JP6375051B2 - 細菌株を含む組成物 - Google Patents

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Description

本発明は、哺乳動物の消化管から単離された細菌株を含む組成物及び疾患の治療におけるそのような組成物の使用の分野にある。
ヒトの腸管は、子宮内では無菌的であると考えられるが、出生直後に母体及び環境のかなり多様な微生物に曝露される。その後、微生物の定着及び継承という活動的な期間が存在するが、これは出産の様式、環境、食物、及び宿主の遺伝子型などの要因によって影響を受け、その全てが特に人生の初期における腸内微生物叢の組成に影響を及ぼす。その後、微生物叢は安定化して、成人様となる(Spor et al. (2011) Nat Rev Microbiol. 9(4):279-90)。ヒト腸内微生物叢は、本質的に2つの主要な細菌門、すなわちバクテロイデス門(Bacteroidetes)とフィルミクテス門(Firmicutes)に属する500〜1000超の異なるファイロタイプを含有する(Eckburg et al. (2005) Science. 10;308(5728):1635-8)。ヒトの腸に細菌が定着することにより生じる共生関係の成功により、広く多様な代謝、構造、保護、及び他の有益な機能がもたらされた。細菌が定着した腸の代謝活性の増強により、そうでなければ消化されない食事成分が確実に分解されて、宿主にとって重要な栄養源を提供する副産物が放出される。同様に、腸内微生物叢の免疫学的重要性は、十分に認識されており、免疫系が損なわれているが片利共生細菌の導入後に機能的に再構成される無菌動物において例証されている(Macpherson et al. (2001) Microbes Infect. 3(12):1021-35、Macpherson et al. (2002) Cell Mol Life Sci. 59(12):2088-96、Mazmanian et al. (2005) Cell 15;122(1):107-18)。
消化管の障害、例えば炎症性腸疾患(IBD,inflammatory bowel disease)では、微生物叢の組成の劇的な変化が報告されている。例えば、クロストリジウム(Clostridium)クラスターXIVa細菌のレベルは、IBD患者において低減されているが、大腸菌(E.coli)の数は増加しており、腸内での共生生物と病原性生物のバランスがシフトしていることを示唆している(Frank et al. (2007) PNAS 104(34):13780-5、Scanlan et al. (2006) J Clin Microbiol. 44(11):3980-8、Kang et al. (2010) Inflamm Bowel Dis. 16(12):2034-42、Machiels et al. (2013) Gut. 63(8):1275-83)。興味深いことに、この微生物共生バランス失調は、エフェクターT細胞集団の不均衡にも関連している。
特定の細菌株が動物の腸に及ぼす潜在的なプラスの効果が認められて、多様な株を、多様な疾患の治療に使用することが提唱されている(例えば、国際公開第2013/050792号パンフレット、国際公開第03/046580号パンフレット、国際公開第2013/008039号パンフレット、国際公開第2014/167338号パンフレットを参照されたい)。同様に、主にラクトバチルス(Lactobacillus)及びビフィドバクテリウム(Bifidobacterium)株を含む特定の株を、腸管に直接関連していない多様な炎症性疾患及び自己免疫疾患の治療に使用することが提唱されている(総説に関してはGoldin and Gorbach (2008) Clin Infect Dis. 46 Suppl 2:S96-100及びAzad et al. (2013) BMJ. 347:f6471を参照されたい)。しかし、種々の疾患と種々の細菌株との関係、並びに特定の細菌株が腸、全身レベル、及びいずれかの特定の型の疾患に及ぼす明確な効果は、あまり特徴付けられていない。
炎症性疾患及び自己免疫疾患を治療する新規方法が当技術分野で必要である。同様に、腸内細菌を使用する新規治療を開発することができるように、腸内細菌の潜在的な効果を特徴付けることも必要である。
国際公開第2013/050792号パンフレット 国際公開第03/046580号パンフレット 国際公開第2013/008039号パンフレット 国際公開第2014/167338号パンフレット
Spor et al. (2011) Nat Rev Microbiol. 9(4):279-90 Eckburg et al. (2005) Science. 10;308(5728):1635-8 Macpherson et al. (2001) Microbes Infect. 3(12):1021-35 Macpherson et al. (2002) Cell Mol Life Sci. 59(12):2088-96 Mazmanian et al. (2005) Cell 15;122(1):107-18 Frank et al. (2007) PNAS 104(34):13780-5 Scanlan et al. (2006) J Clin Microbiol. 44(11):3980-8 Kang et al. (2010) Inflamm Bowel Dis. 16(12):2034-42 Machiels et al. (2013) Gut. 63(8):1275-83 Goldin and Gorbach (2008) Clin Infect Dis. 46 Suppl 2:S96-100 Azad et al. (2013) BMJ. 347:f6471
本発明者らは、炎症性疾患及び自己免疫疾患を治療及び予防するための新規治療を開発した。特に、本発明者らは、IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患及び状態を治療及び予防するための新規治療を開発した。特に、本発明者らは、バクテロイデス(Bacteroides)属の細菌株がTh17炎症応答の低減に有効でありうることを明らかにした。実施例に記述するように、バクテロイデス・コプロコーラ(Bacteroides coprocola)を含む組成物を経口投与すると、喘息、関節リウマチ、及び多発性硬化症のマウスモデルにおいてTh17炎症応答を含む炎症応答の重症度を低減させることができる。
したがって、第1の実施形態において、本発明は、IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患又は状態を治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス属の細菌株を含む組成物を提供する。本発明者らは、この属からの細菌株による治療によって、IL−17を含むTh17経路の一部であるサイトカインのレベルを低減させることができ、Th17炎症応答を軽減でき、IL−17及びTh17経路によって媒介される炎症性疾患及び自己免疫疾患のマウスモデルにおいて臨床上の利益を提供できることを特定した。
特定の実施形態において、本発明は、多発性硬化症;関節リウマチ、変形性関節症、乾癬性関節炎、又は若年性特発性関節炎などの関節炎;視神経脊髄炎(デビック病);強直性脊椎炎;脊椎関節炎;乾癬;全身性紅斑性狼瘡;クローン病又は潰瘍性大腸炎などの炎症性腸疾患;セリアック病;アレルギー性喘息又は好中球性喘息などの喘息;慢性閉塞性肺疾患(COPD,chronic obstructive pulmonary disease);乳がん、結腸がん、肺がん、又は卵巣がんなどのがん;ブドウ膜炎;強膜炎;血管炎;ベーチェット病;アテローム性動脈硬化症;アトピー性皮膚炎;肺気腫;歯周炎;アレルギー性鼻炎;及び同種異系移植片拒絶からなる群から選択される疾患又は状態を治療又は予防する方法に使用するためのバクテロイデス属の細菌株を含む組成物を提供する。バクテロイデス属の細菌株に関して示されたTh17炎症応答に及ぼす効果は、IL−17及びTh17経路によって媒介される疾患及び状態、例えば上記の疾患及び状態に対して治療上の利益を提供しうる。
好ましい実施形態において、本発明は、好中球性喘息又はアレルギー性喘息などの喘息を治療又は予防する方法に使用するためのバクテロイデス属の細菌株を含む組成物を提供する。本発明者らは、バクテロイデス株による治療が好中球及び好酸球の肺への動員を低減させることができ、喘息を治療又は予防するために役立ちうることを特定した。さらに、本発明者らは、喘息のマウスモデルにおいてバクテロイデス株を試験してその有効性を証明した。特定の実施形態において、組成物は、好中球性喘息又は好酸球性喘息を治療又は予防する方法に使用するためのものである。本発明の組成物に関して示された好中球及び好酸球に対する効果は、本発明の組成物が好中球性喘息及び好酸球性喘息を治療又は予防するために特に有効でありうることを意味する。実際に、特定の実施形態において、組成物は、喘息の治療若しくは予防において好中球性炎症応答を低減させる方法に使用するためのものであるか、又は組成物は、喘息の治療若しくは予防において好酸球性炎症応答を低減する方法に使用するためのものである。好ましい実施形態において、本発明は、喘息、特に好中球性喘息の治療に使用するためのバクテロイデス・コプロコーラ種の細菌株を含む組成物を提供する。バクテロイデス・コプロコーラは、喘息モデルにおいて好中球に対して特に顕著な効果を有することが示されており、バクテロイデス・コプロコーラによる治療は、好中球性喘息を治療するために特に有効でありうる。特定の実施形態において、本発明は、喘息、特に好酸球性又はアレルギー性喘息の治療に使用するためのバクテロイデス・シータイオタオミクロン(Bacteroides thetaiotaomicron)種の細菌株を含む組成物を提供する。特定の実施形態において、本発明は、喘息、特に好酸球性又はアレルギー性喘息の治療に使用するためのバクテロイデス・フラジリス(Bacteroides fragilis)種の細菌株を含む組成物を提供する。
さらに好ましい実施形態において、本発明は、関節リウマチを治療又は予防する方法に使用するためのバクテロイデス属の細菌株を含む組成物を提供する。本発明者らは、バクテロイデス株による治療が、関節リウマチのマウスモデルにおいて臨床上の利益を提供することができ、関節の腫脹を低減させることができることを特定している。好ましい実施形態において、本発明は、関節リウマチの治療に使用するためのバクテロイデス・コプロコーラ種の細菌株を含む組成物を提供する。バクテロイデス・コプロコーラを使用する組成物は、関節リウマチを治療するために特に有効でありうる。特定の実施形態において、本発明は、関節リウマチの治療に使用するためのバクテロイデス・シータイオタオミクロン種の細菌株を含む組成物を提供する。特定の実施形態において、本発明は、関節リウマチの治療に使用するためのバクテロイデス・フラジリス種の細菌株を含む組成物を提供する。
さらに好ましい実施形態において、本発明は、多発性硬化症を治療又は予防する方法に使用するためのバクテロイデス属の細菌株を含む組成物を提供する。本発明者らは、バクテロイデス株による治療が、多発性硬化症のマウスモデルにおいて疾患の発生率及び疾患の重症度を低減させることができることを特定した。好ましい実施形態において、本発明は、多発性硬化症の治療に使用するためのバクテロイデス・コプロコーラ種の細菌株を含む組成物を提供する。バクテロイデス・コプロコーラを使用する組成物は、多発性硬化症を治療するために特に有用でありうる。特定の実施形態において、本発明は、多発性硬化症の治療に使用するためのバクテロイデス・シータイオタオミクロン種の細菌株を含む組成物を提供する。特定の実施形態において、本発明は、多発性硬化症の治療に使用するためのバクテロイデス・フラジリス種の細菌株を含む組成物を提供する。
さらに好ましい実施形態において、本発明は、乳がん、肺がん、又は肝臓がんなどのがんを治療又は予防する方法に使用するためのバクテロイデス属の細菌株を含む組成物を提供する。バクテロイデス属の細菌株を含む組成物は、乳がん、肺がん、及び肝臓がんのマウスモデルにおいて腫瘍の増殖を低減させうる。特定の実施形態において、組成物は、がんの治療において腫瘍サイズを低減させる又は腫瘍の増殖を予防する方法に使用するためのものである。特定の実施形態において、本発明は、がんの治療に使用するためのバクテロイデス・コプロコーラ種の細菌株を含む組成物を提供する。特定の実施形態において、本発明は、がんの治療に使用するためのバクテロイデス・シータイオタオミクロン種の細菌株を含む組成物を提供する。特定の実施形態において、本発明は、がんの治療に使用するためのバクテロイデス・フラジリス種の細菌株を含む組成物を提供する。
さらに好ましい実施形態において、本発明は、ブドウ膜炎、例えば後部ブドウ膜炎を治療又は予防する方法に使用するためのバクテロイデス属の細菌株を含む組成物を提供する。特定の実施形態において、本発明は、ブドウ膜炎の治療に使用するためのバクテロイデス・コプロコーラ種の細菌株を含む組成物を提供する。特定の実施形態において、本発明は、ブドウ膜炎の治療に使用するためのバクテロイデス・シータイオタオミクロン種の細菌株を含む組成物を提供する。特定の実施形態において、本発明は、ブドウ膜炎の治療に使用するためのバクテロイデス・フラジリス種の細菌株を含む組成物を提供する。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患又は状態の治療又は予防において、IL−17の産生を低減させる又はTh17細胞の分化を低減させる方法に使用するためのものである。特に、本発明の組成物は、喘息、関節リウマチ、又は多発性硬化症の治療又は予防において、IL−17の産生を低減させる又はTh17細胞の分化を低減させるために使用されうる。好ましくは、本発明は、喘息、関節リウマチ、若しくは多発性硬化症の治療若しくは予防において、又は喘息、関節リウマチ、多発性硬化症、ブドウ膜炎、若しくはがんの治療若しくは予防において、IL−17の産生を低減させる又はTh17細胞の分化を低減させるために使用するためのバクテロイデス・コプロコーラ種の細菌株を含む組成物を提供する。特定の実施形態において、本発明は、喘息、関節リウマチ、多発性硬化症、ブドウ膜炎、又はがんの治療又は予防において、IL−17の産生を低減させる又はTh17細胞の分化を低減させるために使用するためのバクテロイデス・シータイオタオミクロン種の細菌株を含む組成物を提供する。特定の実施形態において、本発明は、喘息、関節リウマチ、多発性硬化症、ブドウ膜炎、又はがんの治療又は予防において、IL−17の産生を低減させる又はTh17細胞の分化を低減させるために使用するためのバクテロイデス・フラジリス種の細菌株を含む組成物を提供する。
特定の実施形態において、組成物は、IL−17レベル又はTh17細胞が上昇している患者に使用するためのものである。バクテロイデス株に関して示されるTh17炎症応答に及ぼす効果は、そのような患者にとって特に有益でありうる。
本発明の好ましい実施形態において、組成物中の細菌株は、バクテロイデス・コプロコーラの細菌株である。近縁の株、例えばバクテロイデス・コプロコーラの細菌株の16s rRNA配列と少なくとも95%、96%、97%、98%、99%、99.5%又は99.9%同一である16s rRNA配列を有する細菌株もまた使用してもよい。好ましくは、細菌株は、配列番号1、2、3又は4と少なくとも95%、96%、97%、98%、99%、99.5%又は99.9%同一である16s rRNA配列を有する。好ましくは、上記配列同一性は配列番号4に対する同一性である。好ましくは、本発明に使用するための細菌株は、配列番号4によって表される16s rRNA配列を有する。
本発明のさらに好ましい実施形態において、組成物中の細菌株は、バクテロイデス・シータイオタオミクロンの細菌株である。近縁の株、例えばバクテロイデス・シータイオタオミクロンの細菌株の16s rRNA配列と少なくとも95%、96%、97%、98%、99%、99.5%又は99.9%同一である16s rRNA配列を有する細菌株もまた使用してもよい。好ましくは、細菌株は、配列番号5と少なくとも95%、96%、97%、98%、99%、99.5%又は99.9%同一である16s rRNA配列を有する。好ましくは、本発明に使用するための細菌株は、配列番号5によって表される16s rRNA配列を有する。
本発明のさらに好ましい実施形態において、組成物中の細菌株は、バクテロイデス・フラジリスの細菌株である。近縁の株、例えばCR626927.1に対して配列同一性を有するゲノムを有する細菌株もまた使用してもよい。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、経口投与用である。本発明の株の経口投与は、IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患及び状態を治療するために有効でありうる。同様に、経口投与は、患者及び医師にとっても都合がよく、腸管への送達及び/又は腸管での部分的又は完全な定着(colonisation)を可能にする。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、1又は2以上の薬学的に許容される賦形剤又は担体を含む。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、凍結乾燥されている細菌株を含む。凍結乾燥は、細菌の送達を可能にする安定な組成物を調製するために有効で都合のよい技術である。
特定の実施形態において、本発明は、上記の組成物を含む食品を提供する。
特定の実施形態において、本発明は、上記の組成物を含むワクチン組成物を提供する。
さらに、本発明は、IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患又は状態を治療又は予防する方法であって、バクテロイデス属の細菌株を含む組成物を投与することを含む方法を提供する。
上記の本発明の開発にあたって、本発明者らは、治療にとって特に有用である細菌株を同定し特徴付けた。本発明のバクテロイデス・コプロコーラ株は、本明細書において記述される疾患、例えば関節炎、喘息、及び多発性硬化症を治療するために有効であることが示されている。したがって、別の態様において、本発明は、受託番号NCIMB 42408として寄託されたバクテロイデス・コプロコーラ株又はその派生物(derivative)の細胞を提供する。本発明はまた、そのような細胞又はそのような細胞の生物学的に純粋な培養物を含む組成物も提供する。本発明はまた、特に本明細書において記述される疾患の治療に使用するための受託番号NCIMB 42408として寄託されたバクテロイデス・コプロコーラ株又はその派生物の細胞も提供する。すなわち本発明は以下に関する。
(1)IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患又は状態を治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス属の細菌株を含む組成物。
(2)アレルギー性喘息又は好中球性喘息などの喘息;関節リウマチ、変形性関節症、乾癬性関節炎、又は若年性特発性関節炎などの関節炎;多発性硬化症;視神経脊髄炎(デビック病);強直性脊椎炎;脊椎関節炎;乾癬;全身性紅斑性狼瘡;クローン病又は潰瘍性大腸炎などの炎症性腸疾患;セリアック病;慢性閉塞性肺疾患(COPD);乳がん、結腸がん、肺がん、又は卵巣がんなどのがん;ブドウ膜炎;強膜炎;血管炎;ベーチェット病;アテローム性動脈硬化症;アトピー性皮膚炎;肺気腫;歯周炎;アレルギー性鼻炎;及び同種異系移植片拒絶からなる群から選択される疾患又は状態を治療又は予防する方法に使用するための、上記(1)に記載の組成物。
(3)好中球性喘息又はアレルギー性喘息などの喘息を治療又は予防する方法に使用するための、上記(2)に記載の組成物。
(4)喘息の治療において、好中球増加又は好酸球増加を低減させる方法に使用するための、上記(3)に記載の組成物。
(5)関節リウマチを治療又は予防する方法に使用するための、上記(2)に記載の組成物。
(6)関節リウマチにおける関節の腫脹を低減させる方法に使用するための、上記(5)に記載の組成物。
(7)多発性硬化症を治療又は予防する方法に使用するための、上記(2)に記載の組成物。
(8)疾患の発生率又は疾患の重症度を低減させる方法に使用するための、上記(7)に記載の組成物。
(9)肺がん、乳がん、又は肝臓がんなどのがんを治療又は予防する方法に使用するための、上記(2)に記載の組成物。
(10)腫瘍のサイズを低減させる、腫瘍の増殖を低減させる、転移を予防する、又は血管新生を予防する方法に使用するための、上記(9)に記載の組成物。
(11)ブドウ膜炎を治療又は予防する方法に使用するための、上記(2)に記載の組成物。
(12)ブドウ膜炎における網膜損傷を低減又は予防する方法に使用するための、上記(11)に記載の組成物。
(13)IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患又は状態の治療又は予防において、IL−17の産生を低減させる又はTh17細胞の分化を低減させる方法に使用するための、上記(1)〜(12)のいずれかに記載の組成物。
(14)IL−17レベル又はTh17細胞が上昇している患者に使用するための、上記(1)〜(13)のいずれかに記載の組成物。
(15)細菌株が、バクテロイデス・コプロコーラの細菌株である、上記(1)〜(14)のいずれかに記載の組成物。
(16)細菌株が、バクテロイデス・コプロコーラの細菌株の16s rRNA配列と少なくとも95%、96%、97%、98%、99%、99.5%又は99.9%同一である16s rRNA配列を有する、上記(1)〜(15)のいずれかに記載の組成物。
(17)細菌株が、配列番号1、2、3又は4と少なくとも95%、96%、97%、98%、99%、99.5%又は99.9%同一である16s rRNA配列を有する、上記(1)〜(15)のいずれかに記載の組成物。
(18)細菌株が、配列番号4と少なくとも95%、96%、97%、98%、99%、99.5%又は99.9%同一である16s rRNA配列を有するか、又は細菌株が、配列番号4によって表される16s rRNA配列を有する、上記(17)に記載の組成物。
(19)細菌株が、バクテロイデス・シータイオタオミクロンの細菌株である、上記(1)〜(14)のいずれかに記載の組成物。
(20)細菌株が、バクテロイデス・シータイオタオミクロンの細菌株の16s rRNA配列と少なくとも95%、96%、97%、98%、99%、99.5%又は99.9%同一である16s rRNA配列を有する、上記(1)〜(14)のいずれかに記載の組成物。
(21)細菌株が、配列番号5と少なくとも95%、96%、97%、98%、99%、99.5%又は99.9%同一である16s rRNA配列を有する、上記(1)〜(14)のいずれかに記載の組成物。
(22)細菌株が、配列番号5によって表される16s rRNA配列を有する、上記(21)に記載の組成物。
(23)細菌株が、バクテロイデス・フラジリスの細菌株である、上記(1)〜(14)のいずれかに記載の組成物。
(24)関節リウマチを治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス・コプロコーラ種の細菌株を含む、上記(1)に記載の組成物。
(25)好中球性喘息又はアレルギー性喘息などの喘息を治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス・コプロコーラ種の細菌株を含む、上記(1)に記載の組成物。
(26)多発性硬化症を治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス・コプロコーラ種の細菌株を含む、上記(1)に記載の組成物。
(27)がんを治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス・コプロコーラ種の細菌株を含む、上記(1)に記載の組成物。
(28)ブドウ膜炎を治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス・コプロコーラ種の細菌株を含む、上記(1)に記載の組成物。
(29)関節リウマチを治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス・シータイオタオミクロン種の細菌株を含む、上記(1)に記載の組成物。
(30)好中球性喘息又はアレルギー性喘息などの喘息を治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス・シータイオタオミクロン種の細菌株を含む、上記(1)に記載の組成物。
(31)多発性硬化症を治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス・シータイオタオミクロン種の細菌株を含む、上記(1)に記載の組成物。
(32)がんを治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス・シータイオタオミクロン種の細菌株を含む、上記(1)に記載の組成物。
(33)ブドウ膜炎を治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス・シータイオタオミクロン種の細菌株を含む、上記(1)に記載の組成物。
(34)関節リウマチを治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス・フラジリス種の細菌株を含む、上記(1)に記載の組成物。
(35)好中球性喘息又はアレルギー性喘息などの喘息を治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス・フラジリス種の細菌株を含む、上記(1)に記載の組成物。
(36)多発性硬化症を治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス・フラジリス種の細菌株を含む、上記(1)に記載の組成物。
(37)がんを治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス・フラジリス種の細菌株を含む、上記(1)に記載の組成物。
(38)ブドウ膜炎を治療又は予防する方法に使用するための、バクテロイデス・フラジリス種の細菌株を含む、上記(1)に記載の組成物。
(39)経口投与用である、上記(1)〜(38)のいずれかに記載の組成物。
(40)1又は2以上の薬学的に許容される賦形剤又は担体を含む、上記(1)〜(39)のいずれかに記載の組成物。
(41)細菌株が凍結乾燥されている、上記(1)〜(40)のいずれかに記載の組成物。
(42)上記(1)〜(14)、及び(24)〜(38)のいずれかに記載の使用のための、上記(1)〜(41)のいずれかに記載の組成物を含む食品。
(43)上記(1)〜(14)、及び(24)〜(38)のいずれかに記載の使用のための、上記(1)〜(41)のいずれかに記載の組成物を含むワクチン組成物。
(44)IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患又は状態を治療又は予防する方法であって、それを必要とする患者にバクテロイデス属の細菌株を含む組成物を投与することを含む、前記方法。
(45)受託番号42408として寄託されたバクテロイデス・コプロコーラ株又はその派生物の細胞。
(46)上記(45)に記載の細胞を含む組成物。
(47)薬学的に許容される担体又は賦形剤を含む、上記(46)に記載の組成物。
(48)受託番号42408として寄託されたバクテロイデス・コプロコーラ株又はその派生物の生物学的に純粋な培養物。
(49)治療に使用するための、受託番号42408として寄託されたバクテロイデス・コプロコーラ株又はその派生物の細胞。
(50)上記(1)〜(14)のいずれかに規定の方法に使用するための、上記(49)に記載の細胞。
チリダニによる喘息のマウスモデル−BAL液中の総細胞数を示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−BALF中の総好酸球数を示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−BALF中の好酸球の割合を示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−BALF中の総マクロファージ数を示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−BALF中のマクロファージの割合を示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−BALF中の総好中球数を示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−BALF中の好中球の割合を示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−BALF中の総リンパ球数を示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−BALF中のリンパ球の割合を示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−BAL液中の総細胞数を示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−BALF中の総好酸球数を示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−BALF中の好酸球の割合を示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−BALF中の総マクロファージ数を示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−BALF中のマクロファージの割合を示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−BALF中の総好中球数を示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−BALF中の好中球の割合を示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−BALF中の総リンパ球数を示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−BALF中のリンパ球の割合を示す。 関節リウマチのマウスモデル−−14日〜0日目の体重を示す。データは初回(−14日)の体重の平均値±SEMパーセントとして表す。統計学的有意性:媒体処置群と比較して、▲ pは0.05未満、及び▲▲▲▲ pは0.0001未満である。 関節リウマチのマウスモデル−0日〜42日目の体重を示す。データは初回(0日)の体重の平均値±SEMパーセントとして表す。媒体処置群と比較して、▲ pは0.05未満、◆ pは0.05未満、及び▲▲▲ pは0.001未満、●●●● pは0.0001未満である。 関節リウマチのマウスモデル−臨床スコアを示す。データは平均値±SEMとして表す。媒体処置群の21日目と比較して、**** pは0.0001未満である。所定の日の媒体処置群と比較して、◆、〇 pは0.05未満である。 関節リウマチのマウスモデル−II型コラーゲンに対する脾細胞の増殖応答を示す。3H−TdR取り込みに基づく、培地のバックグラウンドを差し引いた[CII刺激−培地バックグラウンド]1分間のカウント数。データは全て、平均値±SEMとして表す。 関節リウマチのマウスモデル−媒体処置群からの組織培養上清中のIFN-γのレベルを示す。線は、群の中央値を表す。 関節リウマチのマウスモデル−媒体処置群からの組織培養上清中のIL−17Aのレベルを示す。線は、群の中央値を表す。 関節リウマチのマウスモデル−媒体処置群からの組織培養上清中のIL−10のレベルを示す。線は、群の中央値を表す。 関節リウマチのマウスモデル−媒体処置群からの組織培養上清中のIL−6のレベルを示す。線は、群の中央値を表す。 関節リウマチのマウスモデル−生物治療薬#675処置群(群4)からの組織培養上清中のサイトカインのレベルを示す。線は群の中央値を表す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−血清中の総IgEを示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−血清中のHDM特異的IgG1を示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−BALF中の総IgEを示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−BALF中のHDM特異的IgG1を示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−組織学的分析−平均気管支周囲浸潤スコアを示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−組織学的分析−平均血管周囲浸潤スコアを示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−組織学的分析−平均炎症スコア(気管支周囲浸潤スコアと血管周囲浸潤スコアの両方の平均値)を示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−組織学的分析−粘液スコアを示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−肺組織中のIL−9レベルを示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−肺組織中のIL−1aレベルを示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−肺組織中のIFNγレベルを示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−肺組織中のIL−17Aレベルを示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−肺組織中のIL−4レベルを示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−肺組織中のIL−5レベルを示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−肺組織中のIL−1bレベルを示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−肺組織中のRANTESレベルを示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−肺組織中のMIP−1aレベルを示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−肺組織中のKCレベルを示す。 チリダニによる喘息のマウスモデル−肺組織中のMIP−2レベルを示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−血清中のHDM特異的IgG1を示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−血清中のHDM特異的IgG2aを示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−BALF中のHDM特異的IgG1を示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−BALF中のHDM特異的IgG2aを示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−組織学的分析−平均気管支周囲浸潤スコアを示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−組織学的分析−平均血管周囲浸潤スコアを示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−組織学的分析−平均炎症スコア(気管支周囲浸潤スコアと血管周囲浸潤スコアの両方の平均値)を示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−肺組織中のTNFαレベルを示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−肺組織中のIL−1aレベルを示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−肺組織中のIFNγレベルを示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−肺組織中のIL−17Fレベルを示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−肺組織中のIL−1bレベルを示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−肺組織中のRANTESレベルを示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−肺組織中のMIP−2レベルを示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−肺組織中のKCレベルを示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−肺組織中のIL−17Aレベルを示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−肺組織中のMIP−1aレベルを示す。 重度の好中球性喘息のマウスモデル−肺組織中のIL−33レベルを示す。 関節リウマチのマウスモデル−組織病理学スコアのための目視用テンプレートを示す。コラーゲン誘発関節炎試験におけるマウス足根関節からの複合スコアを示す代表的な画像を示す。 関節リウマチのマウスモデル−組織病理学:炎症スコアを示す。データは平均値±SEMとして表す。媒体処置群と比較して** pは0.01未満である。 関節リウマチのマウスモデル−組織病理学:媒体処置群の軟骨スコアを示す。データは平均値±SEMとして表す。 関節リウマチのマウスモデル−組織病理学:骨スコアを示す。データは平均値±SEMとして表す。 関節リウマチのマウスモデル−組織病理学:総スコアを示す。データは平均値±SEMとして表す。 関節リウマチのマウスモデル−組織病理学:株#675を示す。データは平均値±SEMとして表す。 関節リウマチのマウスモデル−組織病理学:代表的な写真を示す。動物ID(#n.n)及び四肢(Rは右、Lは左)を括弧の中に示す。左上の画像(媒体):炎症及び線維症が関節周囲軟組織に及ぶ広範囲の関節及び骨の破壊。下の画像(株#675):関節周囲組織に局所的に及ぶ滑膜炎及び滑液包炎、軽度の関節軟骨損傷及び関節内壊死組織片が認められるが、骨構造は影響を受けない。 多発性硬化症のマウスモデル−臨床スコアを示す。 多発性硬化症のマウスモデル−疾患の発生率を示す。
細菌株
本発明の組成物は、バクテロイデス属の細菌株を含む。実施例は、この属の細菌がIL−17又はTh17経路によって媒介される疾患及び状態を治療又は予防するために有用であることを実証している。好ましい細菌株は、バクテロイデス・コプロコーラ種の細菌株である。さらに好ましい細菌株は、バクテロイデス・シータイオタオミクロン種又はバクテロイデス・フラジリス種の細菌株である。
本発明に使用するためのバクテロイデス種の例としては、バクテロイデス・マシリエンシス(Bacteroides massiliensis)、バクテロイデス・コプロコーラ、バクテロイデス・シータイオタオミクロン、及びバクテロイデス・カカエ(Bacteroides caccae)が挙げられる。本発明に使用するためのバクテロイデス種のさらなる例は、バクテロイデス・フラジリスである。バクテロイデスは、グラム陰性の偏性嫌気性菌の属である。バクテロイデス種は、非内生胞子形成桿菌であり、種によって運動性又は非運動性でありうる。バクテロイデス種は、哺乳動物の消化管内微生物叢の実質的な部分を構成し、複雑な分子を処理するために必須である。
EG血液寒天プレートで培養したバクテロイデス・コプロコーラ細胞は、絶対嫌気性、非胞子形成、非運動性のグラム陰性菌である。短い桿体又は桿菌状の細胞は、幅が約0.8μmで長さが多様であり、一般的に1〜4μmの範囲である。バクテロイデス・コプロコーラ種の例示的な株は、Kitahara et al. (2005) Int J Syst Evol Microbiol. 55(Pt 5):2143-7に記載されている。典型的な株M16(=JCM 12979=DSM 17136)は、健康なヒトの便から単離された。2つのさらなる株[M11(=JCM 12980)及びM156(=JCM 12981)]がこの種に含まれる。これらのバクテロイデス・コプロコーラ株の16S rRNA遺伝子配列に関するGenBank/EMBL/DDBJ受託番号は、AB200223、AB200224、及びAB200225である(本明細書において、配列番号1、配列番号2、及び配列番号3として開示される)。
受託番号NCIMB 42408として寄託されたバクテロイデス・コプロコーラ細菌を、実施例において試験し、また、本明細書において以降、株675と称する。試験した675株の16S rRNA配列を配列番号4に提供する。株675は、2015年5月13日に、4D Pharma Research Ltd.(Life Sciences Innovation Building, Aberdeen, AB25 2ZS, Scotland)によって国際寄託当局NCIMB, Ltd.(Ferguson Building, Aberdeen, AB21 9YA, Scotland)に「バクテロイデス目675」として寄託され、受託番号NCIMB 42408を与えられた。
株675のゲノムは染色体及びプラスミドを含む。株675の染色体配列を配列番号6に提供する。株675のプラスミド配列を配列番号7に提供する。これらの配列は、PacBio RS IIプラットフォームを使用して生成された。
本実施例で試験した株に近縁の細菌株もまた、IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患及び状態を治療又は予防するために有効であると予想される。特定の実施形態において、本発明に使用するための細菌株は、バクテロイデス・コプロコーラの細菌株の16s rRNA配列と少なくとも95%、96%、97%、98%、99%、99.5%又は99.9%同一である16s rRNA配列を有する。好ましくは、本発明に使用するための細菌株は、配列番号1、2、3、又は4と少なくとも95%、96%、97%、98%、99%、99.5%又は99.9%同一である16s rRNA配列を有する。好ましくは、上記配列同一性は配列番号4に対する同一性である。好ましくは、本発明に使用するための細菌株は、配列番号4によって表される16s rRNA配列を有する。
本発明に使用するためのさらに好ましい細菌株は、受託番号NCIMB 42341として寄託されたバクテロイデス・シータイオタオミクロン株である。この株は、2014年12月3日に国際寄託当局NCIMB, Ltd.(Ferguson Building, Aberdeen, AB21 9YA, Scotland)に寄託された。
本発明に使用するためのさらに好ましいバクテロイデス・シータイオタオミクロン株は、基準株ATCC 29148=CCUG 10774=CIP 104206=DSM 2079=JCM 5827=NCTC 10582=VPI 5482及び株WAL 2926=ATCC 29741である。本発明に使用するためのさらに好ましいバクテロイデス・シータイオタオミクロン株は、欧州特許第1448995号明細書に記載される株である。バクテロイデス・シータイオタオミクロン株WAL 2926の16S rRNA遺伝子配列の受託番号は、M58763(本明細書において配列番号5として開示される)である。
特定の実施形態において、本発明に使用するための細菌株は、バクテロイデス・シータイオタオミクロンの細菌株の16s rRNA配列と少なくとも95%、96%、97%、98%、99%、99.5%又は99.9%同一である16s rRNA配列を有する。好ましくは、本発明に使用するための細菌株は、配列番号5と少なくとも95%、96%、97%、98%、99%、99.5%又は99.9%同一である16s rRNA配列を有する。好ましくは、本発明に使用される細菌株は、配列番号5によって表される16s rRNA配列を有する。
本発明に使用するための好ましいバクテロイデス・フラジリス株は、基準株ATCC 25285=CCUG 4856=CIP 77.16=DSM 2151=JCM 11019=LMG 10263=NCTC 9343である。バクテロイデス・フラジリスNCTC 9343株の完全なゲノムの受託番号はCR626927.1である(バージョン:CR626927.1 GI:60491031)。
特定の実施形態において、本発明に使用するための細菌株は、CR626927.1に対して配列同一性を有するゲノムを有する。好ましい実施形態において、本発明に使用するための細菌株は、CR626927.1の少なくとも60%(例えば、少なくとも65%、70%、75%、80%、85%、95%、96%、97%、98%、99%又は100%)にわたってCR626927.1に対して少なくとも90%の配列同一性(例えば、少なくとも92%、94%、95%、96%、97%、98%、99%又は100%の配列同一性)を有するゲノムを有する。例えば、本発明に使用するための細菌株は、CR626927.1の70%にわたってCR626927.1に対して少なくとも90%の配列同一性、又はCR626927.1の80%にわたってCR626927.1に対して少なくとも90%の配列同一性、又はCR626927.1の90%にわたってCR626927.1に対して少なくとも90%の配列同一性、又はCR626927.1の100%にわたってCR626927.1に対して少なくとも90%の配列同一性、又はCR626927.1の70%にわたってCR626927.1に対して少なくとも95%の配列同一性、又はCR626927.1の80%にわたってCR626927.1に対して少なくとも95%の配列同一性、又はCR626927.1の90%にわたってCR626927.1に対して少なくとも95%の配列同一性、又はCR626927.1の100%にわたってCR626927.1に対して少なくとも95%の配列同一性、又はCR626927.1の70%にわたってCR626927.1に対して少なくとも98%の配列同一性、又はCR626927.1の80%にわたってCR626927.1に対して少なくとも98%の配列同一性、又はCR626927.1の90%にわたってCR626927.1に対して少なくとも98%の配列同一性、又はCR626927.1の100%にわたってCR626927.1に対して少なくとも98%の配列同一性を有するゲノムを有しうる。
特定の実施形態において、本発明に使用するための細菌株は、配列番号6と配列同一性を有する染色体を有する。好ましい実施形態において、本発明に使用するための細菌株は、配列番号6の少なくとも60%(例えば、少なくとも65%、70%、75%、80%、85%、95%、96%、97%、98%、99%又は100%)にわたって配列番号6に対して少なくとも90%の配列同一性(例えば、少なくとも92%、94%、95%、96%、97%、98%、99%又は100%の配列同一性)を有する染色体を有する。例えば、本発明に使用するための細菌株は、配列番号6の70%にわたって配列番号6に対して少なくとも90%の配列同一性、又は配列番号6の80%にわたって配列番号6に対して少なくとも90%の配列同一性、又は配列番号6の90%にわたって配列番号6に対して少なくとも90%の配列同一性、又は配列番号6の100%にわたって配列番号6に対して少なくとも90%の配列同一性、又は配列番号6の70%にわたって配列番号6に対して少なくとも95%の配列同一性、又は配列番号6の80%にわたって配列番号6に対して少なくとも95%の配列同一性、又は配列番号6の90%にわたって配列番号6に対して少なくとも95%の配列同一性、又は配列番号6の100%にわたって配列番号6に対して少なくとも95%の配列同一性、又は配列番号6の70%にわたって配列番号6に対して少なくとも98%の配列同一性、又は配列番号6の80%にわたって配列番号6に対して少なくとも98%の配列同一性、又は配列番号6の90%にわたって配列番号6に対して少なくとも98%の配列同一性、又は配列番号6の100%にわたって配列番号6に対して少なくとも98%の配列同一性を有する染色体を有しうる。
特定の実施形態において、本発明に使用するための細菌株は、配列番号7と配列同一性を有するプラスミドを有する。好ましい実施形態において、本発明に使用するための細菌株は、配列番号7の少なくとも60%(例えば、少なくとも65%、70%、75%、80%、85%、95%、96%、97%、98%、99%又は100%)にわたって配列番号7に対して少なくとも90%の配列同一性(例えば、少なくとも92%、94%、95%、96%、97%、98%、99%又は100%の配列同一性)を有するプラスミドを有する。例えば、本発明に使用するための細菌株は、配列番号7の70%にわたって配列番号7に対して少なくとも90%の配列同一性、又は配列番号7の80%にわたって配列番号7に対して少なくとも90%の配列同一性、又は配列番号7の90%にわたって配列番号7に対して少なくとも90%の配列同一性、又は配列番号7の100%にわたって配列番号7に対して少なくとも90%の配列同一性、又は配列番号7の70%にわたって配列番号7に対して少なくとも95%の配列同一性、又は配列番号7の80%にわたって配列番号7に対して少なくとも95%の配列同一性、又は配列番号7の90%にわたって配列番号7に対して少なくとも95%の配列同一性、又は配列番号7の100%にわたって配列番号7に対して少なくとも95%の配列同一性、又は配列番号7の70%にわたって配列番号7に対して少なくとも98%の配列同一性、又は配列番号7の80%にわたって配列番号7に対して少なくとも98%の配列同一性、又は配列番号7の90%にわたって配列番号7に対して少なくとも98%の配列同一性、又は配列番号7の100%にわたって配列番号7に対して少なくとも98%の配列同一性を有するプラスミドを有しうる。
特定の実施形態において、本発明に使用するための細菌株は、配列番号6に対して配列同一性を有する染色体と、配列番号7に対して配列同一性を有するプラスミドとを有する。
