CN111148534A - 抗igf和抗pd-1抗癌组合疗法 - Google Patents

抗igf和抗pd-1抗癌组合疗法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及某些抗‑IGF抗体分子与PD1拮抗剂用于治疗癌症的组合用途。本发明进一步涉及包含此类抗‑IGF抗体分子和拮抗剂的药物组合物和试剂盒。

Description

抗IGF和抗PD-1抗癌组合疗法
技术领域
本发明涉及用于治疗癌症的组合疗法以及用于这种组合疗法的化合物。用于组合的化合物为胰岛素样生长因子(IGF)拮抗剂和PD-1拮抗剂。
背景技术
有大量的科学、流行病学和临床文献都涉及IGF在许多不同癌症类型的发生、发展和转移中的作用(由Jerome等人，End.Rel.Cancer 10:561-578，2003；和Pollak等人，Nature Rev.Can.4:505-518，2004综述)。
正在采用各种抑制IGF途径的策略，例如抗受体单克隆抗体(包括加尼他单抗(ganitumab)、西妥木单抗(cixutumumab)和达洛珠单抗(dalotuzumab))、酪氨酸激酶抑制剂(TKI，包括双重IGF-1R和InsR酪氨酸激酶抑制剂BMS-754807、KW2450和linsitinib)和抗-IGF配体抗体(dusigitumab＝MEDI-573，Astra Zeneca/Med Immune)。这些药物已在临床上作为单一疗法或与细胞毒性药剂和/或其它分子靶向药剂联合测试。
大多数癌症都表达IGF-1受体，但有证据表明，肿瘤中会发生配体特别是IGF-2的过度表达。已显示IGF-2通过与IGF-1受体和胰岛素受体-A(InsR-A)结合在癌细胞中发出其增殖/存活信号。对IGF-1和IGF-2两者的中和抗体的主要优点是，俘获(sequestration)配体可确保不会发生由IGF-1或IGF-2引起的受体激活，并消除通过IGF-2激活InsR-A的可能性。此外，IGF-1和IGF-2阻断抗体不干扰胰岛素通过InsR-B的代谢信号传导。因此，它提供在多种癌症中具有治疗潜力的平衡方法，避免用单克隆抗体(mAb)或TKI靶向IGF-1R的陷阱。
大量证据表明，IGF信号传导系统不是真正的致癌驱动因素(例如突变或改变的EGFR、HER2、ALK、BRAF或KRAS)，而是在建立有效疗法后激活的耐药机制。例如，IGF轴被认为是赋予对EGFR抑制剂和下游途径分子的抑制剂(例如mTOR或MEK)抵抗性的旁路途径。基于IGF轴与其它受体酪氨酸激酶(RTK)信号传导网络(包括EGFR、HER2、VEGFR、PGDFR、cMET和ALK)之间的广泛相互作用，以及关于驱动细胞增殖和存活的途径的冗余，已研究将IGF靶向药物与其它RTK和下游效应子结合的组合。临床前证据进一步表明，IGF信号传导可保护肿瘤细胞免受化疗法或放射疗法诱导的细胞死亡；因此，已研究IGF轴抑制剂与标准细胞毒性药剂的组合(Ireland等人，Cancer Res.76(23):6851-6863，2016)。
尽管有令人信服的临床前理论依据，但IGF-1R抑制药物与化学疗法或其它靶向疗法联合试验的结果显示，临床获益有限(Langer等人，J Clin Oncol.2014；32(19):2059-66；Fuchs等人，Ann Oncol.2015；26(5):921-7，Sclafani等人，J Natl Cancer Inst.2015；107(12):djv258；Van Cutsem等人，Clin Cancer Res.2014；20(16):4240-50)。
癌症免疫疗法是肿瘤学的一个分支，其中免疫系统用于治疗癌症，这与直接切除或治疗肿瘤的现有常见治疗方法形成鲜明对比。这种治疗概念是基于对T细胞表面上许多抑制这些细胞免疫功能的蛋白质的鉴定。这些蛋白质中列出的是PD-1(程序性细胞死亡1)。PD1是T细胞活性的关键调节因子。最近，已经显示出在一系列不同的癌症环境中，拮抗性的PD-1抗体分子可用于刺激免疫系统从而治疗癌症。
尽管增加了治疗方法，仍然需要针对癌症患者的改进的治疗选择。通过与其它化合物联合使用疗法(特别是在肿瘤学中)和/或改善给药方案，可改善治疗剂的功效。即使已经提出了组合几种治疗剂的概念，并且尽管正在研究各种组合疗法并且在临床试验中，但仍需用于治疗癌症疾病(例如实体瘤)的新的有效的治疗概念，所述概念显示出优于标准疗法的优势，例如更好的治疗结果、有益效果、优异的功效和/或改善的耐受性，例如减少了组合治疗的副作用。
因此，本发明的目的是提供用于癌症治疗的药物组合物和方法，以改善治疗功效和适用性，特别是提供与当前使用和/或现有技术已知的治疗/方法相比具有某些优势的组合治疗/方法。这些优势可包括体内功效(例如，改善临床反应、扩大反应范围、增加反应速度、反应持续时间、疾病稳定率、稳定持续时间、疾病进展时间、无进展生存期(PFS)和/或总生存期(OS)，较晚出现耐药性等)、安全且耐受良好的给药方式以及不良事件发生频率和严重性降低。
发明内容
本发明提供用胰岛素样生长因子(IGF)拮抗剂(优选抗-IGF抗体，和最优选抗-IGF-1-IGF-2抗体)与程序性细胞死亡1(PD-1)信号传导途径(PD-1是一种免疫抑制蛋白，可负调节T细胞受体信号)的拮抗剂一起用于治疗患者的方法。预期该治疗将导致肿瘤生长的减少甚至肿瘤缩小。因此，本发明提供包含抗-IGF抗体(例如，抗-IGF-1-IGF-2抗体)和PD-1拮抗剂的组合疗法。
在详细方面，本发明涉及治疗和/或预防肿瘤性或过度增殖性疾病、特别是癌症或肿瘤性疾病的方法，其包括向有此需要的患者给药
a)治疗有效量的化合物A，和
b)治疗有效量的化合物B，
其中
·化合物A为抗-IGF抗体，
且其中
·化合物B为PD-1拮抗剂。
在一个相关的方面中，本发明提供化合物A和化合物B，其各自用于在治疗和/或预防肿瘤性或过度增殖性疾病的方法中，所述方法包括向有此需要的患者给药化合物A和化合物B，其中
·化合物A为抗-IGF抗体，
且其中
·化合物B为PD-1拮抗剂。
本发明进一步涉及化合物A和化合物B的用途，其用于制备药物组合物，所述药物组合物用于治疗和/或预防肿瘤性或过度增殖性疾病，其中化合物A和化合物B旨在或提供为化合物A和化合物B的组合给药，其中化合物A和化合物B如上所定义。
在另一个方面中，本发明公开药物组合物，其包含
a)化合物A，和
b)化合物B，
其中
·化合物A为抗-IGF抗体，
且其中
·化合物B为PD-1拮抗剂。
在进一步的方面中，本发明涉及试剂盒，其包含
a)第一药物组合物，其包含化合物A，和
b)第二药物组合物，其包含化合物B，
其中化合物A和化合物B如上所定义。
在本发明的一些实施方案中，化合物A为抗-IGF抗体分子，其包含含有氨基酸序列SEQ ID NO:40(HCDR1)、SEQ ID NO:41(HCDR2)和SEQ ID NO:42(HCDR3)的重链互补决定区和含有氨基酸序列SEQ ID NO:43(LCDR1)、SEQ ID NO:44(LCDR2)和SEQ ID NO:45(LCDR3)的轻链决定区。
在本发明的一些实施方案中，如本文所述的抗-IGF抗体为抗-IGF抗体分子，其包含含有氨基酸序列SEQ ID NO:46的重链可变区和含有氨基酸序列SEQ ID NO:47的轻链可变区。
在本发明的一些实施方案中，如本文所述的抗-IGF抗体为抗-IGF抗体分子，其包含含有氨基酸序列SEQ ID NO:48的重链以及含有氨基酸序列SEQ ID NO:49的轻链(在本文中称为“BI-IGF”)。在本发明的一些实施方案中，化合物B为抗-PD-1抗体或抗-PD-L1抗体。
在本发明的一些实施方案中，抗-PD-1抗体选自帕博利珠单抗(pembrolizumab)、纳武单抗(nivolumab)、皮地利珠单抗(pidilizumab)、PDR-001、BAP049-克隆-B、BAP049-克隆-E、PD1-1、PD1-2、PD1-3、PD1-4和PD1-5。
在本发明的一些实施方案中，抗-PD-L1抗体选自阿特珠单抗、阿维鲁单抗和度法鲁单抗。
附图说明
图1：(A)用化合物B进行的单剂治疗延迟肿瘤的生长，中位TGI为71％。组合治疗更有效，得到TGI为83％。(B)所有治疗方案均耐受良好，无明显体重减轻。
图2：如本文所定义的抗-IGF(BI-IGF)抗体的可变结构域的氨基酸序列。CDR序列带有下划线：(A)VL BI-IGF(SEQ ID NO:47)；(B)VH BI-IGF(SEQ ID NO:46)。
图3：抗-PD1抗体分子(本文定义的抗-PD1抗体PD1-1、PD1-2、PD1-3、PD1-4和PD1-5)的可变结构域的氨基酸序列。CDR序列带有下划线。(A)VL PD1-1(SEQ ID NO:20)；VLPD1-2；(SEQ ID NO:22)；VL PD1-3(SEQ ID NO:24)；VL PD1-4，(SEQ ID NO:26)；VL PD1-5(SEQ ID NO:28)；(B)VH PD1-1(SEQ ID NO:19)；VH PD1-2；(SEQ ID NO:21)；VH PD1-3(SEQID NO:23)；VH PD1-4，(SEQ ID NO:25)；VH PD1-5(SEQ ID NO:27)。
具体实施方式
本发明涉及方法、用于用途的化合物、化合物的用途、药物组合物和试剂盒，全部指化合物A和化合物B的组合治疗或组合提供，其中
·化合物A为抗-IGF抗体，且其中
·化合物B为PD-1拮抗剂。
本发明人惊奇地发现，与仅用化合物A或仅用化合物B治疗相比，化合物A和化合物B的组合能够在癌症治疗中产生治疗效果，例如减少或甚至缩小肿瘤生长。化合物A和B协同作用，可减少癌症。
根据本发明所述的化合物A为抗-IGF抗体特别为抗-IGF抗体分子，其优选地与人IGF-1和/或IGF-2结合。
胰岛素样生长因子-1(IGF-1；70个氨基酸的多肽)和胰岛素样生长因子2(IGF-2；67个氨基酸的多肽)是血清中存在的7.5kD可溶性因子，可有效地刺激许多哺乳动物细胞的生长(Pollak等人，Nature Rev.Can.4:505-518，2004)。IGF分泌到血液中后，会与IGF结合蛋白(IGFBP)形成复合物，从而保护它们免受血清途中蛋白降解至其目标组织并阻止其与IGF受体缔合。还已知IGF以自分泌或旁分泌的方式分泌于靶组织本身中。已知这发生在正常的胎儿发育过程中，在该过程中，IGF在组织、骨骼和器官的生长中起关键作用。在许多癌症组织中也发现了这种现象，认为肿瘤细胞和基质细胞之间存在旁分泌信号传导或肿瘤细胞自身产生自分泌IGF(LeRoith D等人，Cancer Lett 195(2):127-37，2003)。
IGF-1和IGF-2能够结合在许多具有相似的亲和力的正常组织上表达的IGF-1受体(IGF-1R)，该组织在功能上是由二聚化的α-和β-亚单元组成的460kD异四聚体(Rubin R等人，Lab Invest 73(3):311-31，1995)。IGF-2也可与IGF-2受体结合，这被认为可以阻止IGF-2结合IGF-1R并通过IGF-1R发出信号。在这方面，已证明IGF-2R是一种肿瘤抑制蛋白。IGF-1R与胰岛素受体在结构上相似，以两种形式存在，即IR-A和IR B，两者的区别在于IR A的胞外域中存在交替剪接的12个氨基酸外显子缺失。IR-B是在大多数正常的成人组织中表达的主要的IR同工型，在其中它介导胰岛素对新陈代谢的作用。另一方面，已知IR-A在发育中的胎儿组织中高表达，而在成人正常组织中却没有表达。最近的研究还表明，在某些癌症中IR A而非IR-B高表达。IR A中的外显子缺失对胰岛素结合没有影响，但确实引起小的构象变化，使IGF-2结合的亲和力比IR-B高得多(Frasca F等人，Mol Cell Biol19(5):3278-88，1999；Pandini G等人，J Biol Chem 277(42):39684-95，2002)。因此，由于其在癌症组织中的表达和对IGF-2结合的倾向增加，在介导IGF-2在癌症中的促有丝分裂作用中，IR-A可能与IGF-1R一样重要。
