＣａＰ細胞におけるアポトーシスの誘導を増加させることを示す図である。カスパーゼ３活性を、最長９６時間にわたる単剤としての及び組合せでの１０μＭのＭＤＶ−３１００及び１μＭのｍＡｂによる処理によるＶＣａＰ細胞におけるアポトーシスの誘導の尺度として用いた。ＭＤＶ−３１００処理は処理の９６時間以内にカスパーゼ３活性を誘導しなかったのに対して、ＩＧＦ ｍＡｂ＿１処理によりアポトーシス事象の増加が認められた。両剤の組合せは、カスパーゼ３活性の誘導に対する相乗効果を示し、これは、対照と比較して約９倍増加し、ＩＧＦ ｍＡｂ＿１処理と比較して約２．５倍高かった。 ＭＤＶ−３１００及びＩＧＦ ｍＡｂ＿１により処理したＶＣａＰ細胞の細胞周期プロファイルを示す図である。フローサイトメトリーにより検出されたヨウ化プロピジウム染色により測定された単剤としての及び組合せでの１０μＭのＭＤＶ−３１００及び１μＭのｍＡｂによる２４時間、４８時間及び７２時間の処理後のＶＣａＰ細胞の細胞周期プロファイル。左側の第１の集団は、アポトーシス細胞を表すサブＧ１集団であり、第２の集団は、Ｇ１／Ｇ０ピークを示し、右の灰色の集団は、Ｓ期にある細胞を示し、右側の集団は、細胞周期のＧ２／Ｍ期にある細胞を表す。ＩＧＦ ｍＡｂ＿１により処理したＶＣａＰ細胞において、並びにＩＧＦ ｍＡｂ＿１及びＭＤＶ−３１００の組合せにより処理した細胞においてより大きい程度に、アポトーシス細胞が時間とともに増加するのに対して、ＭＤＶ−３１００により処理したＶＣａＰ細胞においては、この集団は変化しない。その代わりに、ＭＤＶ−３１００処理は、無処理対照と比較してＧ１／Ｇ０集団を増加させる。 ＩＧＦシグナル伝達阻害の後のアポトーシス及び細胞周期のタンパク質解析を示す図である。ウエスタンブロット解析により解析した場合の８時間、２４時間、４８時間及び７２時間の処理後のＡＫＴリン酸化、ＰＡＲＰ切断、ｐ２１、ＣＤＫ２、サイクリンＥ及びＰＣＮＡレベルに対する単剤としての及び組合せでの１０μＭのＭＤＶ−３１００及び１μＭのＩＧＦ ｍＡｂ＿１による処理の効果。ＩＧＦ ｍＡｂ＿１処理は、ＡＫＴリン酸化の阻害をもたらし、組み合わせたＩＧＦ ｍＡｂ＿１及びＭＤＶ−３１００処理は、ＰＡＲＰ切断及びサイクリンＥレベルを増加させたが、ＣＤＫ２及びＰＣＮＡレベルを低下させた。ＭＤＶ−３１００処理は、８及び２４時間にｐ２１レベルを増加させた。

発明の簡単な説明
１つの態様において、本発明は、アンドロゲン受容体拮抗薬と組み合わせて良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺癌、とりわけＣＲＰＣを含む前立腺新生物の治療に用いるインスリン様成長因子（ＩＧＦ）受容体拮抗薬に関する。
他の実施形態において、本発明は、治療上有効量のＩＧＦ受容体拮抗薬をそれを必要とする患者に投与すること、及び治療上有効量のアンドロゲン受容体拮抗薬を同じ患者に同じ日に、又はＩＧＦ受容体拮抗薬の投与の１、２、３、４、５、６若しくは７日前若しくは後にさらに投与することを含む、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺癌、とりわけＣＲＰＣを含む前立腺新生物の治療の方法に関する。

発明の詳細な説明
本発明は、前立腺新生物の治療に関する。
「前立腺新生物」により、本発明の態様は、前立腺新生物が、良性及び悪性腫瘍を含む前立腺癌、とりわけ去勢抵抗性前立腺癌であり、並びに良性前立腺肥大である場合も含む。
１つの態様において、本発明は、前立腺癌の治療に用いるインスリン様成長因子（ＩＧＦ）受容体拮抗薬に関する。他の実施形態において、前立腺癌は、ホルモン感受性前立腺癌である。他の実施形態において、前立腺癌は、複合アンドロゲン遮断後の前立腺癌である。他の実施形態において、前立腺癌は、抗血管新生療法により治療された前立腺癌である。他の実施形態において、前立腺癌は、化学療法薬により治療された又は治療される。他の実施形態において、前立腺癌は、放射線療法により治療された又は治療される前立腺癌である。他の実施形態において、前立腺癌は、骨喪失療法、例えば、デノスマブ及びホルモン除去により治療された又は治療される前立腺癌である。

他の実施形態において、前立腺癌は、去勢抵抗性前立腺癌（ＣＲＰＣ）である。他の実施形態において、去勢抵抗性前立腺癌は、化学療法薬により治療された又は治療される。他の実施形態において、去勢抵抗性前立腺癌は、放射線療法により治療された又は治療される。他の実施形態において、前立腺癌は、ドセタキセル前又は後の状況における去勢抵抗性前立腺癌である。他の実施形態において、前立腺癌は、カバジタキセル治療後の去勢抵抗性前立腺癌である。他の実施形態において、前立腺癌は、アンドロゲン合成阻害薬、例えば、アビラテロン酢酸塩による治療後の去勢抵抗性前立腺癌である。他の実施形態において、前立腺癌は、アンドロゲン受容体拮抗薬、例えば、エンザルタミドによる治療後の去勢抵抗性前立腺癌である。他の実施形態において、前立腺癌は、免疫調節薬、例えば、シプリューセル−Ｔによる治療後の去勢抵抗性前立腺癌である。

他の態様において、本発明は、アンドロゲン受容体拮抗薬と組み合わせて前立腺癌の治療に用いるインスリン様成長因子（ＩＧＦ）受容体拮抗薬に関する。他の実施形態において、前立腺癌は、ホルモン感受性前立腺癌である。他の実施形態において、前立腺癌は、複合アンドロゲン遮断後の前立腺癌である。他の実施形態において、前立腺癌は、抗血管新生療法により治療された前立腺癌である。他の実施形態において、前立腺癌は、化学療法薬により治療された又は治療される。他の実施形態において、前立腺癌は、放射線療法により治療された又は治療される前立腺癌である。他の実施形態において、前立腺癌は、骨喪失療法、例えば、デノスマブ及びホルモン除去により治療された又は治療される前立腺癌である。
他の実施形態において、前立腺癌は、去勢抵抗性前立腺癌である。他の実施形態において、去勢抵抗性前立腺癌は、化学療法薬により治療された又は治療される。他の実施形態において、去勢抵抗性前立腺癌は、放射線療法により治療された又は治療される。他の実施形態において、前立腺癌は、ドセタキセル前又は後の状況における去勢抵抗性前立腺癌である。他の実施形態において、前立腺癌は、カバジタキセル治療後の去勢抵抗性前立腺癌である。他の実施形態において、前立腺癌は、アンドロゲン合成阻害薬、例えば、アビラテロン酢酸塩による治療後の去勢抵抗性前立腺癌である。他の実施形態において、前立腺癌は、アンドロゲン受容体拮抗薬、例えば、エンザルタミドによる治療後の去勢抵抗性前立腺癌である。他の実施形態において、前立腺癌は、免疫調節薬、例えば、シプリューセル−Ｔによる治療後の去勢抵抗性前立腺癌である。
他の態様において、本発明は、良性前立腺肥大の治療に用いるインスリン様成長因子（ＩＧＦ）受容体拮抗薬に関する。他の態様において、本発明は、アンドロゲン受容体拮抗薬と組み合わせて良性前立腺肥大の治療に用いるインスリン様成長因子（ＩＧＦ）受容体拮抗薬に関する。