受託番号42408として寄託された細菌のバイオタイプである細菌株もまた、IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患及び状態を治療又は予防するために有効であると予想される。受託番号NCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741として寄託された細菌のバイオタイプである細菌株もまた、IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患及び状態を治療又は予防するために有効であると予想される。バイオタイプは、同じ又は非常に類似の生理的及び生化学的特徴を有する近縁の株である。
受託番号NCIMB 42408、NCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741として寄託された細菌のバイオタイプであり、本発明における使用に好適な株を、受託番号NCIMB 42408、NCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741として寄託された細菌の他のヌクレオチド配列をシークエンシングすることによって同定してもよい。例えば、実質的に全ゲノムをシークエンシングしてもよく、本発明に使用するためのバイオタイプの株は、その全ゲノムの少なくとも80%にわたって(例えば、少なくとも85%、90%、95%又は99%又はその全ゲノムにわたって)少なくとも95%、96%、97%、98%、99%、99.5%又は99.9%の配列同一性を有しうる。バイオタイプの株の同定に使用するための他の好適な配列としては、hsp60、又は反復配列、例えばBOX、ERIC、(GTG)、若しくはREP、又はMasco et al. (2003) Systematic and Applied Microbiology, 26:557-563が挙げられうる。バイオタイプの株は、受託番号NCIMB 42408、NCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741として寄託された細菌の対応する配列に対して少なくとも95%、96%、97%、98%、99%、99.5%又は99.9%の配列同一性を有する配列を有しうる。
あるいは、受託番号NCIMB 42408、NCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741として寄託された細菌のバイオタイプであり、本発明における使用に好適な株を、受託番号NCIMB 42408の寄託物、又は受託番号NCIMB 42341の寄託物、又は受託番号ATCC 29148の寄託物、又は受託番号ATCC 29741の寄託物、並びに制限酵素断片分析及び/又はPCR分析を使用することによって、例えば蛍光増幅断片長多型(FAFLP,fluorescent amplified fragment length polymorphism)及び反復DNAエレメント(rep)−PCRフィンガープリンティング又はタンパク質プロファイリング、又は部分的16S若しくは23s rDNAシークエンシングを使用することによって同定してもよい。好ましい実施形態において、そのような技術を、他のバクテロイデス・コプロコーラ又はバクテロイデス・シータイオタオミクロン株を同定するために使用してもよい。
特定の実施形態において、受託番号NCIMB 42408、NCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741として寄託された細菌のバイオタイプであり、本発明における使用に好適な株は、増幅リボソームDNA制限分析(ARDRA,amplified ribosomal DNA restriction analysis)によって分析した場合に、例えばSau3AI制限酵素(例示的な方法及び指針に関しては、例えばSrutkova et al. (2011) J. Microbiol. Methods, 87(1):10-6を参照されたい)を使用した場合に、受託番号NCIMB 42408、NCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741として寄託された細菌と同じパターンを提供する株である。あるいは、バイオタイプの株は、受託番号NCIMB 42408、NCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741として寄託された細菌と同じ炭水化物発酵パターンを有する株として同定される。
本発明の組成物及び方法において有用である他のバクテロイデス株、例えば受託番号NCIMB 42408、NCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741として寄託された細菌のバイオタイプは、実施例に記述されるアッセイを含むいかなる適切な方法又は方策を使用して同定してもよい。例えば、本発明に使用するための株は、嫌気性のYCFA中で培養すること、及び/又は細菌をII型コラーゲン関節炎マウスモデルに投与すること、次いでサイトカインレベルを評価することによって同定してもよい。特に、受託番号NCIMB 42408、NCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741として寄託された細菌と類似の増殖パターン、代謝型、及び/又は表面抗原を有する細菌株は、本発明において有用でありうる。有用な株は、受託番号NCIMB 42408、NCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741株に対して同等の免疫調節活性を有するであろう。特に、バイオタイプの株は、実施例に示される効果と、喘息、関節炎、及び多発性硬化症の疾患モデルに対して同等の効果、並びにサイトカインレベルに対して同等の効果を誘発し、このことは、実施例に記述される培養及び投与プロトコールを使用することによって同定されうる。
本発明の特に好ましい株は、受託番号NCIMB 42408として寄託されたバクテロイデス・コプロコーラ株である。これは、実施例で試験した例示的な675株であり、疾患を治療するために有効であることが示されている。したがって、本発明は、受託番号NCIMB 42408として寄託されたバクテロイデス・コプロコーラ株又はその派生物の細胞、例えば単離細胞を提供する。本発明はまた、受託番号NCIMB 42408として寄託されたバクテロイデス・コプロコーラ株又はその派生物の細胞を含む組成物も提供する。本発明はまた、受託番号NCIMB 42408として寄託されたバクテロイデス・コプロコーラ株の生物学的に純粋な培養物も提供する。本発明はまた、特に本明細書に記述される疾患の治療に使用するための受託番号NCIMB 42408として寄託されたバクテロイデス・コプロコーラ株又はその派生物の細胞も提供する。
受託番号NCIMB 42408、NCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741株として寄託された株の派生物は、オリジナル株の娘株(後代)、又はオリジナル株から培養された(サブクローニングされた)株であってもよい。本発明の株の派生物は、例えば生物活性を損ねることなく、遺伝子レベルで改変されていてもよい。特に、本発明の派生株は、治療上活性である。派生株は、元のNCIMB 42408、NCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741株と同等の免疫調節活性を有するであろう。特に、派生株は、実施例に示される効果と、喘息、関節炎、及び多発性硬化症の疾患モデルに対して同等の効果、並びにサイトカインレベルに対して同等の効果を誘発し、このことは、実施例に記述される培養及び投与プロトコールを使用することによって同定されうる。NCIMB 42408株の派生物は、一般的にはNCIMB 42408株のバイオタイプであろう。NCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741株の派生物は、一般的にはNCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741株のバイオタイプであろう。
受託番号NCIMB 42408として寄託されたバクテロイデス・コプロコーラ株の細胞という言及は、受託番号NCIMB 42408として寄託された株と同じ安全性及び治療有効性の特徴を有するいかなる細胞も包含し、そのような細胞は、本発明に包含される。受託番号NCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741として寄託されたバクテロイデス・シータイオタオミクロン株の細胞という言及は、受託番号NCIMB 42341、ATCC 29148、又はATCC 29741として寄託された株と同じ安全性及び治療有効性の特徴を有するいかなる細胞も包含し、そのような細胞は、本発明に包含される。
好ましい実施形態において、本発明の組成物における細菌株は、生存しており、腸管に部分的又は完全に定着することができる。
治療での用途
実施例において実証されるように、本発明の細菌組成物は、Th17炎症応答を低減させるために有効である。特に、本発明の組成物による治療によって、IL−17及びTh17経路によって媒介される状態の動物モデルにおいて、IL−17Aレベル及び他のTh17経路のサイトカインの低減、並びに臨床上の改善がもたらされる。したがって、本発明の組成物は、炎症性疾患及び自己免疫疾患、特にIL−17によって媒介される疾患又は状態を治療又は予防するために有用でありうる。特に、本発明の組成物は、IL−17炎症応答の上昇を低減又は予防するために有用でありうる。
Th17細胞は、ヘルパーT細胞のサブセットであり、例えば、IL−17A、IL−17F、IL−21、及びIL−22を産生する。Th17細胞の分化及びIL−17の発現は、IL−23によって駆動されうる。これらのサイトカイン及び他のサイトカインは、Th17経路の重要な部分を形成し、Th17経路は、いくつかの炎症性疾患及び自己免疫疾患に寄与してそれらの基礎となる、十分に確立された炎症シグナリング経路である(例えばYe et al. (2015) PLoS One. 10(1):e0117704、Fabro et al. (2015) Immunobiology. 220(1):124-35 、Yin et al. (2014) Immunogenetics. 66(3):215-8、Cheluvappa et al. (2014) Clin Exp Immunol. 175(2):316-22、Schieck et al. (2014) J Allergy Clin Immunol. 133(3):888-91、Balato et al. (2014) J Eur Acad Dermatol Venereol. 28(8):1016-24に記述される)。Th17経路が活性化されている疾患は、Th17経路媒介疾患である。Th17経路媒介疾患は、Th17経路を抑えることによって改善又は軽減することができ、これはTh17細胞の分化の低減、又はその活性の低減、又はTh17経路サイトカインのレベルの低減を通して行われうる。Th17経路によって媒介される疾患は、Th17細胞によって産生されるサイトカイン、例えばIL−17A、IL−17F、IL−21、IL−22、IL−26、IL−9のレベルの増加によって特徴付けられうる(総説に関してはMonteleone et al. (2011) BMC Medicine. 2011, 9:122を参照されたい)。Th17経路によって媒介される疾患は、Th−17関連遺伝子、例えばStat3又はIL−23Rの発現の増加によって特徴付けられうる。Th17経路によって媒介される疾患は、Th17細胞のレベルの増加に関連しうる。
IL−17は、いくつかの炎症性及び自己免疫性の疾患並びに状態の病原性に寄与する炎症促進性サイトカインである。本明細書に使用されるIL−17は、IL−17A、IL−17B、IL−17C、IL−17D、IL−17E、及びIL−17Fを含むIL−17ファミリーのいかなるメンバーも指しうる。IL−17媒介の疾患及び状態は、疾患又は状態に罹患した組織におけるIL−17の高い発現及び/又はIL−17陽性細胞の蓄積若しくは存在によって特徴付けられる。同様に、IL−17媒介疾患及び状態は、高いIL−17レベル又はIL−17レベルの増加によって悪化し、低いIL−17レベル又はIL−17レベルの低減によって軽減される疾患及び状態である。IL−17炎症応答は局所又は全身性でありうる。
IL−17又はTh17経路によって媒介されうる疾患及び状態の例には、多発性硬化症;関節リウマチ、変形性関節症、乾癬性関節炎、又は若年性関節炎などの関節炎;視神経脊髄炎(デビック病);強直性脊椎炎;脊椎関節炎;乾癬;全身性紅斑性狼瘡;クローン病又は潰瘍性大腸炎などの炎症性腸疾患;セリアック病;アレルギー性喘息又は好中球性喘息などの喘息;慢性閉塞性肺疾患(COPD);乳がん、結腸がん、肺がん、又は卵巣がんなどのがん;ブドウ膜炎;強膜炎;血管炎;ベーチェット病;アテローム性動脈硬化症;アトピー性皮膚炎;肺気腫;歯周炎;アレルギー性鼻炎;及び同種異系移植片拒絶が挙げられる。好ましい実施形態において、本発明の組成物は、これらの状態又は疾患の1又は2以上を治療又は予防するために使用される。さらに好ましい実施形態において、これらの状態又は疾患は、IL−17又はTh17経路によって媒介される。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患又は状態の治療又は予防において、IL−17の産生を低減させる、又はTh17細胞の分化を低減させる方法に使用するためのものである。特定の実施形態において、本発明の組成物は、治療又は予防がTh17炎症応答の上昇を低減又は予防することによってもたらされる、炎症性疾患又は自己免疫疾患の治療又は予防に使用するためのものである。特定の実施形態において、本発明の組成物は、IL−17レベル若しくはTh17細胞が上昇している又はTh17炎症応答を示している、炎症性疾患又は自己免疫疾患を有する患者の治療に使用するためでのものある。特定の実施形態において、患者は、慢性炎症性又は自己免疫性の疾患若しくは状態を有すると診断されていてもよく、又は本発明の組成物は、慢性炎症性又は自己免疫性の疾患若しくは状態へと発展する炎症性又は自己免疫性の疾患若しくは状態の予防に使用するためであってもよい。特定の実施形態において、疾患又は状態は、TNF−α阻害剤による治療に応答性でなくてもよい。本発明のこれらの使用は、先の段落に記載した特異的疾患又は状態のいかなるものにも適用されうる。
IL−17及びTh17経路はしばしば、慢性炎症性疾患及び自己免疫疾患に関連しており、そのため、本発明の組成物は、上記の慢性疾患又は状態を治療又は予防するために特に有用でありうる。特定の実施形態において、組成物は、慢性疾患を有する患者に使用するためのものである。特定の実施形態において、組成物は、慢性疾患の発症の予防に使用するためのものである。
本発明の組成物は、IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患及び状態を治療するために、並びにTh17炎症応答に対処するために有用でありうることから、本発明の組成物は、慢性疾患を治療若しくは予防するために、他の治療(TNF−α阻害剤による治療など)に応答しなかった患者の疾患を治療若しくは予防するために、及び/又はIL−17及びTh17細胞に関連する組織損傷及び症状を治療又は予防するために特に有用でありうる。例えば、IL−17は、軟骨及び骨組織におけるマトリクスの破壊を活性化することが知られており、IL−17は、軟骨細胞及び骨芽細胞におけるマトリクス産生に対して阻害効果を有することから、本発明の組成物は、骨びらん又は軟骨損傷を治療又は予防するために有用でありうる。
特定の実施形態において、本発明の組成物による治療は、IL−17レベル、特にIL−17Aレベルの低減をもたらすか又は上昇を予防する。特定の実施形態において、本発明の組成物による治療は、IFN−γ、IL−1β、RANTES、MIP−1α、IL−8又はIL−6レベルの低減をもたらすか、又は上昇を予防する。これらのサイトカインのレベル上昇のそのような低減又は予防は、炎症性及び自己免疫性の疾患並びに状態、特にIL−17又はTh17経路によって媒介される疾患及び状態を治療又は予防するために有用でありうる。
喘息
好ましい実施形態において、本発明の組成物は、喘息の治療又は予防に使用するためのものである。実施例は、本発明の組成物が、チリダニ抽出物による感作及びチャレンジ後の気道への好中球及び/又は好酸球の動員の低減をもたらすことを実証しており、そのため本発明の組成物が喘息の治療又は予防において有用でありうる。喘息は、気道の炎症及び制限によって特徴付けられる慢性疾患である。喘息における炎症は、IL−17及び/又はTh17細胞によって媒介されうることから、本発明の組成物は、喘息の予防又は治療にとって特に有効でありうる。喘息の炎症は、好酸球及び/又は好中球によって媒介されうる。
特定の実施形態において、喘息は好酸球性又はアレルギー性喘息である。好酸球性及びアレルギー性喘息は、末梢血及び気道分泌液中の好酸球数の増加によって特徴付けられ、基底膜部の肥厚に病理学的に関連し、コルチコステロイド応答性に薬理学的に関連する(Fahy (2009) Proc Am Thorac Soc 6.256-259)。好酸球の動員又は活性化を低減又は阻害する組成物は、好酸球性及びアレルギー性喘息を治療又は予防するために有用でありうる。
さらなる実施形態において、本発明の組成物は、好中球性喘息(又は非好酸球性喘息)の治療又は予防に使用するためのものである。多数の好中球は、コルチコステロイド治療に対して非感受性でありうる重度の喘息に関連する。好中球の動員又は活性化を低減又は阻害する組成物は、好中球性喘息の治療又は予防にとって有用でありうる。
好酸球性及び好中球性喘息は、相互に排他的な状態ではなく、好酸球及び好中球の応答のいずれかの対処に役立つ治療は、喘息全般の治療にとって有用でありうる。
IL−17レベルの増加及びTh17経路の活性化は、重度の喘息に関連していることから、本発明の組成物は、重度の喘息の発症を予防するために、又は重度の喘息を治療するために有用でありうる。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、喘息の治療又は予防において好酸球性炎症応答を低減させる方法に使用するため、又は喘息の治療又は予防において好中球性炎症応答を低減させる方法に使用するためのものである。先に述べたように、喘息における高レベルの好酸球は、基底膜部の肥厚に病理学的に関連することから、喘息の治療又は予防における好酸球性炎症応答の低減は、疾患のこの特徴に特異的に対処することができる可能性がある。同様に、好中球の上昇は、好酸球の上昇を伴って又は伴わなくとも、重度の喘息及び慢性的な気道の狭窄に関連する。したがって、好中球性炎症応答の減少は、重度の喘息に対処するために特に有用でありうる。
特定の実施形態において、組成物は、アレルギー性喘息における気管支周囲浸潤を低減させるか、又はアレルギー性喘息の治療において気管支周囲浸潤の低減に使用するためのものである。特定の実施形態において、組成物は、好中球性喘息における気管支周囲及び/若しくは血管周囲浸潤を低減させるか、又はアレルギー性好中球性喘息の治療において、気管支周囲及び/又は血管周囲浸潤の低減に使用するためのものである。
特定の実施形態において、本発明の組成物による治療は、IL−1β、IFNγ、RANTES、MIP−1α、又はIL−8レベルの低減をもたらす、又はレベルの上昇を予防する。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、喘息を治療する方法に使用するためのものであり、それによって好酸球及び/又は好中球性炎症応答の低減が起こる。特定の実施形態において、治療される患者は、採血又は喀痰分析を通して特定されるように、好中球又は好酸球のレベル上昇を有すると特定されている、又は過去に特定されたことがある。
本発明の組成物は、新生児又は妊娠女性に投与した場合に、新生児における喘息の発症を予防するために有用でありうる。組成物は、小児における喘息の発症を予防するために有用でありうる。本発明の組成物は、成人発症喘息を治療又は予防するために有用でありうる。本発明の組成物は、喘息をマネージ又は軽減するために有用でありうる。本発明の組成物は、アレルゲン、例えばチリダニによって悪化する喘息に関連する症状を低減させるために特に有用でありうる。
喘息の治療又は予防は、患者にとって問題である、症状の重症度の軽減、又は悪化の頻度の低減若しくは誘因の範囲の低減を指しうる。
関節炎
好ましい実施形態において、本発明の組成物は、関節リウマチ(RA,rheumatoid arthritis)の治療又は予防に使用するためのものである。実施例により、本発明の組成物が、マウスモデルにおけるRAの臨床兆候の低減をもたらすこと、軟骨及び骨損傷を低減させること、並びにIL−17炎症応答を低減させることが実証されており、そのため本発明の組成物は、RAの治療又は予防において有用でありうる。RAは、関節に主に罹患する全身性の炎症障害である。RAは、関節の腫脹、滑膜過形成、並びに軟骨及び骨の破壊が起こる炎症応答に関連している。例えば、IL−17は軟骨細胞及び骨芽細胞においてマトリクス産生を阻害して、マトリクスメタロプロテナーゼの産生及び機能を活性化することにより、並びにRA疾患の活動度がIL−17レベル及びTh17細胞数と相関することによりMiossec and Kolls (2012) Nat Rev Drug Discov. 11(10):763-76、Yang et al. (2014) Trends Pharmacol Sci. 35(10):493-500、IL−17及びTh17細胞は、RAにおいて重要な役割を有し、それにより本発明の組成物は、RAの予防又は治療にとって特に有効でありうる。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、RAの治療又は予防におけるIL−17レベルの低下又はIL−17レベルの上昇の予防に使用するためのものである。特定の実施形態において、本発明の組成物による治療は、IL−17レベル、特にIL−17Aレベルの低減をもたらすか又は上昇を予防する。特定の実施形態において、本発明の組成物による治療は、IFN−γ又はIL−6レベルの低減をもたらすか又は上昇を予防する。
特定の実施形態において、本発明の組成物による治療によって関節の腫脹の低減が起こる。特定の実施形態において、本発明の組成物は、関節が腫脹した患者又は関節が腫脹するリスクがあると特定された患者に使用するためのものである。特定の実施形態において、本発明の組成物は、RAにおける関節の腫脹を低減させる方法に使用するためのものである。
特定の実施形態において、本発明の組成物による治療によって、軟骨損傷又は骨損傷の低減が起こる。特定の実施形態において、本発明の組成物は、RAの治療において軟骨又は骨損傷の低減又は予防に使用するためのものである。特定の実施形態において、組成物は、軟骨又は骨損傷のリスクがある重度のRAを有する患者の治療に使用するためのものである。
増加したIL−17レベル及び多数のTh17細胞数は、RAにおける軟骨及び骨の破壊に関連している(Miossec and Kolls (2012) Nat Rev Drug Discov. 11(10):763-76、Yang et al. (2014) Trends Pharmacol Sci. 35(10):493-500)。IL−17は、軟骨及び骨組織におけるマトリクスの破壊を活性化させることが知られており、IL−17は軟骨細胞及び骨芽細胞におけるマトリクス産生に対して阻害効果を有する。したがって、特定の実施形態において、本発明の組成物は、RAの治療において骨びらん又は軟骨損傷の予防に使用するためのものである。特定の実施形態において、組成物は、骨びらん若しくは軟骨損傷を示す患者、又は骨びらん若しくは軟骨損傷のリスクがあると特定された患者の治療に使用するためのものである。
TNF−αもまたRAに関連するが、TNF−αは疾患の後期の病原性には関係していない。これに対し、IL−17は、慢性疾患の全ての進行期を通して役割を有する(Koenders et al. (2006) J. Immunol. 176:6262-6269)。したがって、特定の実施形態において、本発明の組成物は、関節の破壊及び軟骨の喪失を含む疾患などの慢性RA又は後期RAの治療に使用するためのものである。特定の実施形態において、本発明の組成物は、抗TNF−α治療を以前に受けたことがある患者を治療するためのものである。特定の実施形態において、治療を受ける患者は、抗TNF−α治療に応答しない、又はもはや応答しない。
本発明の組成物は、患者の免疫系を調節するために有用でありうることから、特定の実施形態において、本発明の組成物は、RAのリスクがあると特定されている患者又は初期RAを有すると診断されている患者におけるRAの予防に使用するためのものである。本発明の組成物は、RAの発症を予防するために有用でありうる。
本発明の組成物は、RAをマネージ又は軽減するために有用でありうる。本発明の組成物は、関節の腫脹又は骨の破壊に関連する症状を低減させるために特に有用でありうる。RAの治療又は予防は、例えば患者にとって問題である、症状の重症度の軽減、又は悪化の頻度の低減若しくは誘因の範囲の低減を指しうる。
多発性硬化症
好ましい実施形態において、本発明の組成物は、多発性硬化症の治療又は予防に使用するためのものである。実施例により、本発明の組成物が、多発性硬化症のマウスモデル(EAEモデル)における疾患の発生率及び疾患の重症度の低減をもたらすことが実証されており、そのため、本発明の組成物は、多発性硬化症の治療又は予防において有用でありうる。多発性硬化症は、特に脳及び脊柱のニューロンの髄鞘に対する損傷に関連する炎症障害である。多発性硬化症は、次第に無能力となり、エピソードが進行する慢性疾患である。例えばIL−17レベルは多発性硬化症の病変と相関しうる、IL−17は血液脳関門の内皮細胞の堅固な接合を破壊しうる、及びTh17細胞が中枢神経系に遊走してニューロンの喪失を引き起こしうることから(Amedei et al. (2012) Int J Mol Sci. 13(10):13438-60、Shabgah et al. (2014) Postepy. Dermatol. Alergol. 31(4):256-61)、IL−17及びTh17細胞は、多発性硬化症において重要な役割を有しうる。したがって、本発明の組成物は、多発性硬化症を予防又は治療するために特に有用でありうる。
特定の実施形態において、本発明の組成物による治療によって、疾患の発生率又は疾患の重症度の低減が起こる。特定の実施形態において、本発明の組成物は、疾患の発生率又は疾患の重症度の低減に使用するためのものである。特定の実施形態において、本発明の組成物による治療は、運動機能の低下を予防するか、又は運動機能の改善が起こる。特定の実施形態において、本発明の組成物は、運動機能の低下の予防に使用するためのものであるか、又は運動機能の改善に使用するためのものである。特定の実施形態において、本発明の組成物による治療は、麻痺の発生を予防する。特定の実施形態において、本発明の組成物は、多発性硬化症の治療における麻痺の予防に使用するためのものである。
本発明の組成物は、患者の免疫系を調節するために有用でありうることから、特定の実施形態において、本発明の組成物は、多発性硬化症のリスクがあると特定されている患者、又は初期多発性硬化症である若しくは「再発−寛解性の」多発性硬化症であると診断されている患者における多発性硬化症の予防に使用するためのものである。本発明の組成物は、硬化症の発生を予防するために有用でありうる。実際に、実施例により、本発明の組成物の投与が、多くのマウスにおける疾患の発症を予防したことが示されている。
本発明の組成物は、多発性硬化症をマネージ又は軽減するために有用でありうる。本発明の組成物は、多発性硬化症に関連する症状を低減するために特に有用でありうる。多発性硬化症の治療又は予防は、例えば患者にとって問題である、症状の重症度の軽減、又は悪化の頻度の低減若しくは誘因の範囲の低減を指しうる。
がん
好ましい実施形態において、本発明の組成物は、がんの治療又は予防に使用するためのものである。IL−17及びTh17経路は、がんの発生及び進行において中心的な役割を有することから、本発明の組成物は、がんの治療又は予防にとって有用でありうる。
がんにおけるIL−17及びTh17細胞の役割は完全には理解されていないが、IL−17及びTh17細胞の多数の腫瘍促進性効果が知られている。例えば、Th17細胞及びIL−17は、血管新生を促進して、腫瘍細胞の増殖及び生存を増加させ、腫瘍促進性の転写因子を活性化することができる(Numasaki et al. (2003) Blood. 101:2620-2627、Zhang et al. (2008) Biochem. Biophys. Res. Commun. 374: 533-537、Karin (2006) Nature. 441: 431-436)。
特定の実施形態において、本発明の組成物による治療によって、腫瘍サイズの低減又は腫瘍増殖の低減が起こる。特定の実施形態において、本発明の組成物は、腫瘍サイズの低減又は腫瘍増殖の低減に使用するためのものである。本発明の組成物は、腫瘍サイズ又は腫瘍増殖を低減するために有効でありうる。特定の実施形態において、本発明の組成物は、固形腫瘍を有する患者に使用するためのものである。特定の実施形態において、本発明の組成物は、がんの治療において血管新生の低減又は予防に使用するためのものである。IL−17及びTh17細胞は、血管新生において中心的な役割を有する。特定の実施形態において、本発明の組成物は、転移の予防に使用するためのものである。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、乳がんの治療又は予防に使用するためのものである。本発明の組成物は、乳がんを治療するために有効である場合があり、IL−17及びTh17細胞は、乳がんにおいて重要な役割を有する(Faghih et al. (2013). Iranian Journal of Immunology. 10(4):193-204)。特定の実施形態において、本発明の組成物は、乳がんの治療において、腫瘍サイズの低減、腫瘍増殖の低減、又は血管新生の低減に使用するためのものである。好ましい実施形態において、がんは乳腺がんである。好ましい実施形態において、がんはステージIVの乳がんである。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、肺がんの治療又は予防に使用するためのものである。本発明の組成物は、肺がんを治療するために有効でありえ、IL−17及びTh17細胞は、肺がんにおいて重要な役割を有する(Numasaki et al. (2005) J. Immunol. 175: 6177-6189)。特定の実施形態において、本発明の組成物は、肺がんの治療において、腫瘍サイズの低減、腫瘍増殖の低減、又は血管新生の低減に使用するためのものである。好ましい実施形態において、がんは肺がんである。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、肝臓がんの治療又は予防に使用するためのものである。本発明の組成物は、肝臓がんを治療するために有効でありえ、IL−17及びTh17細胞は、肝臓がんにおいて重要な役割を有する(Hammerich and Tacke (2014) Clin Exp Gastroenterol. 7:297-306)。特定の実施形態において、本発明の組成物は、肝臓がんの治療において、腫瘍サイズの低減、腫瘍増殖の低減、又は血管新生の低減に使用するためのものである。好ましい実施形態において、がんはヘパトーマ(肝細胞がん)である。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、がん腫の治療又は予防に使用するためのものである。本発明の組成物は、がん腫の治療にとって特に有効でありうる。特定の実施形態において、本発明の組成物は、非免疫原性がんの治療又は予防に使用するためのものである。本発明の組成物は、非免疫原性がんを治療するために有効でありうる。
さらなる実施形態において、本発明の組成物は、急性リンパ球性白血病(ALL,acute lymphoblastic leukemia)、急性骨髄性白血病、副腎皮質がん、基底細胞がん、胆管がん、膀胱がん、骨腫瘍、骨肉腫/悪性線維性組織球腫、脳幹部神経膠腫、脳腫瘍、小脳星細胞腫、大脳星細胞腫/悪性神経膠腫、上衣腫、髄芽腫、テント上原始神経外胚葉腫瘍、乳がん、気管支腺腫/カルチノイド、バーキットリンパ腫、カルチノイド腫瘍、頸がん、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄増殖障害、結腸がん、皮膚T細胞リンパ腫、子宮内膜がん、上衣腫、食道がん、ユーイング肉腫、眼内黒色腫、網膜芽細胞腫、胆嚢がん、胃がん、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍(GIST,gastrointestinal stromal tumor)、胚細胞腫瘍、小児視床下部性視路神経膠腫、ホジキンリンパ腫、黒色腫、膵島細胞がん、カポジ肉腫、腎細胞がん、喉頭がん、白血病、リンパ腫、中皮腫、神経芽腫、非ホジキンリンパ腫、中咽頭がん、骨肉腫、卵巣がん、膵臓がん、副甲状腺がん、咽頭がん、下垂体腺腫、形質細胞新生物、前立腺がん、腎細胞がん、網膜芽腫、肉腫、精巣がん、甲状腺がん、又は子宮がんの治療又は予防に使用するためのものである。
本発明の組成物は、さらなる治療剤と併用して使用した場合に特に有効でありうる。本発明の組成物の免疫調節効果は、より直接的な抗がん剤と併用すると有効でありうる。したがって、特定の実施形態において、本発明は、バクテロイデス属の細菌株と抗がん剤とを含む組成物を提供する。好ましい実施形態において、抗がん剤は、免疫チェックポイント阻害剤、標的化抗体免疫療法、CAR−T細胞療法、腫瘍溶解性ウイルス、又は細胞分裂阻害薬である。好ましい実施形態において、組成物は、Yervoy(イピリムマブ、BMS社製);Keytruda(ペムブロリズマブ、Merck社製);Opdivo(ニボルマブ、BMS社製);MEDI4736(AZ/MedImmune社製);MPDL3280A(Roche/Genentech社製);トレメリムマブ(AZ/MedImmune社製);CT-011(ピディリズマブ、CureTech社製);BMS-986015(リリルマブ、BMS社製);MEDI0680(AZ/MedImmune社製);MSB-0010718C(Merck社製);PF-05082566(Pfizer社製);MEDI6469(AZ/MedImmune社製);BMS-986016(BMS社製);BMS-663513(ウレルマブ、BMS社製);IMP321(Prima Biomed社製);LAG525(Novartis社製);ARGX-110(arGEN-X社製);PF-05082466(Pfizer社製);CDX-1127(バルリルマブ;CellDex Therapeutics社製);TRX-518(GITR Inc.社製);MK-4166(Merck社製);JTX-2011(Jounce Therapeutics社製);ARGX-115(arGEN-X社製);NLG-9189(インドキシモド、NewLink Genetics社製);INCB024360(Incyte社製);IPH2201(Innate Immotherapeutics/AZ社製);NLG-919(NewLink Genetics社製);抗VISTA(JnJ社製);エパカドスタット(Epacadostat)(INCB24360、Incyte社製);F001287(Flexus/BMS社製);CP 870893(University of Pennsylvania社製);MGA271(Macrogenix社製);エマクツズマブ(Emactuzumab)(Roche/Genentech社製);ガルニセルチブ(Eli Lilly社製);ウロクプルマブ(BMS社製);BKT140/BL8040(Biokine Therapeutics社製);バビツキシマブ(Peregrine Pharmaceuticals社製);CC 90002(Celgene社製);852A(Pfizer社製);VTX-2337(VentiRx Pharmaceuticals社製);IMO-2055(Hybridon、Idera Pharmaceuticals社製);LY2157299(Eli Lilly社製);EW-7197(Ewha Women's University社製、Korea);ベムラフェニブ(Plexxikon社製);ダブラフェニブ(Genentech/GSK社製);BMS-777607(BMS社製);BLZ945(Memorial Sloan-Kettering Cancer Centre社製);Unituxin(ジヌツキシマブ、United Therapeutics Corporation社製);Blincyto(ブリナツモマブ、Amgen社製);Cyramza(ラムシルマブ、Eli Lilly社製);Gazyva(オビヌツズマブ、Roche/Biogen社製);Kadcyla(アドトラスツズマブエムタンシン、Roche/Genentech社製);Perjeta(ペルツズマブ、Roche/Genentech社製);Adcetris(ブレンツキシマブベドチン、Takeda/Millennium社製);Arzerra(オファツムマブ、GSK社製);Vectibix(パニツムマブ、Amgen社製);Avastin(ベバシズマブ、Roche/Genentech社製);Erbitux(セツキシマブ、BMS/Merck社製);Bexxar(トシツモマブ−I131、GSK社製);Zevalin(イブリツモマブチウキセタン、Biogen社製);Campath(アレムツズマブ、Bayer社製);Mylotarg(ゲムツズマブオゾガマイシン、Pfizer社製);Herceptin(トラスツズマブ、Roche/Genentech社製);Rituxan(リツキシマブ、Genentech/Biogen社製);ボロシキシマブ(Abbvie社製);エナバツズマブ(Abbvie社製);ABT-414(Abbvie社製);エロツズマブ(Abbvie/BMS社製);ALX-0141(Ablynx社製);オザラリズマブ(Ozaralizumab)(Ablynx社製);アクチマブ−C(Actinium社製);アクチマブ−P(Actinium社製);ミラツズマブ−ドクス(Actinium社製);Emab-SN-38(Actinium社製);ナプツモマブエスタフェナトクス(Active Biotech社製);AFM13(Affimed社製);AFM11(Affimed社製);AGS-16C3F(Agensys社製);AGS-16M8F(Agensys社製);AGS-22ME(Agensys社製);AGS-15ME(Agensys社製);GS-67E(Agensys社製);ALXN6000(サマリズマブ、Alexion社製);ALT-836(Altor Bioscience社製);ALT-801(Altor Bioscience社製);ALT-803(Altor Bioscience社製);AMG780(Amgen社製);AMG228(Amgen社製);AMG820(Amgen社製);AMG172(Amgen社製);AMG595(Amgen社製);AMG110(Amgen社製);AMG232(アデカツムマブ、Amgen社製);AMG211(Amgen/MedImmune社製);BAY20-10112(Amgen/Bayer社製);リロツムマブ(Amgen社製);デノスマブ(Amgen社製);AMP-514(Amgen社製);MEDI575(AZ/MedImmune社製);MEDI3617(AZ/MedImmune社製);MEDI6383(AZ/MedImmune社製);MEDI551(AZ/MedImmune社製);モキセツモマブパスドトクス(AZ/MedImmune社製);MEDI565(AZ/MedImmune社製);MEDI0639(AZ/MedImmune社製);MEDI0680(AZ/MedImmune社製);MEDI562(AZ/MedImmune社製);AV-380(AVEO社製);AV203(AVEO社製);AV299(AVEO社製);BAY79-4620(Bayer社製);アネツマブラブタンシン(Bayer社製);バンチクツマブ(Bayer社製);BAY94-9343(Bayer社製);シブロツズマブ(Boehringer Ingleheim社製);BI-836845(Boehringer Ingleheim社製);B-701(BioClin社製);BIIB015(Biogen社製);オビヌツズマブ(Biogen/Genentech社製);BI-505(Bioinvent社製);BI-1206(Bioinvent社製);TB-403(Bioinvent社製);BT-062(Biotest社製)BIL-010t(Biosceptre社製);MDX-1203(BMS社製);MDX-1204(BMS社製);ネシツムマブ(BMS社製);CAN-4(Cantargia AB社製);CDX-011(Celldex社製);CDX1401(Celldex社製);CDX301(Celldex社製);U3-1565(Daiichi Sankyo社製);パトリツマブ(Daiichi Sankyo社製);チガツズマブ(Daiichi Sankyo社製);ニモツズマブ(Daiichi Sankyo社製);DS-8895(Daiichi Sankyo社製);DS-8873(Daiichi Sankyo社製);DS-5573(Daiichi Sankyo社製);MORab-004(Eisai社製);MORab-009(Eisai社製);MORab-003(Eisai社製);MORab-066(Eisai社製);LY3012207(Eli Lilly社製);LY2875358(Eli Lilly社製);LY2812176(Eli Lilly社製);LY3012217(Eli Lilly社製);LY2495655(Eli Lilly社製);LY3012212(Eli Lilly社製);LY3012211(Eli Lilly社製);LY3009806(Eli Lilly社製);シクスツムマブ(Eli Lilly社製);フランボツマブ(Eli Lilly社製);IMC-TR1(Eli Lilly社製);ラムシルマブ(Eli Lilly社製);タバルマブ(Eli Lilly社製);ザノリムマブ(Emergent Biosolution社製);FG-3019(FibroGen社製);FPA008(Five Prime Therapeutics社製);FP-1039(Five Prime Therapeutics社製);FPA144(Five Prime Therapeutics社製);カツマキソマブ(Fresenius Biotech社製);IMAB362(Ganymed社製);IMAB027(Ganymed社製);HuMax-CD74(Genmab社製);HuMax-TFADC(Genmab社製);GS-5745(Gilead社製);GS-6624(Gilead社製);OMP-21M18(デムシズマブ、GSK社製);マパツムマブ(GSK社製);IMGN289(ImmunoGen社製);IMGN901(ImmunoGen社製);IMGN853(ImmunoGen社製);IMGN529(ImmunoGen社製);IMMU-130(Immunomedics社製);ミラツズマブ−ドクス(Immunomedics社製);IMMU-115(Immunomedics社製);IMMU-132(Immunomedics社製);IMMU-106(Immunomedics社製);IMMU-102(Immunomedics社製);エプラツズマブ(Immunomedics社製);クリバツズマブ(Immunomedics社製);IPH41(Innate Immunotherapeutics社製);ダラツムマブ(Janssen/Genmab社製);CNTO-95(インテツムマブ、Janssen社製);CNTO-328(シルツキシマブ、Janssen社製);KB004(KaloBios社製);モガムリズマブ(Kyowa Hakko Kirrin社製);KW-2871(エクロメキシマブ、Life Science社製);ソネプシズマブ(Lpath社製);マルゲツキシマブ(Margetuximab)(Macrogenics社製);エノブリツズマブ(Macrogenics社製);MGD006(Macrogenics社製);MGF007(Macrogenics社製);MK-0646(ダロツズマブ、Merck社製);MK-3475(Merck社製);Sym004(Symphogen/Merck Serono社製);DI17E6(Merck Serono社製);MOR208(Morphosys社製);MOR202(Morphosys社製);Xmab5574(Morphosys社製);BPC-1C(エンシツキシマブ、Precision Biologics社製);TAS266(Novartis社製);LFA102(Novartis社製);BHQ880(Novartis/Morphosys社製);QGE031(Novartis社製);HCD122(ルカツムマブ、Novartis社製);LJM716(Novartis社製);AT355(Novartis社製);OMP-21M18(デムシズマブ、OncoMed社製);OMP52M51(Oncomed/GSK社製);OMP-59R5(Oncomed/GSK社製);バンチクツマブ(Oncomed/Bayer社製);CMC-544(イノツズマブオゾガマイシン、Pfizer社製);PF-03446962(Pfizer社製);PF-04856884(Pfizer社製);PSMA-ADC(Progenics社製);REGN1400(Regeneron社製);REGN910(ネスバクマブ、Regeneron/Sanofi社製);REGN421(エノチクマブ、Regeneron/Sanofi社製);RG7221、RG7356、RG7155、RG7444、RG7116、RG7458、RG7598、RG7599、RG7600、RG7636、RG7450、RG7593、RG7596、DCDS3410A、RG7414(パルサツズマブ)、RG7160(イムガツズマブ)、RG7159(オビヌツズマブ)、RG7686、RG3638(オナルツズマブ)、RG7597(Roche/Genentech社製);SAR307746(Sanofi社製);SAR566658(Sanofi社製);SAR650984(Sanofi社製);SAR153192(Sanofi社製);SAR3419(Sanofi社製);SAR256212(Sanofi社製)、SGN-LIV1A(リンツズマブ、Seattle Genetics社製);SGN-CD33A(Seattle Genetics社製);SGN-75(ボルセツズマブマホドチン、Seattle Genetics社製);SGN-19A(Seattle Genetics社製) SGN-CD70A(Seattle Genetics社製);SEA-CD40(Seattle Genetics社製);イブリツモマブチウキセタン(Spectrum社製);MLN0264(Takeda社製);ガニツマブ(Takeda/Amgen社製);CEP-37250(Teva社製);TB-403(Thrombogenic社製);VB4-845(Viventia社製);Xmab2512(Xencor社製);Xmab5574(Xencor社製);ニモツズマブ(YM Biosciences社製);カルルマブ(Janssen社製);NY-ESO TCR(Adaptimmune社製);MAGE-A-10 TCR(Adaptimmune社製);CTL019(Novartis社製);JCAR015(Juno Therapeutics社製);KTE-C19 CAR(Kite Pharma社製);UCART19(Cellectis社製);BPX-401(Bellicum Pharmaceuticals社製);BPX-601(Bellicum Pharmaceuticals社製);ATTCK20(Unum Therapeutics社製);CAR-NKG2D(Celyad社製);Onyx-015(Onyx Pharmaceuticals社製);H101(Shanghai Sunwaybio社製);DNX-2401(DNAtrix社製);VCN-01(VCN Biosciences社製);Colo-Ad1(PsiOxus Therapeutics社製);ProstAtak(Advantagene社製);Oncos-102(Oncos Therapeutics社製);CG0070(Cold Genesys社製);Pexa-vac(JX-594、Jennerex Biotherapeutics社製);GL-ONC1(Genelux社製);T-VEC(Amgen社製);G207(Medigene社製);HF10(Takara Bio社製);SEPREHVIR(HSV1716, Virttu Biologics社製);OrienX010(OrienGene Biotechnology社製);Reolysin(Oncolytics Biotech社製);SVV-001(Neotropix社製);Cacatak(CVA21、Viralytics社製);Alimta(Eli Lilly社製)、シスプラチン、オキサリプラチン、イリノテカン、フォリン酸、メトトレキサート、シクロホスファミド、5−フルオロウラシル、Zykadia(Novartis社製)、Tafinlar(GSK社製)、Xalkori(Pfizer社製)、Iressa(AZ社製)、Gilotrif(Boehringer Ingelheim社製)、Tarceva(Astellas Pharma社製)、Halaven(Eisai Pharma社製)、ベリパリブ(Abbvie社製)、AZD9291(AZ社製)、アレクチニブ(Chugai社製)、LDK378(Novartis社製)、ガネテスピブ(Synta Pharma社製)、テルジェンプマツセル−L(NewLink Genetics社製)、GV1001(Kael-GemVax社製)、チバンチニブ(ArQule社製);サイトキサン(BMS社製);オンコビン(Eli Lilly社製);アドリアマイシン(Pfizer社製);ゲムザール(Eli Lilly社製);Xeloda(Roche社製);Ixempra(BMS社製);Abraxane(Celgene社製);Trelstar(Debiopharm社製);Taxotere(Sanofi社製);Nexavar(Bayer社製);IMMU-132(Immunomedics社製);E7449(Eisai社製);