IGF与IGF-1R的结合触发复杂的细胞内信号传导级联，其导致刺激增殖和存活的蛋白质的活化(Pollak等人，Nature Rev.Can.4:505-518，2004)。与EGFR和HER2neu受体不同，癌症中IGF-1R或IR A受体没有已知的扩增，这表明受体激活受活性配体的存在控制。
通过阻断受体-配体结合，减少或阻止通过受体的酪氨酸激酶活性的配体诱导的受体信号传导。能够阻断受体-配体结合的抗体通常被称为中和抗体。
根据本发明所述的化合物B是针对蛋白质程序性死亡1(PD-1)家族成员的拮抗剂，例如针对PD-1本身或其配体之一，PD-L1或PD-L2。已知PD-1为负调节TCR信号的免疫抑制蛋白(Ishida，Y.等人(1992)EMBO J.11:3887-3895；Blank，C.等人(2006)Immunol.Immunother.56(6):739-745)。PD-1和PD-L1之间的相互作用可充当免疫检查点，例如，可导致肿瘤浸润淋巴细胞减少、T细胞受体介导的增殖减少和/或癌细胞的免疫逃避(Dong等人(2003)J.Mol.Med.81:281-7；Blank等人(2005)CancerImmunol.Immunother.54:307-314；Konishi等人(2004)Clin.Cancer Res.10:5094-100)。可通过抑制PD-1与PD-L1或PD-L2的局部相互作用来逆转免疫阻遏；当PD-1与PD-L2的相互作用也被阻断时，这种作用是加和的(Iwai等人(2002)Proc.Nat’l.Acad.Sci USA 99:12293-7；Brown等人(2003)J.Immunol.170:1257-66)。
PD-1是扩展的CD28/CTLA-4细胞调节因子家族的抑制型成员。CD28家族的其它成员包括CD28、CTLA-4、ICOS和BTLA。据信，PD-1作为单体存在，其缺乏其它CD28家族成员的未配对半胱氨酸残基特性。PD-1在活化的B细胞、T细胞和单核细胞上表达(Okazaki等人(2002)Curr Opin Immunol 14:391779-82；Bennett等人(2003)J.Immunol.170:711-8)。已确定PD-1的两个配体PD-L1(B7-H1)和PD-L2(B7-DC)，已显示它们在与PD-1结合后会下调T细胞活化(Freeman等人(2000)J.Exp.Med.192:1027-34；Carter等人(2002)Eur.J.Immunol.32:634-43)。PD-L1和PD-L2都是与PD-1结合的B7同源物。在多种人类癌症中有大量PD-L1(Dong等人(2002)Nat.Med.8:787-9)。
PD-1基因编码55kDa的I型跨膜蛋白，该蛋白是Ig基因超家族的一部分(Agata等人(1996)Int Immunol.8:765-72)。完整的PD-1序列可在GenBank编号U64863下找到。尽管PD-1在结构上类似于CTLA-4，但PD-1缺少对于B7-1和B7-2结合很重要的MYPPY基序(SEQ IDNO:39)。
鉴于上述情况，近年来已经开发了作为PD-1拮抗剂的单克隆抗体用于治疗，更确切地说，用于治疗包括癌症和传染性疾病在内的各种疾病(例如，WO2006/121168；WO2015/112900)。可根据本发明使用任何此类抗体。
本发明意义上的PD-1拮抗剂是抑制PD-1与其受体或配体相互作用的化合物。
优选地，PD-1拮抗剂为PD-1的抑制剂或PD-L1的抑制剂。PD-1拮抗剂可优选为抗-PD-1-抗体或抗-PD-L1-抗体，更优选人源化或完全人抗-PD-1抗体或人源化或完全人抗-PD-L1抗体。这些抗体中的任何一种可为重组人抗体。
可与“抗体分子”互换使用的术语“抗体”涵盖各种抗体结构，包括但不限于多克隆或单克隆、嵌合、人源化、人、单、双或多特异性抗体单链抗体、单结构域抗体以及片段化的抗体(也称为抗体片段)，例如Fab、F(ab)2、F(ab’)2、Fab’，抗体的单链可变片段(scFv)或抗原结合结构域，只要它们表现出所需的抗原结合活性即可。术语“抗体”应涵盖由淋巴细胞产生且例如存在于血清中的完整免疫球蛋白、杂交瘤细胞系分泌的单克隆抗体、在宿主细胞中重组表达产生的多肽(它们具有免疫球蛋白或单克隆抗体的结合特异性)，以及通过进一步加工同时保留其结合特异性而衍生自此类免疫球蛋白、单克隆抗体或多肽的分子。特别地，术语“抗体”包括包含两条重链和两条轻链的完整的免疫球蛋白。该术语进一步涵盖免疫球蛋白的片段，如Fab片段和具有一个或多个衍生自免疫球蛋白的可变结构域的多肽，例如单链抗体(scFv)和单结构域抗体等。
抗体可能具有效应子功能，例如ADCC或CDC，其通常由抗体的Fc部分(抗体恒定区)介导，或者可不具有效应子功能，例如通过缺乏Fc部分或具有封闭的、掩蔽的Fc部分，实质上是未被免疫细胞或免疫系统组分(如补体系统)识别的Fc部分。
抗体或其片段可为任何类型的，例如抗体。IgA、IgD、IgE、IgG、IgM。优选IgG。
本文所用的术语“单克隆抗体”或“单克隆抗体组成”是指单一氨基酸组成的抗体分子的制剂。
“重组抗体”是由重组工程改造的宿主细胞产生的抗体。任选地将其分离或纯化。
“人抗体”是其具有的氨基酸序列对应于由人细胞产生的或衍生自利用人抗体库或其它人抗体编码序列的非人来源的抗体。该人抗体的定义特别排除包含非人抗原结合残基的人源化抗体。
如本文所用，术语“重组人抗体”旨在包括通过重组方式制备、表达、产生或分离的所有人抗体，例如从如NS0或CHO细胞的宿主细胞或动物(例如小鼠)分离的抗体，其对使用转染至宿主细胞中的重组表达载体表达的人免疫球蛋白基因或抗体为转基因的。此类重组人抗体具有重排形式的可变区和恒定区。已对根据本发明的重组人抗体进行了体内体细胞超突变。因此，尽管重组人抗体的VH和VL区的氨基酸序列源自人种系VH和VL序列并与之相关，但可能不天然存在于体内的人抗体种系库中。
“人源化”抗体是指包含来自非人超可变区(HVR)的氨基酸残基和来自人FR的氨基酸残基的嵌合抗体。在某些实施方案中，人源化抗体将包含至少一个(通常是两个)可变结构域中的基本上所有可变结构域，其中所有或基本上所有的HVR(例如互补决定区(CDR))对应于非人抗体的HVR，并且所有或基本上整个框架区(FR)对应于人抗体的FR。人源化抗体可任选地包含源自人抗体的抗体恒定区的至少一部分。抗体(例如非人抗体)的“人源化形式”指经过人源化的抗体。
多肽(例如免疫球蛋白、抗体或通常是抗原结合分子或其片段)的“结合”意指对某些表位、抗原或蛋白质(或对其至少一部分、片段或表位)具有“亲和力”(affinity)或“具有特异性”。
通常，术语“特异性”是指特定抗原结合分子(例如本文所述的抗体)可结合的不同类型的抗原或表位的数目。抗原结合分子的特异性可基于其亲和力和/或亲合力(avidity)来确定。亲和力由抗原与抗原结合蛋白(KD)的解离平衡常数表示，是表位和抗原结合蛋白上抗原结合位点之间结合强度的量度：KD的值越小，表位与抗原结合分子之间的结合强度越强(或者，亲和力也可以表示为亲和力常数(KA)，为1/KD)。如技术人员将了解的，亲和力可以以本领域已知的方式来确定，这取决于目标的特定抗原。亲和力是衡量包含它的抗原结合分子(例如免疫球蛋白、抗体或者通常为抗原结合分子或其片段)与相关抗原之间结合强度的量度。亲合力与表位及其抗原结合分子上的抗原结合位点之间的亲和力以及抗原结合分子上存在的相关结合位点的数量均有关。
表位是被抗原结合分子(例如本文所述的抗体)结合的抗原区域。术语“表位”包括能够特异性结合抗体或抗原结合部分的任何多肽决定簇。在某些实施方案中，表位决定簇包括分子的化学活性表面分子组，例如氨基酸、聚糖侧链、磷酰基或磺酰基，并在某些实施方案中，可具有特定的三维结构特征和/或特定的电荷特征。构象性和非构象性表位的区别在于，在存在变性溶剂的情况下，失去与前者的结合而不失去与后者的结合。如本文所用，术语“结合”和“特异性结合”是指在体外测定中，优选在使用纯化的野生型抗原的等离子体共振测定(BIAcore
Figure BDA0002431665500000091
，GE-Healthcare Uppsala，Sweden)中，抗体或抗原结合部分与抗原表位的结合。
如本文所用，表述“可变结构域”或“可变区”或Fv表示直接与抗体与抗原结合有关的一对轻链和重链。轻链的可变结构域缩写为“VL”，而重链的可变结构域缩写为“VH”。可变轻链和重链结构域具有相同的通用结构，并且每个结构域包含四个框架区(FR)，其序列广泛保守，并通过三个HVR(或CDR)连接。框架区采用β-折叠构象，且CDR可形成连接β-折叠结构的环。每条链中的CDR被框架区保持在其三维结构中，并与来自另一条链的CDR一起形成抗原结合位点。抗体的重链和轻链CDR区在根据本发明的抗体的结合特异性/亲和力中起特别重要的作用，因此提供本发明的另一个目的。
在本发明的上下文中，对CDR的引用是基于Chothia(Chothia and Lesk，J.Mol.Biol.1987，196:901–917)以及Kabat(E.A.Kabat，T.T.Wu，H.Bilofsky，M.Reid-Miller and H.Perry，Sequence of Proteins of Immunological Interest，NationalInstitutes of Health，Bethesda(1983))的定义。
在本申请中使用的术语“恒定结构域”或“恒定区”表示除可变区之外的抗体的结构域的总和。恒定区不直接参与抗原的结合，但是表现出各种效应子功能。
如本文所公开的抗体中所用的“恒定结构域”优选地是人来源的，其来自IgG1、IgG2、IgG3或IgG4亚类的人抗体的恒定重链区和/或恒定轻链κ或λ区。这样的恒定结构域和区在现有技术中是众所周知的，例如由Kabat等人(“Sequence of proteins ofimmunological interest”，US Public Health Services，NIH Bethesda，MD，PublicationNo.91)描述。
抗体的“Fc部分”不直接参与抗体与抗原的结合，但是表现出各种效应子功能。“抗体的Fc部分”是本领域技术人员熟知的术语，并根据木瓜蛋白酶对抗体的切割来定义。根据其重链恒定区的氨基酸序列，抗体或免疫球蛋白分为以下种类：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，其中一些可进一步分为亚类(同种型)，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2。根据重链恒定区，不同类别的免疫球蛋白分别称为α、δ、ε、γ和μ。抗体的Fc部分基于补体激活、C1q结合和Fc受体结合直接参与ADCC(抗体依赖性细胞介导的细胞毒性)和CDC(补体依赖性细胞毒性)。补体激活(CDC)通过补体因子C1q与大多数IgG抗体亚类的Fc部分结合而启动。尽管抗体对补体系统的影响取决于某些条件，但与C1q的结合是由Fc部分中定义的结合位点引起的。这样的结合位点在现有技术中是已知的并描述于Boackle，R.J.，等人，Nature282(1979)742-743；Lukas，T.J.，等人，J.Immunol.127(1981)2555-2560；Brunhouse，R.，andCebra，J.J.，Mol.Immunol.16(1979)907-917；Burton，D.R.，等人，Nature 288(1980)338-344；Thommesen，J.E.，等人，Mol.Immunol.37(2000)995-1004；Idusogie，E.E.，等人，J.Immunol.164(2000)4178-4184；Hezareh，M.，等人，J.Virology 75(2001)12161-12168；Morgan，A.，等人，Immunology 86(1995)319-324；EP 0 307 434。此类结合位点例如L234、L235、D270、N297、E318、K320、K322、P331和P329(根据EU索引Kabat编号，E.A.，请参见下文)。IgG1、IgG2和IgG3亚类的抗体通常显示补体激活以及C1q和C3结合，而IgG4不激活补体系统并且不结合C1q和C3。
