JP5634415B2 - 腫瘍の治療のための細胞治療方法 - Google Patents
腫瘍の治療のための細胞治療方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5634415B2 JP5634415B2 JP2012020842A JP2012020842A JP5634415B2 JP 5634415 B2 JP5634415 B2 JP 5634415B2 JP 2012020842 A JP2012020842 A JP 2012020842A JP 2012020842 A JP2012020842 A JP 2012020842A JP 5634415 B2 JP5634415 B2 JP 5634415B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- seq
- cells
- peptide
- peripheral blood
- peptides
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 82
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 66
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title description 37
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 title description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 213
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 129
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 101
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 53
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 52
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 52
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 38
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 claims abstract description 36
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 claims description 76
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims description 70
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims description 70
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 54
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 claims description 50
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 claims description 50
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 39
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 claims description 36
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 claims description 36
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 claims description 33
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 31
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 claims description 28
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 24
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 22
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 22
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 claims description 21
- 101800001271 Surface protein Proteins 0.000 claims description 21
- 102100022430 Melanocyte protein PMEL Human genes 0.000 claims description 20
- 101000578784 Homo sapiens Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Proteins 0.000 claims description 17
- 102100028389 Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Human genes 0.000 claims description 17
- 108010070641 PEC-60 polypeptide Proteins 0.000 claims description 16
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 15
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 14
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 13
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims description 13
- 239000002523 lectin Substances 0.000 claims description 10
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 claims description 8
- 101000623901 Homo sapiens Mucin-16 Proteins 0.000 claims description 7
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims description 7
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 6
- AHOKKYCUWBLDST-QYULHYBRSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)[C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 AHOKKYCUWBLDST-QYULHYBRSA-N 0.000 claims description 4
- 102100025570 Cancer/testis antigen 1 Human genes 0.000 claims description 4
- 101000856237 Homo sapiens Cancer/testis antigen 1 Proteins 0.000 claims description 4
- 108010017842 Telomerase Proteins 0.000 claims description 3
- 101100314454 Caenorhabditis elegans tra-1 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 102100034256 Mucin-1 Human genes 0.000 claims description 2
- 108010008707 Mucin-1 Proteins 0.000 claims description 2
- 201000003733 ovarian melanoma Diseases 0.000 claims 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 claims 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims 1
- 108010044720 telomerase reverse transcriptase (540-548) Proteins 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 272
- 241000255581 Drosophila <fruit fly, genus> Species 0.000 abstract description 49
- 230000004044 response Effects 0.000 abstract description 26
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 abstract description 23
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 abstract description 20
- 239000012636 effector Substances 0.000 abstract description 16
- 241000255601 Drosophila melanogaster Species 0.000 abstract description 10
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 abstract description 8
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 abstract description 7
- 241000282412 Homo Species 0.000 abstract description 5
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 abstract description 5
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 abstract description 2
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 abstract description 2
- 210000001266 CD8-positive T-lymphocyte Anatomy 0.000 abstract 1
- 208000007654 attenuated familial adenomatous polyposis Diseases 0.000 abstract 1
- 230000001010 compromised effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 abstract 1
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 description 118
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 39
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 39
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 30
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 30
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 30
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 25
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 24
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 22
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 21
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 21
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 20
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 20
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 20
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 19
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 19
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 15
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 13
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 13
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 12
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 11
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 11
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 11
- 102000015271 Intercellular Adhesion Molecule-1 Human genes 0.000 description 10
- 108010064593 Intercellular Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 10
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 10
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 9
- 108010071463 Melanoma-Specific Antigens Proteins 0.000 description 9
- 102000007557 Melanoma-Specific Antigens Human genes 0.000 description 9
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 9
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 9
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 9
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 8
- 102000015736 beta 2-Microglobulin Human genes 0.000 description 8
- 108010081355 beta 2-Microglobulin Proteins 0.000 description 8
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 8
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 8
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 8
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 8
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 8
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 description 8
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 8
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 8
- 102000025850 HLA-A2 Antigen Human genes 0.000 description 7
- 108010074032 HLA-A2 Antigen Proteins 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 210000003171 tumor-infiltrating lymphocyte Anatomy 0.000 description 7
- -1 B7.2 Proteins 0.000 description 6
- 108010084313 CD58 Antigens Proteins 0.000 description 6
