JP2001518804A - ベクターおよびウイルスベクター、およびこれらを増殖するためのパッケージング細胞株 - Google Patents
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Abstract
Description
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1.ウイルスベクター、ウイルスベクター核酸、またはウイルスベクター核酸配 列を含有する核酸構築物を含むベクターであって、該ベクターは、外因性遺伝子 または外因性核酸配列を、目的の標的細胞において発現し得、該ベクターは、以 下: (i)少なくとも1つの配列セグメントが改変されている1つ以上のネイティ ブなプロモーター/エンハンサー領域、 (ii)1つ以上のネイティブでないプロモーター/エンハンサーまたはネイテ ィブでないプロモーターの遺伝子もしくは遺伝子セグメント、および (iii)ネイティブなウイルスベクターターミネーターもしくはプロセシング シグナルもしくはそのセグメント、またはその両方、 を含む核酸成分を含む、ベクター。 2.請求項1に記載のウイルスベクターであって、該ベクターがさらに、ネイテ ィブでないターミネーターを含む、ウイルスベクター。 3.請求項1に記載のウイルスベクターであって、2つ以上の改変された配列セ グメントを含む、ウイルスベクター。 4.請求項1に記載のベクターであって、前記改変が、該ベクターの前記1つ以 上のプロモーター/エンハンサー領域において、ネイティブでない配列セグメン トでの、ネイティブな配列セグメントの置換を含む、ウイルスベクター。 5.請求項4に記載のウイルスベクターであって、前記置換における配列セグメ ントが、ほぼ同じサイズである、ウイルスベクター。 6.請求項1に記載のウイルスベクターであって、前記改変が、点変異、欠失、 および置換からなる群より選択される変異、または上述の任意の組合せを含む、 ウイルスベクター。 7.請求項1に記載のウイルスベクターであって、該ウイルスベクターがレトロ ウイルスである、ウイルスベクター。 8.請求項1に記載のウイルスベクターであって、前記ターミネータ、もしくは 前記プロセシングシグナル、またはその両方が、ポリアデニル化シグナルを含む 、ウイルスベクター。 9.請求項1に記載のウイルスベクターであって、前記ウイルスベクターのター ミネーターのセグメントもしくは前記プロセシングシグナルのセグメント、また はその両方を含む、ウイルスベクター。 10.請求項1に記載のウイルスベクターであって、前記1つ以上のプロモータ ー/エンハンサーの機能が、減少されるか、阻害されるか、または排除される、 ウイルスベクター。 11.請求項1に記載のウイルスベクターであって、前記1つ以上のネイティブ でないプロモーターが、ポリアデニル化シグナルを欠損するRNAを産生し得る 、ウイルスベクター。 12.請求項11に記載のウイルスベクターであって、前記1つ以上のネイティ ブでないプロモーターが、snRNA、tRNA、およびrRNAからなる群より選択される か、または上述の任意の組合せである、ウイルスベクター。 13.請求項12に記載のウイルスベクターであって、前記snRNA、tRNA、また はrRNA遺伝子の1つ以上の遺伝子または遺伝子セグメントの配列をさらに含む、 ウイルスベクター。 14.請求項12または13に記載のウイルスベクターであって、前記snRNAが 、U1、U2、U3、U4、U5、U6、U7、U8、U9、U10、およびU11からなる群より選択さ れるか、または上述の任意の組合わせである、ウイルスベクター。 15.請求項1、12、または13のウイルスベクターであって、前記1つ以上 のネイティブでないプロモーターの遺伝子または遺伝子セグメントの配列が、改 変されている、ウイルスベクター。 16.請求項15に記載のウイルスベクターであって、前記改変が、外因性遺伝 子または外因性核酸配列での、前記1つ以上のネイティブでないプロモーターの 遺伝子配列の置換、または置換え、または付加を含む、ウイルスベクター。 17.少なくとも2つの成分、前記ベクターについての、パッケージング細胞株 への吸着のための一方の成分、および該ベクターの送達についての、標的細胞へ の吸着のための他方の成分を、表面またはそのエンベロープにおいて有するウイ ルスまたはウイルスの部分を含む、ウイルスベクター。 