JP6185553B2 - タンパク質又はペプチドの発現を改善するための人工核酸分子 - Google Patents
タンパク質又はペプチドの発現を改善するための人工核酸分子 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6185553B2 JP6185553B2 JP2015502142A JP2015502142A JP6185553B2 JP 6185553 B2 JP6185553 B2 JP 6185553B2 JP 2015502142 A JP2015502142 A JP 2015502142A JP 2015502142 A JP2015502142 A JP 2015502142A JP 6185553 B2 JP6185553 B2 JP 6185553B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- nucleic acid
- utr
- sequence
- gene
- nucleotides
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 title claims description 510
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 title claims description 338
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 title claims description 338
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims description 288
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims description 147
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 title description 69
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title description 47
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 508
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 499
- 108020003589 5' Untranslated Regions Proteins 0.000 claims description 363
- 108010033040 Histones Proteins 0.000 claims description 260
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims description 258
- 108020005345 3' Untranslated Regions Proteins 0.000 claims description 230
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 224
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 claims description 207
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 claims description 143
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 138
- 101150114197 TOP gene Proteins 0.000 claims description 131
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 105
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims description 86
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 82
- 230000014616 translation Effects 0.000 claims description 79
- 108091034057 RNA (poly(A)) Proteins 0.000 claims description 72
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 56
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 claims description 53
- 102000002278 Ribosomal Proteins Human genes 0.000 claims description 49
- 108010000605 Ribosomal Proteins Proteins 0.000 claims description 49
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 claims description 41
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 38
- 108091005902 Hemoglobin subunit alpha Proteins 0.000 claims description 36
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 claims description 27
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 27
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 23
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 23
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 23
- UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N cytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N 0.000 claims description 23
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims description 23
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 claims description 22
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 21
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 20
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 claims description 20
- 238000010367 cloning Methods 0.000 claims description 19
- 101150087698 alpha gene Proteins 0.000 claims description 17
- 108090000128 Lipoxygenases Proteins 0.000 claims description 16
- 108091000117 Tyrosine 3-Monooxygenase Proteins 0.000 claims description 16
- 108091005904 Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 claims description 15
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims description 15
- 102100024442 60S ribosomal protein L13 Human genes 0.000 claims description 12
- 101000691550 Homo sapiens 39S ribosomal protein L13, mitochondrial Proteins 0.000 claims description 12
- 101001118201 Homo sapiens 60S ribosomal protein L13 Proteins 0.000 claims description 12
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 12
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 claims description 11
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 claims description 11
- UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 1-beta-D-Xylofuranosyl-NH-Cytosine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 101150007523 32 gene Proteins 0.000 claims description 9
- 102100024406 60S ribosomal protein L15 Human genes 0.000 claims description 9
- UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N Cytidine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N 0.000 claims description 9
- 101001117935 Homo sapiens 60S ribosomal protein L15 Proteins 0.000 claims description 9
- 102100037563 40S ribosomal protein S2 Human genes 0.000 claims description 8
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 claims description 8
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 claims description 7
- 101000840051 Homo sapiens Ubiquitin-60S ribosomal protein L40 Proteins 0.000 claims description 6
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical group O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 claims description 6
- 102100028462 Ubiquitin-60S ribosomal protein L40 Human genes 0.000 claims description 6
- 102100033416 60S acidic ribosomal protein P1 Human genes 0.000 claims description 5
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 claims description 5
- 101000712357 Homo sapiens 60S acidic ribosomal protein P1 Proteins 0.000 claims description 5
- 101001108634 Homo sapiens 60S ribosomal protein L10 Proteins 0.000 claims description 5
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical group O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 claims description 5
- 102100026744 40S ribosomal protein S10 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100026726 40S ribosomal protein S11 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100023912 40S ribosomal protein S12 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100026357 40S ribosomal protein S13 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100023216 40S ribosomal protein S15 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100024113 40S ribosomal protein S15a Human genes 0.000 claims description 4
- 102100031571 40S ribosomal protein S16 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100039882 40S ribosomal protein S17 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100039980 40S ribosomal protein S18 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100033051 40S ribosomal protein S19 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100023415 40S ribosomal protein S20 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100037710 40S ribosomal protein S21 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100037513 40S ribosomal protein S23 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100033449 40S ribosomal protein S24 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100022721 40S ribosomal protein S25 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100027337 40S ribosomal protein S26 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100022681 40S ribosomal protein S27 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100023679 40S ribosomal protein S28 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100031928 40S ribosomal protein S29 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100033409 40S ribosomal protein S3 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100022600 40S ribosomal protein S3a Human genes 0.000 claims description 4
- 102100023779 40S ribosomal protein S5 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100033714 40S ribosomal protein S6 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100024088 40S ribosomal protein S7 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100037663 40S ribosomal protein S8 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100033731 40S ribosomal protein S9 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100027271 40S ribosomal protein SA Human genes 0.000 claims description 4
- 102100022406 60S ribosomal protein L10a Human genes 0.000 claims description 4
- 102100023990 60S ribosomal protein L17 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100032411 60S ribosomal protein L18 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100021690 60S ribosomal protein L18a Human genes 0.000 claims description 4
- 102100021206 60S ribosomal protein L19 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100037685 60S ribosomal protein L22 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100035322 60S ribosomal protein L24 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100028348 60S ribosomal protein L26 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100025601 60S ribosomal protein L27 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100021927 60S ribosomal protein L27a Human genes 0.000 claims description 4
- 102100021660 60S ribosomal protein L28 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100021671 60S ribosomal protein L29 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100040540 60S ribosomal protein L3 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100038237 60S ribosomal protein L30 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100023777 60S ribosomal protein L31 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100040637 60S ribosomal protein L34 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100022276 60S ribosomal protein L35a Human genes 0.000 claims description 4
- 102100022048 60S ribosomal protein L36 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100031002 60S ribosomal protein L36a Human genes 0.000 claims description 4
- 102100040131 60S ribosomal protein L37 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100036126 60S ribosomal protein L37a Human genes 0.000 claims description 4
- 102100030982 60S ribosomal protein L38 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100035988 60S ribosomal protein L39 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100026926 60S ribosomal protein L4 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100040623 60S ribosomal protein L41 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100026750 60S ribosomal protein L5 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100040924 60S ribosomal protein L6 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100035841 60S ribosomal protein L7 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100036630 60S ribosomal protein L7a Human genes 0.000 claims description 4
- 102100035931 60S ribosomal protein L8 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100041029 60S ribosomal protein L9 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100034003 FAU ubiquitin-like and ribosomal protein S30 Human genes 0.000 claims description 4
- 101000639726 Homo sapiens 28S ribosomal protein S12, mitochondrial Proteins 0.000 claims description 4
- 101001119189 Homo sapiens 40S ribosomal protein S10 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001119215 Homo sapiens 40S ribosomal protein S11 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000682687 Homo sapiens 40S ribosomal protein S12 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000718313 Homo sapiens 40S ribosomal protein S13 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000623543 Homo sapiens 40S ribosomal protein S15 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001118566 Homo sapiens 40S ribosomal protein S15a Proteins 0.000 claims description 4
- 101000706746 Homo sapiens 40S ribosomal protein S16 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000812077 Homo sapiens 40S ribosomal protein S17 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000811259 Homo sapiens 40S ribosomal protein S18 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000733040 Homo sapiens 40S ribosomal protein S19 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001098029 Homo sapiens 40S ribosomal protein S2 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001114932 Homo sapiens 40S ribosomal protein S20 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001097814 Homo sapiens 40S ribosomal protein S21 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001097953 Homo sapiens 40S ribosomal protein S23 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000656669 Homo sapiens 40S ribosomal protein S24 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000678929 Homo sapiens 40S ribosomal protein S25 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000862491 Homo sapiens 40S ribosomal protein S26 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000678466 Homo sapiens 40S ribosomal protein S27 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000623076 Homo sapiens 40S ribosomal protein S28 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000704060 Homo sapiens 40S ribosomal protein S29 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000656561 Homo sapiens 40S ribosomal protein S3 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000679249 Homo sapiens 40S ribosomal protein S3a Proteins 0.000 claims description 4
- 101000732165 Homo sapiens 40S ribosomal protein S4, X isoform Proteins 0.000 claims description 4
- 101000622644 Homo sapiens 40S ribosomal protein S5 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000656896 Homo sapiens 40S ribosomal protein S6 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000690200 Homo sapiens 40S ribosomal protein S7 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001097439 Homo sapiens 40S ribosomal protein S8 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000657066 Homo sapiens 40S ribosomal protein S9 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000694288 Homo sapiens 40S ribosomal protein SA Proteins 0.000 claims description 4
- 101000755323 Homo sapiens 60S ribosomal protein L10a Proteins 0.000 claims description 4
- 101000682512 Homo sapiens 60S ribosomal protein L17 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001087985 Homo sapiens 60S ribosomal protein L18 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000752293 Homo sapiens 60S ribosomal protein L18a Proteins 0.000 claims description 4
- 101001105789 Homo sapiens 60S ribosomal protein L19 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001097555 Homo sapiens 60S ribosomal protein L22 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000660926 Homo sapiens 60S ribosomal protein L24 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001080179 Homo sapiens 60S ribosomal protein L26 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000719728 Homo sapiens 60S ribosomal protein L27 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000753696 Homo sapiens 60S ribosomal protein L27a Proteins 0.000 claims description 4
- 101000676271 Homo sapiens 60S ribosomal protein L28 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000676246 Homo sapiens 60S ribosomal protein L29 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000673985 Homo sapiens 60S ribosomal protein L3 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001101319 Homo sapiens 60S ribosomal protein L30 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001113162 Homo sapiens 60S ribosomal protein L31 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000672659 Homo sapiens 60S ribosomal protein L34 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001110988 Homo sapiens 60S ribosomal protein L35a Proteins 0.000 claims description 4
- 101001110263 Homo sapiens 60S ribosomal protein L36 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001127203 Homo sapiens 60S ribosomal protein L36a Proteins 0.000 claims description 4