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 6
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 6
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 6
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 6
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 6
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 6
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 6
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 6
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 6
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 6
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 6
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 6
- 102000000440 Melanoma-associated antigen Human genes 0.000 description 5
- 108050008953 Melanoma-associated antigen Proteins 0.000 description 5
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 5
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 5
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 5
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 5
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 5
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 5
- 201000006512 mast cell neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 208000006971 mastocytoma Diseases 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 5
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 5
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 5
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 4
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 4
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 4
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 4
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 4
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 4
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 4
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 4
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 4
- 210000003810 lymphokine-activated killer cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 4
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 4
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 4
- DIGQNXIGRZPYDK-WKSCXVIASA-N (2R)-6-amino-2-[[2-[[(2S)-2-[[2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2R,3S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[2-[[2-[[2-[(2-amino-1-hydroxyethylidene)amino]-3-carboxy-1-hydroxypropylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxybutylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1,5-dihydroxy-5-iminopentylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxybutylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]hexanoic acid Chemical compound C[C@@H]([C@@H](C(=N[C@@H](CS)C(=N[C@@H](C)C(=N[C@@H](CO)C(=NCC(=N[C@@H](CCC(=N)O)C(=NC(CS)C(=N[C@H]([C@H](C)O)C(=N[C@H](CS)C(=N[C@H](CO)C(=NCC(=N[C@H](CS)C(=NCC(=N[C@H](CCCCN)C(=O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)N=C([C@H](CS)N=C([C@H](CO)N=C([C@H](CO)N=C([C@H](C)N=C(CN=C([C@H](CO)N=C([C@H](CS)N=C(CN=C(C(CS)N=C(C(CC(=O)O)N=C(CN)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O DIGQNXIGRZPYDK-WKSCXVIASA-N 0.000 description 3
- 102100034540 Adenomatous polyposis coli protein Human genes 0.000 description 3
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 3
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 3
- 102100025390 Integrin beta-2 Human genes 0.000 description 3
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 3
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- 108010064548 Lymphocyte Function-Associated Antigen-1 Proteins 0.000 description 3
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 3
- 102000003792 Metallothionein Human genes 0.000 description 3
- 108090000157 Metallothionein Proteins 0.000 description 3
- 206010027480 Metastatic malignant melanoma Diseases 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 208000028990 Skin injury Diseases 0.000 description 3
- 108010092262 T-Cell Antigen Receptors Proteins 0.000 description 3
- 102100025237 T-cell surface antigen CD2 Human genes 0.000 description 3
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 3
- 102100031988 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 6 Human genes 0.000 description 3
- 108050002568 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 6 Proteins 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000002788 anti-peptide Effects 0.000 description 3
- 230000006023 anti-tumor response Effects 0.000 description 3
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 3
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 3
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 3
- 108700020302 erbB-2 Genes Proteins 0.000 description 3
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 3
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- 208000021039 metastatic melanoma Diseases 0.000 description 3
- 238000012737 microarray-based gene expression Methods 0.000 description 3
- 238000012243 multiplex automated genomic engineering Methods 0.000 description 3
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 3
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 3
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 3
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 108010021809 Alcohol dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 102000016289 Cell Adhesion Molecules Human genes 0.000 description 2
- 108010067225 Cell Adhesion Molecules Proteins 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000001398 Granzyme Human genes 0.000 description 2
- 108060005986 Granzyme Proteins 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- 102000011786 HLA-A Antigens Human genes 0.000 description 2
- 108010075704 HLA-A Antigens Proteins 0.000 description 2
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 2
- 206010022004 Influenza like illness Diseases 0.000 description 2
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 2
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 101000856426 Mus musculus Cullin-7 Proteins 0.000 description 2
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 2
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N Perforine Natural products COC1=C2CCC(O)C(CCC(C)(C)O)(OC)C2=NC2=C1C=CO2 KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 2
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003181 biological factor Substances 0.000 description 2
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 210000004970 cd4 cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 2
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 2
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 210000004395 cytoplasmic granule Anatomy 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000003090 exacerbative effect Effects 0.000 description 2
- BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N geneticin Chemical compound O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(C)O)O2)N)[C@@H](N)C[C@H]1N BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N 0.000 description 2
- 230000005802 health problem Effects 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000012194 insect media Substances 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 210000002752 melanocyte Anatomy 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 2
- 229930192851 perforin Natural products 0.000 description 2
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 2
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- 238000011272 standard treatment Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- AWNBSWDIOCXWJW-WTOYTKOKSA-N (2r)-n-[(2s)-1-[[(2s)-1-(2-aminoethylamino)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-naphthalen-2-yl-1-oxopropan-2-yl]-n'-hydroxy-2-(2-methylpropyl)butanediamide Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C[C@H](NC(=O)[C@@H](CC(=O)NO)CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCCN)=CC=C21 AWNBSWDIOCXWJW-WTOYTKOKSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BRMWTNUJHUMWMS-UHFFFAOYSA-N 3-Methylhistidine Natural products CN1C=NC(CC(N)C(O)=O)=C1 BRMWTNUJHUMWMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940117976 5-hydroxylysine Drugs 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 101100346189 Caenorhabditis elegans mpc-1 gene Proteins 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100029855 Caspase-3 Human genes 0.000 description 1