Thermodox(Celsion社製);Cometriq(Exellxis社製);Lonsurf(Taiho Pharmaceuticals社製);Camptosar(Pfizer社製);UFT(Taiho Pharmaceuticals社製);及びTS-1(Taiho Pharmaceuticals社製)からなる群から選択される抗がん剤を含む。
ブドウ膜炎
さらに好ましい実施形態において、本発明の組成物は、ブドウ膜炎の治療又は予防に使用するためのものである。本発明の組成物は、ブドウ膜炎の動物モデルにおいて疾患の発生率及び疾患の重症度の低減をもたらし、そのためブドウ膜炎の治療又は予防において有用でありうる。ブドウ膜炎は、ブドウ膜の炎症であり、それによって網膜組織の破壊が起こりうる。ブドウ膜炎は、異なる解剖学的形態(前部、中間部、後部、又はびまん性)で存在する場合があり、全身性の自己免疫障害を含む、異なるが関連する原因により起こりうる。IL−17及びTh17経路は、ブドウ膜炎に中心的に関係していることから、本発明の組成物は、ブドウ膜炎の予防又は治療にとって特に有効でありうる。参考文献Zhang (2015) Inflammation. Aug 23、Sun et al. (2015) Cytokine. 74(1):76-80、Mucientes et al. (2015) Br J Ophthalmol. 99(4):566-70、Jawad et al. (2013) Ocul Immunol Inflamm. 21(6):434-9、Maya et al. (2014) J. Ophthalmology. 310329、Chi et al. (2007) J. Allergy and Clinical Immunology. 119(5):1218-1224、Chi et al. (2008) Investigative Ophthalmology &Visual Science. 49(7): 3058-3064、Luger and Caspi (2008) Semin. Immunopathol. 30(2): 134-143は、ブドウ膜炎の患者においてインターロイキン−17Aの血清レベルが上昇していること、IL−17A遺伝子バリアントと全ブドウ膜炎との特異的関連、実験的自己免疫性ブドウ膜炎の病原性におけるTh17関連サイトカインの役割、単相性実験的自己免疫性ブドウ膜炎におけるTh17細胞と調節性T細胞との不均衡、ブドウ膜炎及び活動性アダマンチアデス−ベーチェット病及びフォークト−小柳−原田(VKH,Vogt-Koyanagi-Harada)病の患者におけるIL−17Aの上方調節、ブドウ膜炎の眼におけるセクキヌマブ(抗IL−17A抗体)及びTh17による非感染性ブドウ膜炎の治療について記述している。
特定の実施形態において、ブドウ膜炎は後部ブドウ膜炎である。後部ブドウ膜炎は主に網膜及び脈絡膜の炎症として出現し、本発明の組成物は、網膜の炎症及び損傷を低減させるために有効でありうる。
特定の実施形態において、本発明の組成物による治療によって、網膜損傷の低減が起こる。特定の実施形態において、本発明の組成物は、ブドウ膜炎の治療において網膜損傷の低減又は予防に使用するためのものである。特定の実施形態において、組成物は、網膜損傷のリスクがある重度のブドウ膜炎の患者の治療に使用するためのものである。特定の実施形態において、本発明の組成物による治療によって視神経乳頭の炎症の低減が起こる。特定の実施形態において、本発明の組成物は、視神経乳頭の炎症の低減又は予防に使用するためのものである。特定の実施形態において、本発明の組成物による治療によって、炎症細胞による網膜組織浸潤の低減が起こる。特定の実施形態において、本発明の組成物は、炎症細胞による網膜組織浸潤の低減に使用するためのものである。特定の実施形態において、本発明の組成物による治療によって、視力が維持されるか又は改善される。特定の実施形態において、本発明の組成物は、視力の維持又は改善に使用するためのものである。
特定の実施形態において、組成物は、非感染疾患又は自己免疫疾患、例えばベーチェット病、クローン病、フックス虹彩毛様体炎、多発血管炎性肉芽腫症、HLA−B27関連ブドウ膜炎、若年性特発性関節炎、サルコイドーシス、脊椎関節炎、交感性眼炎、尿細管間質性腎炎、及びブドウ膜炎症候群、又はフォークト−小柳−原田症候群に関連するブドウ膜炎の治療又は予防に使用するためのものである。IL−17Aは、例えばベーチェット病及びフォークト−小柳−原田病に関係していることが示されている。
ブドウ膜炎の治療又は予防は、例えば症状の重症度の軽減又は再発の予防を指してもよい。
投与様式
好ましくは、本発明の組成物は、本発明の細菌株の腸管への送達及び/又は腸管での部分的若しくは完全な定着を可能にするために、消化管に投与される。一般的に、本発明の組成物は経口投与されるが、それらは直腸、鼻腔内、又は口腔内若しくは舌下経路によって投与されてもよい。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、フォーム(foam)、スプレー、又はゲルとして投与されてもよい。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、直腸内坐剤などの坐剤として、例えばカカオ脂(ココアバター)、合成ハードファット(例えば、suppocire、ウイテプゾール)、グリセロゼラチン、ポリエチレングリコール、又はソープグリセリン組成物の形態で投与されてもよい。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、チューブ、例えば経鼻胃チューブ、経口胃チューブ、胃チューブ、空腸痩チューブ(Jチューブ)、経皮内視鏡胃痩(PEG,percutaneous endoscopic gastrostomy)を介して、又はポート、例えば胃、十二指腸へのアクセスを提供する胸壁ポート、及び他の好適なアクセスポートを介して消化管に投与される。
本発明の組成物は、1回投与されてもよく、又は治療レジメンの一部として連続的に投与されてもよい。特定の実施形態において、本発明の組成物は、毎日投与される。
本発明の特定の実施形態において、本発明による治療は、患者の腸内微生物叢の評価を伴う。本発明の株の送達及び/若しくは部分的若しくは完全な定着が達成されず、有効性が観察されなければ治療を繰り返してもよく、又は送達及び/若しくは部分的若しくは完全な定着が成功して有効性が観察されれば治療を中止してもよい。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、炎症性疾患又は自己免疫疾患がその子宮内の子供及び/又は出産後の子供に発症するのを予防するために妊娠中の動物、例えばヒトなどの哺乳動物に投与されてもよい。
本発明の組成物は、IL−17若しくはTh17経路によって媒介される疾患若しくは状態を有すると診断されている患者、又はIL−17若しくはTh17経路によって媒介される疾患若しくは状態のリスクがあると特定されている患者に投与されてもよい。組成物はまた、健康な患者におけるIL−17又はTh17経路によって媒介される疾患又は状態の発症を予防するための予防的手段として投与されてもよい。
本発明の組成物は、異常な腸内微生物叢を有すると特定されている患者に投与されてもよい。例えば、患者は、バクテロイデス、特にバクテロイデス・コプロコーラの定着が低減していてもよく、又は定着していなくてもよい。
本発明の化合物は、食品、例えば栄養サプリメントとして投与されてもよい。
一般的に本発明の組成物は、ヒトの治療のためのものであるが、本発明の組成物を、家禽、ブタ、ネコ、イヌ、ウマ、又はウサギなどの単胃哺乳動物を含む動物を治療するために使用してもよい。本発明の組成物は、動物の成長及び能力を増強するために有用でありうる。動物に投与する場合、強制経口投与を使用してもよい。
組成物
一般的に、本発明の組成物は、細菌を含む。本発明の好ましい実施形態において、組成物は凍結乾燥形態で製剤化される。例えば、本発明の組成物は、本発明の細菌株を含む顆粒剤又はゼラチンカプセル、例えば硬ゼラチンカプセルを含みうる。
好ましくは、本発明の組成物は、凍結乾燥細菌を含む。細菌の凍結乾燥は十分に確立された手順であり、関連する指針を、例えば参考文献Miyamoto-Shinohara et al. (2008) J. Gen. Appl. Microbiol., 54, 9-24、Cryopreservation and Freeze-Drying Protocols, ed. by Day and McLellan, Humana Press、Leslie et al. (1995) Appl. Environ. Microbiol. 61, 3592-3597で入手することができる。
あるいは、本発明の組成物は、生きた活性な細菌培養物を含んでもよい。
好ましい実施形態において、本発明の組成物は、腸管に細菌株を送達することができるようにカプセル化されている。カプセル化は、pHの変化によって誘発されてもよい化学的又は物理的刺激、例えば圧力、酵素活性、又は物理的崩壊によって破裂させることによって、目標とする位置に送達するまで組成物を分解から保護する。任意の適切なカプセル化法が用いられうる。例示的なカプセル化技術としては、多孔質マトリクス内の捕捉、固体担体表面への接着若しくは吸着、フロキュレーション又は架橋剤による自己凝集、及び微孔性の膜若しくはマイクロカプセルへの機械的封じ込めが挙げられる。本発明の組成物を調製するために有用でありうるカプセル化の指針は、例えば参考文献Mitropoulou et al. (2013) J Nutr Metab. (2013) 716861及びKailasapathy et al. (2002) Curr Issues Intest Microbiol. 3(2):39-48で入手することができる。
組成物は、経口投与されてもよく、錠剤、カプセル剤、又は散剤の形態であってもよい。バクテロイデスは嫌気性菌であることから、カプセル化産物が好ましい。インビボでの送達並びに/又は部分的若しくは完全な定着及び生存を改善するために、他の成分(例えばビタミンC)を、酸素スキャベンジャー及びプレバイオティック基質として含ませてもよい。あるいは、本発明のプロバイオティック組成物は、食品若しくは栄養製品、例えばミルク若しくは乳清ベースの発酵乳製品、又は医薬品として経口投与されてもよい。
組成物はプロバイオティックとして製剤化されてもよい。
本発明の組成物は、本発明の細菌株の治療有効量を含む。細菌株の治療有効量は、患者に対して有益な効果を発揮するために十分である。細菌株の治療有効量は、患者の腸管への送達及び/又は部分的若しくは完全な定着が起こるために十分でありうる。
例えば成人に関する細菌の好適な1日量は、約1×10〜約1×1011コロニー形成単位(CFU,colony forming unit)、例えば約1×10〜約1×1010CFUであってもよく、別の例では約1×10〜約1×1010CFUであってもよい。
特定の実施形態において、組成物は、組成物の重量1gあたり約1×10〜約1×1011CFUの量の細菌株を含有し、例えば約1×10〜約1×1010CFU/gの量の細菌株を含む。用量は、例えば、1g、3g、5g、及び10gであってもよい。
典型的には、プロバイオティック、例えば本発明の組成物を、少なくとも1つの好適なプレバイオティック化合物と組み合わせてもよい。プレバイオティック化合物は通常、オリゴ糖若しくは多糖などの消化できない炭水化物、又は上部消化管で分解若しくは吸収されない糖アルコールである。公知のプレバイオティクスとしては、市販の製品、例えばイヌリン及びトランスガラクトオリゴ糖が挙げられる。
特定の実施形態において、本発明のプロバイオティック組成物は、プレバイオティック化合物を、組成物の全重量に対して約1〜約30重量%(例えば、5〜20重量%)の量で含む。炭水化物は、フラクトオリゴ糖(又はFOS、fructo-oligosaccharides)、短鎖フラクトオリゴ糖、イヌリン、イソマルトオリゴ糖、ペクチン、キシロオリゴ糖(又はXOS、xylo-oligosaccharides)、キトサンオリゴ糖(又はCOS、chitosan-oligosaccharides)、ベータグルカン、アレイブル(arable)ゴム改変レジスタントスターチ、ポリデキストロース、D−タガトース、アカシアファイバー、キャロブ、オート麦、及びシトラスファイバーからなる群から選択されうる。1つの態様において、プレバイオティクスは、短鎖フラクトオリゴ糖(本明細書において単純にするために、以降FOSs−c.c(short-chain fructo-oligosaccharide)として示す)であり、前記FOSs−c.cは、消化されない炭水化物であり、一般的にはビートシュガーの変換によって得られ、3つのグルコース分子が結合しているサッカロース分子を含む。
本発明の組成物は、薬学的に許容される賦形剤又は担体を含んでもよい。そのような好適な賦形剤の例は、参考文献Handbook of Pharmaceutical Excipients, 2nd Edition, (1994), Edited by A Wade and PJ Wellerに見出されうる。治療での使用のために許容可能な担体又は希釈剤は、薬学分野において周知であり、例えば、参考文献Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A. R. Gennaro edit. 1985)に記載されている。好適な担体の例としては、ラクトース、スターチ、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、マンニトール、ソルビトールなどが挙げられる。好適な希釈剤の例には、エタノール、グリセロール、及び水が挙げられる。薬学的担体、賦形剤、又は希釈剤の選択は、意図される投与経路及び標準的な薬学の実践に関して選択することができる。医薬組成物は、担体、賦形剤、若しくは希釈剤として、又は担体、賦形剤、若しくは希釈剤に加えて、いかなる好適な結合剤、潤滑剤、懸濁剤、コーティング剤、可溶化剤を含んでもよい。好適な結合剤の例としては、スターチ、ゼラチン、天然の糖、例えばグルコース、無水乳糖、流動性乳糖、ベータ乳糖、コーンシロップなど、天然及び合成ゴム、例えばアカシア、トラガカントなど、又はアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース及びポリエチレングリコールが挙げられる。好適な潤滑剤の例としては、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。保存剤、安定剤、色素、及び香味料も医薬組成物中に提供されてもよい。保存剤の例としては、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、及びp−ヒドロキシ安息香酸のエステルが挙げられる。抗酸化剤及び懸濁剤も同様に使用してもよい。
本発明の組成物は、食品として処方されてもよい。例えば、食品は、例えば栄養サプリメントのように、本発明の治療効果に加えて、栄養上の利益をもたらしうる。同様に、本発明の組成物の味を向上させるように、又は医薬組成物よりむしろ一般的な食品により類似することによって消費者に組成物をより魅力的にするように、食品を処方してもよい。特定の実施形態において、本発明の組成物は乳製品として処方される。用語「乳製品」は、多様な脂肪含有量を有するいかなる液体又は半固体のミルク又は乳清ベースの製品も意味する。乳製品は、例えば牛乳、ヤギ乳、ヒツジ乳、スキムミルク、全乳、粉乳から還元したミルク、及び加工していない乳清、又は加工製品、例えばヨーグルト、凝固乳、カード、サワーミルク、サワー全乳、バターミルク、及び他のサワーミルク製品でありうる。別の重要な群としては、乳飲料、例えば乳清飲料、発酵乳、コンデンスミルク、幼児用又はベビーミルク;フレーバーミルク、アイスクリーム、ミルク含有食品、例えばスイーツが挙げられる。
特定の実施形態において、本発明の組成物は、1つの細菌株又は種を含有し、他のいかなる細菌株又は種も含有しない。そのような組成物は、ごく微量の又は生物学的に無関係な量の他の細菌株又は種を含んでもよい。そのような組成物は、他の生物体の種を実質的に含まない培養物であってもよい。
本発明による使用のための組成物は、販売承認を必要としてもよく、必要としなくてもよい。
いくつかの例において、凍結乾燥細菌株は、投与前に再構成される。いくつかの場合において、再構成は、本明細書において記述される希釈剤の使用によって行われる。
本発明の組成物は、薬学的に許容される賦形剤、希釈剤、又は担体を含みうる。
特定の実施形態において、本発明は、本発明の細菌株と、薬学的に許容される賦形剤、担体、又は希釈剤とを含む医薬組成物であって、細菌株が、それを必要とする対象に投与した場合に障害を治療するために十分な量で存在し、障害が、喘息、アレルギー性喘息、好中球性喘息、変形性関節症、乾癬性関節炎、若年性特発性関節炎、視神経脊髄炎(デビック病)、強直性脊椎炎、脊椎関節炎、全身性紅斑性狼瘡、セリアック病、慢性閉塞性肺疾患(COPD)、がん、乳がん、結腸がん、肺がん、卵巣がん、ブドウ膜炎、強膜炎、血管炎、ベーチェット病、アテローム性動脈硬化症、アトピー性皮膚炎、肺気腫、歯周炎、アレルギー性鼻炎、及び同種異系移植片拒絶からなる群から選択される、医薬組成物を提供する。
特定の実施形態において、本発明は、本発明の細菌株と、薬学的に許容される賦形剤、担体、又は希釈剤とを含む医薬組成物であって、細菌株が、IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患又は状態を治療又は予防するために十分な量で存在する、医薬組成物を提供する。好ましい実施形態において、前記疾患又は状態は、関節リウマチ、多発性硬化症、乾癬、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、セリアック病、喘息、アレルギー性喘息、好中球性喘息、変形性関節症、乾癬性関節炎、若年性特発性関節炎、視神経脊髄炎(デビック病)、強直性脊椎炎、脊椎関節炎、全身性紅斑性狼瘡、慢性閉塞性肺疾患(COPD)、がん、乳がん、結腸がん、肺がん、卵巣がん、ブドウ膜炎、強膜炎、血管炎、ベーチェット病、アテローム性動脈硬化症、アトピー性皮膚炎、肺気腫、歯周炎、アレルギー性鼻炎、及び同種異系移植片拒絶からなる群から選択される。
特定の実施形態において、本発明は、細菌株の量が、組成物の重量1グラムあたり約1×10〜約1×1011コロニー形成単位である、上記医薬組成物を提供する。
特定の実施形態において、本発明は、1g、3g、5g又は10gの用量で投与される、上記医薬組成物を提供する。
特定の実施形態において、本発明は、経口、直腸内、皮下、鼻腔内、口腔内、及び舌下からなる群から選択される方法によって投与される、上記医薬組成物を提供する。
特定の実施形態において、本発明は、乳糖、スターチ、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、マンニトール、及びソルビトールからなる群から選択される担体を含む、上記医薬組成物を提供する。
特定の実施形態において、本発明は、エタノール、グリセロール、及び水からなる群から選択される希釈剤を含む、上記医薬組成物を提供する。
特定の実施形態において、本発明は、スターチ、ゼラチン、グルコース、無水乳糖、流動性乳糖、ベータ乳糖、コーンシロップ、アカシア、トラガカント、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、及び塩化ナトリウムからなる群から選択される賦形剤を含む、上記医薬組成物を提供する。
特定の実施形態において、本発明は、保存剤、抗酸化剤、及び安定剤の少なくとも1つをさらに含む、上記医薬組成物を提供する。
特定の実施形態において、本発明は、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、及びp−ヒドロキシ安息香酸のエステルからなる群から選択される保存剤を含む、上記医薬組成物を提供する。
特定の実施形態において、本発明は、前記細菌株が凍結乾燥されている、上記医薬組成物を提供する。
特定の実施形態において、本発明は、組成物を密封容器中で約4℃又は約25℃で保存して、容器を相対湿度50%の雰囲気中に置いた場合に、コロニー形成単位として測定した細菌株の少なくとも80%が少なくとも約1か月、3か月、6か月、1年、1.5年、2年、2.5年、又は3年の期間残っている、上記医薬組成物を提供する。
培養方法
本発明に使用するための細菌株は、例えば参考文献Handbook of Microbiological Media, Fourth Edition (2010) Ronald Atlas, CRC Press、Maintaining Cultures for Biotechnology and Industry (1996) Jennie C. Hunter-Cevera, Academic Press、Strobel (2009) Methods Mol Biol. 581:247-61に詳述されている標準的な微生物学の技術を使用して培養することができる。
バクテロイデス属の細菌株は、良好な増殖及び信頼性をもたらしうる以下に概要する方法などの方法を使用して培養してもよい。この方法は、バクテロイデス・コプロコーラ種の株を培養するために特に有用である。
バクテロイデス属の細菌株、及び特にバクテロイデス・コプロコーラ種の株は、一般的に使用されうる凍結保存株の掻爬物ではなく、プレート(又はより大きい液体培養物)に接種するために液体保存株を使用することによって培養してもよい(例えば、参考文献“Creating Bacterial Glycerol Stocks for Long-term Storage of Plasmids” Addgene - https://www.addgene.org/plasmid-protocols/create-glycerol-stock/を参照されたい)。バクテロイデス株の凍結保存株を融解して液体培養物として使用すると、成熟コロニーは確実かつ迅速に形成される。
バクテロイデス属の細菌株を培養するために好適な方法は、
(a)細菌株の凍結保存株を提供するステップ;
(b)凍結保存株を融解して液体保存株を提供するステップ;
(c)液体保存株を固体又は液体培地に添加するステップ;及び
(d)固体又は液体培地をインキュベートして、細菌株の培養物を提供するステップを含みうる。
この方法は、バクテロイデス・コプロコーラの細菌株を培養するために特に有用である。
凍結保存株は、凍結グリセロール保存株であってもよい。固体又は液体培地は、YCFA寒天又はYCFA培地であってもよい。YCFA培地は、(100mlあたり、概算値)カシトン(1.0g)、酵母抽出物(0.25g)、NaHCO(0.4g)、システイン(0.1g)、KHPO(0.045g)、KHPO(0.045g)、NaCl(0.09g)、(NHSO(0.09g)、MgSO・7HO(0.009g)、CaCl(0.009g)、レサズリン(0.1mg)、ヘミン(1mg)、ビオチン(1μg)、コバラミン(1μg)、p−アミノ安息香酸(3μg)、フォリン酸(5μg)、及びピリドキサミン(15μg)を含みうる。
ステップ(d)のインキュベートするステップは、少なくとも36時間、例えば48又は72時間行われうる。ステップ(d)のインキュベートするステップは、嫌気性環境、例えば嫌気性フード内で行われてもよい。ステップ(d)の培養ステップは、細菌株のより大きい培養物を継代培養するために使用してもよい。そのような継代培養によって、より大量の細菌を調製することができ、本発明の組成物を商業規模で提供するために有用でありうる。
ステップ(b)の融解するステップは、室温で又は手での加温によって行ってもよい。
ステップ(c)で添加される液体保存株の量は、300μl〜5ml、例えば500μlでありうる。保存株は、20%グリセロール保存株でありうる。
上記の方法を、医薬組成物又は食品を調製するために使用してもよいが、この場合方法は、細菌株を単離するさらなるステップ、任意で細菌株を凍結乾燥するステップ、及び細菌株を1若しくは2以上の薬学的に許容される賦形剤若しくは担体、又は1若しくは2以上の食品物質と組み合わせるステップを含みうる。この方法によって調製される医薬組成物又は食品は、IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患又は状態を治療又は予防する方法に使用されうる。
バクテロイデス属、特にバクテロイデス・コプロコーラ種の細菌株の例示的な培養法は、以下を含みうる:
1.20%グリセロール保存株500μlをYCFA寒天に播く。
2.プレートを嫌気性フード内で48/72時間放置して、成熟コロニーを生成させる。
3.単一コロニー又は1%液体継代培養のいずれかに由来する細菌を、容量10mlで培養する。
4.成熟コロニーの形態が得られた後、コロニーを有するプレートを2/3日に限って使用する。
ワクチン組成物に使用するための細菌株
本発明者らは、本発明の細菌株がIL−17又はTh17経路によって媒介される疾患又は状態を治療又は予防するために有用であることを特定した。これは、おそらく、本発明の細菌株が宿主免疫系に効果を及ぼした結果である。したがって、本発明の組成物は、また、ワクチン組成物として投与した場合に、IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患又は状態を予防するためにも有用でありうる。特定のそのような実施形態において、本発明の細菌株を、殺滅、不活化、又は弱毒化させてもよい。特定のそのような実施形態において、組成物は、ワクチンアジュバントを含んでもよい。特定の実施形態において、組成物は、注射による投与、例えば皮下注射による投与用である。
全般
本発明の実践は、特に示されていなければ、当業者の能力範囲内である化学、生化学、分子生物学、免疫学、及び薬理学の通常の方法を使用する。そのような技術は、文献に十分に説明されている。例えば、参考文献Gennaro (2000) Remington: The Science and Practice of Pharmacy. 20th edition, ISBN: 0683306472及びMolecular Biology Techniques: An Intensive Laboratory Course, (Ream et al., eds., 1998, Academic Press)、Methods In Enzymology (S. Colowick and N. Kaplan, eds., Academic Press, Inc.)、Handbook of Experimental Immunology, Vols. I IV (D.M. Weir and C.C. Blackwell, eds, 1986, Blackwell Scientific Publications)、Sambrook et al. (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd edition (Cold Spring Harbor Laboratory Press)、Handbook of Surface and Colloidal Chemistry (Birdi, K.S. ed., CRC Press, 1997)、Ausubel et al. (eds) (2002) Short protocols in molecular biology, 5th edition (Current Protocols)、PCR (Introduction to Biotechniques Series), 2nd ed. (Newton & Graham eds., 1997, Springer Verlag)等を参照されたい。
用語「含む(comprising)」は、「含む(including)」並びに「からなる」を包含し、例えばX「を含む」組成物は、Xのみからなってもよく、又は追加のもの、例えばX+Yを含んでもよい。
数値xに関連する用語「約」は、任意であり、例えばx±10%を意味する。
用語「実質的に」は、「完全に」を除外せず、例えばYを「実質的に含まない」組成物は、Yを完全に含まなくてもよい。必要に応じて、用語「実質的に」を、本発明の定義から省略してもよい。
2つのヌクレオチド配列間のパーセント配列同一性に対する言及は、整列させた場合に、2つの配列の比較においてヌクレオチドのパーセントが同じであることを意味する。このアラインメント及びパーセント相同性又は配列同一性は、当技術分野で公知のソフトウェアプログラム、例えば参考文献Current Protocols in Molecular Biology (F.M. Ausubel et al., eds., 1987) Supplement 30の7.7.18章に記載のプログラムを使用して決定することができる。好ましいアラインメントは、ギャップオープンペナルティ12及びギャップ伸長ペナルティ2、BLOSUM行列62と共にアフィンギャップ検索を使用するSmith-Watermanの相同性検索アルゴリズムによって決定される。Smith-Watermanの相同性検索アルゴリズムは、参考文献Smith & Waterman (1981) Adv. Appl. Math. 2: 482-489に開示される。
具体的に示していなければ、多数のステップを含む工程又は方法は、方法の開始若しくは終了時に追加のステップを含んでもよく、又は追加の介在ステップを含んでもよい。同様に、必要に応じて、ステップを結合、省略、又は別の順序で行ってもよい。
本発明の多様な実施形態を本明細書において記述する。それぞれの実施形態において明記された特徴を他の明記された特徴と結びつけて、さらなる実施形態を提供してもよいと認識される。特に、本明細書において好適である、典型である、又は好ましいと強調された実施形態を互いに組み合わせてもよい(相互に排他的である場合を除く)。
チリダニによる喘息のマウスモデルにおける細菌接種物の有効性
概要
マウスに、本発明による細菌株を含む組成物を投与して、次いでチリダニ(HDM,house dust mite)抽出物をチャレンジして、アレルギー性炎症応答を誘発した。HDMに対する炎症応答は、好酸球及び好中球成分を含み、IL−17及びTh17経路によって媒介され、喘息のモデルである。本発明の組成物によって処置したマウスが示した炎症応答の程度及び特徴を対照群と比較した。本発明の組成物は、炎症応答を軽減させて、好酸球及び好中球の動員を低減させることが見出され、このことは、本発明の組成物が、IL−17及びTh17媒介疾患、例えば好酸球増加、好中球増加、及び喘息を処置するために有用でありうることを示している。

