ES2613381T3 - Nuevos extractos de Cynara scolymus, Coffea spp. y Olea Europaea para el tratamiento de síndrome metabólico - Google Patents

Abstract

Composición que comprende: a. un extracto de Cynara que tiene un contenido de ácido cafeoilquínico en el intervalo de 30 a 45% por peso, un contenido de flavonoides en el intervalo de 8 a 16% por peso y un contenido de cinaropicrina en el intervalo de 10 a 18% por peso; b. un extracto de Coffea spp. que tiene un contenido de ácido cafeoilquínico en el intervalo de 40% a 80% por peso; c. un extracto de Olea Europaea que tiene un contenido de polifenoles en el intervalo de 30% a 40% con una concentración de verbascósido mayor de 5% y una concentración de hidroxitirosol mayor que 1.5%.

Description

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DESCRIPCION

Nuevos extractos de Cynara scolymus, Coffea spp. y Olea Europaea para el tratamiento de smdrome metabolico. Resumen de la invencion

La presente invencion se refiere a una combinacion nueva de extractos de Cynara scolymus, Olea Europaea y Coffea spp., que es util para la prevencion y tratamiento de la dislipidemia, la hiperglucemia, la inflamacion y la hipertension, que dichos parametros son caractensticos tanto de smdrome metabolico como de diabetes tipo 2. La normalizacion de dichos parametros tambien influye en el aumento del peso corporal que acompana dichos smdromes a traves de mecanismos indirectos de modificaciones hormonales asociados con la bioqmmica de la interaccion con los sistemas enzimaticos, reduciendo asf el riesgo cardiovascular.

En cuanto al aspecto de lfpidos, la combinacion de estos extractos ha demostrado aumentar significativamente el valor de colesterol HDL en pacientes con valores parametricos por debajo del promedio, cambiando favorablemente la proporcion LDL/HDL, especialmente en pacientes con riesgo de infarto de miocardio con dislipidemia de diferentes etiologfas.

Tambien se ha demostrado una interaccion de los polifenoles en el extracto de Olea Europaea con los mecanismos bioqmmicos del tejido adiposo que promueven la liberacion de citoquinas proinflamatorias. Dichas moleculas se consideran como iniciadores de los procesos que, mediante la alteracion del endotelio vascular, promueven la formacion de la placa aterosclerotica. Dichas actividades son adicionales a la capacidad de reducir los procesos oxidativos que afectan a los niveles de cLDL.

Tecnica anterior

Como se conoce en la literatura, los extractos de alcachofa (Cynara scolymus) son conocidos por su accion de coleretico, colagogo, reductor de la glucosa en sangre, antidispepticos y ligeramente reductor del colesterol; la reduccion del colesterol reportado en numerosos ensayos clmicos es modesta, y nunca supera el 10%, con variaciones entre los estudios debido a la calidad de los protocolos y la composicion de los extractos usados. De acuerdo con la literatura, las clases de ingredientes activos son acidos cafeoilquinicos, que realizan un efecto coleretico, hipoglucemiante y hepatoprotector; flavonoides, que realizan un efecto de reduccion de lfpidos asociado con la smtesis de colesterol; y cinaropicrina, que realiza una accion anti-inflamatoria debido a la interaccion con el factor nuclear NFkB y TNF-a.

El aceite de oliva se ha considerado siempre un ingrediente basico de la dieta mediterranea, que todavfa se conoce como la forma de prevencion mas natural del smdrome metabolico. El progreso continuo en los estudios cientfficos ha demostrado que una serie de micronutrientes que pertenecen a la clase qmmica de los polifenoles, que estan presentes en el aceite extra virgen, incluso mas que la composicion en acidos grasos, opera de forma sinergica a traves de la actividad antioxidante y la modulacion de numerosas actividades enzimaticas que defienden el endotelio de los vasos arteriales. El smdrome metabolico, que en los pafses occidentales se debe a la nutricion incorrecta y un estilo de vida sedentario, a menudo conduce a la dislipidemia y obesidad, con consecuencias adversas evidentes en el aparato cardiocirculatorio. El tejido adiposo en crecimiento es infiltrado por macrofagos, celulas de leucocitos que liberan citoquinas proinflamatorias y mediadoras de la inflamacion tales como COX-2 y iNOS; ademas, los acidos grasos circulantes actuan como mensajeros de las celulas adiposas a traves de los receptores TLR-4, que inducen la expresion de mediadores inflamatorios mediante la activacion de NF-kB o JNK. Esta cascada de eventos genera un estado llamado "inflamacion silenciosa", cuya accion agresiva contra el endotelio vascular provoca lesiones que actuan como el sitio del ataque de la placa de ateroma, que es el principal responsable de los smtomas ateroscleroticos y tromboticos que forman la base de las enfermedades cardiovasculares.

A comienzos de 1990, la clase qmmica de los polifenoles, metabolitos secundarios de las plantas, ya habfan sido identificados por su capacidad antioxidante, y se habfa observado que una dieta rica en estos compuestos se correlacionaba con una baja incidencia de enfermedades cardiovasculares y el envejecimiento de los tejidos.

En particular, dos polifenoles presentes en la parte soluble en agua del fruto de Olea Europaea, verbascosido e hidroxitirosol, no solo han demostrado su eficacia en pruebas in vitro, sino que tambien han dado resultados alentadores en ensayos clmicos. El hidroxitirosol ha recibido un dictamen favorable de la EFSA para la indicacion como un inhibidor de la oxidacion de LDL, uno de los fenomenos secundarios que inducen la formacion de placas de ateroma. Dichos dos polifenoles estan presentes en diferentes cantidades y proporciones en las diversas variedades de olivo, haciendolos mas o menos adecuados para la produccion de un extracto enriquecido.

El proceso requerido para obtener extractos de Cynara scolymus y Olea Europaea, que durante mucho tiempo se han conocido tanto en la medicina tradicional como alopatica, presenta grandes problemas de reproducibilidad y el contenido de ingrediente activo, con el resultado de que los datos clmicos son erraticos y de baja utilidad terapeutica en comparacion con los medicamentos actuales.

Los extractos de Coffea spp., preferentemente Coffea arabica, preparados a partir de los granos sin tostar, presentan problemas similares a los reportados para Cynara scolymus, ya que no existen procesos estandar que proporcionen

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reproducibilidad farmaceutica. La baja reproducibilidad de los extractos depende de varios factores, tales como la eleccion de la biomasa de la planta y de sus condiciones de secado. La produccion de la biomasa constituye una etapa crucial del proceso debido a las condiciones de secado, que son cruciales para mantener el contenido de ingrediente activo, dependen del penodo de crecimiento de la planta.

Una gran cantidad de literatura farmacologica y clmica atribuye muchas actividades de las alcachofas, aceitunas y cafe que dan salud, pero sin describir adecuadamente los extractos utilizados; de hecho, las alcachofas presentan problemas de composicion asociados con la degradacion de algunas familias de ingredientes activos.

La composicion del extracto de oliva esta influenciada por el uso de la variedad y de diferentes subproductos del aceite, mientras que la presencia o ausencia de cafema en los extractos de cafe implica problemas asociados con las actividades a menudo contradictorias de dicho compuesto.

Descripcion la invencion

La presente invencion se refiere a una composicion que comprende:

a. Extracto de Cynara que tiene un contenido de acido cafeoilqumico que va desde 30 a 45% por peso, un contenido de flavonoides que van de 8 a 16% por peso y un contenido de cinaropicrin que va desde 10 a 18% por peso;

b. Extracto de Coffea spp.que contiene entre 40% y 80% por peso de acidos cafeoilquinicos;

c. Extracto de Olea europaea que contiene entre 30% y 40% de polifenoles, con un contenido de verbascosido superior a 5% y un contenido de hidroxitirosol superior a 1.5%.

El extracto de Cynara sp. tiene preferentemente un contenido de acido cafeoilqumico de 35 ± 2%, un contenido de flavonoides de 12 ± 2%, y un contenido de cinaropicrin de 13 ± 2%.

El extracto de Coffea sp. tiene preferentemente un contenido de acido cafeoilqumico de 60 ± 2% por peso.

La proporcion en peso entre el extracto de Coffea sp. y el extracto de Cynara sp. Esta en el intervalo entre 0.5 y 2, y es preferentemente 1.

Las cantidades de extracto de Cynara, extracto de Coffea arabica y extracto de Olea Europaea en el intervalo de 100 a 300 mg.

Variedades seleccionadas de alcachofa, preferentemente Cynara scolymus o Cynara cardunculus, mas preferentemente Cynara scolymus, se usan para preparar el extracto segun la invencion. Los metodos de preparacion del extracto se reportan en WO 2007/006391 y WO 2008/107183.

El extracto de Olea europea, que es rico en hidroxitirosol y verbascosido, se puede preparar a partir de pulpa de oliva (US 6358542), despues de la extraccion de la matriz aceitosa por un procedimiento de preparacion que implica una extraccion de agua y alcohol, una etapa en la resina con elucion de agua y alcohol, y una etapa de secado final. El producto acabado presenta una concentracion de polifenoles final que excede el 30%, con un contenido de verbascosido superior a 5% y un contenido de hidroxitirosol superior a 1.5%. Se prefiere el uso de la variedad Coratina. El producto final, que tiene el nombre comercial Oleaselect®, ha demostrado una excelente actividad, tanto in vitro como en los voluntarios, manteniendo los parametros de dano al tejido bajo control, especialmente durante las comidas ricas en grasas, que son un importante factor de riesgo [Cerletti C. et al, Congreso SINUt de 2010, Milan].

El extracto de cafe se produjo mediante extraccion de agua y alcohol de los granos triturados, con alcoholes alifaticos, preferentemente con etanol, y despues de la eliminacion de la cafema por contraextraccion con acetato de etilo de acuerdo con el procedimiento descrito en los ejemplos, se concentro al vacfo hasta que se seco.

Los granos de Coffea arabica se extrajeron con etanol acuoso hasta que se agotaron de polifenoles, y los extractos parciales se combinaron y concentraron en el vacfo al agua; despues de la filtracion de los materiales insolubles la solucion acuosa se basifico con bicarbonato de sodio y se contraextrajo con una mezcla 9:1 de acetato de etilo/hexano para eliminar la cafema. Despues de la acidificacion a pH 2 la solucion acuosa se absorbio sobre una resina de absorcion de poliestireno en donde se eluyo con etanol. El extracto final se recogio y se concentro al vacfo hasta que se seco. Se obtuvo un extracto que contiene entre 40 y 80% de acidos cafeoilquinicos, normalmente 60%. Como una alternativa al uso de etanol como disolvente para la elucion de resinas de los acidos cafeoilquinicos, una solucion 1 mM de KOH en agua, en presencia de nitrogeno se puede utilizar ventajosamente hasta la recuperacion completa de los acidos cafeoilquinicos; el eluato debilmente basico se neutralizo con resina cationica a pH 5, y se concentro al vacm hasta que se seco.

Alternativamente, en lugar de ser aislados con resina de absorcion, los acidos cafeoilquinicos se pueden aislar por contraextraccion a un pH acido con microfiltracion a traves de membranas organicas y concentracion por nanofiltracion a traves de una membrana ceramica a la concentracion deseada, y despues secarse en un atomizador.

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Los extractos combinados han demostrado una actividad considerable en la reduccion de colesterol total, colesterol LDL y glucosa en sangre. Inesperadamente tambien se han observado el aumento de cHDL, la modulacion de los parametros inflamatorios y reduccion de factores de riesgo cardiovascular.

De acuerdo con un aspecto preferido de la invencion, una parte del extracto de alcachofa se mezcla con una parte del extracto de cafe para obtener, en el extracto final, todas las formas isomericas de acido clorogenico, que es el compuesto principal de la familia de polifenoles y derivados dicafeoil. Los flavonoides derivados de luteolina y cinaropicrina, que realizan una marcada accion de disminucion de lfpidos, tambien actuando sobre las enzimas en el hngado mediante la regulacion de la biosmtesis de la HDL, aumentan la actividad global de la nueva combinacion. La adicion de estos compuestos del extracto de Olea Europea, preferentemente el extracto llamado Oleaselect®, completa la actividad de esta mezcla, proporcionando una proteccion completa contra los efectos degenerativos del smdrome metabolico.

La combinacion de acuerdo con la invencion ha demostrado una actividad considerable en la reduccion del colesterol total, el colesterol LDL y los niveles de glucosa en la sangre y el aumento de los niveles de cHDL, que no era previsible sobre la base de la literatura. En particular, esta combinacion reduce significativamente el nivel postprandial de glucosa en sangre, clmicamente contribuyendo a una marcada reduccion en el peso corporal por reduccion de la masa grasa.

La combinacion de acuerdo con la invencion reduce el riesgo cardiovascular, especialmente en los diabeticos, por las siguientes razones:

a) Mejora de los niveles de lfpidos en sangre

b) Reduccion del nivel de glucosa en sangre

c) Reduccion del mdice de masa corporal (IMC).

El aumento de cHDL es de gran importancia terapeutica debido a que es activo tanto en la dislipidemia primaria como en la inducida por el tratamiento concomitante con medicamentos que disminuyen el colesterol, que naturalmente reducen el nivel de cHDL asf como el nivel de colesterol. La ventaja de esta combinacion reside en el hecho de que las sustancias activas de los parametros mencionados anteriormente son potentes antioxidantes biodisponibles que en consecuencia son capaces de eliminar los radicales libres, tanto a nivel intestinal como vascular despues de la absorcion. La funcion antioxidante que previene la oxidacion de la fraccion de colesterol cLDL, el fenomeno que precede a su deposito en la pared del vaso, tambien se desarrolla en el tngado con la ventaja de la desintoxicacion del tngado y la reduccion de la esteatosis hepatica observada en individuos con sobrepeso y, por diferentes razones, en los diabeticos.

Sorprendentemente, a nivel clmico se ha observado que la combinacion impredeciblemente posee una actividad mayor que la de los componentes individuales tomados a la misma dosis de ingredientes activos, especialmente en cuanto a aumentar el colesterol HDL y reducir el mdice de masa corporal (IMC).

En particular, se debe enfatizar (y este es el punto clave de la invencion) que el aumento inesperadamente alto en el colesterol HDL se observa tanto en los pacientes con hiperlipidemia como en aquellos con colesterol HDL debajo de lo normal despues del tratamiento con estatinas o medicamentos para reducir el colesterol. Tambien posee una accion antiinflamatoria dirigida eficaz en pacientes obesos y dislipidemicos.

Aumentos modestos, erraticos en el colesterol HDL tras la administracion de varios gramos por dfa de Cynara scolymus extractos se han reportado en la literatura, pero sin ninguna evidencia de reproducibilidad o consistencia. Por otra parte, el extracto de alcachofa nunca se ha combinado con el extracto de cafe, aunque el ultimo es la planta mas rica en acidos cafeoilqumicos. Para la alcachofa, se han reportado datos contradictorios de poca importancia practica para el colesterol HDL y la reduccion en el colesterol total (Naturmed, 13, 17-24,1998, Arzneim-Forschung, 50, 260-65, 2O0O. La Cochrane Library, 2002 Issue 3).

El fortalecimiento de la actividad hipoglucemiante tanto postprandial como en ayunas hace la combinacion de acuerdo con la invencion particularmente adecuada para uso nutraceutico para reducir el peso corporal, ya que reduce significativamente el mdice de masa corporal.

La experimentacion con las composiciones segun la invencion indica una reduccion de aproximadamente 25% en el colesterol LDL y colesterol total, y un aumento significativo del 20% en el colesterol HDL. Este incremento, que se observo constante en el tiempo en un estudio de caso de pacientes con colesterol total en el intervalo 230 a 280 mg/dl, nunca ha sido descrito con las preparaciones de hierbas conocidas previamente.

Las formulaciones de acuerdo con la invencion tambien han demostrado ser eficaces en diferentes parametros en una serie de pacientes que sufren de smdrome metabolico, en los que se observo la normalizacion de los parametros tales como la glucosa en sangre, los parametros de lfpidos, hipertension e "inflamacion silenciosa".

De acuerdo con un aspecto preferido, las composiciones segun la invencion se pueden formular como capsulas o tabletas normales o gastricamente, para promover la actividad local topica, dejando la funcion digestiva sin cambios al nivel del estomago.

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Dichos compuestos se administraran preferentemente a seres humanos en aceites ricos en acidos grasos omega-3 para facilitar la absorcion de la cinaropicrina presente en el extracto de Cynara scolymus y de los acidos cafeoilqumicos y polifenoles en Oleaselect®.

