JP6265388B2 - メタボリック症候群を治療するためのアーティチョーク、コッフェア及びオリーブの新規抽出物 - Google Patents

Description

発明の概要
本発明は、脂質代謝異常、高血糖症、炎症及び高血圧の予防と治療とに有用であるアーティチョーク（Ｃｙｎａｒａ ｓｃｏｌｙｍｕｓ）、オリーブ（Ｏｌｅａ ｅｕｒｏｐａｅａ）及びコッフェア（Ｃｏｆｆｅａ ｓｐｐ．）抽出物の新規の組み合わせに関し、該パラメータは、メタボリックシンドローム及び２型糖尿病の双方に特徴的なものである。該パラメータを正常化することは該症候群に付随する体重増加にも影響を与え、それはホルモン調節という間接的な機構を介し、酵素系との相互作用の生化学と関連し、従って心血管系リスクを低減する。

脂質面に関しては、これらの抽出物の組み合わせにより、平均値未満のパラメータ値を有する患者においてＨＤＬコレステロール値が有意に増加し、特に、心発作のリスクがあり様々な病因の脂質代謝異常を有する患者において、ＬＤＬ／ＨＤＬ比が好ましい方向にシフトすることが立証されている。

オリーブ抽出物中のポリフェノールによる、炎症性サイトカインの放出を促進する脂肪組織の生化学的機構との相互作用も実証されている。該分子は、血管内皮を変化させることによりアテローム性プラークの形成を促進するプロセスの開始剤であると考えられる。該作用はｃＬＤＬ値に影響を及ぼす酸化プロセスを低減する能力に付加的なものである。

従来技術
文献から知られるように、アーティチョークの抽出物は、胆汁分泌（choleretic）、胆汁分泌促進（cholagogue）、血糖降下、抗消化不良及び中等度のコレステロール低下の作用として公知であり、多数の臨床試験において報告されているコレステロール低下は中等度であり、１０％を超えることは決してなく、プロトコルの質及び用いられた抽出物の組成により、試験の間で変動がある。文献によると、活性成分の種類には、胆汁分泌、血糖降下及び肝臓保護の効果を示すカフェオイルキナ酸、コレステロール合成と関連する脂質低下の効果を示すフラボノイド、並びに核因子であるＮＦｋＢ及びＴＮＦ−αとの相互作用により抗炎症作用を示すシナロピクリンがある。

オリーブ油は常に地中海食事法の基本材料と考えられ、メタボリックシンドローム予防の最も自然な形態であることがこれまでに知られている。科学的研究の継続的な進歩により、化学的分類ではポリフェノールに属する様々な微量栄養素がエクストラバージン油中に存在し、脂肪酸中の組成物よりもさらに多く、抗酸化作用及び多くの酵素作用の調節を介して相互作用的に働き、動脈の血管内皮を防御することが実証されている。メタボリックシンドロームは、西欧諸国では不適切な栄養摂取とあまり体を動かさない生活様式により、しばしば脂質代謝異常と肥満を引き起こし、それは心循環器に対して明らかな悪影響を与える。増大した脂肪組織は、ＣＯＸ−２及びｉＮＯＳなどの、炎症性サイトカイン及び炎症性メデイエーター(inflammation mediators)を放出するマクロファージ、白血球細胞に浸潤され、加えて、流動性脂肪酸がＴＬＲ−４受容体を介して脂肪細胞の伝達物質として作用し、ＮＦ−ｋＢ又はＪＮＫを活性化することにより、炎症性メデイエーターの発現を誘導する。この連鎖的に起きる事象は「静かな炎症」と呼ばれる状態を生み出し、血管内皮に対するその攻撃的な作用により、アテローム性プラークによる攻撃部位となる病変を生じ、心血管疾患の基盤を成すアテローム性動脈硬化症及び血栓の症状の主な原因となる。