675:バクテロイデス・コプロコーラ
試験計画
群:
1.陰性対照群。媒体対照による処置(経口投与)
3.治療用細菌接種株675による処置(経口投与)
7.陽性対照群。デキサメタゾンによる処置(腹腔内投与)
8.無処置対照群
1群当たりのマウスの数=5
−14〜13日目:媒体対照を毎日経口投与(群1)
−14〜13日目:治療用細菌接種物を毎日経口投与(群2〜6)
0、2、4、7、9、11日目:容量30μlのPBS中のHDM(チリダニ抽出物−カタログ番号:XPB70D3A25、ロット番号:231897、Greer Laboratories社製、Lenoir, NC, USA)15μgを鼻腔内投与(群1〜8)
0、2、4、7、9、11日目:デキサメタゾンの投与(腹腔内投与、3mg/kg、Sigma-Aldrich社製、カタログ番号D1159)(群7)
14日目:分析のため全ての動物の屠殺。
マウスの総数=40
エンドポイント及び分析
14日目に、動物を致死量のペントバルビタール(Streuli Pharma AG社製、Uznach、カタログ番号:1170139A)の腹腔内注射により屠殺した直後に気管支肺胞洗浄(BAL,bronchoalveolar lavage)を行った。
細胞をBAL(気管支肺胞洗浄)液から単離して、白血球百分率を決定した(細胞数200個/試料)。
材料及び方法
マウス。雌性7週齢BALB/cマウスをCharles River Laboratoriesから購入して、1ケージあたり全5匹ずつ無作為にケージ(換気ケージ、Indulab AG社製、Gams, Switzerland、ケージタイプ:“The Sealsafe(商標)−IVCケージ。製品番号1248L)に割付した。ケージには、試験番号、群番号、及び実験開始日のラベルを貼った。マウスを毎週モニターして、試験開始(試験日−14日)前7日間、施設に馴化させた。試験日−14日目で、動物は8週齢であった。飲料水及び食事を自由に与えた。ケージエンリッチメントが存在した。動物の毎日の世話は、地域当局の承認番号2283.1(Service de la consommation et des affaires veterinaires du Canton de Vaudによる発行及び承認)に従って実施した。飲料水及び食事を自由に与え、1日1回交換した。ケージエンリッチメントが存在した。実験動物の飼育、遺伝子改変動物の作製、及び動物実験法に関するFVO(スイス連邦獣医局(Federal Veterinary Office))の法令455.163の下で、スイスの当局によって示された動物福祉規則を遵守した。
細菌接種物の培養。無菌的ワークステーション内で、細菌の凍結バイアルを、手袋をはめた手で加温することによって融解して、内容物約0.7mlを、嫌気性YCFA8mlを含有するHungateチューブ(カタログ番号、1020471、Glasgeratebau Ochs社製、Bovenden-Lenglern, Germany)に注入した。通常、株あたり2本のチューブを調製した。次いで、Hungateチューブを37℃で最大24〜26時間(株675に関して)インキュベート(静置)した。
接種株675の細菌ODはばらつきが大きいことが見出されたことから、3つの異なる培養アプローチをそれぞれの日に行った。2つのバイアルを上記の通りに培養して、第3の試料を、播種のために前日の培養物からの400μlのアリコートを利用して培養した。処置4日目に、凍結保存株からの増殖が不良であったことから、後者のアプローチを利用した。注目すべきは、このアプローチによって全ての場合において細菌株675の強健な増殖が得られたことであった。
媒体対照の培養。嫌気性YCFA8mlを含有するHungateチューブを37℃で16時間インキュベート(静置)した。
細菌接種物又は媒体対照の投与。培養した細菌接種物又は媒体対照400μlを強制経口投与によって毎日投与した。
鼻腔内感作。マウスを、9.75mg/kgのキシラソール及び48.75mg/kgのケタソール(Dr. E. Graeub AG社製、Bern, Switzerland)の腹腔内注射によって麻酔し、鼻腔当たり容量30μlのPBS中のHDM(カタログ番号:XPB70D3A25、ロット番号:231897、Greer Laboratories社製、Lenoir, NC, USA)15μgを投与した。
陽性対照化合物であるデキサメタゾンの調製及び投与。デキサメタゾン−21−リン酸二ナトリウム塩(Sigma-Aldrich社製、カタログ番号D1159、ロット番号SLBD.1030V)をHOに溶解して、上記の試験プロトコールに記載した日に3mg/kgの用量を200μlの容量で動物に経口投与した。
終了手順。14日目に、動物を致死量のペントバルビタール(Streuli Pharma AG社製、Uznach、カタログ番号:1170139A)の腹腔内注射により屠殺した直後に食塩水500μlによって気管支肺胞洗浄(BAL)を行った。
BALへの細胞浸潤の測定。BAL液から細胞を単離して、標準的な形態学及び細胞化学の基準に基づいて、白血球百分率を決定した。
グラフ及び統計分析。グラフは全てGraphpad Prismバージョン6によって作製し、一元配置ANOVAを適用した。統計分析の結果を個々のデータ表と共に提供した。エラーバーは、平均値の標準誤差(SEM,Standard Error of the Mean)を表す。
結果及び分析
実験結果を図1〜9に示す。
細菌又は媒体で処置したマウスにおいて病的状態又は死亡は認められなかった。2つの対照、すなわち媒体処置(陰性対照)及びデキサメタゾン処置(陽性対照)は、予想通りの結果を示し、デキサメタゾン処置後に好酸球増加及び好中球増加の減少が認められた。
この実験の最も重要な結果を図6及び7に示し、これらはHDMによるチャレンジ後の気管支肺胞洗浄液において検出された好中球の総数及びパーセントを報告する。株675は、媒体のみの対照と比較してBAL中の好中球の総数及び好中球の割合を低減させた。
重度の好中球性喘息のマウスモデルにおける細菌接種物の有効性
概要
マウスに、本発明による細菌株を含む組成物を投与して、次いでチリダニ(HDM)抽出物の皮下投与によって感作し、鼻腔内投与によりHDMをチャレンジして、重度の好中球性喘息の炎症応答のモデルとした。本発明の組成物で処置したマウスが示した炎症応答の程度及び特徴を対照群と比較した。本発明の組成物は、抗IL−17抗体の投与を含む陽性対照と同等に炎症応答を軽減させて、特に好中球の動員を低減させることが見出された。したがって、データは、本発明の組成物がIL−17及びTh17媒介状態、例えば好中球増加及び喘息を処置するために有用でありうることを示している。