- 101001127258 Homo sapiens 60S ribosomal protein L36a-like Proteins 0.000 claims description 4
- 101000671735 Homo sapiens 60S ribosomal protein L37 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001092424 Homo sapiens 60S ribosomal protein L37a Proteins 0.000 claims description 4
- 101001127039 Homo sapiens 60S ribosomal protein L38 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000716179 Homo sapiens 60S ribosomal protein L39 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000691203 Homo sapiens 60S ribosomal protein L4 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000674326 Homo sapiens 60S ribosomal protein L41 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000691083 Homo sapiens 60S ribosomal protein L5 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000673524 Homo sapiens 60S ribosomal protein L6 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000853617 Homo sapiens 60S ribosomal protein L7 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000853243 Homo sapiens 60S ribosomal protein L7a Proteins 0.000 claims description 4
- 101000853659 Homo sapiens 60S ribosomal protein L8 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000672886 Homo sapiens 60S ribosomal protein L9 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000732045 Homo sapiens FAU ubiquitin-like and ribosomal protein S30 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000711369 Homo sapiens Probable ribosome biogenesis protein RLP24 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001115218 Homo sapiens Ubiquitin-40S ribosomal protein S27a Proteins 0.000 claims description 4
- 102100023341 Ubiquitin-40S ribosomal protein S27a Human genes 0.000 claims description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 108090000850 ribosomal protein S14 Proteins 0.000 claims description 4
- 102000004314 ribosomal protein S14 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100026112 60S acidic ribosomal protein P2 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100035916 60S ribosomal protein L11 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100025643 60S ribosomal protein L12 Human genes 0.000 claims description 3
- 101000691878 Homo sapiens 60S acidic ribosomal protein P2 Proteins 0.000 claims description 3
- 101001073740 Homo sapiens 60S ribosomal protein L11 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000575173 Homo sapiens 60S ribosomal protein L12 Proteins 0.000 claims description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 3
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 claims description 3
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 claims description 3
- 102100040768 60S ribosomal protein L32 Human genes 0.000 claims description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Chemical group O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Chemical group O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 claims description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 102100037965 60S ribosomal protein L21 Human genes 0.000 claims 1
- 102100021308 60S ribosomal protein L23 Human genes 0.000 claims 1
- 102100036116 60S ribosomal protein L35 Human genes 0.000 claims 1
- 101100511506 Bombyx mori LP3 gene Proteins 0.000 claims 1
- 101000661708 Homo sapiens 60S ribosomal protein L21 Proteins 0.000 claims 1
- 101000675833 Homo sapiens 60S ribosomal protein L23 Proteins 0.000 claims 1
- 101000672453 Homo sapiens 60S ribosomal protein L32 Proteins 0.000 claims 1
- 101000715818 Homo sapiens 60S ribosomal protein L35 Proteins 0.000 claims 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical group C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 132
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 63
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 58
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 46
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 44
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 44
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 42
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 42
- 230000006870 function Effects 0.000 description 42
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 40
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 35
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 34
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 33
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 33
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 31
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 31
- 108091023045 Untranslated Region Proteins 0.000 description 30
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 28
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 27
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 26
- 101100471181 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) crp-63 gene Proteins 0.000 description 24
- 101150061207 RPL32 gene Proteins 0.000 description 24
- 101100359081 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) rpl3001 gene Proteins 0.000 description 24
- 101150059313 rpmF gene Proteins 0.000 description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 description 23
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 21
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 21
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 20
- 150000003838 adenosines Chemical class 0.000 description 19
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 19
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 19
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 17
- -1 beta-D-erythrofuranosyl Chemical group 0.000 description 17
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 17
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 17
- 101001045218 Homo sapiens Peroxisomal multifunctional enzyme type 2 Proteins 0.000 description 16
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 16
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 16
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 16
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 16
- 102000006947 Histones Human genes 0.000 description 15
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 15
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 15
- 101150084750 1 gene Proteins 0.000 description 14
- 108010029483 alpha 1 Chain Collagen Type I Proteins 0.000 description 14
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 14
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 13
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 13
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 13
- 108700026220 vif Genes Proteins 0.000 description 13
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 12
- 108091027974 Mature messenger RNA Proteins 0.000 description 12
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 12
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 12
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 12
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 12
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 12
- 239000002719 pyrimidine nucleotide Substances 0.000 description 12
- 230000004044 response Effects 0.000 description 12
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 12
- 102000006772 Acid Ceramidase Human genes 0.000 description 11
- 108020005296 Acid Ceramidase Proteins 0.000 description 11
- 102100027685 Hemoglobin subunit alpha Human genes 0.000 description 11
- 102100039869 Histone H2B type F-S Human genes 0.000 description 11
- 101000861049 Homo sapiens Cytochrome c oxidase subunit 6C Proteins 0.000 description 11
- 101001035372 Homo sapiens Histone H2B type F-S Proteins 0.000 description 11
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 11
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 11
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 11
- 108020004566 Transfer RNA Proteins 0.000 description 11
- 210000005006 adaptive immune system Anatomy 0.000 description 11
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 11
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 11
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 11
- 241000894007 species Species 0.000 description 11
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 11
- 102100027573 ATP synthase subunit alpha, mitochondrial Human genes 0.000 description 10
- 102100024005 Acid ceramidase Human genes 0.000 description 10
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 10
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 10
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 10
- 101000936262 Homo sapiens ATP synthase subunit alpha, mitochondrial Proteins 0.000 description 10
- 102100022587 Peroxisomal multifunctional enzyme type 2 Human genes 0.000 description 10
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 10
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 10
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 10
- 102100034535 Histone H3.1 Human genes 0.000 description 9
- 101001067844 Homo sapiens Histone H3.1 Proteins 0.000 description 9
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 9
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 9
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 9
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 9
- 210000005007 innate immune system Anatomy 0.000 description 9
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 9
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 9
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 9
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 101150042997 21 gene Proteins 0.000 description 8
- 101150066375 35 gene Proteins 0.000 description 8
- 102100033312 Alpha-2-macroglobulin Human genes 0.000 description 8
- 108010015078 Pregnancy-Associated alpha 2-Macroglobulins Proteins 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 7
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 7
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 7
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 7
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 7
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 7
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 7
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 6
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 6
- 102100021519 Hemoglobin subunit beta Human genes 0.000 description 6
- 102000048218 Tyrosine 3-monooxygenases Human genes 0.000 description 6
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 6
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 6
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 6
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 6
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 6
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 102100030690 Histone H2B type 1-C/E/F/G/I Human genes 0.000 description 5
- 102100034523 Histone H4 Human genes 0.000 description 5
- 102100022823 Histone RNA hairpin-binding protein Human genes 0.000 description 5
- 101100443149 Homo sapiens HSD17B4 gene Proteins 0.000 description 5
- 101001084682 Homo sapiens Histone H2B type 1-C/E/F/G/I Proteins 0.000 description 5
- 101001067880 Homo sapiens Histone H4 Proteins 0.000 description 5
- 101000825762 Homo sapiens Histone RNA hairpin-binding protein Proteins 0.000 description 5
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 5
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 5
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 5
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 5
- 238000011239 genetic vaccination Methods 0.000 description 5
- 108060003196 globin Proteins 0.000 description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 5
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 5
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 5
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 5
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 5
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 5
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 5
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 5
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 5
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 5
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 5
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 5
- 102100040881 60S acidic ribosomal protein P0 Human genes 0.000 description 4
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical compound O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 4
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 4
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 4
- 102100039266 Histone H2A type 1-B/E Human genes 0.000 description 4
- 101000673456 Homo sapiens 60S acidic ribosomal protein P0 Proteins 0.000 description 4
- 101001009007 Homo sapiens Hemoglobin subunit alpha Proteins 0.000 description 4
- 101001036111 Homo sapiens Histone H2A type 1-B/E Proteins 0.000 description 4
- 102000018251 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Human genes 0.000 description 4
- 108010091358 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Proteins 0.000 description 4
- 241001045988 Neogene Species 0.000 description 4
- 108091036407 Polyadenylation Proteins 0.000 description 4
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 4
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 4
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 241000269370 Xenopus <genus> Species 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 4
- 210000003483 chromatin Anatomy 0.000 description 4
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 4
- 102000018146 globin Human genes 0.000 description 4
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 4
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 101150091879 neo gene Proteins 0.000 description 4
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 4
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 4
- 125000000714 pyrimidinyl group Chemical group 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 102100023247 60S ribosomal protein L23a Human genes 0.000 description 3
- 108010076130 Cleavage And Polyadenylation Specificity Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000011591 Cleavage And Polyadenylation Specificity Factor Human genes 0.000 description 3
- 108700010070 Codon Usage Proteins 0.000 description 3
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 3
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 108060002716 Exonuclease Proteins 0.000 description 3
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 3
- 101001115494 Homo sapiens 60S ribosomal protein L23a Proteins 0.000 description 3
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 3
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 3
- 108010007780 U7 Small Nuclear Ribonucleoprotein Proteins 0.000 description 3
- SIIZPVYVXNXXQG-KGXOGWRBSA-N [(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-4-[[(3s,4r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-3-hydroxyoxolan-2-yl]methyl [(2r,4r,5r)-2-(6-aminopurin-9-yl)-4-hydroxy-5-(phosphonooxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers C1=NC2=C(N)N=CN=C2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OC2[C@@H](O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@H]2O)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)[C@@H](O)[C@H]1OP(O)(=O)OCC([C@@H](O)[C@H]1O)OC1N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 SIIZPVYVXNXXQG-KGXOGWRBSA-N 0.000 description 3
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 description 3
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 3
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 description 3