本発明の状況におけるＩＧＦ受容体拮抗薬は、ＩＧＦ受容体シグナル伝達を直接的若しくは間接的に妨げ、減少させ又は遮断する化合物である。好ましくは、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、ＩＧＦリガンドのその受容体への結合を減少させ若しくは遮断する、又はＩＧＦ受容体のチロシンキナーゼ活性を阻害する化合物である。

さらなる実施形態において、本発明のＩＧＦ受容体拮抗薬は、ＩＧＦリガンドに結合し、ひいては受容体へのリガンドの結合を減少させる又は妨げる抗体である。他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、ＩＧＦ−１受容体に結合し、ひいては受容体へのリガンドの結合を減少させる又は妨げる抗体である。受容体−リガンド結合を遮断することにより、受容体のチロシンキナーゼ活性によるリガンド誘導受容体シグナル伝達が減少又は妨げられる。そのような抗体は、一般的に中和抗体と呼ばれる。他の態様において、本発明は、インスリン様成長因子、ＩＧＦ−１及びＩＧＦ−２の成長促進特性を中和するＩＧＦ受容体拮抗薬に関する。

「抗体」という用語は、抗体、抗体断片、抗体様分子及び上記のいずれかを含むコンジュゲートを含む。抗体は、ポリ又はモノクローナル、キメラ、ヒト化、ヒト、単一、二重又は多重特異性抗体を含むが、これらに限定されない。「抗体」という用語は、それらがリンパ球により産生され、例えば血清中に存在するときの完全免疫グロブリン、ハイブリドーマ細胞系により分泌されたモノクローナル抗体、免疫グロブリン又はモノクローナル抗体の結合特異性を有する、宿主細胞中で組換え発現により産生されたポリペプチド、及びそれらの結合特異性を保持しながらさらなる処理によりそのような免疫グロブリン、モノクローナル抗体又はポリペプチドから得られた分子を含むものとする。特に、「抗体」という用語は、２つの重鎖及び２つの軽鎖を含む完全免疫グロブリンを含む。他の実施形態において、該用語は、Ｆａｂ断片のような免疫グロブリンの断片を含む。他の実施形態において、「抗体」という用語は、単鎖抗体（ｓｃＦｖ）、単一ドメイン抗体などのような、免疫グロブリン（immunobulin）に由来する１つ又は複数の可変ドメインを有するポリペプチドを含む。

さらなる実施形態において、本発明のＩＧＦ受容体拮抗薬は、ＩＧＦ−１に対する抗体、ＩＧＦ−２に対する抗体、ＩＧＦ−１及びＩＧＦ−２の両方に結合する抗体、ＩＧＦ−１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）に対する抗体又はＩＧＦ−１Ｒチロシンキナーゼ活性の阻害薬である。
他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、配列番号１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２（ＨＣＤＲ２）及び配列番号３（ＨＣＤＲ３）の重鎖相補性決定領域並びに配列番号４（ＬＣＤＲ１）、配列番号５（ＬＣＤＲ２）及び配列番号６（ＬＣＤＲ３）の軽鎖決定領域を有するＩＧＦリガンド抗体である。
他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、配列番号１１（ＨＣＤＲ１）、配列番号１２（ＨＣＤＲ２）及び配列番号１３（ＨＣＤＲ３）の重鎖相補性決定領域並びに配列番号１４（ＬＣＤＲ１）、配列番号１５（ＬＣＤＲ２）及び配列番号１６（ＬＣＤＲ３）の軽鎖決定領域を有するＩＧＦリガンド抗体である。
他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、配列番号２１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２２（ＨＣＤＲ２）及び配列番号２３（ＨＣＤＲ３）の重鎖相補性決定領域並びに配列番号２４（ＬＣＤＲ１）、配列番号２５（ＬＣＤＲ２）及び配列番号２６（ＬＣＤＲ３）の軽鎖決定領域を有するＩＧＦリガンド抗体である。

他の好ましい実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、配列番号３１（ＨＣＤＲ１）、配列番号３２（ＨＣＤＲ２）及び配列番号３３（ＨＣＤＲ３）の重鎖相補性決定領域並びに配列番号３４（ＬＣＤＲ１）、配列番号３５（ＬＣＤＲ２）及び配列番号３６（ＬＣＤＲ３）の軽鎖決定領域を有するＩＧＦリガンド抗体である。これらの相補性決定領域を含む抗体の例は、本明細書でＩＧＦ ｍＡｂ＿１と呼ぶ。
他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、配列番号７の重鎖可変領域及び配列番号８の軽鎖可変領域を有するＩＧＦリガンド抗体である。
他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、配列番号１７の重鎖可変領域及び配列番号１８の軽鎖可変領域を有するＩＧＦリガンド抗体である。
他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、配列番号２７の重鎖可変領域及び配列番号２８の軽鎖可変領域を有するＩＧＦリガンド抗体である。
他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、配列番号３７の重鎖可変領域及び配列番号３８の軽鎖可変領域を有するＩＧＦリガンド抗体である。これらの可変領域を含む抗体の例は、本明細書でＩＧＦ ｍＡｂ＿１と呼ぶ。

他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、配列番号４１の重鎖可変領域及び配列番号４２の軽鎖可変領域を有するＩＧＦリガンド抗体である。
他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、配列番号４３の重鎖可変領域及び配列番号４４の軽鎖可変領域を有するＩＧＦリガンド抗体である。
他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、配列番号９の重鎖及び配列番号１０の軽鎖を有するＩＧＦリガンド抗体である。

他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、配列番号１９の重鎖及び配列番号２０の軽鎖を有するＩＧＦリガンド抗体である。
他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、配列番号２９の重鎖及び配列番号３０の軽鎖を有するＩＧＦリガンド抗体である。
他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、配列番号３９の重鎖及び配列番号４０の軽鎖を有するＩＧＦリガンド抗体である。これらの重鎖及び軽鎖を含む抗体の例は、本明細書でＩＧＦ ｍＡｂ＿１と呼ぶ。
他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、配列番号４５の重鎖及び配列番号４６の軽鎖を有するＩＧＦ受容体抗体である。
他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、フィギツムマブ、ダロツズマブ、シクスツムマブ、ロバツムマブ又はガニツマブである。
他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、リンシチニブである。

好ましくは、ＩＧＦ受容体拮抗薬は、上文で定義したＩＧＦ ｍＡｂ＿１である。前述の抗体の製造及び治療上の使用は、国際公開第２００２／５３５９６号、国際公開第２００７／０７０４３２号、国際公開第２００８／１５２４２２号、国際公開第２００８／１５５３８７号及び国際公開第２０１０／０６６８６８号に開示されている。
１つの実施形態において、抗体は、哺乳類宿主細胞において組換え発現により産生され、一連のクロマトグラフ及び非クロマトグラフステップにより精製され、１０ｍｇ／ｍｌの抗体濃度の非経口（静脈内）注入又は注射用の水性緩衝組成物に製剤化され、前記緩衝液は、例えば、２５ｍＭ クエン酸Ｎａ ｐＨ６、１１５ｍＭ ＮａＣｌ及び０．０２％ポリソルベート２０を含む。静脈内注入のために、医薬組成物は、生理的溶液、例えば、０．９％塩化ナトリウム又はＧ５溶液で希釈することができる。

抗体は、１回若しくは複数回の別個の投与により、又は持続注入、例えば、１時間にわたる注入により、１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇの用量で患者に投与することができる。一般的な治療計画は、通常、毎週１回から３週間ごとに１回までの抗体の投与を含む。例えば、毎週の用量は、５、１０又は１５ｍｇ／ｋｇであり得る。好ましくは、抗体は、１０ｍｇ／ｍｌのＩＧＦ ｍＡｂ＿１の濃度で準備する。抗体は、好ましくは、疾患の進行まで週１回反復する、１時間ｉｖ注入により７５０ｍｇ（１０００ｍｇまで）の総用量として患者に投与することができる。