当在本文中使用时，术语“包含(comprising)”及其变体例如“包含(comprises)”和“包含(comprise)”可用术语“含有”或“包括”或“具有”代替。
一方面，本文描述的化合物A涉及分离的抗体分子(例如人或人源化的抗体分子)，其a)结合人IGF-I和IGF-2，使得i)IGF-I和IGF-2与IGF-I受体的结合被抑制，并且ii)IGF-I受体介导的信号传导被抑制，b)与小鼠和大鼠IGF-I和IGF-2结合，c)不与人胰岛素结合。优选地，本发明及其所有实施方案中的抗IGF抗体分子具有包含氨基酸序列SEQ ID NO:40(HCDR1)、SEQ ID NO:41(HCDR2)和SEQ ID NO:42(HCDR3)的重链互补决定区和包含氨基酸序列SEQ ID NO:43(LCDR1)、SEQ ID NO:44(LCDR2)和SEQ ID NO:45(LCDR3)的轻链决定区。
在另一个实施方案中，如本文所述的抗-IGF抗体是指抗-IGF抗体分子，其具有包含氨基酸序列SEQ ID NO:46的重链可变区和包含氨基酸序列SEQ ID NO:47的轻链可变区。
在另一个实施方案中，如本文所述的抗-IGF抗体是指抗-IGF抗体分子，其具有包含氨基酸序列SEQ ID NO:48的重链以及包含氨基酸序列SEQ ID NO:49的轻链(在本文中称为“BI-IGF”)。
优选地，如本文所述的抗-IGF抗体为人抗-IGF抗体。
特别地，抗-IGF抗体为如表1中以SEQ ID号和各自的氨基酸序列的方式示出的序列定义的抗体分子，其中HCDR表示重链可变结构域的CDR序列，LCDR表示轻链可变结构域的CDR序列，VH表示重链可变结构域，VL表示轻链可变结构域，HC表示(全长)重链和LC表示(全长)轻链：
表1：本文所述的抗-IGF抗体的CDR、VH、VL、HC和LC序列的SEQ ID NO(序列编号)
Figure BDA0002431665500000121
在一方面中，如本文所述的抗-IGF抗体不以比结合人IGF-I或IGF-2所需的最小浓度高至少100倍的浓度结合人胰岛素。
在另一个方面中，本文所述的抗-IGF抗体分子的性质的特征在于，与其和胰岛素的亲和力相比，抗-IGF抗体分子分别对IGF-1和IGF-2的亲和力至少为100倍，甚至超过1000倍。即使在剂量很高(例如大于100mg/kg)时可能无法完全排除弱结合，但抗-IGF抗体分子在治疗剂量下不与胰岛素结合。
在一些实施方案中，本文所述的抗-IGF抗体分子不影响人胰岛素的促有丝分裂特性，所述人胰岛素的促有丝分裂特性是由其与胰岛素受体的结合介导的。(通常，促有丝分裂特性定义为化合物促使细胞开始细胞分裂，触发有丝分裂的能力，例如在胰岛素的情况下，其促进细胞生长的能力)。
在一些实施方案中，如本文所述的抗-IGF抗体除了其抑制经由IGF-1受体介导的IGF信号传导的能力外，还具有抑制经由胰岛素受体IR-A介导的IGF-2信号传导的能力。
本文所述的抗IGF抗体对IGF-1和IGF-2具有令人惊讶的高中和效力。此外，与对IGF-2相比，它们对IGF-1具有意想不到的更高的效力和结合亲和力。它们具有高溶解性和稳定性，在可变结构域中没有不良的糖基化或水解基序，并且在循环中具有长的半衰期。
在一些实施方案中，本文所述的抗-IGF抗体例如通过减少调节性T细胞的数量来减少肿瘤的免疫抑制环境。在肿瘤中，PD-1阻滞通过激活CD8+T细胞(细胞毒性T细胞，CTL)诱导抗肿瘤免疫反应。不期望受到任何科学理论的束缚，如本文所述的抗-IGF抗体可通过耗尽调节性T细胞(Tregs)来进一步增强抗肿瘤免疫应答，从而导致肿瘤微环境中免疫阻遏的降低。
在WO 2010/066868、WO 2013/060872和WO 2014/135611中公开了上述抗-IGF抗体的制造和治疗用途。特别地，这些文献充分公开了本发明中使用的抗-IGF抗体分子的制备方法。
在进一步的方面中，在本发明中是指如本文所述的抗-IGF抗体分子，其用作药物。
在进一步的方面中，在本发明中是指包含作为活性成分的抗-IGF抗体分子的药物组合物，所述抗体优选为全长抗体，其由表1中所示的CDR、VH、VL、HC和LC序列定义。
抗-IGF抗体可以以1mg/kg至50mg/kg的剂量向患者给药，例如以至少20mg/kg、25mg/kg、30mg/kg和35mg/kg中的任何一种直到40mg/kg、45mg/kg和50mg/kg中的任何一种给药，通过一次或多次单独给药或连续输注，例如，1小时内输注。典型的治疗方案通常涉及每周一次至每三周一次的抗体给药。
在一些实施方案中，所述抗-IGF抗体以至少20mg/kg、25mg/kg、30mg/kg和35mg/kg中的任何一种直到40mg/kg、45mg/kg和50mg/kg中的任何一种给药，在四个星期的治疗周期中每周一次，每两周一次，每三周一次。例如，可以每周一次、每周两次、每三周一次以15、20、25、30或35mg/kg(例如，25mg/kg)的剂量给药。可以以10mg/mL至100mg/mL的抗体的浓度(例如，以10mg/mL、30、50、65或75mg/mL的浓度)制备抗体。抗体可以优选以至少750mg(直到1000mg)的总剂量通过静脉内输注1小时向患者给药，每周重复一次，直到疾病进展。
本发明含义内的PD-1拮抗剂及其所有实施方案为抑制PD-1与其受体相互作用的化合物，优选抗-PD-1抗体或抗-PD-L1抗体。
优选地，所述PD-1拮抗剂，即本发明中的抗-PD-1抗体或抗-PD-L1抗体及其所有实施方案为人源化的或完全人抗-PD-1抗体或人源化的或完全人抗-PD-L1抗体。
PD-1拮抗剂在本领域是众所周知的，例如Li等人，Int.J.Mol.Sci.2016，17，1151的综述(通过引用并入本文)。根据本发明，可使用Li等人公开的任何拮抗剂尤其是抗体以及下文公开的其它抗体。优选地，本发明的PD-1拮抗剂及其所有实施方案选自以下抗体(B0)：
-帕博利珠单抗(抗-PD-1抗体)；
-纳武单抗(抗-PD-1抗体)；
-皮地利珠单抗(抗-PD-1抗体)；
-PDR-001(抗-PD-1抗体)；
-如下文和EP16170174.3中所公开的PD1-1、PD1-2、PD1-3、PD1-4和PD1-5(抗-PD-1抗体)；
-抗-PD-1抗体(一般和/或特异性)，其公开于WO 2015/112900：
ο如在WO 2015/112900(第171页)的表1中定义的任一抗体
ο如在WO 2015/112900(第171页)的表1中定义的任一人源化抗体
ο如在WO 2015/112900(第171页)的表1中定义的BAP049-hum01至BAP049-hum16中的任一种
ο如在WO 2015/112900(第171页)的表1中定义的BAP049-克隆-A至BAP049-克隆-E中的任一种；
-阿特珠单抗(atezolizumab)(抗-PD-L1抗体)；
-阿维鲁单抗(avelumab)(抗-PD-L1抗体)；
-度法鲁单抗(durvalumab)(抗-PD-L1抗体)；
-抗-PD-L1抗体(一般和/或特异性)，其公开于WO 2016/061142：
ο如在WO 2016/061142的表1(第265页)中定义的任一抗体；
ο如在WO 2016/061142的表1(第265页)中定义的任一人源化抗体；
ο如在WO 2016/061142的表1(第265页)中定义的BAP058-hum01至BAP058-hum17中的任一种
ο如在WO 2016/061142的表1(第265页)中定义的BAP058-克隆-K至BAP058-克隆-O中的任一种。
帕博利珠单抗(以前也称为lambrolizumab；商品名Keytruda；也称为MK-34750)公开于例如Hamid，O.等人(2013)New England Journal of Medicine 369(2)：134-44中，其为一种与PD-1结合的人源化IgG4单克隆抗体；它含有在C228P处的突变，旨在防止Fc介导的细胞毒性。帕博利珠单抗公开于例如US 8,354,509和WO2009/114335中。它被FDA批准用于治疗患有不可切除或转移性黑素瘤的患者和患有转移性NSCLC的患者。
纳武单抗(CAS登记号：946414-94-4；BMS-936558或MDX1106b)为一种完全人IgG4单克隆抗体，可特异性阻断PD-1，其缺乏可检测的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)。纳武单抗公开于例如US 8,008,449和WO2006/121168中。它被FDA批准用于治疗患有不可切除或转移性黑素瘤、转移性NSCLC和晚期肾细胞癌的患者。
皮地利珠单抗(CT-011；Cure Tech)是一种与PD-1结合的人源化IgG1k单克隆抗体。皮地利珠单抗公开于例如WO 2009/101611中。
PDR-001或PDR001是高亲和力的、配体阻断的人源化抗PD-1IgG4抗体，其阻断PD-L1和PD-L2与PD-1的结合。PDR-001公开于WO2015/112900和WO2017/019896中。
抗体PD1-1至PD1-5是由表2中所示序列以SEQ ID号定义的抗体分子，其中VH表示重链可变结构域，VL表示轻链可变结构域，HC表示(全长)重链，且LC表示(全长)轻链：
表2：CDR、VH、VL、HC和LC序列的SEQ ID NO
抗-PD1抗体 CDR序列 VH序列 VL序列 HC序列 LC序列
PD1-1 1-6 19 20 29 30
PD1-2 7-12 21 22 31 32
PD1-3 13-18 23 24 33 34
PD1-4 13-18 25 26 35 36
PD1-5 13-18 27 28 37 38
且其中SEQ ID号的氨基酸序列(以及序列名称)如表3所示：
表3：
Figure BDA0002431665500000161
Figure BDA0002431665500000171
Figure BDA0002431665500000181
Figure BDA0002431665500000191
Figure BDA0002431665500000201
特别地，本文所述的抗-PD-1抗体分子包含：(a)重链CDR，其包含氨基酸序列SEQID NO:1(HCDR1)、SEQ ID NO:2(HCDR2)和SEQ ID NO:3(HCDR3)，以及轻链CDR，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:4(LCDR1)、SEQ ID NO:5(LCDR2)和SEQ ID NO:6(LCDR3)；或，b)重链CDR，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:7(HCDR1)、SEQ ID NO:8(HCDR2)和SEQ ID NO:9(HCDR3)，以及轻链CDR，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:10(LCDR1)、SEQ ID NO:11(LCDR2)和SEQ ID NO:12(LCDR3)；或(c)重链CDR，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:13(HCDR1)、SEQ ID NO:14(HCDR2)和SEQ ID NO:15(HCDR3)，以及轻链CDR，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:16(LCDR1)、SEQ ID NO:17(LCDR2)和SEQ ID NO:18(LCDR3)。