675:バクテロイデス・コプロコーラ
試験計画
群:
1.陰性対照群、媒体対照による処置(経口投与)
3.治療用細菌接種株675による処置(経口投与)
7.陽性対照群。抗IL−17による処置(腹腔内投与)
8.無処置対照群
9.健康なマウス(ベースライン)
1群当たりのマウスの数(群1〜8)=5
−14〜17日目:媒体対照を毎日経口投与(群1)
−14〜17日目:治療用細菌接種物を毎日経口投与(群2〜6)
0日目:CFAと混合したHDMによる感作(皮下投与)(群1〜8)
7日目:CFAと混合したHDMによる感作(皮下投与)(群1〜8)
13、15、17日目:抗IL−17中和抗体の腹腔内投与(群7)
14、15、16、17日目:鼻腔当たり30μlのPBS中のHDMをチャレンジ(群1〜8)
18日目:分析のため全ての動物の屠殺。
エンドポイント及び分析
14日目に、動物を致死量のペントバルビタール(Streuli Pharma AG社製、Uznach、カタログ番号:1170139A)の腹腔内注射により屠殺した直後に気管支肺胞洗浄(BAL)を行った。細胞をBAL液から単離して、白血球百分率を決定した(細胞数200個/試料)。
材料及び方法
マウス。雌性7週齢C57BL/6マウスをCharles River Laboratoriesから購入して、1ケージあたり全5匹ずつ無作為にケージ(換気ケージ、Indulab AG社製、Gams, Switzerland、ケージタイプ:“The Sealsafe(商標)−IVCケージ。製品番号1248L)に割付した。ケージには、試験番号、群番号、及び実験開始日のラベルを貼った。マウスを毎週モニターして、試験開始(試験日−14日)前7日間、施設に馴化させた。試験日−14日目で、動物は8週齢であった。飲料水及び食事を自由に与えた。ケージエンリッチメントが存在した。動物の毎日の世話は、地域当局の承認番号2283.1(Service de la consommation et des affaires veterinaires du Canton de Vaudによる発行及び承認)に従って実施した。飲料水及び食事を自由に与え、1日1回交換した。ケージエンリッチメントが存在した。実験動物の飼育、遺伝子改変動物の作製、及び動物実験法に関するFVO(スイス連邦獣医局)の法令455.163の下で、スイスの当局によって示された動物福祉規則を遵守した。
細菌接種物の培養。無菌的ワークステーション内で、細菌の凍結バイアルを、手袋をはめた手で加温することによって融解して、内容物約0.7mlを、嫌気性YCFA8mlを含有するHungateチューブ(カタログ番号、1020471、Glasgeratebau Ochs社製、Bovenden-Lenglern, Germany)に注入した。通常、株あたり2本のチューブを調製した。次いで、Hungateチューブを37℃で最大24〜26時間(株675に関して)インキュベート(静置)した。
接種株675の細菌ODはばらつきが大きかったことから、3つの異なる培養アプローチをそれぞれの日に行った。2つのバイアルを上記の通りに培養して、第3の試料を、播種のために前日の培養物からの400μlのアリコートを利用して培養した。処置4日目に、凍結保存株からの増殖が不良であったことから、後者のアプローチを利用した。注目すべきは、このアプローチによって全ての場合において細菌株675の強健な増殖が得られたことであった。
媒体対照の培養。嫌気性YCFA8mlを含有するHungateチューブを37℃で16時間インキュベート(静置)した。
細菌接種物又は媒体対照の投与。培養した細菌接種物又は媒体対照400μlを強制経口投与によって毎日投与した。
HDMの感作。PBS中のHDM(カタログ番号:XPB70D3A25、ロット番号:231897、Greer Laboratories社製、Lenoir, NC, USA)50μgを、フロイント完全アジュバント(CFA(complete Freund’s adjuvant)、Chondrex Inc社製、Washington, USA)の等量と共に乳化させて、200μlの容量を反対側の脇腹に2週間の間に2回皮下投与した。2回目の免疫の1週間後に、マウスを、9.75mg/kgのキシラソール及び48.75mg/kgのケタソール(Dr. E. Graeub AG社製、Bern, Switzerland)の腹腔内注射によって麻酔して、容量30μlのPBS中のHDM15μgを4日連続して鼻腔内にチャレンジした。最終チャレンジの1日後に分析を行った。
陽性対照化合物である抗マウスIL−17抗体の調製及び投与。抗IL−17中和抗体をBio X Cell社から購入して、4℃で保存し(クローン17F3、カタログ番号BE0173、Bio X Cell社製)、上記の試験プロトコールに記載した日に12.5mg/kgの用量を動物に腹腔内投与した。
終了手順。18日目に、動物を致死量のペントバルビタール(Streuli Pharma AG社製、Uznach、カタログ番号:1170139A)の腹腔内注射により屠殺した直後に食塩水500μlによって気管支肺胞洗浄(BAL)を行った。
BALへの細胞浸潤の測定。BAL液から細胞を単離して、標準的な形態学及び細胞化学の基準に基づいて、白血球百分率を決定した。
グラフ及び統計分析。グラフは全てGraphpad Prismバージョン6によって作製し、一元配置ANOVAを適用した。統計分析の結果を個々のデータ表と共に提供した。エラーバーは、平均値の標準誤差(SEM)を表す。
結果及び分析
実験結果を図10〜18に示す。
細菌又は媒体で処置したマウスにおいて病的状態又は死亡は認められなかった。図15及び16に示されるように、株675は、強い効果を示し、陰性対照と比較して総好中球数を低減させた。さらに、株675は、図11及び12に示すように、対照と比較して好酸球数を低減させた。
II型コラーゲン誘発関節炎マウスモデルにおける関節炎を処置するための細菌接種物の有効性
材料及び方法

675:バクテロイデス・コプロコーラ
細菌培養
細菌培養物を、以下の増殖スキームに従って嫌気性のワークステーション(Don Whitley Scientific社製)の中で投与のために増殖させた。
− 月曜日/水曜日/金曜日:グリセロール保存株を氷に移して、グリセロール保存株からYCFAプレートで画線培養する。プレートを最長3日間、以下のように使用する。
− 毎日午後:プレート培養物のそれぞれの株から単一コロニーを取り上げ、YCFAを含有する8mlのHungateチューブに一晩移した(ON1)。
− 午前:80μl(1%)のON1を新しい8mlチューブに継代する(DC1)。ON1培養物を午前の強制経口投与のために使用する。
− 午後:DC1培養物を午後の強制経口投与のために使用する。
細菌株#675を、グリセロール保存株から増殖させた。
グリセロール保存株を−80℃で保存した。1週間に3回、グリセロール保存株を室温で融解して、YCFAプレートで画線培養した。新しいグリセロールアリコートをそれぞれの場合に使用した。細菌を所定のプレートにおいて最大72時間増殖させた。
動物に投与する溶液を1日2回、8時間間隔で午前(AM)と午後(PM)の処置のために調製した。画線培養したプレートから細菌コロニーを取り上げて、YCFA培地を含有するチューブに移した。細菌株#675を16時間増殖させた後、午前の投与を行った。午後の投与のために、細菌をYCFA培地に1%で継代培養した。午前及び午後の処置の調製後に、それぞれの株に関してOD値を記録した。
II型コラーゲン誘発関節炎マウスモデル
成体雄性DBA/1マウスを実験群に無作為に割付して、2週間馴化させた。0日目に、動物に、4mg/mlヒト型結核菌(Mycobacterium tuberculosis)H37Raを補充したフロイント不完全アジュバント中にII型コラーゲン(CII,type II collagen)100マイクログラムを含有する乳剤100マイクロリットルを皮下注射によって投与した。21日目に、動物に、フロイント不完全アジュバント中にII型コラーゲン100μを含有する追加免疫用の乳剤を皮下注射によって投与した。
以下の投与スケジュールに従って処置を行った。−14日から45日目の実験終了時まで、動物の体重を1週間に3回測定した。21日目から実験終了まで、動物を、後肢及び前肢の腫脹、橈骨手根(手首)関節の腫脹、及び脛骨足根骨(足首)関節の腫脹を含む関節炎の臨床兆候に関して週に3回スコア化した。
45日目に、マウスを間引いて、最終血液試料をサイトカイン分析のために採取した。
−14日目、0日目、及び45日目に、便試料を微生物学的分析のために収集して、直ちに急速凍結して、−80℃で保存した。
コラーゲン誘発関節炎(CIA,collagen-induced arthritis)マウスモデルは、関節リウマチの十分に確立されたマウスモデルである(Brand et al. (2007) Nature Protocols. 2(5):1269-1275)。CIIによる免疫は、滑膜過形成、単核球浸潤、及び軟骨破壊を含む、関節リウマチのいくつかの重要な病理学的特徴を含む病原性を引き起こす。重要なことに、CIAの発症は、IL−17Aの分泌を通してTh17細胞によって媒介される(Jiao et al. (2014) Immunopathology and Infectious Diseases. 184(4):1085-93)。関節炎モデルの基礎となる免疫応答は、ヒト型結核菌を補充したフロイントアジュバントを使用することによって増強される。
21日目に、各群の3匹のサテライト動物から脾臓を収集した。細胞をII型コラーゲンの存在下又は非存在下で72時間培養した。培養上清及び最終血清中の、TNF−α、IL−6、IFN−γ、IL−4、IL−10、及びIL−17を含むサイトカインを、Luminexによって定量した。細胞の増殖は、トリチウム化チミジン取り込み法を使用して定量した。
処置群及び用量
全ての群はn=15(主な試験群に関してn=12、サテライト群に関してn=3)であった。
生物治療薬のために使用される媒体は、酵母抽出物−カシトン−脂肪酸(YCFA、Yeast extract-Casitone-Fatty Acid)培地であった。

体重
−14日目から実験終了まで、動物の体重を週に3回測定した。データをグラフにした(平均値±SEM)。
非特異的臨床所見
−14日目から実験終了まで、動物を、異常な姿勢(丸くなる)、異常な被毛の状態(立毛)、及び異常な活動レベル(活動の低減又は増加)を含む、非特異的臨床兆候に関して毎日チェックした。
臨床所見
21日目から45日目の実験終了まで、動物を、後肢及び前肢の腫脹、橈骨手根(手首)関節の腫脹、及び脛骨足根骨(足首)関節の腫脹を含む関節炎の臨床兆候に関して週に3回スコア化した。各脚を以下の尺度を使用してスコア化した:(0)正常、(1)わずかに腫脹、(2)軽度の腫脹、(3)中等度の腫脹、及び(4)重度の腫脹。それぞれの脚スコアを加算することにより臨床スコアを計算した。1匹の動物に関して可能性がある最大臨床スコアは(16)であった。2回連続して(12)に等しいスコアを有する動物、及びいずれか1回の折に(12)より大きいスコアを有する動物を間引いた。データをグラフにした(平均値±SEM)。
細胞増殖の分析
21日目に、1群あたり3匹のサテライト動物を間引いて脾臓を摘出した。脾細胞をII型コラーゲンの存在下又は非存在下で72時間培養した。72時間後、細胞をトリチウム化チミジンの存在下で一晩パルスした。チミジンの取り込みを測定することによって、細胞の増殖を定量した。データをグラフにした(平均値±SEM)。上清を採取して、重要なサイトカインの存在に関して試験した。
サイトカインの分析
脾細胞培養物からの最終上清を、LuminexによってTNF−α、IL−6、IFN−γ、IL−4、IL−10、及びIL−17を定量するために試験した。データをグラフにした(平均値±SEM)。
微生物学的分析
−14日目、0日目、及び45日目に、便試料を各動物から収集して、直後に急速凍結して、−80℃で保存した。盲腸(内容物を含む)を直ちに急速凍結して、−80℃で保存した。細菌を播くことによって、細菌同定試験を毎日実施した。
組織病理学
実験の終了時に、後肢を組織固定液で保存した。試料を脱灰液に移した。組織試料を処理して切片にして、ヘマトキシリン・エオシンで染色した。試験計画に対して盲検の適任の組織病理学者が、炎症、関節軟骨損傷、及び下層の骨幹端骨損傷を含む、関節炎の兆候に関して切片をスコア化した。詳細なスコア化システムを使用した(以下を参照されたい)。データをグラフにした(平均値±SEM)。生データ及び分析したデータも同様に代表的な写真と共に提供した。

結果及び分析
生存及び非特異的臨床所見
一部の動物は、関節炎の臨床兆候の重症度により、又は非特異的臨床所見の重症度により、試験の予定終了前に間引いた。
群1の動物1匹を間引いた(媒体処置、供給元から到着時に脚が骨折していた動物)。
動物11匹を、関節炎の臨床兆候の重症度により間引いた;群1(媒体処置)の動物5匹及び群4(生物治療薬#675による処置)の動物6匹。
動物5匹を、異常な姿勢(丸くなる)、異常な被毛の状態(立毛)、異常な活動レベル(活動の低減)を含む、非特異的臨床兆候の重症度により間引いた:群1(媒体処置)の動物3匹及び群4(生物治療薬#675による処置)の動物2匹。
体重
体重データを−14日目から0日目まで記録して、初回(−14日)の体重のパーセントとして表記して、二元配置ANOVAの後に、−14日目との多重比較、次いで媒体処置群との多重比較のためにダネット事後検定によって分析した。データを図19に示す。実験の予定終了日以前に間引いた動物からのデータを分析から除外した。
−14日目と比較すると、1日2回の強制経口投与は、−9日目及び−7日目で媒体処置群において有意な体重減少を誘導した。
群4(0日目まで無処置、その後生物治療薬#675による処置)の体重は、−11日目から−1日まで媒体処置群より有意に高かった(pは0.0001未満、pが0.05未満であった−4日目を除く)。
生物治療薬処置群において−14日目〜−1日目の間で測定された体重は、いかなる所定の日においても媒体処置群において測定された体重と差がなかった。
体重データを0日目から28日目まで記録して、初回(0日目)の体重のパーセントとして表記して、二元配置ANOVAの後に、媒体群の0日目との多重比較、次いで媒体処置群との多重比較のためにダネット事後検定によって分析した。データを図20に示す。実験の予定終了日以前に間引いた動物及びサテライト動物からのデータを分析から除外した。28日目、35日目、及び42日目のデータを、一元配置ANOVAの後に媒体処置群との多重比較のためにダネット事後検定によってさらに分析した。
関節炎の臨床兆候の発生は、媒体処置群の0日目と比較して26日目及び28日目(pは0.0001未満)で有意に体重が減少したことに関連した。
媒体処置群と比較すると、体重は、群4(生物治療薬#675による処置)において、3日目、5日目、10日目(pは0.05未満)、及び26日目(pは0.001未満)で有意に高かった。
データを一元配置ANOVAで分析すると、体重は、28日目での媒体処置群と比較すると群4(生物治療薬#675による処置)で有意に高かった(pは0.01未満)。35日目又は42日目では実験群の間に有意差はなかった。
臨床所見
臨床スコアデータを二元配置ANOVAの後、媒体処置群における日毎の多重比較のために、次いでそれぞれの日の実験群と媒体処置群の間の多重比較のためにダネット事後検定によって分析した。データを図21に示す。実験終了前に間引いた動物から記録されたデータを分析から除外した。関節炎の臨床兆候の重症度により動物を間引いた場合、最後に記録されたスコアを、翌日に報告して、統計分析に使用した。
臨床スコアの有意な増加は、媒体処置群において、21日目と比較して28日目〜45日目(pは0.0001未満)まで観察された。
生物治療薬#675は、媒体処置群と比較した場合に臨床スコアを低減させなかった。この群の動物は、他の実験群と比較して異なる時期に免疫され、このことが、より高い臨床スコアが観察された理由を説明しうる。
細胞増殖の分析
アッセイを検証するために、脾細胞を、陽性対照刺激として可溶性抗CD3及び抗CD28(抗CD3/CD28)の存在下で培養して、細胞の増殖能を確認した。
抗CD3/CD28に対する強い増殖応答が、全ての実験群で観察され、細胞が健康で生存しており、活性化シグナルに応答可能であることを示した。
II型コラーゲン(CII)の存在下での増殖応答を試験するために、脾細胞を、50μg/mlのCIIの存在下で培養した。CIIに対する脾細胞の増殖応答を、二元配置ANOVAの後、非刺激脾細胞とCII刺激脾細胞の間の多重比較のためにサイダック事後検定によって、及び一元配置ANOVAの後に、異なる実験群と媒体処置群とのCII刺激応答の比較のためにダネット事後検定によって分析した。データを図22に示す。
CIIは、媒体処置群における非刺激脾細胞と比較するとH−チミジン取り込み(cpm)の非常に有意な増加を誘導した(pは0.0001未満)。
生物治療薬#675で処置した群の脾細胞の増殖は異なる日に設定され、したがって顕著な低減が観察されたものの、媒体処置群との比較を行わなかった。
組織培養上清中のサイトカインレベル
抗CD3/CD28刺激培養に由来する組織培養上清中のそれぞれのサイトカインのレベルを、luminex分析によって測定した。これらは、測定した全てのサイトカインに関して強い応答を示した(媒体群における平均レベルは以下の通りであった:IL−4=6,406pg/ml;IL−6=306pg/ml;IL−10=10,987pg/ml;IL−17A=11,447pg/ml;IFN−γ=15,581pg/ml;TNF−α=76pg/ml)。
以下の章は、II型コラーゲン刺激培養物から得られたデータを要約する。該当する場合、非刺激脾細胞及びCII刺激脾細胞の上清中のサイトカインレベルの差の統計分析を、二元配置ANOVAの後に多重比較のためにサイダック事後検定を使用して行ったが、生物治療薬処置群と媒体処置群におけるCII刺激応答の比較のためには、一元配置ANOVAの後のダネット事後検定を使用した。いずれの場合にも群の間でサイトカインレベルに有意差はなかった。これはおそらく使用した母集団のサイズ(n=3)が小さいためである。
データの実質的な拡散を有するサイトカインに関するデータの分布をより正確に提示するために、これらを散布図として表す。
CIIによる刺激後の組織培養上清中のIL−4の群平均値は5pg/ml未満であった。これらは生物学的に有意ではないと考えられ、本明細書に含まなかった。コラーゲンによる刺激後の組織培養上清中のTNF−αの群平均値は、定量限界未満であった。
IFN−γの上清中レベル(図23)
IL−17と共に、IFN−γは、CIAモデルにおいて疾患を駆動する主要なサイトカインである。図23における散布図は、CII刺激後のIFN−γレベルを実証しており、群の中央値は、生物治療薬と比較して媒体処置群ではより高かった(図27を参照されたい)。
IL−17Aの上清中レベル(図24)
IL−17Aのレベルは、媒体処置群に関してCII刺激培養において50pg/mlであった。このサイトカインのレベルは、媒体処置群と比較して生物治療薬群ではより低いように思われた(図27を参照されたい)。
IL−10の上清中レベル(図25)
媒体処置群におけるIL−10のレベルはCII刺激及び培地対照培養に関してそれぞれ、13pg/ml及び2.1pg/mlであった。炎症及び炎症促進性サイトカインの誘導は抗炎症フィードバック機構を伴いうることから、媒体処置群ではより高レベルのIL−10(抗炎症性サイトカインである)が予想されうる。
IL−6の上清中レベル(図26)
炎症性サイトカイン、例えばIL−6及びTNF−αは、典型的には、抗CII培養において高レベルで産生されない。しかし、それらのレベルは、免疫調節の結果として変化しうる。CII刺激培養におけるIL−6のレベルは控えめであり、10pg/mlに達した。培地対照培養より高いものの、これらの差は、小さすぎて統計分析を行うための論理的根拠を提供できなかった。
群4−生物治療薬#675における組織培養上清(図27)
この群の脾細胞培養は異なる日に設定されており、したがって媒体処置群とは異なる。直接比較は適切ではない場合があるが、生物治療薬#675による処置は、IFN−γ、IL−17A、及びIL−6レベルを低下させるために有効であったように思われる。
微生物学的分析
細菌の増殖は、分光光度計を使用して600nmでの光学密度を測定することによって、確認した。細菌の同一性は、画線培養したプレートの写真を参照写真と比較することによって確認した。
細菌調製法を改善した後、測定された高いOD値によって示されるように、一貫して高用量の細菌株を−2日目及び−3日目に投与した(0日目からの株#675を除く)。
便試料を収集して、−14日目、0日目及び終了時に急速凍結した。
組織病理学
組織病理学の結果を図66〜71に示す。このモデルに関して予想されるように、関節炎の有無又は存在する変化の重症度に関して個体内及び個体間変動が観察された。
病態の性質はこのモデルに関して予想された通りであり、関節周囲軟組織(筋肉、脂肪組織、皮膚コラーゲン)を巻き込むように広がる滑膜及び滑液包の広範な混合型の慢性活動型炎症が認められた。最も重度の罹患関節では、関節内壊死組織片を伴う関節軟骨の変性及び喪失、並びに線維症及び炎症による関節及び骨構造の炎症及び破壊が認められた。
組織病理学的変化の発生率は、媒体−80%(16/20);生物治療薬#675−83%(20/24)であった。生物治療薬#675は、後肢関節で観察される組織病理学的損傷を低減させるために、並びに関節炎症スコア、軟骨損傷スコア、骨損傷スコア、及び総組織病理学スコアを低減させるために有効であったが(図70を参照されたい)、媒体群との統計学的比較は実施することができなかった。
要約
臨床スコアの増加は、DBA/1マウスのこの関節炎モデルについて予想されるように、II型コラーゲンの最初の投与後28日目から観察された。生物治療薬#675は、このモデルの関節炎を処置するために有効であることが示された。生物治療薬#675で処置した動物は、媒体処置群と比較して異なる時期に免疫されており、このことはより高い臨床スコアが観察されたことを説明しうる。しかし、生物治療薬#675は、組織病理学的分析において実証されたように関節における病理学的疾患を低減させるために有効であった。
II型コラーゲンに対する増殖性の記憶応答が、全ての実験群の脾細胞培養物において認められた。生物治療薬#675の培養では、これらが異なる時期に確立されたことから統計処理を行わなかったが、対照と比較してコラーゲン特異的応答の低減が観察された。
試験したT細胞サイトカインの多くが、媒体処置群においてII型コラーゲン刺激と培地対照との間で検出可能な増加を示した。これらの増加は、生物治療薬処置群では明白ではなかった。このことは、上記のII型コラーゲンに対する増殖性の記憶応答を広く支持している。
このモデル及びヒトRAにおける病原性の応答であるTh1/Th17軸が抑制されている証拠が認められた。サイトカインレベルの低減と増殖の低減との相関は、免疫の調節を示唆している。この調節がTh2関連IL−4のレベルの増加に起因するのか、又は免疫調節性サイトカインであるIL−10の増加に起因するのかは証拠がない。
チリダニによる喘息のマウスモデルにおける細菌接種物の効果に関するさらなる分析
実施例1で試験したマウスにさらなる分析を行って、アレルギー性喘息の炎症応答に及ぼす本発明の組成物の効果をさらに特徴付けた。
材料及び方法
14日目での血液抜き取り及び血清調製。動物の血液試料を心穿刺によって収集した。14000gで5分間遠心分離することによって、血液試料から血清を単離して、−20℃で保存した。
14日目での臓器の摘出。後続の組織学的分析のために左の肺葉のコレクションをホルマリンに入れた。右肺葉(残りの全ての肺葉)のコレクション及び血清を採取して急速凍結して後続の分析を行った。残りのBAL液を後続の分析のために急速凍結した。
血清及びBAL液中の抗体レベルの測定
BAL液及び血清中の総IgE及びチリダニ(HDM)特異的IgG1抗体産生を、ELISAアッセイによって測定した。
肺の単離及び組織学的分析
左の肺葉をホルマリンで固定した後、パラフィンに包埋して、切片を作製し、ヘマトキシリン・エオシン及びPASで染色した。その後の組織学スコア化は以下のように盲検的に行った:試料あたり無作為な5つの視野を炎症(気管支周囲浸潤及び血管周囲浸潤)及び粘液産生に関してスコア化した。炎症性浸潤を以下のグレード化システムによってスコア化した:
0−正常
1−軽度の炎症性浸潤
2−中等度の炎症性浸潤
3−顕著な炎症性浸潤
4−重度の炎症性浸潤
5−非常に重度の炎症性浸潤
それぞれの視野において、気道のサイズを測定して、粘液細胞数/umを定量した。
肺組織における炎症メディエータの測定
炎症メディエータの定量のために単離した右肺葉(残りの全ての肺葉)を急速凍結した後、CCL11、IFN−ガンマ、IL−1アルファ、IL−1ベータ、IL−4、IL−5、IL−9、IL−17A、CXCL1、CCL3、CXCL2、及びCCL5を、市販の多重アッセイ(Merck-Millipore社)によって測定した。分析は、製造業者の説明書に従って実施した。
結果及び分析
実験の結果を図28〜46に示す。
実施例1に記述される知見を支持して、株675によって処置したマウスの肺組織における細胞浸潤の分析は、平均炎症スコアの顕著で統計学的に有意な低減を示した(図32及び34を参照されたい)。
BAL液及び血清中の抗体レベルを分析した(図28〜31を参照されたい)。血清抗体レベルに及ぼす細菌処置の明確な効果は観察されなかった。このことは、各処置のデータの拡散及びエラーバーが大きく、陽性対照及び陰性対照が予想通りの反応を示さないように思われたことから、実験の失敗を反映する可能性がある。同様にベースラインの血清抗体レベルが何らかの変化を隠すこともありえた。
同様に、肺組織におけるサイトカインレベルに及ぼす細菌処置の明確な効果は観察されなかった(図36〜46を参照されたい)。この場合も、各処置のデータの広がり及びエラーバーが大きく、陽性対照及び陰性対照が予想通りの反応を示さないように思われたことから、実験の失敗を反映する可能性がある。同様に、関係する作用機序が影響を及ぼしたのがより早期のサイトカイン応答であり、そのため最後のHDM気道チャレンジの4日後でもはや検出不能であった可能性もある。現在の試験においてサイトカインデータを解釈する際には、検出されるレベルのばらつきにより、何らかの注意を払うべきである。このばらつきは一部には、異なる分析のために肺組織を分離し、そのため一つの肺葉が、まだら状の炎症分布により他のマウスの同じ肺葉を完全には表していなかった又は同等ではなかったという事実によって説明できる。
重度の好中球性喘息のマウスモデルにおける細菌接種物の効果のさらなる分析
実施例2で試験したマウスにさらなる分析を行って、重度の喘息に関連する好中球の応答に及ぼす本発明の組成物の効果をさらに特徴付けた。
材料及び方法
18日目での臓器の摘出。後続の組織学的分析のために左の肺葉のコレクションをホルマリンに入れた。右肺葉(残りの全ての肺葉)のコレクション及び血清を採取して急速凍結して後続の分析を行った。残りのBAL液を後続の分析のために急速凍結した。
肺組織における炎症メディエータの測定(後続の分析)。炎症メディエータの定量のために単離した右肺葉(残りの全ての肺葉)を急速凍結した後、IFN−ガンマ、IL−1アルファ、IL−1ベータ、CXCL1、CCL3、CXCL2、CCL5、IL−17A、TNF−アルファ、IL−17F、IL−23、及びIL−33を、市販の多重アッセイ(Merck-Millipore社製)によって測定した。分析は、製造業者の説明書に従って実施した。
血清及びBAL液中の抗体レベルの測定(後続の分析)。BAL及び血清中のチリダニ(HDM)特異的IgG1及びIgG2a抗体産生を、ELISAアッセイによって測定した。
肺の単離及び組織学的分析(後続の分析)。左の肺葉をホルマリンで固定した後、パラフィンに包埋して、切片を作製し、ヘマトキシリン・エオシン及びPASで染色した。その後の組織学スコア化は以下のように盲検的に行った:試料あたり無作為な5つの視野を、炎症(気管支周囲浸潤及び血管周囲浸潤)及び粘液産生に関してスコア化した。炎症性浸潤を以下のグレード化システムによってスコア化した:
0−正常
1−軽度の炎症性浸潤
2−中等度の炎症性浸潤
3−顕著な炎症性浸潤
4−重度の炎症性浸潤
5−非常に重度の炎症性浸潤
結果及び分析
実験結果を図47〜64に示す。
抗体レベルのさらなる分析により、BAL液及び血清中のHDM特異的IgG1レベルの低減においても細菌株675の有効性が反映されたことが判明した(図47及び49を参照されたい)。IgG2aレベルに及ぼす効果に関しては確固たる結論を引き出すことはできない。全体として、抗体分析のデータは、抗体のアイソタイプスイッチに及ぼす選択的効果とは対照的に、炎症応答の全体的な低減に関連する低減を示唆している。
組織学的分析は、BAL液からの白血球百分率を支持し、株675で処置したマウスにおいて細胞浸潤の低減を示した(図51〜53を参照されたい)。
実施例4と同様にサイトカインレベルに関連して、各処置のデータの拡散及びエラーバーが大きく、陽性対照及び陰性対照が予想通りの反応を示さないように思われる。同様に、作用機序がより早期のサイトカイン応答に影響を及ぼすことに関係し、そのため最後のHDM気道チャレンジの4日後でもはや検出不能であった可能性もある。現在の試験においてサイトカインデータを解釈する際には、検出されるレベルのばらつきにより、何らかの注意を払うべきである。このばらつきは一部には、異なる分析のために肺組織を分離し、そのため一つの肺葉が、まだら状の炎症分布により他のマウスの同じ肺葉を完全には表していなかった又は同等ではなかった可能性があるという事実によって説明できる。このばらつきにもかかわらず、陽性対照の抗IL−17抗体が一般的に予想通りの反応を示した中で、株675に関してサイトカインレベルに及ぼす明確な抗炎症効果が示された。
上記の注意を考慮すると、図56、58、59、61、及び63のデータは、本発明の細菌株による処置が、IL−1b、IFNγ、RANTES、MIP−1a、及びKC(ヒトIL−8のマウスオルトログ)レベルの低減をもたらしうることを示唆しており、このことは間質細胞又は自然免疫細胞によるケモカイン放出(及びしたがって細胞の動員)に及ぼす影響に関連する作用機序を示しうる。これらのサイトカインはTh17経路の一部である。このデータセットと併せて考慮すると、株675は重度の好中球性喘息のこのマウスモデルにおいて炎症からマウスを保護するために非常に有効であるという明確な結論を引き出すことができる。
多発性硬化症のマウスモデルにおける細菌接種物の有効性
概要
マウスに、本発明による細菌株を含む組成物を投与して、次いでマウスをミエリン乏突起膠細胞糖タンパク質によって免疫して、実験的自己免疫性脳脊髄炎(EAE,experimental autoimmune encephalomyelitis)を誘発した。EAEは、ヒト多発性硬化症の最も一般的に使用される実験モデルである。本発明の組成物は、疾患の発生率及び疾患の重症度に対して顕著な効果を有することが見出された。