１９９０年代の初頭までに、植物二次代謝産物である、化学的分類によるポリフェノールには、抗酸化能があると既に確認されており、これらの化合物に富む食事が心疾患及び組織老化の発生低減に関連があることが認められている。特に、オリーブの果実の水溶性部分に存在する２種のポリフェノール、ベルバスコシド及びヒドロキシチロソールが、インビトロの試験で有効であることが判明しただけではなく、臨床試験においても有望な結果を与えた。ヒドロキシチロソールは、アテローム性プラークの形成を誘起する二次的な現象の一つである、ＬＤＬ酸化の阻害物質としての兆候があるため、ＥＦＳＡから好評を得ている。該２種のポリフェノールは、異なった分量と比率で様々なオリーブの栽培品種内に存在しており、そのため程度の差はあるが豊富な抽出物の生成に適切となる。

伝統医学と逆症療法医学の双方においてずっと以前から知られている、アーティチョーク及びオリーブの抽出物を得るために必要なプロセスには、臨床データが一定せず、現行の薬剤と比較した場合治療の有用性が低いという結果を伴う、再現性及び活性成分含量の大きな問題がある。

非焙煎の豆から調製されたコッフェア種の抽出物、好ましくはコッフェア・アラビカ(Ｃｏｆｆｅａ ａｒａｂｉｃａ)の抽出物にも、薬学的再現性をもたらす標準的プロセスが存在しないため、アーティチョークに関しての報告と同様の問題がある。抽出物の低再現性は、植物バイオマスの選択及びその乾燥条件等の種々の要素に起因する。活性成分の量を維持するために極めて重要である乾燥条件が植物の生長期間に依存するという理由から、バイオマスの生成はプロセスの重要な段階となる。

膨大な量の薬理学的及び臨床的文献が、アーティチョーク、オリーブ及びコーヒーに関して健康をもたらす多くの活性を主張しているが、用いられた抽出物の十分な記載がなく、実際、アーティチョークにはいくつかの種類の活性成分の分解に関連する組成上の問題が存在する。

オリーブ抽出物の組成物は、栽培品種の使用及び種々の油の副生成物による影響を受け、一方、コーヒー抽出物にカフェインが存在するかしないかは、該化合物のしばしば矛盾する作用と関連する問題を含んでいる。

国際公開第２００７／００６３９１号パンフレット

Ｎａｔｕｒｍｅｄ、１３、１７〜２４、１９９８

発明の説明
本発明は、
ａ．３０〜４５重量％の範囲の含有量のカフェオイルキナ酸、８〜１６重量％の範囲の含有量のフラボノイド、及び１０〜１８重量％の含有量のシナロピクリンを有するシナーラ（Ｃｙｎａｒａ）抽出物と、
ｂ．４０重量％〜８０重量％の範囲のカフェオイルキナ酸を含有するコッフェア抽出物と、
ｃ．５％を超える含有量のベルバスコシド及び１．５％を超える含有量のヒドロキシチロソールを有し、３０％〜４０％のポリフェノールを含有するオリーブ抽出物と、
を含有する組成物に関する。

シナーラ（Ｃｙｎａｒａ）抽出物は、含有量３５±２％のカフェオイルキナ酸、含有量１２±２％のフラボノイド、及び含有量１３±２％のシナロピクリンを有することが好ましい。

コッフェア抽出物は、含有量６０±２重量％のカフェオイルキナ酸を有することが好ましい。

コッフェア抽出物とシナーラ抽出物との重量比は、０．５〜２の範囲であり、好ましくは１である。シナーラ抽出物、コッフェア・アラビカ抽出物、及びオリーブ抽出物の量は、１００〜３００ｍｇの範囲である。

選択されたアーティチョーク栽培品種、好ましくはシナーラ・スコリムス（Ｃｙｎａｒａ ｓｃｏｌｙｍｕｓ）又はシナーラ・カルダンクルス（Ｃｙｎａｒａ ｃａｒｄｕｎｃｕｌｕｓ）、より好ましくはシナーラ・スコリムス（Ｃｙｎａｒａ ｓｃｏｌｙｍｕｓ）は、本発明により抽出物を調製するために用いられる。抽出物を調製する方法は、ＷＯ２００７／００６３９１（特許文献１）及びＷＯ２００８／１０７１８３に報告されている。

ベルバスコシド及びヒドロキシチロソールを多く含むオリーブ抽出物は、オリーブの果肉から（ＵＳ６３５８５４２）、水−アルコール抽出、樹脂上での水−アルコール溶離の段階、及び乾燥の最終段階を含む調製プロセスによる油状基質の抽出後に、調製することができる。最終生産物は、含有量５％を超えるベルバスコシドと含有量１．５％を超えるヒドロキシチロソールとを有する、３０％を超える最終ポリフェノール濃度をもたらす。コラティーナ（Ｃｏｒａｔｉｎａ）栽培品種を使用することが好ましい。最終製品は、商標名Ｏｌｅａｓｅｌｅｃｔ（登録商標）を有し、生体外と志願者の両方において優秀な活性が立証され、殊に主要な危険因子である脂肪に富む食事中に、組織損傷パラメータを制御下に置く［Ｃｅｒｌｅｔｔｉ Ｃ．他、ＳＩＮＵＴ Ｃｏｎｇｒｅｓｓ ２０１０、Ｍｉｌａｎ］。

砕いた豆を脂肪族アルコール好ましくはエタノールを用いて、水−アルコール抽出することによりコーヒー抽出物を生成し、例に記載された手順に従い酢酸エチルを用いて逆抽出によりカフェインを除去した後、真空中で乾燥するまで濃縮する。

コッフェア・アラビカ豆を、ポリフェノールを完全に取り出すまでエタノール水溶液を用いて抽出し、部分抽出物を組み合わせて真空中で濃縮し水を加え、不溶性物質を濾過した後、水溶液を重炭酸ナトリウムを用いて塩基性化し、酢酸エチル／ヘキサンの９：１混合物を用いて逆抽出しカフェインを除去する。ｐＨ２まで酸性化した後、水溶液をポリスチレン吸収樹脂に吸収し、エタノールを用いて溶離する。最終抽出物を収集し真空中で乾燥するまで濃縮する。４０〜８０％の、通常は６０％のカフェオイルキナ酸を含有する抽出物を得る。樹脂からカフェオイルキナ酸を溶離するための溶媒としてのエタノール使用の代替としては、窒素存在下で水に溶かしたＫＯＨの１ｍＭ溶液をカフェオイルキナ酸を完全に回収するまで有利に使用することができ、弱塩基溶離液をカチオン樹脂を用いてｐＨ５まで中和し、真空中で乾燥するまで濃縮する。

代替法として、吸収樹脂を用いて分離する代わりに、カフェオイルキナ酸を酸性ｐＨにおいて逆抽出し、有機膜を介して精密濾過し、セラミック膜を介してナノ濾過し、所望の濃度まで濃縮することにより単離し、次に噴霧器で乾燥することができる。

組み合わせた抽出物は、総コレステロール、ＬＤＬコレステロール、及び血糖の減少において際立った活性を実証している。ｃＨＤＬの増加、炎症性パラメータの調節、及び心血管系危険要素の減少もまた予想外であるが観察された。

本発明の好ましい一態様により、アーティチョーク抽出物の一部をコーヒー抽出物の一部と混合し、最終抽出物中に、ポリフェノール及びジカフェオイル誘導体の主要化合物であるクロロゲン酸のすべての異性体を得る。ルテオリン由来のフラボノイド及びシナロピクリンは、著しい脂質低下作用を示し、またＨＤＬの生合成を調製することにより肝臓の酵素に作用し、新規の組み合わせの幅広い活性を強化する。オリーブ抽出物、好ましくはＯｌｅａｓｅｌｅｃｔ（登録商標）と呼ばれる抽出物をこれらの化合物に添加することによって、メタボリックシンドロームの変性作用から完全に防護することにより、この混合物の活性が完全となる。

本発明による組み合わせは、総コレステロール、ＬＤＬコレステロール及び血糖値の減少、並びにｃＨＤＬ値の増加において際立った活性を実証し、それは文献に基づいては予測不可能であった。特に、この組み合わせは、食後血糖値を有意に減少させ、臨床的に、脂肪量を低減することにより体重の著しい減少に貢献する。

本発明による組み合わせは、以下の理由により、特に糖尿病において心血管系リスクを低減する：
ａ）血中脂質値の改善
ｂ）血糖値の低減
ｃ）肥満度指数（ＢＭＩ）の低減。

ｃＨＤＬの増加は、原発性の脂質代謝異常と、コレステロール値だけでなくｃＨＤＬ値も当然低下させる、コレステロール低下薬との併用療法により誘発される脂質代謝異常の両方に有効であるので、治療上非常に重要である。この組み合わせの利点は、上記パラメータにおいて活性である物質が、強力な生物学的に利用可能な抗酸化剤であり、その結果として吸収後に腸及び血管レベルの双方においてフリーラジカルを除去することができるという事実にある。血管壁への沈着に先行する現象であるｃＬＤＬコレステロール部分の酸化を防ぐ抗酸化機能は、肝臓にも発現し、これには肝臓の解毒作用、並びに過体重者及び様々な理由による糖尿病患者に認められる脂肪肝の低減という利点がある。

該組み合わせは、予期しなかったことだが、活性成分を同用量で摂取した個別の構成成分の活性より大きな活性を、特にＨＤＬコレステロールの増加及び肥満度指数（ＢＭＩ）の低減に関して有することが、臨床レベルで見いだされたのは驚くべきことである。

特に、スタチン又はコレステロール低減薬を用いた治療の後で、高脂質血症の患者とＨＤＬコレステロールが正常値未満の患者の双方において、ＨＤＬコレステロール値の予想外に高い増加が認められることを強調すべきである（かつ、これが本発明の核心である）。また、それは肥満及び脂質代謝異常の患者において目的とする抗炎症作用も効果的に有する。

アーティチョーク抽出物の数グラム／日投与の後における、中等度で一定しないＨＤＬコレステロール増加が文献に報告されているが、再現性又は一貫性の根拠が何もない。その上、コーヒー抽出物はカフェオイルキナ酸が最も豊富な植物であるにもかかわらず、アーティチョーク抽出物とコーヒー抽出物との組み合わせは成されていない。アーティチョークに関しては、ＨＤＬコレステロールと総コレステロールの低減の双方に関する、実質的に有意性の低い矛盾するデータが報告されている（Ｎａｔｕｒｍｅｄ、１３、１７〜２４、１９９８（非特許文献１）、Ａｒｚｎｅｉｍ−Ｆｏｒｓｃｈｕｎｇ、５０、２６０〜６５、２０００。Ｔｈｅ Ｃｏｃｈｒａｎｅ Ｌｉｂｒａｒｙ、２００２、Ｉｓｓｕｅ３）。

食後低血糖活性及び空腹時低血糖活性の双方を強化することにより、本発明による組み合わせは肥満度指数を有意に低減させるため、体重を減少させるための栄養補助的な使用に特に適切となる。

本発明による組成物を用いた実験は、総コレステロール及びＬＤＬコレステロールの約２５％の減少、並びにＨＤＬコレステロールの２０％の有意な増加を示している。この増加は、２３０〜２８０ｍｇ／ｄｌの範囲の総コレステロールを有する患者に関する事例研究で長い時間をかけて一定であることが見いだされ、これまでに公知の植物的調製においては示されていない。

本発明による製剤はまた、メタボリックシンドロームに罹患している様々な患者において異なるパラメータに効果を示しており、その血糖、脂質パラメータ、高血圧及び「静かな炎症」等のパラメータの正常化が認められた。

好ましい一態様により、本発明による組成物は、通常通り又は胃保護用のカプセル若しくは錠剤として製剤され、局部的な作用を促進し、一方、胃レベルで消化機能を不変なままに保つ。

該化合物は、アーティチョーク抽出物中に存在するシナロピクリン、並びにカフェオイルキナ酸及びＯｌｅａｓｅｌｅｃｔ（登録商標）中のポリフェノールの吸収を助長するために、ω−３脂肪酸が豊富な油中で、ヒトに投与することが望ましいであろう。

さらなる一態様により、本発明による組成物は有用な又は相補性の活性を有する他の物質と共に投与されてもよい。

本発明による組成物は、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｈａｎｄｂｏｏｋ」、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．、Ｎ．Ｙ．、ＵＳＡに記載されている方法等の従来的方法に従い、製剤される。特に、本発明による組成物は、従来の植物成分の製剤技術に従い製剤され、それには添加剤とカプセル本体との相互作用を避けるために特別の注意をする必要がある。経口製剤の例として、錠剤、糖衣錠、ソフトゼラチンカプセル及びハードゼラチンカプセル、並びにセルロースカプセルがある。

以下に提示する例は、さらに本発明を例証する
例１ コッフェア・アラビカ（Ｃｏｆｆｅａ ａｒａｂｉｃａ）抽出物の調製
１０Ｋｇのコッフェア・アラビカ豆を細かく擦り砕き、ｐＨを２．５に維持するために十分な分量のＨ_２ＳＯ_４を含有する、エタノールと水の８５％ｖ／ｖ混合物を用いて、カフェオイルキナ酸を完全に取り出すまで抽出する。抽出は５０℃の温度で実施する。水−アルコール溶液を１０Ｌまで濃縮し、次に水不溶性生成物を濾過する。水溶液をｐＨ７．６まで塩基性化し、存在するカフェインが殆ど全体的に除去されるまで、酢酸エチルとヘキサンの９：１混合物を用いて逆抽出する。真空中で残留溶媒を除去した後、溶液をｐＨ４まで酸性化し、４００ＤカットオフのＮ３０Ｆ膜を介してナノ濾過を行う。カフェオイルキナ酸を残留液中で濃縮し、一方、塩及び糖、並びに低分子量を有する所望しない生成物を透過液から除去する。残留液を乾燥残留物が１０％になるまで濃縮し、粉末化する。６００ｇの薄ベージュ色の抽出物を得て、それはカフェオイルキナ酸含有量をＨＰＬＣ測定により５６％、及びクロロゲン酸含有量３２％を有する。

例２ ソフトゼラチンカプセル
個々の組成物
アーティチョーク（Ｃｙｎａｒａ ｓｃｏｌｙｍｕｓ）抽出物 ２００ｍｇ
コッフェア・アラビカ（Ｃｏｆｆｅａ ａｒａｂｉｃａ）抽出物 １００ｍｇ
オリーブ（Ｏｌｅａ ｅｕｒｏｐａｅａ）抽出物 ２５０ｍｇ
大豆レシチン １０ｍｇ
アマニ油 十分量９００ｍｇ。

参考例３ 錠剤
個々の組成物
アーティチョーク抽出物 ２００ｍｇ
コッフェア・アラビカ抽出物 １５０ｍｇ
Ｏｌｅａｓｅｌｅｃｔ（登録商標） ２５０ｍｇ
微結晶性セルロース ３００ｍｇ
リン酸カルシウム二水和物 １００ｍｇ
二酸化ケイ素 １２ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ８ｍｇ。

例４ メタボリックシンドロームに罹患している患者の治療
総コレステロール、トリグリセリド、ＬＤＬコレステロール、及び血糖値の上昇を呈するメタボリックシンドローム患者４群を対象に臨床試験を行った。
４群の患者は、例２で報告した本発明による組成物（４群）、及び該組成物中に存在する同一量の活性な各構成成分、即ち、１群：コッフェア・アラビカ抽出物１００ｍｇ；２群：アーティチョーク抽出物２００ｍｇ；３群：Ｏｌｅａｓｅｌｅｃｔ（登録商標）２５０ｍｇを用いて３か月間処置した。主な食事の際にカプセルを投与した。総コレステロール、ＬＤＬコレステロール、ＨＤＬコレステロール、トリグリセリド、血糖及び肥満度指数（ＢＭＩ）の初期平均値、並びに１か月間の処置後のこれらの値の百分率変化を以下の表に示す。

Claims (12)

1. メタボリックシンドロームの薬物療法に使用するための組成物であって、
   該組成物は、
   ａ．３０〜４５重量％の範囲の含有量のカフェオイルキナ酸、８〜１６重量％の範囲の含有量のフラボノイド、及び１０〜１８重量％の含有量のシナロピクリンを有するシナーラ（Ｃｙｎａｒａ）抽出物と、
   ｂ．４０重量％〜８０重量％の範囲のカフェオイルキナ酸を含有するコッフェア（Ｃｏｆｆｅａ ｓｐｐ．）抽出物と、
   ｃ．５％を超える含有量のベルバスコシド及び１．５％を超える含有量のヒドロキシチロソールを有する、３０％〜４０％のポリフェノールを含有するオリーブ（Ｏｌｅａ ｅｕｒｏｐａｅａ）抽出物
   を含む
   ことを特徴とする組成物。
2. ２型糖尿病の薬物療法に使用するための組成物であって、
   該組成物は、
   ａ．３０〜４５重量％の範囲の含有量のカフェオイルキナ酸、８〜１６重量％の範囲の含有量のフラボノイド、及び１０〜１８重量％の含有量のシナロピクリンを有するシナーラ（Ｃｙｎａｒａ）抽出物と、
   ｂ．４０重量％〜８０重量％の範囲のカフェオイルキナ酸を含有するコッフェア（Ｃｏｆｆｅａ ｓｐｐ．）抽出物と、
   ｃ．５％を超える含有量のベルバスコシド及び１．５％を超える含有量のヒドロキシチロソールを有する、３０％〜４０％のポリフェノールを含有するオリーブ（Ｏｌｅａ ｅｕｒｏｐａｅａ）抽出物
   を含む
   ことを特徴とする組成物。
3. 高血糖症、高コレステロール血症、高血圧及び肥満の薬物療法に使用するための組成物であって、
   該組成物は、
   ａ．３０〜４５重量％の範囲の含有量のカフェオイルキナ酸、８〜１６重量％の範囲の含有量のフラボノイド、及び１０〜１８重量％の含有量のシナロピクリンを有するシナーラ（Ｃｙｎａｒａ）抽出物と、
   ｂ．４０重量％〜８０重量％の範囲のカフェオイルキナ酸を含有するコッフェア（Ｃｏｆｆｅａ ｓｐｐ．）抽出物と、
   ｃ．５％を超える含有量のベルバスコシド及び１．５％を超える含有量のヒドロキシチロソールを有する、３０％〜４０％のポリフェノールを含有するオリーブ（Ｏｌｅａ ｅｕｒｏｐａｅａ）抽出物
   を含む
   ことを特徴とする組成物。
4. 前記シナーラ抽出物が、含有量３５±２重量％のカフェオイルキナ酸、含有量１２±２重量％のフラボノイド、及び含有量１３±２重量％のシナロピクリンを有する
   ことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
5. 前記コッフェア抽出物が、含有量６０±２重量％のカフェオイルキナ酸を有する
   ことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
6. 前記オリーブ抽出物が、含有量３０±２％のポリフェノールを有し、ベルバスコシド濃度が５％を超え、ヒドロキシチロソール濃度が１．５％を超える
   ことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
7. シナーラ抽出物が、シナーラ・スコリムス（Ｃｙｎａｒａ ｓｃｏｌｙｍｕｓ）又はシナーラ・カルダンクルス（Ｃｙｎａｒａ ｃａｒｄｕｎｃｕｌｕｓ）の抽出物である
   ことを特徴とする、請求項１〜６のいずれかに記載の組成物。
8. 前記コッフェア抽出物が、コッフェア・アラビカ抽出物である
   ことを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
9. コッフェア及びオリーブの前記抽出物に対する前記シナーラ抽出物の重量比が０．５〜２の範囲である
   ことを特徴とする、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
10. シナーラ抽出物、コッフェア・アラビカ抽出物及びオリーブ抽出物の各量が１００〜３００ｍｇの範囲である
    ことを特徴とする、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
11. 前記組成物は、前記ａ〜ｃの抽出物と混合して、医薬として許容される少なくとも１種の賦形剤又は担体をさらに含む
    ことを特徴とする、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
12. 前記担体がω−３不飽和脂肪酸を含む油である
    ことを特徴とする、請求項１１に記載の組成物。