在一些实施方案中，所述抗-PD-1抗体分子具有重链可变结构域，其包含选自SEQID NO：19、21、23、25和27的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗-PD-1抗体分子具有轻链可变结构域，其包含选自SEQID NO：20、22、24、26和28的氨基酸序列。
在一些实施方案中，所述抗-PD-1抗体分子具有(a)包含氨基酸序列SEQ ID NO:19的重链可变结构域，以及包含氨基酸序列SEQ ID NO:20的轻链可变结构域，(b)包含氨基酸序列SEQ ID NO:21的重链可变结构域，以及包含氨基酸序列SEQ ID NO:22的轻链可变结构域，(c)包含氨基酸序列SEQ ID NO:23的重链可变结构域，以及包含氨基酸序列SEQ ID NO:24的轻链可变结构域，(d)包含氨基酸序列SEQ ID NO:25的重链可变结构域，以及包含氨基酸序列SEQ ID NO:26的轻链可变结构域，或(e)包含氨基酸序列SEQ ID NO:27的重链可变结构域，以及包含氨基酸序列SEQ ID NO:28的轻链可变结构域。
在一些实施方案中，所述抗-PD-1抗体具有(a)包含氨基酸序列SEQ ID NO:29的重链，以及包含氨基酸序列SEQ ID NO:30的轻链，(b)包含氨基酸序列SEQ ID NO:31的重链，以及包含氨基酸序列SEQ ID NO:32的轻链，(c)包含氨基酸序列SEQ ID NO:33的重链，以及包含氨基酸序列SEQ ID NO:34的轻链，(d)包含氨基酸序列SEQ ID NO:35的重链，以及包含氨基酸序列SEQ ID NO:36的轻链，或(e)包含氨基酸序列SEQ ID NO:37的重链，以及包含氨基酸序列SEQ ID NO:38的轻链。
阿特珠单抗(特善奇(Tecentriq)，也称为MPDL3280A)是噬菌体衍生的靶向PD-L1的人IgG1k单克隆抗体，其被描述于Deng等人，mAbs 2016；8：593-603中。它已被FDA批准用于治疗患有尿路上皮癌瘤的患者。
阿维鲁单抗为完全人类抗PD-L1 IgG1单克隆抗体，其例如描述于Boyerinas等人，Cancer Immunol.Res.2015；3:1148-1157中。
度法鲁单抗(MEDI4736)为对PD-L1具有高度特异性的人类IgG1k单克隆抗体，其例如描述于Stewart等人，Cancer Immunol.Res.2015；3:1052-1062或Ibrahim等人Semin.Oncol.2015；42:474-483中。
此外，PD-1拮抗剂由Li等人(同上)公开或在临床试验中已知，例如AMP-224、MEDI0680(AMP-514)、REGN2810、BMS-936559、JS001-PD-1、SHR-1210、BMS-936559、TSR-042、JNJ-63723283、MEDI4736、MPDL3280A和MSB0010718C，其可以用作上述拮抗剂的替代或补充。
本文使用的INN还意在涵盖具有与起始抗体相同或基本相同的氨基酸序列的所有生物相似抗体(biosimilar antibodies)，其包括但不限于在美国42USC§262分节(k)及其它司法管辖区的同等规定中授权的那些生物相似抗体。
以上列出的PD-1拮抗剂在本领域中是已知的，具有它们各自的制造、治疗用途和性质。
在一个实施方案中，所述PD-1拮抗剂为帕博利珠单抗(B1)。
在另一个实施方案中，所述PD-1拮抗剂为纳武单抗(B2)。
在另一个实施方案中，所述PD-1拮抗剂为皮地利珠单抗(B3)。
在另一个实施方案中，所述PD-1拮抗剂为阿特珠单抗(B4)。
在另一个实施方案中，所述PD-1拮抗剂为阿维鲁单抗(B5)。
在另一个实施方案中，所述PD-1拮抗剂为度法鲁单抗(B6)。
在另一个实施方案中，所述PD-1拮抗剂为PDR-001(B7)。
在另一个实施方案中，所述PD-1拮抗剂为如WO 2015/112900中表1(第171页)所限定的BAP049-克隆-B(B8)。
在另一个实施方案中，所述PD-1拮抗剂为如WO 2015/112900中表1(第171页)所限定的BAP049-克隆-E(B9)。
在另一个实施方案中，所述PD-1拮抗剂选自如WO 2016/061142中表1(第265页)所限定的BAP058-克隆-K至BAP058-克隆-O(B10)。
在另一个实施方案中，所述PD-1拮抗剂为PD1-1(B11)。
在另一个实施方案中，所述PD-1拮抗剂为PD1-2(B12)。
在另一个实施方案中，所述PD-1拮抗剂为PD1-3(B13)。
在另一个实施方案中，所述PD-1拮抗剂为PD1-4(B14)。
在另一个实施方案中，所述PD-1拮抗剂为PD1-5(B15)。
如本文所述，可以以约0.1至30mg/kg患者体重，例如约0.5至25mg/kg患者体重、约1至20mg/kg患者体重、约2至5mg/kg患者体重或约3mg/kg患者体重的剂量注射(例如皮下或静脉内)给药PD-1拮抗剂化合物B。
PD-1拮抗剂的剂量和治疗方案可以由技术人员确定。本发明的PD-1拮抗剂的优选剂量方案包括通过静脉内给药1mg/kg宿主体重或3mg/kg宿主体重，该抗体使用以下给药方案之一给予：(i)每四周一次、给药6次，然后每三个月一次；(ii)每三周一次；(iii)以3mg/kg宿主体重给予一次，然后以1mg/kg宿主体重每三周给予。在某些实施方案中，以约1至40mg/kg宿主体重、例如，1至30mg/kg宿主体重、例如，约5至25mg/kg宿主体重、约10至20mg/kg宿主体重、约1至5mg/kg宿主体重、1至10mg/kg宿主体重、5至15mg/kg宿主体重、10至20mg/kg宿主体重、15至25mg/kg宿主体重或约3mg/kg宿主体重的剂量注射(例如皮下或静脉内)给药PD-1拮抗剂。给药时间表可以从一周一次到每两、三或四周一次。在一个实施方案中，每隔一周以约10至20mg/kg宿主体重的剂量给药PD-1拮抗剂。所述抗体分子可通过静脉内输注以大于20mg/min、例如20-40mg/min、通常大于或等于40mg/min的速率给药，以达到约35至440mg/m2、通常约70至310mg/m2、更通常约110至130mg/m2的剂量。在实施方案中，约110至130mg/m2的输注速率达到约3mg/kg宿主体重的水平。在其它实施方案中，所述抗体分子可通过静脉内输注以小于10mg/min、例如小于或等于5mg/min的速率给药，以达到约1至100mg/m2、例如约5至50mg/m2、约7至25mg/m2或约10mg/m2的剂量。在一些实施方案中，在大约30分钟内输注抗体。应注意的是，剂量值可随要缓解的病况的类型和严重性而变化。还应理解的是，对于任何特定受试者，应根据个体需要和给药或指导给药组合物的人的专业判断，随时间调整具体的剂量方案，并且本文列出的剂量范围仅是示例性的，并不意图限制要求保护的组合物的范围或实践。
为了用于治疗，本文公开的抗体，例如，如本文所定义的抗-IGF抗体分子，任选地与一种或多种其它活性剂(例如，本文所述的PD1拮抗剂)或如本文所定义的抗-PD1抗体分子组合，任选地与一种或多种其它活性剂(例如，如本文所述的抗-IGF抗体)组合被包括在适于促进向动物或人类给药的药物组合物中。
抗-IGF和/或PD1和/或抗-PDL1抗体分子的典型制剂可通过将所述抗体分子与生理上可接受的载体、赋形剂或稳定剂以冻干或其它干燥制剂或水溶液或水性或非水性悬浮液的形式混合来制备。溶液或水性或非水性悬浮液。载体、赋形剂、改性剂或稳定剂在所用剂量和浓度下均无毒。它们包括缓冲体系，例如磷酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐和其它无机或有机酸及其盐；抗氧化剂，包括抗坏血酸和蛋氨酸；亲水性聚合物，例如聚乙烯吡咯烷酮或聚乙二醇(PEG)；稳定氨基酸，例如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖、寡糖或多糖和其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖、蔗糖、海藻糖、糊精或葡聚糖；螯合剂，诸如EDTA；糖醇，诸如甘露醇或山梨糖醇；成盐的抗衡剂离子，例如钠；和/或离子或非离子表面活性剂，例如TWEENTM(聚山梨醇酯)、PLURONICSTM或脂肪酸酯、脂肪酸醚或糖酯。赋形剂还可具有释放调节或吸收调节的功能。
抗体分子也可被干燥(冷冻干燥、喷雾干燥、喷雾冷冻干燥、通过近或超临界气体干燥、真空干燥、空气干燥)。
自然地，用于体内给药的制剂必须是无菌的；可以通过常规技术例如通过无菌滤膜过滤来完成灭菌。
在一个具体的实施方案中，将抗-IGF抗体配制成用于肠道外(静脉内)输注或注射的水性缓冲液组合物，抗体浓度为10mg/mL，所述缓冲液包含24.2mM组氨酸、3.88％甘露醇、0.97％蔗糖、0.02％聚山梨醇酯20，pH 6.0。对于静脉内输注，可将药物组合物用生理溶液稀释，例如用0.9％氯化钠或G5溶液稀释。
在本发明内，应理解的是，根据本发明使用的所述组合、组合物、试剂盒、方法、用途或化合物可设想为同时、并行、依次、相继、交替或单独给药所述活性药剂或组分。可理解的是，所述抗-IGF抗体和PD-1拮抗剂可依赖地或独立地给药，例如可将所述抗-IGF抗体和PD-1拮抗剂作为同样的药物组合物/剂型的部分给药，或优选地，以单独的药物组合物/剂型给药。
在本文中，本发明含义内的“组合”或“组合的”包括但不限于由多于一种活性药剂的混合或组合产生的产品，并且包括固定和非固定(例如，游离的)组合(包括试剂盒)以及用途，例如组分或药剂的同时、并行、依次、相继、交替或单独用途。术语“固定组合”表示所述活性药剂以单一实体或剂量的形式同时向患者给予。术语“非固定组合”表示所述活性药剂作为单独的实体同时、并行或依次地向患者给药，没有特定的时间限制，其中这种给药在患者体内提供治疗有效水平的两种化合物。后者也适用于鸡尾酒疗法，例如，给药三种或更多种活性药剂。
给药抗-IGF抗体/化合物A和PD-1拮抗剂/化合物B可通过共同给药所述活性组分或药剂来进行，例如，通过以一个或两个单独的制剂或剂型同时或并行地将它们给药。或者，抗-IGF抗体和PD-1拮抗剂的给药可通过依次或交替给药所述活性组分或药剂来进行，例如，以两种单独的制剂或剂型来进行。
例如，同时给药包括在基本上相同的试剂给药。这种给药形式也可称为“伴随”给药。并行给药包括在相同的一般时间段内给药活性药剂，例如在同一天，但不一定在同一时间。交替给药包括在一段时间内给药一种药剂，例如在几天或一周的过程中，然后在随后的一段时间内给药其它药剂，例如在几天或者一周的过程中，然后将该模式重复一个或多个周期。依次或相继给药包括在第一时间段(例如在几天或一周的过程中)使用一种或多种剂量给药一种药剂，然后在第二时间段内使用一个或多个剂量给药其它药剂(例如，在几天或一周的过程中)。还可采用重叠的安排，其包括在治疗期间的不同日期给药所述活性药剂，不一定按照规律顺序。也可以采用这些一般性准则的变化形式，例如，根据所使用的药剂和受试者的状况。
因此，在优选的实施方案中，在根据本发明所述的方法中，如本文所述的化合物A与如本文所述的化合物B同时、并行、依次、相继、交替或单独地给药。在类似优选的实施方案中，用于根据本发明所述的方法中的如本文所述的化合物A与如本文所述的化合物B同时、并行、依次、相继、交替或单独地给药。在相关的优选实施方案中，用于根据本发明所述的方法中的如本文所述的化合物B与如本文所述的化合物A同时、并行、依次、相继、交替或单独地给药。在进一步的优选实施方案中，提供如本文所述的化合物A的用途，其中化合物A与化合物B同时、并行、依次、相继、交替或单独地给药。在进一步的相关的优选实施方案中，提供如本文所述的化合物B的用途，其中化合物B与化合物A同时、并行、依次、相继、交替或单独地给药。在另一个实施方案中，提供本发明所述的试剂盒，其中第一药物组合物与第二药物组合物同时、并行、依次、相继、交替或单独地给药。