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 3
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 3
- 108010048367 enhanced green fluorescent protein Proteins 0.000 description 3
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 3
- 102000013165 exonuclease Human genes 0.000 description 3
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 3
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000043679 human COX6c Human genes 0.000 description 3
- 102000055457 human HSD17B4 Human genes 0.000 description 3
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 3
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 3
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 3
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 2
- ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 2-deoxy-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)CC=O ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 0.000 description 2
- XHSQDZXAVJRBMX-DDHJBXDOSA-N 5,6-dichloro-1-β-d-ribofuranosylbenzimidazole Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=CC(Cl)=C(Cl)C=C2N=C1 XHSQDZXAVJRBMX-DDHJBXDOSA-N 0.000 description 2
- 102100031854 60S ribosomal protein L14 Human genes 0.000 description 2
- 208000035657 Abasia Diseases 0.000 description 2
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 2
- 108010083359 Antigen Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 2
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 2
- 102100027896 Cytochrome b-c1 complex subunit 7 Human genes 0.000 description 2
- 101100444936 Danio rerio eif3ha gene Proteins 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- 101150115146 EEF2 gene Proteins 0.000 description 2
- 101150039757 EIF3E gene Proteins 0.000 description 2
- 101150073788 EIF3K gene Proteins 0.000 description 2
- 101150028132 Eif3h gene Proteins 0.000 description 2
- 102100030801 Elongation factor 1-alpha 1 Human genes 0.000 description 2
- 102100040465 Elongation factor 1-beta Human genes 0.000 description 2
- 102100030808 Elongation factor 1-delta Human genes 0.000 description 2
- 102100023362 Elongation factor 1-gamma Human genes 0.000 description 2
- 102100031334 Elongation factor 2 Human genes 0.000 description 2
- 102100031780 Endonuclease Human genes 0.000 description 2
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 2
- 102100040015 Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit 3 Human genes 0.000 description 2
- 102100035045 Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit C Human genes 0.000 description 2
- 102100033132 Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit E Human genes 0.000 description 2
- 102100034255 Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit F Human genes 0.000 description 2
- 102100037115 Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit H Human genes 0.000 description 2
- 102100037110 Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit K Human genes 0.000 description 2
- 102100038085 Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit L Human genes 0.000 description 2
- 108700023157 Galactokinases Proteins 0.000 description 2
- 102000048120 Galactokinases Human genes 0.000 description 2
- 102100030993 Histone H2A-Bbd type 2/3 Human genes 0.000 description 2
- 102100033572 Histone H2B type 2-E Human genes 0.000 description 2
- 101000704267 Homo sapiens 60S ribosomal protein L14 Proteins 0.000 description 2
- 101000799972 Homo sapiens Alpha-2-macroglobulin Proteins 0.000 description 2
- 101000718108 Homo sapiens Androgen-induced gene 1 protein Proteins 0.000 description 2
- 101000875027 Homo sapiens Collagen alpha-1(X) chain Proteins 0.000 description 2
- 101001060428 Homo sapiens Cytochrome b-c1 complex subunit 7 Proteins 0.000 description 2
- 101000920078 Homo sapiens Elongation factor 1-alpha 1 Proteins 0.000 description 2
- 101000967447 Homo sapiens Elongation factor 1-beta Proteins 0.000 description 2
- 101000920062 Homo sapiens Elongation factor 1-delta Proteins 0.000 description 2
- 101001050451 Homo sapiens Elongation factor 1-gamma Proteins 0.000 description 2
- 101000959829 Homo sapiens Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit 3 Proteins 0.000 description 2
- 101000810389 Homo sapiens Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit L Proteins 0.000 description 2
- 101000899111 Homo sapiens Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 description 2
- 101000843305 Homo sapiens Histone H2A-Bbd type 2/3 Proteins 0.000 description 2
- 101000871966 Homo sapiens Histone H2B type 2-E Proteins 0.000 description 2
- 101000763579 Homo sapiens Toll-like receptor 1 Proteins 0.000 description 2
- 101000763537 Homo sapiens Toll-like receptor 10 Proteins 0.000 description 2
- 101000831567 Homo sapiens Toll-like receptor 2 Proteins 0.000 description 2
- 101000831496 Homo sapiens Toll-like receptor 3 Proteins 0.000 description 2
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 description 2
- 101000669460 Homo sapiens Toll-like receptor 5 Proteins 0.000 description 2
- 101000669406 Homo sapiens Toll-like receptor 6 Proteins 0.000 description 2
- 101000669402 Homo sapiens Toll-like receptor 7 Proteins 0.000 description 2
- 101000800483 Homo sapiens Toll-like receptor 8 Proteins 0.000 description 2
- 102100030703 Interleukin-22 Human genes 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 102000003820 Lipoxygenases Human genes 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100481579 Mus musculus Tlr11 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100481580 Mus musculus Tlr12 gene Proteins 0.000 description 2
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 2
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 2
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 2
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 2
- 101100279491 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) int6 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100225588 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) nip1 gene Proteins 0.000 description 2
- 108091081021 Sense strand Proteins 0.000 description 2
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 2
- 102000008235 Toll-Like Receptor 9 Human genes 0.000 description 2
- 108010060818 Toll-Like Receptor 9 Proteins 0.000 description 2
- 102100027010 Toll-like receptor 1 Human genes 0.000 description 2
- 102100027009 Toll-like receptor 10 Human genes 0.000 description 2
- 102100024333 Toll-like receptor 2 Human genes 0.000 description 2
- 102100024324 Toll-like receptor 3 Human genes 0.000 description 2
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 description 2
- 102100039357 Toll-like receptor 5 Human genes 0.000 description 2
- 102100039387 Toll-like receptor 6 Human genes 0.000 description 2
- 102100039390 Toll-like receptor 7 Human genes 0.000 description 2
- 102100033110 Toll-like receptor 8 Human genes 0.000 description 2
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 2
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 2
- DBFUQOZREOHGAV-UAKXSSHOSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(4-amino-5-bromo-2-oxopyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound C1=C(Br)C(N)=NC(=O)N1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 DBFUQOZREOHGAV-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 2
- YIJVOACVHQZMKI-JXOAFFINSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C(C)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 YIJVOACVHQZMKI-JXOAFFINSA-N 0.000 description 2
- VEWJOCYCKIZKKV-GBNDHIKLSA-N [[(2r,3s,4r,5s)-5-(2,4-dioxo-1h-pyrimidin-5-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1C1=CNC(=O)NC1=O VEWJOCYCKIZKKV-GBNDHIKLSA-N 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 2
- 230000003172 anti-dna Effects 0.000 description 2
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 2
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 2
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 2
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 2
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 2
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 101150093313 eIF3c gene Proteins 0.000 description 2
- 210000003162 effector t lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 101150081549 eif3f gene Proteins 0.000 description 2
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 102000049437 human A2M Human genes 0.000 description 2
- 102000044123 human COL10A1 Human genes 0.000 description 2
- 230000006303 immediate early viral mRNA transcription Effects 0.000 description 2
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 2
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000013011 mating Effects 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 2
- 230000034004 oogenesis Effects 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 2
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 2
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 2
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 2
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 2
- 239000002213 purine nucleotide Substances 0.000 description 2
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 2
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000009711 regulatory function Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 2
- 238000003151 transfection method Methods 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 2
- 229940075420 xanthine Drugs 0.000 description 2
- MPCAJMNYNOGXPB-UHFFFAOYSA-N 1,5-anhydrohexitol Chemical class OCC1OCC(O)C(O)C1O MPCAJMNYNOGXPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KHWCHTKSEGGWEX-RRKCRQDMSA-N 2'-deoxyadenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 KHWCHTKSEGGWEX-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- NCMVOABPESMRCP-SHYZEUOFSA-N 2'-deoxycytosine 5'-monophosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 NCMVOABPESMRCP-SHYZEUOFSA-N 0.000 description 1
- LTFMZDNNPPEQNG-KVQBGUIXSA-N 2'-deoxyguanosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 LTFMZDNNPPEQNG-KVQBGUIXSA-N 0.000 description 1
- AEFXDQOYZPPQPD-FBGCOTALSA-N 2-amino-9-[(2r,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3h-purin-6-one;1-[(2r,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidine-2,4-dione Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1.C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O AEFXDQOYZPPQPD-FBGCOTALSA-N 0.000 description 1
- 101710176159 32 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- ACMIJDVJWLMBCX-PXAZEXFGSA-N 4-[(3ar,6ar)-2,3,3a,4,6,6a-hexahydro-1h-pyrrolo[2,3-c]pyrrol-5-yl]-6-fluoro-n-methyl-2-(2-methylpyrimidin-5-yl)oxy-9h-pyrimido[4,5-b]indol-8-amine Chemical compound CNC1=CC(F)=CC(C2=C(N3C[C@@H]4NCC[C@@H]4C3)N=3)=C1NC2=NC=3OC1=CN=C(C)N=C1 ACMIJDVJWLMBCX-PXAZEXFGSA-N 0.000 description 1
- LZINOQJQXIEBNN-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybutyl dihydrogen phosphate Chemical compound OCCCCOP(O)(O)=O LZINOQJQXIEBNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IWFHOSULCAJGRM-UAKXSSHOSA-N 5-bromouridine 5'-triphosphate Chemical compound O1[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 IWFHOSULCAJGRM-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 1
- ZKBQDFAWXLTYKS-UHFFFAOYSA-N 6-Chloro-1H-purine Chemical compound ClC1=NC=NC2=C1NC=N2 ZKBQDFAWXLTYKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XYVLZAYJHCECPN-UHFFFAOYSA-L 6-aminohexyl phosphate Chemical compound NCCCCCCOP([O-])([O-])=O XYVLZAYJHCECPN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- RYYIULNRIVUMTQ-UHFFFAOYSA-N 6-chloroguanine Chemical compound NC1=NC(Cl)=C2N=CNC2=N1 RYYIULNRIVUMTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100022289 60S ribosomal protein L13a Human genes 0.000 description 1
- 101710187886 60S ribosomal protein L30 Proteins 0.000 description 1
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 108010068307 Alpha-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 102000002572 Alpha-Globulins Human genes 0.000 description 1
- 101800002638 Alpha-amanitin Proteins 0.000 description 1
- 102000006306 Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 101100472041 Arabidopsis thaliana RPL8A gene Proteins 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 1
- QCMYYKRYFNMIEC-UHFFFAOYSA-N COP(O)=O Chemical group COP(O)=O QCMYYKRYFNMIEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 206010008805 Chromosomal abnormalities Diseases 0.000 description 1
- 208000031404 Chromosome Aberrations Diseases 0.000 description 1
- UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N Coenzym Q(11) Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1O UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100034528 Core histone macro-H2A.1 Human genes 0.000 description 1
- 102100030670 Core histone macro-H2A.2 Human genes 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 241000257465 Echinoidea Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102100039950 Eukaryotic initiation factor 4A-I Human genes 0.000 description 1
- 102100022462 Eukaryotic initiation factor 4A-II Human genes 0.000 description 1
- 101100450032 Gallus gallus H2AZ2 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100039619 Granulocyte colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 102100037487 Histone H1.0 Human genes 0.000 description 1
- 102100039856 Histone H1.1 Human genes 0.000 description 1
- 102100023917 Histone H1.10 Human genes 0.000 description 1
- 102100039855 Histone H1.2 Human genes 0.000 description 1
- 102100027368 Histone H1.3 Human genes 0.000 description 1
- 102100027369 Histone H1.4 Human genes 0.000 description 1
- 102100022653 Histone H1.5 Human genes 0.000 description 1
- 102100033558 Histone H1.8 Human genes 0.000 description 1
- 102100023920 Histone H1t Human genes 0.000 description 1
- 102100039268 Histone H2A type 1-A Human genes 0.000 description 1
- 102100039265 Histone H2A type 1-C Human genes 0.000 description 1
- 102100039263 Histone H2A type 1-D Human genes 0.000 description 1
- 102100021642 Histone H2A type 2-A Human genes 0.000 description 1
- 102100027363 Histone H2A type 2-C Human genes 0.000 description 1
- 102100033550 Histone H2A-Bbd type 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100030994 Histone H2A.J Human genes 0.000 description 1
- 102100030673 Histone H2A.V Human genes 0.000 description 1
- 102100023919 Histone H2A.Z Human genes 0.000 description 1
- 102100034533 Histone H2AX Human genes 0.000 description 1
- 101710195517 Histone H2AX Proteins 0.000 description 1
- 102100030688 Histone H2B type 1-A Human genes 0.000 description 1
- 102100030687 Histone H2B type 1-B Human genes 0.000 description 1
- 102100030689 Histone H2B type 1-D Human genes 0.000 description 1
- 102100030650 Histone H2B type 1-H Human genes 0.000 description 1
- 102100030649 Histone H2B type 1-J Human genes 0.000 description 1
- 102100021639 Histone H2B type 1-K Human genes 0.000 description 1
- 102100021640 Histone H2B type 1-L Human genes 0.000 description 1
- 102100021637 Histone H2B type 1-M Human genes 0.000 description 1
- 102100021638 Histone H2B type 1-N Human genes 0.000 description 1
- 102100021544 Histone H2B type 1-O Human genes 0.000 description 1
- 102100039846 Histone H2B type F-M Human genes 0.000 description 1
- 102100027357 Histone H2B type W-T Human genes 0.000 description 1
- 102100034536 Histone H3.1t Human genes 0.000 description 1
- 102100033636 Histone H3.2 Human genes 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000681240 Homo sapiens 60S ribosomal protein L13a Proteins 0.000 description 1
- 101001067929 Homo sapiens Core histone macro-H2A.1 Proteins 0.000 description 1
- 101001084697 Homo sapiens Core histone macro-H2A.2 Proteins 0.000 description 1