- 101710090333 Caspase-5 Proteins 0.000 description 1
- 102100038916 Caspase-5 Human genes 0.000 description 1
- 102000003908 Cathepsin D Human genes 0.000 description 1
- 108090000258 Cathepsin D Proteins 0.000 description 1
- 108090000613 Cathepsin S Proteins 0.000 description 1
- 102100035654 Cathepsin S Human genes 0.000 description 1
- 206010008805 Chromosomal abnormalities Diseases 0.000 description 1
- 208000031404 Chromosome Aberrations Diseases 0.000 description 1
- 108091007045 Cullin Ring E3 Ligases Proteins 0.000 description 1
- 238000000018 DNA microarray Methods 0.000 description 1
- 206010011968 Decreased immune responsiveness Diseases 0.000 description 1
- 208000012239 Developmental disease Diseases 0.000 description 1
- 108700012293 Drosophila APC Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 101000793880 Homo sapiens Caspase-3 Proteins 0.000 description 1
- 101000611023 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000606090 Homo sapiens Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 206010024229 Leprosy Diseases 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010024641 Listeriosis Diseases 0.000 description 1
- 208000004852 Lung Injury Diseases 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 208000008771 Lymphadenopathy Diseases 0.000 description 1
- 206010025327 Lymphopenia Diseases 0.000 description 1
- 206010025652 Malignant melanoma in situ Diseases 0.000 description 1
- 206010064912 Malignant transformation Diseases 0.000 description 1
- 102000011202 Member 2 Subfamily B ATP Binding Cassette Transporter Human genes 0.000 description 1
- 108010023335 Member 2 Subfamily B ATP Binding Cassette Transporter Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 241000251748 Myxinidae Species 0.000 description 1
- JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N N(pros)-methyl-L-histidine Chemical compound CN1C=NC=C1C[C@H](N)C(O)=O JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 206010029488 Nodular melanoma Diseases 0.000 description 1
- 108090001074 Nucleocapsid Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000011931 Nucleoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010061100 Nucleoproteins Proteins 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 208000030852 Parasitic disease Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 208000008601 Polycythemia Diseases 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000052575 Proto-Oncogene Human genes 0.000 description 1
- 108700020978 Proto-Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 208000004337 Salivary Gland Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229940100514 Syk tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 101710165202 T-cell surface antigen CD2 Proteins 0.000 description 1
- 206010069363 Traumatic lung injury Diseases 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 102100040403 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 Human genes 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000018756 Variant Creutzfeldt-Jakob disease Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- GELXFVQAWNTGPQ-UHFFFAOYSA-N [N].C1=CNC=N1 Chemical compound [N].C1=CNC=N1 GELXFVQAWNTGPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000013228 adenopathy Diseases 0.000 description 1
- 230000001668 ameliorated effect Effects 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000004873 anchoring Methods 0.000 description 1
- 230000001495 anti-association Effects 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 238000002617 apheresis Methods 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 1
- 208000005881 bovine spongiform encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000000981 bystander Effects 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000009566 cancer vaccine Methods 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 231100000357 carcinogen Toxicity 0.000 description 1
- 239000003183 carcinogenic agent Substances 0.000 description 1
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000036978 cell physiology Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000005859 cell recognition Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000017455 cell-cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000013626 chemical specie Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 125000002668 chloroacetyl group Chemical group ClCC(=O)* 0.000 description 1
- 230000010428 chromatin condensation Effects 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 238000009096 combination chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 238000011254 conventional chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 229960003901 dacarbazine Drugs 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N delta-DL-hydroxylysine Natural products NCC(O)CCC(N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N erythro-5-hydroxy-L-lysine Chemical compound NC[C@H](O)CC[C@H](N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 230000003631 expected effect Effects 0.000 description 1
- 210000001723 extracellular space Anatomy 0.000 description 1
- 108010052621 fas Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000018823 fas Receptor Human genes 0.000 description 1
- 230000008175 fetal development Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 229940009600 gammagard Drugs 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000010749 gastric carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011194 good manufacturing practice Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000037824 growth disorder Diseases 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 238000011540 hip replacement Methods 0.000 description 1
- 229940042795 hydrazides for tuberculosis treatment Drugs 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000002991 immunohistochemical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 230000008611 intercellular interaction Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 208000030776 invasive breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000007798 limiting dilution analysis Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 201000005249 lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 231100000515 lung injury Toxicity 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 231100001023 lymphopenia Toxicity 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- 101150018863 maa gene Proteins 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 1
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- 230000036212 malign transformation Effects 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 201000010893 malignant breast melanoma Diseases 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 231100000324 minimal toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 229960003816 muromonab-cd3 Drugs 0.000 description 1
- JIDVGUQUQSOHOL-UHFFFAOYSA-N myxin Chemical compound C1=CC=C2[N+]([O-])=C3C(OC)=CC=CC3=[N+]([O-])C2=C1O JIDVGUQUQSOHOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 201000000032 nodular malignant melanoma Diseases 0.000 description 1
- 210000004882 non-tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 229940029358 orthoclone okt3 Drugs 0.000 description 1
- 208000013371 ovarian adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000000863 peptide conjugate Substances 0.000 description 1
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 210000003800 pharynx Anatomy 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011008 sodium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000003393 splenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000000498 stomach carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001839 systemic circulation Effects 0.000 description 1
- 229960001603 tamoxifen Drugs 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 208000012991 uterine carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0636—T lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/46449—Melanoma antigens
- A61K39/464491—Melan-A/MART