化合物A、化合物B或两者单独或同时给药的优选给药途径包括但不限于口服、肠溶、肠道外(例如肌内、腹膜内、静脉内、经皮或皮下注射或植入)、经鼻、阴道、直肠或局部给药。在优选的实施方案中，给药途径为静脉内给药，尤其是静脉内输注或注射。本发明的化合物可以单独或一起配制成合适剂量单位制剂，所述单位制剂含有适合每种给药途径的常规无毒的药学上可接受的载体、赋形剂和/或媒剂。更优选地，制剂包括固体、半固体或液体剂型，例如冻干剂、液体溶液(例如注射剂和输注溶液)、分散剂或混悬剂、脂质体和栓剂。优选的方式取决于给药和治疗应用的预期方式。特别优选的实施方案包括液体制剂和冻干剂。在冻干剂的情况下，冻干物可在液体、优选在水中重构。
本文所述的化合物A和B可以每天、每周5次、每周3次、每周2次、每周一次、两周一次、三周一次、四周一次给药。优选的给药间隔包括每周一次和每两周一次。
优选地，通过静脉内输注每周一次给药化合物A和B。
给药方案可包括长期治疗。“长期”是指至少两周，优选持续数周、数月或数年。鉴于本文的教导，本领域普通技术人员仅使用常规实验即可确定该剂量方案的必要修改。参见Remington’s Pharmaceutical Sciences(Martin，E.W.，ed.4)，Mack Publishing Co.，Easton，PA。在发生任何并发症的情况下，剂量也可以由个别医师进行调整。给药可以是每天、每二天、每三天、每四天、每周一天、每周两天、每两周一天、每三周一天等等。
如本文所述的化合物A和B可以以治疗有效量以在适当的时间间隔给药的单次或分次剂量给药。治疗有效量是指在达到所需治疗结果所必需的剂量和时间段内有效的量，并且是预防、改善或治疗疾病或病症所必需的最小量。治疗有效量的化合物可根据诸如个体的疾病状态、年龄、性别和体重以及化合物在个体中引起期望的反应的能力等因素而变化。治疗有效量也是该化合物的任何毒性或有害作用均被治疗有益作用所抵消的量。治疗有效剂量优选抑制可测量的参数，例如相对于未经治疗的受试者或相对于同一待治疗受试者的先前未治疗期，抑制肿瘤的生长速率至少约20％，更优选地至少约40％，甚至更优选至少约60％，再更优选至少约80％。
可以以在单一疗法中治疗有效的剂量给药活性化合物，或以低于或高于单一疗法中使用的剂量给药活性化合物，但是当组合使用时，将产生期望的(联合)治疗有效量。用于治疗所需的本文所述化合物的量可以适合于所选择的特定化合物、给药途径、所治疗病况的性质以及患者的年龄和状况，并且最终将由医师或临床医生裁定。同样，本文所述的化合物的剂量可以根据靶细胞、肿瘤、组织、移植物或器官进行调整。
化合物A或化合物B的所需剂量可以作为每次给药的固定量或作为团剂(bolus)给药，以达到患者体内的设定血液浓度。
化合物A和化合物B的单独或一起的给药时间表可能会有所不同，例如，每周一次，每两、三或四周一次。在某个实施方案中，化合物A、化合物B或两者的给药量或剂量较低(例如，降低至少20％、至少30％、至少40％、或至少50％)。在其它实施方案中，导致所需效果(例如，过度增殖性或肿瘤性疾病的治疗)的化合物A、化合物B或两者的量或剂量较低(例如，降低至少20％、至少30％、至少40％或至少50％)。
本文所述的方法、化合物、使用的化合物、化合物的用途、药物组合物和试剂盒包括向受试者给药本文所述的抗-IGF抗体分子和抗-PD-1抗体分子的组合。
关于抗-IGF抗体的实施方案与实施方案(B0)至(B15)(关于PD-1拮抗剂)的排列导致特定的组合，所有这些都应被认为是具体公开的并且是本发明的实施方案以及其所有组合、组合物、试剂盒、方法、用途和使用的化合物的实施方案。
取决于待治疗的癌症疾病，本文定义的组合疗法可以单独使用或与一种或多种其它治疗剂进一步组合使用，所述治疗剂尤其选自抑制癌细胞中血管生成、信号转导途径或有丝分裂检查点的化疗剂或治疗活性化合物。
所述其它治疗剂可与抗-IGF抗体和/或PD1拮抗剂任选地作为相同药物制剂的组分同时给药，或在给药抗-IGF抗体和/或PD1拮抗剂之前或之后给药。
化疗剂可选自激素、激素类似物和抗激素(例如，他莫西芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、氟维司群、醋酸甲地孕酮、氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、醋酸环丙孕酮、非那甾胺、醋酸布舍瑞林、氟甲睾酮、甲羟孕酮、奥曲肽、阿佐昔芬、帕瑞肽、伐普肽)、芳香酶抑制剂(例如，阿那曲唑、来曲唑、利罗唑、依西美坦、阿他美坦、福美司坦)、LHRH激动剂和拮抗剂(例如，醋酸戈舍瑞林、亮丙瑞林、阿巴瑞克(abarelix)、西曲瑞克(cetrorelix)、德舍瑞林(deslorelin)、组氨瑞林(histrelin)、曲普瑞林(triptorelin))、抗代谢物(例如，诸如甲氨蝶呤的叶酸拮抗物、培美曲塞(pemetrexed)、嘧啶类似物(诸如5氟尿嘧啶)、卡培他滨、地西他滨、奈拉滨和吉西他滨，嘌呤和腺苷类似物(如巯基嘌呤、硫鸟嘌呤、克拉屈滨和喷他汀、阿糖胞苷、氟达拉滨)；抗肿瘤抗生素(例如蒽环类药物，如阿霉素、柔红霉素、表柔比星和伊达比星、丝裂霉素-C、博来霉素、放线菌素、普卡霉素、米托蒽醌、匹沙酮、链脲霉素)；铂衍生物(例如顺铂、奥沙利铂、卡铂、洛铂、赛特铂)、烷化剂(例如，雌氮芥、甲氧麻黄碱、美法仑、苯丁酸氮芥、白消安、达卡巴嗪、环磷酰胺、异环磷酰胺、羟基脲、替莫唑胺、亚硝基脲，如卡莫司汀和洛莫司汀、噻替帕)；抗有丝分裂剂(例如长春花生物碱，如长春碱、长春地辛、长春瑞滨和长春新碱；紫杉烷类，如紫杉醇、多西他赛及其制剂，拉洛他赛(Larotaxel)；司莫紫杉醇(simotaxel)和埃博霉素，如伊沙匹隆(ixabepilone)、帕土匹龙(patupilone)、ZK-EPO)；拓扑异构酶抑制剂(例如表鬼臼毒素，如依托泊苷和依托磷酸酯、替尼泊苷、安吖啶、拓扑替康和伊立替康)以及其它化学疗法，例如氨磷汀、阿那格雷、干扰素α、丙卡巴肼、米托坦和卟吩姆钠(porfimer)、贝沙罗汀、塞来昔布。
在一些实施方案中，涉及化合物A和化合物B的治疗还包括“铂二重奏”疗法，即用(i)铂化合物(例如顺铂或卡铂)加上(ii)第三代化疗剂(例如多西他赛、紫杉醇、长春瑞滨或吉西他滨)进行的治疗。
在一些实施方案中，涉及化合物A和化合物B的治疗与癌细胞靶向疗法组合。
在一些实施方案中，本文所述的组合疗法涉及化合物A和化合物B，而不涉及任何其它化疗剂。
在某些实施方案中，使用本文所公开的组合疗法治疗的肿瘤性或过度增殖性疾病、尤其是癌症或肿瘤疾病包括但不限于实体瘤，血液癌症(例如白血病，淋巴瘤，骨髓瘤，例如多发性骨髓瘤)和转移性病变。在一个实施方案中，所述癌症是实体瘤。实体瘤的例子包括恶性肿瘤，例如肉瘤和癌瘤，例如各种器官系统的腺癌，例如影响肺、乳腺、卵巢、淋巴、胃肠道(例如结肠)、肛门、生殖器和泌尿生殖道(例如肾、尿路上皮、膀胱细胞、前列腺)、咽、中枢神经系统(CNS)(例如脑、神经或神经胶质细胞)、头颈部、皮肤(例如黑素瘤)和胰腺的腺癌，以及包括恶性肿瘤的腺癌，例如结肠癌、直肠癌、肾细胞癌、肝癌、非小细胞肺癌、小肠癌和食道癌。所述癌症可为早期、中期、晚期或转移性癌症。
如本文所用，“过度增殖性疾病”是指其中细胞生长超过正常水平的病况。例如，过度增殖性疾病或病况包括恶性疾病(例如食道癌、结肠癌、胆道癌)和非恶性疾病(例如动脉粥样硬化、良性增生、良性前列腺肥大)。
在一些实施方案中，所述癌症选自肺癌(例如NSCLC(例如鳞状和/或非鳞状组织学NSCLC，或NSCLC腺癌))、黑素瘤(例如晚期黑素瘤)、肾癌(例如肾细胞癌)、肝脏、骨髓瘤(例如多发性骨髓瘤)、前列腺癌、乳腺癌(例如，不表达雌激素受体、孕激素受体或HER2/neu的一个或两个或全部的乳腺癌，例如三阴性乳腺癌)、结直肠癌、胰腺癌、头颈癌(例如头颈鳞状细胞癌(HNSCC)、肛门癌、胃食管癌、甲状腺癌、宫颈癌、淋巴增生性疾病(例如，移植后淋巴增生性疾病)或血液癌症、T细胞淋巴瘤、B细胞淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤或白血病(例如，髓样白血病或淋巴样白血病)。
在一些实施方案中，所述癌症选自癌瘤(例如晚期或转移性癌瘤)、黑素瘤或肺癌，例如NSCLC。
在一些实施方案中，所述癌症选自胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、结直肠癌、肺癌、成胶质细胞瘤、肾癌，优选胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、结直肠癌或肺癌。
在一些实施方案中，所述癌症为胰腺癌、肺癌、乳腺癌、黑素瘤、结直肠癌、卵巢癌、胃癌、甲状腺癌、肝癌或前列腺癌。
在一些实施方案中，本发明涉及给药化合物A(例如，BI–IGF)和化合物B(例如，B0至B15的任一种)治疗癌症的方法，与化合物B(例如，B0至B15的任一种)组合用于治疗癌症的用途中的化合物A(例如，BI–IGF)，与化合物A(例如，BI–IGF)组合用于治疗癌症的用途化合物B(例如，B0至B15的任一种)，化合物A(例如，BI–IGF)在制备药物中的用途，所述药物与化合物B(例如，B0至B15的任一种)组合用于治疗癌症，化合物B(例如，B0至B15的任一种)在制备药物中的用途，所述药物与化合物A(例如，BI–IGF)组合用于治疗癌症，包含化合物A(例如，BI–IGF)和化合物B(例如，B0至B15的任一种)的药物组合物，其中待治疗的癌症选自胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、结直肠癌、肺癌、成胶质细胞瘤、肾癌，优选地胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、结直肠癌或肺癌特别是NSCLC。
如上所述，本发明涉及包含如本文所定义的化合物A和化合物B的药物组合物，并涉及包含第一药物组合物的试剂盒，所述第一药物组合物包含如本文所定义的化合物A，并涉及第二药物组合物，其包含如本文所定义的化合物B。
如本文所定义的术语“药物组合物”是指其形式为允许其中所含活性成分的生物活性是有效的并且不包含对给药所述组合物的受试者产生不可接受的毒性的其它成分的制剂。本发明的药物组合物可以通过本领域已知的多种方法来给药。如本领域技术人员将理解的，给药途径和/或方式将根据所需结果而变化。
不论选择何种给药途径，通过本领域技术人员已知的常规方法，将本发明的组合疗法和/或药物组合物中所用的化合物、本发明的第一药物组合物和第二药物组合物配制成药学上可接受的剂型。
如本文所定义的试剂盒可包括适合的容器多个适合的容器，其包含第一药物组合物和/或第二药物组合物，其中所述第一药物组合物和第二药物组合物可容纳在同一容器中或不同容器中。该试剂盒可用于本发明的任何方法或任何用途中。
优选地，本发明的试剂盒进一步包含用于在有此需要的患者中使用化合物A和/或化合物B的可读指示的包装说明书，所述化合物A和/或化合物B用于治疗和/或预防肿瘤性或过度增殖性疾病、优选癌症或肿瘤疾病。说明书可如上所述提供关于发明方法及其任何优选实施方案的进一步详细说明。
在权利要求书和/或说明书中，“一种”或“一个”一词与术语“包含”结合使用可表示“一个”，但也与“一个或多个”、“至少一个”和“一个或多个”的含义一致。
“约”如本文所用，意指在给定测量精度的性质时，所测量数量的可接受误差程度。示例性误差程度在给定值或值的范围的20％以内，通常在10％以内，更通常在5％以内。