- 101000959666 Homo sapiens Eukaryotic initiation factor 4A-I Proteins 0.000 description 1
- 101001044475 Homo sapiens Eukaryotic initiation factor 4A-II Proteins 0.000 description 1
- 101001026554 Homo sapiens Histone H1.0 Proteins 0.000 description 1
- 101001035402 Homo sapiens Histone H1.1 Proteins 0.000 description 1
- 101000905024 Homo sapiens Histone H1.10 Proteins 0.000 description 1
- 101001035375 Homo sapiens Histone H1.2 Proteins 0.000 description 1
- 101001009450 Homo sapiens Histone H1.3 Proteins 0.000 description 1
- 101001009443 Homo sapiens Histone H1.4 Proteins 0.000 description 1
- 101000899879 Homo sapiens Histone H1.5 Proteins 0.000 description 1
- 101000872218 Homo sapiens Histone H1.8 Proteins 0.000 description 1
- 101000905044 Homo sapiens Histone H1t Proteins 0.000 description 1
- 101001036104 Homo sapiens Histone H2A type 1-A Proteins 0.000 description 1
- 101001036109 Homo sapiens Histone H2A type 1-C Proteins 0.000 description 1
- 101001036112 Homo sapiens Histone H2A type 1-D Proteins 0.000 description 1
- 101000898905 Homo sapiens Histone H2A type 2-A Proteins 0.000 description 1
- 101001009465 Homo sapiens Histone H2A type 2-C Proteins 0.000 description 1
- 101000872104 Homo sapiens Histone H2A-Bbd type 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000843302 Homo sapiens Histone H2A.J Proteins 0.000 description 1
- 101001084711 Homo sapiens Histone H2A.V Proteins 0.000 description 1
- 101000905054 Homo sapiens Histone H2A.Z Proteins 0.000 description 1
- 101001067891 Homo sapiens Histone H2AX Proteins 0.000 description 1
- 101001084688 Homo sapiens Histone H2B type 1-A Proteins 0.000 description 1
- 101001084691 Homo sapiens Histone H2B type 1-B Proteins 0.000 description 1
- 101001084684 Homo sapiens Histone H2B type 1-D Proteins 0.000 description 1
- 101001084676 Homo sapiens Histone H2B type 1-H Proteins 0.000 description 1
- 101001084678 Homo sapiens Histone H2B type 1-J Proteins 0.000 description 1
- 101000898898 Homo sapiens Histone H2B type 1-K Proteins 0.000 description 1
- 101000898901 Homo sapiens Histone H2B type 1-L Proteins 0.000 description 1
- 101000898894 Homo sapiens Histone H2B type 1-M Proteins 0.000 description 1
- 101000898897 Homo sapiens Histone H2B type 1-N Proteins 0.000 description 1
- 101000898881 Homo sapiens Histone H2B type 1-O Proteins 0.000 description 1
- 101001035373 Homo sapiens Histone H2B type F-M Proteins 0.000 description 1
- 101001009399 Homo sapiens Histone H2B type W-T Proteins 0.000 description 1
- 101001067850 Homo sapiens Histone H3.1t Proteins 0.000 description 1
- 101000871895 Homo sapiens Histone H3.2 Proteins 0.000 description 1
- 101001002470 Homo sapiens Interferon lambda-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000853002 Homo sapiens Interleukin-25 Proteins 0.000 description 1
- 101000853000 Homo sapiens Interleukin-26 Proteins 0.000 description 1
- 101000998139 Homo sapiens Interleukin-32 Proteins 0.000 description 1
- 101001128431 Homo sapiens Myeloid-derived growth factor Proteins 0.000 description 1
- 101000979623 Homo sapiens Nucleoside diphosphate kinase B Proteins 0.000 description 1
- 101000609211 Homo sapiens Polyadenylate-binding protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000843169 Homo sapiens Putative histone H2B type 2-D Proteins 0.000 description 1
- 101000843236 Homo sapiens Testis-specific H1 histone Proteins 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 1
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 description 1
- 102100026720 Interferon beta Human genes 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 1
- 108090000177 Interleukin-11 Proteins 0.000 description 1
- 102000003815 Interleukin-11 Human genes 0.000 description 1
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 1
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 description 1
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 1
- 101800003050 Interleukin-16 Proteins 0.000 description 1
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 description 1
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 description 1
- 108090000171 Interleukin-18 Proteins 0.000 description 1
- 108050009288 Interleukin-19 Proteins 0.000 description 1
- 108010065637 Interleukin-23 Proteins 0.000 description 1
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 1
- 102100021596 Interleukin-31 Human genes 0.000 description 1
- 101710181613 Interleukin-31 Proteins 0.000 description 1
- 102100033501 Interleukin-32 Human genes 0.000 description 1
- 108010067003 Interleukin-33 Proteins 0.000 description 1
- 102000017761 Interleukin-33 Human genes 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 1
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 1
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 1
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 1
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 1
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 1
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 102000013967 Monokines Human genes 0.000 description 1
- 108010050619 Monokines Proteins 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 101100481581 Mus musculus Tlr13 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000012064 NLR Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005686 NOD-like receptors Proteins 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 101100338284 Nicotiana tabacum HIS2B gene Proteins 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 102100023258 Nucleoside diphosphate kinase B Human genes 0.000 description 1
- 108010047956 Nucleosomes Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 101100016305 Oryza sativa subsp. japonica H2B1 gene Proteins 0.000 description 1
- DEECAJKTIURQCA-LGZRFNTHSA-N P(O)(=O)(OP(=O)(O)OP(=O)(O)O)OC[C@@H]1[C@H]([C@H]([C@@H](O1)N1C(=O)N=C(N)C=N1)O)O.P(O)(=O)(OP(=O)(O)OP(=O)(O)O)OC[C@@H]1[C@H]([C@H]([C@@H](O1)N1C(=O)NC(=O)C(=C1)C)O)O Chemical compound P(O)(=O)(OP(=O)(O)OP(=O)(O)O)OC[C@@H]1[C@H]([C@H]([C@@H](O1)N1C(=O)N=C(N)C=N1)O)O.P(O)(=O)(OP(=O)(O)OP(=O)(O)O)OC[C@@H]1[C@H]([C@H]([C@@H](O1)N1C(=O)NC(=O)C(=C1)C)O)O DEECAJKTIURQCA-LGZRFNTHSA-N 0.000 description 1
- 108010068204 Peptide Elongation Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000002508 Peptide Elongation Factors Human genes 0.000 description 1
- 101000622060 Photinus pyralis Luciferin 4-monooxygenase Proteins 0.000 description 1
- 102100039427 Polyadenylate-binding protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010049404 Prokaryotic Initiation Factor-3 Proteins 0.000 description 1
- 102100031032 Putative histone H2B type 2-D Human genes 0.000 description 1
- 108091005685 RIG-I-like receptors Proteins 0.000 description 1
- 108020005144 RNA 5' Terminal Oligopyrimidine Sequence Proteins 0.000 description 1
- 230000021839 RNA stabilization Effects 0.000 description 1
- 230000004570 RNA-binding Effects 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102000004389 Ribonucleoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010081734 Ribonucleoproteins Proteins 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- RXGJTYFDKOHJHK-UHFFFAOYSA-N S-deoxo-amaninamide Natural products CCC(C)C1NC(=O)CNC(=O)C2Cc3c(SCC(NC(=O)CNC1=O)C(=O)NC(CC(=O)N)C(=O)N4CC(O)CC4C(=O)NC(C(C)C(O)CO)C(=O)N2)[nH]c5ccccc35 RXGJTYFDKOHJHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100016310 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) HTB1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100527654 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) RPL4A gene Proteins 0.000 description 1
- 101100527652 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) rpl402 gene Proteins 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 101710137500 T7 RNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 102100031010 Testis-specific H1 histone Human genes 0.000 description 1
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 1
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 1
- 108091026823 U7 small nuclear RNA Proteins 0.000 description 1
- DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N Uridinemonophosphate Natural products OC1C(O)C(COP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GKVHYBAWZAYQDO-XVFCMESISA-N [[(2r,3s,4r,5r)-3,4-dihydroxy-5-(2-oxo-4-sulfanylidenepyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound O1[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1N1C(=O)NC(=S)C=C1 GKVHYBAWZAYQDO-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- KHYOUGAATNYCAZ-XVFCMESISA-N [[(2r,3s,4r,5r)-3,4-dihydroxy-5-(4-oxo-2-sulfanylidenepyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound O1[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1N1C(=S)NC(=O)C=C1 KHYOUGAATNYCAZ-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- ABOQIBZHFFLOGM-UAKXSSHOSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-3,4-dihydroxy-5-(5-iodo-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound O1[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 ABOQIBZHFFLOGM-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 1
- QTWNSBVFPSAMPO-IOSLPCCCSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-3,4-dihydroxy-5-(6-imino-1-methylpurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound C1=NC=2C(=N)N(C)C=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O QTWNSBVFPSAMPO-IOSLPCCCSA-N 0.000 description 1
- LCQWKKZWHQFOAH-IOSLPCCCSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-3,4-dihydroxy-5-[6-(methylamino)purin-9-yl]oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound C1=NC=2C(NC)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O LCQWKKZWHQFOAH-IOSLPCCCSA-N 0.000 description 1
- CABDYDUZLRXGTB-UUOKFMHZSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(2,6-diaminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound C12=NC(N)=NC(N)=C2N=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O CABDYDUZLRXGTB-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- YWHNPOKVSACYOQ-KQYNXXCUSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(2-amino-1-methyl-6-oxopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound C1=NC=2C(=O)N(C)C(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O YWHNPOKVSACYOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- GLIPDAOPPNSQCA-KQYNXXCUSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(2-amino-6-methoxypurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound C1=NC=2C(OC)=NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O GLIPDAOPPNSQCA-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- NCKFQXVRKKNRBB-SHUUEZRQSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(3,5-dioxo-1,2,4-triazin-2-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=N1 NCKFQXVRKKNRBB-SHUUEZRQSA-N 0.000 description 1
- ZPZGYYNOHSQDQC-UAKXSSHOSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(4-amino-5-iodo-2-oxopyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound C1=C(I)C(N)=NC(=O)N1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 ZPZGYYNOHSQDQC-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 1
- GVVRDIINMFAFEO-KCGFPETGSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(4-aminopyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound C1=CC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O GVVRDIINMFAFEO-KCGFPETGSA-N 0.000 description 1
- PQISXOFEOCLOCT-UUOKFMHZSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(6-amino-8-azidopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound [N-]=[N+]=NC1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O PQISXOFEOCLOCT-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- WDPOFPOWJQWIPX-UUOKFMHZSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(7-aminotriazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound N1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O WDPOFPOWJQWIPX-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 125000002015 acyclic group Chemical group 0.000 description 1
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N adenosine monophosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)C(OP(O)(O)=O)C1O LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 1
- 239000004007 alpha amanitin Substances 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CIORWBWIBBPXCG-SXZCQOKQSA-N alpha-amanitin Chemical compound O=C1N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N2C[C@H](O)C[C@H]2C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)[C@@H](O)CO)C(=O)N[C@@H](C2)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@H]1C[S@@](=O)C1=C2C2=CC=C(O)C=C2N1 CIORWBWIBBPXCG-SXZCQOKQSA-N 0.000 description 1
- CIORWBWIBBPXCG-UHFFFAOYSA-N alpha-amanitin Natural products O=C1NC(CC(N)=O)C(=O)N2CC(O)CC2C(=O)NC(C(C)C(O)CO)C(=O)NC(C2)C(=O)NCC(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NCC(=O)NC1CS(=O)C1=C2C2=CC=C(O)C=C2N1 CIORWBWIBBPXCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 239000013602 bacteriophage vector Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- BPKIGYQJPYCAOW-FFJTTWKXSA-I calcium;potassium;disodium;(2s)-2-hydroxypropanoate;dichloride;dihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[Na+].[Na+].[Cl-].[Cl-].[K+].[Ca+2].C[C@H](O)C([O-])=O BPKIGYQJPYCAOW-FFJTTWKXSA-I 0.000 description 1
- 125000002837 carbocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 229920006317 cationic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 150000001793 charged compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013599 cloning vector Substances 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- IERHLVCPSMICTF-XVFCMESISA-N cytidine 5'-monophosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 IERHLVCPSMICTF-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- IERHLVCPSMICTF-UHFFFAOYSA-N cytidine monophosphate Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(COP(O)(O)=O)O1 IERHLVCPSMICTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- GYOZYWVXFNDGLU-XLPZGREQSA-N dTMP Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 GYOZYWVXFNDGLU-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K dioxido-sulfanylidene-sulfido-$l^{5}-phosphane Chemical compound [O-]P([O-])([S-])=S NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 210000001808 exosome Anatomy 0.000 description 1
- 231100000221 frame shift mutation induction Toxicity 0.000 description 1
- 230000037433 frameshift Effects 0.000 description 1
- 108091006104 gene-regulatory proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000034356 gene-regulatory proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000016361 genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003144 genetic modification method Methods 0.000 description 1
- 230000012178 germinal center formation Effects 0.000 description 1
- 125000003976 glyceryl group Chemical group [H]C([*])([H])C(O[H])([H])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- RQFCJASXJCIDSX-UUOKFMHZSA-N guanosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O RQFCJASXJCIDSX-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- 235000013928 guanylic acid Nutrition 0.000 description 1
- PHNWGDTYCJFUGZ-UHFFFAOYSA-L hexyl phosphate Chemical compound CCCCCCOP([O-])([O-])=O PHNWGDTYCJFUGZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000054999 human core Human genes 0.000 description 1
- 108700026469 human core Proteins 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 239000000677 immunologic agent Substances 0.000 description 1
- 229940124541 immunological agent Drugs 0.000 description 1
- 230000006054 immunological memory Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 108090000681 interleukin 20 Proteins 0.000 description 1
- 108010074108 interleukin-21 Proteins 0.000 description 1
- 108010074109 interleukin-22 Proteins 0.000 description 1
- 108090000237 interleukin-24 Proteins 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 235000011475 lollipops Nutrition 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000003670 luciferase enzyme activity assay Methods 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000005210 lymphoid organ Anatomy 0.000 description 1
- 102000004356 mRNA Cleavage and Polyadenylation Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010042176 mRNA Cleavage and Polyadenylation Factors Proteins 0.000 description 1
- 230000034701 macropinocytosis Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 210000001806 memory b lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003071 memory t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 1
- 101150112128 mrpl2 gene Proteins 0.000 description 1
- OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-(2-naphthalen-1-ylsulfanylphenyl)methanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1SC1=CC=CC2=CC=CC=C12 OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 108091027963 non-coding RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 description 1
- 210000001623 nucleosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000014207 opsonization Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 1
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 description 1
- UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M phosphonate Chemical compound [O-]P(=O)=O UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108091023021 poly(A) binding Proteins 0.000 description 1
- 102000028499 poly(A) binding Human genes 0.000 description 1
- 210000002729 polyribosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000029279 positive regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 239000011241 protective layer Substances 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 125000000561 purinyl group Chemical group N1=C(N=C2N=CNC2=C1)* 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 230000037425 regulation of transcription Effects 0.000 description 1
- 230000009712 regulation of translation Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 1
- 101150003660 rpl2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150027142 rpl8 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150015255 rplB gene Proteins 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000005451 thionucleotide Substances 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007039 two-step reaction Methods 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- DJJCXFVJDGTHFX-XVFCMESISA-N uridine 5'-monophosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- 229960005502 α-amanitin Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
- A61K48/0008—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'non-active' part of the composition delivered, e.g. wherein such 'non-active' part is not delivered simultaneously with the 'active' part of the composition
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/67—General methods for enhancing the expression
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5156—Animal cells expressing foreign proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5256—Virus expressing foreign proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/50—Physical structure
- C12N2310/53—Physical structure partially self-complementary or closed
- C12N2310/531—Stem-loop; Hairpin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/50—Methods for regulating/modulating their activity
- C12N2320/52—Methods for regulating/modulating their activity modulating the physical stability, e.g. GC-content
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2840/00—Vectors comprising a special translation-regulating system
- C12N2840/10—Vectors comprising a special translation-regulating system regulates levels of translation
- C12N2840/105—Vectors comprising a special translation-regulating system regulates levels of translation enhancing translation
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
a. TOP遺伝子の5’UTRに由来するか又はTOP遺伝子の5’UTRの変異体に由来する核酸配列を含むか又はからなる少なくとも1つの5’−非翻訳領域エレメント(5’UTRエレメント)と、
b. 少なくとも1つのオープンリーディングフレーム(ORF)と
とを含む人工核酸分子に関する。
c. 少なくとも1つのヒストンステムループ
を更に含む。
a. TOP遺伝子の5’UTRに由来するか又は上記TOP遺伝子の5’UTRの変異体に由来する核酸配列を含むか又はからなる少なくとも1つの5’−非翻訳領域エレメント(5’UTRエレメント)と、
b. 少なくとも1つのオープンリーディングフレーム(ORF)と
c. 少なくとも1つのヒストンステムループと
を含むことが特に好ましい。
PPAx=(E1x−E0x)+(E2x−E0x)+E0x
E0は、コンストラクトE0(5’UTRエレメント及びヒストンステムループを有しない)について得られるタンパク質の量であり、E1は、コンストラクトE1について得られるタンパク質の量であり、E2は、コンストラクトE2について得られるタンパク質の量であり、xは、発現開始後の時点である。E1E2x=PPAxである場合、タンパク質産生増加効果は、相加的であり、E1E2x>PPAxである場合、本発明における意味で相乗的である。ここで、E1E2xは、時点xにおいてコンストラクトE1E2から得られるタンパク質の量である。好ましくは、E1E2は、発現開始の24時間後、48時間後、又は72時間後等の発現開始後の所与の時点において、PPAの少なくとも1.0倍、より好ましくは少なくとも1.1倍、より好ましくは少なくとも1.3倍、より好ましくは少なくとも1.5倍、更により好ましくは少なくとも1.75倍である。
式(I)(ステム境界エレメントを含まないステムループ配列):
ステム1又はステム2の境界エレメントN1−6は、1個〜6個、好ましくは2個〜6個、より好ましくは2個〜5個、更により好ましくは3個〜5個、最も好ましくは4個〜5個、又は5個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、
ステム1[N0−2GN3−5]は、エレメントステム2に対して逆相補的であるか又は部分的に逆相補的であり、且つ5個〜7個のヌクレオチドの連続配列であり、N0−2は、0個〜2個、好ましくは0個〜1個、より好ましくは1個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、N3−5は、3個〜5個、好ましくは4個〜5個、より好ましくは4個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、Gは、グアノシン又はそのアナログであり、任意でシチジン又はそのアナログによって置換されてもよいが、但し、その場合、ステム2におけるその相補的ヌクレオチドであるシチジンも、グアノシンによって置換され、
ループ配列[N0−4(U/T)N0−4]は、エレメントステム1とステム2との間に位置し、且つ3個〜5個のヌクレオチド、より好ましくは4個のヌクレオチドの連続配列であり、各N0−4は、互いに独立して、0個〜4個、好ましくは1個〜3個、より好ましくは1個〜2個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、U/Tは、ウリジン又は任意でチミジンを表し、
ステム2[N3−5CN0−2]は、エレメントステム1に対して逆相補的であるか又は部分的に逆相補的であり、且つ5個〜7個のヌクレオチドの連続配列であり、N3−5は、3個〜5個、好ましくは4個〜5個、より好ましくは4個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、N0−2は、0個〜2個、好ましくは0個〜1個、より好ましくは1個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、Cは、シチジン又はそのアナログであり、任意でグアノシン又はそのアナログによって置換されてもよいが、但し、その場合、ステム1におけるその相補的ヌクレオチドであるグアノシンも、シチジンによって置換され、
ステム1及びステム2は、互いに塩基対合して逆相補的配列を形成することができる(前記塩基対合は、例えば、ヌクレオチドAとU/T又はGとCとのワトソン−クリック塩基対合、又は非ワトソン−クリック塩基対合(例えば、ゆらぎ塩基対合、逆ワトソン−クリック塩基対合、フーグスティーン塩基対合、逆フーグスティーン塩基対合)によってステム1とステム2との間で生じ得る)か、或いは、互いに塩基対合して部分的に逆相補的な配列を形成することができる(1つのステムにおける1以上の塩基が、他のステムの逆相補的な配列に対して相補的塩基を有しないことに基づいて、ステム1とステム2との間で不完全な塩基対合が生じ得る)。
式(Ia)(ステム境界エレメントを含まないステムループ配列):
式(IIb)(ステム境界エレメントを含まないステムループ配列):
式(Ic)(ステム境界エレメントを含まない後生動物及び原生動物のヒストンステムループコンセンサス配列):
VGYYYYHHTHRVVRCB(式(Ic)に係る配列番号1,403)
SGYYYTTYTMARRRCS(式(Ic)に係る配列番号1,404)
SGYYCTTTTMAGRRCS(式(Ic)に係る配列番号1,405)
DGNNNBNNTHVNNNCH(式(Ie)に係る配列番号1,406)
RGNNNYHBTHRDNNCY(式(Ie)に係る配列番号1,407)
RGNDBYHYTHRDHNCY(式(Ie)に係る配列番号1,408)
VGYYYTYHTHRVRRCB(式(If)に係る配列番号1,409)
SGYYCTTYTMAGRRCS(式(If)に係る配列番号1,410)
SGYYCTTTTMAGRRCS(式(If)に係る配列番号1,411)
GGYYCTTYTHAGRRCC(式(Ig)に係る配列番号1,412)
GGCYCTTYTMAGRGCC(式(Ig)に係る配列番号1,413)
GGCTCTTTTMAGRGCC(式(Ig)に係る配列番号1,414)
DGHYCTDYTHASRRCC(式(Ih)に係る配列番号1,415)
GGCYCTTTTHAGRGCC(式(Ih)に係る配列番号1,416)
GGCYCTTTTMAGRGCC(式(Ih)に係る配列番号1,417)
H*H*HHVVGYYYYHHTHRVVRCBVHH*N*N*(式(IIc)に係る配列番号1,418)
M*H*MHMSGYYYTTYTMARRRCSMCH*H*H*(式(IIc)に係る配列番号1,419)
M*M*MMMSGYYCTTTTMAGRRCSACH*M*H*(式(IIc)に係る配列番号1,420)
N*N*NNNDGNNNBNNTHVNNNCHNHN*N*N*(式(IIe)に係る配列番号1,421)
N*N*HHNRGNNNYHBTHRDNNCYDHH*N*N*(式(IIe)に係る配列番号1,422)
N*H*HHVRGNDBYHYTHRDHNCYRHH*H*H*(式(IIe)に係る配列番号1,423)
H*H*MHMVGYYYTYHTHRVRRCBVMH*H*N*(式(IIf)に係る配列番号1,424)
M*M*MMMSGYYCTTYTMAGRRCSMCH*H*H*(式(IIf)に係る配列番号1,425)
M*M*MMMSGYYCTTTTMAGRRCSACH*M*H*(式(IIf)に係る配列番号1,426)
H*H*MAMGGYYCTTYTHAGRRCCVHN*N*M*(式(IIg)に係る配列番号1,427)
H*H*AAMGGCYCTTYTMAGRGCCVCH*H*M*(式(IIg)に係る配列番号1,428)
M*M*AAMGGCTCTTTTMAGRGCCMCY*M*M*(式(IIg)に係る配列番号1,429)
N*H*AAHDGHYCTDYTHASRRCCVHB*N*H*(式(IIh)に係る配列番号1,430)
H*H*AAMGGCYCTTTTHAGRGCCVMY*N*M*(式(IIh)に係る配列番号1,431)
H*M*AAAGGCYCTTTTMAGRGCCRMY*H*M*(式(IIh)に係る配列番号1,432)
a. TOP遺伝子の5’UTRに由来するか又は上記TOP遺伝子の5’UTRの変異体に由来する核酸配列を含むか又はからなる少なくとも1つの5’−非翻訳領域エレメント(5’UTRエレメント)と、
b. 少なくとも1つのオープンリーディングフレーム(ORF)と、
c. 少なくとも1つのヒストンステムループであって、好ましくは、前記ヒストンステムループの配列が、式(I)又は(Ia)〜(Ih)又は(II)又は(IIa)〜(IIh)に係る配列からなる群より選択される配列、例えば、配列番号1,391〜1,433からなる群より選択される配列、好ましくは、配列番号1,403〜1,433からなる群より選択される配列であるヒストンステムループと
を含む人工核酸分子を提供する。
幾つかの実施形態では、要素(c.)に係るヒストンステムループ配列は、マウスヒストン遺伝子、例えば、マウスヒストン遺伝子H2A614には由来しない。1つの実施形態では、本発明の人工核酸分子は、マウスヒストンステムループ配列もマウスヒストン遺伝子H2A614も含有しない。更に、1つの実施形態では、本発明の人工核酸分子は、ステムループプロセシングシグナル、より具体的には、マウスヒストンプロセシングシグナル、最も具体的には、マウスヒストンステムループプロセシングシグナルH2kA614を含有しない。また、1つの実施形態では、本発明の核酸分子は、少なくとも1つの哺乳類ヒストン遺伝子を含有していてよい。しかし、1つの実施形態では、少なくとも1つの哺乳類ヒストン遺伝子は、国際特許公開第01/1,2824号パンフレットに記載の配列番号7ではない。
(a.)本明細書に記載するTOP遺伝子に由来する少なくとも1つの5’UTRエレメントと、
(b.)好ましくはペプチド又はタンパク質をコードしている少なくとも1つのオープンリーディングフレームと、
(c.)本明細書に記載する、任意でヒストンステムループの3’側にヒストン下流要素を含まない少なくとも1つのヒストンステムループと、
(d.)ポリ(A)配列及び/又はポリアデニル化シグナル。
(a.)上記TOP遺伝子に由来する少なくとも1つの5’UTRエレメントと、
(b.)好ましくはペプチド又はタンパク質をコードしている少なくとも1つのオープンリーディングフレームと、
(d.)ポリ(A)配列と、
(c.)本明細書に記載する少なくとも1つのヒストンステムループ。
(a.)TOP遺伝子の5’UTRに由来するか又はTOP遺伝子の5’UTRの変異体に由来する核酸配列を含むか又はからなる少なくとも1つの5’−非翻訳領域エレメント(5’UTRエレメント)と;
(b.)少なくとも1つのオープンリーディングフレーム(ORF)と;
(c.)ヒストンステムループと;
(d.)ポリ(A)配列及び/又はポリアデニル化シグナルであって、前記ポリ(A)配列が、前記ヒストンステムループの5’側又は3’側に位置するポリ(A)配列及び/又はポリアデニル化シグナル。
PPAx=(E1x−E0x)+(E2x−E0x)+E0x
E0は、コンストラクトE0(UTRを有しない)について得られるタンパク質の量であり、E1は、コンストラクトE1について得られるタンパク質の量であり、E2は、コンストラクトE2について得られるタンパク質の量であり、xは、発現開始後の時点である。E1E2x=PPAxである場合、タンパク質産生増加効果は、相加的であり、E1E2x>PPAxである場合、本発明における意味で相乗的である。ここで、E1E2xは、時点xにおいてコンストラクトE1E2から得られるタンパク質の量である。好ましくは、E1E2は、発現開始の24時間後、48時間後、又は72時間後等の発現開始後の所与の時点において、PPAの少なくとも1.0倍、より好ましくは少なくとも1.1倍、より好ましくは少なくとも1.3倍、より好ましくは少なくとも1.5倍、更により好ましくは少なくとも1.75倍である。
(a.)配列番号1,368又は配列番号1,452〜1,460に係る核酸配列に対して少なくとも約40%、好ましくは少なくとも約50%、好ましくは少なくとも約60%、好ましくは少なくとも約70%、より好ましくは少なくとも約80%、より好ましくは少なくとも約90%、更により好ましくは少なくとも約95%、更により好ましくは少なくとも約99%の同一性を有する核酸配列、又は対応するRNA配列を含むか又はからなる少なくとも1つの5’UTRエレメントと、
(b.)少なくとも1つのオープンリーディングフレームと、
(c.)本明細書に記載する少なくとも1つのヒストンステムループ(例えば、配列番号1,391〜1,433のうちのいずれか1つに係るヒストンステムループ配列、好ましくは、配列番号1,433に係る配列に対して少なくとも約75%、好ましくは少なくとも約80%、好ましくは少なくとも約85%、より好ましくは少なくとも約90%、更により好ましくは少なくとも約95%の配列同一性を有するヒストンステムループ配列、又は対応するRNA配列)であって、好ましくは、配列番号1,433に係る配列に対して少なくとも約75%、好ましくは少なくとも約80%、好ましくは少なくとも約85%、より好ましくは少なくとも約90%、更により好ましくは少なくとも約95%の配列同一性を有する配列又は対応するRNA配列の位置6、13、及び20が保存されている、即ち、配列番号1,433の位置6、13、及び20のヌクレオチドと同一であるヒストンステムループと、
(d.)任意で、本明細書に記載するポリ(A)配列又はポリ(A)シグナルと、
(e.)任意で、ポリ(C)配列と、
(f.)任意で、3’UTRエレメント、好ましくは、安定なmRNAを提供する遺伝子に由来する3’UTRエレメント、例えば、配列番号1,369、1,371、又は1,434に係る核酸配列に対して少なくとも約40%、好ましくは少なくとも約50%、好ましくは少なくとも約60%、好ましくは少なくとも約70%、より好ましくは少なくとも約80%、より好ましくは少なくとも約90%、更により好ましくは少なくとも約95%、更により好ましくは少なくとも約99%、最も好ましくは100%の同一性を有する核酸配列、又は対応するRNA配列を含むか又はからなる3’UTRエレメントと
を含む。
5’−キャップ−5’UTRエレメント−ORF−3’UTRエレメント−ヒストンステムループ−ポリ(A)配列
5’−キャップ−5’UTRエレメント−ORF−3’UTRエレメント−ポリ(A)配列−ヒストンステムループ
5’−キャップ−5’UTRエレメント−ORF−IRES−ORF−3’UTRエレメント−ヒストンステムループ−ポリ(A)配列
5’−キャップ−5’UTRエレメント−ORF−IRES−ORF−3’UTRエレメント−ポリ(A)配列−ヒストンステムループ
5’−キャップ−5’UTRエレメント−ORF−3’UTRエレメント−ポリ(A)配列−ポリ(C)配列−ヒストンステムループ
5’−キャップ−5’UTRエレメント−ORF−IRES−ORF−3’UTRエレメント−ポリ(A)配列−ポリ(C)配列−ヒストンステムループ
5’−キャップ−5’UTRエレメント−ORF−IRES−ORF−3’UTRエレメント−ヒストンステムループ−ポリ(A)配列−ポリ(C)配列。
5’UTR−ORF−ヒストンステムループ−3’;又は
5’UTR−ORF−ORF−ヒストンステムループ−3’;又は
5’UTR−ORF−IRES−ORF−ヒストンステムループ−3’;又は
5’UTR−ORF−ヒストンステムループ−ポリ(A)配列−3’;又は
5’UTR−ORF−ヒストンステムループ−ポリアデニル化シグナル−3’;又は
5’UTR−ORF−ORF−ヒストンステムループ−ポリアデニル化シグナル−3’;又は
5’UTR−ORF−ヒストンステムループ−ヒストンステムループ−3’;又は
5’UTR−ORF−ヒストンステムループ−ヒストンステムループ−ポリ(A)配列−3’;又は
5’UTR−ORF−ヒストンステムループ−ヒストンステムループ−ポリアデニル化シグナル−3’;又は
5’UTR−ORF−ヒストンステムループ−ポリ(A)配列−ヒストンステムループ−3’;又は
5’UTR−ORF−ポリ(A)配列−ヒストンステムループ−3’;又は
5’UTR−ORF−ポリ(A)配列−ヒストンステムループ−ヒストンステムループ−3’等。
更に、幾つかの実施形態では、オープンリーディングフレームは、グロビンタンパク質、ルシフェラーゼタンパク質、GFPタンパク質又はその変異体、例えば、グロビンタンパク質、ルシフェラーゼタンパク質、又はGFPタンパク質に対して少なくとも70%の配列同一性を示す変異体からなる群より選択されるレポータータンパク質をコードしないことが好ましい。
Proのコドンは、CC(U/T)又はCCAからCCC又はCCGに改変してよい;
Argのコドンは、CG(U/T)又はCGA又はAGA又はAGGからCGC又はCGGに改変してよい;
Alaのコドンは、GC(U/T)又はGCAからGCC又はGCGに改変してよい;
Glyのコドンは、GG(U/T)又はGGAからGGC又はGGGに改変してよい。
Pheのコドンは、(U/T)(U/T)(U/T)から(U/T)(U/T)Cに改変してよい;
Leuのコドンは、(U/T)(U/T)A、(U/T)(U/T)G、C(U/T)(U/T)又はC(U/T)AからC(U/T)C又はC(U/T)Gに改変してよい;
Serのコドンは、(U/T)C(U/T)又は(U/T)CA又はAG(U/T)から(U/T)CC、(U/T)CG又はAGCに改変してよい;
Tyrのコドンは、(U/T)A(U/T)から(U/T)ACに改変してよい;
Cysのコドンは、(U/T)G(U/T)から(U/T)GCに改変してよい;
Hisのコドンは、CA(U/T)からCACに改変してよい;
Glnのコドンは、CAAからCAGに改変してよい;
Ileのコドンは、A(U/T)(U/T)又はA(U/T)AからA(U/T)Cに改変してよい;
Thrのコドンは、AC(U/T)又はACAからACC又はACGに改変してよい;
Asnのコドンは、AA(U/T)からAACに改変してよい;
Lysのコドンは、AAAからAAGに改変してよい;
Valのコドンは、G(U/T)(U/T)又はG(U/T)AからG(U/T)C又はG(U/T)Gに改変してよい;
Aspのコドンは、GA(U/T)からGACに改変してよい;
Gluのコドンは、GAAからGAGに改変してよい;
終止コドン(U/T)AAは、(U/T)AG又は(U/T)GAに改変してよい。
(a.)TOP遺伝子の5’UTRに由来するか又はTOP遺伝子の5’UTRの変異体に由来する核酸配列を含むか又はからなる少なくとも1つの5’非翻訳領域エレメント(5’UTRエレメント)と、
(b.)少なくとも1つのオープンリーディングフレーム及び/又は少なくとも1つのクローニングサイトと、
(c.)任意で、少なくとも1つのヒストンステムループと
を含むベクターを提供する。
ベクターは、本発明に係る人工核酸分子について上記した通りポリ(A)配列及び/又はポリアデニル化シグナル及び/又はポリ(C)配列を更に含んでいてよい。
{(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x};式(III)
(式中、l+m+n+o+xは、3〜100であり、l、m、n、又はoは、互いに独立して、0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21〜30、31〜40、41〜50、51〜60、61〜70、71〜80、81〜90、及び91〜100から選択される任意の数であるが、但し、Arg(アルギニン)、Lys(リジン)、His(ヒスチジン)及びOrn(オルニチン)の総含量は、オリゴペプチドの全アミノ酸の少なくとも10%であり;Xaaは、Arg、Lys、His又はOrnを除くネイティブ(即ち、自然界に存在する)又は非ネイティブなアミノ酸から選択される任意のアミノ酸であり;xは、0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21〜30、31〜40、41〜50、51〜60、61〜70、71〜80、81〜90から選択される任意の数であるが、但し、Xaaの総含量は、オリゴペプチドの全アミノ酸の90%を超えない)。アミノ酸Arg、Lys、His、Orn、及びXaaはいずれも、ペプチドの任意の位置に位置してよい。これに関連して、7アミノ酸〜30アミノ酸のカチオン性ペプチド又はタンパク質が特に好ましい。
{(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa’)x(Cys)y} 部分式(IIIa)
(式中、(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;及びxは、本明細書に定義する通りであり、Xaa’は、Arg、Lys、His、Orn、又はCysを除くネイティブ(即ち、自然界に存在する)又は非ネイティブなアミノ酸から選択される任意のアミノ酸であり、yは、0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21〜30、31〜40、41〜50、51〜60、61〜70、71〜80、81〜90から選択される任意の数であるが、但し、Arg(アルギニン)、Lys(リジン)、His(ヒスチジン)及びOrn(オルニチン)の総含量は、オリゴペプチドの全アミノ酸の少なくとも10%である)。更に、カチオン性又はポリカチオン性のペプチドは、部分式(IIIb)から選択してよい:
Cys1{(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x}Cys2 部分式(IIIb)
(式中、経験式{(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x}(式(III))は、本明細書に定義する通りであり、(半経験)式(III)に係るアミノ酸配列のコアを形成し、Cys1及びCys2は、(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)xに近接するか又は末端に存在するシステインである)。
配列番号1,364 PpLuc(GC)−ag−A64(図6)
配列番号1,365 RPL32−PpLuc(GC)−ag−A64−C30−ヒストンSL(図7)
配列番号1,366 ヒトリボソームタンパク質ラージ32の5’UTRの断片
配列番号1,367 ヒトリボソームタンパク質ラージ32の5’UTRの断片
配列番号1,368 5’末端オリゴピリミジン領域を有しないヒトリボソームタンパク質ラージ32の5’UTR
配列番号1,369 ヒトアルブミン3’UTR
配列番号1,370 ヒトヘモグロビン、アルファ1(HBA1)の3’UTR
配列番号1,371 ヒトヘモグロビン、アルファ2(HBA2)の3’UTR
配列番号1,372 ヒトヘモグロビン、ベータ(HBB)の3’UTR
配列番号1,373 ヒトチロシンヒドロキシラーゼ(TH)の3’UTR
配列番号1,374 ヒトアラキドン酸15−リポキシゲナーゼ(ALOX15)の3’UTR
配列番号1,375 ヒトコラーゲンI型アルファ1(COL1A1)の3’UTR
配列番号1,376 アルブミン7の3’UTR
配列番号1,377 ヒトアルブミンの3’UTR+ポリ(A)配列
配列番号1,378 ヒトアルブミンの3’UTR断片1
配列番号1,379 ヒトアルブミンの3’UTR断片2
配列番号1,380 ヒトアルブミンの3’UTR断片3
配列番号1,381 ヒトアルブミンの3’UTR断片4
配列番号1,382 ヒトアルブミンの3’UTR断片5
配列番号1,383 ヒトアルブミンの3’UTR断片6
配列番号1,384 ヒトアルブミンの3’UTR断片7
配列番号1,385 ヒトアルブミンの3’UTR断片8
配列番号1,386 ヒトアルブミンの3’UTR断片9
配列番号1,387 ヒトアルブミンの3’UTR断片10
配列番号1,388 ヒトアルブミンの3’UTR断片11
配列番号1,389 ヒトアルブミンの3’UTR断片12
配列番号1,390 ヒトアルブミンの3’UTR断片13
配列番号1,391 式(Ic)に係る配列
配列番号1,392 式(IIc)に係る配列
配列番号1,393 式(Id)に係る配列
配列番号1,394 式(IId)に係る配列
配列番号1,395 式(Ie)に係る配列
配列番号1,396 式(IIe)に係る配列
配列番号1,397 式(If)に係る配列
配列番号1,398 式(IIf)に係る配列
配列番号1,399 式(Ig)に係る配列
配列番号1,400 式(IIg)に係る配列
配列番号1,401 式(Ih)に係る配列
配列番号1,402 式(IIh)に係る配列
配列番号1,403 式(Ic)に係る配列
配列番号1,404 式(Ic)に係る配列
配列番号1,405 式(Ic)に係る配列
配列番号1,406 式(Ie)に係る配列
配列番号1,407 式(Ie)に係る配列
配列番号1,408 式(Ie)に係る配列
配列番号1,409 式(If)に係る配列
配列番号1,410 式(If)に係る配列
配列番号1,411 式(If)に係る配列
配列番号1,412 式(Ig)に係る配列
配列番号1,413 式(Ig)に係る配列
配列番号1,414 式(Ig)に係る配列
配列番号1,415 式(Ih)に係る配列
配列番号1,416 式(Ih)に係る配列
配列番号1,417 式(Ih)に係る配列
配列番号1,418 式(IIc)に係る配列
配列番号1,419 式(IIc)に係る配列
配列番号1,420 式(IIc)に係る配列
配列番号1,421 式(IIe)に係る配列
配列番号1,422 式(IIe)に係る配列
配列番号1,423 式(IIe)に係る配列
配列番号1,424 式(IIf)に係る配列
配列番号1,425 式(IIf)に係る配列
配列番号1,426 式(IIf)に係る配列
配列番号1,427 式(IIg)に係る配列
配列番号1,428 式(IIg)に係る配列
配列番号1,429 式(IIg)に係る配列
配列番号1,430 式(IIh)に係る配列
配列番号1,431 式(IIh)に係る配列
配列番号1,432 式(IIh)に係る配列
配列番号1,433 実施例のヒストンステムループ配列
配列番号1,434 α−グロビン遺伝子の3’UTRの中央のα−複合体結合部分
配列番号1,435 ATPシンターゼ脂質結合タンパク質、ミトコンドリア(atp5g2)
配列番号1,436 RPL35−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図14)
配列番号1,437 RPL21−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図15)
配列番号1,438 ATP5A1−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図16)
配列番号1,439 HSD17B4−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図17)
配列番号1,440 AIG1−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図18)
配列番号1,441 COX6C−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図19)
配列番号1,442 ASAH1−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図20)
配列番号1,443 mRPL21−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図37)
配列番号1,444 mRPL35A−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図38)
配列番号1,445 RPL35−PpLuc(GC)−A64−C30−ヒストンSL
配列番号1,446 RPL21−PpLuc(GC)−A64−C30−ヒストンSL
配列番号1,447 ATP5A1−PpLuc(GC)−A64−C30−ヒストンSL
配列番号1,448 HSD17B4−PpLuc(GC)−A64−C30−ヒストンSL
配列番号1,449 AIG1−PpLuc(GC)−A64−C30−ヒストンSL
配列番号1,450 COX6C−PpLuc(GC)−A64−C30−ヒストンSL
配列番号1,451 ASAH1−PpLuc(GC)−A64−C30−ヒストンSL
配列番号1,452 5’末端オリゴピリミジン領域を有しないヒトリボソームタンパク質ラージ35(RPL35)の5’UTR
配列番号1,453 5’末端オリゴピリミジン領域を有しないヒトリボソームタンパク質ラージ21(RPL21)の5’UTR
配列番号1,454 5’末端オリゴピリミジン領域を有しないヒトATPシンターゼ、H+輸送、ミトコンドリアF1複合体アルファサブユニット1、心筋(ATP5A1)の5’UTR
配列番号1,455 5’末端オリゴピリミジン領域を有しないヒトヒドロキシステロイド(17−ベータ)デヒドロゲナーゼ4(HSD17B4)の5’UTR
配列番号1,456 5’末端オリゴピリミジン領域を有しないヒトアンドロゲン誘導1(AIG1)の5’UTR
配列番号1,457 5’末端オリゴピリミジン領域を有しないヒトシトクロームcオキシダーゼサブユニットVIc(COX6C)の5’UTR
配列番号1,458 5’末端オリゴピリミジン領域を有しないヒトN−アシルスフィンゴシンアミドヒドロラーゼ(酸性セラミダーゼ)1(ASAH1)の5’UTR
配列番号1,459 5’末端オリゴピリミジン領域を有しないマウスリボソームタンパク質ラージ21(mRPL21)の5’UTR
配列番号1,460 5’末端オリゴピリミジン領域を有しないマウスリボソームタンパク質ラージ35A(mRPL35A)の5’UTR
配列番号1,461 マウスリボソームタンパク質ラージ21(mRPL21)
配列番号1,462 マウスリボソームタンパク質ラージ35A(mRPL35A)
配列番号1,463 RPL32−PpLuc(GC)−ag−A64(図10)
配列番号1,464 PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図9)
配列番号1,465 PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL
配列番号1,466 RPL35−PpLuc(GC)−ag−A64(図22)
配列番号1,467 RPL21−PpLuc(GC)−ag−A64(図23)
配列番号1,468 atp5a1−PpLuc(GC)−ag−A64(図24)
配列番号1,469 HSD17B4−PpLuc(GC)−ag−A64(図25)
配列番号1,470 AIG1−PpLuc(GC)−ag−A64(図26)
配列番号1,471 COX6C−PpLuc(GC)−ag−A64(図27)
配列番号1,472 ASAH1−PpLuc(GC)−ag−A64(図28)
配列番号1,473 RPL35−PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図29)
配列番号1,474 RPL21−PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図30)
配列番号1,475 atp5a1−PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図31)
配列番号1,476 HSD17B4−PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図32)
配列番号1,477 AIG1−PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図33)
配列番号1,478 COX6C−PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図34)
配列番号1,479 ASAH1−PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図35)
配列番号1,480 RPL32−PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図11)
配列番号1,481 RPL32−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図13)
T7プロモーターに続いて、キタアメリカホタルルシフェラーゼ(ppLuc(GC))をコードしているGCリッチ配列及びA64ポリ(A)配列を含むインビトロ転写用ベクターを構築した。インビトロ転写前にベクターを線形化するために用いられる制限酵素部位をポリ(A)配列に続いて配置した。インビトロ転写によってこのベクターから得られたmRNAを「ppLuc(GC)−ag−A64」と命名する。
配列番号1,364 PpLuc(GC)−ag−A64(図6)
配列番号1,365 RPL32−PpLuc(GC)−ag−A64−C30−ヒストンSL(図7):
配列番号1,436 RPL35−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図14)
配列番号1,437 RPL21−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図15)
配列番号1,438 ATP5A1−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図16)
配列番号1,439 HSD17B4−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図17)
配列番号1,440 AIG1−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図18)
配列番号1,441 COX6C−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図19)
配列番号1,442 ASAH1−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図20)
配列番号1,443 mRPL21−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図37)
配列番号1,444 mRPL35A−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図38)
配列番号1,445 RPL35−PpLuc(GC)−A64−C30−ヒストンSL
配列番号1,446 RPL21−PpLuc(GC)−A64−C30−ヒストンSL
配列番号1,447 ATP5A1−PpLuc(GC)−A64−C30−ヒストンSL
配列番号1,448 HSD17B4−PpLuc(GC)−A64−C30−ヒストンSL
配列番号1,449 AIG1−PpLuc(GC)−A64−C30−ヒストンSL
配列番号1,450 COX6C−PpLuc(GC)−A64−C30−ヒストンSL
配列番号1,451 ASAH1−PpLuc(GC)−A64−C30−ヒストンSL
配列番号1,463 RPL32−PpLuc(GC)−ag−A64(図10)
配列番号1,464 PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図9)
配列番号1,465 PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL
配列番号1,466 RPL35−PpLuc(GC)−ag−A64(図22)
配列番号1,467 RPL21−PpLuc(GC)−ag−A64(図23)
配列番号1,468 atp5a1−PpLuc(GC)−ag−A64(図24)
配列番号1,469 HSD17B4−PpLuc(GC)−ag−A64(図25)
配列番号1,470 AIG1−PpLuc(GC)−ag−A64(図26)
配列番号1,471 COX6C−PpLuc(GC)−ag−A64(図27)
配列番号1,472 ASAH1−PpLuc(GC)−ag−A64(図28)
配列番号1,473 RPL35−PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図29)
配列番号1,474 RPL21−PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図30)
配列番号1,475 atp5a1−PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図31)
配列番号1,476 HSD17B4−PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図32)
配列番号1,477 AIG1−PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図33)
配列番号1,478 COX6C−PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図34)
配列番号1,479 ASAH1−PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図35)
配列番号1,480 RPL32−PpLuc(GC)−ag−A64−ヒストンSL(図11)
配列番号1,481 RPL32−PpLuc(GC)−アルブミン7−A64−C30−ヒストンSL(図13)。
実施例1に係るDNAテンプレートを線形化し、T7−ポリメラーゼを用いてインビトロで転写させた。次いで、DNAテンプレートをDNase処理によって分解した。過剰のN7−メチル−グアノシン−5’−トリホスフェートー5’−グアノシンを転写反応物に添加することによって、5’−キャップ構造を含むmRNA転写産物を得た。このようにして得られたmRNAを精製し、水に再懸濁させた。
1ウェル当たり5×104個の細胞という密度になるようにヒト皮膚線維芽細胞(HDF)を24ウェルプレートに播種した。次の日、細胞をopti−MEMで洗浄し、次いで、opti−MEM中リポフェクタミン2000複合体化ppLucコードmRNA(1ウェル当たり50ng)でトランスフェクトした。コントロールとして、ppLucをコードしていないmRNAを別個にリポフェクトした。トランスフェクション効率を制御するために、ウミシイタケ(Renilla reniformis)ルシフェラーゼ(RrLuc)をコードしているmRNAをPpLuc mRNAと共にトランスフェクトした(1ウェル当たりRrLuc mRNA20ng)。トランスフェクション開始の90分間後、opti−MEMを培地に交換した。トランスフェクションの24時間後、48時間後、72時間後、培地を吸引し、リシスバッファ200μL(25mM Tris、pH7.5(HCl)、2mM EDTA、10% グリセロール、1% Triton X−100、2mM DTT、1mM PMSF)に細胞を溶解させた。ルシフェラーゼ活性を測定するまで溶解物を−20℃で保存した。
或いは、HDFを96ウェルプレートに播種し、1日間後〜3日間後に1ウェル当たり104個の細胞の密度でトランスフェクトした。リポフェクション直前に、opti−MEMで細胞を洗浄した。リポフェクタミン2000と複合体化している1ウェル当たり25ngのPpLucコードmRNAで細胞をリポフェクトした。幾つかの実験では、トランスフェクション効率を制御するためにウミシイタケルシフェラーゼ(ReLuc)をコードしているmRNAをPpLuc mRNAと共にトランスフェクトした(1ウェル当たりRrLuc mRNA2.5ng)。トランスフェクション開始の90分間後、opti−MEMを培地に交換した。トランスフェクション後の様々な時点において、培地を吸引し、リシスバッファ100μL(Passive Lysis Buffer,Promega)に細胞を溶解させた。ルシフェラーゼ活性を測定するまで溶解物を−80℃で保存した。
BioTek SynergyHTプレートリーダーによって相対光単位(RLU)としてルシフェラーゼ活性を測定した。PpLuc活性は、溶解物50μL及びルシフェリンバッファ200μL(75μM ルシフェリン、25mM グリシルグリシン、pH7.8(NaOH)、15mM MgSO4、2mM ATP)を用いて、15秒間の測定時間で測定した。RrLuc活性は、溶解物50μL及びセレンテラジンバッファ200μL(500mM NaClに調整したリン酸緩衝生理食塩水中40μMセレンテラジン)を用いて、15秒間の測定時間で測定した。
或いは、Hidex Chameleonプレートリーダーによって相対光単位(RLU)としてルシフェラーゼ活性を測定した。PpLuc活性は、溶解物20μL及びルシフェリンバッファ50μL(Beetle−Juice,PJK GmbH)を用いて、2秒間の測定時間で測定した。RrLuc活性は、溶解物20μL及びセレンテラジンバッファ50μL(Renilla−Juice,PJK GmbH)を用いて、2秒間の測定時間で測定した。
5.1 TOP遺伝子の5’UTRに由来する5’UTRエレメントとヒストンステムループとの組み合わせは、タンパク質発現を強く増加させる
mRNAからのタンパク質産生に対するTOP遺伝子の5’UTRに由来する5’UTRエレメントとヒストンステムループ(ヒストンSL)との組み合わせの効果について調べるために、様々なUTRを有するmRNAを合成した:5’UTRエレメント及びヒストンSLのいずれも有しないmRNA、又は5’UTRエレメント及びヒストンSLを両方含むmRNA。ルシフェラーゼをコードしているmRNA又はコントロールmRNAをヒト皮膚線維芽細胞(HDF)にトランスフェクトした。トランスフェクションの24時間後にルシフェラーゼレベルを測定した(以下の表1及び図8を参照)。
mRNAからのタンパク質発現に対するTOP遺伝子の5’UTRに由来する5’UTRエレメントとヒストンステムループとの組み合わせの効果について調べるために、様々なUTRを有するmRNAを合成した:5’UTRエレメント及びヒストンSLのいずれも有しないmRNA、又は5’UTRエレメント若しくはヒストンステムループを含むmRNA、又は5’UTRエレメント及びヒストンSLを両方含むmRNA。ルシフェラーゼをコードしているmRNAをヒト皮膚線維芽細胞(HDF)にトランスフェクトした。トランスフェクションの8時間後、24時間後、及び48時間後にルシフェラーゼレベルを測定した(以下の表2及び図12を参照)。
両エレメントを組み合わせたmRNAから得られたシグナルを、両エレメントを有しないmRNAから得られたシグナルと5’UTRエレメントによるシグナル増加とヒストンステムループによるシグナル増加との合計で除することによって、5’UTRエレメントとヒストンステムループとの相乗作用を定量した。この計算は、3つの時点で個別に実施し、また曲線下面積(AUC)から計算した0時間〜48時間に発現した全タンパク質についても実施した(以下の表3を参照)。
mRNAからのタンパク質発現に対するTOP遺伝子の5’UTRに由来する5’UTRエレメントの効果について調べるために、様々な5’UTRエレメントのうちの1つを有するmRNAを合成した。更に、mRNAは、アルブミン7の3’UTRエレメントを含んでいた。ルシフェラーゼをコードしているmRNAをヒト皮膚線維芽細胞(HDF)にトランスフェクトした。トランスフェクションの24時間後、48時間後、及び72時間後にルシフェラーゼレベルを測定した(以下の表4及び図21を参照)。
mRNAからのタンパク質発現に対するTOP遺伝子の5’UTRに由来する5’UTRエレメントとヒストンステムループとの組み合わせの効果について調べるために、様々なUTRを有するmRNAを合成した:5’UTRエレメント及びヒストンステムループのいずれも有しないmRNA、ヒストンステムループを含むmRNA、TOP遺伝子の5’UTRに由来する様々な5’UTRエレメントのうちの1つを含むmRNA、又は様々な5’UTRエレメントのうちの1つとヒストンステムループとの両方を含むmRNA。更に、mRNAは、α−グロビンの3’UTRエレメントを含んでいた。ルシフェラーゼをコードしているmRNAをヒト皮膚線維芽細胞(HDF)にトランスフェクトした。トランスフェクションの8時間後、24時間後、及び48時間後にルシフェラーゼレベルを測定した(図36を参照)。ルシフェラーゼは、5’UTRエレメントもヒストンステムループも有しないmRNAから明らかに発現していた。ヒストンステムループは、ルシフェラーゼレベルを増加させた。また、全ての5’UTRエレメントが、ルシフェラーゼレベルを増加させた。しかし、驚くべきことに、5’UTRエレメントとヒストンステムループとの組み合わせは、個々のエレメントのいずれかでみられたレベルを遥かに超えてルシフェラーゼレベルを更に強く増加させた。同一のmRNAにおいて5’UTRエレメントとヒストンステムループとを組み合わせたことによるルシフェラーゼレベルの増加の程度は、これらが相乗的に作用することを示す。
mRNAからのタンパク質発現に対するマウスTOP遺伝子の5’UTRに由来するTOP5’UTRエレメントの効果について調べるために、2つの異なるマウス5’UTRエレメントを有するmRNAを合成した。更に、mRNAは、アルブミン7の3’UTRエレメントを含んでいた。ルシフェラーゼをコードしているmRNAをヒト皮膚線維芽細胞(HDF)にトランスフェクトした。比較のために、ヒトrpl32の5’UTRエレメントを含有するmRNAをトランスフェクトした。トランスフェクションの24時間後、48時間後、及び72時間後にルシフェラーゼレベルを測定した(以下の表6及び図39を参照)。
Claims (40)
- a. TOP遺伝子の5’UTRに由来するか若しくはTOP遺伝子の5’UTRの変異体に由来する核酸配列を含むか、又は前記核酸配列からなる少なくとも1つの5’−非翻訳領域エレメント(5’UTRエレメント)と、
b. 少なくとも1つのオープンリーディングフレーム(ORF)と、
c. 少なくとも1つのヒストンステムループと、
を含み、
前記変異体が、その変異体が由来する自然界に存在する5’UTRと少なくとも95%同一であり、
前記少なくとも1つの5’−UTRエレメントが、5’末端オリゴピリミジンモチーフ(TOPモチーフ)を含まず、
前記少なくとも1つの5’−UTRエレメントが、前記少なくとも1つのORFによりコードされるタンパク質のタンパク質産生を増加することを特徴とする人工核酸分子。 - 5’UTRエレメントとオープンリーディングフレームとが、異種である請求項1に記載の人工核酸分子。
- TOP遺伝子の5’UTRに由来する核酸配列が、その5’末端において、ポリピリミジン領域の下流の位置1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10に位置するヌクレオチドで始まる請求項1から2のいずれかに記載の人工核酸分子。
- 5’UTRエレメントが、その5’末端において、ポリピリミジン領域の下流の位置1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10に位置するヌクレオチドで始まる請求項1から3のいずれかに記載の人工核酸分子。
- TOP遺伝子の5’UTRに由来する核酸配列が、その3’末端において、前記5’UTRが由来する遺伝子の開始コドンの上流の位置1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10に位置するヌクレオチドで終わる請求項1から4のいずれかに記載の人工核酸分子。
- 5’UTRエレメントが、開始コドンもオープンリーディングフレームも含まない請求項1から5のいずれかに記載の人工核酸分子。
- TOP遺伝子の5’UTRに由来する核酸配列が、真核生物のTOP遺伝子の5’UTR又はその変異体に由来し、
前記変異体が、その変異体が由来する自然界に存在する5’UTRと少なくとも95%同一である請求項1から6のいずれかに記載の人工核酸分子。 - 少なくとも1つのヒストンステムループが、以下の式(I)及び(II)のいずれかから選択される請求項2から7のいずれかに記載の人工核酸分子:
式(I)(ステム境界エレメントを含まないステムループ配列):
ステム1又はステム2の境界エレメントN 1−6 は、1個〜6個のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、
ステム1[N 0−2 GN 3−5 ]は、エレメントステム2に対して逆相補的であるか又は部分的に逆相補的であり、且つ5個〜7個のヌクレオチドの連続配列であり、N 0−2 は、0個〜2個、のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、N 3−5 は、3個〜5個、のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、Gは、グアノシン又はそのアナログであり、シチジン又はそのアナログによって置換されてもよいが、但し、その場合、ステム2におけるその相補的ヌクレオチドであるシチジンも、グアノシンによって置換され、
ループ配列[N 0−4 (U/T)N 0−4 ]は、エレメントステム1とステム2との間に位置し、且つ3個〜5個のヌクレオチドの連続配列であり、各N 0−4 は、互いに独立して、0個〜4個、のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、U/Tは、ウリジン又はチミジンを表し、
ステム2[N 3−5 CN 0−2 ]は、エレメントステム1に対して逆相補的であるか又は部分的に逆相補的であり、且つ5個〜7個のヌクレオチドの連続配列であり、N 3−5 は、3個〜5個、のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、N 0−2 は、0個〜2個、のNの連続配列であり、各Nは、互いに独立して、A、U、T、G、及びCから選択されるヌクレオチド、又はこれらのヌクレオチドアナログから選択され、Cは、シチジン又はそのアナログであり、グアノシン又はそのアナログによって置換されてもよいが、但し、その場合、ステム1におけるその相補的ヌクレオチドであるグアノシンも、シチジンによって置換され、
ステム1及びステム2は、互いに塩基対合して、ステム1とステム2との間に塩基対合が生じ得る逆相補的配列を形成することができるか、或いは、互いに塩基対合して、ステム1とステム2との間に不完全な塩基対合が生じ得る部分的に逆相補的な配列を形成することができる)。 - 少なくとも1つのヒストンステムループが、以下の式(Ia)及び(IIa)のうちの少なくとも1つから選択される請求項1から8のいずれかに記載の人工核酸分子:
式(Ia)(ステム境界エレメントを含まないステムループ配列):
- d. ポリ(A)配列及びポリアデニル化シグナルの少なくともいずれか
を更に含む請求項1から9のいずれかに記載の人工核酸分子。 - e. ポリ(C)配列
を更に含む請求項1から10のいずれかに記載の人工核酸分子。 - f. 少なくとも1つの3’UTRエレメント
を更に含む請求項1から11のいずれかに記載の人工核酸分子。 - 少なくとも1つの3’UTRエレメントが、安定なmRNAを提供する遺伝子の3’UTR又は安定なmRNAを提供する遺伝子の3’UTRの変異体に由来する核酸配列を含むか又はからなり、
前記変異体が、その変異体が由来する自然界に存在する3’UTRと少なくとも95%同一である請求項12に記載の人工核酸分子。 - 5’UTRエレメントが、配列番号1〜1,363、配列番号1,435、配列番号1,461、及び配列番号1,462からなる群より選択される核酸配列;配列番号1〜1,363、配列番号1,435、配列番号1,461、及び配列番号1,462のいずれかのホモログ、又はこれらの変異体に由来する核酸配列を含むか又はからなり、
前記ホモログが、前記配列番号に係る配列に対して相同性を有する脊椎動物由来の配列であり、前記配列番号に係る配列と少なくとも95%同一であり、
前記変異体が、その変異体が由来する自然界に存在する5’UTRと少なくとも95%同一である請求項1から13のいずれかに記載の人工核酸分子。 - 5’UTRエレメントが、配列番号1〜1,363、配列番号1,435、配列番号1,461、及び配列番号1,462のいずれかから選択される核酸配列、又は対応するRNA配列に対して少なくとも95%の同一性を有する核酸配列を含むか又はからなる、或いは、少なくとも1つの5’UTRエレメントが、配列番号1〜1,363、配列番号1,435、配列番号1,461、及び配列番号1,462のいずれかから選択される核酸配列、又は対応するRNA配列に対して少なくとも95%の同一性を有する核酸配列の断片を含むか又はからなる請求項1から14のいずれかに記載の人工核酸分子。
- 5’UTRエレメントが、リボソームタンパク質をコードしているTOP遺伝子の5’UTR又はリボソームタンパク質をコードしているTOP遺伝子の5’UTRの変異体に由来する核酸配列、対応するRNA配列、これらのホモログ、又はこれらの変異体を含むか又はからなり、
前記変異体が、その変異体が由来する自然界に存在する5’UTRと少なくとも95%同一であり、
前記ホモログが、リボソームタンパク質をコードしているTOP遺伝子の5’UTRに係る配列に対して相同性を有する脊椎動物由来の配列であり、前記5’UTRに係る配列と少なくとも95%同一である請求項1から15のいずれかに記載の人工核酸分子。 - 5’UTRエレメントが、配列番号170、232、244、259、1,284、1,285、1,286、1,287、1,288、1,289、1,290、1,291、1,292、1,293、1,294、1,295、1,296、1,297、1,298、1,299、1,300、1,301、1,302、1,303、1,304、1,305、1,306、1,307、1,308、1,309、1,310、1,311、1,312、1,313、1,314、1,315、1,316、1,317、1,318、1,319、1,320、1,321、1,322、1,323、1,324、1,325、1,326、1,327、1,328、1,329、1,330、1,331、1,332、1,333、1,334、1,335、1,336、1,337、1,338、1,339、1,340、1,341、1,342、1,343、1,344、1,346、1,347、1,348、1,349、1,350、1,351、1,352、1,353、1,354、1,355、1,356、1,357、1,358、1,359、及び1,360のいずれかに係る核酸配列の5’UTR、又は対応するRNA配列に対して少なくとも95%の同一性を有する核酸配列を含むか又はからなる、或いは、少なくとも1つの5’UTRエレメントが、配列番号170、232、244、259、1,284、1,285、1,286、1,287、1,288、1,289、1,290、1,291、1,292、1,293、1,294、1,295、1,296、1,297、1,298、1,299、1,300、1,301、1,302、1,303、1,304、1,305、1,306、1,307、1,308、1,309、1,310、1,311、1,312、1,313、1,314、1,315、1,316、1,317、1,318、1,319、1,320、1,321、1,322、1,323、1,324、1,325、1,326、1,327、1,328、1,329、1,330、1,331、1,332、1,333、1,334、1,335、1,336、1,337、1,338、1,339、1,340、1,341、1,342、1,343、1,344、1,346、1,347、1,348、1,349、1,350、1,351、1,352、1,353、1,354、1,355、1,356、1,357、1,358、1,359、及び1,360のいずれかに係る核酸配列の5’UTR又は対応するRNA配列に対して少なくとも95%の同一性を有する核酸配列の断片を含むか又はからなる請求項1から16のいずれかに記載の人工核酸分子。
- 5’UTRエレメントが、リボソームラージタンパク質(RPL)をコードしているTOP遺伝子の5’UTR又はリボソームラージタンパク質(RPL)をコードしているTOP遺伝子の5’UTRの変異体、対応するRNA配列、これらのホモログ、又はこれらの変異体に由来し、
前記変異体が、その変異体が由来する自然界に存在する5’UTRと少なくとも95%同一であり、
前記ホモログが、リボソームラージタンパク質(RPL)をコードしているTOP遺伝子の5’UTRに係る配列に対して相同性を有する脊椎動物由来の配列であり、前記5’UTRに係る配列と少なくとも95%同一である請求項1から17のいずれかに記載の人工核酸分子。 - 5’UTRエレメントが、配列番号67、259、1,284〜1,318、1,344、1,346、1,348〜1,354、1,357、1,461、及び1,462のいずれかに係る核酸配列の5’UTR、又は対応するRNA配列に対して少なくとも95%の同一性を有する核酸配列を含むか又はからなる、或いは、少なくとも1つの5’UTRエレメントが、配列番号67、259、1,284〜1,318、1,344、1,346、1,348〜1,354、1,357、1,461、及び1,462のいずれかに係る核酸配列の5’UTR又は対応するRNA配列に対して少なくとも95%の同一性を有する核酸配列の断片を含むか又はからなる請求項1から18のいずれかに記載の人工核酸分子。
- 5’UTRエレメントが、リボソームタンパク質ラージ32遺伝子の5’UTR又はその変異体に由来する核酸配列を含むか又はからなる請求項1から19のいずれかに記載の人工核酸分子。
- 5’UTRエレメントが、配列番号1,368及び1,452〜1,460のいずれかに係る核酸配列又は対応するRNA配列に対して少なくとも95%の同一性を有する核酸配列を含むか又はからなり、或いは、少なくとも1つの5’UTRエレメントが、配列番号1,368及び1,452〜1,460のいずれかに係る核酸配列又は対応するRNA配列に対して少なくとも95%の同一性を有する核酸配列の断片を含むか又はからなる請求項1から20のいずれかに記載の人工核酸分子。
- 5’UTRエレメントが、RPSA、RPS2、RPS3、RPS3A、RPS4、RPS5、RPS6、RPS7、RPS8、RPS9、RPS10、RPS11、RPS12、RPS13、RPS14、RPS15、RPS15A、RPS16、RPS17、RPS18、RPS19、RPS20、RPS21、RPS23、RPS24、RPS25、RPS26、RPS27、RPS27A、RPS28、RPS29、RPS30、RPL3、RPL4、RPL5、RPL6、RPL7、RPL7A、RPL8、RPL9、RPL10、RPL10A、RPL11、RPL12、RPL13、RPL13A、RPL14、RPL15、RPL17、RPL18、RPL18A、RPL19、RPL21、RPL22、RPL23、RPL23A、RPL24、RPL26、RPL27、RPL27A、RPL28、RPL29、RPL30、RPL31、RPL32、RPL34、RPL35、RPL35A、RPL36、RPL36A、RPL37、RPL37A、RPL38、RPL39、RPL40、RPL41、RPLP0、RPLP1、RPLP2、RPLP3、UBA52から選択されるTOP遺伝子の5’UTR、又はこれらの変異体に由来する核酸配列を含むか又はからなり、
前記変異体が、その変異体が由来する自然界に存在する5’UTRと少なくとも95%同一である請求項1から21のいずれかに記載の人工核酸分子。 - 少なくとも1つのヒストンステムループが、配列番号1,391〜1433からなる群より選択される核酸配列を含むか又はからなる請求項1から22のいずれかに記載の人工核酸分子。
- ヒストンステムループが、配列番号1,433に係る配列又は対応するRNA配列に対して少なくとも95%の配列同一性を有する核酸配列を含むか又はからなる請求項1から23のいずれかに記載の人工核酸分子。
- 3’UTRエレメントが、アルブミン遺伝子、α−グロビン遺伝子、β−グロビン遺伝子、チロシンヒドロキシラーゼ遺伝子、リポキシゲナーゼ遺伝子、及びコラーゲンアルファ遺伝子からなる群より選択される遺伝子の3’UTRに由来する核酸配列、又はアルブミン遺伝子、α−グロビン遺伝子、β−グロビン遺伝子、チロシンヒドロキシラーゼ遺伝子、リポキシゲナーゼ遺伝子、及びコラーゲンアルファ遺伝子からなる群より選択される遺伝子の3’UTRの変異体に由来する核酸配列を含むか又はからなり、
前記変異体が、その変異体が由来する自然界に存在する3’UTRと少なくとも95%同一である請求項12から24のいずれかに記載の人工核酸分子。 - 少なくとも1つの3’UTRエレメントが、脊椎動物のアルブミン遺伝子の3’UTR又はその変異体に由来する核酸配列を含むか又はからなり、
前記変異体が、その変異体が由来する自然界に存在する3’UTRと少なくとも95%同一である請求項12から25のいずれかに記載の人工核酸分子。 - 少なくとも1つの3’UTRエレメントが、配列番号1,369〜1,377及び1,434から選択される核酸配列又は対応するRNA配列に対して少なくとも95%の同一性を有する核酸配列を含むか又はからなる、或いは、少なくとも1つの3’UTRエレメントが、配列番号1,369〜1,377及び1,434から選択される核酸配列又は対応するRNA配列に対して少なくとも95%の同一性を有する核酸配列の断片を含むか又はからなる請求項12から25のいずれかに記載の人工核酸分子。
- 人工核酸分子が、少なくとも部分的にG/C改変されている請求項1から27のいずれかに記載の人工核酸分子。
- 前記オープンリーディングフレームが、少なくとも部分的にG/C改変されており、前記オープンリーディングフレームのG/C含量が、野生型オープンリーディングフレームに比べて増加している請求項1から28のいずれかに記載の人工核酸分子。
- RNAである請求項1から29のいずれかに記載の人工核酸分子。
- a. TOP遺伝子の5’UTRに由来するか若しくはTOP遺伝子の5’UTRの変異体に由来する核酸配列を含むか、又は前記核酸配列からなる少なくとも1つの5’−非翻訳領域エレメント(5’UTRエレメント)と、
b. 少なくとも1つのオープンリーディングフレーム(ORF)及び少なくとも1つのクローニングサイトの少なくともいずれかと、
c. 少なくとも1つのヒストンステムループと、
を含み、
前記変異体が、その変異体が由来する自然界に存在する5’UTRと少なくとも95%同一であり、
前記少なくとも1つの5’−UTRエレメントが、5’末端オリゴピリミジンモチーフ(TOPモチーフ)を含まず、
前記少なくとも1つの5’−UTRエレメントが、前記少なくとも1つのORFによりコードされるタンパク質のタンパク質産生を増加することを特徴とするベクター。 - DNAベクターである請求項31に記載のベクター。
- プラスミドベクター又はウイルスベクターである請求項31から32のいずれかに記載のベクター。
- 請求項1から30のいずれかに記載の人工核酸分子を含むか又はコードしている請求項31から33のいずれかに記載のベクター。
- 環状分子である請求項31から34のいずれかに記載のベクター。
- 請求項1から30のいずれかに記載の人工核酸分子又は請求項31から35のいずれかに記載のベクターを含むことを特徴とする細胞。
- 哺乳類細胞である請求項36に記載の細胞。
- 請求項1から30のいずれかに記載の人工核酸分子、請求項31から35のいずれかに記載のベクター、又は請求項36から37のいずれかに記載の細胞を含むことを特徴とする医薬組成物。
- 1以上の薬学的に許容できる希釈剤、賦形剤、及び1以上のアジュバントの少なくともいずれかを更に含む請求項38に記載の医薬組成物。
- 医薬として使用するための、請求項1から30のいずれかに記載の人工核酸分子、請求項31から35のいずれかに記載のベクター、請求項36から37のいずれかに記載の細胞、又は請求項38から39のいずれかに記載の医薬組成物。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP2012001336 | 2012-03-27 | ||
EPPCT/EP2012/001336 | 2012-03-27 | ||
EPPCT/EP2012/002447 | 2012-06-08 | ||
EP2012002447 | 2012-06-08 | ||
PCT/EP2013/000937 WO2013143699A1 (en) | 2012-03-27 | 2013-03-27 | Artificial nucleic acid molecules for improved protein or peptide expression |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017145047A Division JP6700227B2 (ja) | 2012-03-27 | 2017-07-27 | タンパク質又はペプチドの発現を改善するための人工核酸分子 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015512631A JP2015512631A (ja) | 2015-04-30 |
JP2015512631A5 JP2015512631A5 (ja) | 2016-02-04 |
JP6185553B2 true JP6185553B2 (ja) | 2017-08-23 |
Family
ID=48128253
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015502142A Active JP6185553B2 (ja) | 2012-03-27 | 2013-03-27 | タンパク質又はペプチドの発現を改善するための人工核酸分子 |
JP2017145047A Active JP6700227B2 (ja) | 2012-03-27 | 2017-07-27 | タンパク質又はペプチドの発現を改善するための人工核酸分子 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017145047A Active JP6700227B2 (ja) | 2012-03-27 | 2017-07-27 | タンパク質又はペプチドの発現を改善するための人工核酸分子 |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US9683233B2 (ja) |
JP (2) | JP6185553B2 (ja) |
KR (1) | KR102287184B1 (ja) |
CN (1) | CN104284979B (ja) |
AU (2) | AU2013242404B2 (ja) |
BR (1) | BR112014018210A2 (ja) |
CA (1) | CA2859452C (ja) |
DK (2) | DK2831241T3 (ja) |
ES (2) | ES2742473T3 (ja) |
MX (2) | MX362981B (ja) |
RU (2) | RU2750261C2 (ja) |
SG (3) | SG10201607968WA (ja) |
WO (1) | WO2013143699A1 (ja) |
Families Citing this family (161)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP3578205A1 (en) | 2010-08-06 | 2019-12-11 | ModernaTX, Inc. | A pharmaceutical formulation comprising engineered nucleic acids and medical use thereof |
WO2012019630A1 (en) | 2010-08-13 | 2012-02-16 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded protein |
RU2013120302A (ru) | 2010-10-01 | 2014-11-20 | Модерна Терапьютикс, Инк. | Сконструированные нуклеиновые кислоты и способы их применения |
WO2012116714A1 (en) | 2011-03-02 | 2012-09-07 | Curevac Gmbh | Vaccination in elderly patients |
JP2014511687A (ja) | 2011-03-31 | 2014-05-19 | モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッド | 工学操作された核酸の送達および製剤 |
IL307511A (en) | 2011-06-08 | 2023-12-01 | Shire Human Genetic Therapies | Preparations of lipid nanoparticles and methods for administration of mRNA |
US9464124B2 (en) | 2011-09-12 | 2016-10-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
US9428535B2 (en) | 2011-10-03 | 2016-08-30 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof |
LT2791160T (lt) | 2011-12-16 | 2022-06-10 | Modernatx, Inc. | Modifikuotos mrnr sudėtys |
WO2013120497A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded therapeutic protein |
WO2013120498A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded allergenic antigen or an autoimmune self-antigen |
WO2013120500A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded tumour antigen |
WO2013120499A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly (a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded pathogenic antigen |
KR20140139101A (ko) | 2012-03-27 | 2014-12-04 | 큐어백 게엠바하 | 5''top utr을 포함하는 인공 핵산 분자 |
CA2866955A1 (en) | 2012-03-27 | 2013-10-03 | Curevac Gmbh | Artificial nucleic acid molecules |
DK2831241T3 (da) | 2012-03-27 | 2017-11-06 | Curevac Ag | Kunstige nukleinsyremolekyler til forbedret protein- eller peptidekspression. |
US9283287B2 (en) | 2012-04-02 | 2016-03-15 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins |
US9572897B2 (en) | 2012-04-02 | 2017-02-21 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins |
US9254311B2 (en) | 2012-04-02 | 2016-02-09 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of proteins |
US9192651B2 (en) | 2012-04-02 | 2015-11-24 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of secreted proteins |
WO2014081507A1 (en) | 2012-11-26 | 2014-05-30 | Moderna Therapeutics, Inc. | Terminally modified rna |
SG10201710473VA (en) | 2013-02-22 | 2018-02-27 | Curevac Ag | Combination of vaccination and inhibition of the pd-1 pathway |
WO2014159813A1 (en) | 2013-03-13 | 2014-10-02 | Moderna Therapeutics, Inc. | Long-lived polynucleotide molecules |
EP2971010B1 (en) | 2013-03-14 | 2020-06-10 | ModernaTX, Inc. | Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions |
DK3388834T3 (da) | 2013-03-15 | 2020-05-04 | Translate Bio Inc | Synergistisk forbedring af levering af nukleinsyrer via blandede formuleringer |
US8980864B2 (en) | 2013-03-15 | 2015-03-17 | Moderna Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of altering cholesterol levels |
WO2015024669A1 (en) | 2013-08-21 | 2015-02-26 | Curevac Gmbh | Combination vaccine |
ES2747762T3 (es) | 2013-08-21 | 2020-03-11 | Curevac Ag | Vacuna contra el virus respiratorio sincitial (RSV) |
KR102354389B1 (ko) * | 2013-08-21 | 2022-01-20 | 큐어백 아게 | Rna―암호화된 단백질의 발현을 증가시키는 방법 |
BR112016001192A2 (pt) | 2013-08-21 | 2017-08-29 | Curevac Ag | Vacina contra a raiva |
EP3052106A4 (en) | 2013-09-30 | 2017-07-19 | ModernaTX, Inc. | Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides |
CA2926218A1 (en) | 2013-10-03 | 2015-04-09 | Moderna Therapeutics, Inc. | Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor |
CA2925021A1 (en) | 2013-11-01 | 2015-05-07 | Curevac Ag | Modified rna with decreased immunostimulatory properties |
SG10201903381TA (en) * | 2013-12-30 | 2019-05-30 | Curevac Ag | Artificial nucleic acid molecules |
SG10201805660WA (en) | 2013-12-30 | 2018-08-30 | Curevac Ag | Methods for rna analysis |
EP3495486B1 (en) * | 2013-12-30 | 2020-12-16 | CureVac AG | Artificial nucleic acid molecules |
US11254951B2 (en) * | 2014-12-30 | 2022-02-22 | Curevac Ag | Artificial nucleic acid molecules |
CA2927254C (en) | 2013-12-30 | 2023-10-24 | Curevac Ag | Artificial nucleic acid molecules |
US10307472B2 (en) | 2014-03-12 | 2019-06-04 | Curevac Ag | Combination of vaccination and OX40 agonists |
US10369216B2 (en) | 2014-04-01 | 2019-08-06 | Curevac Ag | Polymeric carrier cargo complex for use as an immunostimulating agent or as an adjuvant |
BR112016026980B1 (pt) | 2014-06-10 | 2022-05-03 | Curevac Real Estate Gmbh | Método para sintetizar uma molécula de rna de uma dada sequência |
EP3160938B1 (en) | 2014-06-25 | 2020-09-16 | Acuitas Therapeutics Inc. | Novel lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids |
US20170216363A1 (en) | 2014-08-07 | 2017-08-03 | The Johns Hopkins University | Nanoparticle modification of human adipose-derived mesenchymal stem cells for treating brain cancer and other neurological diseases |
JP6824594B2 (ja) | 2014-09-11 | 2021-02-03 | Jnc株式会社 | 合成遺伝子の設計方法 |
EP4241784A3 (en) | 2014-12-12 | 2023-11-15 | CureVac SE | Artificial nucleic acid molecules for improved protein expression |
CN107124889A (zh) * | 2014-12-30 | 2017-09-01 | 库瑞瓦格股份公司 | 人工核酸分子 |
US10653768B2 (en) | 2015-04-13 | 2020-05-19 | Curevac Real Estate Gmbh | Method for producing RNA compositions |
US10780054B2 (en) | 2015-04-17 | 2020-09-22 | Curevac Real Estate Gmbh | Lyophilization of RNA |
AU2016251687C1 (en) | 2015-04-22 | 2023-07-27 | CureVac SE | RNA containing composition for treatment of tumor diseases |
EP3289101B1 (en) | 2015-04-30 | 2021-06-23 | CureVac AG | Immobilized poly(n)polymerase |
DK3294885T3 (da) | 2015-05-08 | 2020-08-10 | Curevac Real Estate Gmbh | Fremgangsmåde til at fremstille rna |
CA2975816A1 (en) | 2015-05-15 | 2016-11-24 | Curevac Ag | Prime-boost regimens involving administration of at least one mrna construct |
EP3297682B1 (en) | 2015-05-20 | 2021-07-14 | CureVac AG | Dry powder composition comprising long-chain rna |
SG11201708540VA (en) | 2015-05-20 | 2017-12-28 | Curevac Ag | Dry powder composition comprising long-chain rna |
US11608513B2 (en) | 2015-05-29 | 2023-03-21 | CureVac SE | Method for adding cap structures to RNA using immobilized enzymes |
PT4108769T (pt) | 2015-05-29 | 2023-10-10 | Curevac Mfg Gmbh | Um método para produção e purificação de rna, compreendendendo pelo menos um passo de filtração por fluxo tangencial |
EP3313829B1 (en) | 2015-06-29 | 2024-04-10 | Acuitas Therapeutics Inc. | Lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids |
WO2017009376A1 (en) | 2015-07-13 | 2017-01-19 | Curevac Ag | Method of producing rna from circular dna and corresponding template dna |
CN114381470A (zh) * | 2015-08-28 | 2022-04-22 | 库瑞瓦格股份公司 | 人工核酸分子 |
ES2910425T3 (es) | 2015-09-17 | 2022-05-12 | Modernatx Inc | Compuestos y composiciones para la administración intracelular de agentes terapéuticos |
WO2017059902A1 (en) * | 2015-10-07 | 2017-04-13 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | 3' utr sequences for stabilization of rna |
WO2017064146A1 (en) | 2015-10-12 | 2017-04-20 | Curevac Ag | Automated method for isolation, selection and/or detection of microorganisms or cells comprised in a solution |
ES2914225T3 (es) | 2015-10-16 | 2022-06-08 | Modernatx Inc | Análogos de cap de ARNm con enlace de fosfato modificado |
WO2017066791A1 (en) | 2015-10-16 | 2017-04-20 | Modernatx, Inc. | Sugar substituted mrna cap analogs |
WO2017066782A1 (en) | 2015-10-16 | 2017-04-20 | Modernatx, Inc. | Hydrophobic mrna cap analogs |
WO2017066789A1 (en) | 2015-10-16 | 2017-04-20 | Modernatx, Inc. | Mrna cap analogs with modified sugar |
JP2018530587A (ja) | 2015-10-16 | 2018-10-18 | モデルナティエックス インコーポレイテッドModernaTX,Inc. | mRNAキャップ類似体およびmRNAキャッピングの方法 |
HRP20230209T1 (hr) | 2015-10-28 | 2023-04-14 | Acuitas Therapeutics Inc. | Novi lipidi i lipidne formulacije nanočestica za isporuku nukleinskih kiselina |
EP3373965A1 (en) | 2015-11-09 | 2018-09-19 | CureVac AG | Rotavirus vaccines |
SI3394030T1 (sl) | 2015-12-22 | 2022-04-29 | Modernatx, Inc. | Sestave za doziranje sredstev v celice |
CN108778308A (zh) | 2015-12-22 | 2018-11-09 | 库瑞瓦格股份公司 | 生产rna分子组合物的方法 |
WO2017109161A1 (en) | 2015-12-23 | 2017-06-29 | Curevac Ag | Method of rna in vitro transcription using a buffer containing a dicarboxylic acid or tricarboxylic acid or a salt thereof |
SG10201913630YA (en) | 2016-02-17 | 2020-03-30 | Curevac Ag | Zika virus vaccine |
WO2017149139A1 (en) | 2016-03-03 | 2017-09-08 | Curevac Ag | Rna analysis by total hydrolysis |
WO2017162265A1 (en) | 2016-03-21 | 2017-09-28 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Trans-replicating rna |
KR102369898B1 (ko) | 2016-04-08 | 2022-03-03 | 트랜슬레이트 바이오 인코포레이티드 | 다량체 코딩 핵산 및 그 용도 |
US20190284249A1 (en) * | 2016-04-25 | 2019-09-19 | Evorx Technologies, Inc. | Beta-catenin barcoded peptides |
US11596699B2 (en) | 2016-04-29 | 2023-03-07 | CureVac SE | RNA encoding an antibody |
EP3452101A2 (en) | 2016-05-04 | 2019-03-13 | CureVac AG | Rna encoding a therapeutic protein |
US11141474B2 (en) | 2016-05-04 | 2021-10-12 | Curevac Ag | Artificial nucleic acid molecules encoding a norovirus antigen and uses thereof |
MX2018013919A (es) | 2016-06-09 | 2019-04-15 | Curevac Ag | Portadores hibridos para cargas de acido nucleico. |
EP3842530A1 (en) | 2016-06-13 | 2021-06-30 | Translate Bio, Inc. | Messenger rna therapy for the treatment of ornithine transcarbamylase deficiency |
CA3027201A1 (en) | 2016-06-14 | 2017-12-21 | Modernatx, Inc. | Stabilized formulations of lipid nanoparticles |
WO2018013525A1 (en) | 2016-07-11 | 2018-01-18 | Translate Bio Ma, Inc. | Nucleic acid conjugates and uses thereof |
EP3538067A1 (en) | 2016-11-08 | 2019-09-18 | Modernatx, Inc. | Stabilized formulations of lipid nanoparticles |
US20200024347A1 (en) | 2016-11-10 | 2020-01-23 | Iomx Therapeutics Ag | Or10h1 antigen binding proteins and uses thereof |
WO2018096179A1 (en) | 2016-11-28 | 2018-05-31 | Curevac Ag | Method for purifying rna |
EP4035659A1 (en) | 2016-11-29 | 2022-08-03 | PureTech LYT, Inc. | Exosomes for delivery of therapeutic agents |
WO2018104540A1 (en) | 2016-12-08 | 2018-06-14 | Curevac Ag | Rnas for wound healing |
EP3551230A1 (en) * | 2016-12-08 | 2019-10-16 | CureVac AG | Rna for treatment or prophylaxis of a liver disease |
EP3558354A1 (en) | 2016-12-23 | 2019-10-30 | CureVac AG | Lassa virus vaccine |
US11141476B2 (en) | 2016-12-23 | 2021-10-12 | Curevac Ag | MERS coronavirus vaccine |
US11524066B2 (en) | 2016-12-23 | 2022-12-13 | CureVac SE | Henipavirus vaccine |
CN108456669B (zh) * | 2017-02-20 | 2023-08-08 | 上海凯赛生物技术股份有限公司 | 一种核糖体结合位点、重组表达质粒、转化子及其应用 |
US11969506B2 (en) | 2017-03-15 | 2024-04-30 | Modernatx, Inc. | Lipid nanoparticle formulation |
HUE060693T2 (hu) | 2017-03-15 | 2023-04-28 | Modernatx Inc | Vegyület és készítmények terápiás szerek intracelluláris bejuttatására |
AU2018240515A1 (en) | 2017-03-24 | 2019-08-01 | CureVac SE | Nucleic acids encoding CRISPR-associated proteins and uses thereof |
US11357856B2 (en) | 2017-04-13 | 2022-06-14 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipids for delivery of active agents |
AU2018256867A1 (en) | 2017-04-27 | 2019-11-14 | The Johns Hopkins University | Nucleoside-modified mRNA-lipid nanoparticle lineage vaccine for hepatitis C virus |
CA3061612A1 (en) | 2017-04-28 | 2018-11-01 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Novel carbonyl lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids |
WO2018232120A1 (en) | 2017-06-14 | 2018-12-20 | Modernatx, Inc. | Compounds and compositions for intracellular delivery of agents |
MA49421A (fr) | 2017-06-15 | 2020-04-22 | Modernatx Inc | Formulations d'arn |
BR112019028280A2 (pt) | 2017-07-04 | 2020-07-14 | Curevac Ag | moléculas de ácido nucleico |
JP7355731B2 (ja) | 2017-08-16 | 2023-10-03 | アクイタス セラピューティクス インコーポレイテッド | 脂質ナノ粒子製剤における使用のための脂質 |
WO2019036030A1 (en) | 2017-08-17 | 2019-02-21 | Acuitas Therapeutics, Inc. | LIPIDS FOR USE IN LIPID NANOPARTICLE FORMULATIONS |
US11542225B2 (en) | 2017-08-17 | 2023-01-03 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipids for use in lipid nanoparticle formulations |
US20200362382A1 (en) | 2017-08-18 | 2020-11-19 | Modernatx, Inc. | Methods of preparing modified rna |
US11602557B2 (en) | 2017-08-22 | 2023-03-14 | Cure Vac SE | Bunyavirales vaccine |
WO2019046809A1 (en) | 2017-08-31 | 2019-03-07 | Modernatx, Inc. | METHODS OF MANUFACTURING LIPID NANOPARTICLES |
US20220233568A1 (en) * | 2017-10-19 | 2022-07-28 | Curevac Ag | Novel artificial nucleic acid molecules |
SG11202003247RA (en) | 2017-11-08 | 2020-05-28 | Curevac Ag | Rna sequence adaptation |
WO2019112489A1 (en) * | 2017-12-05 | 2019-06-13 | Limited Liability Company "Gero" | Methods and agents for treatment of aging and aging related conditions and diseases |
EP3723796A1 (en) | 2017-12-13 | 2020-10-21 | CureVac AG | Flavivirus vaccine |
US11167043B2 (en) | 2017-12-20 | 2021-11-09 | Translate Bio, Inc. | Composition and methods for treatment of ornithine transcarbamylase deficiency |
US11525158B2 (en) | 2017-12-21 | 2022-12-13 | CureVac SE | Linear double stranded DNA coupled to a single support or a tag and methods for producing said linear double stranded DNA |
EP3508499A1 (en) | 2018-01-08 | 2019-07-10 | iOmx Therapeutics AG | Antibodies targeting, and other modulators of, an immunoglobulin gene associated with resistance against anti-tumour immune responses, and uses thereof |