ＩＧＦ受容体拮抗薬は、アンドロゲン受容体拮抗薬と組み合わせて患者に投与する。「組み合わせて」は、両方の作用機序の複合効果によってもたらされる治療効果を達成するために両薬物を同じ患者に特定の時間枠内に投与することを意味する。１つの態様において、アンドロゲン受容体拮抗薬をＩＧＦ受容体拮抗薬と同じ日に投与する。本発明の他の態様において、アンドロゲン受容体拮抗薬を、ＩＧＦ受容体拮抗薬の投与の１、２、３、４、５、６又は７日前又は後に投与する。
他の実施形態において、両活性化合物は同じ医薬組成物内に存在する。したがって、他の実施形態において、本発明は、ＩＧＦ受容体拮抗薬及びアンドロゲン受容体拮抗薬を薬学的に許容される担体と一緒に含む、医薬組成物に関する。

アンドロゲン受容体拮抗薬（ＡＲ拮抗薬）は、アンドロゲン受容体（ＡＲ）シグナル伝達を遮断する化合物である。アンドロゲン受容体拮抗薬は、アンドロゲンが反応性組織においてそれらの生物学的作用を発現することを妨げる。そのような化合物は、それぞれの受容体を遮断し、受容体上の結合部位について競合し、受容体の核移行、ＤＮＡ結合に影響を及ぼす、又はアンドロゲン産生に影響を及ぼすことによりアンドロゲン経路を変化させ得る。本発明の状況において、アンドロゲン受容体拮抗薬は、抗アンドロゲン薬、アンドロゲン合成阻害薬、１７α−ヒドロキシラーゼ／Ｃ１７，２０リアーゼ（ＣＹＰ１７Ａ１）阻害薬、５−アルファ−レダクターゼ阻害薬、コルチコステロイド、黄体化ホルモン放出ホルモン（ＬＨ−ＲＨ）作動薬又はエストロゲン作動薬であり得る。
他の実施形態において、アンドロゲン受容体拮抗薬は、フルタミド、ニルタミド、エンザルタミド、ビカルタミド、ケトナゾール、アビラテロン、アビラテロン酢酸塩、オルテロネル、フィナステリド、デュタステリド、ベクスロステリド、イゾンステリド、ツロステリド、エピステリド、デキサメタゾン、プレドニゾン、ロイプロリド、ゴセレリン、トリプトレリン、ヒストレリン又はエストロゲンである。

他の実施形態において、アンドロゲン受容体拮抗薬は、エンザルタミドである（Tran et al., Science 2009,324(5928):787-790）。エンザルタミドは、例えば、Ｘｔａｎｄｉ（登録商標）の名称のもとに例えば、Ｍｅｄｉｖａｔｉｏｎ社又はＡｓｔｅｌｌａｓ社から得ることができる。エンザルタミドは、好ましくは治療の各サイクル中に１日１回１６０ｍｇの用量として投与する。
他の実施形態において、アンドロゲン受容体拮抗薬は、例えば、アビラテロン酢酸塩の形のアビラテロンである（Agarwal et al., Future Oncology 2010,6(5):665-679）。アビラテロンは、例えば、Ｊａｎｓｓｅｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．から得ることができる。
アンドロゲン受容体拮抗薬の製造、製剤及び使用は、選択される実際の化合物に依存し、現況技術で見いだすことができる。

本発明の他の実施形態は、ＩＧＦ受容体拮抗薬と組み合わせて前立腺癌の治療に用いるアンドロゲン受容体拮抗薬である。他の実施形態において、ＩＧＦ受容体拮抗薬との組合せでのアンドロゲン受容体拮抗薬の使用は、良性前立腺肥大の治療のためである。さらなる実施形態において、前記アンドロゲン受容体拮抗薬は、フルタミド、ニルタミド、エンザルタミド、ビカルタミド、ケトナゾール、アビラテロン酢酸塩、オルテロネル、フィナステリド、デュタステリド、ベクスロステリド、イゾンステリド、ツロステリド、エピステリド、デキサメタゾン、プレドニゾン、ロイプロリド、ゴセレリン、トリプトレリン、ヒストレリン又はエストロゲンである。

本発明の他の実施形態は、治療上有効量のＩＧＦ受容体拮抗薬をそれを必要とする患者に投与すること、及び治療上有効量のアンドロゲン受容体拮抗薬を同じ患者に同じ日に、又はＩＧＦ受容体拮抗薬の投与の１、２、３、４、５、６若しくは７日前若しくは後にさらに投与することを含む、前立腺新生物の治療の方法に関する。
「前立腺新生物」により、本発明のこの態様は、前立腺新生物が、良性及び悪性腫瘍を含む前立腺癌、とりわけ去勢抵抗性前立腺癌であり、並びに良性前立腺肥大である場合も含む。
投与するＩＧＦ又はアンドロゲン受容体拮抗薬の「治療上有効量」は、前立腺新生物、特に去勢抵抗性前立腺癌又は良性前立腺肥大を予防、改善又は治療するために必要な最小量である。
他の実施形態において、本発明は、ＩＧＦ受容体拮抗薬をアンドロゲン受容体拮抗薬と組み合わせて用いる、前立腺新生物の治療用の医薬の製造のためのＩＧＦ受容体拮抗薬の使用に関する。

「前立腺新生物」により、本発明のこの態様は、前立腺新生物が、良性及び悪性腫瘍を含む前立腺癌、とりわけ去勢抵抗性前立腺癌であり、並びに良性前立腺肥大である場合も含む。
他の実施形態において、本発明は、アンドロゲン受容体拮抗薬をＩＧＦ受容体拮抗薬と組み合わせて用いる、前立腺癌新生物の治療用の医薬の製造のためのアンドロゲン受容体拮抗薬の使用に関する。
「前立腺新生物」により、本発明のこの態様は、前立腺新生物が、良性及び悪性腫瘍を含む前立腺癌、とりわけ去勢抵抗性前立腺癌であり、並びに良性前立腺肥大である場合も含む。

材料及び方法
化合物
ＩＧＦ ｍＡｂ＿１は、配列番号３９の重鎖及び配列番号４０の軽鎖を有するＩＧＦリガンドに対する抗体である。その製造は、国際公開第２０１０／０６６８６８号に開示されている。
ＩＧＦ ｍＡｂ＿２は、配列番号２９の重鎖及び配列番号３０の軽鎖を有するＩＧＦリガンドに対する抗体である。その製造は、国際公開第２０１０／０６６８６８号に開示されている。