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0601—Invertebrate cells or tissues, e.g. insect cells; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K2035/124—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells the cells being hematopoietic, bone marrow derived or blood cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5154—Antigen presenting cells [APCs], e.g. dendritic cells or macrophages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5156—Animal cells expressing foreign proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5158—Antigen-pulsed cells, e.g. T-cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55522—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K2039/55527—Interleukins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55522—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K2039/55527—Interleukins
- A61K2039/55533—IL-2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55522—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K2039/55527—Interleukins
- A61K2039/55538—IL-12
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/38—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
- C12N2501/23—Interleukins [IL]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/50—Cell markers; Cell surface determinants
- C12N2501/515—CD3, T-cell receptor complex
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2502/00—Coculture with; Conditioned medium produced by
- C12N2502/99—Coculture with; Conditioned medium produced by genetically modified cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2510/00—Genetically modified cells
Description
a.天然に存在しない抗原提示細胞系(nnAPC)を調製することであって、前記nnAPCは、癌と関連する約15までの異なるペプチド分子、好ましくは約10の異なるペプチド分子を同時に提示することが可能であり、各ペプチドはが長さ約6ないし12アミノ酸、好ましくは長さが約8ないし10アミノ酸、かつ約10nMないし100μMの濃度範囲にあり;
b.癌を伴う被験体もしくは適するドナーからCD8+細胞を収集すること;
c.前記CD8+細胞を前記nnAPC細胞系で刺激すること;
d.馴化成長培地(CGM)もしくはIL−2、IL−7のようなサイトカインを含有する培地、好ましくはIL−2、または組合せのIL−2およびIL−7に前記CD8+細
胞を添加すること;
e.前記被験体もしくは適するドナーから収集された懸濁されない末梢血単球、あるいはCD−8枯渇末梢血単球を、約10ないし50μg/mlのペプチドと混合すること;
f.前記末梢血単球懸濁物を、約3,000ないし7,000ラドの範囲、好ましくは約5,000ラドの線量のような、懸濁物中のこれらの細胞の増殖を予防するのに必要な十分な線量のγ線放射で照射すること、あるいは、末梢血リンパ球懸濁物を、限定されるものでないがマイトマイシンCを挙げることができる細胞増殖抑制剤で処理してもよい;
g.接着性末梢血単球を単離すること;
h.前記接着性末梢血単球に、約10ng/mlないし10μg/mlの前記各ペプチドを添加すること;
i.前記CD8+細胞を、1の末梢血単球に対し約10のCD8+細胞の比で、前記接着性末梢血単球と組み合わせること;
j.場合によっては、CD8+細胞および末梢血単球の前記組み合わせられた懸濁物を約
6ないし7日間刺激すること;
k.場合によっては、CD8+細胞および末梢血単球の前記懸濁物を培地中のIL−2お
よびIL−7で刺激すること;
l.場合によっては、CD8+懸濁物を適するCTL活性についてアッセイすること、な
らびに、場合によって、CTLの純度、無菌性(sterility)およびエンドトキシン含量についてアッセイすること;ならびに、
m.前記被験体にCD8+懸濁物を接種すること
を含んで成る、前記被験体の治療方法を提供する。
a.天然に存在しない抗原提示細胞系(nnAPC)を調製することであって、前記nnAPCは癌と関連する約15までの異なるペプチド分子、好ましくは約10のペプチドを同時に提示することが可能であり、各ペプチドは長さが8ないし10アミノ酸であり;
b.癌を伴う被験体からCD8+細胞を収集すること;
c.前記CD8+細胞を前記nnAPC細胞系で約6ないし7日間刺激すること;
d.前記CD8+細胞を培地中のIL−2およびIL−7で刺激すること;
e.前記被験体から収集された末梢血単球を、約20μg/mlの各ペプチドと混合すること;
f.前記CD8枯渇末梢血単球懸濁物を、約5,000ラドのγ線放射で照射すること;g.接着性末梢血単球を単離すること;
h.前記接着性末梢血単球に、約10μg/mlの前記エピトープを添加すること;
i.前記CD8+細胞を、1の末梢血単球に対し約10のCD8+細胞の比で前記接着性
末梢血単球と組み合わせること;
j.CD8+細胞および末梢血単球の前記組み合わせられた懸濁物を約6ないし7日間刺
激すること;
k.CD8+細胞および末梢血単球の前記懸濁物を、培地中のIL−2およびIL−7で
刺激すること;
l.適するCTL活性、純度、無菌性およびエンドトキシン含量についてCD8+懸濁物
をアッセイすること;ならびに
m.前記被験体にCD8+懸濁物を接種すること
を含んで成る、前記被験体の治療方法を提供する。
a.天然に存在しない抗原提示細胞系(nnAPC)を調製することであって、前記nnAPCは黒色腫と関連する約15までの異なるペプチド分子、好ましくは約10のペプチドを同時に提示することが可能であり、各ペプチドは長さが8ないし10アミノ酸であり;
b.黒色腫を伴う被験体からCD8+細胞を収集すること;
c.前記CD8+細胞を前記nnAPC細胞系で約6ないし7日間刺激すること;
d.前記CD8+細胞を培地中のIL−2およびIL−7で刺激すること;
e.前記被験体から収集された末梢血単球を、約20μg/mlの、前記nnAPCが提示することができる各ペプチドと混合すること;
f.前記CD8枯渇末梢血単球懸濁物を、約5,000ラドのγ線放射で照射すること;g.接着性末梢血単球を単離すること;
h.前記接着性末梢血単球に、約10μg/mlの前記エピトープを添加すること;
i.前記CD8+細胞を、1の末梢血単球に対し約10のCD8+細胞の比で前記接着性
末梢血単球と組み合わせること;
j.CD8+細胞および末梢血単球の前記組み合わせられた懸濁物を約6ないし7日間刺
激すること;
k.CD8+細胞および末梢血単球の前記懸濁物を培地中のIL−2およびIL−7で刺
激すること;
l.CD8+懸濁物を、適するCTL活性、純度、無菌性およびエンドトキシン含量につ
いてアッセイすること;ならびに
m.前記被験体にCD8+懸濁物を接種すること
を含んで成る、前記被験体の治療方法を提供する。
ーゼ207-216、gp100209-217、gp100154-162、MART−127-35、HER−2/neu789-797、HER−2/neu369-377、C−レクチン8-16、Pec6020-29お
よびPec6025-33を提示する、黒色腫の治療方法である。
a.天然に存在しない抗原提示細胞系(nnAPC)を調製することであって、前記nnAPCは前記疾患もしくは疾患状態と関連する約15までの異なるペプチド分子、好ましくは約10の異なるペプチド分子を同時に提示することが可能であり、各ペプチドは長さが約6ないし12アミノ酸、好ましくは長さが約8ないし10アミノ酸、かつ、約10nMないし100μMの濃度範囲にあり;
b.CD8+細胞を前記被験体もしくは適するドナーから収集すること;
c.前記CD8+細胞を前記nnAPC細胞系で刺激すること;
d.前記CD8+細胞を、CGMもしくはIL−2、IL−7のようなサイトカインを含
有する培地好ましくはIL−2、または組合せのIL−2およびIL−7に添加すること;
e.前記被験体もしくは適するドナーから収集された懸濁されない末梢血単球、あるいはCD−8枯渇末梢血単球を、約10ないし50μg/mlのペプチドと混合すること;
f.前記末梢血単球懸濁物を、約3,000ないし7,000ラドの範囲、好ましくは約5,000ラドの線量のような、所望の末梢血単球を除く懸濁物中の全部の成分を無効にする(sterilize)のに必要な十分な線量のγ線放射で照射すること;
g.接着性末梢血単球を単離すること;
h.前記接着性末梢血単球に、約10ng/mlないし10μg/mlの前記各ペプチドを添加すること;
i.前記CD8+細胞を、1の末梢血単球に対し約10のCD8+細胞の比で、前記接着性末梢血単球と組み合わせること;
j.場合によっては、CD8+細胞および末梢血単球の前記組み合わせられた懸濁物を、
約6ないし7日間刺激すること;
k.場合によっては、CD8+細胞および末梢血単球の前記懸濁物を、培地中のIL−2
およびIL−7で刺激すること;
l.場合によっては、適するCTL活性についてCD8+懸濁物をアッセイすること、な
らびに、場合によってはCTLの純度、無菌性およびエンドトキシン含量についてアッセイすること;ならびに
m.前記被験体にCD8+懸濁物を接種すること
を含んで成る方法により治療する。
シグナルを伝達する、リンパ球機能抗原(LFA−1、LFA−2およびLFA−3)、細胞間接着分子1(ICAM−1)、T細胞共刺激因子(CD2、CD28、B7)のような補助分子(accessory molecule)と関連するペプチドを提示することができる。
a.キイロショウジョウバエ(Drosophila melanogaster)卵から昆虫細胞系を調製すること;あるいは、ヒトMHCクラスI分子および共刺激接着分子を発現させるための昆虫細胞系を調製すること;
b.前記昆虫細胞を、昆虫細胞を成長させるのに適する培地、好ましくはシュナイダー[Schneider]TMドロソフィラ(Drosophila)培地中で成長させること;
c.pRmHa−1発現ベクターからpRmHa−3プラスミドを作成することであって、前記pRmHa−3プラスミドは、メタロチオネインプロモーター、金属応答コンセンサス配列、およびキイロショウジョウバエ(Drosophila melanogaster)から単離されたポリアデニル化シグナルを担持するアルコール脱水素酵素遺伝子を包含し;
d.前記pRmHa−3プラスミドに、ヒトクラスI HLA A2.1、B7.1、B7.2、ICAM−1、β−2ミクログロブリンおよびLFA−3の相補DNAを挿入することであって、A2.1はいずれかのヒトクラスI DNA配列で置換することができ;
e.前記昆虫細胞を、phshneoプラスミド、および相補DNAを含有する前記pRmHa−3プラスミドでトランスフェクトすること;ならびに
f.前記昆虫細胞をCuSO4と接触させて前記昆虫細胞中のトランスフェクトされた遺
伝子の発現を誘導することによりnnAPCを創製すること
よりなる。
略語
APC 抗原提示細胞
CD8+ CD8+ T細胞
CTL 細胞傷害性Tリンパ球
E エフェクター
Fas CD95としてもまた知られる、T細胞上のエピトープ
ICAM 細胞間接着分子
IL インターロイキン
LAK リンホカイン活性化型キラー細胞
LFA リンパ球機能抗原
MHC 主要組織適合抗原複合体
nnAPC 天然に存在しない抗原提示細胞
NP 核タンパク質
PBMC 末梢血単核細胞
PBS リン酸緩衝生理的食塩水
PCR ポリメラーゼ連鎖反応
RPMI ロズウェル パーク メモリアル インスティテュート(Roswel
l Park Memorial Institute)
RWJPRI R.W.ジョンソン ファーマシューティカル リサーチ インスティ
テュート(The R.W.Johnson Pharmaceuti
cal Research Institute)
T 標的
TCP T細胞抗原受容体
TIL 腫瘍浸潤リンパ球
本明細書で使用されるところの「チロシナーゼ369−377」もしくは「チロシナーゼ369-377」はアミノ酸配列YMNGTMSQV(配列番号1)を指す。この定義内に、
配列YMNGTMSQV(配列番号1)のアミノ酸残基「N」を「D」に改変してYMDGTMSQV(配列番号2)のアミノ酸配列をもたらす翻訳後事象から生じる、配列YMDGTMSQV(配列番号2)のペプチドもまた包含される(Skipperら,J.Exp.Med.(1996)183:527−534)。
)を指す。
)を指す。
を指す。
本明細書で使用されるところの「養子免疫療法」という用語は、疾患もしくは疾患状態の治療のためのドナーもしくは自己のTリンパ球の投与を指し、ここで疾患もしくは疾患状態は、クラスI HLA分子と通常は関連する不十分な(insufficient)もしくは不十分な(inadequate)免疫応答をもたらす。養子免疫療法は、感染したもしくは形質転換された細胞の排除がCTLにより達成されることが立証されているいかなる疾患もしくは疾患状態にも適切な治療である。例えば、疾患もしくは疾患状態は、限定されるものでないが、黒色腫、前立腺、乳房、結腸直腸、胃、咽頚部、膵、子宮頚、卵巣、骨、白血病および肺癌のような癌および/もしくは腫瘍;B型肝炎、C型肝炎、ヒト免疫不全ウイルスのようなウイルス感染症;結核、らいおよびリステリア症のような細菌感染症、ならびにマラリアのような寄生虫感染症を挙げることができる。
Their Use in Diagnostic and Therapeutic
Methods)」と題された1999年2月23日公布の米国特許第5,874,560号明細書;ならびに「黒色腫抗原ならびに診断および治療法におけるそれらの使用(Melanoma Antigens and Their Use in Diagnostic and Therapeutic Methods)」と題された1998年12月1日公布の米国特許第5,844,075号明細書に開示される。とりわけ、米国特許第5,994,523号明細書は、それぞれ配列番号1および配列番号2として図1にMART−1の完全長の核酸およびアミノ酸配列を開示する。前述の図1は引用することにより本明細書に組み込まれる。
r Cancer by Detecting Messenger RNA for a MAGE−XP Gene)」と題された1998年6月2日公布の米国特許第5,759,783号明細書;および「合成ペプチドエピトープを使用するヒトにおける抗腫瘍細胞傷害性Tリンパ球の誘導(Induction of Anti−Tumor Cytotoxic T Lymphocytes in Humans Using Synthetic Peptide Epitopes)」と題された1997年9月2日公布の米国特許第5,662,907号明細書に開示される。
Use in Diagnostic and Therapeutic Methods)」と題された1999年11月30日公布の米国特許第5,994,523号明細
書;「黒色腫抗原ならびに診断および治療法におけるそれらの使用(Melanoma Antigens and Their Use in Diagnostic and
Therapeutic Methods)」と題された1999年2月23日公布の米国特許第5,874,560号明細書;ならびに「黒色腫抗原ならびに診断および治療法におけるそれらの使用(Melanoma Antigens and Their Use in Diagnostic and Therapeutic Methods)」と題された1998年12月1日公布の米国特許第5,844,075号明細書に開示される。とりわけ、米国特許第5,994,523号明細書は、図4および5にGP100に関係する核酸およびアミノ酸配列をそれぞれ開示する。配列番号27、33、34、35、36、37、38、39、40および41として同定されるものを包含する該アミノ酸配列由来の抗原ペプチドもまた開示される。前述の図4および5の全部、ならびに配列番号により同定されるペプチドは、引用することにより本明細書に組み込まれる。
を開示し、配列番号により同定されるものは引用することにより本明細書に組み込まれる。
対分子量をもつ膜貫通タンパク質である。それは、上皮増殖因子受容体(EGFR)に対する40%の相同性をもつおよそ645aaの細胞外結合ドメイン(ECD)、高度に疎水性の膜貫通固定ドメイン(TMD)、およびEGFRに対する80%の相同性をもつおよそ580アミノ酸のカルボキシ末端細胞質ドメイン(CD)を有する。
な免疫系の非特異的推進物質(booster)の使用を包含する。しかしながら、サイトカインの利益は、悪心および発熱のようなそれらの使用にしばしば付随する副作用により小さくされる。
抗原提示細胞(APC)の表面上に存在するクラスI MHC(HLA)複合体に結合された抗原の免疫原性ペプチドフラグメント(エピトープ)のCD8+細胞への提示よりな
る。この複合体は、シグナルを細胞内で伝えるT細胞抗原受容体(TCR)により特異的に認識される。
刺激分子の相互作用の存在下でクラスI MHC分子により結合された免疫原性ペプチド(エピトープ)を担持する抗原提示細胞と相互作用する場合に、CD8+細胞は完全に活
性化された細胞溶解性T細胞となる。
的事象を必要とする。
相互作用を図1に描く。該相互作用は、T細胞抗原受容体(TCR)への、APCもしくは標的細胞上のMHCクラスI分子と共同しての抗原の結合で開始する。リンパ球機能抗原(LFA−1、LFA−2およびLFA−3)、細胞間接着分子1(ICAM−1)、T細胞共刺激因子(CD2、CD28、B7)のような補助分子が、細胞−細胞接着を高めるか、もしくは付加的な細胞活性化シグナルを伝達する。
する。Fasリガンドと、標的細胞上のFas受容体の相互作用がアポトーシスにつながる。CPP32のようなプロテアーゼ、およびIL−1b変換酵素(ICE)に関連する他者がアポトーシスの誘導に関係している。インビトロCD8+活性化に、天然に存在す
る抗原提示細胞、例えば樹状細胞、マクロファージ、自己腫瘍細胞を使用することが可能である。しかしながら、このアプローチ後の活性化の効率は低い。これは、天然のAPCのクラスI分子が、腫瘍エピトープ以外に多くの他の型のペプチドエピトープを含有するためである。ペプチドの大部分は正常の無害の細胞タンパク質由来であり、腫瘍に対して実際に有効であるとみられる活性の天然のAPCの数の希釈(dilution)をもたらす(Allisonら,Curr.Op.Immunol.(1995)7:682−686)。
物の抗原提示細胞を、キイロショウジョウバエ(Drosophila melanogaster)(ショウジョウバエ)細胞中でMHC クラスI分子を発現させることにより創製する。ショウジョウバエ(Drosophila)は免疫系を有しないため、クラスI分子上にペプチドエピトープを添加することに関与するTAP−1,2ペプチド輸送タンパクが存在しない。結果として、クラスI分子は、空容器(empty vessel)としてショウジョウバエ(Drosophila)細胞表面上に出現する。これらのトランスフェクトされたショウジョウバエ(Drosophila)細胞を、限定されるものでないが黒色腫特異的エピトープを挙げることができる癌もしくは腫瘍特異的エピトープのようなクラスI分子に結合する外因性ペプチドとともにインキュベートすることにより、すべてのクラスI分子を同一のペプチドで占有することが可能である。これらのショウジョウバエ(Drosophila)APC中に単一ペプチドを含有するクラスI分子の高密度発現は、抗原ペプチドに完全に特異的である細胞傷害性CD8+ T細胞のイ
ンビトロでの生成を可能にする。ショウジョウバエ(Drosophila)細胞を調製するための方法および手順は、「ヒトクラスI MHCおよびβ2−ミクログロブリンを発現する昆虫細胞を使用する細胞傷害性T細胞のインビトロ活性化(In Vitro Activation of Cytotoxic T−Cells Using Insect Cells Expressing Human Class I MHC and β2−Microglobulin)」と題された1996年6月25日公布の米国特許第5,529,921号明細書、ならびに「MHC クラスI抗原およびβ2−ミクログロブリンをコードする遺伝子を発現しかつ空複合体を集成することが可能なショウジョウバエ細胞系、ならびに前記細胞系の作成方法(Drosophila Cell
Lines Expressing Genes Encoding MHC Class I Antigens And β2−Microglobulin and Capable of Assembling Empty Complexes and
Methods of Making Said Cell Lines)」と題された1994年5月24日公布の米国特許第5,314,813号明細書に教示される。とりわけ、米国特許第5,529,921号明細書は、第26段第56行ないし第28段第22行で、前駆細胞の培養物の多様な分離および/もしくは濃縮方法を開示する。
上を提供する。患者へのサイトカインの投与を包含する治療レジメンは、しばしば、悪心、嘔吐および発熱のような流感様の症状を発症する患者をもたらす。これらの副反応は一般に生命を脅かさないが、とは言え既に弱らされた状態にある患者で起こるとりわけ重症の反応は、生命を危うくする状況をもたらす可能性がある。別の考慮は、それ以外は有益な治療レジメンの患者の受容性およびコンプライアンスに対してこうした副反応が有する有害な影響である。サイトカインでのインビボ刺激に対する必要性を除去することは、患者の快適さを向上させる治療レジメンをもたらし、また、彼もしくは彼女の患者が従うことがよりありそうである有効な治療方法を臨床家に提供する。
この系において、精製されたCD8+ 2C細胞は、共刺激分子B7−1およびICAM
−1もまた担持するMHCクラスI(Ld)のトランスフェクトされたショウジョウバエ
(Drosophila)細胞により提示されるインビトロペプチドに高度に反応性である。プライミングされないCD8+ T細胞についての最小要件を規定するためのプローブとしてのトランスフェクトされたショウジョウバエ(Drosophila)細胞(Caiら、P.N.A.S.USA(1996)93:14736−14741)。あるいは、分離されないマウス脾細胞を精製された2C細胞の代わりに応答体(responder)として使用する場合は、共刺激分子に対する必要性は当てはまらない。この例において、脾集団中のCD8+細胞は活性化されたB細胞から「傍観者(bystander
)」共刺激を受領する。この知見を利用して、MHCクラスI(Ld)のトランスフェク
トされたショウジョウバエ(Drosophila)細胞が、添加されたリンホカインの非存在下でインビトロで同系のP815肥満細胞腫の腫瘍特異的ペプチドに応答するように正常DBA/2マウス脾細胞を誘導することが可能であることを示すことが可能であった。P815肥満細胞腫を担持するDBA/2マウスへのこれらのCTLの注入は迅速な腫瘍退縮に至った(Sunら、Immunity(1996)4:555−564)。
ともにインビトロで培養した。5日後に培養物から収集されたリンパ球は、インビトロでP815腫瘍細胞に対する強い細胞傷害性Tリンパ球(CTL)活性を表したが、しかし、図3、図Aに示されるとおり、P1A.35−43を発現しないP815の突然変異体細胞系P1024を溶解することに失敗した。これらのCTLを、3日前にP815細胞を以前に接種されたDBA/2マウスに注入した場合、腫瘍は第一週の間に妨害を受けずに成長したが、しかし、その後、図3、図Bに示されるとおり、次の週の間に排除された。図3、図Bに示されるとおり、CTLをウイルス核タンパク質ペプチドのような無関係の抗原に対してインビトロで免疫化した場合、特異性は、P815の成長に対するいずれかの影響の非存在により立証された。要約すれば、主要組織適合抗原複合体クラスI(Ld)のトランスフェクトされたショウジョウバエ(Drosophila)細胞は、添加されたリンホカインの非存在下で、同系のP815肥満細胞腫の腫瘍特異的ペプチドにインビトロで応答するように正常DBA/2マウス脾細胞を誘導した。P815肥満細胞腫を担持するDBA/2マウスへのこれらのCTLの注入は迅速な腫瘍の退縮に至った(Wolfelら、J.Exp.Med.(1993)178:489−495)。
健康被験体からのヒトCTLをチロシナーゼに対してインビトロで免疫化した。ショウジョウバエ(Drosophila)細胞のみでの一次刺激後に、チロシナーゼを担持するJY細胞の特異的溶解が、試験された全部のCTLエフェクター対JY標的の比で明ら
かであった。健康被験体からのチロシナーゼ特異的CTLを、完全な刺激/再刺激プロトコルを使用して誘導し、そしてMalme 3M黒色腫細胞系を殺すそれらの能力について試験した。1もしくは2の可能な例外を伴い、Malme 3Mに対する特異的CTL活性が、全ドナーにおいて変動する程度まで誘導された。大部分については、対照のMalme 3腫瘍細胞に対する反応性は最小限であった。黒色腫患者からの細胞もまた、健康志願者由来のものに類似の活性および特異性のCTLを生成させるために、チロシナーゼエピトープに対してインビトロで免疫化した。
エ細胞を使用する場合に4種の異なるペプチドに対して生成された一方、未熟DCは無意味の特異的殺傷をもたらし、また、成熟DCは刺激に使用された4種のペプチドの1種のみに対する特異的殺傷をもたらした。
抗CD8抗体での陽性選択により白血球成分分取(leukapheresis)サンプルから単離されたCD8+細胞を、ヒトクラスI分子(HLA−A2.1)、B7.1
、ICAM−1、LFA−3およびB7.2を発現するショウジョウバエ(Drosophila)細胞により提示される4種の異なる黒色腫関連ペプチドに対して刺激する。CD8+細胞を、IL−2およびIL−7の存在下にペプチドエピトープを添加された自己
単球で2回再刺激する。CTLをOKT3およびIL−2とともに非特異的に拡張する。CTL活性をMalme 3M細胞に対して測定し、また、CD8+ T細胞の純度をフ
ローサイトメトリーにより評価する。
ショウジョウバエ(Drosophila)抗原提示細胞の製造
シュナイダー(Schneider)S2細胞系を、発表された手順に従ってキイロショウジョウバエ(Drosophila melanogaster)(オレゴン(Oregon)−R)卵から調製し、そしてアメリカン タイプ カルチャー コレクション(American Type Culture Collection)に寄託した(CRL 10974)。S2細胞は、10%ウシ胎児血清を補充された商業的シュナイダー(Schneider)ドロソフィラ(Drosophila)培地中で成長させる。
HLA−A2.1およびβ−2ミクログロブリン:発表された配列由来のプライマーを使用するK562細胞からの逆転写PCR
B7.1:発表された配列由来のプライマーを使用するK562細胞からの逆転写PCRICAM−1:発表された配列由来のプライマーを使用するK562細胞からの逆転写PCR
B7.2:発表された配列由来のプライマーを使用するHL−60細胞(ATCC CCL−240)からの逆転写PCR
LFA−3:発表された配列由来のプライマーを使用するHL−60細胞(ATCC CCL−240)からの逆転写PCR
7.1および抗ICAM−1抗体を使用するフローサイトメトリーにより評価した。30%以上の細胞によるHLA発現が、CD8+リンパ球の効率的なインビトロ活性化に必要
である。
CD8+細胞は、ダイナビーズ[Dynabeads]TM単離手順(ダイナル(Dyn
al))を使用する陽性選択により白血球成分分取サンプルから単離する。抗ヒトCD8マウスモノクローナル抗体(ヒトγグロブリン[ガンマガード(Gammagard)(R)]1ml中50μg)を、1%ヒト血清アルブミン(バクスター−ハイランド(Bax
ter−Hyland))および0.2%クエン酸ナトリウムを補充されたダルベッコのPBS中の洗浄された細胞に添加する。穏やかな混合を伴う4℃で45分のインキュベーション後に、ヒツジ抗マウスIgGで被覆されたダイナル(Dynal)磁性ビーズ(ダイナビーズ[Dynabeads]TM)を含有する同一緩衝液中で、1:1のビーズ対細胞の比で洗浄かつ再懸濁する。細胞およびビーズを滅菌管に入れ、そして4℃で45分間穏やかに混合する。この時間の終了時に、抗体結合された細胞を、製造元の説明書(ダイナル(Dynal))に従ってMPC−1(R)分離装置を使用して磁気的に除去する。C
D8細胞−ビーズ複合体の解離を、CD8ペプチド59-70(AAEGLDTQRFSG;
配列番号12)の存在下37℃で45分間のインキュベーションにより達成する。遊離ビーズを磁気的に除去し、そしてCD8細胞を計数しかつフローサイトメトリーにより分析して純度を評価する。CD8+細胞の回収は典型的に80%より大きい。表1は、抗CD
8抗体での陽性選択による正常ヒトPBMC調製物からの14の別個のCD8+調製物の
細胞組成を要約する。
一次刺激
トランスフェクトされたショウジョウバエ(Drosophila)S2細胞を、10%ウシ胎児血清およびCuSO4を補充されたシュナイダー(Schneider)培地
(106個の細胞/ml)中、27℃で24時間インキュベートする。細胞を回収し、洗
浄し、そして100μg/mlのヒトチロシナーゼ366-377を含有する昆虫X−プレス培
地(Insect X−press medium)(バイオウイタッカー(BioWhittaker))に再懸濁する。27℃で3時間のインキュベーション後に、S2細胞を、10%自己血清を補充されたRPMI培地(ギブコ(Gibco))中1:10の比でCD8+細胞と混合する。細胞混合物を37℃で4日間インキュベートし、その間にシ
ョウジョウバエ(Drosophila)細胞が死に絶える。第5日に、IL−2(20U/ml)およびIL−7(30U/ml)を添加して、チロシナーゼ特異的CTL集団を選択的に拡張する。
白血球成分分取の時点で得られた凍結自己CD8枯渇PBMCを融解し、洗浄し、そして10%自己血清(β2ミクログロブリンの供給源として)および20μg/mlのチロシナーゼ369-377を含有するRPMI培地中106個の細胞/mlで再懸濁する。γ線照射(5,000ラド)後に細胞を37℃で2時間インキュベートする。ダルベッコのPBSで洗浄することにより非接着細胞を除去する。10%自己血清および10μg/mlのチロシナーゼ369-377を含有するHepes緩衝RPMI培地中での90分間のインキュベ
ーションにより、接着性単球にチロシナーゼエピトープを添加する。上清を除去し、そしてショウジョウバエ(Drosophila)活性化されたCD8+細胞懸濁物(10%
自己血清を含むRPMI培地中3×106個の細胞/ml)を、1の接着性単球に対し1
0のCD8+細胞の比で添加する。37℃で3ないし4日の培養後に、IL−2(20U
/ml)およびIL−7(30U/ml)を、培地交換を伴い添加して、チロシナーゼ特異的CTL集団を選択的に拡張する。
エフェクター細胞を、自己血清、抗CD3モノクローナル抗体(OKT(R)3)、IL
−2およびγ線照射された自己PBMCを補充されたRPMI培地中でそれらを培養することにより、非特異的に拡張する。
CTLアッセイ
Malme 3M細胞を51Cr放出アッセイでの標的細胞として使用する。4%ウシ胎
児血清、1%HEPES緩衝液および0.25%ゲンタマイシンを含有するRPMI培地中の5×106個のMalme 3M細胞を、0.1mCiの51Crで37℃で1時間標
識する。細胞を4回洗浄し、かつ、10%ウシ胎児血清(ハイクローン(HyClone))を含むRPMI中105個の細胞/mlに希釈する。96穴マイクロタイタープレー
ト中で、100μlのエフェクターCTLおよび100μlのペプチド添加された51Cr標識Malme 3M標的細胞を、100:1、20:1および4:1(エフェクター:標的)の比で組合せる。K562細胞を20:1(K562:Malme 3M)の比で添加して、ナチュラルキラー細胞のバックグラウンド溶解を低下させる。非特異的溶解は非腫瘍性HLA−A2.1線維芽細胞系Malme 3を使用して評価する。51Crの自発的放出および最大放出を測定するための対照を二重で(in duplicate)包含する。37℃で6時間のインキュベーション後に、プレートを遠心分離し、そして上清を計数して51Cr放出を測定する。
フローサイトメトリー。
CS分析を使用して、細胞表面マーカーの数について分析した。健康なドナーからの細胞を使用する典型的な活性プロトコルからの結果を表2に示す。
黒色腫に対する細胞傷害性T細胞注入の試験
試験の目的
本実施例は、以下の因子:
1.インビトロ免疫感作後の再注入された自己CTLの安全性および忍容性;
2.制限希釈分析での全身循環の要因考慮(factoring)における注入されたCTLの動力学;
3.ラジオシントグラフィーによるCTLの全身の配置;
4.免疫組織学による生検された結節の細胞組成(CTL、TH、NK、B細胞);なら
びに
5.2ヶ月にわたる測定可能な傷害の退縮および応答の持続期間
に従って評価されるところの黒色腫の治療における細胞傷害性T細胞注入の有効性を教示する。
治療への適格性は、患者が測定可能もしくは評価可能であった組織学的に報告された切除不可能な悪性黒色腫およびHLA−A2表現型を有することを必要とした。治療前評価は、MRIもしくはCTスキャンによる脳の放射線学的評価、胸部および腹部のCT走査、ならびに、とりわけ皮膚およびリンパ節の身体検査を包含した。治療された患者の総数は15(9例の男性および6例の女性)であった。年齢は、58歳の平均を伴う33から75歳までの範囲にわたった。転移性疾患の平均持続期間は1.5年であった。アネルギーの状態が存在したかどうかを決定するための治療前皮膚試験を15例中14例の患者で実施し、14例中5例は評価された普遍的抗原の全7種について陰性と判定された。患者は、HLA−A2特異的モノクローナル抗体(BB7.2)を用いるFACS分析によりHLA−A2ハプロタイプについてスクリーニングした。サブタイプ分類(subtyping)はPCR分析により実施した。患者の1例を除く全部がHLA−A*0201で
あり、例外(患者08)はHLA−A*0205であった。
15例の患者を本臨床プロトコル下に治療した。全患者は、自己CTLの少なくとも単回注入を受領した。各患者に投与された周期の数および細胞の用量は表1に要約する。インビトロで生成された細胞の数は、アフェレーシス(aphaeresis)処置から単離されたPBMCの数、および各PBMC調製物中に存在するCD8+ T細胞の数のよ
うな患者関連の因子に依存した。インビトロで生成された細胞の全部をドナーに再注入したため、各患者に投与された用量は必然的に変動した。患者間の用量を正規化する試みにおいて、計算された「効力」得点を各用量について記録した。該値は、細胞の総数にペプチド添加された標的細胞で得られた溶解活性を掛けることにより得た。注入されたT細胞の用量は、4×107個の最小(患者08)から3.2×109個の最大(患者13)までの範囲にわたった。患者は各周期の終了時の彼らの臨床状態に基づいて第二、第三もしくは第四の治療周期に進入した。アフェレーシスサンプルから得られたPBMCの数は、とりわけその後の周期の開始が以前のものの終了に近かった場合に、付加的周期を受けている患者でより低い傾向があった。これは、前の周期の間に投与されたIFNα−2bによる持続性のリンパ球減少に帰される。単離されたナイーブなCD8+ T細胞の総数はP
BMC調製物のそれぞれ中のその割合に依存した。CD8+ T細胞のパーセントは患者
間で8%ないし31%の間で変動した。得られた拡張係数は最終的な細胞数にもまた寄与し、そして0.1から6.0倍の範囲にわたった。エクスビボでCTLを生成させるための手順は本明細および上の実施例1に教示される。