如本文所用的术语“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”意指治愈已经存在的疾病状态或病况，或增加从疾病状态或病况中恢复的可能性。治疗还可包括抑制，即阻止疾病状态或病况的发展以及改善(即引起疾病的消退或延缓疾病的进展)。治疗可以缓解疾病症状而不治愈患者。
如本文所用，术语“预防(preventing)”或“预防(prevention)”并不意味着完全停止在患者或受试者中发生疾病状态或病况，而还可指降低发展为疾病状态或病况的风险。
通过以下实施例进一步说明本发明，而不必限于本发明的这些实施方案。其实施例或部分，包括化合物、剂量和给药途径以及治疗组合，各自原样或与以上详细描述相结合，构成本发明的一部分。
实施例
实施例1
化合物A和化合物B的组合在结肠癌模型中的体内抗肿瘤功效
材料和方法
在源自鼠结肠癌细胞系MC-38的同系基因小鼠肿瘤模型中研究了化合物A和化合物B的组合的抗肿瘤功效。将肿瘤细胞皮下植入具有免疫能力的同系基因C57Bl/6的6至8周龄雌性小鼠中(在30μl基质胶中，1x 106个肿瘤细胞)，并在开始治疗前三天建立肿瘤。向小鼠腹膜内(ip)给药化合物B(PD-1鼠抗体，10mg/Kg，每三天或四天一次)、化合物B(PD-1鼠抗体，10mg/Kg，每三天或四天一次)和化合物A(BI-IGF，200mg/Kg，每七天一次)的组合或IgG同种型对照抗体(10mg/Kg，每三天或四天一次)，持续15-32天。使用卡尺每周测定三次肿瘤体积。根据公式“肿瘤体积＝长度*直径2*π/6”计算每个肿瘤的体积[mm3]。肿瘤生长抑制(TGI)值的百分比计算如下：TGI＝100x{1-[(治疗最后一天–治疗第一天)/(对照最后一天–对照第一天)]}。
在第15天确定中位TGI。每天测量体重作为治疗耐受性的指标。
结果
化合物B的单一药剂治疗延迟了肿瘤的生长，中位TGI为71％。组合治疗更有效，TGI为83％(图1A)。
所有治疗方案均耐受良好，无明显体重减轻(图1B)。
结论
与单独使用化合物B的功效相比，化合物A和化合物B的组合显示出优异的抗肿瘤功效。
实施例2
化合物A和化合物B的组合在乳腺癌模型中的体内抗肿瘤功效
材料和方法
在源自乳腺癌细胞系EMT-6的同系基因小鼠肿瘤模型中研究了化合物A和化合物B的组合的抗肿瘤功效。将肿瘤细胞皮下植入具有免疫能力的同系基因BALB/c的6至8周龄雌性小鼠中(在30μl基质胶中，1x 106个肿瘤细胞)，并在开始治疗前6至10天建立肿瘤。向小鼠腹膜内(ip)给药化合物B(PD-1鼠抗体，10mg/Kg，每三天或四天一次)、化合物B(PD-1鼠抗体，10mg/Kg，每三天或四天一次)和化合物A(BI-IGF，200mg/Kg，每七天一次)的组合或IgG同种型对照抗体(10mg/Kg，每三天或四天一次)，持续10-35天。使用卡尺每周测定三次肿瘤体积。根据公式“肿瘤体积＝长度*直径2*π/6”计算每个肿瘤的体积[mm3]。肿瘤生长抑制(TGI)值的百分比计算如下：
TGI＝100x{1-[(治疗最后一天–治疗第一天)/(对照最后一天–对照第一天)]}。在治疗的第10至15天确定中位TGI。每天测量体重作为治疗耐受性的指标。
实施例3
化合物A和化合物B的组合对结肠癌模型中肿瘤内调节性T细胞(Tregs)的作用
材料和方法
在衍生自结肠癌细胞系MC-38的同系基因小鼠肿瘤模型中，研究了用化合物A和化合物B组合治疗后肿瘤内Treg的减少。将肿瘤细胞皮下植入具有免疫能力的同系基因C57Bl/6的6至8周龄雌性小鼠中(在30μl基质胶中，1x 106个肿瘤细胞)，并在开始治疗前3至6天建立肿瘤。向小鼠腹膜内(ip)给药化合物A(BI-IGF，200mg/Kg，每七天一次)、化合物B(PD-1的鼠抗体，10mg/Kg，每三天或四天一次)、化合物B(PD-1，10mg/Kg，每三天或四天一次)和化合物A(BI-IGF，200mg/Kg，每七天一次)的组合，或IgG同种型对照抗体(10mg/Kg，每三天或四天一次)，持续10-35天。使用卡尺每周测定三次肿瘤体积。根据公式“肿瘤体积＝长度*直径2*π/6”计算每个肿瘤的体积[mm3]。在实验的最后一天，当肿瘤体积达到约500-600mm3时，收获肿瘤。一半的肿瘤被速冻，另一半被福尔马林固定且石蜡包埋(FFPE)。为了评估肿瘤内的Treg，将冷冻样品裂解并通过流式细胞仪(FACS)分析，并将FFPE样品切成薄片并通过免疫组织化学(IHC)分析。
序列表
<110> 勃林格殷格翰国际有限公司
<120> 抗癌组合疗法
<130> 12-0425-WO-1
<160> 49
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<223> 免疫球蛋白结构域
<400> 20
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Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Lys
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Glu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 21
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 免疫球蛋白结构域
<400> 21
Glu Val Met Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ala Ser
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Ser Asn Pro Asn Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 22
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 免疫球蛋白结构域
<400> 22
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Met Ser Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Asp Thr Ser
20 25 30
Gly Ile Ser Phe Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Val Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Ile Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65 70 75 80
Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Lys
85 90 95
Glu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
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<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 免疫球蛋白结构域
<400> 23
Glu Val Met Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Lys Ser
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
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<213> 人工序列
<220>
<223> 免疫球蛋白结构域
<400> 24
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Met Ser Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Asp Val Ser
20 25 30
Gly Ile Ser Phe Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Val Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Ile Pro Ala
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65 70 75 80
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85 90 95
Glu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
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<213> 人工序列
<220>
<223> 免疫球蛋白结构域
<400> 25
Glu Val Met Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Lys Ser
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
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50 55 60
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<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 免疫球蛋白结构域
<400> 26
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1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Met Ser Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Asp Val Ser
20 25 30
Gly Ile Ser Phe Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35 40 45
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<220>
<223> 免疫球蛋白结构域
<400> 27
Glu Val Met Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Lys Ser
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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<220>
<223> 免疫球蛋白结构域
<400> 28
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
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Gly Ile Ser Phe Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体链
<400> 29
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1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ala Ser
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435 440 445