細胞培養
ＤＵ−１４５（ＡＴＣＣ、ＨＴＢ−８１）、ＢＭ−１６０４（ＤＳＭＺ、ＡＣＣ２９８）、ＰＣ−３（ＡＴＣＣ、ＣＲＬ−１４３５）、２２Ｒｖ１（ＡＴＣＣ、ＣＲＬ−２５０５）、ＬＮＣａＰ（ＡＴＣＣ、ＣＲＬ−１７４０）及びＤＵＣａＰ細胞（Ｐｒｏｆ ＫＪ．Ｐｉｅｎｔａ、Ｈａｌｌｙｍ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ、Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、Ｓｅｏｕｌ、Ｋｏｒｅａの実験室で得られた；Lee YG et al., In Vivo 2001;15(2):157-62）は、１０％熱不活性化ウシ胎児血清（ＦＣＳ；ＪＲＨ、＃１２１０３）及び２ｍＭ Ｌ−グルタミン（ＧＩＢＣＯ、＃２５０３０）を添加したＲＰＭＩ１６４０増殖培地（ＧＩＢＣＯ、＃３１８７０）中で培養し、ＮＣＩ−Ｈ６６０（ＡＴＣＣ、ＣＲＬ−５８１３）は、５％ＦＣＳ、４ｍＭ Ｌ−グルタミン、５μｇ／ｍｌインスリン、０．０１ｍｇ／ｍＬトランスフェリン、３０ｎＭ亜セレン酸ナトリウム、１０ｎＭベータエストラジオール及び１０ｎＭヒドロコルチゾンを添加したＲＰＭＩ中で成長させた。Ｃ４−２及びＣ４−２ｂ（両方がＭＤ Ａｎｄｅｒｓｏｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｎｔｅｒから使用が許可された；Thalmann GN et al., Cancer Res. 1994;54:2577-2581）並びにＶＣａＰ（ＡＴＣＣ、ＣＲＬ−２８７６）は、１０％熱不活性化ＦＣＳ、２ｍＭ Ｌ−グルタミン及びＲ１８８１（Ｓｉｇｍａ、＃Ｒ０９０８；０．１ｎＭを有するＶＣａＰ及び１ｎＭを有するＣ４−２／Ｃ４−２ｂ）を添加したＤＭＥＭ（Ｌｏｎｚａ、＃１２−６０４Ｆ）中で培養した。ＭＤＡ−ＰＣａ−２ｂ（ＡＴＣＣ、ＣＲＬ−２４２２）は、２０％熱不活性化ＦＣＳ、２５ｎｇ／ｍｌコレラ毒素、０．００５ｍＭエタノールアミン、１００ｐｇ／ｍｌヒドロコルチゾン及び４５ｎＭ亜セレン酸を添加したＦ−１２Ｋ（ＧＩＢＣＯ、＃２１１２７）中で成長させた。Ｂｏｂ細胞（ＥＣＡＣＣ、＃１００２１１０２）は、事前に適格性確認済みのヒト組換え表皮成長因子１−５３、ウシ下垂体抽出物及びグルタミン、２ｎｇ／ｍｌ白血病抑制因子、２ｎｇ／ｍｌ幹細胞因子、１００ｎｇ／ｍｌコレラ毒素並びに１ｎｇ／ｍｌ顆粒球マクロファージコロニー刺激因子を添加したケラチノサイト−ＳＦＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、＃３７０１０−０２２）中で培養した。Ｓｈｍａｃ４（ＥＣＡＣＣ、＃１０１１２３０２）、Ｓｈｍａｃ５（ＥＣＡＣＣ、＃１０１１２３０３）及びＰ４Ｅ６細胞（ＥＣＡＣＣ、＃１０１１２３０１）は、Ｓｔｅｍｌｉｎｅ Ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ Ｇｒｏｗｔｈ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ（Ｓｉｇｍａ、＃Ｓ９９４５）、２ｍＭ Ｌ−グルタミン及び２％ＦＣＳを含むＳｔｅｍｌｉｎｅ Ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ Ｍｅｄｉｕｍ ＩＩ（Ｓｉｇｍａ、＃Ｓ０１９６）中で成長させた。細胞は、加湿雰囲気中５％ＣＯ₂中３７℃で７５ｃｍ²組織培養フラスコ（Ｎｕｎｃ、＃１７８９０５）中に保持した。

２次元細胞増殖アッセイ
以下の方法を用いて、前立腺癌細胞系の成長に対するＩＧＦリガンド中和ｍＡｂｓ及びアンドロゲンシグナル伝達阻害薬の抑制効果を測定した。アッセイは、１０％血清を含む細胞増殖培地中で実施した。

付着細胞をトリプシン／ＥＤＴＡ溶液（ＧＩＢＣＯ、＃０４３−９０３１ＦＵ）を用いて分離し、増殖培地に再懸濁し、遠心分離し、アッセイ培地（１０％熱不活性化ＦＣＳ及び２ｍＭ Ｌ−グルタミンを添加した）に再懸濁し、１ｍＬ当たり細胞５０００〜４００００個に希釈した。１００μＬ／ウェルの細胞懸濁液を滅菌平底白色９６ウェルプレート（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、＃６００５２８０）の各ウェルに加え、プレートを＋３７℃及び５％ＣＯ₂に設定した加湿インキュベーター中で一夜インキュベートした。翌日、上清を吸引し、３５μＬ／ウェルのアッセイ培地をすべてのウェルに加えた。

ＩＧＦ ｍＡｂ＿１及びｍＡｂ＿２（最高濃度１μＭ）、ＭＤＶ−３１００（最高濃度１０μＭ）、アビラテロン酢酸塩（最高濃度１００μＭ）の連続希釈物を別個のプレート上でアッセイ培地（成長因子又はホルモン無添加）で調製した。すべての薬剤は、単剤として又は組合せで試験した。すべての試料は、３連ウェル（１００μＭ／ウェルアッセイ）で試験した。プレートは、加湿インキュベーター中で＋３７℃及び５％ＣＯ₂で５日間インキュベートした。このインキュベーション期間の後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ緩衝液、基質及び試験プレートをＲＴに平衡化させた。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏは、培養中の生存細胞の数を測定するようにデザインされ、発光シグナルの発生が細胞中に存在するＡＴＰの量に比例する、生物発光アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ、＃Ｇ７５７１）である。１００μＬの新たに混合したＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ試薬を各ウェルに加えた。回転振とう機（ＭＴＳ２／４、ＩＫＡ）上で２分及びＲＴで１０分のインキュベーションの後、発光を記録した（Ｇｅｎｉｏｓ Ｐｒｏ、Ｔｅｃａｎ又はＶｉｃｔｏｒ Ｘ４、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）。

細胞溶解物の調製及びイムノブロッティング
細胞１×１０⁶個及び４×１０⁶個をそれぞれ６ウェルプレート及び１０ｃｍディッシュで１０％熱不活性化ＦＣＳを含む培地中で平板培養し、一夜インキュベートした後、細胞を１μＭのＭＤＶ−３１００及び１００ｎＭのＩＧＦ ｍＡｂ＿１又は抗体とＡＲシグナル伝達阻害薬との組合せで処理した。２４時間後に細胞をプレート上で溶解し、総タンパク質を単離し、Ｂｒａｄｆｏｒｄアッセイによりタンパク質濃度を測定した。細胞溶解物をスナップ凍結し、−８０℃で保存した。

３０〜５０μｇの総タンパク質溶解物を４〜１２％Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓ ＰＡＧ（Ｂｉｏ Ｒａｄ）上に加え、ＰＶＤＦ膜を用いてＢｉｏ Ｒａｄ ｔｒａｎｓ−Ｂｌｏｔ（登録商標）Ｔｕｒｂｏシステムによりブロットすることによりウエスタンブロッティングを実施した。膜を以下のタンパク質に対する抗体とともに４℃で一夜インキュベートした。ＩＧＦ−１Ｒベータ（＃３０２７、細胞シグナル伝達；１：１０００）、ｐ−Ｓ４７３ ＡＫＴ（＃４０６０、細胞シグナル伝達；１：２０００）、ＡＫＴ（＃９２７２、細胞シグナル伝達；１：１０００）、ＰＴＥＮ（＃９５５９、細胞シグナル伝達；１：１０００）、ＡＲ（Ｎ−２０、＃ｓｃ−８１６、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ；１：２００）及びＧＡＰＤＨ（＃７２９８、細胞シグナル伝達；１：１０００）（負荷対照とした）。細胞周期調節因子並びに増殖及びアポトーシスのマーカーは、以下の抗体を用いて分析した。ｐ２１ Ｗａｆ１／Ｃｉｐ１（１２Ｄ１；＃２９４７、細胞シグナル伝達；１：１０００）、ＣＤＫ２（７８Ｂ２；＃２５４６、細胞シグナル伝達；１：１０００）、サイクリンＥ（Ｃ−１９；ｓｃ−１９８、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ；１：１０００）、ＰＣＮＡ（＃２５８６、細胞シグナル伝達；１：２０００）及びＰＡＲＰ（＃９５４２、細胞シグナル伝達；１：１０００）。

抗体希釈物をＴＢＳ−０．５％Ｔｗｅｅｎ２０（ＴＢＳ−Ｔ）中５％ＢＳＡ又は５％無脂肪乳を用いて調製した。ＴＢＳ−Ｔで洗浄した後、膜をポリクローナルＨＲＰコンジュゲートヤギ抗ウサギ二次抗体（ＤＡＫＯ、＃Ｐ０４４８）とともに１時間インキュベートし、ＴＢＳ−Ｔでさらに洗浄した後、ＥＣＬ／Ｓｕｐｅｒ ＥＣＬ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）及びＩｍａｇｅＱｕａｎｔ ＬＡＳ４０００上暴露により抗体反応性を検出した。総タンパク質レベルの検出のために、抗ホスホ抗体とともにインキュベートした膜をＲｅｓｔｏｒｅ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ Ｓｔｒｉｐｐｉｎｇ Ｂｕｆｆｅｒ（Ｔｈｅｒｍｏ、＃２１０５９）で１５〜２０分間ストリッピング処理し、ブロックし、膜を上述のように処理する前に総タンパク質に対する抗体とともにインキュベートした。