675:受託番号NCIMB 42408として寄託された細菌
試験計画
群:
1.陰性対照群。媒体対照による処置(経口投与)
3.治療用細菌接種株675による処置(経口投与)
9.陽性対照群。デキサメタゾンによる処置(腹腔内投与)
10.無処置対照群。
1群当たりのマウスの数=10
−14〜27日目:媒体対照の毎日経口投与(群1)
−14〜27日目:治療用細菌接種物の毎日経口投与(群4)
0〜28日目:デキサメタゾンの週に3回腹腔内投与(群9)
0日目:MOG35−55(ミエリン乏突起膠細胞糖タンパク質−2mg/ml)及びCFA(2mg/ml MTB)を1:1で混合して、1mg/ml溶液を得た。ペプチド−CFA混合物100μlを、各後肢に皮下注射した。百日咳毒素(300ng)を腹腔内投与した。
1日目:百日咳毒素の腹腔内投与(300ng)。
7日目以降:疾患の発生率及び体重を週に3回測定。
エンドポイント及び分析
マウスを疾患の発生率及び疾患の重症度に関して週に3回分析した。スコア化は盲検で行った。疾患の重症度は、0〜5までの範囲の臨床スコアを使用して評価し、5はマウスの死亡を示した(以下の臨床スコアスコア化システムを参照されたい)。
モニタリング
表記の日にマウスの体重を測定して、疾患活動度スコア及び疾患の発生率を観察した。
疾患活動度スコア観察:
0−非免疫マウスと比較して運動機能に明白な変化はない。
0.5−尾の先端を引きずる。
1.0−尾を引きずる。
1.5−尾を引きずり、後肢が阻害される。
2.0−尾を引きずり、後肢の虚弱。
又は−歩行を観察すると頭部の傾きの明白な兆候がある。平衡が不良である。
2.5−尾を引きずり、後肢を引きずる。
又は−マウスが時に倒れるほど強い頭部の傾きが見られる。
3.0−尾を引きずり、後肢の完全な麻痺。
3.5−尾を引きずり、後肢の完全な麻痺。
これに加えて、マウスはケージの中を移動するが、横向きに寝かせると、立つことができない。
後肢は完全に体の片面に寄っている。
4.0−尾を引きずり、後肢の完全な麻痺及び前肢の部分麻痺。
マウスはケージの中の移動が最小限であるが、覚醒して餌を食べる
4.5−完全な後肢の麻痺及び前肢の部分麻痺。ケージの中を移動しない。
マウスを直ちに安楽死させてケージから出す。
5.0−マウスを重度の麻痺により安楽死させる。
動物が、1に等しい又は1より大きい疾患活動度スコアを有する場合、プラスの疾患発生率スコアを有すると考えられる。
結果
試験結果を図72及び73に示す。
陰性対照群における疾患の誘導は、媒体対照及び無処置対照によって示された高いスコアにより、成功であった。株675による処置の効果は顕著であり、株675で処置したマウスは、疾患の発生率及び疾患の重症度の顕著な低減を示した。実際に、疾患の発生率及び疾患の重症度の低減は、陽性対照群と同等であった。これらのデータは、株675が、多発性硬化症の治療又は予防にとって有用でありうることを示している。
安定性試験
本明細書に記述される少なくとも1つの細菌株を含有する本明細書において記述される組成物を、25℃又は4℃で密封容器の中で保存して、容器を30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、90%又は95%の相対湿度を有する雰囲気中に置く。1か月、2か月、3か月、6か月、1年、1.5年、2年、2.5年、又は3年後に、細菌株の少なくとも50%、60%、70%、80%又は90%が、標準的なプロトコールによって決定したコロニー形成単位で測定した場合に残っている。
配列
配列番号1(バクテロイデス・コプロコーラの16S rRNAの遺伝子、部分配列:株M11−AB200223)
1 agagtttgat cctggctcag gatgaacgct agctacaggc ttaacacatg caagtcgagg
61 ggcagcatga acttagcttg ctaagtttga tggcgaccgg cgcacgggtg agtaacacgt
121 atccaacctt ccgtttactc agggatagcc tttcgaaaga aagattaata cctgatagta
181 tggtgagatt gcatgatggc accattaaag atttattggt aaacgatggg gatgcgttcc
241 attaggtagt aggcggggta acggcccacc tagcctgcga tggatagggg ttctgagagg
301 aaggtccccc acattggaac tgagacacgg tccaaactcc tacgggaggc agcagtgagg
361 aatattggtc aatgggcgag agcctgaacc agccaagtag cgtgaaggat gaaggtccta
421 cggattgtaa acttctttta tacgggaata aagtttccta cgtgtaggat tttgtatgta
481 ccgtatgaat aagcatcggc taactccgtg ccagcagccg cggtaatacg gaggatgcga
541 gcgttatccg gatttattgg gtttaaaggg agcgcagacg ggagattaag tcagttgtga
601 aagtttgcgg ctcaaccgta aaattgcagt tgatactggt ttccttgagt gcagttgagg
661 caggcggaat tcgtggtgta gcggtgaaat gcttagatat cacgaagaac cccgattgcg
721 aaggcagctt gctaaactgt aactgacgtt catgctcgaa agtgtgggta tcaaacagga
781 ttagataccc tggtagtcca cacggtaaac gatggatact cgctgttggc gatatactgt
841 cagcggccaa gcgaaagcat taagtatccc acctggggag tacgccggca acggtgaaac
901 tcaaaggaat tgacgggggc ccgcacaagc ggaggaacat gtggtttaat tcgatgatac
961 gcgaggaacc ttacccgggc ttaaattgca gacgaattac gaggaaactt gtaagccgca
1021 aggcgtctgt gaaggtgctg catggttgtc gtcagctcgt gccgtgaggt gtcggcttaa
1081 gtgccataac gagcgcaacc ctcgtggtca gttactaaca ggttaagctg agggctctgg
1141 ccagactgcc atcgtaagat gtgaggaagg tggggatgac gtcaaatcag cacggccctt
1201 acgtccgggg ctacacacgt gttacaatgg gaggtacaga aggccgctac ccggcaacgg
1261 gatgccaatc cccaaaacct ctctcagttc ggactggagt ctgcaacccg actccacgaa
1321 gctggattcg ctagtaatcg cgcatcagcc acggcgcggt gaatacgttc ccgggccttg
1381 tacacaccgc ccgtcaagcc atgaaagccg ggggtacctg aagtgcgtaa ccgcaaggag
1441 cgccctaggg taaaaccggt aattggggct aagtctaaca aggtaaccaa g
配列番号2(バクテロイデス・コプロコーラの16S rRNAの遺伝子、部分配列:株M16−AB200224)
1 agagtttgat cctggctcag gatgaacgct agctacaggc ttaacacatg caagtcgagg
61 ggcagcatga acttagcttg ctaagtttga tggcgaccgg cgcacgggtg agtaacacgt
121 atccaacctt ccgtttactc agggatagcc tttcgaaaga aagattaata cctgatagta
181 tggtgagatt gcatgatggc accattaaag atttattggt aaacgatggg gatgcgttcc
241 attaggtagt aggcggggta acggcccacc tagcctgcga tggatagggg ttctgagagg
301 aaggtccccc acattggaac tgagacacgg tccaaactcc tacgggaggc agcagtgagg
361 aatattggtc aatgggcgag agcctgaacc agccaagtag cgtgaaggat gaaggtccta
421 cggattgtaa acttctttta tacgggaata aagtttccta cgtgtaggat tttgtatgta
481 ccgtatgaat aagcatcggc taactccgtg ccagcagccg cggtaatacg gaggatgcga
541 gcgttatccg gatttattgg gtttaaaggg agcgcagacg ggagattaag tcagttgtga
601 aagtttgcgg ctcaaccgta aaattgcagt tgatactggt ttccttgagt gcagttgagg
661 caggcggaat tcgtggtgta gcggtgaaat gcttagatat cacgaagaac cccgattgcg
721 aaggcagctt gctaaactgt aactgacgtt catgctcgaa agtgtgggta tcaaacagga
781 ttagataccc tggtagtcca cacggtaaac gatggatact cgctgttggc gatatactgt
841 cagcggccaa gcgaaagcat taagtatccc acctggggag tacgccggca acggtgaaac
901 tcaaaggaat tgacgggggc ccgcacaagc ggaggaacat gtggtttaat tcgatgatac
961 gcgaggaacc ttacccgggc ttaaattgca gacgaattac gaggaaactt gtaagccgca
1021 aggcgtctgt gaaggtgctg catggttgtc gtcagctcgt gccgtgaggt gtcggcttaa
1081 gtgccataac gagcgcaacc ctcgtggtca gttactaaca ggttaagctg agggctctgg
1141 ccagactgcc atcgtaagat gtgaggaagg tggggatgac gtcaaatcag cacggccctt
1201 acgtccgggg ctacacacgt gttacaatgg gaggtacaga aggccgctac ccggcaacgg
1261 gatgccaatc cccaaaacct ctctcagttc ggactggagt ctgcaacccg actccacgaa
1321 gctggattcg ctagtaatcg cgcatcagcc acggcgcggt gaatacgttc ccgggccttg
1381 tacacaccgc ccgtcaagcc atgaaagccg ggggtacctg aagtgcgtaa ccgcaaggag
1441 cgccctaggg taaaaccggt aattggggct aagtctaaca aggtaaccaa
配列番号3(バクテロイデス・コプロコーラの16S rRNAの遺伝子、部分配列:株M158−AB200225)
1 agagtttgat cctggctcag gatgaacgct agctacaggc ttaacacatg caagtcgagg
61 ggcagcatga acttagcttg ctaagtttga tggcgaccgg cgcacgggtg agtaacacgt
121 atccaacctt ccgtttactc agggatagcc tttcgaaaga aagattaata cctgatagta
181 tggtgagatt gcatgatagc accattaaag atttattggt aaacgatggg gatgcgttcc
241 attaggtagt aggcggggta acggcccacc tagcctncga tggatagggg ttctgagagg
301 aaggtccccc acattggaac tgagacacgg tccaaactcc tacgggaggc agcagtgagg
361 aatattggtc aatgggcgag agcctgaacc agccaagtag cgtgaaggat gaaggtccta
421 cggattgtaa acttctttta tacgggaata aagtatccta cgtgtaggat tttgtatgta
481 ccgtatgaat aagcatcggc taactccgtg ccagcagccg cggtaatacg gaggatgcga
541 gcgttatccg gatttattgg gtttaaaggg agcgcagacg ggagattaag tcagttgtga
601 aagtttgcgg ctcaaccgta aaattgcagt tgatactggt ttccttgagt gcagttgagg
661 caggcggaat tcgtggtgta gcggtgaaat gcttagatat cacgaagaac cccgattgcg
721 aaggcagctt gctaaactgt aactgacgtt catgctcgaa agtgtgggta tcaaacagga
781 ttagataccc tggtagtcca cacggtaaac gatggatact cgctgttggc gatatactgt
841 cagcggccaa gcgaaagcat taagtatccc acctggggag tacgccggca acggtgaaac
901 tcaaaggaat tgacgggggc ccgcacaagc ggaggaacat gtggtttaat tcgatgatac
961 gcgaggaacc ttacccgggc ttaaattgca gacgaattac gaggaaactt gtaagccgca
1021 aggcgtctgt gaaggtgctg catggttgtc gtcagctcgt gccgtgaggt gtcggcttaa
1081 gtgccataac gagcgcaacc ctcgtggtca gttactaaca ggttaagctg aggactctgg
1141 ccagactgcc atcgtaagat gtgaggaagg tggggatgac gtcaaatcag cacggccctt
1201 acgtccgggg ctacacacgt gttacaatgg gaggtacaga aggcagctac ccggcgacgg
1261 gatgccaatc cccaaaacct ctctcagttc ggactggagt ctgcaacccg actccacgaa
1321 gctggattcg ctagtaatcg cgcatcagcc acggcgcggt gaatacgttc ccgggccttg
1381 tacacaccgc ccgtcaagcc atgaaagccg ggggtacctg aagtgcgtaa ccgcaaggag
1441 cgccctaggg taaaaccggt aattggggct aagtcgtaac aaggtaacca a
配列番号4(バクテロイデス・コプロコーラ株675のコンセンサス16S rRNA配列
GTCTGGCTCAKGATGAACGCTAGCTACAGGCTTAACACATGCAAGTCGAGGGGCAGCATGAACTTAGCTTGCTAAGTTTGATGGCGACCGGCGCACGGGTGAGTAACACGTATCCAACCTCCCGCTTACTCAGGAATAGCCTTTCGAAAGAAAGATTAATGCCTGATGGTATCTTAAGCACACATGTAATTAAGATTAAAGATTTATCGGTAAGCGATGGGGATGCGTTCCATTAGGTAGTAGGCGGGGTAACGGCCCACCTAGCCGACGATGGATAGGGGTTCTGAGAGGAAGGTCCCCCACATTGGAACTGAGACACGGTCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGAGGAATATTGGTCAATGGGCGCGAGCCTGAACCAGCCAAGTAGCGTGAAGGATGAAGGTCCTATGGATTGTAAACTTCTTTTATACGGGAATAAAGTGGTCCACGTGTGGGCCTTTGCATGTACCGTATGAATAAGCATCGGCTAACTCCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGGAGGATGCGAGCGTTATCCGGATTTATTGGGTTTAAAGGGAGCGCAGACGGGGGATTAAGTCAGTTGTGAAAGTTTGCGGCTCAACCGTAAAATTGCAGTTGATACTGGTTCCCTTGAGTGCAGTTGAGGCAGGCGGAATTCGTGGTGTAGCGGTGAAATGCATAGATATCACGAAGAACCCCGATTGCGAAGGCAGCCTGCTAAGCTGTAACTGACGTTGAGGCTCGAAAGTGTGGGTATCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACACGGTAAACGATGGATACTCGCTGTTGGCGATATACTGTCAGCGGCCAAGCGAAAGCATTAAGTATCCCACCTGGGGAGTACGCCGGCAACGGTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGAGGAACATGTGGTTTAATTCGATGATACGCGAGGAACCTTACCCGGGCTTAAATTGCAGACGAATTACTTGGAAACAGGTAAGCCGCAAGGCGTCTGTGAAGGTGCTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGCCGTGAGGTGTCGGCTTAAGTGCCATAACGAGCGCAACCCTCGTGGCCAGTTACTAGCAGGTAACGCTGAGGACTCTGGCCAGACTGCCATCGTAAGATGCGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCAGCACGGCCCTTACGTCCGGGGCTACACACGTGTTACAATGGGAGGTACAGAAGGCAGCTACCCGGCGACGGGATGCCAATCTCCAAAGCCTCTCTCAGTTCGGACTGGAGTCTGCAACCCGACTCCACGAAGCTGGATTCGCTAGTAATCGCGCATCAGCCACGGCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCAAGCCATGAAAGCCGGGAGTACCTGAAGTGCGTAACCGCAAGGAGCGCCCTAGGGTAAAACCGGTAATTGGGGCTAAGTCNTACGGGG
配列番号5(バクテロイデス・シータイオタオミクロンの16S rRNAの遺伝子、部分配列−M58763)
1 cttntacaat gaagagtttg atcctggctc aggatnaacg ctagctacag gcttaacaca
61 tgcaagtcna ggggcagcat ttcagtttgc ttgcaaactg gagatggcga ccggcgcacg
121 ggtgagtaac acgtatccaa cctgccgata actcggggat agcctttcga aagaaagatt
181 aatacccnat ggtataatca gaccgcatng tcttrttatt aaagaatttc ggttatcgat
241 ggggatgcgt tccattaggc agttggtgag gtaacggctc acnnaacctt cgatggatag
301 gggttctgag aggaaggtcc cccacattgg aactgagaca cggtccaaac tcctacggga
361 ggcagcagtg aggaatattg gtcaatgggc gcaggcctga accagccaag tagcgtgaag
421 gatgactgcc ctatgggttg taaacttctt ttatatggga ataaagtttt ccacgtgtgg
481 aattttgtat gtaccatatg aataaggatc ggctaactcc gtgccagcag ccncgntnat
541 acggagnatc cgagcgttat ccggatttat tgggtttaaa gggagcgtag gtggacagtt
601 aagtcagttg tgaaagtttg cggctcaacc gtaaaattgc agttgatact ggctgtcttg
661 agtacagtag aggtgggcgg aattcgtggt gtagcggtga aatgcttaga tatcacgaag
721 aactccgatt gcgaaggcag ctcactggac tgcaactgac actgatgctc gaaagtgtgg
781 gtatcaaaca ggattagata ccctggtagt ccacacagta aacgatgaat actcgctgtt
841 tgcgatatac agtaagcggc caagcgaaag cattaagtat tccacctggg gagtacgccg
901 gcaacggtga aactcaaagg aattgacggg ggccngcaca agcggaggaa catgtggttt
961 aattcgatga tacgcgagga accttacccg ggcttaaatt gcatttgaat atattggaaa
1021 cagtatagcc gyaaggcaaa tgtgaaggtg ctgcatggtt gtcgtcagct cgtgccgtga
1081 ggtgtcggct taagtgccat aacgagcgca acccttatct ttagttacta acaggtcatg
1141 ctgaggactc tagagagact gccgtcgtaa gatgtgagga aggtggggat gacgtcaaat
1201 cagcacngcc cntacgtccg gggctacaca cgtgttacaa tggggggtac agaaggcagc
1261 tacctggtga caggatgcta atcccaaaag cctctctcag ttcggatcga agtctgcaac
1321 ccgacttcgt gaagctggat tcgctagtaa tcgcgcatca gccatggcgc ggtgaatacg
1381 ttcccgggcn ttgtacacac cgcccgtcaa gccatgaaag ccgggggtac ctgaagtacg
1441 taaccgcaag gagcgtccta gggtaaaact ggtaattggg gc
配列番号6(株675染色体配列)−電子版の配列表を参照されたい。
配列番号7(株675プラスミド配列)−電子版の配列表を参照されたい。
(参考文献)
[1] Spor et al. (2011) Nat Rev Microbiol. 9(4):279-90
[2] Eckburg et al. (2005) Science. 10;308(5728):1635-8
[3] Macpherson et al. (2001) Microbes Infect. 3(12):1021-35
[4] Macpherson et al. (2002) Cell Mol Life Sci. 59(12):2088-96
[5] Mazmanian et al. (2005) Cell 15;122(1):107-18
[6] Frank et al. (2007) PNAS 104(34):13780-5
[7] Scanlan et al. (2006) J Clin Microbiol. 44(11):3980-8
[8] Kang et al. (2010) Inflamm Bowel Dis. 16(12):2034-42
[9] Machiels et al. (2013) Gut. 63(8):1275-83
[10] WO 2013/050792
[11] WO 03/046580
[12] WO 2013/008039
[13] WO 2014/167338
[14] Goldin and Gorbach (2008) Clin Infect Dis. 46 Suppl 2:S96-100
[15] Azad et al. (2013) BMJ. 347:f6471
[16] Kitahara et al. (2005) Int J Syst Evol Microbiol. 55(Pt 5):2143-7
[17] Masco et al. (2003) Systematic and Applied Microbiology, 26:557-563
[18] Srutkova et al. (2011) J. Microbiol. Methods, 87(1):10-6
[19] Ye et al. (2015) PLoS One. 10(1):e0117704
[20] Fabro et al. (2015) Immunobiology. 220(1):124-35
[21] Yin et al. (2014) Immunogenetics. 66(3):215-8
[22] Cheluvappa et al. (2014) Clin Exp Immunol. 175(2):316-22
[23] Schieck et al. (2014) J Allergy Clin Immunol. 133(3):888-91
[24] Balato et al. (2014) J Eur Acad Dermatol Venereol. 28(8):1016-24
[25] Monteleone et al. (2011) BMC Medicine. 2011, 9:122
[26] Fahy (2009) Proc Am Thorac Soc 6.256-259
[27] Miossec and Kolls (2012) Nat Rev Drug Discov. 11(10):763-76
[28] Yang et al. (2014) Trends Pharmacol Sci. 35(10):493-500
[29] Koenders et al. (2006) J. Immunol. 176:6262-6269
[30] Amedei et al. (2012) Int J Mol Sci. 13(10):13438-60
[31] Shabgah et al. (2014) Postepy. Dermatol. Alergol. 31(4):256-61
[32] Numasaki et al. (2003) Blood. 101:2620-2627
[33] Zhang et al. (2008) Biochem. Biophys. Res. Commun. 374: 533-537
[34] Karin (2006) Nature. 441: 431-436
[35] Faghih et al. (2013). Iranian Journal of Immunology. 10(4):193-204
[36] Numasaki et al. (2005) J. Immunol. 175: 6177-6189
[37] Hammerich and Tacke (2014) Clin Exp Gastroenterol. 7:297-306
[38] Zhang (2015) Inflammation. Aug 23
[39] Sun et al. (2015) Cytokine. 74(1):76-80
[40] Mucientes et al. (2015) Br J Ophthalmol. 99(4):566-70
[41] Jawad et al. (2013) Ocul Immunol Inflamm. 21(6):434-9
[42] Maya et al. (2014) J. Ophthalmology. 310329
[43] Chi et al. (2007) J. Allergy and Clinical Immunology. 119(5):1218-1224
[44] Chi et al. (2008) Investigative Ophthalmology &Visual Science. 49(7): 3058-3064
[45] Luger and Caspi (2008) Semin. Immunopathol. 30(2): 134-143
[46] Miyamoto-Shinohara et al. (2008) J. Gen. Appl. Microbiol., 54, 9-24
[47] Cryopreservation and Freeze-Drying Protocols, ed. by Day and McLellan, Humana Press
[48] Leslie et al. (1995) Appl. Environ. Microbiol. 61, 3592-3597
[49] Mitropoulou et al. (2013) J Nutr Metab. (2013) 716861
[50] Kailasapathy et al. (2002) Curr Issues Intest Microbiol. 3(2):39-48
[51] Handbook of Pharmaceutical Excipients, 2nd Edition, (1994), Edited by A Wade and PJ Weller
[52] Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A. R. Gennaro edit. 1985)
[53] Handbook of Microbiological Media, Fourth Edition (2010) Ronald Atlas, CRC Press
[54] Maintaining Cultures for Biotechnology and Industry (1996) Jennie C. Hunter-Cevera, Academic Press
[55] Strobel (2009) Methods Mol Biol. 581:247-61
[56] “Creating Bacterial Glycerol Stocks for Long-term Storage of Plasmids” Addgene - https://www.addgene.org/plasmid-protocols/create-glycerol-stock/
[57] Gennaro (2000) Remington: The Science and Practice of Pharmacy. 20th edition, ISBN: 0683306472
[58] Molecular Biology Techniques: An Intensive Laboratory Course, (Ream et al., eds., 1998, Academic Press)
[59] Methods In Enzymology (S. Colowick and N. Kaplan, eds., Academic Press, Inc.)
[60] Handbook of Experimental Immunology, Vols. I IV (D.M. Weir and C.C. Blackwell, eds, 1986, Blackwell Scientific Publications)
[61] Sambrook et al. (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd edition (Cold Spring Harbor Laboratory Press)
[62] Handbook of Surface and Colloidal Chemistry (Birdi, K.S. ed., CRC Press, 1997)
[63] Ausubel et al. (eds) (2002) Short protocols in molecular biology, 5th edition (Current Protocols)
[64] PCR (Introduction to Biotechniques Series), 2nd ed. (Newton & Graham eds., 1997, Springer Verlag)
[65] Current Protocols in Molecular Biology (F.M. Ausubel et al., eds., 1987) Supplement 30
[66] Smith & Waterman (1981) Adv. Appl. Math. 2: 482-489
[67] Brand et al. (2007) Nature Protocols. 2(5):1269-1275
[68] Jiao et al. (2014) Immunopathology and Infectious Diseases. 184(4):1085-93

Claims (29)

  1. IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患又は状態を治療又は予防する方法に使用するための、配列番号4と少なくとも95%同一である16s rRNA配列を有し、IL−17又はTh17炎症応答を低減する効果を有するバクテロイデス属の細菌株を含む組成物。
  2. 喘息;関節炎;多発性硬化症;視神経脊髄炎(デビック病);強直性脊椎炎;脊椎関節炎;乾癬;全身性紅斑性狼瘡;炎症性腸疾患;セリアック病;慢性閉塞性肺疾患(COPD);がん;ブドウ膜炎;強膜炎;血管炎;ベーチェット病;アテローム性動脈硬化症;アトピー性皮膚炎;肺気腫;歯周炎;アレルギー性鼻炎;及び同種異系移植片拒絶からなる群から選択される疾患又は状態を治療又は予防する方法に使用するための、請求項1に記載の組成物。
  3. 喘息が、アレルギー性喘息又は好中球性喘息であり、
    関節炎が、関節リウマチ、変形性関節症、乾癬性関節炎、又は若年性特発性関節炎であり、
    炎症性腸疾患が、クローン病又は潰瘍性大腸炎であり、
    がんが、乳がん、結腸がん、肺がん、又は卵巣がんである、請求項2に記載の組成物。
  4. 喘息を治療又は予防する方法に使用するための、請求項2又は3に記載の組成物。
  5. 喘息の治療において、好中球増加又は好酸球増加を低減させる方法に使用するための、請求項4に記載の組成物。
  6. 関節リウマチを治療又は予防する方法に使用するための、請求項2に記載の組成物。
  7. 関節リウマチにおける関節の腫脹を低減させる方法に使用するための、請求項6に記載の組成物。
  8. 多発性硬化症を治療又は予防する方法に使用するための、請求項2に記載の組成物。
  9. 疾患の発生率又は疾患の重症度を低減させる方法に使用するための、請求項8に記載の組成物。
  10. がんを治療又は予防する方法に使用するための、請求項2又は3に記載の組成物。
  11. がんが、肺がん、乳がん又は肝臓がんである、請求項10に記載の組成物。
  12. 腫瘍のサイズを低減させる、腫瘍の増殖を低減させる、転移を予防する、又は血管新生を予防する方法に使用するための、請求項10又は11に記載の組成物。
  13. ブドウ膜炎を治療又は予防する方法に使用するための、請求項2に記載の組成物。
  14. ブドウ膜炎における網膜損傷を低減又は予防する方法に使用するための、請求項13に記載の組成物。
  15. IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患又は状態の治療又は予防において、IL−17の産生を低減させる又はTh17細胞の分化を低減させる方法に使用するための、請求項1〜14のいずれかに記載の組成物。
  16. IL−17レベル又はTh17細胞が上昇している患者に使用するための、請求項1〜15のいずれかに記載の組成物。
  17. 細菌株が、バクテロイデス・コプロコーラの細菌株である、請求項1〜16のいずれかに記載の組成物。
  18. 細菌株が、配列番号4と少なくとも96%、97%、98%、99%、99.5%又は99.9%同一である16s rRNA配列を有するか、又は細菌株が、配列番号4によって表される16s rRNA配列を有する、請求項1〜17のいずれかに記載の組成物。
  19. 経口投与用である、請求項1〜18のいずれかに記載の組成物。
  20. 1又は2以上の薬学的に許容される賦形剤又は担体を含む、請求項1〜19のいずれかに記載の組成物。
  21. 細菌株が凍結乾燥されている、請求項1〜20のいずれかに記載の組成物。
  22. 食品である、請求項1〜21のいずれかに記載の組成物。
  23. ワクチン組成物である、請求項1〜21のいずれかに記載の組成物。
  24. 配列番号4と少なくとも95%同一である16s rRNA配列を有し、IL−17又はTh17炎症応答を低減する効果を有するバクテロイデス属の細菌株を含む組成物を含む、IL−17又はTh17経路によって媒介される疾患又は状態の治療又は予防剤。
  25. 受託番号NCIMB 42408として寄託された株又はその派生物の細胞。
  26. 請求項25に記載の細胞を含む組成物。
  27. 薬学的に許容される担体又は賦形剤を含む、請求項26に記載の組成物。
  28. 受託番号NCIMB 42408として寄託された株又はその派生物の生物学的に純粋な培養物。
  29. 受託番号NCIMB 42408として寄託された株又はその派生物の細胞を含む、治療に使用するための組成物。
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WO (1) WO2016203217A1 (ja)
ZA (1) ZA201707854B (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2018203742A (ja) * 2015-06-15 2018-12-27 フォーディー ファーマ リサーチ リミテッド4D Pharma Research Limited 細菌株を含む組成物