De acuerdo con otro aspecto, las composiciones de acuerdo con la invencion pueden administrarse junto con otras sustancias que poseen actividad util o complementaria.

Las composiciones farmaceuticas de acuerdo con la invencion se pueden formular de acuerdo con tecnicas convencionales, tales como las descritas en "Remington's Pharmaceutical Handbook", Mack Publishing Co., N.Y., USA. Particularmente, las composiciones de acuerdo con la invencion se formulan de acuerdo con tecnicas convencionales de formulacion de ingredientes de plantas, que requieren que se adopte especial cuidado para evitar interacciones con los excipientes y las matrices de las capsulas.

Ejemplos de formulaciones orales son comprimidos, grageas, capsulas de gelatina blandas y duras, y capsulas de celulosa.

Los ejemplos dados mas abajo ilustran ademas la invencion.

Ejemplo 1 - Preparacion del extracto de Coffea arabica

10 Kg de granos de Coffea arabica son molidos finamente y extrafdos con una mezcla del 85% v/v de etanol y agua que contiene una cantidad de H2SO4 suficiente para mantener el pH a 2.5, hasta el agotamiento de los acidos cafeoilqumicos. La extraccion se realiza a la temperatura de 50 ° C. La solucion de agua-alcohol se concentra a 10 L, y los productos insolubles en agua se filtran. La solucion acuosa se alcaliniza a pH 7.6 y se contraextrajo con una mezcla 9:1 de acetato de etilo y hexano hasta que la cafema presente haya sido casi totalmente eliminada. Despues de la eliminacion de los disolventes residuales en un vado, la solucion se acidifico a pH 4 y se sometio a nanofiltracion a traves de una membrana N30F con 400 D de valor de corte. Los acidos cafeoilqumicos se concentran en el retenido, mientras que las sales y los azucares y productos indeseables con un bajo peso molecular se eliminan del permeado. El retenido se concentra hasta un residuo seco de 10% y atomizado. Se obtienen 600 g de un extracto de color beige palido, que tiene un contenido de acido cafeoilqumico de 56%, medida por HPLC, y un contenido de acido clorogenico de 32%.

Ejemplo 2 - Capsulas de gelatina blanda

Composicion unitaria:

Extracto de Cynara scolymus Extracto de Coffea arabica 100 mg Extracto de Olea europea Lecitina de soya Aceite de linaza

200 mg

250 mg 10 mg

c.s. para 900 mg

Ejemplo de referencia 3 - Tabletas

Composicion unitaria:

Extracto de Cynara scolymus 200 mg

Extracto de Coffea arabica 150 mg Oleaselect® 250 mg

Celulosa microcristalina 300 mg

Dihidrato de fosfato de calcio 100 mg

Dioxido de silicio 12 mg

Estearato de magnesio 8 mg

Ejemplo 4 - Tratamiento de pacientes que sufren de smdrome metabolico

Un ensayo clmico se llevo a cabo en cuatro grupos de pacientes con smdrome metabolico que presentaban niveles elevados de colesterol total, trigliceridos, colesterol LDL, y los valores de glucosa en sangre.

Los cuatro grupos de pacientes fueron tratados durante tres meses con la composicion segun la invencion indicado en el ejemplo 2 (Grupo 4), y con los componentes activos de los mismos en las mismas cantidades presentes en la composicion:

Grupo 1: Extracto de Coffea arabica 100 mg; Grupo 2: Extracto de Cynara scolymus 200 mg; Grupo 3: Oleaselect® 250 mg.

Las capsulas se administraron a la comida principal. Los valores de medias iniciales de colesterol total, colesterol LDL, colesterol HDL, trigliceridos, glucosa en sangre y el mdice de masa corporal (IMC), y las variaciones porcentuales de los valores despues de un mes de tratamiento, se exponen en las tablas a continuacion.

Tabla 1

Grupo

Valor medio de colesterol total antes del tratamiento % de variacion en el valor medio de colesterol total despues de 1 mes de tratamiento Valor medio de colesterol LDL antes del tratamiento % de variacion en valor medio de colesterol LDL despues de 1 mes de tratamiento Valor medio de colesterol HDL antes del tratamiento % de variacion en el valor medio de colesterol HDL despues de 1 mes de tratamiento

Grupo 1 (10 pacientes)

267 -2.6 172 -3.4 35 -5.1

Grupo 2 (20 pacientes)

278 -4.1 188 -5.2 34 6.5

Grupo 3 (19 pacientes

271 -6.2 181 -5.6 36 3.2

Grupo 4 (23 pacientes)

275 -26 198 -24.8 33 25

Tabla 2

Grupo

Valor medio de trigliceridos antes del tratamiento % de variacion en valor medio de trigliceridos despues de 1 mes de tratamiento Valor medio de glucosa en la sangre antes del tratamiento % de variacion en valor medio de glucosa en sangre despues de 1 mes de tratamiento Valor medio del mdice de masa corporal IMC % de variacion en el valor medio del IMC despues de un mes de tratamiento

Grupo 1 (10 pacientes)

285 -5.1 142 -4.1 28 -0.2

Grupo 2 (20 pacientes)

256 -8.0 131 -4.9 29 -1.2

Grupo 3 (20 pacientes

273 -6.3 129 -1.6 27 -1.3

Grupo 4 (23 pacientes)

267 -41 130 -22.4 28 -8.5

Claims (13)

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   Reivindicaciones

   1. Composicion que comprende:

   a. un extracto de Cynara que tiene un contenido de acido cafeoilqumico en el intervalo de 30 a 45% por peso, un contenido de flavonoides en el intervalo de 8 a 16% por peso y un contenido de cinaropicrina en el intervalo de 10 a 18% por peso;

   b. un extracto de Coffea spp. que tiene un contenido de acido cafeoilqumico en el intervalo de 40% a 80% por peso;

   c. un extracto de Olea Europaea que tiene un contenido de polifenoles en el intervalo de 30% a 40% con una concentracion de verbascosido mayor de 5% y una concentracion de hidroxitirosol mayor que 1.5%.
2. 2. Composicion de acuerdo con la reivindicacion 1 en donde el extracto de Cynara tiene un contenido de acido cafeoilqumico de 35 ± 2% por peso, un contenido de flavonoides de 12 ± 2% por peso y un contenido de cinaropicrina de 13 ± 2% por peso.
3. 3. Composicion de acuerdo con la reivindicacion 1 en donde el extracto de Coffea spp. tiene un contenido de acido cafeoilqumico de 60 ± 2% por peso.
4. 4. Composicion de acuerdo con la reivindicacion 1 en donde el extracto de Olea Europaea tiene un contenido de polifenoles de 30 ± 2% con una concentracion verbascosido mayor que 5% y una concentracion de hidroxitirosol mayor que 1.5%.
5. 5. Composicion de acuerdo con las reivindicaciones 1-4 en donde el extracto de Cynara es el extracto de Cynara scolymus o Cynara cardunculus.
6. 6. Composicion de acuerdo con las reivindicaciones 1-5 en donde el extracto de Coffea spp. es el extracto de Coffea arabica.
7. 7. Composicion de acuerdo con las reivindicaciones 1-6 en donde la proporcion en peso del extracto de Cynara a los extractos de Coffea spp. y Olea Europaea esta en el intervalo de 0.5 a 2.
8. 8. Composicion de acuerdo con las reivindicaciones 1-7 en donde las cantidades de extracto de Cynara, extracto de Coffea arabica y extracto de Olea Europaea vanan de 100 a 300 mg.
9. 9. Composicion de acuerdo con las reivindicaciones 1-8 para su uso en el tratamiento farmacologico del smdrome metabolico.
10. 10. Composicion de acuerdo con las reivindicaciones 1-8 para uso en el tratamiento farmacologico de la diabetes tipo 2.
11. 11. Composicion de acuerdo con las reivindicaciones 1-8 para uso en el tratamiento farmacologico de la hiperglucemia, la hipercolesterolemia, la hipertension y la obesidad.
12. 12. Composicion farmaceutica que comprende como ingrediente activo una composicion de las reivindicaciones 18 en mezcla con al menos un excipiente o vehmulo farmaceuticamente aceptable.
13. 13. Composicion farmaceutica segun la reivindicacion 12 en donde el vehmulo es un aceite que comprende acidos grasos insaturados Omega-3.