フローサイトメトリーを用いた細胞周期解析
ＶＣａＰ細胞４×１０⁵個を１μＭのＩＧＦ ｍＡｂ＿１及び１０μＭのＭＤＶ−３１００並びに両剤の組合せで処理し、６ウェルプレートで３７℃で２４時間、４８時間及び７２時間インキュベートした。その後、上清をＦＡＣＳ管に移し、付着細胞をトリプシンにより分離し、それぞれのＦＡＣＳ管中に収集した。遠心分離した後、培地を捨て、細胞ペレットを氷冷７０％エタノールで４℃最低限２時間固定した。エタノールを完全に除去した後、固定細胞を低張緩衝溶液（０．１％クエン酸ナトリウム、０．１％（容積／容積）トリトンＸ−１００、１００μｇ／ｍｌ ＤＮアーゼ不含有ＲＮアーゼＡ）中ヨウ化プロピジウム（１０μｇ／ｍｌ；Ｓｉｇｍａ；Ｐ４８６４−１０ｍＬ）で染色し、暗所で室温で３０分間インキュベートした。細胞をＢｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ＦＡＣＳ Ｃａｎｔｏ ＩＩフローサイトメーターを用いて解析し、データをＦＡＣＳ Ｄｉｖａソフトウエアを用いて評価した。

チミジン取込みアッセイ
ＶＣａＰ細胞を１μＭのＩＧＦ ｍＡｂ＿１及び１０μＭのＭＤＶ−３１００並びに両剤の組合せで処理し、平底９６ウェルプレートでＲ１８８１の非存在下で３連として１ウェル当たり細胞５×１０⁴個の密度で９６時間インキュベートした。インキュベーションの最後の２４時間、³Ｈ−チミジン（０．４μＣｉ／ウェル；ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、ＮＥＴ３５５００１ＭＣ）を加えた。その後、プレートを凍結し、−２０℃で２４時間インキュベートした。採取のために、プレートを解凍し、４０μＬのトリプシンを各ウェルに加えて、細胞断片を分離した。懸濁液をフィルタープレートに移した。次いでプレートを蒸留水で３回洗浄し、６０℃で３時間乾燥した。１ウェル当たり２５μＬのＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔを加え、液体シンチレーションカウンター（１４５０ Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ Ｗａｌｌａｃ Ｔｒｉｌｕｘ、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ）を用いてチミジンの取込み（ＣＰＭ；１分当たりの計数）を測定することにより増殖速度を測定した。

細胞倍加時間
細胞３×１０⁵個／ウェルのＶＣａＰ細胞を１ウェル当たり２ｍＬ細胞培養培地中に播種した。播種の２４時間後に細胞培養培地を除去し、Ｒ１８８１を含まないＤＭＥＭ＋１０％ＦＣＳで置換した。培地の交換の２４時間後に前処理ウェルを採取し、Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ（商標）Ｖｉ−ＣＥＬＬ ＸＲ２．０３を用いて計数し、１０μＭのＭＤＶ−３１００を残りの細胞に加えた。２４時間ごとに４回、各時点について３ウェルにおけるＶＣａＰ細胞数を測定した。これらの３連から平均値を計算した。世代時間を決定するために、以下の式を用いる。

カスパーゼ３活性の評価
種々の濃度のＭＤＶ−３１００及びＩＧＦ ｍＡｂ＿１並びに両剤の組合せによる処理によるカスパーゼ−３／７媒介性アポトーシスを受ける細胞の生存細胞画像を取得するために、ＣｅｌｌＰｌａｙｅｒ（商標）９６−Ｗｅｌｌ Ｋｉｎｅｔｉｃ Ｃａｓｐａｓｅ−３／７ Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｅｓｓｅｎ ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ；＃４４４０）を用いた。ＶＣａＰｓ細胞５００００個／１００μｌ／ウェルを播種し、翌日、Ｒ１８８１の非存在下で増殖培地中で各濃度の両剤により処理した。Ｃａｓｐａｓｅ−３／７試薬を増殖培地の１ウェル当たり１００μｌ中５μＭの最終濃度に希釈し、培地に加えた。プレートをＩｎｃｕＣｙｔｅ（商標）２０１１Ａ中のマイクロプレートトレイ内に入れ、位相コントラスト及び蛍光チャンネルを用いて１ウェル当たり３画像を４時間ごとに７日間にわたり取得した。

（例１）
前立腺癌細胞増殖に対するＩＧＦ及びＡＲシグナル伝達遮断の抑制効果
ＡＲ及びＩＧＦ−１／２阻害の組合せの抗増殖効果を試験するために、２次元細胞増殖アッセイにおいて、１０種の前立腺癌細胞系（Ｂｏｂ、Ｃ４−２、Ｃ−４−２Ｂ、ＤＵＣａＰ、ＭＤＡ ＰＣａ ２ｂ、Ｐ４Ｅ６、ＰＣ−３、Ｓｈｍａｃ４、Ｓｈｍａｃ５、ＶＣａＰ）を、ＡＲ拮抗薬ＭＤＶ−３１００及びＩＧＦリガンドに対する全長ヒトモノクローナル抗体（ＩＧＦ ｍＡｂ＿１及びＩＧＦ ｍＡｂ＿２）により、単剤として及び組合せで、処理した（表１）。供試細胞系のうちの３つ（ＶＣａＰ及びＤＵＣａＰ−両細胞系は同じ前立腺癌患者の異なる転移の部位に由来していた、並びにＭＤＡ ＰＣａ ２ｂ）は、ＡＲ及びＩＧＦシグナル伝達阻害単独の両方に対する単剤での抗増殖反応、並びに組み合わせた場合の効果の増大を示した（図１）。

（例２）
前立腺癌細胞増殖に対するＩＧＦシグナル伝達及びアンドロゲン合成遮断の抑制効果
アンドロゲン及びＩＧＦシグナル伝達阻害の組合せの可能性を試験する第２のアプローチとして、８種の前立腺癌細胞系（２２Ｒｖ１、ＢＭ１６０４、ＤＵ−１４５、ＤＵＣａＰ、ＬＮＣａＰ、ＭＤＡ ＰＣａ ２ｂ、ＰＣ−３、ＶＣａＰ）を、ＣＹＰ１７Ａ及びひいてはアンドロゲンの新規合成を選択的に阻害する、アビラテロン酢酸塩により、単独で及びＩＧＦリガンド中和モノクローナル抗体（ＩＧＦ ｍＡｂ＿１及びＩＧＦ ｍＡｂ＿２）との組合せで処理した。これらのアッセイの結果によってもＶＣａＰ、ＭＤＡ ＰＣａ ２ｂ及びＤＵＣａＰ細胞が単剤及び組合せ処理の両方に対して反応性である唯一の細胞系であることが確認された。しかし、アビラテロン酢酸塩による処理は、アビラテロン酢酸塩が抗増殖作用を示す腫瘍細胞による自己分泌アンドロゲン産生を意味する。これは、アビラテロン酢酸塩処理に対して感受性の細胞の数を制限する可能性がある。ＶＣａＰの２次元及び３次元増殖アッセイ並びにＭＤＡ ＰＣａ ２ｂ及びＤＵＣａＰ細胞の２次元アッセイの結果を図２に示す。これらのデータは、ＩＧＦリガンドを中和する抗体との組合せにより細胞増殖に対するアビラテロン酢酸塩の単剤効果を増大させることができることを示唆するものである。

（例３）
アンドロゲン受容体及びＩＧＦ−１Ｒの存在並びにＰＴＥＮ及びｗｔ ＰＩＫ３ＣＡの発現がアンドロゲン及びＩＧＦシグナル伝達阻害薬の組合せに対して感受性の前立腺癌細胞を特徴づける
図３にＡＲ及びＩＧＦシグナル伝達阻害に対して感受性である、ＶＣａＰ、ＭＤＡ ＰＣａ ２ｂ及びＤＵＣａＰ細胞系におけるシグナル伝達タンパク質発現を非感受性細胞系ＰＣ−３と比較して示す。細胞をＭＤＶ−３１００及びＩＧＦ ｍＡｂ＿１により、単剤として及び組合せで、２４時間処理し、タンパク質溶解物を、ＩＧＦ−１Ｒ、ＡＲ、ＰＴＥＮ及びＡＫＴのタンパク質発現について、並びにＡＫＴ−Ｓｅｒ４７３のリン酸化について、無処理対照と比較した。反応性の細胞系は、ｗｔ ＡＲ、ＩＧＦ−１Ｒ及びＰＴＥＮを発現した。これらの特性は、ＰＣ−３又は単剤処理若しくは両剤の組合せのいずれか１つに対して抗増殖反応を示さなかった他の供試細胞系には存在しなかった（表１）。
これらの結果は、アンドロゲン受容体、ＩＧＦ−１Ｒ並びにＰＴＥＮ（及びｗｔ ＰＩＫ３ＣＡ）の発現の存在下では、アンドロゲン及びＩＧＦシグナル伝達阻害薬の組合せがｉｎ ｖｉｔｒｏでの前立腺癌細胞増殖の阻害における有効性の増大をもたらすことを示すものである。

（例４）
ＭＤＶ−３１００及びＩＧＦ ｍＡｂ＿１の組合せ処理後の長期ＡＫＴリン酸化阻害
ＡＫＴリン酸化の阻害に関する単剤としての、及び組合せ処理での、ＭＤＶ−３１００及びＩＧＦリガンドｍＡｂ（ＩＧＦ ｍＡｂ＿１）の効果を処理の４時間から１２０時間までウエスタンブロットにより解析した。両剤の組合せは、抗体処理単独よりもＡＫＴリン酸化の完全且つ長期持続的阻害をもたらした（図４）。

（例５）
ＩＧＦ ｍＡｂ＿１及びＭＤＶ−３１００による組合せ処理はＶＣａＰ細胞におけるアポトーシス誘導に対する相乗効果をもたらす
図１に示すデータの裏付けとして、図５に示すトリチウム化チミジン取込みアッセイから得られた結果から、ＭＤＶ−３１００及びＩＧＦ ｍＡｂ＿１の両方の単独が細胞増殖に対する抑制効果（約５０％）を有するが、両剤の組合せがはるかにより有効であったことが示された。ＩＧＦ ｍＡｂ＿１単独によるＶＣａＰ細胞の処理は、位相コントラスト顕微鏡法（図６Ａ）、カスパーゼ３活性（図７）、ＦＡＣＳベースの細胞周期解析（図８）及びＰＡＲＰ切断（図９）により評価したとき、アポトーシスのさほど大きくない増加をもたらした。これに対して、ＭＤＶ−３１００単独による処理後に認められた細胞数の減少（図６Ａ）は、長い細胞倍加時間（図６Ｂ）に起因していた。ＭＤＶ−３１００は、カスパーゼ３活性（図７）、サブＧ１アポトーシス細胞集団（図８）又はＰＡＲＰ切断（図９）を誘導しなかった。しかし、ＩＧＦ ｍＡｂ＿１とＭＤＶ−３１００を組み合わせたとき、サブＧ１アポトーシス細胞集団の増加（図８）及びＰＡＲＰの切断（図９）に加えて、カスパーゼ３活性に対する相乗効果が認められた（図７）。

（例６）
エンザルタミドと組み合わせるＩＧＦ ｍＡｂ＿１の提案される試験
はじめに
ここに提案した試験では、ＣＲＰＣ患者における、単独投与したエンザルタミドと比較して、エンザルタミドと組み合わせたＩＧＦ ｍＡｂ＿１の安全性及び抗腫瘍活性を検討する。

この無作為化オープンラベル試験は、エンザルタミド（アームＢ）と比較して、ＩＧＦ ｍＡｂ＿１とエンザルタミドとの組合せ（アームＡ）の抗腫瘍活性及び安全性プロファイルを探究するために実施するものとする。忍容性及び安全性第Ｉｂ相は、無作為化試験の開始の前の安全性の問題に加えて、最大耐量（ＭＴＤ）及び／又は推奨第ＩＩ相用量を決定するために実施するものとする。
ＩＧＦ ｍＡｂ＿１は、各治療サイクルの開始時の１時間静脈内注入による２８日サイクルの治療において週１回投与するものとする。エンザルタミドは、各治療サイクル中の連続経口投与により毎日投与するものとする。

背景
ＩＧＦ ｍＡｂ＿１は、ＩｇＧ１イソ型の完全にヒトモノクローナル抗体（ＨｕｍＡｂ）である。Ａｂは、ＩＧＦ−１及びＩＧＦ−２に高い親和力で結合し、両タンパク質により誘発される増殖及び生存促進シグナル伝達を強力に中和する。
エンザルタミドは、アンドロゲン受容体シグナル伝達経路における種々の段階において作用するアンドロゲン受容体拮抗薬である。化学名は、４−｛３−［４−シアノ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−５，５−ジメチル−４−オキソ−２−スルファニリデンイミダゾリジン−１−イル｝−２−フルオロ−Ｎ−メチルゼンズアミドである。分子量は、４６４．４４であり、分子式は、Ｃ２１Ｈ１６Ｆ４Ｎ４Ｏ２Ｓである。エンザルタミドは、転移性去勢抵抗性前立腺癌（ＣＲＰＣ）を有する患者の治療を適応とする。
投与
ＩＧＦ ｍＡｂ＿１は、各治療サイクルの開始時の１時間静脈内注入による２８日サイクルの治療において週１回投与するものとする。エンザルタミドは、各治療サイクル中の連続経口投与により毎日投与するものとする。

試験集団の選択
合計最大約１４０例の患者を試験に募集することができる。併用療法の安全性を保証し、第ＩＩ部推奨用量を決定するために約１５〜１８例の患者を試験の第Ｉ部忍容性及び安全性相に参加させるものとする。試験の第ＩＩ部において、１２０例の患者を２つの試験アームの１つに無作為化し、６０例の患者が各アームに無作為化されるものとする（アームＢ＝６０、アームＢ＝６０）。
試験の第Ｉ部は、３箇所以上の施設で実施するものとする。試験の第ＩＩ部は、１０箇所以上の施設で実施するものとする。
試験に組み入れられたすべての患者（すなわち、インフォームドコンセントが行われた）の記録は、それらの患者が治験薬により治療されたか否かにかかわらず、治験施設におけるＩＳＦで維持管理するものとする。

試験参加のための主要な診断
この試験に組み入れられるべき患者は、診断され、組織学的又は細胞学的に確認されたＣＲＰＣを有し、単独のドセタキソール治療の後に受け、進行していなければならない。患者は、あらゆる状況において、アビラテロン又はカバジタキセル治療の前に受け、失敗してもよく、又はしなくてもよい。

参加基準
１．患者は、前立腺の組織学的又は細胞学的に確認された腺癌を有する。
２．１８歳以上の男性患者
３．転移性前立腺癌（病期Ｍ１又はＤ２）の放射線学的証拠を有する患者。試験治療の開始の２８日以内の放射性核種骨スキャン、ＣＴスキャン又はＭＲＩにより評価可能な遠隔転移。
４．ドセタキセルの投与を受けている間又はドセタキセルベースの化学療法の完了の１２０日以内に疾患の進行（生化学的、臨床的又は放射線学的）を有し、治験責任医師の見解では追加のドセタキセルベースの療法から著しい利益を得ることがありそうもない、又はこの薬剤による療法に不耐性であった患者。
５．患者は、以下の少なくとも１つと定義される進行性疾患の証拠を有さなければならない。
ａ．進行性測定可能疾患：従来の固形腫瘍基準ＲＥＣＩＳＴ１．１を用いる。
ｂ．骨スキャン進行：骨スキャンで少なくとも２つの新たな病変。
ｃ．漸増ＰＳＡ：少なくとも１週間隔で測定した参照値（ＰＳＡ＃１）と比較して少なくとも２回の連続的漸増ＰＳＡ値。第３のＰＳＡ（ＰＳＡ＃３）は、ＰＳＡ＃２より大きい必要があり、もしそうでなければ、第４のＰＳＡ（ＰＳＡ＃４）がＰＳＡ＃２より大きい必要がある。

６．ＰＳＡ≧２ｎｇ／ｍＬを有する患者。
７．＜５０ｎｇ／ｍＬの血清テストステロンを有する事前の外科的又は内科的去勢を有する患者。去勢の方法が黄体化ホルモン放出レベルホルモン（ＬＨＲＨ）作動薬である場合、患者は、プロトコール治療中ＬＨＲＨ作動薬の使用を自発的に継続しなければならない。
８．Ｅａｓｔｅｒｎ Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐ全身状態（ＥＣＯＧ ＰＳ）０、１又は２。
９．患者が十分な血液学的機能（絶対好中球数［ＡＮＣ］≧１５００／ｕＬ、ヘモグロビン≧９ｇ／ｄＬ及び血小板≧１０００００／ｕＬ）を有する。
１０．患者が十分な肝機能（ビリルビンが正常の上限（ＵＬＮ）の≦１．５倍、アスパラギン酸トランスアミナーゼ［ＡＳＴ］及びアラニントランスアミナーゼ［ＡＬＴ］がＵＬＮの≦３倍又は肝臓転移が存在する場合には≦５倍）を有する。

１１．十分な腎機能（クレアチニン≦１．５×ＵＬＮ又は計算クレアチニンクリアランス＞４０ｍＬ／分）。
１２．ディップスティック又はルーチン尿検査（ＵＡ）で≦１＋の尿蛋白。尿ディップスティック又はルーチン分析で≧２＋が示される場合、試験への参加を許容するために２４時間尿を収集し、２４時間に＜１０００ｍｇの蛋白を示さなければならない。
１３．十分な凝固機能（国際標準化比［ＩＮＲ］が≦１．５且つ部分トロンボプラスチン時間［ＰＴＴ］がＵＬＮを≦５秒上回る［経口抗凝固療法を受けていない限り］）。最大投与量抗凝固療法を受けている患者は、他のすべての基準を満たし、安定量の経口抗凝固剤又は低分子量ヘパリン（許容されていない、ワルファリンを除く）の投与を受けているならば適格である。
１４．空腹時血漿グルコースが＜８．９ｍｍｏｌ／Ｌ（＜１６０ｍｇ／ｄＬ）又はＨｂＡ１ｃが＜８．０％。

除外基準
１．転移性疾患に対する２回を超える事前のタキサンベースの細胞障害性化学療法を受けた患者。ドセタキソールの治療中断の後に第２又は第３のドセタキセルベースの療法を受け、その後の疾患の進行を有する患者は、適格である。
２．あらゆる状況において事前のエンザルタミド治療を受けた患者は、適格でない。
３．試験治療の開始前の４週間以内にアビラテロン又はカバジタキセル治療を受けた患者。
４．進行前立腺癌に対するミトキサントロンによる事前の療法を受けた患者（ミトキサントロンによる事前のアジュバント療法は、許容）。
５．試験投薬の開始の４週間以内に以下のいずれかによる治療を受けた患者：化学療法、免疫療法、生物学的療法、分子標的、ホルモン療法、放射線療法（鎮痛の目的のため又は試験治療の開始前の２週間以内に完了させることができる骨折のリスクのある溶解性病変に対する局所放射線療法の場合を除く）。
６．試験治療の開始前の４週間以内又はこの試験と同時のあらゆる治験薬の使用。
７．試験の開始の４週間以内に、強いＣＹＰ２Ｃ８阻害薬；強い又は中等度のＣＹＰ３Ａ４又はＣＹＰ２Ｃ８誘導薬；狭い治療指数を有するＣＹＰ３Ａ４、ＣＹＰ２Ｃ９及びＣＹＰ２Ｃ１９基質による治療を受けた患者。
８．症候性うっ血性心不全の既往歴を有する又は試験前の心エコー若しくはマルチゲート（ＭＵＧＡ）スキャンを受け、ＬＬＮを≧１０％下回る左室駆出分画（ＬＶＥＦ）を有する患者。
９．ＱＴｃＦ延長が＞４５０ミリ秒又はＱＴ延長が治験責任医師により臨床的に問題となるとみなされた（例えば、先天性長ＱＴ症候群）。ＱＴｃＦは、スクリーニング時に受けた３回のＥＣＧｓの平均値として計算する。

１０．小細胞又は神経内分泌腫瘍を有する患者。
１１．既知又は疑われる軟膜転移を有する患者。
１２．制御されていない又は制御不十分の高血圧。
１３．制御不十分の糖尿病を有する患者。糖尿病の既往歴を有する患者は、血糖が正常範囲内にあり（空腹＜１６０ｍｇ／ｄＬ又はＵＬＮを下回る）、この状態に対する安定食事又は治療規制を受けているならば、参加することが許容される。
１４．既知のヒト免疫不全ウイルス感染又は後天性免疫不全症候群関連疾患。
１５．てんかん、発作又は治験責任医師により判断された発作の素因を有する患者。
１６．治験責任医師により判断されたプロトコールを順守することが不可能な患者。
１７．治験責任医師により判断された活動中アルコール又は活動中薬物乱用。
１８．ヒトモノクローナル抗体に対するアレルギーの既往歴。
１９．ＩＧＦ及び／又はＩＧＦＲ経路を標的とする薬剤による事前の療法。
２０．性的に活動的であり、試験中又は実薬療法の終了後少なくとも３ヵ月間医学的に許容される避妊の方法（例えば、インプラント、注射剤、複合経口避妊薬、関係する女性のある種の子宮内器具又は精管切除パートナー、関係する男性用のコンドームなど）を使用する意志がない患者。臨床試験薬の投与中及び臨床試験薬の最終投与後６ヵ月間まで精液を提供しないことに同意する意志がない男性。

第ＩＩ部のための追加の除外基準：
２１．任意選択の腫瘍生検を受けることになっている患者については、遺伝性出血障害の既往歴、又は治験責任医師により判断された、過去６ヵ月における臨床的に問題となる大出血事象。

施行する治療
物質：ＩＧＦ ｍＡｂ＿１ヒトモノクローナル抗体
剤形： 液体製剤
供給元： Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ Ｐｈａｒｍａ ＧｍｂＨ＆Ｃｏ．ＫＧ
単位強度（unit strength）： ２０ｍｌバイアル入りで供給される１０ｍｇ／ｍｌのＩＧＦ ｍＡｂ＿１。適切な用量のＩＧＦ ｍＡｂ＿１を生理塩化ナトリウム溶液（０．９％）で希釈する。
使用期間： 疾患の進行又は過度の毒性の出現まで２８日サイクルの治療の各週の開始時（１、８、１５及び２２日目）に１時間。注入時間は、注入反応又は有害事象の場合には１時間以上に延長することができる。
投与経路： 静脈内
開始用量： １時間ｉ．ｖ．注入により７５０ｍｇ（最大１０００ｍｇ）の総投与量
追加情報： 用量は、第Ｉ部忍容性／安全性及び用量設定相中に調節する
物質： エンザルタミド（Ｘｔａｎｄｉ（登録商標））
剤形： 液体充填軟ゼラチンカプセル剤
供給元： Ａｓｔｅｌｌａｓ
単位強度： ４０ｍｇ
使用期間： 治療の各サイクル中１６０ｍｇ１日１回
投与経路： 経口
開始用量： １６０ｍｇ１日１回
追加情報： 用量は、製品特性の概要（ＳＰＣ）に記載されている第Ｉ部忍容性／安全性及び用量設定相中に調節する。