<210> 30
<211> 218
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体链
<400> 30
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
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195 200 205
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
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<213> 人工序列
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<400> 31
Glu Val Met Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
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His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 32
<211> 218
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体链
<400> 32
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Met Ser Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Asp Thr Ser
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Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
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Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 33
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体链
<400> 33
Glu Val Met Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Lys Ser
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100 105 110
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Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
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Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
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435 440 445
<210> 34
<211> 218
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体链
<400> 34
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195 200 205
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210 215
<210> 35
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体链
<400> 35
Glu Val Met Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
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Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
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Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
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Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
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Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
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<210> 36
<211> 218
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体链
<400> 36
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
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195 200 205
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 37
<211> 446
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体链
<400> 37
Glu Val Met Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Lys Ser
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Ser Asn Val Asn Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 38
<211> 218
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体链
<400> 38
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Met Ser Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Asp Val Ser
20 25 30
Gly Ile Ser Phe Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Val Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Ile Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65 70 75 80
Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Lys
85 90 95
Glu Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
100 105 110
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
115 120 125
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
130 135 140
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
145 150 155 160
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
165 170 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
180 185 190
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
195 200 205
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 39
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 结合基序
<400> 39
Met Tyr Pro Pro Tyr
1 5
<210> 40
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> CDR序列
<400> 40
Ser Tyr Trp Met Ser
1 5
<210> 41
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> CDR序列
<400> 41
Ser Ile Thr Ser Tyr Gly Ser Phe Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 42
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> CDR序列
<400> 42
Asn Met Tyr Thr His Phe Asp Ser
1 5
<210> 43
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> CDR序列
<400> 43
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Ser Val Ser
1 5 10
<210> 44
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> CDR序列
<400> 44
Asp Asn Ser Lys Arg Pro Ser
1 5
<210> 45
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> CDR序列
<400> 45
Gln Ser Arg Asp Thr Tyr Gly Tyr Tyr Trp Val
1 5 10
<210> 46
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 免疫球蛋白结构域
<400> 46
Gln Val Glu Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Leu Val
35 40 45
Ser Ser Ile Thr Ser Tyr Gly Ser Phe Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asn Met Tyr Thr His Phe Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 47
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 免疫球蛋白结构域
<400> 47
Asp Ile Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn
20 25 30
Ser Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Asp Asn Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gln
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Arg Asp Thr Tyr Gly
85 90 95
Tyr Tyr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 48
<211> 447
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体链
<400> 48
Gln Val Glu Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Leu Val
35 40 45
Ser Ser Ile Thr Ser Tyr Gly Ser Phe Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asn Met Tyr Thr His Phe Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His
210 215 220
Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435 440 445
<210> 49
<211> 216
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体链
<400> 49
Asp Ile Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn
20 25 30
Ser Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Asp Asn Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gln
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Arg Asp Thr Tyr Gly
85 90 95
Tyr Tyr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln
100 105 110
Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu
115 120 125
Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Gly Asp Ser Ser Pro Val Lys
145 150 155 160
Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr
165 170 175
Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His
180 185 190
Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys
195 200 205
Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210 215

Claims (33)

1.一种治疗或预防肿瘤性或过度增殖性疾病的方法，所述方法包括向有此需要的患者给药
a)治疗有效量的化合物A，和
b)治疗有效量的化合物B，
其中化合物A为抗-IGF抗体，和
其中化合物B为PD-1拮抗剂。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述肿瘤性或过度增殖性疾病为癌症或肿瘤疾病。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述肿瘤性或过度增殖性疾病为胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、结直肠癌或肺癌。
4.根据权利要求1至3中任一项的方法，其中化合物A为与人IGF-I和IGF-2结合的抗体分子。
5.根据权利要求1至3中任一项的方法，其中化合物A为抗体分子，其包含SEQ ID NO:40(HCDR1)、SEQ ID NO:41(HCDR2)和SEQ ID NO:42(HCDR3)的重链互补决定区以及SEQ IDNO:43(LCDR1)、SEQ ID NO:44(LCDR2)和SEQ ID NO:45(LCDR3)的轻链决定区，优选地，其中化合物A为包含SEQ ID NO:46的重链可变区和SEQ ID NO:47的轻链可变区的抗体分子，更优选地其中化合物A为包含SEQ ID NO:48的重链和SEQ ID NO:49的轻链的抗体分子。
6.根据权利要求1至5中任一项的方法，其中所述PD-1拮抗剂为抗-PD-1抗体或抗-PD-L1抗体。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述抗-PD-1抗体选自帕博利珠单抗、纳武单抗、皮地利珠单抗、PDR-001、BAP049-克隆-B、BAP049-克隆-E、PD1-1、PD1-2、PD1-3、PD1-4和PD1-5。
8.根据权利要求6所述的方法，其中所述抗-PD-L1抗体选自阿特珠单抗、阿维鲁单抗和度法鲁单抗。
9.根据权利要求1至8中任一项的方法，其中化合物A与化合物B同时、并行、依次、相继、交替或单独地给药。
10.如权利要求1、4或5中任一项所限定的化合物A，其用于治疗或预防肿瘤性或过度增殖性疾病、优选癌症或肿瘤疾病的方法，所述方法包括将化合物A与化合物B组合向有此需要的患者给药，其中化合物B如权利要求1和6至8中任一项所限定。
11.化合物A，其用于根据权利要求10所述的用途，其中化合物A与化合物B同时、并行、依次、相继、交替或单独地给药。
12.如权利要求1和6至8中任一项所限定的化合物B，其用于治疗或预防肿瘤性或过度增殖性疾病、特别是癌症或肿瘤疾病的方法中，所述方法包括将化合物B与化合物A组合向有此需要的患者给药，其中化合物A如权利要求1、4或5中任一项所限定。
13.化合物B，其用于根据权利要求12所述的用途，其中化合物B与化合物A同时、并行、依次、相继、交替或单独地给药。
14.如权利要求1、4或5中任一项所限定的化合物A用于制备药物组合物的用途，所述药物组合物用于治疗或预防肿瘤性或过度增殖性疾病、优选癌症或肿瘤疾病，其中化合物A与化合物B组合使用，其中化合物B如权利要求1和6至8中任一项所限定。
15.根据权利要求14所述的化合物A的用途，其中化合物A与化合物B同时、并行、依次、相继、交替或单独地给药。
16.如权利要求1和6至8中任一项所限定的化合物B用于制备药物组合物的用途，所述药物组合物用于治疗或预防肿瘤性或过度增殖性疾病、优选癌症或肿瘤疾病，其中化合物B与化合物A组合使用，其中化合物A如权利要求1、4或5中任一项所限定。
17.根据权利要求16所述的化合物B的用途，其中化合物B与化合物A同时、并行、依次、相继、交替或单独地给药。
18.药物组合物，其包括
a)化合物A和
b)化合物B，
其中化合物A为抗-IGF抗体，
且其中化合物B为PD-1拮抗剂。
19.根据权利要求18所述的药物组合物，其中化合物A为与人IGF-I和IGF-2结合的抗体分子。
20.根据权利要求18或19所述的药物组合物，其中化合物A为抗体分子，其包含SEQ IDNO:40(HCDR1)、SEQ ID NO:41(HCDR2)和SEQ ID NO:42(HCDR3)的重链互补决定区以及SEQID NO:43(LCDR1)、SEQ ID NO:44(LCDR2)和SEQ ID NO:45(LCDR3)的轻链决定区，优选地，其中化合物A为包含SEQ ID NO:46的重链可变区和SEQ ID NO:47的轻链可变区的人抗体分子，更优选地，其中化合物A为包含SEQ ID NO:48的重链和SEQ ID NO:49的轻链的人抗体分子。
21.根据权利要求18至20中任一项的药物组合物，其中所述PD-1拮抗剂为抗-PD-1抗体或抗-PD-L1抗体。
22.根据权利要求21所述的药物组合物，其中所述抗-PD-1抗体选自帕博利珠单抗、纳武单抗、皮地利珠单抗、PDR-001、BAP049-克隆-B、BAP049-克隆-E、PD1-1、PD1-2、PD1-3、PD1-4和PD1-5。
23.根据权利要求22所述的药物组合物，其中所述抗-PD-L1抗体选自阿特珠单抗、阿维鲁单抗和度法鲁单抗。
24.根据权利要求18至23中任一项的药物组合物，其进一步包含一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂和/或媒剂。
25.根据权利要求18至24中任一项的药物组合物，其用于治疗和预防肿瘤性或过度增殖性疾病、优选癌症或肿瘤疾病的方法中。
26.试剂盒，其包含
a)第一药物组合物或剂型，其包含化合物A，和
b)第二药物组合物或剂型，其包含化合物B，
其中化合物A为抗-IGF抗体，
且其中化合物B为PD-1拮抗剂。
27.根据权利要求26所述的试剂盒，其中化合物A为与人IGF-I和IGF-2结合的抗体分子。
28.根据权利要求26或27所述的试剂盒，其中化合物A为抗体分子，其包含SEQ ID NO:40(HCDR1)、SEQ ID NO:41(HCDR2)和SEQ ID NO:42(HCDR3)的重链互补决定区以及SEQ IDNO:43(LCDR1)、SEQ ID NO:44(LCDR2)和SEQ ID NO:45(LCDR3)的轻链决定区，优选地其中化合物A为包含SEQ ID NO:46的重链可变区和SEQ ID NO:47的轻链可变区的抗体分子，更优选地，其中化合物A为包含SEQ ID NO:48的重链和SEQ ID NO:49的轻链的抗体分子。
29.根据权利要求26至28中任一项的试剂盒，其中所述PD-1拮抗剂为抗-PD-1抗体或抗-PD-L1抗体。
30.根据权利要求29所述的试剂盒，其中所述抗-PD-1抗体选自帕博利珠单抗、纳武单抗、皮地利珠单抗、PDR-001、BAP049-克隆-B、BAP049-克隆-E、PD1-1、PD1-2、PD1-3、PD1-4和PD1-5。
31.根据权利要求29所述的试剂盒，其中所述抗-PD-L1抗体选自阿特珠单抗、阿维鲁单抗和度法鲁单抗。
32.根据权利要求26至31中任一项的试剂盒，其进一步包含包装说明书，所述包装说明书包含用于在治疗或预防有此需要的患者的肿瘤性或过度增殖性疾病中同时、并行、依次、相继、交替或单独地向患者给药的可读指示，优选地，所述肿瘤性或过度增殖性疾病为癌症或肿瘤疾病。
33.根据权利要求1至9中任一项的方法、用于根据权利要求10至11中任一项的用途的化合物A、用于根据权利要求12至13中任一项的用途的化合物B、根据权利要求14至15中任一项的化合物A的用途、根据权利要求16至17中任一项的化合物B的用途、根据权利要求18至25中任一项的药物组合物，或根据权利要求26至32中任一项的试剂盒，其中所述待治疗的肿瘤性疾病为选自胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、结直肠癌、肺癌、成胶质细胞瘤、肾癌的癌症，优选为胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、结直肠癌或肺癌，尤其是NSCLC。
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