18.請求項17に記載のウイルスベクターであって、両方の成分が、該ウイル スベクターに対してネイティブである、ウイルスベクター。 19.請求項17に記載のウイルスベクターであって、前記一方の成分が該ウイ ルスに対してネイティブであり、および前記他方の成分が該ウイルスに対してネ イティブでない、ウイルスベクター。 20.請求項17に記載のウイルスベクターであって、両方の成分が、該ウイル スベクターに対してネイティブでない、ウイルスベクター。 21.請求項19または20に記載のウイルスベクターであって、前記ネイティ ブでない成分が、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、B型肝炎ウイルス(HBV)、 C型肝炎ウイルス(HCV)、単純疱疹ウイルス(HSV)、および水庖性口炎ウイルス(V SV)、およびその一部もしくは部分からなる群より選択されるか、または由来す るか、または上述の任意の組合せである、ウイルスベクター。 22.請求項21に記載のウイルスベクターであって、前記HIVまたはその一部 または部分が、gp120を含む、ウイルスベクター。 23.請求項21に記載のウイルスベクターであって、前記HBVもしくはその一 部もしくは部分、または前記HCVもしくはその一部もしくは部分が、表面抗原を 含む、ウイルスベクター。 24.請求項17に記載のウイルスベクターであって、該ウイルスベクターがレ トロウイルスを含む、ウイルスベクター。 25.請求項24に記載のウイルスベクターであって、前記レトロウイルスが、 マウスレトロウイルスを含む、ウイルスベクター。 26.請求項18または19に記載のウイルスベクターであって、前記成分の一 方が狭宿主性である、ウイルスベクター。 27.請求項18または19に記載のウイルスベクターであって、前記成分の一 方が広宿主性である、ウイルスベクター。 28.請求項17に記載のウイルスベクターであって、一方の成分、他方の成分 、または両方の成分が、タンパク質、オリゴペプチドもしくはポリペプチド、糖 タンパク質、融合されたペプチド、組換えペプチド、改変されたペプチド、また は上述の任意の組合わせからなる群より選択される、ウイルスベクター。 29.表面またはエンベロープにおいて少なくとも2つの成分を有する、ウイル スまたはそのウイルス部分を含むウイルスベクターであって、第1の成分が、該 ウイルスに対してネイティブであり、および第2の成分が、以下: (i)該ウイルスベクターに対してネイティブでない; (ii)目的の標的細胞に対して吸着し得る、および (iii)該ウイルスベクターについてネイティブな細胞に対して吸着し得ない 、という点において特徴づけされる、ウイルスベクター。 30.請求項29に記載のウイルスベクターであって、該ウイルスベクターがレ トロウイルスである、ウイルスベクター。 31.請求項30に記載のウイルスベクターであって、前記レトロウイルスが、 マウス白血病ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、ヒトT細胞白血病ウイルス、お よびテナガザル白血病ウイルスからなる群より選択されるか、または上述の任意 の組合せである、ウイルスベクター。 32.請求項29に記載のウイルスベクターであって、ネイティブでない成分が 、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、B型肝炎ウイルス(HBV)、C型肝炎ウイルス(HCV )、単純疱疹ウイルス(HSV)、および水庖性口炎ウイルス(VSV)、およびその一部 もしくは部分からなる群より選択されるか、または由来するか、または上述の任 意の組合せである、ウイルスベクター。 33.請求項32に記載のウイルスベクターであって、前記由来するメンバーが 、HIV gp120を含む、ウイルスベクター。 34.請求項32に記載のウイルスベクターであって、前記由来するメンバーが 、HBV表面抗原またはHCV表面抗原を含む、ウイルスベクター。 35.請求項29に記載のウイルスベクターであって、前記標的細胞が、T細胞 、肝細胞、骨髄細胞、および上皮細胞からなる群より選択されるか、または上述 の 任意の組合せである、ウイルスベクター。 36.(i)ウイルスベクター、(ii)ウイルス核酸、および(iii)核酸構築 物からなる群より選択されるベクターであって、該ベクターは、セグメントをコ ードするネイティブでない核酸配列を含み、該セグメントは、標的細胞のゲノム に取込まれ得、および該ベクターは、該標的細胞において第1の核酸を生成およ び導入し得、 該第1の核酸は、第1の核酸の部分を含む第2の核酸を生成し得、該第2の核 酸は、該取込みセグメントを含み、そして外因性遺伝子または外因性核酸配列を 発現し得る、ベクター。 37.請求項36に記載のベクターであって、該ベクターが、ウイルスベクター を含み、および前記取込みセグメントが、該ウイルスベクターに対してネイティ ブでない、ベクター。 38.請求項36に記載のベクターであって、該ベクターが、ウイルス核酸を含 み、および前記取込みセグメントが、該ウイルスベクターに対してネイティブで ない、ベクター。 39.請求項36に記載のベクターであって、前記ウイルスベクターが、(i) アデノウイルスを含む、ベクター。 40.請求項36に記載ウイルスベクターであって、前記第1の核酸が、レトロ ウイルスを含み、および前記第2の核酸が、アデノ随伴ウイルス(AAV)を含む 、ウイルスベクター。 41.請求項36に記載のウイルスベクターであって、前記第1の核酸が、アデ ノ随伴ウイルス(AAV)を含み、および前記第2の核酸が、レトロウイルスを含 む、ベクター。 42.請求項37に記載のウイルスベクターであって、前記第2の核酸配列が、 レトロウイルスLTRまたはアデノ随伴ウイルスを含む、ウイルスベクター。 43.(i)ウイルス核酸およびウイルスベクターパッケージング成分を含むウ イルスベクター、(ii)ウイルス核酸、および(iii)核酸構築物からなる群よ り選択される第1のベクターであって、 パッケージング細胞に導入される場合、該第1のベクターは(a)第2のウイ ルスベクター、(b)ウイルス核酸、および(c)第2の核酸構築物からなる群 より選択される第2のベクターを生成し得、それぞれは目的の標的細胞において 外因性遺伝子または外因性核酸配列を発現し得、 該第1のベクターは、該パッケージング細胞において、該第2のベクターを生 成し得、および 該パッケージング細胞は、前記第2のウイルス核酸についての1つ以上のパッ ケージング成分を提供し得、 該第2のウイルス核酸もしくは該第2の核酸構築物が、該第1の(i)ウイル ス核酸もしくは該第1の(iii)核酸構築物とは構造的に異なるか、または該第 2のウイルスベクターの1つよりも多いパッケージング成分が、該第1のウイル スベクターのパッケージング成分(ii)とは異なるか、またはその両方である、 第1のベクター。 44.請求項43に記載の第1のベクターであって、該第1のベクターがレトロ ウイルスを含み、および該第2のベクターが、アデノ随伴ウイルス(AAV)を含 む、第1のベクター。 45.請求項43に記載の第1のベクターであって、前記構造的差異が、核酸の 化学的性質、核酸の形態、核酸のサイズ、および機能的エレメントからなる群よ り選択される差異、または上述の任意の組合せを含む、第1のベクター。 46.請求項45に記載の第1のベクターであって、前記核酸の化学的性質、第 2のウイルス核酸、または第2の核酸が、RNAおよびDNAからなる群より選択され 、ならびに(i)ウイルス核酸または(iii)核酸構築物が、該群の異なるメン バーを含む、第1のベクター。 47.請求項45に記載の第1のベクターであって、前記核酸の形態、第2のウ イルス核酸、または第2の核酸が、1本鎖、2本鎖、および部分的な2本鎖から なる群より選択され、ならびに(i)ウイルス核酸または(iii)核酸構築物が 、該群の異なるメンバーを含む、第1のベクター。 48.請求項45に記載の第1のベクターであって、前記核酸の大きさ、第2の ウイルス核酸、または第2の核酸が、(i)ウイルス核酸または(iii)核酸構 築物のセグメントを含む、第1のベクター。 49.請求項45に記載の第1のベクターであって、前記機能的なセグメント、 第2のウイルス核酸、または第2の核酸が、1つ以上のプロモーター、1つ以上 のエンハンサー領域、取込みセグメント、およびターミネーター、または部分も しくはセグメント、または上述の任意の組合せを含み、ならびに(i)ウイルス 核酸または(iii)核酸構築物が、該群の異なるメンバーを含む、第1のベクタ ー。 50.請求項43に記載の第1のベクターであって、該第1のベクターが、レト ロウイルスを含み、そして前記第2のベクターが、アデノ随伴ウイルスを含む、 第1のベクター。 51.請求項43に記載の第1のベクターであって、該第1のベクターが、アデ ノ随伴ウイルスを含み、前記第2のベクターが、レトロウイルスを含む、第1の ベクター。 52.請求項50に記載のウイルスベクターを増殖するためのパッケージング細 胞株であって、該パッケージング細胞株が、該ウイルスベクターの表面またはエ ンベロープについての少なくとも2つのパッケージング成分を提供する、パッケ ージング細胞株。 53.請求項52に記載のパッケージング細胞株であって、該細胞株が、前記ウ イルスベクターに対してネイティブである、パッケージング細胞株。 54.請求項52に記載のパッケージング細胞株であって、該細胞株が、レトロ ウイルスを含む、パッケージング細胞株。 55.請求項52に記載のパッケージング細胞株であって、該細胞株が、NIH3T3 、U937、H9、および293からなる群より選択されるか、または上述の任意の組合 わせである、パッケージング細胞株。 56.請求項52に記載のパッケージング細胞株であって、表面またはエンベロ ープの成分の両方の任意の配列が、該パッケージング細胞株の染色体に安定に取 込まれる、パッケージング細胞株。 57.請求項52に記載のパッケージング細胞株であって、表面またはエンベロ ープの成分の配列が、該パッケージング細胞株の染色体に安定に取込まれ、およ び別の表面またはエンベロープの成分の配列が、一過性に発現される、パッケー ジング細胞株。 58.請求項52に記載のパッケージング細胞株であって、前記エンベロープの 成分の配列が、該パッケージング細胞株の染色体に安定に取込まれ、および前記 表面成分の配列が、一過性に発現される、パッケージング細胞株。 59.請求項52に記載のパッケージング細胞株であって、表面またはエンベロ ープの成分の両方の任意の配列が、一過性に発現される、パッケージング細胞株 。 60.請求項19、20、または29のいずれかに記載のウイルスベクターを増 殖するためのパッケージング細胞株であって、該細胞株は、該ウイルスベクター の成分に対してネイティブでないが、該ウイルスベクター核酸に対してネイティ ブであり、該パッケージング細胞株が、その膜または表面において、該ベクター について該ネイティブでない成分への吸着のためのレセプターまたは結合対を発 現する、パッケージング細胞株。 61.請求項1に記載のウイルスベクターまたはウイルスベクター核酸を生成す るためのプロセスであって、該プロセスは、以下: 請求項1に記載のベクターを提供する工程;および 該ウイルスベクターまたは該ウイルスベクター核酸を生成する条件下で、パッ ケージング細胞に該ベクターを導入する工程を包含する、プロセス。 62.請求項61に記載のプロセスであって、前記提供する工程または導入する 工程において、核酸構築物が、プロモーター/エンハンサー領域において改変さ れている、プロセス。 63.請求項61に記載のプロセスであって、前記提供する工程または導入する 工程において、核酸構築物が、ネイティブでないプロモーターにおいて改変され ている、プロセス。 64.請求項61に記載のプロセスであって、前記核酸構築物が、前記パッケー ジング細胞株に安定に取込まれ得る、プロセス。 65.請求項61に記載のプロセスであって、前記核酸構築物が、エピソームの 手段によって改変されている、プロセス。 66.請求項61に記載のプロセスであって、前記核酸構築物が、一過性の発現 の手段によって改変されている、プロセス。 67.ヘルパーウイルスから独立してウイルスベクターを増殖するためのパッケ ージング細胞株であって、該ウイルスベクターは、核酸成分および非核酸成分を 含み、ウイルスベクターの核酸成分の配列は、該宿主細胞株に安定に取込まれ、 そして該ウイルスベクターの非核酸成分の配列が、一過性の発現、エピソーム発 現、安定に取込まれる発現、または上述の任意の組み合わせからなる群より選択 される手段によって、該パッケージング細胞株に導入される、パッケージング細 胞株。
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