Claims (13)

1. アンドロゲン受容体拮抗薬と組み合わせて前立腺新生物の治療に用いるための、インスリン様成長因子（ＩＧＦ）受容体拮抗薬を含む医薬組成物であって、
   前記アンドロゲン受容体拮抗薬がエンザルタミド及びアビラテロンアセテートから選択され、並びに
   前記ＩＧＦ受容体拮抗薬が、
   配列番号３１（ＨＣＤＲ１）、配列番号３２（ＨＣＤＲ２）及び配列番号３３（ＨＣＤＲ３）の重鎖相補性決定領域並びに配列番号３４（ＬＣＤＲ１）、配列番号３５（ＬＣＤＲ２）及び配列番号３６（ＬＣＤＲ３）の軽鎖決定領域を有する抗体ｍＡｂ１、又は
   配列番号２１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２２（ＨＣＤＲ２）及び配列番号２３（ＨＣＤＲ３）の重鎖相補性決定領域並びに配列番号２４（ＬＣＤＲ１）、配列番号２５（ＬＣＤＲ２）及び配列番号２６（ＬＣＤＲ３）の軽鎖決定領域を有する抗体ｍＡｂ２、
   である、上記医薬組成物。
2. 前記抗体ｍＡｂ１が、配列番号３７の重鎖可変領域及び配列番号３８の軽鎖可変領域を有し、又は、前記抗体ｍＡｂ２が、配列番号２７の重鎖可変領域及び配列番号２８の軽鎖可変領域を有する、請求項１記載の医薬組成物。
3. 前立腺新生物が良性前立腺肥大（ＢＰＨ）又は前立腺癌である、請求項１又は２に記載の医薬組成物。
4. 前立腺癌が去勢抵抗性前立腺癌である、請求項３に記載の医薬組成物。
5. 抗体ｍＡｂ１が配列番号３９の重鎖及び配列番号４０の軽鎖を有する、請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
6. ＩＧＦ受容体拮抗薬と組み合わせて前立腺新生物の治療に用いるための、アンドロゲン受容体拮抗薬を含む医薬組成物であって、
   前記アンドロゲン受容体拮抗薬がエンザルタミド及びアビラテロンアセテートから選択され、並びに
   前記ＩＧＦ受容体拮抗薬が、
   配列番号３１（ＨＣＤＲ１）、配列番号３２（ＨＣＤＲ２）及び配列番号３３（ＨＣＤＲ３）の重鎖相補性決定領域並びに配列番号３４（ＬＣＤＲ１）、配列番号３５（ＬＣＤＲ２）及び配列番号３６（ＬＣＤＲ３）の軽鎖決定領域を有する抗体ｍＡｂ１、又は
   配列番号２１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２２（ＨＣＤＲ２）及び配列番号２３（ＨＣＤＲ３）の重鎖相補性決定領域並びに配列番号２４（ＬＣＤＲ１）、配列番号２５（ＬＣＤＲ２）及び配列番号２６（ＬＣＤＲ３）の軽鎖決定領域を有する抗体ｍＡｂ２、
   である、上記医薬組成物。
7. 前記抗体ｍＡｂ１が、配列番号３７の重鎖可変領域及び配列番号３８の軽鎖可変領域を有し、又は、前記抗体ｍＡｂ２が、配列番号２７の重鎖可変領域及び配列番号２８の軽鎖可変領域を有する、請求項６記載の医薬組成物。
8. 前記抗体ｍＡｂ１が、配列番号３９の重鎖及び配列番号４０の軽鎖を有する、請求項６又は７記載の医薬組成物。
9. ＩＧＦ受容体拮抗薬を含む前立腺新生物の治療用組成物であって、前記組成物を用いた治療が、治療上有効量のＩＧＦ受容体拮抗薬を必要とする患者に投与すること、及び治療上有効量のアンドロゲン受容体拮抗薬を同じ患者にＩＧＦ受容体拮抗薬の投与の前又は後の７日以内にさらに投与することを含み、
   前記アンドロゲン受容体拮抗薬がエンザルタミド及びアビラテロンアセテートから選択され、並びに
   前記ＩＧＦ受容体拮抗薬が、
   配列番号３１（ＨＣＤＲ１）、配列番号３２（ＨＣＤＲ２）及び配列番号３３（ＨＣＤＲ３）の重鎖相補性決定領域並びに配列番号３４（ＬＣＤＲ１）、配列番号３５（ＬＣＤＲ２）及び配列番号３６（ＬＣＤＲ３）の軽鎖決定領域を有する抗体ｍＡｂ１、又は
   配列番号２１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２２（ＨＣＤＲ２）及び配列番号２３（ＨＣＤＲ３）の重鎖相補性決定領域並びに配列番号２４（ＬＣＤＲ１）、配列番号２５（ＬＣＤＲ２）及び配列番号２６（ＬＣＤＲ３）の軽鎖決定領域を有する抗体ｍＡｂ２、
   である、上記治療用組成物。
10. 前記抗体ｍＡｂ１が、配列番号３７の重鎖可変領域及び配列番号３８の軽鎖可変領域を有し、又は、前記抗体ｍＡｂ２が、配列番号２７の重鎖可変領域及び配列番号２８の軽鎖可変領域を有する、請求項９記載の治療用組成物。
11. 前記抗体ｍＡｂ１が、配列番号３９の重鎖及び配列番号４０の軽鎖を有する、請求項９又は１０記載の治療用組成物。
12. 前立腺新生物の治療用の医薬の製造のためのＩＧＦ受容体拮抗薬の使用であって、
    前記ＩＧＦ受容体拮抗薬がアンドロゲン受容体拮抗薬と組み合わせて用いられるものであり、
    前記アンドロゲン受容体拮抗薬がエンザルタミド及びアビラテロンアセテートから選択され、並びに
    前記ＩＧＦ受容体拮抗薬が、
    配列番号３１（ＨＣＤＲ１）、配列番号３２（ＨＣＤＲ２）及び配列番号３３（ＨＣＤＲ３）の重鎖相補性決定領域並びに配列番号３４（ＬＣＤＲ１）、配列番号３５（ＬＣＤＲ２）及び配列番号３６（ＬＣＤＲ３）の軽鎖決定領域を有する抗体ｍＡｂ１、又は
    配列番号２１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２２（ＨＣＤＲ２）及び配列番号２３（ＨＣＤＲ３）の重鎖相補性決定領域並びに配列番号２４（ＬＣＤＲ１）、配列番号２５（ＬＣＤＲ２）及び配列番号２６（ＬＣＤＲ３）の軽鎖決定領域を有する抗体ｍＡｂ２、
    である、上記使用。
13. 前立腺新生物の治療用の医薬の製造のためのアンドロゲン受容体拮抗薬の使用であって、
    前記アンドロゲン受容体拮抗薬がＩＧＦ受容体拮抗薬と組み合わせて用いられるものであり、
    前記アンドロゲン受容体拮抗薬がエンザルタミド及びアビラテロンアセテートから選択され、並びに
    前記ＩＧＦ受容体拮抗薬が、
    配列番号３１（ＨＣＤＲ１）、配列番号３２（ＨＣＤＲ２）及び配列番号３３（ＨＣＤＲ３）の重鎖相補性決定領域並びに配列番号３４（ＬＣＤＲ１）、配列番号３５（ＬＣＤＲ２）及び配列番号３６（ＬＣＤＲ３）の軽鎖決定領域を有する抗体ｍＡｂ１、又は
    配列番号２１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２２（ＨＣＤＲ２）及び配列番号２３（ＨＣＤＲ３）の重鎖相補性決定領域並びに配列番号２４（ＬＣＤＲ１）、配列番号２５（ＬＣＤＲ２）及び配列番号２６（ＬＣＤＲ３）の軽鎖決定領域を有する抗体ｍＡｂ２、
    である、上記使用。