SG11202012710WA (en) * | 2018-06-25 | 2021-01-28 | Akouos Inc | Methods of treating clrn1-associated hearing loss and/or vision loss |
WO2020061367A1 (en) | 2018-09-19 | 2020-03-26 | Modernatx, Inc. | Compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents |
JP2022501367A (ja) | 2018-09-20 | 2022-01-06 | モデルナティエックス インコーポレイテッドModernaTX, Inc. | 脂質ナノ粒子の調製及びその投与方法 |
EP3874029B1 (en) * | 2018-10-29 | 2023-08-30 | Ottawa Hospital Research Institute | Genetically-engineered mesenchymal stem cells overexpressing aoah and uses thereof |
MX2021009236A (es) | 2019-01-31 | 2021-11-12 | Modernatx Inc | Agitadores vorticiales y metodos, sistemas y aparatos asociados de estos. |
MX2021009245A (es) | 2019-01-31 | 2021-11-12 | Modernatx Inc | Metodos de preparacion de nanoparticulas lipidicas. |
CN110229226B (zh) * | 2019-05-23 | 2023-04-11 | 西安医学院 | 一种slfn11截断肽及其应用和药物组合物 |
WO2020263883A1 (en) * | 2019-06-24 | 2020-12-30 | Modernatx, Inc. | Endonuclease-resistant messenger rna and uses thereof |
JP2022538688A (ja) | 2019-07-05 | 2022-09-05 | イオックス セラピューティクス アーゲー | IGSF11(VSIG3)のIgC2に結合する抗体及びその使用 |
CN112618711B (zh) * | 2019-09-24 | 2023-09-29 | 华南理工大学 | 一种猪口服接种疫苗纳米复合佐剂及其制备方法与应用 |
EP4047084A4 (en) * | 2019-10-17 | 2024-01-17 | Univ Nagoya City Public Univ Corp | ARTIFICIALLY SYNTHESIZED MRNA AND USE THEREOF |
EP3822288A1 (en) | 2019-11-18 | 2021-05-19 | Deutsches Krebsforschungszentrum, Stiftung des öffentlichen Rechts | Antibodies targeting, and other modulators of, the cd276 antigen, and uses thereof |
CN112980877A (zh) * | 2019-12-12 | 2021-06-18 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种提高外源基因表达效率的方法 |
US11576966B2 (en) | 2020-02-04 | 2023-02-14 | CureVac SE | Coronavirus vaccine |
US11241493B2 (en) | 2020-02-04 | 2022-02-08 | Curevac Ag | Coronavirus vaccine |
CN111118018B (zh) * | 2020-03-05 | 2021-06-01 | 泰州博莱得利生物科技有限公司 | 猫血清白蛋白重组蛋白及其在毕赤酵母中的表达方法 |
AU2021254312B2 (en) | 2020-04-09 | 2024-01-11 | Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. | Lipid nanoparticle composition |
TW202204622A (zh) | 2020-04-09 | 2022-02-01 | 大陸商蘇州艾博生物科技有限公司 | 針對冠狀病毒之核酸疫苗 |
EP4138897A1 (en) | 2020-04-22 | 2023-03-01 | BioNTech SE | Coronavirus vaccine |
JP2023532707A (ja) | 2020-06-30 | 2023-07-31 | スージョウ・アボジェン・バイオサイエンシズ・カンパニー・リミテッド | 脂質化合物及び脂質ナノ粒子組成物 |
WO2022008027A1 (en) | 2020-07-06 | 2022-01-13 | Iomx Therapeutics Ag | Antibodies binding igv of igsf11 (vsig3) and uses thereof |
EP4182297A1 (en) | 2020-07-16 | 2023-05-24 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Cationic lipids for use in lipid nanoparticles |
CN116157525A (zh) * | 2020-08-07 | 2023-05-23 | 香港科技大学 | 用于提高蛋白质表达的组合物和方法 |
AU2021328980A1 (en) | 2020-08-20 | 2023-03-09 | Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. | Lipid compounds and lipid nanoparticle compositions |
EP4222167A1 (en) | 2020-09-30 | 2023-08-09 | Nobell Foods, Inc. | Recombinant milk proteins and food compositions comprising the same |
US10947552B1 (en) | 2020-09-30 | 2021-03-16 | Alpine Roads, Inc. | Recombinant fusion proteins for producing milk proteins in plants |
US10894812B1 (en) | 2020-09-30 | 2021-01-19 | Alpine Roads, Inc. | Recombinant milk proteins |
JP2023547507A (ja) | 2020-11-03 | 2023-11-10 | ドイチェス クレブスフォルシュンクスツェントルム スチフトゥング デス エッフェントリヒェン レヒツ | 標的細胞限定的で共刺激性の二重特異性かつ2価の抗cd28抗体 |
AU2021405281A1 (en) | 2020-12-22 | 2023-07-06 | CureVac SE | Rna vaccine against sars-cov-2 variants |
CN116615472A (zh) | 2021-01-14 | 2023-08-18 | 苏州艾博生物科技有限公司 | 聚合物缀合的脂质化合物和脂质纳米颗粒组合物 |
WO2022152109A2 (en) | 2021-01-14 | 2022-07-21 | Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. | Lipid compounds and lipid nanoparticle compositions |
WO2022184845A1 (en) | 2021-03-03 | 2022-09-09 | Chemotherapeutisches Forschungsinstitut Georg-Speyer-Haus | Bispecific antibodies enhancing cell mediated immune responses |
WO2022247755A1 (en) | 2021-05-24 | 2022-12-01 | Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. | Lipid compounds and lipid nanoparticle compositions |
CN113904733B (zh) * | 2021-08-18 | 2022-09-13 | 国网浙江省电力有限公司信息通信分公司 | 基于基因编码与突变的超长距光传输方法及系统 |
TW202328067A (zh) | 2021-09-14 | 2023-07-16 | 美商雷納嘉德醫療管理公司 | 環狀脂質及其使用方法 |
WO2023044343A1 (en) | 2021-09-14 | 2023-03-23 | Renagade Therapeutics Management Inc. | Acyclic lipids and methods of use thereof |
WO2023056917A1 (en) | 2021-10-08 | 2023-04-13 | Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. | Lipid compounds and lipid nanoparticle compositions |
AR127312A1 (es) | 2021-10-08 | 2024-01-10 | Suzhou Abogen Biosciences Co Ltd | Compuestos lipídicos ycomposiciones de nanopartículas lipídicas |
CN116064598B (zh) | 2021-10-08 | 2024-03-12 | 苏州艾博生物科技有限公司 | 冠状病毒的核酸疫苗 |
CN113943750B (zh) * | 2021-10-16 | 2024-04-30 | 温州医科大学 | 一种秀丽隐杆线虫转基因质粒、转基因秀丽隐杆线虫的构建方法及应用 |
CN115404238A (zh) * | 2021-12-22 | 2022-11-29 | 江苏拓弘康恒医药有限公司 | 高翻译稳定性BDNF mRNA的设计和制备方法 |
WO2023122752A1 (en) | 2021-12-23 | 2023-06-29 | Renagade Therapeutics Management Inc. | Constrained lipids and methods of use thereof |
WO2023196931A1 (en) | 2022-04-07 | 2023-10-12 | Renagade Therapeutics Management Inc. | Cyclic lipids and lipid nanoparticles (lnp) for the delivery of nucleic acids or peptides for use in vaccinating against infectious agents |
WO2024002985A1 (en) | 2022-06-26 | 2024-01-04 | BioNTech SE | Coronavirus vaccine |
WO2024037578A1 (en) | 2022-08-18 | 2024-02-22 | Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. | Composition of lipid nanoparticles |
Family Cites Families (56)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5908779A (en) | 1993-12-01 | 1999-06-01 | University Of Connecticut | Targeted RNA degradation using nuclear antisense RNA |
JP2001518804A (ja) | 1997-03-21 | 2001-10-16 | エンゾー セラピューティクス インコーポレイテッド | ベクターおよびウイルスベクター、およびこれらを増殖するためのパッケージング細胞株 |
JP2002511259A (ja) * | 1998-04-09 | 2002-04-16 | ジェンセット | 5’estおよびコードされるヒトタンパク質 |
US6783961B1 (en) * | 1999-02-26 | 2004-08-31 | Genset S.A. | Expressed sequence tags and encoded human proteins |
US6423885B1 (en) | 1999-08-13 | 2002-07-23 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organization (Csiro) | Methods for obtaining modified phenotypes in plant cells |
US7700359B2 (en) * | 2000-06-02 | 2010-04-20 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Gene products differentially expressed in cancerous cells |
EP1404868A2 (en) * | 2001-02-28 | 2004-04-07 | Chondrogene Inc. | Compositions and methods relating to osteoarthritis |
EP2842964A1 (de) | 2001-06-05 | 2015-03-04 | Curevac GmbH | Virtuelles Verfahren zur Ermittlung einer modifzierten mRNA-Sequenz |
US8021875B2 (en) * | 2001-08-27 | 2011-09-20 | Roche Madison Inc. | Methods for expression of transgenes |
US7985553B2 (en) * | 2001-10-29 | 2011-07-26 | Nathaniel Heintz | Method for isolating cell type-specific mRNAs |
DE10162480A1 (de) | 2001-12-19 | 2003-08-07 | Ingmar Hoerr | Die Applikation von mRNA für den Einsatz als Therapeutikum gegen Tumorerkrankungen |
DE10229872A1 (de) | 2002-07-03 | 2004-01-29 | Curevac Gmbh | Immunstimulation durch chemisch modifizierte RNA |
US9068234B2 (en) * | 2003-01-21 | 2015-06-30 | Ptc Therapeutics, Inc. | Methods and agents for screening for compounds capable of modulating gene expression |
EP1604011A4 (en) | 2003-01-21 | 2009-12-09 | Ptc Therapeutics Inc | METHODS FOR IDENTIFYING COMPOUNDS THAT MODULATE THE EXPRESSION OF DEPENDENT GENES FROM A NON-TRANSLATED REGION, AND METHODS OF USING SAME |
DE10335833A1 (de) | 2003-08-05 | 2005-03-03 | Curevac Gmbh | Transfektion von Blutzellen mit mRNA zur Immunstimulation und Gentherapie |
WO2005035771A2 (en) * | 2003-10-10 | 2005-04-21 | Powderject Vaccines, Inc. | Nucleic acid constructs |
PL1959011T3 (pl) | 2003-10-24 | 2012-07-31 | Selexis Sa | Wysokowydajny transfer genu i ekspresja w komórkach ssaczych przez procedurę wielokrotnej transfekcji sekwencji regionu przylegania do macierzy |
DE102004035227A1 (de) | 2004-07-21 | 2006-02-16 | Curevac Gmbh | mRNA-Gemisch zur Vakzinierung gegen Tumorerkrankungen |
DE102004042546A1 (de) | 2004-09-02 | 2006-03-09 | Curevac Gmbh | Kombinationstherapie zur Immunstimulation |
DE102005023170A1 (de) | 2005-05-19 | 2006-11-23 | Curevac Gmbh | Optimierte Formulierung für mRNA |
EP3611266B1 (en) | 2005-08-23 | 2022-11-09 | The Trustees of the University of Pennsylvania | Rna containing modified nucleosides and methods of use thereof |
DE102006035618A1 (de) | 2006-07-31 | 2008-02-07 | Curevac Gmbh | Nukleinsäure der Formel (I): GlXmGn, insbesondere als immunstimulierendes Adjuvanz |
EP2046954A2 (en) | 2006-07-31 | 2009-04-15 | Curevac GmbH | NUCLEIC ACID OF FORMULA (I): GIXmGn, OR (II): CIXmCn, IN PARTICULAR AS AN IMMUNE-STIMULATING AGENT/ADJUVANT |
DE102006061015A1 (de) | 2006-12-22 | 2008-06-26 | Curevac Gmbh | Verfahren zur Reinigung von RNA im präparativen Maßstab mittels HPLC |
DE102007001370A1 (de) | 2007-01-09 | 2008-07-10 | Curevac Gmbh | RNA-kodierte Antikörper |
WO2009030254A1 (en) | 2007-09-04 | 2009-03-12 | Curevac Gmbh | Complexes of rna and cationic peptides for transfection and for immunostimulation |
WO2009046738A1 (en) | 2007-10-09 | 2009-04-16 | Curevac Gmbh | Composition for treating lung cancer, particularly of non-small lung cancers (nsclc) |
WO2009046739A1 (en) | 2007-10-09 | 2009-04-16 | Curevac Gmbh | Composition for treating prostate cancer (pca) |
US8101606B2 (en) * | 2007-11-12 | 2012-01-24 | Washington University | Neurofibromin pathway modulators |
KR101483715B1 (ko) | 2008-01-31 | 2015-01-19 | 큐어백 게엠바하 | 면역증강제/애주번트인 화학식(NuGlXmGnNv)a를 포함하는 핵산 및 이의 유도체 |
GB0815872D0 (en) | 2008-09-01 | 2008-10-08 | Pasteur Institut | Novel method and compositions |
WO2010037408A1 (en) | 2008-09-30 | 2010-04-08 | Curevac Gmbh | Composition comprising a complexed (m)rna and a naked mrna for providing or enhancing an immunostimulatory response in a mammal and uses thereof |
US8343497B2 (en) | 2008-10-12 | 2013-01-01 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Targeting of antigen presenting cells with immunonanotherapeutics |
ES2679043T3 (es) | 2009-05-15 | 2018-08-21 | Irx Therapeutics, Inc. | Inmunoterapia de vacuna |
US20110053829A1 (en) | 2009-09-03 | 2011-03-03 | Curevac Gmbh | Disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates for the transfection of nucleic acids |
WO2011069529A1 (en) | 2009-12-09 | 2011-06-16 | Curevac Gmbh | Mannose-containing solution for lyophilization, transfection and/or injection of nucleic acids |
EP2955230A1 (en) | 2010-07-30 | 2015-12-16 | CureVac AG | Complexation of nucleic acids with disulfide-crosslinked cationic components for transfection and immunostimulation |
WO2012019630A1 (en) | 2010-08-13 | 2012-02-16 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded protein |
WO2012089225A1 (en) | 2010-12-29 | 2012-07-05 | Curevac Gmbh | Combination of vaccination and inhibition of mhc class i restricted antigen presentation |
WO2012116715A1 (en) | 2011-03-02 | 2012-09-07 | Curevac Gmbh | Vaccination in newborns and infants |
WO2012113413A1 (en) | 2011-02-21 | 2012-08-30 | Curevac Gmbh | Vaccine composition comprising complexed immunostimulatory nucleic acids and antigens packaged with disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates |
WO2012116714A1 (en) | 2011-03-02 | 2012-09-07 | Curevac Gmbh | Vaccination in elderly patients |
WO2013113326A1 (en) | 2012-01-31 | 2013-08-08 | Curevac Gmbh | Pharmaceutical composition comprising a polymeric carrier cargo complex and at least one protein or peptide antigen |
WO2013113325A1 (en) | 2012-01-31 | 2013-08-08 | Curevac Gmbh | Negatively charged nucleic acid comprising complexes for immunostimulation |
WO2013120497A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded therapeutic protein |
WO2013120498A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded allergenic antigen or an autoimmune self-antigen |
WO2013120500A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded tumour antigen |
WO2013120499A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly (a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded pathogenic antigen |
DK2831241T3 (da) | 2012-03-27 | 2017-11-06 | Curevac Ag | Kunstige nukleinsyremolekyler til forbedret protein- eller peptidekspression. |
KR20140139101A (ko) | 2012-03-27 | 2014-12-04 | 큐어백 게엠바하 | 5''top utr을 포함하는 인공 핵산 분자 |
CA2866955A1 (en) | 2012-03-27 | 2013-10-03 | Curevac Gmbh | Artificial nucleic acid molecules |
ES2719598T3 (es) | 2012-05-25 | 2019-07-11 | Curevac Ag | Inmovilización reversible y/o liberación controlada de ácidos nucleicos contenidos en nanopartículas mediante revestimientos poliméricos (biodegradables) |
WO2014081507A1 (en) | 2012-11-26 | 2014-05-30 | Moderna Therapeutics, Inc. | Terminally modified rna |
BR112016001192A2 (pt) | 2013-08-21 | 2017-08-29 | Curevac Ag | Vacina contra a raiva |
ES2747762T3 (es) | 2013-08-21 | 2020-03-11 | Curevac Ag | Vacuna contra el virus respiratorio sincitial (RSV) |
SG10201903381TA (en) * | 2013-12-30 | 2019-05-30 | Curevac Ag | Artificial nucleic acid molecules |
-
2013
- 2013-03-27 DK DK13716727.6T patent/DK2831241T3/da active
- 2013-03-27 CA CA2859452A patent/CA2859452C/en active Active
- 2013-03-27 SG SG10201607968WA patent/SG10201607968WA/en unknown
- 2013-03-27 SG SG10201710631RA patent/SG10201710631RA/en unknown
- 2013-03-27 RU RU2018117941A patent/RU2750261C2/ru active
- 2013-03-27 BR BR112014018210A patent/BR112014018210A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2013-03-27 AU AU2013242404A patent/AU2013242404B2/en active Active
- 2013-03-27 MX MX2014011485A patent/MX362981B/es active IP Right Grant
- 2013-03-27 ES ES17001061T patent/ES2742473T3/es active Active
- 2013-03-27 RU RU2014142978A patent/RU2658490C2/ru active
- 2013-03-27 CN CN201380016579.4A patent/CN104284979B/zh active Active
- 2013-03-27 DK DK19171200.9T patent/DK3578659T3/da active
- 2013-03-27 MX MX2019002345A patent/MX2019002345A/es unknown
- 2013-03-27 JP JP2015502142A patent/JP6185553B2/ja active Active
- 2013-03-27 US US14/388,226 patent/US9683233B2/en active Active
- 2013-03-27 SG SG11201403450VA patent/SG11201403450VA/en unknown
- 2013-03-27 ES ES13716727.6T patent/ES2654205T3/es active Active
- 2013-03-27 KR KR1020147030147A patent/KR102287184B1/ko active IP Right Grant
- 2013-03-27 WO PCT/EP2013/000937 patent/WO2013143699A1/en active Application Filing
-
2017
- 2017-05-09 US US15/590,370 patent/US10738306B2/en active Active
- 2017-07-27 JP JP2017145047A patent/JP6700227B2/ja active Active
-
2018
- 2018-11-15 AU AU2018264081A patent/AU2018264081C1/en active Active
-
2020
- 2020-07-04 US US16/920,701 patent/US20200332293A1/en active Pending
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6700227B2 (ja) | タンパク質又はペプチドの発現を改善するための人工核酸分子 | |
JP6301906B2 (ja) | 5’toputrを含む人工核酸分子 | |
AU2013242403B2 (en) | Artificial nucleic acid molecules | |
US11524066B2 (en) | Henipavirus vaccine | |
JP6648019B2 (ja) | Rnaコードされたタンパク質の発現を促進するための医薬的組成物、医薬的組成物の製造のための修飾rnaの使用、および、医薬的組成物を含むパーツキット | |
EP2603590B1 (en) | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded protein | |
US20170326225A1 (en) | Ebolavirus and marburgvirus vaccines | |
EP3551230A1 (en) | Rna for treatment or prophylaxis of a liver disease | |
CN111304231A (zh) | 人工核酸分子 | |
WO2022167009A1 (zh) | 靶向Aqp1 mRNA的sgRNA及其载体与应用 | |
EP2814964B1 (en) | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded allergenic antigen or an autoimmune self-antigen |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20151209 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20151209 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20161122 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170221 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20170530 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20170626 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20170727 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6185553 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |