JP3795011B2 - 保湿剤及びこれを含有する化粧料 - Google Patents
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は皮膚の水分保持能に優れた保湿剤及びこれを含有する使用感の優れた化粧料に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来、アロエは、育毛、紫外線防御、抗炎症、抗チロシナーゼ、保湿、毛髪保護、増粘等の目的で使用されており、これを含有する化粧料は多数報告されている（例えば、非特許文献１を参照）。このアロエから得た添加成分は、アロインを主とするアントラキノン類を有効成分とするものが多いことから、皮膚刺激性を有していた（例えば、非特許文献２参照）。また、アロエより多糖類を抽出して用いる場合もあったが、これらの保湿作用は弱く十分なものではなかった（例えば、特許文献１参照）。
【０００３】
一方、抽出工程の迅速化及び特異臭の低減を目的として、アロエに酵母を加えて発酵させた皮膚外用剤も報告されているが（例えば、特許文献２及び３参照）、酵母を用いるときは、糖類を添加しなければ発酵が十分に進行せず、得られた発酵生成物は残存糖の影響で、腐敗しやすかったりベタツキ感があるといった問題があった。また、アロエの発酵に酵母を用いたときには特有の発酵臭がすることから、商品の嗜好性を下げるといった問題もあった。
【０００４】
【特許文献１】
特願昭５８−１９７１７５号公報
【特許文献２】
特願昭５８−１９７１７５号公報
【特許文献３】
特開昭６０−０８７２０７号公報
【非特許文献１】
前田憲寿他、「Ｆｒａｇｒａｎｃｅ Ｊｏｕｒｎａｌ臨時増刊」、Ｎｏ．１６、ｐ８３−８４、１９９９
【非特許文献２】
鈴木正人監修、「新しい化粧品素材の効能・効果・作用（下）」、シーエムシー、ｐ３９５−３９７、１９９８
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
従って本発明の課題は、アロエの有する保湿作用をより高めると共に皮膚刺激性を無くした、使用感の優れた保湿剤やこれを含有する化粧料を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
かかる実状において、本発明者らは上記の課題を解決すべく鋭意研究した結果、アロエに乳酸菌を作用せしめて得られる発酵生成物が、皮膚角質層の水分含有量を高めること、また、このものは種々の使用感に優れていることを見いだし、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち、本発明はアロエに乳酸菌の一種又は二種以上を作用させて得られる発酵生成物を有効成分とする保湿剤を提供するものである。
【０００８】
また、本発明は上記保湿剤を含有する化粧料を提供するものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明の保湿剤は、アロエに乳酸菌を作用させて得られる発酵生成物を有効成分とするものである。
【００１０】
本発明の保湿剤の有効成分である発酵生成物の調製に当たり、その原料となるアロエは、アフリカ原産のユリ科植物の総称であり、キダチアロエやアロエベラ等、３００種以上の品種を有する。このアロエはムチンやアロエマンナン等の多糖類を多く含むほか、アロインやアロエニン、アロエチン、アロチミン、アロエウルシン等の成分を含有することが知られている。本発明で使用するアロエは、アロエの仲間であれば特に限定するものではないが、アロエ（Aloe）属の植物が好ましく、特に入手の容易性や、コストの点等から、キダチアロエ（Aloe arborescens Miller）又はアロエベラ（Aloe barbadensis Miller）を使用することが好ましい。上記アロエの使用部位としては特に限定されないが、葉、葉肉、芽、根の他に、繊維成分がないため後の製造工程が簡便になる前記部位の汁液、ドリップ液等も用いることができる。また、アロエの発酵に用いられる乳酸菌は上記アロエ中の繊維成分やタンパク成分等を資化することができないので、常法に従い、醗酵処理前にセルラーゼ処理、プロテアーゼ処理等の分解処理等を行うことが好ましい。セルラーゼ処理を行うことにより、資化性が向上して発酵が進行し、発酵生成物中に資化できなかったセルロース等が残存せず、後の製造工程が簡便となる。また、プロテアーゼ処理を行うことにより、発酵生成物にタンパク成分等が残留しないため濁りを生じず、発酵後に清澄化工程を行う必要がなくなる。更に、アミラーゼ処理を併用することで、より乳酸菌の資化性が向上する。酵素分解処理には、セルラーゼ、ペクチナーゼ等の繊維質分解酵素（セルラーゼ類）や、酸性プロテアーゼ、中性プロテアーゼ、アルカリ性プロテアーゼ、パパイン、フィシン、プロメライン等のプロティナーゼ、ペプチダーゼ、マンナナーゼ等のタンパク分解酵素等（プロテアーゼ類）、α-アミラーゼ、グルコアミラーゼ等のデンプン分解酵素（アミラーゼ類）から１種または２種以上を適宜選択して使用すればよい。
【００１１】
一方、本発明の保湿剤の有効成分である発酵生成物の調製に用いられる乳酸菌としては、アロエを発酵できるものであれば特に限定されず、種々の乳酸菌を使用することができる。具体的には、例えば、ラクトバチルス・カゼイ（Lactobacillus casei）、ラクトバチルス・クルバタス（Lactobacillus curvatus）、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）、ラクトバチルス・アミロボラス（Lactobacillus amylovorus）、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）、ラクトバチルス・ブフネリ（Lactobacillus buchneri）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）、ラクトバチルス・マリ（Lactobacillus mali）、ラクトバチルス・パラブフネリ（Lactobacillus parabuchneri）、ラクトバチルス・パラカゼイ（Lactobacillus paracasei）、ラクトバチルス・ペントサス（Lactobacillus pentosus）、ラクトバチルス・ラムノサス（Lactobacillus rhamnosus）、ラクトバチルス・ビチュリヌス（Lactobacillus vitulinus）、ラクトバチルス・ゼアエ（Lactobacillus zeae）等のラクトバチルス属、ラクトコッカス・ラクティス（Lactococcus lactis）等のラクトコッカス属、ロイコノストック・メセンテロイデス（Leuconostoc mesenteroides）、ロイコノストック・カルノサム（Leuconostoc carnosum）、ロイコノストック・シトレウム（Leuconostoc citreum）、ロイコノストック・ゲリダム（Leuconostoc gelidum）、ロイコノストック・ラクティス（Leuconostoc lactis）等のロイコノストック属、ペディオコッカス・ペントサセウス（Pediococcus pentosaceus）等のペディオコッカス属、エンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）、エンテロコッカス・フェシウム（Enterococcus faecium）等のエンテロコッカス属、及びワイセラ・コンフューサ（Weissella confusa）、ワイセラ・パラメセンテロイデス（Weissella paramesenteroides）、ワイセラ・ビリデスセンス（Weissella viridescens）等のワイセラ属等に属する乳酸菌の一種又は二種以上から選択し、使用すればよい。
【００１２】
本発明で用いられる上記乳酸菌の起源は特に限定されず、動物、植物、或いは魚介類由来乳酸菌等、いずれの乳酸菌でも好適に使用できるが、発酵の安定性の点から植物由来乳酸菌が特に好ましい。
【００１３】
また、発酵生成物の保湿効果の点から、ＦＥＲＭ ＢＰ−１３６６やＡＴＣＣ ２７２１６等のラクトバチルス・カゼイ 、ＪＣＭ １０９６Ｔ等のラクトバチルス・カルバタス、ＪＣＭ １５８８ＴやＮＲＩＣ ０３９７等のラクトバチルス・ペントサス、ＡＴＣＣ １４９１７ＴやＡＴＣＣ ８０１４等のラクトバチルス・プランタラム、ＤＳＭ ２０１７８等のラクトバチルス・ゼアエ、ＡＴＣＣ １９２５６Ｔ等のロイコノストック・ラクティスから選ばれる乳酸菌の一種又は二種以上を選択することが好ましい。
【００１４】
なお、本発明で用いた乳酸菌のうち、ＦＥＲＭ ＢＰ−１３６６は昭和６２年５月１８日付けで独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センター（郵便番号３０５−８５６６ 日本国茨城県つくば市東１丁目１番地１中央第６）に寄託済のラクトバチルス・カゼイ（Lactobacillus casei） ＹＩＴ９０２９株である。
なお、表１および表２に示す菌株名の語尾に"Ｔ"を付した菌株は基準株（type strain）であり、その他の株も含めてＡＴＣＣ（American Type Culture Collection）等から入手することができる。
【００１５】
上記した乳酸菌を用いるアロエの発酵は、一般的な乳酸菌を用いた植物の発酵方法により行うことができ、特に制約されないが、例えば、前培養した乳酸菌の菌液をアロエの抽出物等に接種した後、その微生物に適した温度、時間等の条件を適宜決定して発酵を行えばよい。なお、この培養の際には発酵生成物の嗜好性を損なわないためおよびアロエを十分に資化させるために糖類を添加しないことが好ましい。
【００１６】
具体的に上記したアロエの発酵は、Ｂｒｉｘを０.５〜４.０に調製したアロエの抽出物に乳酸菌を接種して、ｐＨを中性〜酸性、３０〜４０℃の培養温度で６〜９６時間程度行えばよい。
【００１７】
斯くして得られる発酵生成物は優れた保湿作用を有し、このままでも保湿剤として使用可能であるが、本発明の効果を妨げない範囲で、遠心処理やろ過処理等の精製処理を行なって保湿剤としてもよく、また、低級及び多価アルコール等の有機溶媒で発酵生成物を抽出した後保湿剤としてもよい。
【００１８】
上記のようにして得られた保湿剤は、化粧料をはじめとする種々の組成物に配合することができる。化粧料に配合する場合には、化粧料の全量に対して発酵生成物として０.０１％〜１００％（Ｗ／Ｖ）、好ましくは０.１％〜９０％、より好ましくは１〜３０％となる量の保湿剤を添加すればよい。また、この化粧料には本発明の効果を妨げない範囲で通常化粧料に配合される成分、例えば、水、アルコール類、油成分、界面活性剤、防腐剤、香料、色素等を配合することができる。また、上記化粧料に脱脂乳又は豆乳にビフィズス菌を接種して得られた培養液、ヒアルロン酸、グリセリン等の保湿成分を配合することによってよりいっそう保湿効果が期待される。具体的に、ヒアルロン酸を配合する場合には、ヒアルロン酸ナトリウムの使用が好ましい。さらに、発酵生成物を両親媒性物質のラメラ構造体に内包して用いてもよい。
【００１９】
【実施例】
次に実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに何ら限定されるものではない。
【００２０】
製 造 例 １
乳酸菌の前培養：
アロエの発酵に用いる乳酸菌の前培養を行った。乳酸菌の培養の培地には１２１℃で１５ 分間蒸気滅菌したＭＲＳ培地（Ｄｉｆｃｏ社製）又はＧＹＰ液体培地（小崎 道雄 監修、「乳酸菌実験マニュアル」、３０、朝倉書店、１９９２）の４ｍｌを用いた。この培地に表１及び表２の各乳酸菌を接種した後、３０℃又は３７℃にて１日間静置培養を行ない、前培養液を得た。
【００２１】
【表１】
【００２２】
【表２】
ATCC : American Type Culture Collection
DSM : Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH
FERM : 独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センター
（National Institute of Biosciences and Human-Technology, Agency of Industrial Science and Technology, Ministry of International Trade and Industry）
IAM : 東京大学分子細胞生物学研究所
（IAM Culture collection, Institute of Molecular and Cellular Biosciences, University of Tokyo）
JCM : 理化学研究所 微生物系統保存施設
（Japan Collection of Microorganisms）
NIRD : National Institute for Research in Dairying, UK.
NRIC : 東京農業大学 菌株保存室
（NODAI Research Institute Culture Collection）
NCDO : National Collections of industrial, Food and Marine Bacteria, NCIMB Ltd., UK.
菌株名T : 基準株（Type strain）を表す
【００２３】
製 造 例 ２：
アロエベラ発酵生成物の製造（１）：
アロエベラ（Aloe barbadensis Miller）の凍結葉を解凍後破砕し、２倍量の水及びクエン酸０.０５％を加え、４０℃にてセルラーゼ処理（セルラーゼ“オノズカ”３Ｓ；ヤクルト薬品工業社製）を３時間行った。その後、一旦９０℃まで加熱した後、室温まで冷却してろ過し、Ｂｒｉｘ３.５になるまで減圧濃縮を行ってアロエベラ抽出液を得た。得られたアロエベラ抽出液（ｐＨ３.７）を１２１℃で１５分間蒸気滅菌した。これに、表３に記載した乳酸菌の前培養菌液を１％接種した後、３０℃で９６時間静置培養し、遠心上清を採取してアロエ発酵生成物を得た。
【００２４】
製 造 例 ３
アロエベラ発酵生成物の製造（２）：
アロエベラ（Aloe barbadensis Miller）の凍結葉を解凍する際に得られるドリップ液にクエン酸０.０５％を加え、４０℃にてペクチン分解（スクラーゼＳ；三共株式会社製）、デンプン分解（コクラーゼ；三共株式会社製）及びパパイン（パパインソルブル；ヤクルト薬品工業社製）処理を３時間行った。その後、一旦９０℃まで加熱した後、室温まで冷却してろ過し、Ｂｒｉｘ３.５になるまで減圧濃縮した。更に凍結融解後、析出したシュウ酸カルシウムをろ過にて除去してアロエベラ抽出液を得た。得られたアロエベラ抽出液（ｐＨ３.７）を １２１℃で１５分間蒸気滅菌し、表３に記載した乳酸菌の前培養菌液をこれに１％接種した後、３０℃で９６時間静置培養し、遠心上清を採取してアロエ発酵生成物を得た。なお、乳酸菌を接種しないアロエべラ抽出液を未発酵物として同様に静置培養し、比較品１とした。
【００２５】
製 造 例 ４
キダチアロエ発酵生成物の製造：
キダチアロエ（Aloe arborescens Miller）の乾燥葉を水洗し、５倍量の水を加えミキサーでペースト状に粉砕して４８時間放置後、ろ液を採取してキダチアロエ抽出液（ｐＨ５.３）とした。得られたキダチアロエ抽出液を １２１℃で１５ 分間蒸気滅菌し、これに表４に記載した乳酸菌の菌液を１％接種した後、３０℃で９６ 時間静置培養し、遠心上清を採取してアロエ発酵生成物を得た。なお、乳酸菌を接種しないキダチアロエ抽出液を未発酵物として同様に静置培養し、比較品２とした。
【００２６】
製 造 例 ５
ｐＨ調製アロエベラ発酵生成物の製造：
製造例３と同様にして得られたアロエベラ抽出液に８Ｎ水酸化ナトリウム（和光純薬）を加えｐＨ７.０に調製した後、１２１℃で１５分間蒸気滅菌し、これに表５に記載した乳酸菌の菌液を１％接種した後、３０℃で９６時間静置培養し、遠心上清を採取してアロエ発酵生成物を得た。なお、乳酸菌を接種しないｐＨ調製済みアロエべラ抽出液を未発酵物として同様に静置培養し、比較品３とした。
【００２７】
試 験 例 １
アロエベラ発酵生成物の保湿効果（１）：
温度２４℃、湿度４５％ の環境を維持した測定室において、女性パネラー１０名の前腕内側皮膚に上記製造例３で得られた各種アロエ発酵生成物を１０μｌ/ｃｍ２塗布し、皮膚角質層の水分含有量の経時的変化をコンダクタンスメータ（ＩＢＳ社製ＳＫＩＣＯＮ−２００）にて測定した。コンダクタンスは塗布前と塗布１０分後に各々５回測定した平均値を求め、さらに１０名の平均値で表し、以下の式１により算出されるコンダクタンス上昇率で表した。得られた結果を表３に示す。
【００２８】
【式１】
【００２９】
【表３】
【００３０】
表３に示したとおり、アロエベラ発酵生成物は未発酵のアロエ抽出物に比較して優れた皮膚角質層の水分保持機能を有しており、保湿剤として有用であることがわかった。また、乳酸菌として、ＪＣＭ １５５８およびＡＴＣＣ １４９１７を用いたときに得られる発酵生成物の保湿効果は特に優れたものであった。なお、製造例２で得られたアロエ発酵生成物について同様の試験を実施した結果、特にＪＣＭ １５５８およびＡＴＣＣ １４９１７を用いるときに得られる発酵生成物が優れた保湿性を示した。更に、この発酵生成物の「べたつき」、「皮膚刺激性」はまったく感じられず、また、いずれの乳酸菌を用いて発酵した生成物にも発酵臭はほとんど無く、アロエ特有の青臭さも消失していた。
【００３１】
試 験 例 ２
キダチアロエ発酵生成物の保湿効果：
温度２４℃、湿度４５％ の環境を維持した測定室において、女性パネラー１０名の前腕内側皮膚に上記製造例４で得られた各種アロエ発酵生成物を１０μｌ/ｃｍ２塗布し、皮膚角質層の水分含有量の経時的変化をコンダクタンスメータ（ＩＢＳ社製ＳＫＩＣＯＮ−２００）にて測定した。得られた結果は試験例１と同様に算出されたコンダクタンス上昇率で表した。得られた結果を表４に示す。
【００３２】
【表４】
【００３３】
表４に示したとおり、キダチアロエ発酵生成物は未発酵のアロエ抽出物に比較して優れた皮膚角質層の水分保持機能を有しており、保湿剤として有用であることがわかった。また、乳酸菌として、ＪＣＭ １１０９６を用いたときに得られる発酵生成物の保湿効果は特に優れたものであった。更に、この発酵生成物の「べたつき」、「皮膚刺激性」はまったく感じられず、また、いずれの乳酸菌を用いて発酵した生成物にも発酵臭はほとんど無く、アロエ特有の青臭さも消失していた。
【００３４】
試 験 例 ３
アロエベラ発酵生成物の保湿効果（２）：
温度２４℃、湿度４５％ の環境を維持した測定室において、女性パネラー１０名の前腕内側皮膚に上記製造例５で得られた各種アロエ発酵生成物を１０μｌ/ｃｍ２塗布し、皮膚角質層の水分含有量の経時的変化をコンダクタンスメータ（ＩＢＳ社製ＳＫＩＣＯＮ−２００）にて測定した。得られた結果は試験例１と同様に算出されたコンダクタンス上昇率で表した。得られた結果を表５に示す。
【００３５】
【表５】
【００３６】
表５に示したとおり、ｐＨ調製をしたアロエベラ発酵生成物は未調整のアロエベラ発酵生成物と同等かそれ以上の保湿効果を有していた。また、ｐＨ調製したアロエベラ抽出液も未発酵のアロエ抽出物に比較して優れた皮膚角質層の水分保持機能を有しており、保湿剤として有用であることがわかった。また、乳酸菌として、ＡＴＣＣ １４９１７を用いたときに得られる発酵生成物の保湿効果は特に優れたものであった。更に、この発酵生成物の「べたつき」、「皮膚刺激性」はまったく感じられず、また、いずれの乳酸菌を用いて発酵した生成物にも発酵臭はほとんど無く、アロエ特有の青臭さも消失していた。
【００３７】
試 験 例 ４
アロエベラ発酵生成物を含有する化粧料の保湿効果：
アロエベラにラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）ＡＴＣＣ １４９１７株を製造例３と同様の方法で作用させて得られた発酵生成物(実施品８９)と、これにヒアルロン酸（ＨＡ）を０.０６％ 配合した化粧料を調製した(実施品９０）。次いで、これらを１０μｌ/ｃｍ２で皮膚に塗布し、そのときのコンダクタンス上昇率の経時的変化を調べた。なお、実施品９０と同量になるよう調製したＨＡを比較例４とした。得られた結果を表６に示す。
【００３８】
【表６】
【００３９】
表６よりアロエに乳酸菌を作用させて得られた発酵生成物にヒアルロン酸を配合した化粧料は、発酵生成物単独のものよりも優れた保湿効果が得られることがわかった。
【００４０】
実 施 例 １
化粧水：
下記組成の化粧水を製造した。
【００４１】
＜ 製 法 ＞
（７）に（３）を分散し、これに（１）、（２）、（４）、（５）及び（６）を加えて十分撹拌することにより化粧水を得た。なお、アロエ発酵生成物としては、製造例２〜４で得られた実施品２、実施品１８、実施品２０、実施品３５、実施品６６、実施品６７、実施品７６、実施品７７、実施品８０を使用した。
【００４２】
実 施 例 ２
乳液：
下記組成の乳液を製造した。
【００４３】
＜ 製 法 ＞
（10）に（７）及び（８）を加え、これに８０℃で（１）〜（６）を加えて乳化し、その（９）を加えて室温まで冷却して乳液を得た。なお、アロエ発酵生成物としては、製造例２〜４で得られた実施品３、実施品５、実施品３３、実施品３４、実施品６０、実施品６１、実施品８６、実施品８７、実施品８８を使用した。
【００４４】
実 施 例 ３
クリーム：
下記組成のクリームを製造した。
【００４５】
＜ 製 法 ＞
（13）に（10）及び（11）を加え、これに（９）を分散せしめて分散液を得る。次いでこれを８０℃で（１）〜（８）を加えて乳化し、その後（12）を加えて室温まで冷却してクリームを得た。なお、アロエ発酵生成物としては、製造例２〜４で得られた実施品４、実施品２０、実施品３６、実施品４３、実施品４４、実施品６０、実施品７３、実施品７８、実施品８５を使用した。
【００４６】
【発明の効果】
本発明のアロエを乳酸菌に作用させて得られる発酵生成物はヒト皮膚角質層の水分保持能に優れ、保湿剤として有用である。また、このものはアロエの青臭さがほとんど消失しており、発酵臭も少ない。さらに、アロエの発酵の際に実質的に糖類を添加していないので、保湿剤によく見られるべたつき感もまったくなく、これを配合すれば優れた保湿作用と良好な使用感を有する化粧料が得られる。
以 上
【発明の属する技術分野】
本発明は皮膚の水分保持能に優れた保湿剤及びこれを含有する使用感の優れた化粧料に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来、アロエは、育毛、紫外線防御、抗炎症、抗チロシナーゼ、保湿、毛髪保護、増粘等の目的で使用されており、これを含有する化粧料は多数報告されている（例えば、非特許文献１を参照）。このアロエから得た添加成分は、アロインを主とするアントラキノン類を有効成分とするものが多いことから、皮膚刺激性を有していた（例えば、非特許文献２参照）。また、アロエより多糖類を抽出して用いる場合もあったが、これらの保湿作用は弱く十分なものではなかった（例えば、特許文献１参照）。
【０００３】
一方、抽出工程の迅速化及び特異臭の低減を目的として、アロエに酵母を加えて発酵させた皮膚外用剤も報告されているが（例えば、特許文献２及び３参照）、酵母を用いるときは、糖類を添加しなければ発酵が十分に進行せず、得られた発酵生成物は残存糖の影響で、腐敗しやすかったりベタツキ感があるといった問題があった。また、アロエの発酵に酵母を用いたときには特有の発酵臭がすることから、商品の嗜好性を下げるといった問題もあった。
【０００４】
【特許文献１】
特願昭５８−１９７１７５号公報
【特許文献２】
特願昭５８−１９７１７５号公報
【特許文献３】
特開昭６０−０８７２０７号公報
【非特許文献１】
前田憲寿他、「Ｆｒａｇｒａｎｃｅ Ｊｏｕｒｎａｌ臨時増刊」、Ｎｏ．１６、ｐ８３−８４、１９９９
【非特許文献２】
鈴木正人監修、「新しい化粧品素材の効能・効果・作用（下）」、シーエムシー、ｐ３９５−３９７、１９９８
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
従って本発明の課題は、アロエの有する保湿作用をより高めると共に皮膚刺激性を無くした、使用感の優れた保湿剤やこれを含有する化粧料を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
かかる実状において、本発明者らは上記の課題を解決すべく鋭意研究した結果、アロエに乳酸菌を作用せしめて得られる発酵生成物が、皮膚角質層の水分含有量を高めること、また、このものは種々の使用感に優れていることを見いだし、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち、本発明はアロエに乳酸菌の一種又は二種以上を作用させて得られる発酵生成物を有効成分とする保湿剤を提供するものである。
【０００８】
また、本発明は上記保湿剤を含有する化粧料を提供するものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明の保湿剤は、アロエに乳酸菌を作用させて得られる発酵生成物を有効成分とするものである。
【００１０】
本発明の保湿剤の有効成分である発酵生成物の調製に当たり、その原料となるアロエは、アフリカ原産のユリ科植物の総称であり、キダチアロエやアロエベラ等、３００種以上の品種を有する。このアロエはムチンやアロエマンナン等の多糖類を多く含むほか、アロインやアロエニン、アロエチン、アロチミン、アロエウルシン等の成分を含有することが知られている。本発明で使用するアロエは、アロエの仲間であれば特に限定するものではないが、アロエ（Aloe）属の植物が好ましく、特に入手の容易性や、コストの点等から、キダチアロエ（Aloe arborescens Miller）又はアロエベラ（Aloe barbadensis Miller）を使用することが好ましい。上記アロエの使用部位としては特に限定されないが、葉、葉肉、芽、根の他に、繊維成分がないため後の製造工程が簡便になる前記部位の汁液、ドリップ液等も用いることができる。また、アロエの発酵に用いられる乳酸菌は上記アロエ中の繊維成分やタンパク成分等を資化することができないので、常法に従い、醗酵処理前にセルラーゼ処理、プロテアーゼ処理等の分解処理等を行うことが好ましい。セルラーゼ処理を行うことにより、資化性が向上して発酵が進行し、発酵生成物中に資化できなかったセルロース等が残存せず、後の製造工程が簡便となる。また、プロテアーゼ処理を行うことにより、発酵生成物にタンパク成分等が残留しないため濁りを生じず、発酵後に清澄化工程を行う必要がなくなる。更に、アミラーゼ処理を併用することで、より乳酸菌の資化性が向上する。酵素分解処理には、セルラーゼ、ペクチナーゼ等の繊維質分解酵素（セルラーゼ類）や、酸性プロテアーゼ、中性プロテアーゼ、アルカリ性プロテアーゼ、パパイン、フィシン、プロメライン等のプロティナーゼ、ペプチダーゼ、マンナナーゼ等のタンパク分解酵素等（プロテアーゼ類）、α-アミラーゼ、グルコアミラーゼ等のデンプン分解酵素（アミラーゼ類）から１種または２種以上を適宜選択して使用すればよい。
【００１１】
一方、本発明の保湿剤の有効成分である発酵生成物の調製に用いられる乳酸菌としては、アロエを発酵できるものであれば特に限定されず、種々の乳酸菌を使用することができる。具体的には、例えば、ラクトバチルス・カゼイ（Lactobacillus casei）、ラクトバチルス・クルバタス（Lactobacillus curvatus）、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）、ラクトバチルス・アミロボラス（Lactobacillus amylovorus）、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）、ラクトバチルス・ブフネリ（Lactobacillus buchneri）、ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）、ラクトバチルス・マリ（Lactobacillus mali）、ラクトバチルス・パラブフネリ（Lactobacillus parabuchneri）、ラクトバチルス・パラカゼイ（Lactobacillus paracasei）、ラクトバチルス・ペントサス（Lactobacillus pentosus）、ラクトバチルス・ラムノサス（Lactobacillus rhamnosus）、ラクトバチルス・ビチュリヌス（Lactobacillus vitulinus）、ラクトバチルス・ゼアエ（Lactobacillus zeae）等のラクトバチルス属、ラクトコッカス・ラクティス（Lactococcus lactis）等のラクトコッカス属、ロイコノストック・メセンテロイデス（Leuconostoc mesenteroides）、ロイコノストック・カルノサム（Leuconostoc carnosum）、ロイコノストック・シトレウム（Leuconostoc citreum）、ロイコノストック・ゲリダム（Leuconostoc gelidum）、ロイコノストック・ラクティス（Leuconostoc lactis）等のロイコノストック属、ペディオコッカス・ペントサセウス（Pediococcus pentosaceus）等のペディオコッカス属、エンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）、エンテロコッカス・フェシウム（Enterococcus faecium）等のエンテロコッカス属、及びワイセラ・コンフューサ（Weissella confusa）、ワイセラ・パラメセンテロイデス（Weissella paramesenteroides）、ワイセラ・ビリデスセンス（Weissella viridescens）等のワイセラ属等に属する乳酸菌の一種又は二種以上から選択し、使用すればよい。
【００１２】
本発明で用いられる上記乳酸菌の起源は特に限定されず、動物、植物、或いは魚介類由来乳酸菌等、いずれの乳酸菌でも好適に使用できるが、発酵の安定性の点から植物由来乳酸菌が特に好ましい。
【００１３】
また、発酵生成物の保湿効果の点から、ＦＥＲＭ ＢＰ−１３６６やＡＴＣＣ ２７２１６等のラクトバチルス・カゼイ 、ＪＣＭ １０９６Ｔ等のラクトバチルス・カルバタス、ＪＣＭ １５８８ＴやＮＲＩＣ ０３９７等のラクトバチルス・ペントサス、ＡＴＣＣ １４９１７ＴやＡＴＣＣ ８０１４等のラクトバチルス・プランタラム、ＤＳＭ ２０１７８等のラクトバチルス・ゼアエ、ＡＴＣＣ １９２５６Ｔ等のロイコノストック・ラクティスから選ばれる乳酸菌の一種又は二種以上を選択することが好ましい。
【００１４】
なお、本発明で用いた乳酸菌のうち、ＦＥＲＭ ＢＰ−１３６６は昭和６２年５月１８日付けで独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センター（郵便番号３０５−８５６６ 日本国茨城県つくば市東１丁目１番地１中央第６）に寄託済のラクトバチルス・カゼイ（Lactobacillus casei） ＹＩＴ９０２９株である。
なお、表１および表２に示す菌株名の語尾に"Ｔ"を付した菌株は基準株（type strain）であり、その他の株も含めてＡＴＣＣ（American Type Culture Collection）等から入手することができる。
【００１５】
上記した乳酸菌を用いるアロエの発酵は、一般的な乳酸菌を用いた植物の発酵方法により行うことができ、特に制約されないが、例えば、前培養した乳酸菌の菌液をアロエの抽出物等に接種した後、その微生物に適した温度、時間等の条件を適宜決定して発酵を行えばよい。なお、この培養の際には発酵生成物の嗜好性を損なわないためおよびアロエを十分に資化させるために糖類を添加しないことが好ましい。
【００１６】
具体的に上記したアロエの発酵は、Ｂｒｉｘを０.５〜４.０に調製したアロエの抽出物に乳酸菌を接種して、ｐＨを中性〜酸性、３０〜４０℃の培養温度で６〜９６時間程度行えばよい。
【００１７】
斯くして得られる発酵生成物は優れた保湿作用を有し、このままでも保湿剤として使用可能であるが、本発明の効果を妨げない範囲で、遠心処理やろ過処理等の精製処理を行なって保湿剤としてもよく、また、低級及び多価アルコール等の有機溶媒で発酵生成物を抽出した後保湿剤としてもよい。
【００１８】
上記のようにして得られた保湿剤は、化粧料をはじめとする種々の組成物に配合することができる。化粧料に配合する場合には、化粧料の全量に対して発酵生成物として０.０１％〜１００％（Ｗ／Ｖ）、好ましくは０.１％〜９０％、より好ましくは１〜３０％となる量の保湿剤を添加すればよい。また、この化粧料には本発明の効果を妨げない範囲で通常化粧料に配合される成分、例えば、水、アルコール類、油成分、界面活性剤、防腐剤、香料、色素等を配合することができる。また、上記化粧料に脱脂乳又は豆乳にビフィズス菌を接種して得られた培養液、ヒアルロン酸、グリセリン等の保湿成分を配合することによってよりいっそう保湿効果が期待される。具体的に、ヒアルロン酸を配合する場合には、ヒアルロン酸ナトリウムの使用が好ましい。さらに、発酵生成物を両親媒性物質のラメラ構造体に内包して用いてもよい。
【００１９】
【実施例】
次に実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに何ら限定されるものではない。
【００２０】
製 造 例 １
乳酸菌の前培養：
アロエの発酵に用いる乳酸菌の前培養を行った。乳酸菌の培養の培地には１２１℃で１５ 分間蒸気滅菌したＭＲＳ培地（Ｄｉｆｃｏ社製）又はＧＹＰ液体培地（小崎 道雄 監修、「乳酸菌実験マニュアル」、３０、朝倉書店、１９９２）の４ｍｌを用いた。この培地に表１及び表２の各乳酸菌を接種した後、３０℃又は３７℃にて１日間静置培養を行ない、前培養液を得た。
【００２１】
【表１】
【表２】
DSM : Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH
FERM : 独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センター
（National Institute of Biosciences and Human-Technology, Agency of Industrial Science and Technology, Ministry of International Trade and Industry）
IAM : 東京大学分子細胞生物学研究所
（IAM Culture collection, Institute of Molecular and Cellular Biosciences, University of Tokyo）
JCM : 理化学研究所 微生物系統保存施設
（Japan Collection of Microorganisms）
NIRD : National Institute for Research in Dairying, UK.
NRIC : 東京農業大学 菌株保存室
（NODAI Research Institute Culture Collection）
NCDO : National Collections of industrial, Food and Marine Bacteria, NCIMB Ltd., UK.
菌株名T : 基準株（Type strain）を表す
【００２３】
製 造 例 ２：
アロエベラ発酵生成物の製造（１）：
アロエベラ（Aloe barbadensis Miller）の凍結葉を解凍後破砕し、２倍量の水及びクエン酸０.０５％を加え、４０℃にてセルラーゼ処理（セルラーゼ“オノズカ”３Ｓ；ヤクルト薬品工業社製）を３時間行った。その後、一旦９０℃まで加熱した後、室温まで冷却してろ過し、Ｂｒｉｘ３.５になるまで減圧濃縮を行ってアロエベラ抽出液を得た。得られたアロエベラ抽出液（ｐＨ３.７）を１２１℃で１５分間蒸気滅菌した。これに、表３に記載した乳酸菌の前培養菌液を１％接種した後、３０℃で９６時間静置培養し、遠心上清を採取してアロエ発酵生成物を得た。
【００２４】
製 造 例 ３
アロエベラ発酵生成物の製造（２）：
アロエベラ（Aloe barbadensis Miller）の凍結葉を解凍する際に得られるドリップ液にクエン酸０.０５％を加え、４０℃にてペクチン分解（スクラーゼＳ；三共株式会社製）、デンプン分解（コクラーゼ；三共株式会社製）及びパパイン（パパインソルブル；ヤクルト薬品工業社製）処理を３時間行った。その後、一旦９０℃まで加熱した後、室温まで冷却してろ過し、Ｂｒｉｘ３.５になるまで減圧濃縮した。更に凍結融解後、析出したシュウ酸カルシウムをろ過にて除去してアロエベラ抽出液を得た。得られたアロエベラ抽出液（ｐＨ３.７）を １２１℃で１５分間蒸気滅菌し、表３に記載した乳酸菌の前培養菌液をこれに１％接種した後、３０℃で９６時間静置培養し、遠心上清を採取してアロエ発酵生成物を得た。なお、乳酸菌を接種しないアロエべラ抽出液を未発酵物として同様に静置培養し、比較品１とした。
【００２５】
製 造 例 ４
キダチアロエ発酵生成物の製造：
キダチアロエ（Aloe arborescens Miller）の乾燥葉を水洗し、５倍量の水を加えミキサーでペースト状に粉砕して４８時間放置後、ろ液を採取してキダチアロエ抽出液（ｐＨ５.３）とした。得られたキダチアロエ抽出液を １２１℃で１５ 分間蒸気滅菌し、これに表４に記載した乳酸菌の菌液を１％接種した後、３０℃で９６ 時間静置培養し、遠心上清を採取してアロエ発酵生成物を得た。なお、乳酸菌を接種しないキダチアロエ抽出液を未発酵物として同様に静置培養し、比較品２とした。
【００２６】
製 造 例 ５
ｐＨ調製アロエベラ発酵生成物の製造：
製造例３と同様にして得られたアロエベラ抽出液に８Ｎ水酸化ナトリウム（和光純薬）を加えｐＨ７.０に調製した後、１２１℃で１５分間蒸気滅菌し、これに表５に記載した乳酸菌の菌液を１％接種した後、３０℃で９６時間静置培養し、遠心上清を採取してアロエ発酵生成物を得た。なお、乳酸菌を接種しないｐＨ調製済みアロエべラ抽出液を未発酵物として同様に静置培養し、比較品３とした。
【００２７】
試 験 例 １
アロエベラ発酵生成物の保湿効果（１）：
温度２４℃、湿度４５％ の環境を維持した測定室において、女性パネラー１０名の前腕内側皮膚に上記製造例３で得られた各種アロエ発酵生成物を１０μｌ/ｃｍ２塗布し、皮膚角質層の水分含有量の経時的変化をコンダクタンスメータ（ＩＢＳ社製ＳＫＩＣＯＮ−２００）にて測定した。コンダクタンスは塗布前と塗布１０分後に各々５回測定した平均値を求め、さらに１０名の平均値で表し、以下の式１により算出されるコンダクタンス上昇率で表した。得られた結果を表３に示す。
【００２８】
【式１】
【表３】
表３に示したとおり、アロエベラ発酵生成物は未発酵のアロエ抽出物に比較して優れた皮膚角質層の水分保持機能を有しており、保湿剤として有用であることがわかった。また、乳酸菌として、ＪＣＭ １５５８およびＡＴＣＣ １４９１７を用いたときに得られる発酵生成物の保湿効果は特に優れたものであった。なお、製造例２で得られたアロエ発酵生成物について同様の試験を実施した結果、特にＪＣＭ １５５８およびＡＴＣＣ １４９１７を用いるときに得られる発酵生成物が優れた保湿性を示した。更に、この発酵生成物の「べたつき」、「皮膚刺激性」はまったく感じられず、また、いずれの乳酸菌を用いて発酵した生成物にも発酵臭はほとんど無く、アロエ特有の青臭さも消失していた。
【００３１】
試 験 例 ２
キダチアロエ発酵生成物の保湿効果：
温度２４℃、湿度４５％ の環境を維持した測定室において、女性パネラー１０名の前腕内側皮膚に上記製造例４で得られた各種アロエ発酵生成物を１０μｌ/ｃｍ２塗布し、皮膚角質層の水分含有量の経時的変化をコンダクタンスメータ（ＩＢＳ社製ＳＫＩＣＯＮ−２００）にて測定した。得られた結果は試験例１と同様に算出されたコンダクタンス上昇率で表した。得られた結果を表４に示す。
【００３２】
【表４】
表４に示したとおり、キダチアロエ発酵生成物は未発酵のアロエ抽出物に比較して優れた皮膚角質層の水分保持機能を有しており、保湿剤として有用であることがわかった。また、乳酸菌として、ＪＣＭ １１０９６を用いたときに得られる発酵生成物の保湿効果は特に優れたものであった。更に、この発酵生成物の「べたつき」、「皮膚刺激性」はまったく感じられず、また、いずれの乳酸菌を用いて発酵した生成物にも発酵臭はほとんど無く、アロエ特有の青臭さも消失していた。
【００３４】
試 験 例 ３
アロエベラ発酵生成物の保湿効果（２）：
温度２４℃、湿度４５％ の環境を維持した測定室において、女性パネラー１０名の前腕内側皮膚に上記製造例５で得られた各種アロエ発酵生成物を１０μｌ/ｃｍ２塗布し、皮膚角質層の水分含有量の経時的変化をコンダクタンスメータ（ＩＢＳ社製ＳＫＩＣＯＮ−２００）にて測定した。得られた結果は試験例１と同様に算出されたコンダクタンス上昇率で表した。得られた結果を表５に示す。
【００３５】
【表５】
表５に示したとおり、ｐＨ調製をしたアロエベラ発酵生成物は未調整のアロエベラ発酵生成物と同等かそれ以上の保湿効果を有していた。また、ｐＨ調製したアロエベラ抽出液も未発酵のアロエ抽出物に比較して優れた皮膚角質層の水分保持機能を有しており、保湿剤として有用であることがわかった。また、乳酸菌として、ＡＴＣＣ １４９１７を用いたときに得られる発酵生成物の保湿効果は特に優れたものであった。更に、この発酵生成物の「べたつき」、「皮膚刺激性」はまったく感じられず、また、いずれの乳酸菌を用いて発酵した生成物にも発酵臭はほとんど無く、アロエ特有の青臭さも消失していた。
【００３７】
試 験 例 ４
アロエベラ発酵生成物を含有する化粧料の保湿効果：
アロエベラにラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）ＡＴＣＣ １４９１７株を製造例３と同様の方法で作用させて得られた発酵生成物(実施品８９)と、これにヒアルロン酸（ＨＡ）を０.０６％ 配合した化粧料を調製した(実施品９０）。次いで、これらを１０μｌ/ｃｍ２で皮膚に塗布し、そのときのコンダクタンス上昇率の経時的変化を調べた。なお、実施品９０と同量になるよう調製したＨＡを比較例４とした。得られた結果を表６に示す。
【００３８】
【表６】
表６よりアロエに乳酸菌を作用させて得られた発酵生成物にヒアルロン酸を配合した化粧料は、発酵生成物単独のものよりも優れた保湿効果が得られることがわかった。
【００４０】
実 施 例 １
化粧水：
下記組成の化粧水を製造した。
＜ 製 法 ＞
（７）に（３）を分散し、これに（１）、（２）、（４）、（５）及び（６）を加えて十分撹拌することにより化粧水を得た。なお、アロエ発酵生成物としては、製造例２〜４で得られた実施品２、実施品１８、実施品２０、実施品３５、実施品６６、実施品６７、実施品７６、実施品７７、実施品８０を使用した。
【００４２】
実 施 例 ２
乳液：
下記組成の乳液を製造した。
＜ 製 法 ＞
（10）に（７）及び（８）を加え、これに８０℃で（１）〜（６）を加えて乳化し、その（９）を加えて室温まで冷却して乳液を得た。なお、アロエ発酵生成物としては、製造例２〜４で得られた実施品３、実施品５、実施品３３、実施品３４、実施品６０、実施品６１、実施品８６、実施品８７、実施品８８を使用した。
【００４４】
実 施 例 ３
クリーム：
下記組成のクリームを製造した。
＜ 製 法 ＞
（13）に（10）及び（11）を加え、これに（９）を分散せしめて分散液を得る。次いでこれを８０℃で（１）〜（８）を加えて乳化し、その後（12）を加えて室温まで冷却してクリームを得た。なお、アロエ発酵生成物としては、製造例２〜４で得られた実施品４、実施品２０、実施品３６、実施品４３、実施品４４、実施品６０、実施品７３、実施品７８、実施品８５を使用した。
【００４６】
【発明の効果】
本発明のアロエを乳酸菌に作用させて得られる発酵生成物はヒト皮膚角質層の水分保持能に優れ、保湿剤として有用である。また、このものはアロエの青臭さがほとんど消失しており、発酵臭も少ない。さらに、アロエの発酵の際に実質的に糖類を添加していないので、保湿剤によく見られるべたつき感もまったくなく、これを配合すれば優れた保湿作用と良好な使用感を有する化粧料が得られる。
以 上
Claims (11)
- 実質的に糖類を添加しない環境下でアロエに乳酸菌の一種又は二種以上を作用させて得られる発酵生成物を有効成分とする保湿剤。
- 乳酸菌が、ラクトバチルス属、ラクトコッカス属、ロイコノストック属、ペディオコッカス属、エンテロコッカス属及びワイセラ属からなる群から選ばれる乳酸菌の一種又は二種以上である請求項第１項記載の保湿剤。
- 乳酸菌が、植物由来乳酸菌である請求項第１項記載の保湿剤。
- アロエに乳酸菌の一種又は二種以上を作用させる前に、繊維質分解酵素、タンパク分解酵素及びデンプン分解酵素から選ばれる１種または２種以上を用いた酵素処理を行うものである請求項第１項ないし第３項の何れかの項記載の保湿剤。
- 請求項第１項ないし第４項の何れかの項記載の保湿剤を含有する化粧料。
- 実質的に糖類を添加しない環境下で、アロエに乳酸菌の一種又は二種以上を作用させ発酵生成物を得、次いでこれを有効成分として配合することを特徴とする保湿剤の製造方法。
- 乳酸菌が、ラクトバチルス属、ラクトコッカス属、ロイコノストック属、ペディオコッカス属、エンテロコッカス属及びワイセラ属からなる群から選ばれる乳酸菌の一種又は二種以上である請求項第６項記載の保湿剤の製造方法。
- 乳酸菌が、植物由来乳酸菌である請求項第７項記載の保湿剤の製造方法。
- アロエに乳酸菌の一種又は二種以上を作用させる前に、繊維質分解酵素、タンパク分解酵素及びデンプン分解酵素から選ばれる１種または２種以上を用いた酵素処理を行うものである請求項第６項ないし第８項の何れかの項記載の保湿剤の製造方法。
- アロエとしてＢｒｉｘ０ . ５〜４ . ０に調整されたアロエの抽出物を用いるものである請求項第６項ないし第９項の何れかの項記載の保湿剤の製造方法。
- アロエに乳酸菌の一種又は二種以上を３０〜４０℃の温度で６〜９６時間作用させるものである請求項第６項ないし第１０項の何れかの項記載の保湿剤の製造方法。
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