Families Citing this family (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB201112091D0 (en) 2011-07-14 2011-08-31 Gt Biolog Ltd Bacterial strains isolated from pigs
GB201117313D0 (en) 2011-10-07 2011-11-16 Gt Biolog Ltd Bacterium for use in medicine
GB201306536D0 (en) 2013-04-10 2013-05-22 Gt Biolog Ltd Polypeptide and immune modulation
NO3065748T3 (ja) 2014-12-23 2018-04-21
SI3193901T1 (en) 2014-12-23 2018-06-29 4D Pharma Research Limited Pirin polypeptide and immune modulation
MA41060B1 (fr) 2015-06-15 2019-11-29 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes
ME03563B (me) 2015-06-15 2020-07-20 4D Pharma Res Ltd Kompozicije koje sadrže bakterijske sojeve
SG10201912324XA (en) 2015-06-15 2020-02-27 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
HUE044617T2 (hu) 2015-06-15 2019-11-28 4D Pharma Res Ltd Baktériumtörzseket tartalmazó készítmények
MD3209310T2 (ro) 2015-11-20 2018-06-30 4D Pharma Res Ltd Compoziții care conțin tulpini bacteriene
GB201520497D0 (en) 2015-11-20 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
GB201520638D0 (en) 2015-11-23 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
GB201520631D0 (en) 2015-11-23 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
GB201612191D0 (en) 2016-07-13 2016-08-24 4D Pharma Plc Compositions comprising bacterial strains
CN114712405A (zh) 2016-03-04 2022-07-08 4D制药有限公司 包含细菌菌株的组合物
US11786562B2 (en) * 2016-04-19 2023-10-17 Genome Research Limited Bacteriotherapy
US9999641B2 (en) 2016-06-14 2018-06-19 Vedanta Biosciences, Inc. Treatment of clostridium difficile infection
TWI802545B (zh) 2016-07-13 2023-05-21 英商4D製藥有限公司 包含細菌菌株之組合物
GB201621123D0 (en) 2016-12-12 2017-01-25 4D Pharma Plc Compositions comprising bacterial strains
WO2018112194A1 (en) 2016-12-15 2018-06-21 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Compositions and methods for modulating growth of a genetically modified gut bacterial cell
WO2018187272A1 (en) 2017-04-03 2018-10-11 Gusto Global, Llc Rational design of microbial-based biotherapeutics
EP3630137B1 (en) 2017-05-22 2023-05-17 4D Pharma Research Limited Compositions comprising bacterial strains
MA41708A (fr) 2017-05-24 2020-04-08 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes
PL3600364T3 (pl) 2017-06-14 2021-01-11 4D Pharma Research Limited Kompozycje zawierające szczep bakteryjny z rodzaju megasphaera i ich zastosowania
SI3638271T1 (sl) 2017-06-14 2021-01-29 4D Pharma Research Limited Sestavki, ki vsebujejo bakterijske seve
EP3476396A1 (en) * 2017-10-31 2019-05-01 Institut Gustave Roussy Bacterial and cell compositions for the treatment of colorectal cancer and methods for assessing a prognosis for patients having the same
WO2019115759A1 (en) * 2017-12-14 2019-06-20 Københavns Universitet Bacterial compositions and the use thereof for the treatment or prevention of asthma or other wheezing disorders or allergy in a child
CA3103064A1 (en) * 2018-06-19 2019-12-26 4D Pharma Research Ltd Dosage form comprising a live biotherapeutic product
MX2021004150A (es) * 2018-10-09 2021-06-08 4D Pharma Res Limited Composiciones que comprenden cepas bacterianas.
US20220401542A1 (en) * 2019-11-05 2022-12-22 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Mycobacterial compositions and biomarkers for use in treatment and monitoring of therapeutic responsiveness
EP3839039A1 (en) 2019-12-16 2021-06-23 4D Pharma Research Limited Providing bacterial biomass with improved storage stability
EP4077633A1 (en) 2019-12-20 2022-10-26 4D Pharma León, S.L.U. Lyophilisation process
US20230181582A1 (en) 2020-05-22 2023-06-15 Qx Therapeutics Inc. Compositions and methods for treating lung injuries associated with viral infections
JPWO2022191182A1 (ja) * 2021-03-08 2022-09-15

Family Cites Families (360)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL154598B (nl) 1970-11-10 1977-09-15 Organon Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van laagmoleculire verbindingen en van eiwitten die deze verbindingen specifiek kunnen binden, alsmede testverpakking.
US3817837A (en) 1971-05-14 1974-06-18 Syva Corp Enzyme amplification assay
US3939350A (en) 1974-04-29 1976-02-17 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Fluorescent immunoassay employing total reflection for activation
US3996345A (en) 1974-08-12 1976-12-07 Syva Company Fluorescence quenching with immunological pairs in immunoassays
US4275149A (en) 1978-11-24 1981-06-23 Syva Company Macromolecular environment control in specific receptor assays
US4277437A (en) 1978-04-05 1981-07-07 Syva Company Kit for carrying out chemically induced fluorescence immunoassay
US4366241A (en) 1980-08-07 1982-12-28 Syva Company Concentrating zone method in heterogeneous immunoassays
NL8300698A (nl) 1983-02-24 1984-09-17 Univ Leiden Werkwijze voor het inbouwen van vreemd dna in het genoom van tweezaadlobbige planten; agrobacterium tumefaciens bacterien en werkwijze voor het produceren daarvan; planten en plantecellen met gewijzigde genetische eigenschappen; werkwijze voor het bereiden van chemische en/of farmaceutische produkten.
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
DK122686D0 (da) 1986-03-17 1986-03-17 Novo Industri As Fremstilling af proteiner
FR2613624B1 (fr) 1987-04-10 1990-11-23 Roussy Inst Gustave Composition pharmaceutique, administrable par voie orale, destinee a reduire les effets des b-lactamines
US5443826A (en) 1988-08-02 1995-08-22 Borody; Thomas J. Treatment of gastro-intestinal disorders with a fecal composition or a composition of bacteroides and E. Coli
ATE165738T1 (de) 1988-08-02 1998-05-15 Gastro Services Pty Ltd Behandlung von gastro-intestinalen krankheiten
KR100225087B1 (ko) 1990-03-23 1999-10-15 한스 발터라벤 피타아제의 식물내 발현
DE69107455T3 (de) 1990-05-09 2004-09-23 Novozymes A/S Eine ein endoglucanase enzym enthaltende zellulasezubereitung.
GB9107305D0 (en) 1991-04-08 1991-05-22 Unilever Plc Probiotic
DE69316801T2 (de) 1992-07-20 1998-05-20 Yakult Honsha Kk Spezies-Spezifische Oligonukleotide gegen Bifidobakterien und Verfahren zum Nachweis unter Verwendung derselben
WO1994013820A1 (en) 1992-12-10 1994-06-23 Gist-Brocades N.V. Production of heterologous proteins in filamentous fungi
US5741665A (en) 1994-05-10 1998-04-21 University Of Hawaii Light-regulated promoters for production of heterologous proteins in filamentous fungi
US5599795A (en) 1994-08-19 1997-02-04 Mccann; Michael Method for treatment of idiopathic inflammatory bowel disease (IIBD)
AUPM823094A0 (en) 1994-09-16 1994-10-13 Goodman Fielder Limited Probiotic compositions
AUPM864894A0 (en) 1994-10-07 1994-11-03 Borody, Thomas Julius Treatment of bowel-dependent neurological disorders
RU2078815C1 (ru) 1995-01-17 1997-05-10 Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им.Г.Н.Габричевского Штамм бактерий bifidobacterium breve, используемый для получения бактерийных лечебно-профилактических бифидосодержащих препаратов
JPH08259450A (ja) 1995-03-17 1996-10-08 Nichinichi Seiyaku Kk インターフェロン産生増強剤
US6861053B1 (en) 1999-08-11 2005-03-01 Cedars-Sinai Medical Center Methods of diagnosing or treating irritable bowel syndrome and other disorders caused by small intestinal bacterial overgrowth
AUPN698495A0 (en) 1995-12-06 1996-01-04 Pharma Pacific Pty Ltd Improved therapeutic formulation and method
SE508045C2 (sv) 1996-02-26 1998-08-17 Arla Ekonomisk Foerening Adhesionsinhibitorer, preparat innehållande desamma och förfarande för framställning därav
KR20000064729A (ko) 1996-03-20 2000-11-06 번스 필프 앤드 컴파니 리미티드 위장관에서의미생물개체군의변경
AUPN881396A0 (en) 1996-03-20 1996-04-18 Arnott's Biscuits Limited Enhancement of microbial colonization of the gastrointestinal tract
WO1997035956A1 (en) 1996-03-27 1997-10-02 Novo Nordisk A/S Alkaline protease deficient filamentous fungi
US6033864A (en) 1996-04-12 2000-03-07 The Regents Of The University Of California Diagnosis, prevention and treatment of ulcerative colitis, and clinical subtypes thereof, using microbial UC pANCA antigens
WO1998043081A1 (en) 1997-03-26 1998-10-01 Ligand Pharmaceuticals Incorporated Treatment of gastrointestinal disease with ppar modulators
SE511524C2 (sv) 1997-06-02 1999-10-11 Essum Ab Lactobacillus casei rhamnosus-stam samt farmaceutisk beredning för bekämpning av patogena tarmbakterier
US5925657A (en) 1997-06-18 1999-07-20 The General Hospital Corporation Use of PPARγ agonists for inhibition of inflammatory cytokine production
AUPO758297A0 (en) 1997-06-27 1997-07-24 Rowe, James Baber Control of acidic gut syndrome
US5951977A (en) 1997-10-14 1999-09-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Competitive exclusion culture for swine
IT1298918B1 (it) 1998-02-20 2000-02-07 Mendes Srl Uso di batteri dotati di arginina deiminasi per indurre apoptosi e/o ridurre una reazione infiammatoria e composizioni farmaceutiche
DE19826928A1 (de) 1998-06-17 1999-12-23 Novartis Consumer Health Gmbh Arzneimittel, lebensfähige anaerobe Bakterien enthaltend, die die Sulfatreduktion sulfatreduzierender Bakterien hemmen
ID29150A (id) 1999-01-15 2001-08-02 Entpr Ireland Cs Penggunaan lactobacillus salivarius
US7090973B1 (en) 1999-04-09 2006-08-15 Oscient Pharmaceuticals Corporation Nucleic acid sequences relating to Bacteroides fragilis for diagnostics and therapeutics
WO2001016120A1 (en) 1999-08-27 2001-03-08 Eli Lilly And Company Biaryl-oxa(thia)zole derivatives and their use as ppars modulators
KR20020083157A (ko) 2000-02-08 2002-11-01 에프. 호프만-라 로슈 아게 동물 사료에서 산-안정성 프로테아제의 사용
FR2808689B1 (fr) 2000-05-11 2004-09-03 Agronomique Inst Nat Rech Utilisation de souches acetogenes hydrogenotrophes pour la prevention ou le traitement de troubles digestifs
US20020013270A1 (en) 2000-06-05 2002-01-31 Bolte Ellen R. Method for treating a mental disorder
AUPQ899700A0 (en) 2000-07-25 2000-08-17 Borody, Thomas Julius Probiotic recolonisation therapy
AU2002226984A1 (en) 2000-11-27 2002-06-03 Astrazeneca Ab Method for studying the effects of commensal microflora on mammalian intestine and treatments of gastrointestinal-associated disease based thereon
DE10101793A1 (de) 2001-01-17 2002-08-01 Manfred Nilius Verwendung von SLPI zur Behandlung chronisch-entzündlicher Darmerkrankungen
EP1227152A1 (en) 2001-01-30 2002-07-31 Société des Produits Nestlé S.A. Bacterial strain and genome of bifidobacterium
KR100437497B1 (ko) 2001-03-07 2004-06-25 주식회사 프로바이오닉 로타바이러스 및 유해 미생물 억제 활성을 가지는 신규내산성 락토바실러스 루테리 프로바이오-16 및 이를함유하는 생균활성제
EP1243273A1 (en) 2001-03-22 2002-09-25 Societe Des Produits Nestle S.A. Composition comprising a prebiotic for decreasing infammatory process and abnormal activation of non-specific immune parameters
WO2002085933A1 (en) 2001-04-20 2002-10-31 The Institute For Systems Biology Toll-like receptor 5 ligands and methods of use
EP1260227A1 (en) 2001-05-23 2002-11-27 Societe Des Produits Nestle S.A. Lipoteichoic acid from lactic acid bacteria and its use to modulate immune responses mediated by gram-negative bacteria, potential pathogenic gram-positive bacteria
PE20030284A1 (es) 2001-07-26 2003-05-01 Alimentary Health Ltd Cepas de bifidobacterium
AU2002341384A1 (en) 2001-09-05 2003-03-24 Actial Farmaceutica, Lda. Lactic acid bacteria comprising unmethylated cytosine-guanine dinucleotides for use in therapy
GB0127916D0 (en) * 2001-11-21 2002-01-16 Rowett Res Inst Method
AU2002346504A1 (en) 2001-11-27 2003-06-10 Astrazeneca Ab Therapeutic protein and treatments
AU2002365279B2 (en) 2001-12-17 2009-08-13 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of inflammatory bowel disease
US7101565B2 (en) 2002-02-05 2006-09-05 Corpak Medsystems, Inc. Probiotic/prebiotic composition and delivery method
DE10206995B4 (de) 2002-02-19 2014-01-02 Orthomol Pharmazeutische Vertriebs Gmbh Mikronährstoffkombinationsprodukt mit Pro- und Prebiotika
JP2003261453A (ja) 2002-03-11 2003-09-16 Nippon Berumu Kk E.フェカリスからなる抗腫瘍剤及び放射線防護剤
DE60322570D1 (de) 2002-06-28 2008-09-11 Puleva Biotech Sa Probiotische stämme, verfahren zur ihren selektion, diese enthaltende zusammensetzungen und ihre verwendung
US20040005304A1 (en) 2002-07-08 2004-01-08 Mak Wood, Inc. Novel compositions and methods for treating neurological disorders and associated gastrointestinal conditions
GB0307026D0 (en) 2003-03-27 2003-04-30 Rowett Res Inst Bacterial supplement
EP1481681A1 (en) 2003-05-30 2004-12-01 Claudio De Simone Lactic acid bacteria combination and compositions thereof
GB0316915D0 (en) 2003-07-18 2003-08-20 Glaxo Group Ltd Compounds
AU2003247193A1 (en) 2003-07-23 2005-02-04 M.D.Lab Corp. Acid tolerant probiotic lactobacillus plantarum probio-38 that can suppress the growth of pathogenic microorganism and tge coronavirus
US7485325B2 (en) 2003-08-06 2009-02-03 Gayle Dorothy Swain Animal food supplement compositions and methods of use
JP4683881B2 (ja) 2003-08-27 2011-05-18 有限会社アーク技研 抗腫瘍活性剤
US8192733B2 (en) 2003-08-29 2012-06-05 Cobb & Associates Probiotic composition useful for dietary augmentation and/or combating disease states and adverse physiological conditions
US20050163764A1 (en) 2003-09-22 2005-07-28 Yale University Treatment with agonists of toll-like receptors
GB0323039D0 (en) 2003-10-01 2003-11-05 Danisco Method
EP2033529B1 (en) 2003-10-24 2019-12-11 N.V. Nutricia Synbiotic composition for infants
US20050239706A1 (en) 2003-10-31 2005-10-27 Washington University In St. Louis Modulation of fiaf and the gastrointestinal microbiota as a means to control energy storage in a subject
RU2407784C2 (ru) 2003-12-17 2010-12-27 Н.В. Нютрисиа Пробиотический штамм lactobacillus casei, продуцирующий молочную кислоту, применение штамма для приготовления питательной композиции для лечения или профилактики легочной дисфункции, питательная композиция и способ ее получения, лекарственное средство для лечения или профилактики хронической обструктивной болезни легких у субъекта и применение штамма для приготовления лекарственного средства, контейнер
ES2235642B2 (es) 2003-12-18 2006-03-01 Gat Formulation Gmbh Proceso de multi-microencapsulacion continuo para la mejora de la estabilidad y almacenamiento de ingredientes biologicamente activos.
WO2005093049A1 (en) 2004-03-22 2005-10-06 Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Cellular and viral inactivation
WO2005107381A2 (en) 2004-05-07 2005-11-17 Hans-Gustaf Ljunggren Use of flagellin as an adjuvant for vaccine
PE20060426A1 (es) 2004-06-02 2006-06-28 Schering Corp DERIVADOS DE ACIDO TARTARICO COMO INHIBIDORES DE MMPs, ADAMs, TACE Y TNF-alfa
US7638513B2 (en) 2004-06-02 2009-12-29 Schering Corporation Compounds for the treatment of inflammatory disorders
EP1765391B1 (en) 2004-06-07 2013-03-06 Qu Biologics Inc Bacterial compositions for the treatment of cancer
PT1629850E (pt) 2004-08-24 2007-08-14 Nutricia Nv Composição nutricional que compreende a administração de oligossacarídeos indigeríveis
US20060062773A1 (en) 2004-09-21 2006-03-23 The Procter & Gamble Company Compositions for maintaining and restoring normal gastrointestinal flora
KR100468522B1 (ko) 2004-10-12 2005-01-31 주식회사 프로바이오닉 코로나바이러스와 돼지 써코바이러스 2형의 생육을 억제하는 신규한 내산성 프로바이오틱 엔테로코커스훼시움 프로바이오-63
US20060115465A1 (en) 2004-10-29 2006-06-01 Macfarlane George Treatment of gastrointestinal disorders
ITMI20042189A1 (it) 2004-11-16 2005-02-16 Anidral Srl Composizione a base di batteri probiotici e suo uso nella prevenzione e-o nel trattamento di patologie e-o infezioni respiratorie e nel miglioramento della funzionalita' intestinale
PL2805625T5 (pl) 2005-02-28 2023-03-13 N.V. Nutricia Kompozycja odżywcza z prebiotykami i probiotykami
WO2006102536A2 (en) 2005-03-23 2006-09-28 University Of Southern California Treatment of disease conditions through modulation of hydrogen sulfide produced by small intestinal bacterial overgrowth
US20100048595A1 (en) 2005-03-23 2010-02-25 Washington University In St. Louis Use of archaea to modulate the nutrient harvesting functions of the gastrointestinal microbiota
JP2006265212A (ja) 2005-03-25 2006-10-05 Institute Of Physical & Chemical Research Il−21産生誘導剤
US20100233312A9 (en) 2005-04-11 2010-09-16 The Procter & Gamble Company Compositions comprising probiotic and sweetener components
EP1714660A1 (en) 2005-04-21 2006-10-25 N.V. Nutricia Uronic acid and probiotics
JP2008538913A (ja) 2005-04-26 2008-11-13 ティーガスク− ザ アグリカルチャー アンド フード ディベロップメント オーソリティー 動物用に適しているプロバイオティクス組成物
CN109485727A (zh) 2005-05-09 2019-03-19 小野药品工业株式会社 程序性死亡-1(pd-1)的人单克隆抗体及使用抗pd-1抗体来治疗癌症的方法
US7572474B2 (en) 2005-06-01 2009-08-11 Mead Johnson Nutrition Company Method for simulating the functional attributes of human milk oligosaccharides in formula-fed infants
US8075934B2 (en) 2008-10-24 2011-12-13 Mead Johnson Nutrition Company Nutritional composition with improved digestibility
JP2007084533A (ja) 2005-08-24 2007-04-05 Prima Meat Packers Ltd 免疫応答調節組成物及び該組成物を有効成分とする食品
US7625704B2 (en) 2005-08-31 2009-12-01 Fred Hutchinson Cancer Research Center Methods and compositions for identifying bacteria associated with bacteria vaginosis
PT1933869E (pt) 2005-09-01 2009-12-24 Schering Corp Utilização de antagonistas de il-23 e il-para tratar a doença inflamatória ocular auto-imune
US20090028840A1 (en) 2005-09-23 2009-01-29 Gwangju Institute Of Sciecne And Technology Compositions For Preventing Or Treating Arthritis Comprising Lactic Acid Bacteria and Collangen As Active Ingredients
EP1776877A1 (en) 2005-10-21 2007-04-25 N.V. Nutricia Method for stimulating the intestinal flora
WO2007050656A2 (en) 2005-10-24 2007-05-03 Nestec S.A. Dietary fiber formulation and method of administration
JP2007116991A (ja) 2005-10-28 2007-05-17 Eternal Light General Institute Inc 機能性食品
US7767420B2 (en) 2005-11-03 2010-08-03 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Heparan sulfate glycosaminoglycan lyase and uses thereof
EP1957449A1 (en) 2005-12-01 2008-08-20 Schering Corporation Compounds for the treatment of inflammatory disorders and microbial diseases
US8889149B2 (en) 2006-02-16 2014-11-18 Wayne State University Use of flagellin to prevent and treat gram negative bacterial infection
US20080260898A1 (en) 2006-03-17 2008-10-23 Marko Stojanovic Compositions comprising probiotic and sweetener components
JP5031249B2 (ja) 2006-03-22 2012-09-19 学校法人北里研究所 炎症抑制作用のある菌体含有組成物
US20090252708A1 (en) 2006-05-18 2009-10-08 Biobalance Llc Biotherapeutic compositions comprising probiotic escherichia coli and uses thereof
EP2021011A2 (en) 2006-05-26 2009-02-11 Nestec S.A. Methods of use and nutritional compositions of touchi extract
WO2007140613A1 (en) 2006-06-06 2007-12-13 Mcgill University Fermented milk product and use thereof
WO2007147019A2 (en) * 2006-06-13 2007-12-21 Zymogenetics, Inc. Il-17 and il-23 antagonists and methods of using the same
TW200819540A (en) 2006-07-11 2008-05-01 Genelux Corp Methods and compositions for detection of microorganisms and cells and treatment of diseases and disorders
DK2164349T3 (en) 2006-08-04 2014-12-15 Shs Int Ltd protein-FORMULA
WO2008031438A2 (en) 2006-09-13 2008-03-20 Region Hovedstaden V/Gentofte Hospital Treatment of asthma, eczema and/or allergy using non-pathogenic organisms
US20080069861A1 (en) 2006-09-19 2008-03-20 National Starch And Chemical Investment Holding Corporation Probiotic/Non-Probiotic Combinations
KR101170283B1 (ko) 2006-10-27 2012-07-31 화이자 프로덕츠 인코포레이티드 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스 경질 캡슐 및 이의 제조 방법
WO2008053444A2 (en) 2006-11-01 2008-05-08 The Procter & Gamble Company Treating a respiratory condition with bifidobacterium
EP1920781B1 (en) 2006-11-10 2015-03-04 Glycotope GmbH Compositions comprising a core-1 positive microorganism and their use for the treatment or prophylaxis of tumors
WO2008064489A1 (en) 2006-12-01 2008-06-05 Mcmaster University Probiotics to inhibit inflammation
WO2008076696A2 (en) 2006-12-18 2008-06-26 Washington University In St. Louis The gut microbiome as a biomarker and therapeutic target for treating obesity or an obesity related disorder
DE102006062250A1 (de) 2006-12-22 2008-06-26 Roland Saur-Brosch Verwendung einer Zusammensetzung aus Mineralstoffen und/oder Vitaminen und gegebenenfalls acetogenen und/oder butyrogenen Bakterien zur oralen oder rektalen Verabreichung für die Behandlung und Vorbeugung von abdominalen Beschwerden
WO2008083157A2 (en) 2006-12-29 2008-07-10 Washington University In St. Louis Altering pgc-1alapha, ampk, fiaf, or the gastrointestinal microbiota as a means to modulate body fat and/or weight loss in a subject
JP2008195635A (ja) 2007-02-09 2008-08-28 Crossfield Bio Inc 馬用乳酸菌製剤
RU2468807C2 (ru) 2007-02-28 2012-12-10 Мед Джонсон Нутришен Компани Детское питание, содержащее инактивированный пробиотик
PL2134833T3 (pl) 2007-03-28 2016-09-30 Probiotyczny szczep Bifidobacterium
AU2008231467A1 (en) 2007-03-28 2008-10-02 Alimentary Health Limited Probiotic Bifidobacterium strains
AU2008245685B2 (en) 2007-04-24 2013-06-27 Kemin Industries, Inc. Broad-spectrum antibacterial and antifungal activity of Lactobacillus johnsonii D115
EP1997499A1 (en) 2007-05-31 2008-12-03 Puleva Biotech, S.A. Mammalian milk microorganisms, compositions containing them and their use for the treatment of mastitis
EP1997906A1 (en) 2007-06-01 2008-12-03 Friesland Brands B.V. Lactobacillus
EP1997907A1 (en) 2007-06-01 2008-12-03 Friesland Brands B.V. Bifidobacteria
EP1997905A1 (en) 2007-06-01 2008-12-03 Friesland Brands B.V. Nucleic acid amplification
WO2008153377A1 (en) 2007-06-15 2008-12-18 N.V. Nutricia Nutrition with non-viable bifidobacterium and non-digestible oligosaccharide
ES2611277T3 (es) 2007-06-27 2017-05-08 Laboratorios Ordesa, S.L. Péptidos contra una infección por rotavirus
HUP0700552A2 (en) 2007-08-27 2009-03-30 Janos Dr Feher Method and composition inhibiting inflammation
WO2009030254A1 (en) 2007-09-04 2009-03-12 Curevac Gmbh Complexes of rna and cationic peptides for transfection and for immunostimulation
EP2192909A2 (en) 2007-10-01 2010-06-09 University College Cork-National University of Ireland, Cork Modulation of tissue fatty acid composition of a host by human gut bacteria
DK2203551T3 (da) 2007-10-20 2013-10-28 Univ Liege Bifidobakterieart
AU2008317000B2 (en) 2007-10-26 2014-10-23 Brenda E. Moore Probiotic compositions and methods for inducing and supporting weight loss
EP2205642B1 (en) 2007-11-02 2016-01-27 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Non-anticoagulant polysaccharide compositions
EP2065048A1 (en) 2007-11-30 2009-06-03 Institut Pasteur Use of a L. casei strain, for the preparation of a composition for inhibiting mast cell activation
CN101969966B (zh) 2007-12-07 2013-05-08 努特里希亚公司 用于尘螨变态反应的双歧杆菌
US20100330190A1 (en) 2007-12-17 2010-12-30 Compans Richard W Immunogenic compositions and methods of use thereof
ES2343499B1 (es) 2007-12-24 2011-06-10 Consejo Superior De Investigaciones Cientificas Microorganismos para mejorar el estado de salud de individuos con desordenes relacionados con la ingesta de gluten.
WO2009100331A2 (en) 2008-02-06 2009-08-13 The Procter & Gamble Company Compositions methods and kits for enhancing immune response to a respiratory condition
EP2103226A1 (en) 2008-03-18 2009-09-23 Friesland Brands B.V. Long-life probiotic food product
WO2009128949A2 (en) 2008-04-18 2009-10-22 Vaxinnate Corporation Compositions of dengue viral proteins and methods of use
WO2009138220A1 (en) 2008-05-13 2009-11-19 Glycotope Gmbh Fermentation process
MX2008006546A (es) 2008-05-21 2009-11-23 Sigma Alimentos Sa De Cv Bifidobacteria productora de ácido fólico, composición alimenticia y uso de la bifidobacteria.
CN102940652B (zh) 2008-05-28 2015-03-25 青岛东海药业有限公司 两形真杆菌制剂及其应用
CN101590081A (zh) 2008-05-28 2009-12-02 青岛东海药业有限公司 凸腹真杆菌和两形真杆菌制剂及其应用
WO2009149149A1 (en) 2008-06-04 2009-12-10 Trustees Of Dartmouth College Prevention or treatment of immune-relevant disease by modification of microfloral populations
EP2133088A3 (en) 2008-06-09 2010-01-27 Nestec S.A. Rooibos and inflammation
WO2009151315A1 (en) 2008-06-13 2009-12-17 N.V. Nutricia Nutritional composition for infants delivered via caesarean section
WO2009154463A2 (en) 2008-06-20 2009-12-23 Stichting Top Institute Food And Nutrition Butyrate as a medicament to improve visceral perception in humans
EP2138186A1 (en) 2008-06-24 2009-12-30 Nestec S.A. Probiotics, secretory IgA and inflammation
WO2010002241A1 (en) 2008-06-30 2010-01-07 N.V. Nutricia Nutritional composition for infants delivered via caesarean section
KR101017448B1 (ko) 2008-09-18 2011-02-23 주식회사한국야쿠르트 대장의 건강 증진 효능을 갖는 비피도박테리움 롱검 에이취와이8004 및 이를 유효성분으로 함유하는 제품
US20100074870A1 (en) 2008-09-19 2010-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Probiotic infant products
US8137718B2 (en) 2008-09-19 2012-03-20 Mead Johnson Nutrition Company Probiotic infant products
KR101057357B1 (ko) 2008-09-22 2011-08-17 광주과학기술원 유산균 및 콜라겐을 유효성분으로 포함하는 관절염 예방 또는 치료용 약제학적 조성물 및 식품 조성물
WO2010036876A2 (en) 2008-09-25 2010-04-01 New York University Compositions and methods for characterizing and restoring gastrointestinal, skin, and nasal microbiota
WO2010037408A1 (en) 2008-09-30 2010-04-08 Curevac Gmbh Composition comprising a complexed (m)rna and a naked mrna for providing or enhancing an immunostimulatory response in a mammal and uses thereof
US10369204B2 (en) 2008-10-02 2019-08-06 Dako Denmark A/S Molecular vaccines for infectious disease
RU2509478C2 (ru) 2008-12-05 2014-03-20 Нестек С.А. Пробиотическая композиция, предназначенная для младенцев с низкой массой тела при рождении
RU2011129812A (ru) 2008-12-19 2013-01-27 Нестек С.А. Профилактика и лечение ротавирусной диареи
IT1392672B1 (it) 2009-01-12 2012-03-16 Wyeth Consumer Healthcare S P A Composizioni comprendenti componenti probiotici e prebiotici e sali minerali, con lactoferrina
EP2810652A3 (en) 2009-03-05 2015-03-11 AbbVie Inc. IL-17 binding proteins
JP5710876B2 (ja) 2009-03-26 2015-04-30 クロスフィールドバイオ株式会社 新規ビフィドバクテリウム属微生物およびその利用
US8816067B2 (en) 2009-05-07 2014-08-26 Tate & Lyle Ingredients France SAS Compositions and methods for making alpha-(1,2)-branched alpha-(1,6) oligodextrans
EP2251020A1 (en) 2009-05-11 2010-11-17 Nestec S.A. Short-time high temperature treatment generates microbial preparations with anti-inflammatory profiles
EP2251022A1 (en) 2009-05-11 2010-11-17 Nestec S.A. Non-replicating micro-organisms and their immune boosting effect
MX338680B (es) 2009-05-11 2016-04-27 Nestec Sa Bifidobacterium longum ncc2705 (cncm i-2618) y padecimientos inmunes.
KR20100128168A (ko) 2009-05-27 2010-12-07 중앙대학교 산학협력단 공액 리놀레산 생산능이 우수한 신규한 균주
US20100311686A1 (en) 2009-06-03 2010-12-09 Kasper Lloyd H Nutraceutical composition and methods for preventing or treating multiple sclerosis
WO2010143940A1 (en) 2009-06-12 2010-12-16 N.V. Nutricia Synergistic mixture of beta-galacto-oligosaccharides with beta-1,3 and beta-1,4/1,6 linkages
WO2010147714A1 (en) 2009-06-16 2010-12-23 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Autism-associated biomarkers and uses thereof
WO2011005756A1 (en) 2009-07-06 2011-01-13 Puretech Ventures, Llc Delivery of agents targeted to microbiota niches
CA2768301A1 (en) 2009-07-24 2011-01-27 Southwest Regional Pcr, Llc Universal microbial diagnosis, detection, quantification, and specimen-targeted therapy
MX341971B (es) 2009-08-18 2016-09-08 Nestec Sa Una composicion nutricional que comprende cepas de bifidobacterium longum y que reduce los sintomas de la alergia a los alimentos, especialmente en lactantes y niños.
US20110053829A1 (en) 2009-09-03 2011-03-03 Curevac Gmbh Disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates for the transfection of nucleic acids
US20120177650A1 (en) 2009-09-23 2012-07-12 Borody Thomas J Therapy for enteric infections
EP2308498A1 (en) 2009-09-30 2011-04-13 Nestec S.A. Administration of Bifidobacterium breve during infancy to prevent inflammation later in life
WO2011043654A1 (en) 2009-10-05 2011-04-14 Aak Patent B.V. Methods for diagnosing irritable bowel syndrome
WO2011044208A1 (en) 2009-10-06 2011-04-14 Scott Dorfner Antibiotic formulations providing reduced gastrointentestinal side effects
EP2498789B1 (en) 2009-11-11 2016-06-22 Alimentary Health Limited Probiotic bifidobacterium strain
JP2013514085A (ja) 2009-12-18 2013-04-25 ヒルズ・ペット・ニュートリシャン・インコーポレーテッド プロバイオティックを含むペットフード組成物ならびにそれを調製および使用する方法
UA109123C2 (uk) * 2010-01-28 2015-07-27 Пробіотична композиція для застосування в лікуванні запалення кишечнику
US20150104418A1 (en) 2014-12-18 2015-04-16 Microbios, Inc. Bacterial composition
FR2955774A1 (fr) 2010-02-02 2011-08-05 Aragan Preparation destinee a traiter l'exces ponderal et les desordres associes et applications de ladite preparation
NL2004200C2 (en) 2010-02-05 2011-08-08 Friesland Brands Bv Use of sialyl oligosaccharides in weight management.
NL2004201C2 (en) 2010-02-05 2011-08-08 Friesland Brands Bv Use of sialyl oligosaccharides to modulate the immune system.
IT1398553B1 (it) 2010-03-08 2013-03-01 Probiotical Spa Composizione comprendente batteri probiotici per il trattamento di patologie associate con le alterazioni del sistema immunitario.
JP5737646B2 (ja) 2010-03-24 2015-06-17 森下仁丹株式会社 抗アレルギー剤
EP2552464B1 (en) 2010-03-30 2018-02-28 Assistance Publique - Hôpitaux de Paris Use of bifidobacteria for preventing allergy in breastfed infants
US8951512B2 (en) 2010-05-04 2015-02-10 New York University Methods for treating bone disorders by characterizing and restoring mammalian bacterial microbiota
WO2011149335A1 (en) 2010-05-25 2011-12-01 N.V. Nutricia Immune imprinting nutritional composition
AU2011261528A1 (en) * 2010-06-01 2013-01-10 Moore Research Enterprises Llc Cellular constituents from Bacteroides, compositions thereof, and therapeutic methods employing Bacteroides or cellular constituents thereof
WO2011151941A1 (ja) 2010-06-04 2011-12-08 国立大学法人東京大学 制御性t細胞の増殖または集積を誘導する作用を有する組成物
TWI417054B (zh) 2010-06-15 2013-12-01 Jen Shine Biotechnology Co Ltd 新穎糞腸球菌ljs-01及其益生用途
EP2397145A1 (en) 2010-06-18 2011-12-21 Nestec S.A. L. johnsonii La1, B. longum NCC2705 and immune disorders
FR2962045B1 (fr) 2010-07-05 2012-08-17 Bifinove Complexe macromoleculaire d'origine bacterienne et utilisation dudit complexe moleculaire pour prevenir et traiter les rhumatismes inflammatoires
TWI401086B (zh) 2010-07-20 2013-07-11 Univ China Medical 胚芽乳酸桿菌及其用途
ES2645509T3 (es) 2010-07-26 2017-12-05 Qu Biologics Inc Composiciones antiinflamatorias inmunogénicas
EP2600877A4 (en) 2010-08-04 2014-05-07 Borody Thomas J COMPOSITIONS FOR FLORAL TRANSPLANTATION OF FECAL MATERIALS AND METHODS OF MAKING AND USING SAME, AND DEVICES FOR THEIR ADMINISTRATION
WO2012024638A2 (en) 2010-08-20 2012-02-23 New York University Compositions and methods for treating obesity and related disorders by characterizing and restoring mammalian bacterial microbiota
KR101250463B1 (ko) 2010-10-12 2013-04-15 대한민국 신생아 분변에서 분리한 내산소성 비피도박테리움 롱검 비피더스 유산균 및 이를 이용한 프로바이오틱 조성물
CA2815259A1 (en) 2010-10-27 2012-05-03 Quantibact A/S Capture of target dna and rna by probes comprising intercalator molecules
CN102031235B (zh) 2010-11-09 2012-07-25 中国农业大学 一种粪肠球菌anse228及其应用
EP2455092A1 (en) 2010-11-11 2012-05-23 Nestec S.A. Non-replicating probiotic micro-organisms protect against upper respiratory tract infections
WO2012071380A1 (en) 2010-11-24 2012-05-31 Oragenics, Inc. Use of bacteria to treat and prevent respiratory infections
CN102093967B (zh) 2010-12-02 2013-01-30 中国农业科学院特产研究所 一株水貂源屎肠球菌及其应用
ES2389547B1 (es) 2010-12-07 2013-08-08 Consejo Superior De Investigaciones Científicas (Csic) Bifidobacterium cect 7765 y su uso en la prevención y/o tratamiento del sobrepeso, la obesidad y patologías asociadas.
SG191830A1 (en) 2011-01-10 2013-08-30 Cleveland Biolabs Inc Use of toll-like receptor agonist for treating cancer
DK2481299T3 (en) 2011-01-31 2017-02-06 Dr Fischer Gesundheitsprodukte Gmbh BIFIDOBACTERIUM BIFIDUM STREAMS FOR USE IN GASTROINTESTINAL DISEASES
JP5840368B2 (ja) 2011-02-02 2016-01-06 カルピス株式会社 関節炎予防改善用物質
LT2672980T (lt) 2011-02-09 2018-03-12 Lavivo Ab Simbiozinės kompozicijos žarnyno mikrobiotos atkūrimui ir rekonstrukcijai
JP2014507481A (ja) 2011-03-09 2014-03-27 リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミネソタ 結腸微生物相移植のための組成物及び方法
BRPI1100857A2 (pt) 2011-03-18 2013-05-21 Alexandre Eduardo Nowill agente imunomodulador e suas combinaÇÕes, seu uso e mÉtodo imunoterÁpico para a recontextualizaÇço, reprogramaÇço e reconduÇço do sistema imune em tempo real
WO2012140636A1 (en) 2011-04-11 2012-10-18 Alimentary Health Limited A probiotic formulation
WO2012142605A1 (en) 2011-04-15 2012-10-18 Samaritan Health Services Rapid recolonization deployment agent
SG194542A1 (en) 2011-04-20 2013-12-30 Mico Bio Inc Composition and method for enhancing an immune response
EP2707379A4 (en) 2011-05-13 2014-10-08 Glycosyn LLC USE OF PURIFIED 2'-FUCOSYLLACTOSIS, 3-FUCOSYLLACTOSIS AND LACTODIFUCOTETRAOSE AS PREBIOTICS
KR20120133133A (ko) 2011-05-30 2012-12-10 한국 한의학 연구원 생약 추출물 또는 이의 유산균 발효물을 포함하는 호흡기 질환의 예방 또는 치료용 조성물
WO2012170478A2 (en) 2011-06-06 2012-12-13 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and kits for detecting adenomas, colorectal cancer, and uses thereof
GB201110095D0 (en) 2011-06-15 2011-07-27 Danisco Method of treatment
JP2013005759A (ja) 2011-06-24 2013-01-10 Kyodo Milk Industry Co Ltd マウス腸内菌叢の推測方法
US20140128585A1 (en) 2011-07-07 2014-05-08 Nagaoka Perfumery Co., Ltd. Fructose absorption inhibitor
US20130017999A1 (en) 2011-07-14 2013-01-17 Marc Fremont Methods and Compositions for Evaluating and/or Treating Chronic Immune Diseases
GB201112091D0 (en) 2011-07-14 2011-08-31 Gt Biolog Ltd Bacterial strains isolated from pigs
US20130022575A1 (en) 2011-07-19 2013-01-24 Microbial Rx Systems and methods of replacing intestinal flora
CN102304483A (zh) 2011-08-12 2012-01-04 北京金泰得生物科技股份有限公司 一株饲用屎肠球菌及其应用
KR101261872B1 (ko) 2011-08-23 2013-05-14 대한민국 (식품의약품안전처장) 장내 미생물 효소복합체 및 이의 제조방법
WO2013037068A1 (en) 2011-09-14 2013-03-21 Queen's University At Kingston Method for treatment of disorders of the gastrointestinal system
GB201117313D0 (en) 2011-10-07 2011-11-16 Gt Biolog Ltd Bacterium for use in medicine
WO2013053836A1 (en) 2011-10-11 2013-04-18 Quantum Pharmaceuticals Sa Composition comprising anaerobically cultivated human intestinal microbiota
CN103082292B (zh) 2011-11-02 2015-03-04 深圳华大基因研究院 罗斯氏菌(Roseburia)在治疗和预防肥胖相关疾病中的应用
CN102373172B (zh) 2011-11-03 2013-03-20 北京龙科方舟生物工程技术有限公司 一株屎肠球菌及其应用
WO2013080561A1 (en) 2011-12-01 2013-06-06 University Of Tokyo Human-derived bacteria that induce proliferation or accumulation of regulatory t cells
ES2408279B1 (es) 2011-12-15 2014-09-09 Universidad De Las Palmas De Gran Canaria Bacteria acido láctica probiótica
ITBG20120010A1 (it) 2012-02-24 2013-08-25 Milano Politecnico Dispositivo per l'addestramento chirurgico
ITMI20120471A1 (it) 2012-03-26 2013-09-27 Giovanni Mogna Composizione a base di ceppi di batteri bifidobacterium longum in grado di aiutare il prolungamento della vita
JP5792105B2 (ja) 2012-03-27 2015-10-07 森永乳業株式会社 ラクト−n−ビオースiの製造方法
EP2832859B1 (en) 2012-03-30 2018-07-25 Ajinomoto Co., Inc. Diabetes-inducible bacterium
US20130280724A1 (en) 2012-04-11 2013-10-24 Nestec Sa Methods for diagnosing impending diarrhea
GB201206599D0 (en) 2012-04-13 2012-05-30 Univ Manchester Probiotic bacteria
EP2836218A4 (en) 2012-04-13 2015-10-21 Trustees Boston College PROBIOTIC COMPOSITIONS AND METHODS OF USE
EP3686284A1 (en) 2012-05-18 2020-07-29 Genome Research Limited Methods and groups
ES2436251B1 (es) 2012-05-25 2014-10-08 Consejo Superior De Investigaciones Científicas (Csic) Bacteroides cect 7771 y su uso en la prevención y tratamiento de sobrepeso, obesidad y alteraciones metabólicas e inmunológicas.
EP3659598A1 (en) 2012-06-04 2020-06-03 Gaurav Agrawal Compositions and methods for treating crohn's disease and related conditions and infections
CN102743420A (zh) 2012-06-06 2012-10-24 上海交通大学 改善肠道菌群结构的方法及应用
WO2014001368A1 (en) 2012-06-25 2014-01-03 Orega Biotech Il-17 antagonist antibodies
DK2879523T3 (da) 2012-07-31 2017-01-16 Nestec Sa Ernæringssammensætning til fremme af muskuloskeletalt helbred hos patienter med inflammatorisk tarmsygdom (ibd)
US20150211053A1 (en) 2012-08-01 2015-07-30 Bgi-Shenzhen Biomarkers for diabetes and usages thereof
WO2014032108A1 (en) 2012-08-29 2014-03-06 Borody Thomas J Laxative compositions and methods for treating constipation and related gastrointestinal diseases and conditions
CA2881656C (en) 2012-08-29 2023-07-11 California Institute Of Technology Diagnosis and treatment of autism spectrum disorder
CA2884816A1 (en) 2012-09-13 2014-03-20 Massachusetts Institute Of Technology Programmable drug delivery profiles of tumor-targeted bacteria
KR101473058B1 (ko) 2012-09-19 2014-12-16 주식회사 쎌바이오텍 과민성 대장 증후군 예방 또는 치료용 조성물
CN103652322B (zh) 2012-09-21 2016-02-10 临沂思科生物科技有限公司 一种含乳酸菌的复合益生菌饲料添加剂的制备方法
WO2014053608A1 (en) 2012-10-03 2014-04-10 Metabogen Ab Identification of a person having risk for atherosclerosis and associated diseases by the person's gut microbiome and the prevention of such diseases
FR2997091B1 (fr) 2012-10-22 2016-05-06 Fond Mediterranee Infection Utilisation d'un compose antioxydant pour la culture de bacteries sensibles a la tension en oxygene
US9839657B2 (en) 2012-10-30 2017-12-12 Deerland Enzymes, Inc. Prebiotic compositions comprising one or more types of bacteriophage
CN104755092A (zh) 2012-10-30 2015-07-01 雀巢产品技术援助有限公司 用于递送协同免疫作用的包含微粒和益生菌的组合物
AU2013338774B2 (en) 2012-11-01 2017-03-02 Academisch Ziekenhuis Groningen Methods and compositions for stimulating beneficial bacteria in the gastrointestinal tract
WO2014075745A1 (en) 2012-11-19 2014-05-22 Université Catholique de Louvain Use of akkermansia for treating metabolic disorders
SG10201704035TA (en) 2012-11-23 2017-06-29 Seres Therapeutics Inc Synergistic bacterial compositions and methods of production and use thereof
US8906668B2 (en) 2012-11-23 2014-12-09 Seres Health, Inc. Synergistic bacterial compositions and methods of production and use thereof
BR112015012123A8 (pt) 2012-11-26 2018-01-23 Borody Thomas J composições para a recuperação de uma microbiota fecal e métodos para produzir e usar as mesmas.
ES2786193T3 (es) 2012-12-12 2020-10-09 Broad Inst Inc Modificación por tecnología genética y optimización de sistemas, métodos y composiciones enzimáticas mejorados para la manipulación de secuencias
MX2015007550A (es) 2012-12-12 2017-02-02 Broad Inst Inc Suministro, modificación y optimización de sistemas, métodos y composiciones para la manipulación de secuencias y aplicaciones terapéuticas.
DK2931898T3 (en) 2012-12-12 2016-06-20 Massachusetts Inst Technology CONSTRUCTION AND OPTIMIZATION OF SYSTEMS, PROCEDURES AND COMPOSITIONS FOR SEQUENCE MANIPULATION WITH FUNCTIONAL DOMAINS
US20140193464A1 (en) 2013-01-08 2014-07-10 Imagilin Technology, Llc Effects of probiotics on humans and animals under environmental or biological changes
US10973861B2 (en) * 2013-02-04 2021-04-13 Seres Therapeutics, Inc. Compositions and methods
EP2951285A4 (en) 2013-02-04 2016-10-26 Seres Therapeutics Inc COMPOSITIONS AND METHODS FOR INHIBITING THE GROWTH OF PATHOGENIC BACTERIA
EP3536328B1 (en) 2013-02-22 2021-10-27 The Regents of The University of California Food or beverage product, or probiotic composition, comprising lactobacillus johnsonii 456
JP2016511272A (ja) 2013-03-05 2016-04-14 レイクスユニフェルシテイト フローニンゲン 炎症を抑制するためのフィーカリバクテリウム・パラウスニッチィーhtf−f(dsm26943)の使用
WO2014153194A2 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Seres Health, Inc. Methods for pathogen detection and enrichment from materials and compositions
AU2014239883B2 (en) 2013-03-14 2019-01-17 Therabiome, Llc Targeted gastrointestinal tract delivery of probiotic organisms and/or therapeutic agents
EP2967077A4 (en) * 2013-03-15 2016-09-14 Seres Therapeutics Inc MICROBIAL COMPOSITIONS AND ASSOCIATED METHODS BASED ON A NETWORK
WO2014150094A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 University Of Florida Research Foundation, Inc. Butyrogenic bacteria as probiotics to treat clostridium difficile
CN103156888A (zh) * 2013-03-18 2013-06-19 广州知光生物科技有限公司 脆弱拟杆菌在制备治疗炎症性肠病组合物中的应用
CN103142656A (zh) 2013-03-18 2013-06-12 广州知光生物科技有限公司 脆弱拟杆菌在制备防治结肠癌组合物中的应用
CN103146620A (zh) 2013-03-25 2013-06-12 广州知光生物科技有限公司 具有益生菌特性的脆弱拟杆菌
JP2014196260A (ja) 2013-03-29 2014-10-16 公立大学法人奈良県立医科大学 慢性閉塞性肺疾患の予防又は治療用組成物
GB201306536D0 (en) 2013-04-10 2013-05-22 Gt Biolog Ltd Polypeptide and immune modulation
EP2994161B1 (en) * 2013-05-10 2020-10-28 California Institute of Technology Probiotic prevention and treatment of colon cancer
EP4234011A3 (en) 2013-06-05 2023-09-20 Rebiotix, Inc. Microbiota restoration therapy (mrt), compositions and methods of manufacture
US9511099B2 (en) 2013-06-05 2016-12-06 Rebiotix, Inc. Microbiota restoration therapy (MRT), compositions and methods of manufacture
WO2014201037A2 (en) 2013-06-10 2014-12-18 New York University Methods for manipulating immune responses by altering microbiota
WO2014200334A1 (en) 2013-06-14 2014-12-18 N.V. Nutricia Synbiotic composition for treatment of infections in allergic patients
WO2015003001A1 (en) 2013-07-01 2015-01-08 The Washington University Methods for identifying supplements that increase gut colonization by an isolated bacterial species, and compositions derived therefrom
WO2015003305A1 (zh) 2013-07-08 2015-01-15 吉瑞高新科技股份有限公司 电子烟盒
EP3019181A4 (en) 2013-07-09 2016-09-21 Puretech Ventures Llc COMPOSITIONS CONTAINING COMBINATIONS OF BIOACTIVE MICROFLORE DERIVED MOLECULES FOR THE TREATMENT OF DISEASE
JP6637885B2 (ja) 2013-07-21 2020-01-29 ペンデュラム セラピューティクス, インコーポレイテッド マイクロバイオームの特性解明、モニタリング、および処置のための方法およびシステム
WO2015017625A1 (en) 2013-07-31 2015-02-05 Wikifoods, Inc. Encapsulated functional food compositions
WO2015021936A1 (en) 2013-08-16 2015-02-19 The University Of Hong Kong Method and compositions for treating cancer using probiotics cross-reference to related application
CN103509741B (zh) 2013-08-22 2015-02-18 河北农业大学 布劳特菌auh-jld56及其在牛蒡苷元转化中的应用
ITMI20131467A1 (it) 2013-09-06 2015-03-07 Sofar Spa Uso di una composizione comprendente microrganismi per aumentare la produzione intestinale di acido butirrico, di acido folico o di niacina e/o per diminuire la produzione intestinale di acido succinico
US10203329B2 (en) 2013-09-12 2019-02-12 The Johns Hopkins University Biofilm formation to define risk for colon cancer
US10058576B2 (en) 2013-10-03 2018-08-28 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions and methods comprising a defined microbiome and methods of use thereof
CA2962736C (en) 2013-10-18 2021-08-31 Innovachildfood Ab A nutritionally balanced composite meal for infants and small children and a method of producing said meal
PL229020B1 (pl) 2013-11-13 2018-05-30 Inst Biotechnologii Surowic I Szczepionek Biomed Spolka Akcyjna Nowy szczep Bifidobacterium breve
AU2014352643A1 (en) 2013-11-25 2016-06-30 Seres Therapeutics, Inc. Synergistic bacterial compositions and methods of production and use thereof
US9956282B2 (en) 2013-12-16 2018-05-01 Seres Therapeutics, Inc. Bacterial compositions and methods of use thereof for treatment of immune system disorders
CN103981115B (zh) 2013-12-24 2018-10-26 北京大伟嘉生物技术股份有限公司 一株高抗逆性屎肠球菌及其应用
CN103981117B (zh) 2013-12-24 2018-10-26 北京大伟嘉生物技术股份有限公司 一株高抗逆性屎肠球菌及其培养方法和应用
CN103820363B (zh) 2014-01-27 2016-02-24 福建省农业科学院生物技术研究所 一种屎肠球菌菌粉的制备与应用
CN103865846B (zh) 2014-02-27 2016-03-30 扬州绿保生物科技有限公司 一种屎肠球菌及其制备方法
CN103849590B (zh) 2014-03-25 2016-07-06 上海交通大学 一株耐酸短双歧杆菌BB8dpH及其应用
KR101683474B1 (ko) 2014-03-26 2016-12-08 주식회사 쎌바이오텍 과민성 대장 증후군 예방 또는 치료용 조성물
US9783858B2 (en) 2014-04-02 2017-10-10 Northwestern University Altered microbiome of chronic pelvic pain
KR101583546B1 (ko) 2014-04-09 2016-01-11 국립암센터 유전자 다형성을 이용한 소라페닙 치료에 대한 반응성 예측방법
WO2015156419A1 (en) 2014-04-10 2015-10-15 Riken Compositions and methods for induction of th17 cells
CN104195075B (zh) 2014-08-14 2017-04-19 生合生物科技股份有限公司 一种屎肠球菌ef08及包含它的饲料添加物和饲料
WO2015168534A1 (en) 2014-05-02 2015-11-05 Novogy, Inc. Therapeutic treatment of gastrointestinal microbial imbalances through competitive microbe displacement
WO2015169944A1 (en) 2014-05-08 2015-11-12 Panoptes Pharma Ges.M.B.H. Compounds for treating ophthalmic diseases and disorders
CN106687130B (zh) 2014-08-05 2020-01-21 深圳华大基因科技有限公司 真杆菌属在预防和治疗结直肠癌相关疾病中的用途
WO2016033439A2 (en) 2014-08-28 2016-03-03 Yale University Compositions and methods for the treating an inflammatory disease or disorder
WO2016036615A1 (en) 2014-09-03 2016-03-10 California Institute Of Technology Microbe-based modulation of serotonin biosynthesis
CN104546932A (zh) 2014-09-30 2015-04-29 深圳华大基因科技有限公司 卵形拟杆菌在治疗或预防类风湿性关节炎或其相关疾病中的应用
CN104546935A (zh) * 2014-09-30 2015-04-29 深圳华大基因科技有限公司 多形拟杆菌在治疗或预防类风湿性关节炎或其相关疾病中的应用
CN104546934B (zh) 2014-09-30 2019-04-09 深圳华大基因科技有限公司 粪副拟杆菌在治疗或预防类风湿性关节炎或其相关疾病中的应用
CN104546940A (zh) 2014-09-30 2015-04-29 深圳华大基因科技有限公司 平常拟杆菌在治疗或预防类风湿性关节炎或其相关疾病中的应用
CN104546942A (zh) * 2014-09-30 2015-04-29 深圳华大基因科技有限公司 多氏拟杆菌在治疗或预防类风湿性关节炎或其相关疾病中的应用
CN104546933A (zh) * 2014-09-30 2015-04-29 深圳华大基因科技有限公司 粪拟杆菌在治疗或预防类风湿性关节炎或其相关疾病中的应用
US10046030B2 (en) 2014-10-07 2018-08-14 University Of Virginia Patent Foundation Compositions and methods for preventing and treating infection
DK3209308T3 (da) 2014-10-24 2022-10-03 Evolve Biosystems Inc Aktiverede bifidobakterier og fremgangsmåder til anvendelse deraf
EP3212207A4 (en) 2014-10-30 2018-06-13 California Institute of Technology Compositions and methods comprising bacteria for improving behavior in neurodevelopmental disorders
EP3212289A4 (en) 2014-10-30 2018-05-16 California Institute of Technology Compositions and methods comprising bacteria for improving behavior in neurodevelopmental disorders
GB2551642B (en) 2014-10-31 2020-09-23 Pendulum Therapeutics Inc Methods and compositions relating to microbial treatment and diagnosis of disorders
CN104435000A (zh) 2014-11-12 2015-03-25 江南大学 乳酸菌对支气管哮喘治疗中的应用
CN107249609A (zh) 2014-11-25 2017-10-13 纪念斯隆-凯特琳癌症中心 肠道微生物群和gvhd
MA41020A (fr) 2014-11-25 2017-10-03 Evelo Biosciences Inc Compositions probiotiques et prébiotiques, et leurs procédés d'utilisation pour la modulation du microbiome
NO3065748T3 (ja) 2014-12-23 2018-04-21
SI3193901T1 (en) 2014-12-23 2018-06-29 4D Pharma Research Limited Pirin polypeptide and immune modulation
CN104560820B (zh) 2014-12-30 2017-10-20 杭州师范大学 屎肠球菌kq2.6及应用
WO2016118730A1 (en) 2015-01-23 2016-07-28 Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education Use of short chain fatty acids in cancer prevention
CN105982919A (zh) 2015-02-26 2016-10-05 王汉成 生物减速剂抗癌技术
WO2016139217A1 (en) 2015-03-04 2016-09-09 Ab-Biotics, S.A. Composition comprising anaerobically cultivated human intestinal microbiota
WO2016149687A1 (en) 2015-03-18 2016-09-22 Whole Biome, Inc. Methods and compositions relating to microbial treatment and diagnosis of skin disorders
WO2016149449A1 (en) 2015-03-18 2016-09-22 Tufts University Compositions and methods for preventing colorectal cancer
KR20240059639A (ko) 2015-06-01 2024-05-07 더 유니버서티 오브 시카고 공생 미생물총의 조작에 의한 암의 치료
HUE044617T2 (hu) 2015-06-15 2019-11-28 4D Pharma Res Ltd Baktériumtörzseket tartalmazó készítmények
SG10201912324XA (en) 2015-06-15 2020-02-27 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
MA41010B1 (fr) * 2015-06-15 2020-01-31 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes
ME03563B (me) 2015-06-15 2020-07-20 4D Pharma Res Ltd Kompozicije koje sadrže bakterijske sojeve
MA41060B1 (fr) 2015-06-15 2019-11-29 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes
CN105112333A (zh) 2015-08-31 2015-12-02 江南大学 一种具有良好肠道定殖能力的长双歧杆菌及筛选方法和应用
GB201520497D0 (en) 2015-11-20 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
MD3209310T2 (ro) 2015-11-20 2018-06-30 4D Pharma Res Ltd Compoziții care conțin tulpini bacteriene
GB201520631D0 (en) 2015-11-23 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
GB201520638D0 (en) 2015-11-23 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
AU2016361583B2 (en) 2015-11-25 2021-05-13 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Methods and compositions for reducing vancomycin-resistant enterococci infection or colonization
CN114712405A (zh) 2016-03-04 2022-07-08 4D制药有限公司 包含细菌菌株的组合物
TWI802545B (zh) 2016-07-13 2023-05-21 英商4D製藥有限公司 包含細菌菌株之組合物
GB201621123D0 (en) 2016-12-12 2017-01-25 4D Pharma Plc Compositions comprising bacterial strains
WO2018112363A1 (en) 2016-12-16 2018-06-21 Evelo Biosciences, Inc. Methods of treating cancer using parabacteroides
WO2018112365A2 (en) 2016-12-16 2018-06-21 Evelo Biosciences, Inc. Methods of treating colorectal cancer and melanoma using parabacteroides goldsteinii
MA41708A (fr) 2017-05-24 2020-04-08 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes
AR112328A1 (es) 2017-07-05 2019-10-16 Evelo Biosciences Inc Composiciones y métodos para tratamiento de cáncer usando bifidobacterium animalis ssp. lactis

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2018203742A (ja) * 2015-06-15 2018-12-27 フォーディー ファーマ リサーチ リミテッド4D Pharma Research Limited 細菌株を含む組成物

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