インビボで黒色細胞腫を溶解する抗原特異的CTLの能力を高める試みにおいて、低用量のIFNα−2bを、CTL注入前連続5日間、および追加の4週間に週3回投与した。サイトカインに対するインビボ応答の一測定方法は、連続的時間点で得られる生検を特異的抗体での陽性染色についての免疫組織化学的分析により評価することである。連続的生検を、クラスIおよび抗原発現の双方の評価のため、複数の皮膚傷害を伴う1例の患者(患者04)で得た。生検は、クラスIおよびMART−1発現がいずれの治療前も弱く陽性であったことを示した(生検A)。10MU/m2の皮下注入の5日後に、これら2
種のマーカーの劇的な増大が示された(生検B)。チロシナーゼおよびgp100について、免疫組織化学的染色は治療前サンプルでそれぞれ陰性ないし弱く陽性であった(生検
A)。最初の5日のIFNα投与および13回の追加治療後に、これらの後者の抗原の発現が、染色された組織サンプル中で増大した(生検C)。
全患者からの生成されたCTLを、生検材料が系統を樹立するために利用可能であった場合、ペプチド添加されたT2標的、HLA−A2黒色腫細胞系(Malme3M)および自己黒色腫系統に対して、遊離日に評価した。細胞の各調製された用量をその細胞溶解活性について評価した。各ペプチド単独で、もしくは全4種のペプチドを同時にのいずれかを提示するペプチド添加されたT2細胞を使用して、各患者について生成されるCTL応答の特異性を決定した。内因性に発現された黒色腫関連抗原を担持する細胞を溶解する能力を、HLA−A2を合致された系統もしくは自己腫瘍系統で評価した。細胞溶解活性に加え、抗原特異性を、特異的ペプチド刺激に応答して作成される細胞内γインターフェロン産生の確立された検出方法で評価した。エクスビボプロトコルの終了時に生成されたCTLをこの方法により評価した。ペプチドのそれぞれに特異的な細胞の割合を個別に記録した。患者13からの各大量の(bulk)CD8培養物中の特異的細胞の数を、T細胞のその集団中で検出されるペプチド特異性のそれぞれを加えることにより計算した。特異的細胞の総数の増加を、各連続する治療周期で検出することができた。
治療の前、間および後の全患者からの生検サンプルが理想的であったと思われる。しかしながら、実験条件は制限された数の患者のみからの生検サンプルを見込んだ。腫瘍組織は試験に参入した15例の患者の5例から得た。2例の患者(患者08および13)において、生検サンプルは、T細胞療法後それぞれ5および6週で入手可能であった。組織サンプルの検査は、浸潤するCD8およびCD4双方の細胞の存在を示した。腫瘍サンプルの1つは、追跡検査の時点(T細胞の第二の注入後4週間)までに大きさが増大した、頭皮の後頭部領域の皮膚傷害から採取した。該生検は、リンパ球でひどく浸潤された組織の壊死を示した。他の生検は股関節置換手術の間に取り出された大腿骨頭部からであった。患者08からの皮膚傷害は一般的クラスIおよび特異的HLA−A2マーカー双方について強く陽性(4+)であった。チロシナーゼおよびgp100は弱く陽性(それぞれ1+および2+)であった一方、MART−1はこの同一のサンプルで陰性であった。患者13からの生検の領域もまた、より不均質な染色;HLA−A2.1分子の発現を欠く腫瘍細胞の明確な集団、およびMAAの1種もしくはそれ以上を伴い壊死性であった。しかしながら、無傷の組織領域は強いクラスI(4+)および黒色腫関連抗原の全部を示した。この後者のサンプルにおけるリンパ球浸潤は、腫瘍結節に深く浸潤するよりはむしろそれらを取り巻くようであった。しかしながら、腫瘍に直接関連した最高の割合の細胞はCD8細胞であった。これらの患者の双方からの治療前生検サンプルの欠如は、治療前の組織サンプル中の類似の型の浸潤する細胞の確認を予防した。
CTスキャンは治療前スクリーニング基準および治療後追跡検査の一部であった。患者10は治療前スキャン(99年6月23日)の5週間後に8×108個のCTLの単回注
入を受領した(99年7月27日)。注入1ヶ月後に胸部のCTスキャンを反復した場合(99年8月27日)に、肺傷害の大きさの劇的な減少が示された。同様に、患者14は、6.6×108個の細胞での第一の注入(99年10月5日)の3.5週間前に参入過
程の一部として胸部CTスキャンを受けた(99年9月10日)。11.5×108個の
細胞での第二の注入1ヶ月後の追跡CTスキャン(99年1月7日)は3個の別個の傷害の劇的な縮化を示した。患者13は前および後CTスキャンで測定されたような客観的応答もまた有した。傍気管腺症は周期I後に7.8cm2(試験前)から4.4cm2となり、そして周期II後に消失した。
本プロトコル下で治療された患者の大部分は以前の医学的介入を受領していた。治療前皮膚試験を実施して、一団の7種の普遍的抗原に対するアネルギー応答が、エクスビボでCTLを生成させるかもしくは報告された臨床応答を予防するかのいずれかの不能と相関するかどうかを決定した。エクスビボでCTLを生成させる能力は、患者の治療前皮膚試験の結果と相関しなかった。患者03および04(双方とも混合型応答体(mixed responder))は、第二の周期の開始前に反復皮膚試験を受け、そしてアネルギーのままであったことは注目されるべきであろう。
乳房および卵巣腫瘍細胞を溶解することが可能なHER−2/neu特異的CTLの生成
われわれは、全部の形態の癌にこのアプローチを用いて標的を定めることができるかどうかを決定するために、他の腫瘍型にわれわれのCTL生成技術を適用することに興味をもった。HER−2/neuは、多くのヒトの癌、主として乳房、卵巣および結腸の腺癌において増幅かつ過剰発現されるEGFRに対する相同性をもつ癌原遺伝子である。それはしばしば攻撃的疾患と関連し、そして乏しい予後の指標である可能性がある。それはこれらの型の癌の可能な標的としていくつかの臨床試験で研究されている。
完全なエクスビボプロトコルの完了後に、生成されたCTLを抗原特異性について評価した。CTLを生成させるために、第0日にショウジョウバエ(Drosophila)細胞に4種のHER−2ペプチドの組合せを添加した。4週のエクスビボ刺激プロトコルの終了時に、大量のCD8培養物を抗原特異性について評価した。免疫化ペプチドのそれぞれを添加されたT2細胞を標的細胞として使用した。図14に典型的な応答を描く。大量の培養物は4種のHER−2ペプチドのそれぞれに対する特異性を含有する。抗腫瘍応答を卵巣腫瘍細胞系(ATCC;HTB−77)で評価した。標的細胞系がHLA−A2.1拘束性でない場合、われわれは+/−アッセイ系を有するように細胞系をトランスフ
ェクトした。HLA−A2.1をHTB−77系統にトランスフェクトした場合、CD8エフェクター細胞による高められた殺傷が示された(図15、図AないしD)。個々のペプチドを代表するHER−2特異的エフェクターを評価して、この腫瘍細胞系上でのペプチドエピトープのそれぞれの提示を確認した。
HTB−77/A2.1細胞系は、ペプチド特異的溶解を立証するためにIFNγでの前処理を必要とする。細胞を、51Cr放出アッセイの開始前24時間、500U/mlのIFNγ(25ng/mlの比活性)で処理した。図17で、IFNγの添加は、HLA−A2.1でトランスフェクトされた細胞系の高められた溶解をもたらした。HLA−A2.1およびHER−2双方の表面発現に対するこの用量のIFNγの影響を決定するために、FACS分析を実施して、誘導の24および48時間後双方のこれらの分子のレベルを測定した。図18、図AおよびBはFACS分析の結果を描く。図Aで、IFNγでの誘導後24および48時間に、HTB−77細胞の表面上でのHER−2分子の促進は存在しなかった。HLA−A2.1でトランスフェクトされた細胞では、HER−2もHLA−A2.1も、類似の処理プロトコル後に表面の発現レベルの増大を立証しなかった。示されたことは、mRNAレベルをマイクロアレイDNAチップ分析により評価した場合のTAP−1の発現、ならびにHLA−DMおよび−DR、カテプシンSおよびDならびにカスパーゼ5のレベルの増大であった(図19)。これは、IFNγの存在下でHTB−77/A2.1細胞の促進殺傷が存在する理由を説明するとみられる。この特定の分子のアップレギュレーションは、HER−2分子のより効率的なプロセシングをもたらして目的のペプチドのより良好な提示を可能にするとみられる。
合成ペプチドはペプチド合成機(ギルソン カンパニー インク(Gilson Company,Inc.))を使用して標準的なFmoc化学により作成した。全部のペプチドはC−8カラムでの逆相HPLCにより>95%純度まで精製した。純度および正体は、電子スプレーイオン化を用いる質量分析計を使用して確立した。黒色腫関連ペプチドは:ペプチド819はMART−1特異的であり(AAGIGILTV 配列番号6)、817および853は双方がgp100ペプチドであり(それぞれITDQVPFSV 配列番号4およびKTWGQYWQV 配列番号5)、チロシナーゼ特異的ペプチドは689および792であり、792は、ペプチド689により表される天然の配列(YMNGTMSQV 配列番号1)の翻訳後修飾されたバージョン(YMDGTMSQV 配列番号2)を表したを包含した。ペプチド826(CLTSTVQLV 配列番号7)および835(KIFGSLAFL 配列番号8)は、p185タンパク質のそれぞれ細胞内および細胞外ドメインからのHER−2/neu配列を表した。Pec6020(ALALAALLVV 配列番号10)Pec6025(ALLVVDREV 配列番号11)は卵巣腫瘍系統で検出される粘液素タンパク質を表す重なり合う配列であった。C−レクチンもまた卵巣腫瘍細胞系で検出されるタンパク質であり、そしてその配列からのペプチド(C−レクチン8)はKMASRSMRL 配列番号9により表される。
標準的51Cr放出アッセイを実施して、T2細胞に添加された黒色腫関連ペプチドエピトープのCTLエフェクター細胞認識を測定した。収穫物3×106個のT2細胞を、RPMI+10%FBS(培地)中で成長させた。0.1mCiの51Crを添加し、そして水浴中37℃でインキュベートした。標識された細胞を10mlの4%洗浄液(RPMI+4%FBS)およびペレットに添加し、追加の2回洗浄し、そして自発的対洗剤に溶解された細胞の放射活性を記録するために0.2×106個/mLの最終濃度に培地で再懸濁した。細胞に20μg/mLの適切なペプチド(1種もしくは複数)を30分間適用した。50μLを、10、2、0.4および0.08×106個/mLのCD8エフェクタ
ー細胞をそれぞれ含有する各96穴プレートに添加し、これを37℃で6時間インキュベートし、回転しそして上清について収集した。
細胞を、FACS緩衝液(PBS中1%BSA、0.02%NaN3)中4℃で30分
間のインキュベーション、次いで同一緩衝液での洗浄により、FITCもしくはPE結合モノクローナル抗体で標識した。細胞を、データ獲得およびそれのセルクェスト(CellQuest)ソフトウェアを用いるFACScanフローサイトメーター(ベクトン ディッキンソン(Becton Dickinson))での分析前に0.5%ホルムアルデヒド中で固定した。非特異的染色は、標識精製された一次抗体に対する使用された同一の二次抗体、もしくは一次抗体を直接標識した場合はアイソタイプを合致された対照を用いて測定した。四量体染色は、陰性対照として配列SLYVTVATL 配列番号43をもつHLA−A2.1特異的HIVgag四量体分子(ベックマン コールター(Beckman Coulter))を用いて実施した。HER−2特異的四量体は、配列CLTSTVQLV(826 配列番号7)、KIFGSLAFL(835 配列番号8)もしくはVMAGVGFSPYV(861 配列番号16)ペプチドを用いて作成した。PE標識四量体HLA−A2.1ペプチド複合体を、フルオレセインイソチオシアネート(FITC)標識抗ヒトCD8a(BD ファーマジン(BD PharMagin))モノクローナル抗体とともに使用して、エピトープ特異的CD8+ T細胞を、包装挿入物に記述されたとおり染色した。サンプルをベクトン ディスケンソン(Becton Disckenson)FACScanでの二色フローサイトメトリーにより分析し、そしてゲートされた(gated)CD8+ T細胞を、四量体HLA−A2.1ペプチド複合体での染色について検査した。
本エクスビボ刺激プロトコルを用いる付加的な乳房および卵巣特異的CTLの生成
われわれは、多様な腫瘍起源の数種の腫瘍抗原の全部の既知のHLA−A2.1拘束性ペプチドエピトープに対するCTL応答を生成する能力を立証した。われわれの当初の研究は黒色腫に焦点を当て、ここで、われわれは、MART−1、gp100およびチロシナーゼの黒色腫関連タンパク質に特異的な4種の異なるペプチドエピトープに特異的なCTLで治療された患者における客観的臨床応答を立証することが可能であった[Richardsら,Amer.Soc.Clin.Oncol.,カリフォルニア州サンフランシスコ(2001年5月)]。
b.前記癌を伴う被験体もしくは適するドナーからCD8+細胞を収集すること;
c.前記CD8+細胞を前記nnAPC細胞系で刺激すること;
d.馴化成長培地(CGM)もしくはIL−2、IL−7よりなる群から選択されるサイトカインを含有する培地に前記CD8+細胞を添加すること(前記サイトカインは個別に
もしくは組合せで使用することができ);
e.前記被験体もしくは適するドナーから収集された懸濁されない末梢血単球もしくはCD−8枯渇末梢血単球を、約1ないし50μg/mlの、前記nnAPCが同時に提示することができる前記ペプチドの1種と混合すること;
f.前記末梢血単球懸濁物を、所望の末梢血単球を除く懸濁物中の全部の成分を無効にするのに必要な十分な線量のγ線放射で照射すること;
g.接着性末梢血単球を単離すること;
h.前記接着性末梢血単球に、約1μg/mlないし50μg/mlの前記各ペプチドを添加すること;
i.前記CD8+細胞を、1の末梢血単球に対し約10のCD8+細胞の比で、前記接着性末梢血単球と組み合わせること;および
j.前記被験体にCD8+懸濁物を接種すること
を含んで成る、前記被験体の治療方法。
c.前記CD8+細胞を前記nnAPC細胞系で約6ないし7日間刺激すること;
d.前記CD8+細胞を培地中のIL−2およびIL−7で刺激すること;
e.前記被験体から収集された末梢血単球を、約20μg/mlの各ペプチドと混合すること;
f.前記CD8枯渇末梢血単球懸濁物を、約5,000ラドのγ線放射で照射すること;g.接着性末梢血単球を単離すること;
h.前記接着性末梢血単球に、約1μg/mlないし50μg/mlの前記エピトープを添加すること;
i.前記CD8+細胞を、1の末梢血単球に対し約10のCD8+細胞の比で、前記接着
性末梢血単球と組み合わせること;
j.CD8+細胞および末梢血単球の前記組み合わせられた懸濁物を約6ないし7日間刺
激すること;
k.CD8+細胞および末梢血単球の前記懸濁物を、培地中のIL−2およびIL−7で
刺激すること;
l.適するCTL活性、純度、無菌性およびエンドトキシン含量についてCD8+懸濁物
をアッセイすること;ならびに
m.前記被験体にCD8+懸濁物を接種すること
を含んで成る、前記被験体の治療方法。
b.前記黒色腫を伴う被験体からCD8+細胞を収集すること;
c.前記CD8+細胞を前記nnAPC細胞系で約6ないし7日間刺激すること;
d.前記CD8+細胞を培地中のIL−2およびIL−7で刺激すること;
e.前記被験体から収集された末梢血単球を、約20μg/mlの、前記nnAPCが提示することができる各ペプチドと混合すること;
f.前記CD8枯渇末梢血単球懸濁物を約5,000ラドのγ線放射で照射すること;
g.接着性末梢血単球を単離すること;
h.前記接着性末梢血単球に、約1μg/mlないし50μg/mlの前記エピトープを添加すること;
i.前記CD8+細胞を、1の末梢血単球に対し約10のCD8+細胞の比で前記接着性
末梢血単球と組み合わせること;
j.CD8+細胞および末梢血単球の前記組み合わせられた懸濁物を約6ないし7日間刺
激すること;
k.CD8+細胞および末梢血単球の前記懸濁物を培地中のIL−2およびIL−7で刺
激すること;
l.CD8+懸濁物を、適するCTL活性、純度、無菌性およびエンドトキシン含量につ
いてアッセイすること;ならびに
m.前記被験体にCD8+懸濁物を接種すること
を含んで成る、前記被験体の治療方法。
12.記載の方法。
シナーゼ207-216、gp100209-217、gp100154-162、MART−127-35、HER−2/neu789-797、HER−2/neu369-377、C−レクチン8-16、Pec6020-29およびPec6025-33を同時に提示する、15.記載の天然に存在しない抗原提示細胞
nnAPC。
a.キイロショウジョウバエ(Drosophila melanogaster)卵から昆虫細胞系を調製すること;
b.前記昆虫細胞を、昆虫細胞を成長させるのに適する培地、好ましくはシュナイダー[Schneider]TMドロソフィラ(Drosophila)培地中で成長させること;
c.pRmHa−1発現ベクターからpRmHa−3プラスミドを作成すること(前記pRmHa−3プラスミドは、メタロチオネインプロモーター、金属応答コンセンサス配列、およびキイロショウジョウバエ(Drosophila melanogaster)から単離されたポリアデニル化シグナルを担持するアルコール脱水素酵素遺伝子を包含し);
d.前記pRmHa−3プラスミドに、ヒトクラスI HLA A2.1、B7.1、B7.2、ICAM−1、β−2ミクログロブリンおよびLFA−3の相補DNAを挿入すること(A2.1はいずれかのヒトクラスI DNA配列で置換することができ);
e.前記昆虫細胞を、phshneoプラスミド、および相補DNAを含有する前記pRmHa−3プラスミドでトランスフェクトすること;
f.前記昆虫細胞をCuSO4と接触させて前記昆虫細胞中のトランスフェクトされた遺
伝子の発現を誘導することによりnnAPCを創製すること
よりなる、15までのペプチド分子を同時に提示することが可能な天然に存在しない抗原提示細胞(nnAPC)の製造方法。
Claims (8)
- a.抗原提示細胞(nnAPC)が癌と関連する複数の異なる抗原ペプチドを同時に提示し、そして前記複数の異なる抗原ペプチドは、チロシナーゼ 369-377 YMNGTMSQV(配列番号1)、チロシナーゼ 369-377 YMDGTMSQV(配列番号2)、チロシナーゼ 207-216 FLPWELFLL(配列番号3)、gp100 209-217 ITDQVPFSV(配列番号4)、gp100 154-162 KTWGQYWQV(配列番号5)、およびMART−1 27-35 AAGIGILTV(配列番号6)、HER−2/neu 789-797 CLTSTVQLV(配列番号7)、HER−2/neu 369-377 KIFGSLAFL(配列番号8)、HER−2/neu 48-56 HLYQGCQVV(配列番号13)、HER−2/neu 650-658 PLTSIISAV(配列番号15)、HER−2/neu 773-782 VMAGVGSPYV(配列番号16)、HER−2/neu 971-979 ELVSEFSRM(配列番号18)、AES 128-135 GPLTPLPV(配列番号19)、MUC−1 950-958 STAPVHNV(配列番号20)、CEA 571-579 YLSGANLNL(配列番号21)、L−レクチン 8-16 KMASRSMRL(配列番号9)、NY−ESO−1 157-165C SLLMWITQC(配列番号24)、NY−ESO−1 157-165V SLLMWITQV(配列番号25)、NY−ESO−1 155-163 QLSLLMWIT(配列番号26)、Pec60 20-29 ALALAALLVV(配列番号10)、Pec60 25-33 ALLVVDREV(配列番号11)、CA−125 157-165 YLETFREQV(配列番号27)、CA−125 255-263 VLLKLRRPV(配列番号28)、CA−125 337-345 GLQSPKSPL(配列番号29)、CA−125 546-554 ELYIPSVDL(配列番号30)、CA−125 898-906 KALFAGPPV(配列番号31)、CA−125 414-422 FMWGNLTLA315(配列番号32)、MAGE−3 271-279 FLWGPRALV(配列番号33)、テロメラーゼ 540-548 ILAKFLHWL(配列番号34)、テロメラーゼ 865-873 RLVDDFLLV(配列番号35)およびG250 245-262 HLSTAFARV(配列番号36)から成る群から選択される、天然に存在しない抗原提示細胞(nnAPC)を調製すること;
b.被験体もしくは適するドナーから収集されたCD8+T−細胞を前記nnAPCで刺激すること;
c.IL−2およびIL−7よりなる群から選択される1以上のサイトカインを含有する培地に前記刺激されたCD8+T−細胞を添加することにより、前記刺激されたCD8+T−細胞を増加させること;
d.前記被験体もしくは前記適するドナーから収集された末梢血単球もしくはCD−8枯渇末梢血単球と、1ないし50μg/mlの前記複数の異なる抗原ペプチドの各々との、懸濁物を調整すること;
e.前記懸濁物を、前記懸濁物中の全ての成分を滅菌し且つ前記末梢血単球もしくはCD−8枯渇末梢血単球の増殖を予防するのに必要な十分な線量のγ線放射で照射すること;
f.接着性末梢血単球もしくは接着性CD−8枯渇末梢血単球を単離すること;
g.前記接着性末梢血単球もしくは前記接着性CD−8枯渇末梢血単球に、1μg/mlないし50μg/mlの前記複数の異なる抗原ペプチドの各々を添加すること;および
h.前記増加されたCD8+T−細胞を、1の前記ペプチドを添加された末梢血単球もしくは1の前記ペプチドを添加されたCD−8枯渇末梢血単球に対して10のCD8+T−細胞の比で、前記ペプチドを添加された接着性末梢血単球もしくは前記ペプチドを添加されたCD−8枯渇末梢血単球で再刺激し、それにより癌を伴う被験体の治療に用いるための細胞傷害性Tリンパ球(CTL)を生成すること;
を含んで成る、癌を伴う被験体の治療に用いるための細胞傷害性Tリンパ球(CTL)の製造方法。 - 工程aの前記複数の異なる抗原ペプチドのそれぞれが10nMないし100μMの濃度範囲にある、請求項1記載の方法。
- 前記1以上のサイトカインがIL−2である、請求項1記載の方法。
- 前記1以上のサイトカインが、IL−2およびIL−7の組み合わせである、請求項1記載の方法。
- γ線放射の線量が3,000ないし7,000ラドである、請求項1記載の方法。
- γ線放射の線量が5,000ラドである、請求項1記載の方法。
- 前記癌が、乳がん、卵巣癌および黒色腫から成る群から選択される、請求項1記載の方法。
- 前記癌が黒色腫であり、前記複数の異なる抗原ペプチドがチロシナーゼ369-377YMNGTMSQV(配列番号1)、チロシナーゼ369-377YMDGTMSQV(配列番号2)、チロシナーゼ3207-216FLPWELFLL(配列番号3)、gp100209-217ITDQVPFSV(配列番号4)、gp100154-162KTWGQYWQV(配列番号5)、MART−127-35AAGIGILTV(配列番号6)から成る群から選択される、請求項7記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US27025201P | 2001-02-20 | 2001-02-20 | |
US60/270,252 | 2001-02-20 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010054732A Division JP2010222352A (ja) | 2001-02-20 | 2010-03-11 | 腫瘍の治療のための細胞治療方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2012097117A JP2012097117A (ja) | 2012-05-24 |
JP5634415B2 true JP5634415B2 (ja) | 2014-12-03 |
Family
ID=23030546
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2002565553A Withdrawn JP2006510567A (ja) | 2001-02-20 | 2002-02-19 | 腫瘍の治療のための細胞治療方法 |
JP2010054732A Pending JP2010222352A (ja) | 2001-02-20 | 2010-03-11 | 腫瘍の治療のための細胞治療方法 |
JP2012020842A Expired - Fee Related JP5634415B2 (ja) | 2001-02-20 | 2012-02-02 | 腫瘍の治療のための細胞治療方法 |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2002565553A Withdrawn JP2006510567A (ja) | 2001-02-20 | 2002-02-19 | 腫瘍の治療のための細胞治療方法 |
JP2010054732A Pending JP2010222352A (ja) | 2001-02-20 | 2010-03-11 | 腫瘍の治療のための細胞治療方法 |
Country Status (22)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20030077248A1 (ja) |
EP (3) | EP2848255B1 (ja) |
JP (3) | JP2006510567A (ja) |
KR (2) | KR100971266B1 (ja) |
CN (1) | CN1571834B (ja) |
AT (1) | ATE396691T1 (ja) |
BR (1) | BR0207399A (ja) |
CA (2) | CA2698079C (ja) |
DE (1) | DE60226853D1 (ja) |
DK (1) | DK2016930T3 (ja) |
EA (1) | EA013944B1 (ja) |
ES (2) | ES2306771T3 (ja) |
HK (2) | HK1058485A1 (ja) |
HU (1) | HUP0402656A3 (ja) |
IL (3) | IL157366A0 (ja) |
MX (1) | MXPA03007503A (ja) |
NO (1) | NO334885B1 (ja) |
NZ (1) | NZ527683A (ja) |
PL (1) | PL206976B1 (ja) |
PT (1) | PT1377251E (ja) |
WO (1) | WO2002065992A2 (ja) |
ZA (1) | ZA200307327B (ja) |
Families Citing this family (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7973137B1 (en) | 1996-03-28 | 2011-07-05 | Johns Hopkins University | Cell compositions comprising molecular complexes that modify immune responses |
MXPA03007503A (es) | 2001-02-20 | 2004-10-15 | Johnson & Johnson | Un metodo de terapia de celulas para el tratamiento de tumores. |
US20040071671A1 (en) | 2001-02-20 | 2004-04-15 | Leturcq Didier J. | Cell therapy method for the treatment of tumors |
WO2002072766A2 (en) * | 2001-03-09 | 2002-09-19 | Board Of Regents, Universitx Of Texas System | Induction of tumor immunity by variants of folate binding protein |
AU2003230603A1 (en) * | 2002-03-08 | 2003-09-22 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Controlled modulation of amino acid side chain length of peptide antigens |
ATE483469T1 (de) * | 2002-07-12 | 2010-10-15 | Univ Johns Hopkins | Reagenzien und verfahren zum eingriff in einzigartige klonotype lymphozyten-rezeptoren |
CA2505379A1 (en) * | 2002-11-07 | 2004-05-21 | Johnson & Johnson Research Pty Limited | A means of producing and utilising a population of disease specific cytotoxic t-lymphocytes |
JP4609855B2 (ja) * | 2003-06-16 | 2011-01-12 | 国立大学法人九州大学 | ヒト由来免疫担当細胞の製造方法 |
JP2005139118A (ja) * | 2003-11-07 | 2005-06-02 | Ortho Mcneil Pharmaceut Inc | 腫瘍の治療のための細胞治療方法 |
US20100094560A1 (en) * | 2006-08-15 | 2010-04-15 | Prometheus Laboratories Inc. | Methods for diagnosing irritable bowel syndrome |
WO2008039874A2 (en) | 2006-09-26 | 2008-04-03 | Cedars-Sinai Medical Center | Cancer stem cell antigen vaccines and methods |
CA2700436C (en) | 2006-09-28 | 2017-04-18 | John S. Yu | Cancer vaccines and vaccination methods |
MX2009003764A (es) | 2006-10-04 | 2009-04-22 | Janssen Pharmaceutica Nv | Preparaciones de celulas presentadoras de antigeno artificiales y su uso en terapias celulares. |
WO2010028066A2 (en) * | 2008-09-02 | 2010-03-11 | Cedars-Sinai Medical Center | Cd133 epitopes |
JP2010235611A (ja) * | 2010-05-10 | 2010-10-21 | Ortho Mcneil Pharmaceut Inc | 腫瘍の治療のための細胞治療方法 |
WO2012087943A2 (en) | 2010-12-20 | 2012-06-28 | The Regents Of The University Of Michigan | Inhibitors of the epidermal growth factor receptor-heat shock protein 90 binding interaction |
WO2014127296A1 (en) * | 2013-02-14 | 2014-08-21 | Immunocellular Therapeutics, Ltd | Cancer vaccines and vaccination methods |
CN103667189B (zh) * | 2013-09-24 | 2015-10-28 | 上海宇研生物技术有限公司 | 用于治疗肺癌的cd8毒性t淋巴细胞及其制备方法 |
KR20170078619A (ko) * | 2014-09-17 | 2017-07-07 | 더 존스 홉킨스 유니버시티 | 항원-특이적 t 세포 식별, 농축, 및/또는 증식을 위한 시약 및 방법 |
US9993538B2 (en) | 2015-05-29 | 2018-06-12 | Galena Biopharma, Inc. | Peptide vaccine therapy for treatment of FRα-expressing tumors |
MA45169A (fr) | 2016-05-31 | 2019-04-10 | Sellas Life Sciences Group Inc | Thérapie vaccinale pour le traitement du cancer de l'endomètre et de l'ovaire |
WO2017216768A1 (en) | 2016-06-16 | 2017-12-21 | Association For The Advancement Of Tissue Engineering And Cell Based Technologies And Therapies - A4Tec | Dendrimer-derived artificial antigen, methods and uses thereof |
CN109906086A (zh) * | 2016-08-02 | 2019-06-18 | 河谷细胞有限公司 | 树突细胞的转染及其方法 |
Family Cites Families (40)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4530901A (en) * | 1980-01-08 | 1985-07-23 | Biogen N.V. | Recombinant DNA molecules and their use in producing human interferon-like polypeptides |
US4401756A (en) * | 1981-04-14 | 1983-08-30 | Immunex Corporation | Process for preparing human interleukin 2 |
US4407945A (en) * | 1981-04-29 | 1983-10-04 | Immunex Corporation | Constitutive production of interleukin 2 by a T cell hybridoma |
US4473642A (en) * | 1981-04-29 | 1984-09-25 | Immunex Corporation | Constitutive production of interleukin 2 by a T cell hybridoma |
US6936694B1 (en) * | 1982-05-06 | 2005-08-30 | Intermune, Inc. | Manufacture and expression of large structural genes |
US4992367A (en) * | 1986-05-12 | 1991-02-12 | Hoffmann-La Roche Inc. | Enhanced expression of human interleukin-2 in mammalian cells |
US5229115A (en) * | 1990-07-26 | 1993-07-20 | Immunex Corporation | Adoptive immunotherapy with interleukin-7 |
US5637483A (en) * | 1991-10-04 | 1997-06-10 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Irradiated tumor cell vaccine engineered to express GM-CSF |
US5583031A (en) * | 1992-02-06 | 1996-12-10 | President And Fellows Of Harvard College | Empty major histocompatibility class II heterodimers |
US5314813A (en) * | 1992-02-19 | 1994-05-24 | Scripps Research Institute | Drosophila cell lines expressing genes encoding MHC class I antigens and B2-microglobulin and capable of assembling empty complexes and methods of making said cell lines |
US5731160A (en) | 1992-05-26 | 1998-03-24 | Rijksuniversiteit Leiden | Induction of antigen specific T-lymphocyte responses by stimulation with peptide loaded MHC class I molecules on antigen processing defective mammalian cell lines |
US5397703A (en) * | 1992-07-09 | 1995-03-14 | Cetus Oncology Corporation | Method for generation of antibodies to cell surface molecules |
US5662907A (en) | 1992-08-07 | 1997-09-02 | Cytel Corporation | Induction of anti-tumor cytotoxic T lymphocytes in humans using synthetic peptide epitopes |
US5487974A (en) * | 1992-12-22 | 1996-01-30 | Ludwig Institute For Cancer-Research | Method for detecting complexes containing human leukocyte antigen A2 (HLA-A2) molecules and a tyrosinase drived peptide on abnormal cells |
US5801005A (en) | 1993-03-17 | 1998-09-01 | University Of Washington | Immune reactivity to HER-2/neu protein for diagnosis of malignancies in which the HER-2/neu oncogene is associated |
US5820866A (en) * | 1994-03-04 | 1998-10-13 | National Jewish Center For Immunology And Respiratory Medicine | Product and process for T cell regulation |
US5585461A (en) * | 1994-03-24 | 1996-12-17 | Ludwig Institute For Cancer Research | Isolated, MAGE-3 derived peptides which complex with HLA-A2 molecules and uses thereof |
US5874560A (en) | 1994-04-22 | 1999-02-23 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Melanoma antigens and their use in diagnostic and therapeutic methods |
US5968753A (en) | 1994-06-14 | 1999-10-19 | Nexell Therapeutics, Inc. | Positive and positive/negative cell selection mediated by peptide release |
US5595881A (en) | 1994-08-09 | 1997-01-21 | Anergen, Inc. | Method for the detection of antigen presenting cells |
US5827642A (en) * | 1994-08-31 | 1998-10-27 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Rapid expansion method ("REM") for in vitro propagation of T lymphocytes |
US5843648A (en) * | 1995-01-10 | 1998-12-01 | The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | P15 and tyrosinase melanoma antigens and their use in diagnostic and therapeutic methods |
US5645837A (en) * | 1995-01-17 | 1997-07-08 | Thomas Jefferson University | Peptides that inhibit T cell activation and methods of using the same |
DE69628154T2 (de) * | 1995-03-08 | 2004-03-18 | The Scripps Research Institute, La Jolla | Antigen präsentierendes system und aktivierung von t-zellen |
US5587289A (en) * | 1995-03-14 | 1996-12-24 | Ludwig Institute For Cancer Research | Isolated nucleic acid molecules which are members of the MAGE-Xp family and uses thereof |
US5759783A (en) * | 1995-03-14 | 1998-06-02 | Ludwig Institute For Cancer Research | Method of screening for cancer by detecting messenger RNA for a MAGE-XP gene |
US5695760A (en) | 1995-04-24 | 1997-12-09 | Boehringer Inglehiem Pharmaceuticals, Inc. | Modified anti-ICAM-1 antibodies and their use in the treatment of inflammation |
US5985270A (en) | 1995-09-13 | 1999-11-16 | Fordham University | Adoptive immunotherapy using macrophages sensitized with heat shock protein-epitope complexes |
IL125884A0 (en) | 1996-03-04 | 1999-04-11 | Targeted Genetics Corp | Modified rapid expansion methods ("modified-rem") for in vitro propagation of t lymphocytes |
WO1997046256A1 (en) * | 1996-05-23 | 1997-12-11 | The Scripps Research Institute | Mhc class ii antigen-presenting systems and methods for activating cd4+ t cells |
WO2001059073A2 (en) * | 2000-02-11 | 2001-08-16 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Cytotoxic t lymphocytes activated by dendritic cell hybrids |
WO1999037313A1 (en) * | 1998-01-26 | 1999-07-29 | Genzyme Corporation | Immune effector cell hybrids |
WO1999054345A1 (en) | 1998-04-21 | 1999-10-28 | Thomas Jefferson University | Cd8 antagonists |
US6140050A (en) | 1998-06-26 | 2000-10-31 | Ludwig Institute For Cancer Research | Methods for determining breast cancer and melanoma by assaying for a plurality of antigens associated therewith |
US6913749B2 (en) | 1998-11-02 | 2005-07-05 | Resistentia Pharmaceuticals Ab | Immunogenic polypeptides for inducing anti-self IgE responses |
PT1179176E (pt) * | 1999-04-16 | 2006-07-31 | Ortho Mcneil Pharm Inc | Metodo para a deteccao de celulas-t especificas para o antigenio |
JP2001089389A (ja) | 1999-07-22 | 2001-04-03 | Sumitomo Pharmaceut Co Ltd | 抗原特異的t細胞の誘導剤 |
EP1257565A4 (en) * | 2000-02-01 | 2005-04-06 | Austin Research Inst | DERIVED FROM MUCIN-1 ANTIGENE AND ITS USE IN IMMUNOTHERAPY |
US20030165483A1 (en) * | 2000-07-10 | 2003-09-04 | Ulrich Zimmermann | Method for the modification of biological cells |
MXPA03007503A (es) | 2001-02-20 | 2004-10-15 | Johnson & Johnson | Un metodo de terapia de celulas para el tratamiento de tumores. |
-
2002
- 2002-02-19 MX MXPA03007503A patent/MXPA03007503A/es active IP Right Grant
- 2002-02-19 EA EA200300815A patent/EA013944B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2002-02-19 CA CA2698079A patent/CA2698079C/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-02-19 PT PT02742493T patent/PT1377251E/pt unknown
- 2002-02-19 IL IL15736602A patent/IL157366A0/xx unknown
- 2002-02-19 US US10/080,013 patent/US20030077248A1/en not_active Abandoned
- 2002-02-19 CA CA2438754A patent/CA2438754C/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-02-19 ES ES02742493T patent/ES2306771T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-19 DK DK08009460.0T patent/DK2016930T3/en active
- 2002-02-19 CN CN028082966A patent/CN1571834B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2002-02-19 EP EP14187466.9A patent/EP2848255B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-19 EP EP08009460.0A patent/EP2016930B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-19 AT AT02742493T patent/ATE396691T1/de not_active IP Right Cessation
- 2002-02-19 NZ NZ527683A patent/NZ527683A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-02-19 JP JP2002565553A patent/JP2006510567A/ja not_active Withdrawn
- 2002-02-19 DE DE60226853T patent/DE60226853D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-19 PL PL369971A patent/PL206976B1/pl unknown
- 2002-02-19 WO PCT/US2002/005748 patent/WO2002065992A2/en active Application Filing
- 2002-02-19 ES ES14187466.9T patent/ES2643582T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-19 EP EP02742493A patent/EP1377251B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-19 KR KR1020097010449A patent/KR100971266B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2002-02-19 BR BR0207399-4A patent/BR0207399A/pt not_active Application Discontinuation
- 2002-02-19 HU HU0402656A patent/HUP0402656A3/hu unknown
- 2002-02-19 KR KR1020037010894A patent/KR100962544B1/ko active IP Right Grant
-
2003
- 2003-08-12 IL IL157366A patent/IL157366A/en not_active IP Right Cessation
- 2003-08-19 NO NO20033674A patent/NO334885B1/no not_active IP Right Cessation
- 2003-09-18 ZA ZA2003/07327A patent/ZA200307327B/en unknown
-
2004
- 2004-02-25 HK HK04101353A patent/HK1058485A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2008
- 2008-01-16 US US12/014,863 patent/US9222071B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2010
- 2010-03-11 JP JP2010054732A patent/JP2010222352A/ja active Pending
-
2012
- 2012-02-02 JP JP2012020842A patent/JP5634415B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2012-04-17 IL IL219223A patent/IL219223B/en not_active IP Right Cessation
-
2015
- 2015-09-18 HK HK15109174.2A patent/HK1208376A1/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5634415B2 (ja) | 腫瘍の治療のための細胞治療方法 | |
US9222070B2 (en) | Cell therapy method for the treatment of tumors | |
JP6230208B2 (ja) | 樹状細胞/腫瘍細胞融合物および抗cd3/cd28を使用する抗腫瘍免疫の刺激 | |
JP2011504101A5 (ja) | ||
JP2005139118A (ja) | 腫瘍の治療のための細胞治療方法 | |
JP2010235611A (ja) | 腫瘍の治療のための細胞治療方法 | |
AU2008200524B2 (en) | A cell therapy method for the treatment of tumors | |
AU2002306587A1 (en) | A cell therapy method for the treatment of tumors |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140204 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140319 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140619 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20141008 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20141014 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5634415 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |