JP3601834B2 - Maldi分析の方法および装置 - Google Patents
Maldi分析の方法および装置 Download PDFInfo
- Publication number
- JP3601834B2 JP3601834B2 JP51475098A JP51475098A JP3601834B2 JP 3601834 B2 JP3601834 B2 JP 3601834B2 JP 51475098 A JP51475098 A JP 51475098A JP 51475098 A JP51475098 A JP 51475098A JP 3601834 B2 JP3601834 B2 JP 3601834B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sample
- pin
- nucleic acid
- analyte
- desorbed
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Classifications
-
- H—ELECTRICITY
- H01—ELECTRIC ELEMENTS
- H01J—ELECTRIC DISCHARGE TUBES OR DISCHARGE LAMPS
- H01J49/00—Particle spectrometers or separator tubes
- H01J49/02—Details
- H01J49/10—Ion sources; Ion guns
- H01J49/16—Ion sources; Ion guns using surface ionisation, e.g. field-, thermionic- or photo-emission
- H01J49/161—Ion sources; Ion guns using surface ionisation, e.g. field-, thermionic- or photo-emission using photoionisation, e.g. by laser
- H01J49/164—Laser desorption/ionisation, e.g. matrix-assisted laser desorption/ionisation [MALDI]
-
- H—ELECTRICITY
- H01—ELECTRIC ELEMENTS
- H01J—ELECTRIC DISCHARGE TUBES OR DISCHARGE LAMPS
- H01J49/00—Particle spectrometers or separator tubes
- H01J49/02—Details
- H01J49/04—Arrangements for introducing or extracting samples to be analysed, e.g. vacuum locks; Arrangements for external adjustment of electron- or ion-optical components
- H01J49/0409—Sample holders or containers
- H01J49/0418—Sample holders or containers for laser desorption, e.g. matrix-assisted laser desorption/ionisation [MALDI] plates or surface enhanced laser desorption/ionisation [SELDI] plates
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
- B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
- B01J2219/00277—Apparatus
- B01J2219/00351—Means for dispensing and evacuation of reagents
- B01J2219/00387—Applications using probes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C40—COMBINATORIAL TECHNOLOGY
- C40B—COMBINATORIAL CHEMISTRY; LIBRARIES, e.g. CHEMICAL LIBRARIES
- C40B60/00—Apparatus specially adapted for use in combinatorial chemistry or with libraries
- C40B60/14—Apparatus specially adapted for use in combinatorial chemistry or with libraries for creating libraries
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Plasma & Fusion (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Electron Tubes For Measurement (AREA)
- Analysing Materials By The Use Of Radiation (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Description
本発明は、マトリックス支援レーザ脱離/イオン化質量分光分析(MALDI−MS)に関する。KarasおよびHillenkampが1988年に紹介したこの方法は、バイオポリマーや、ペプチド、タンパク質、DNA断片などの物質の質量を求める方法として確立された。この方法では、分析すべき物質を通常、マトリックス材料の溶液に入れ支持体上に被覆する。溶質が蒸発し、個体マトリックス状のアナライト(analyte)が残る。次いで、このアナライトを照射し、アナライト分子または合成ポリマーを脱離させる。この脱離プロセスは質量分光計または分離および検出用の同様な計器に対して特に、焦げや分断を起こさず、あるいは薬品による劣化を生じさせずに大きな生物分子を放出するのに有用である。
一般的なMALDI質量分析の構成では、サンプルを金属基板上に置き、イオンアナライザに対向する側から放出する(「頂部照射」)。この構成に対して、サンプルの背面を透明な基板を通じて、たとえば焦点を合されたレーザ光線によって照射する透過照射も可能である。どちらの場合も、ニコチン酸、安息香酸、ケイ皮酸など比較的低い分子量の芳香有機物質からなるマトリックスが、分析すべきある量のペプチド、タンパク質、またはその他の物質を保持し、高強度のレーザ光線を放射され、サンプルの表面からアナライトを脱離させる。代表的な質量分析構成では、アナライトのイオンが電界加速を受け、タイムオブフライト(TOF)質量分光計などの計器で質量分離される。レーザ放射としては、マトリックスがレーザ波長で強力に材料を吸収し、外面に吐出プルーム(plume)を与えるのに十分な速さで材料を脱離させるような放射が選択される。しかし、レーザ波長はアナライトの結合を破壊しないほど長く、脱離プロセスでは熱が使用されず、したがって大きな分子がほとんど変化なしに分析計に与えられる。比較的軽いマトリックス材料から大きな分子を脱離させ、あるいは吐出するメカニズムは極めて一般的なものであり、これによって質量が数十キロダルトン(kilo Dalton)または数百キロダルトンであるアナライトを検出することができる。様々なマトリックス材料から脱離させるある種の物質を調製する様々な技法によってこの技法の有用性が拡張されている。
従来型の計器において、標準構成では、照射と質量分析が共にサンプルの同じ側から行われる。このため、大きな分子イオンの収量が比較的高く、質量分解能が良好になる。直径50マイクロメートルないし1000マイクロメートルの照射スポットサイズが106〜107W/cm2の範囲の照射レベルと共に使用され、基本的に少量のサンプルが吐出され、分析のために材料の短く高速のプルームが与えられている。そのような計器を使用する有機大分子スペクトルに関する多数の文献が発表されている。それにもかかわらず、いくつかの高電圧電極を有する真空フライトチャンバ内にイオン抽出加速光学系を設け、材料を分析検出器へ加速するという構成要件のために、レーザ照射光線の光路が制約されており、そのため、計器は比較的コストが高く融通性に欠ける。さらに、初期イオン源として比較的高エネルギーのプルームを与えると、イオンの初期バーストの速度および空間位置の広がりが生じ、イオンがまた、プルームの空間的広がりのために異なる電界を受け、したがって、計器によるアナライトの収量は良好であるが、質量分解能は低下する。一般に、マトリックス分子は内部基準ピークを与える。しかし、アナライトは多くの場合、マトリックス分子よりも質量が何倍も大きく、脱離のメカニズムが完全には解明されていないので、得られるスペクトルには、質量測定の精度と独立に生成されるスペクトルとの将来の比較とを困難にする、最初のプルーム形状または放出ダイナミクスのために生じる認識されないシフトやその他のアーチファクト(artifact)が含まれる可能性もある。
様々な研究者が、それぞれの異なる材料および一つまたは複数のマトリックス組成の透過MALDIを開発しており、いくつかの条件の下で、より一般的な頂部照射を使用して蓄積された結果と同様な結果を得ることに成功している。一般に、照射と質量分析計器をマトリックスのそれぞれの対向側に分離することによって、より自由ないくつかの異なる計器設計を実施することができる。特に、特定のスポットまたはサンプル位置を選択的に分析できるようにする走査構成を実施することができる。さらに、画定された表面からイオンを脱離させることができれば、より鮮鋭なスペクトルを生成することができる。しかし、頂部照射構成から透過照射構成に切り換える際、脱離技法の基本となるいくつかの基本的なプロセスの性質を変更する必要がある。したがってたとえば、プルームの形状、放出時の分子またはイオンの速度または方向、放出の基本的なメカニズムまたは収量はすべて、照射/脱離構成の変化の影響を受ける恐れがある。透過照射を使用した実験は比較的少なく、これらは一般に、頂部照射よりもスペクトルの質が低く、限られた範囲の比較的軽いアナライト分子でしか行われていない。
材料が脱離する基本メカニズムは完全には解明されておらず、その効果は材料に応じて変わる。一般に、測定を行うときは、適切な電界または磁界、あるいはその両方を設定し、あるいはその他の方法でサンプル窓を画定することによって分析器を調整し、次いでマトリックスを照射し、分光計が脱離したイオンの検出を開始するまでフルエンスを漸次高めていく。その場合、一般に、フルエンスをいくらか高め、脱離した材料中に存在する重いアナライトの量を増加させることができるが、材料の焦げや分断を導入するほど増加させてはならない。一般に、照射フルエンスを高めると、放出される材料の量が増加する。しかし、前述のように、質量分解能は最初は制限され、初期速度の増大する広がりや、放出プルームの不規則な形状や、その他の要因の影響を受ける。
したがって、結果的に得られるスペクトルが、同様な化合物の頂部照射で得られるMALDIスペクトルと同じであり、あるいはそのようなMALDIスペクトルと相関付けられる透過MALDI方法または装置を提供することが望ましい。
また、分析サンプルを脱離させる新しいMALDIステージまたはメカニズムを提供することが望ましい。
また、ピークが改良され質量分解能が向上したMALDI分光プロセスを提供することが望ましい。
発明の要約
一つまたは複数の上記の望ましい目的は、分光分析システムに定義された瞬間に低平均速度または零平均速度を有するアナライトイオンを注入するようにマトリックス支援レーザ脱離分析を行うことにより、本発明によって達成される。一実施形態では、カバー、バッフル、またはコンパートメントを有するマトリックスまたはサンプルホルダへレーザ光が送られる。レーザはマトリックスの、好ましくは比較的大きなスポットを、106W/cm2の範囲のフルエンスで照射し、アナライトおよびマトリックス材料を脱離させ、プルームとして放出させる。バッフルあるいはコンパートメントはプルームを妨害しあるいは閉じ込め、比較的高密度のアナライトとマトリックスとを含む領域を瞬間的に画定する。アナライトは、マトリックスよりも分子量が数十倍ないし数千倍高く、衝突を受けて低平均速度または零平均速度を達成する。したがって、「熱平衡化された」アナライトイオンはバッフル領域から移され、従来型の質量分析を受ける。
本発明を実施するうえで有用なステージの好ましい実施形態では、レーザ照射は、ガスレーザ、ハイブリッド周波数多重化レーザ構成、高出力レーザダイオードアレイ、またはダイオード励起された源から入力端で照射を受けることができる光ファイバの出力端から与えられる。光ファイバの端部は、サンプルが配置された薄い透明プレートに突き合わされ、サンプルは、真空加速チャンバ内のファイバに対向するプレートの側に配置される。好ましくは、機械的ステージがプレートをx平面内方向とy平面内方向の両方へ移動し、サンプル、または放射を受ける所与のサンプル上の点を選択する。光ファイバ照射器を使用すると、ステージアセンブリ全体をほぼ従来型の計器ステージの寸法内に包含することができ、しかも明確に定義された強度と高い一様性とを有する頑丈で正確な照射源が構成される。その場合、照射源からの射出がサンプルを照射し、質量分析器アセンブリに対向するプレートの表面でアナライトを脱離させる。本発明の一態様によれば、プルームは、その極めて指向性の高い運動量がランダム化または「熱平衡化」されるように部分的に閉じ込められる。熱平衡化後、プルーム環境は低速イオンを含み、このイオンは分析器内で加速され、各特性電荷/質量成分が、分光検出ができるように明確に画定された間隔に分離される。
他の実施形態では、照射ファイバの端部にある領域を囲む小形のフェルール(ferrule)または毛細管状チューブエンクロージャで熱平衡化領域が画定される。マトリックスはチューブの円筒形内壁に沿って配設され、発散ファイバ出力によってマトリックスが照射される。このチューブは、脱離した材料が最初に吐出される出口への移動経路としての短いトンネルを備えると共に、脱離したアナライトを熱平衡化するための斜めの経路を備える。他の実施形態では、小形の差掛カバープレートまたはオーバハングカバープレートまたはせん孔カバープレートの形状を有するマイクロストラクチャが、放出されたアナライトを熱平衡化させるための滞留時間を延ばす閉じ込め、あるいは衝突相互作用を与える。そのような閉込めマイクロストラクチャは、結晶化プロセスを特にこのような構造を得るように制御する場合にはサンプル結晶と基板の表面とで形成することもできる。
この構造は、レーザ照射がプルームを形成し、そのプルームがコンパートメントに充満する二段放出構成を含むことができる。このコンパートメントは、照射プルームから移動した熱平衡化済みイオンが放出される際に通過する開口部を一枚の壁に有する。この二段構造では、照射と出口との間の距離が、大きな分子を熱平衡化できるほど長いが、TOFピーク幅を広げない短い時間間隔でアナライトイオンを放出させることができるほど短い距離にされる。
【図面の簡単な説明】
本発明のこれらおよびその他の特徴は、本明細書の方法の代表的な実施形態の説明とその方法を実施するための例示的な装置の開示を、図面と共に検討することによって理解されよう。
第1図は、従来技術のMALDI分析技法を示す図である。
第2図は、本発明によるMALDI分析のステップを示す図である。
第3A図は、透過MALDI分析のためのサンプル取付装置用の本発明による装置の基本実施形態を示す図である。
第3B図は、透過MALDI分析のための異なるサンプル取付装置用の本発明による装置の基本実施形態を示す図である。
第4A図は、第3A図の実施形態の動作段を示す図である。
第4B図は、第3B図の実施形態の動作段を示す図である。
第5A図は、第2の実施形態およびその動作を示す図である。
第5B図は、第2の実施形態およびその動作を示す図である。
第6A図は、頂部照射に関する第3の実施形態およびその動作を示す図である。
第6B図は、頂部照射に関する第3の実施形態およびその動作を示す図である。
第7図は、実験的なMALDI構成を示す図である。
第7A図は、実験的なMALDI構成を示す図である。
第8A図は、本発明を実施するための好ましいステージを示す図である。
第8B図は、本発明を実施するための好ましいステージを示す図である。
第9A図は、本発明の第4の実施形態を示す図である。
第9B図は、本発明の第4の実施形態を示す図である。
第10図は、ピンツール装置を概略的に示す図である。
第11図は、様々なピン形態を示す図である。
第11aは、真っ直ぐなヘッドを有する固体ピンを示し、第11bは、凹状ヘッドを有する固体ピンを示し、第11cは、角錐台状ヘッドを有する固体ピンを示し、第11dは、凹状ヘッドと(光ファイバを挿入するための)中空中央部とを有するピンを示し、第11eは、角錐台状ヘッドと中空中央部とを有するピンを示す。
第12A図は、取付装置を概略的に表す図である。
第12B図は、ピンツール装置を概略的に表す図である。
第12C図は、設置された取付装置およびツールの断面図である。
第13図は、第9A図ないし第9E図に示したピンツールの質量分光構成の概略図である。
第14図は、電圧が印加されるピンツールを概略的に示す図である。電界を印加すると、陽極に核酸が引き付けられる。このシステムはまた、荷電されない分子が溶液中に残り、それに対して正に荷電された分子が陰極の方に引き付けられるので、核酸を浄化する。
第15図は、ポストバイオロジー取り込みを使用した質量分光による配列決定で使用されるステップのフローチャートである。
詳細な説明
第1図は、分子量がたとえば500ダルトンないし100000ダルトン以上の範囲である大分子化合物などの試料のマトリックス支援レーザ脱離およびイオン化用の代表的な従来技術の構成を示す。図のように、金属箔シートやガラススライドなどの基板3は、その表面上のある領域にサンプル2を保持する。前述のように、サンプル2は一般に、少量の大分子アナライトを含む分子量の比較的低いレーザ吸収材料の溶液として堆積され、このサンプルをそのまま乾燥させ、たとえば粒状結晶層または連続結晶層からなる薄い固体材料層を形成させる。特殊なケースでは、グリセリンなど、真空で安定な溶剤を使用する。サンプル2は次いで、基板3上に薄い液体層または滴を形成する。レーザ光線1をサンプル2に当て、サンプルから材料のプルーム4を脱離させる。一般に、マトリックス材料としては、低分子量化合物、たとえば紫外線(UV)波長で脱離する芳香族化合物が選択され、レーザは、マトリックス材料を励起しマトリックス材料によって強く吸収される波長として選択された波長を有する。その場合、サンプルを照射すると、サンプルから材料が脱離し、この図に示したように照射部位から膨張するプルーム4が形成される。大分子脱離のメカニズムは完全には解明されていないが、「熱」蒸発とは明らかに異なり、非常に高速の事象である。したがって、アナライトは、薬品による劣化を広範囲に生じさせずに周りの真空チャンバに進入する。しかし、さらに第1図に示したように、脱離した材料は非常に指向性が高く、図でベクトルV1で示した表面に垂直な方向に、大きな速度成分を有する。プルーム膨張速度は通常、毎秒500mないし1000m程度である。
典型的な分析プロセスでは、プルーム4中の脱離材料は、加速と質量依存透過を行う扇形走査分光計や四重走査分光計などの質量分光計、またはタイムオブフライト(TOF)質量分析器に与えられる。一般に、プルーム中のサンプルが比較的少量であるため、収集効率が非常に低く、感度が不十分であり、扇形走査計器を設定するのは困難であるので、タイムオブフライト計器が好ましい。
タイムオブフライト計器では、プルームの性質、プルーム生成段の構成、周囲の電極、電界強度に関するある仮定に基づいて分子の移動の動力学が大ざっぱにモデル化されている。そのようなモデルを設定すると、質量分解能m/mは、初期速度広がりについて式を簡単にするためのいくつかの仮定を設けると、電極間隔に対する初期速度広がりおよびプルーム範囲に応じて変動する項を含む項の和の大きさとして近似することができる。基本的に、初期速度(エネルギー)広がり、プルーム範囲によって分子がそれぞれの異なる電界条件を受ける程度、イオンが脱離加速構成において衝突を受けあるいはターンアラウンド時間を経験する程度はすべて、検出器への到着時間のピークに広がりを導入する。
これらの問題は、第2図に記載したサンプルをレーザ脱離させイオン化させる方法により、本発明の基本的な態様によって対処される。一般に、サンプルは、従来技術とほぼ同様に、測定すべきアナライト材料を含む固体マトリックスからなり、レーザによって照射される支持体上に堆積される。第2図に記載したように、第1のステップとして、サンプルを照射し、サンプルから材料を脱離させる。一般に、照射ステップは、継続時間が0.5ナノ秒ないし200ナノ秒であり、直径が約10マイクロメートルないし数百マイクロメートルの照射スポットに当てられ、放射照度が106W/cm2以上の範囲であるレーザ放射の短いパルスによって行われ、脱離しイオン化した材料のプルームが形成される。上記で指摘したように、この脱離材料は最初、物理的なレーザ誘導脱離プロセスによって加えられた指向性運動量を有する。本発明によれば、第2ステップでは、この脱離材料が、分光分離を受ける前に内部衝突および周囲との衝突を受けることにより、指向性運動量が少なくとも部分的に熱平衡化され、すなわち方向に関してランダム化され、その全体的な大きさが低減される期間にわたって閉じ込められる。プルーム自体の寸法が小さく、閉込めが、たとえば、プルーム内のアナライト分子が周囲の壁または障害物との少なくとも一回の衝突を受けるような壁間隔を含む、対応する規模のものであることが理解されよう。本発明では、初期領域で低電界強度を与え、加速前にプルームの初期部位付近での滞留時間を延長させる二段イオン抽出を使用して熱平衡化を行うことが意図される。
一般に、本発明は透過照射構成でも、あるいは頂部照射構成でも実施することができる。ただし、基板に対して実際の閉込め構造および加速構造を位置決めする場合にはいくつかの異なる因子を考慮しなければならない。下記で、特にタイムオブフライト質量分析計器を参照して、本発明の代表的な物理的実施形態について説明する。しかし、概略的な説明から明らかなように、本発明はイオントラップや、イオンサイクロトロン共鳴フーリエ変換質量分光計や、低圧でイオンを検出しあるいは特徴付けるために使用されるその他の計器など、他の様々な分析計器用のサンプル入力として使用したときにも、うまく働き性能を顕著に向上させる。
第3A図および第3B図は本発明の基本的な実施形態を示し、図中の要素は、第1図において対応する符合を有する要素に対応する。第3A図に示したように、たとえば、直径が140マイクロメートルまたは200マイクロメートルのコアを有する光ファイバ10を、アナライトを含むマトリックスで構成されたサンプル2が堆積された透明基板3の一面に突き合わせる。この場合、乾燥したマトリックスが示されている。ファイバ10はその発散出力ビーム1を用いてサンプル2を照射し、脱離した材料のプルーム4をサンプルから発散させる。さらに第3A図に示したように、閉込め構造20は、その壁に一つまたは複数の出口穴22を有するコンパートメント21をプルーム4の周りに形成する。コンパートメント21の寸法は、照射スポットの寸法に匹敵する寸法で、たとえば10マイクロメートルないし500マイクロメートルであり、プルーム4の範囲と同程度の大きさでよく、したがってプルームは数百ナノ秒以内に膨張しコンパートメントに充満する。
第3A図および第3B図に示した構成は共に、レーザ光が、イオン抽出方向とは逆の方向からサンプルを照射するという点で透過照射構成である。第3A図の構成では、ファイバが底面、すなわち基板に対向する側からサンプルを照射するように、透明基板上に直接サンプルが置かれる。その結果、材料はサンプルの底面から脱離する。サンプル2はたとえば、基板上の厚さが数マイクロメートルの層としての微結晶からなり、プルーム4は主として、結晶の底面(基板に対向する側)から脱離し、向きを変えた後に、突出するプルームの本体を形成する材料からなる。
第3B図は、反射MALDIに関するこの実施形態の対応する構成を示す。この実施形態では、ファイバと分析チャンバを分離する基板3上にはサンプル2は堆積されず、エンクロージャの壁20上に堆積される。その場合、ファイバ10は、基板を通じ、コンパートメントを構成する小さなギャップを介して、遠い側のサンプルへビームを放射する。どちらの場合でも、プルーム4は、コンパートメント化された空間21へ膨張する。
第4A図および第4B図は、経時的なプルームのその後の変化を示す。前述のように、プルーム4中の分子の速度は最初、毎秒数百メートル以上程度である。第4A図に示したように、プルーム4はコンパートメント21に充満し、一般にマトリックス分子間の内部衝突およびマトリックス分子とアナライト分子との間の内部衝突と、試料ホルダの壁20との内部衝突を受ける。このため、分子の移動方向がランダム化され、三つの直交並進モードを超えた様々な自由度を有する分子、通常はタンパク質および大形有機分子の場合、エネルギーを内部で区画し、適切に動作するマックスウェル分布によって平均速度を大幅に低下させることもできる。第4A図に示したように、分子は、比較的短い拡散時間の後に出口穴22に達する。第4B図は、抽出電界Eextの印加時に穴から加速されているプルーム材料を示す。したがって、穴22は、少なくとも部分的にランダム化され、好ましくはマックスウェル分布および低平均速度によって完全にランダム化された速度で、所定の寸法の離散開口部を通じてサンプルを与える。この所定の初期条件によって、より鮮鋭に画定されたピークとより少ない広がりとを有する飛行時間スペクトルが得られ、そのため、従来型の計器よりも数倍高いだけでなく質量から独立した計算された質量分解能が得られ、高分子量でのスペクトル画定が大幅に向上する。
第5A図および第5B図は、新規の構成の単一の本体で第1の実施形態の基板およびコンパートメントを置き換えた本発明の第2の実施形態30を示す。この場合、たとえば、分光加速のための一様な電界平坦化導電開始平面を構成する働きをする導電ハウジングまたはジャケット9によって高アスペクト毛細管32が保持される。毛細管の内壁上にサンプル2を付着させる。毛細管はファイバ10の端部を囲み、したがって、ファイバ端部から発散した出力ビームは、サンプル2を照射し、材料のプルームを毛細管の側面から中央ルーメン(lumen)33へ吐出させる。この場合、サンプル2を毛細管の内側の周りのバンドとして被覆した場合、結果的に得られるプルームは自己干渉し、すなわち非常に指向性の強い脱離プルームが半径方向内側へ進み、壁のそれぞれの異なる部分からの材料が他の部分からのプルーム材料と衝突し、そのため小さな毛管体積33内の衝突発生率が高くなる。さらに第5B図に示したように、抽出電界によって、熱平衡化された材料35のサンプルは、毛管軸を横切る方向に沿って分析計器内へ加速される。
第5A図に示した閉込め構成を頂部照射構成で使用することもできる。その場合、ファイバ10から現れたレーザ光線は好ましくは、前面(すなわち、質量分析器に対向する側)から閉込め構成に進入する焦点を合されたレーザ光線または直径の小さなレーザ光線で置き換えられる。
前述の例から明らかなように、プルームの閉込め構成が完全なエンクロージャである必要はなく、好ましくは、たとえば分子移動方向を変化させ、したがって脱離材料の分子間の衝突によって非常に指向性の強い運動量をより迅速に低減することのできる物理的閉込め構造の壁との少なくとも一回の衝突を含む、脱離材料の衝突相互作用を確保する構成を含むだけでよい。
第6A図および第6B図は、この場合は頂面(すなわち、イオン抽出側)照射向けに構成された他の閉込め構成を示す。前述のように、符合1、2、3、4はそれぞれ、レーザ照射光線と、サンプルと、サンプルを保持する基板と、脱離によってサンプルから放出されたプルームを指定する。この実施形態では、構造40は、プルーム4の放出経路を横切るバリアまたはオーバハング42を備える。オーバハング42はたとえば、支持体またはポスト41によって保持された棚またはキャップからなる。オーバハング42は完全にサンプル2を覆うわけではなく、差掛のように延び、開放セクタ43によって、サンプル上の小さなスポットに焦点を合されたレーザ光線1の斜め照射が可能である。第6B図に示したように、プルームは次いで、差掛の下方で熱平衡化され、セクタ43を通じて加速され、分析計器に低速イオンを与える。分析計器は、低速イオンを捕捉し、あるいはその点から外側へ加速する。
第3図ないし第6図に示した例などプルーム熱平衡化に関するすべての実施形態で、イオン抽出は、プルーム閉込め構造と質量分析器との間の空間中の適切な電極またはメッシュ、あるいはその両方によって生成されるいくつかの遅延電界および加速電界を実施することによって行うことができる。閉込めに対する電位Uでのそのような一つのメッシュ80が一例として第3A図に描かれている。遅延電極または抽出電極のすべての電位は、時間変調、たとえば時間遅延することができる。
前述の構成は、キャップや、カバーや、エンクロージャなどの外部構造が熱平衡化容器を構成する物理的バリアを示しているが、本発明ではさらに、マトリックス自体によって部分的に実施されるより多くの開放構造によって閉込めを行うことが意図される。第7図、第7A図、第7B図は、マトリックス材料の微結晶層から与えられる部分的熱平衡化条件のために透過モード照射構成で熱平衡化が行われることが観測された実験的構成を示す。この装置50では、サンプルを頂部照射できるように第1のファイバF1を照射し、あるいはサンプルの背面から透過照射を行えるように第2のファイバF2を照射するようにレーザ源を構成した。サンプルを基板3上に保持し、端面が厳密に質量分析器の軸上に位置決めされたステージによってファイバF2を保持した。生成されたレーザ光線は、ステージ担体によって制御されるサンプル上の選択された位置に当てられる。第7A図で最も良く分かるように、サンプル2は、分析チャンバに対向する基板の表面上に堆積された数マイクロメートルないし数百マイクロメートルの範囲の最大寸法を有する比較的薄い微結晶層からなっていた。この場合、プルームのかなりの部分が、結晶の背面、すなわち基板およびファイバに対向する結晶面から、5マイクロメートル以下のギャップを介して放出され、したがって放出された材料が迅速に基板に衝突し、向きを変えてプルーム材料と相互作用し、部分的に熱平衡化された状態のこの脱離材料が分析計器に到着することが判明した。微結晶はランダム構成として配置され、その背面は、全体的な脱離運動量が最初は、頂部照射構成の場合よりも指向性が弱く、分子同士が衝突し脱離プルーム材料の束に変化するにつれて迅速にランダム化されていくように、可変斜め角度に配置される。
さらに第7A図に示したように、ステージ60は、放出加速構成を改良するために基板3の周りにほぼ平坦な電界を与える金属プレート61を含む。照射ファイバF2はこの平面電極のスロットを通過し、基板3に突き合わされる。ファイバは開口数が多く、サンプルにおいて所定の直径のほぼ均一なビーム形状を与えた。図の実施形態では、この突合せ結合構成がサンプル上で200マイクロメートルのスポットを構成するように141mファイバを使用した。第7B図に示したように、サンプルは、簡単なガラス製カバーシート上の微結晶と巨大結晶の典型的な乾燥堆積物からなっていた。より大きな結晶は寸法が約100mであり、それに対して残りの微結晶はずっと小さく、レーザの最初の作動によって完全に除去された。巨大結晶自体は、角度の組合せ時に基板面に対して自然に配向し、そのため、これらの面からほぼ垂直に入射して放出されるプルームは、迅速に基板に衝突し、基板から離れる方向が阻止され、再びプルーム材料に入り込み、迅速に熱平衡化を受けた。
図を飛ばして第9A図および第9B図を参照すると、閉込め、より正確には強化された衝突相互作用が、多孔性構造または透過構造から与えられる本発明の第4の実施形態70が示されている。この実施形態70では、サンプル2を基板3上に置き、適切なスペーサ72を用いてサンプルの上方に取り付けられた多孔性材料または繊維状材料71のシュラウド(shroud)またはシースで覆う。その場合、プルームの熱平衡化は、適切な電極から与えられる印加電界の有無にかかわらずに多孔性シースまたは繊維状シースを通じたイオンの抽出時に行われる。典型的な構成では、シース71は薄く、たとえば100m以下であり、スペーサ72がサンプルの厚さ程度の自由距離を与える。一例を挙げると、実験室用濾過紙と同様なパルプ・ベースの繊維状紙は、放出されたプルームを熱平衡化することが判明した。ただし、一般には、この層の材料としてはプルームに反応せず、またプルームを汚染しない材料が選択される。
第9A図に示した実施形態では、前述のように、ファイバ10によって透過構成の光透過性の基板3を通じてサンプルを照射する。第9B図に示した実施形態では、頂部照射構成の焦点を合されたコリメート光線1aによって光透過性または半透明の多孔性シースまたは繊維状シース71を通じてサンプルを照射する。繊維状シースまたは多孔性シース71の適切な材料にはガラス材料と、セラミック材料と、ポリマー材料とが含まれる。水などの液体の洗浄または浄化に使用されるポリマーまたは紙の微孔性膜のガラスフリットもシース71に適している。代替実施形態(図示せず)では、多孔性材料の底面、すなわち質量分析器から離れる方向に面する側に直接サンプルを置くことができる。この実施形態の他の変形形態では、サンプルを多孔性材料の光透過性シースまたは半透明シースに組み込み、シースの衝突強化多孔性構造内で直接脱離が行われるように本来の場所で照射する。
前述の例は、本発明の一連の実施態様を示すために様々な構造および本体を用いた熱平衡化を示しており、簡単な機械的要素を使用している。しかし、スクリーンや毛細管など既存の構造から熱平衡化プルーム段を作製する必要はない。局部熱平衡化環境への放出を行うようにサンプルを保持するまったく新しい構造を構想することも可能である。したがって、たとえば基板2は、サンプル2が被覆される計器対向表面に複数の細い針状突起または深いウェルを有するプレートからなる。この場合、レーザから与えられる照射1によって、ピンの側面またはウェルの壁から、周囲の壁または隣接するピンで画定された空間への脱離が行われる。その場合、初期プルーム速度は、基板の全体平面にほぼ平行なものであり、そのためプルームが閉じ込められ、衝突の発生率が高くなり、それに続いて、基板上に形成されたピンまたはウェルの端部で、熱平衡化されたプルーム材料がそれに垂直な平面を横切って放出される。そのようなピンまたはウェルは、既知のマイクロリソグラフィ技法によって適合材料を使用して微細構造として形成することができ、たとえば、さらにサンプルコーム(たとえば、ヘッジホグ(hedgehog)コームまたはマイクロタイタ(microtiter)プレートとして働くように構成することができ、その場合、事前準備プロセスの支持体はMALDI分析器の基板として働くことができる。他の新規のマイクロリソグラフィ的な構成を実施して、プルームを変調する有効な衝突空間を形成することは容易である。
本発明の好ましい実施形態は、ファイバが基板3上の選択されたx、y位置を照射しそこから材料を脱離することができるようにファイバ担体に関連して構成されたステージ12上に保持された基板3を用いて実施される。そのようなステージを第8A図および第8B図に示す。第8A図の斜視図に示したように、プレート11から突き出るファイバの端部をステージプレート12の開口部12a内に位置決めするための安全な機械的取付け装置を構成するプレート11に固定されたカラー10aにファイバ10を取り付ける。分析器に注入されるイオンの対称的な分散を決定するために、ファイバ端面を質量分析器の軸上の固定位置に厳密に心合わせする。ステージプレート12を、たとえば従来型のステージ取付け駆動装置およびステッパ駆動装置によって二次元移動できるように真空チャンバ内部に取り付け、基板3上のサンプル2の所望の位置を照射できるようにする。好ましくは、基板3はいくらか導電性で誘電性の薄い材料層を底面(ファイバに対向する側)に有する。この層は、ステージ12に電気的に接触し、したがってステージと同じ電位に荷電し、それによって基板3の放出表面で平坦な電界を与える。
他の態様では、本発明は、MALDI質量分光によってピンツールに含まれる核酸を直接分析することによる核酸配列決定プロセスを含む。好ましい実施形態では、最初に、サンプルから得られた核酸を増幅する。たとえば、ジデオキシヌクレオチド(d/ddNTP)または配列決定プライマを添加せずに「マスター」ミックスのPCR反応を実施することができる。次いで、共役手段を介してアリコートを分離し、たとえば配列決定プレートへ移し、次いでd/ddNTPおよびプライマを添加し、配列決定反応を実施することができる。別法として、PCRをAマスターミックスとCマスターミックスとGマスターミックスとTマスターミックスとの間で分割することができる。次いで、アリコートを配列決定プレートへ移し配列決定プライマを添加することができる。
たとえば、標準条件を使用したサイクル配列決定反応で0.4pmolないし0.5pmolのPCR生成物を使用し、それによって各PCRを十回の配列決定反応で使用することができる(10×A、C、G、T)。配列決定反応は、標準384マイクロウェルプレート中の5pmolないし6pmolの5'標識配列決定プライマを含む10μlの体積で実施することができ、そのため最大で96回の配列決定反応が可能である(反応当たり35塩基で3360塩基)。別法として、12×16フォーマットの約5cm×5cmの192マイクロウェルプレートを使用することができる。このフォーマットではウェル当たりに最大で48回の配列決定反応が可能である。その結果プレート当たり1680塩基(反応当たり35塩基)となる。配列決定プレートのフォーマットによって移送要素(たとえば、ピンツール)の寸法が決定される。
配列決定プレートのウェルに4×4アレイのピンツール(第10図)を取り付け、たとえば、ピンの先端に付着させた官能化ビーズ(≧1pmol容量)上に、配列決定生成物を取り込むことができる。取込み/インキュベーションステップ時に、ピンを運動させ続け(垂直、1mmないし2mm走行)配列決定反応を混合し、取込みの効率を高めることができる。
別法として、たとえば、第14図に示されるように電界を印加する場合に、核酸をピンツール上に直接取り込むことができる。ピンツールに電圧を印加すると、核酸は陽極の方へ引き付けられる。このシステムではまた、未荷電分子が溶液中に残り、正に荷電された分子が陰極に引き付けられるので、核酸が浄化される。具体的には、(電圧の有無にかかわらずに)一本鎖オリゴヌクレオチド(たとえば、長さ約5塩基対ないし12塩基対)を部分的または完全に含むようにピンツールを修正することができる。その場合、ピンに特異的に共役できるのは(たとえば、溶液中の)相補核酸シーケンスだけである。
他の実施形態では、ピンツールの先端にPCRプライマを共役させることができる。固相(ピンツール)結合プライマと溶液中のプライマを用いてPCRを実行することができ、その場合PCR生成物はピンツールに付着する。次いで、増幅生成物を含むピンツールを反応から除去し(たとえば、質量分光によって)分析することができる。
いくつかの異なるピン形態の例を第11図に示す。たとえば、第11a図、第11b図、第11c図は、中実ピン構成を示す。第11d図および第11e図は、たとえば質量分光計検出用の光ファイバを収容するための溝または穴が中心を通るピンを示す。このピンは、平坦な先端、またはナノウェル(nanowell)、凹、凸、円錐台、角錐台を含め、いくつかの構成のうちのどれか(たとえば、寸法は幅4μないし800μ×深さ100μ)を有することができる。好ましい実施形態では、個別のピンの長さは約5mmであり、直径は約1mmである。ピンおよび取付けプレートはポリスチレンで作製することができる(たとえば、ワンピース射出成形)。ポリスチレンは官能化するうえで理想的な材料であり、非常に高い公差を用いて成形することができる。ピンツール装置のピンは折りたたみ可能であり(たとえば、挟み状機構によって制御される)、したがってピン同士を近接させ、全体的な寸法を減少することができる。
質量分光による検出では、ピンツールを数回にわたって取り外し、たとえばクエン酸アンモニウムで洗浄し、マトリックスを添加する前にサンプルを調整しておくことができる。たとえば、ピンを単にマトリックス溶液に浸漬させることができる。次いで、マトリックス溶液がピンの先端のみに付着するようにマトリックスの濃度を調整することができる。別法として、ピンツールを反転し、マイクロドロップ装置によってマトリックス溶液を各ピンの先端に噴霧することができる。さらに、マトリックスを添加する前に、生成物をピンからたとえばチップ上のナノウェルに分割しておくことができる。
ピンから直接行う分析の場合、一方式(第12図)では、ピン上にステンレススチール「マスク」プローブを取り付け、次いで質量分光計に設置することができる。
ピンツール装置を収容する二つの分光計構成が第13図で提案されている。第1の構成は固体ピンを収容する。実際には、レーザは材料層を結晶の表面から除去し、その結果得られるイオンは、イオン光学系を通じて加速され焦点を合される。第2の構成は、サンプルが後方からレーザ照射される光ファイバピンを収容する。実際には、レーザはピンツール背面プレートおよび短い光ファイバ(直径は約100μm、長さは背面プレートの厚さを含めると約7mm)に焦点を合される。この構成では、蒸発したサンプルがマトリックス/ビーズミックスの深さを通過し、イオンを減速させかつ冷却し、それによってある種の遅延抽出を行う必要がある。この抽出によって、実際には分析の分解能が向上するはずである。
ピンが取り付けられるプローブは様々な構成のものでよい。たとえば、ピンツールの上方に取り付けられた、各ピンごとに一つの複数の穴を有する大形プローブでよい。アセンブリ全体は質量分光計のX軸−Y軸に並進させる。別法として、適切な電界を与えられるほど大きいが、ピン同士の間に整合するほど小さな単一の穴を有する固定プローブでもよい。次いでピンツールをすべての三つの軸において並進させ、ピンを順次分析できるように穴に導入する。このフォーマットは(すなわち標準384ウェルマイクロプレートフォーマットに基づく)より大きなピンツールにより適している。前述の二つのプローブは共に、前述の二つの分光計構成に適している。
第15図は、前述のポストバイオロジー取り込みによる質量分光配列決定で使用されるステップを概略的に示すものである。
本発明の基本的な実施形態と、本発明の改良されたレーザ脱離を実施するための代表的な構成についての説明を終わる。本発明を以上のように開示し説明したが、当業者には、他の変形形態および修正形態が思いつくであろう。すべてのそのような変形形態および修正形態は、添付の請求の範囲で定義される本発明の範囲内のものであるとみなされる。
Claims (48)
- アナライト材料のマトリックス支援レーザ脱離/イオン化を行うための改良された方法であって、
マトリックスおよびアナライトが支持体上にサンプルとして堆積される、大部分のマトリックス材料と小部分のアナライト材料とで構成された試料を調製するステップと、
アナライトを含む材料がサンプルの表面から脱離されイオン化されるように前記マトリックスを照射するステップと、
脱離運動量が衝突相互作用によって少なくとも部分的に方向に関してランダム化されるように、前記脱離した材料を初期的に閉じ込めておくステップと、
それによって、脱離したアナライトを調整し、分析の初期条件を制御するステップと
を含む方法。 - さらに、前記脱離材料を閉じ込めておく間に衝突バッファガスを与えるステップを含み、前記衝突バッファガスが、
i)衝突脱離と、
ii)化学イオン化と、
iii)アナライトとの分子間反応またはイオン分子間反応
のうちの少なくとも一つを推進する特性を有するガスから選択される、
請求の範囲第1項に記載の改良された方法。 - 照射ステップが、光ファイバから出力されたビームを用いて照射を行うステップを含む請求の範囲第1項に記載の方法。
- 照射ステップが、サンプル上のファイバ出力端部により像を造ることによって行われる請求の範囲第3項に記載の方法。
- 照射ステップが、サンプルを保持する光透過性基板の近くにファイバを置き基板を通して照射することによって直接行われる請求の範囲第3項に記載の方法。
- 閉込めステップが、バッフルを用いて閉込めることによって行われる請求の範囲第1項に記載の方法。
- 閉込めステップが、部分的に閉鎖されたコンパートメントに閉じ込めることによって行われる請求の範囲第1項に記載の方法。
- 閉込めステップが、前記脱離材料を多孔性材料層中を通過させることを含む請求の範囲第1項に記載の方法。
- 前記多孔性材料層がマトリックスである請求の範囲第8項に記載の方法。
- 閉込めステップが、前記試料を支持体上に透過床として付着させ、脱離した材料が支持体によって閉じ込められるように床の下側を照射することによって実行される請求の範囲第1項に記載の方法。
- 閉込めステップが、少なくとも一つの電位画定構造を用いて閉込めを行うことをさらに含み、前記電位画定構造が、前記イオンを衝突相互作用によって少なくとも部分的に方向に関してランダム化されるように選択された電圧を有する請求の範囲第1項に記載の方法。
- 前記材料が脱離した後に続く遅延の後にのみ、それにより、衝突を受けた一部の脱離材料の抽出またはサンプリングにのみに抽出電圧を印加する、請求の範囲第1項に記載の方法。
- マトリックス支援レーザ脱離イオン化材料をサンプリングする方法であって、マトリックスを照射し材料を脱離させるステップと、前記材料を、脱離材料を少なくとも部分的に熱平衡化するのに有効な透過バリア中を通過させ、それによって、前記材料を分析するための初期条件を制御するステップとを含む方法。
- 分析計器に材料のイオン化サンプルを与える装置であって、
前記サンプルを与える試料を保持するステージと、
試料を照射し、材料をサンプルから脱離させかつイオン化し、それによって、脱離した材料に指向性運動量を有させるためにステージに向けられた手段と、
前記材料中の大きな分子の速度が低下するように前記指向性運動量を少なくとも部分的に熱平衡化するのに十分な程度に前記脱離材料を閉じ込める手段であって、速度の低下した大きな分子を分析計器に与えるために分析計器と連通する出口を有する前記閉込め手段と
を備える装置。 - ステージに向けられた手段が、前記試料上の所定の領域を照射するために前記試料から離隔された光ファイバを含む請求の範囲第14項に記載の装置。
- 前記ステージおよび前記ファイバが、照射位置を過ぎた前記試料の所定の領域を選択的に走査し前記試料の一部をサンプリングするために相互に相対運動できるように取り付けられる請求の範囲第15項に記載の装置。
- 閉込め手段が、前記出口への経路を横切る多孔性材料を含む請求の範囲第14項に記載の装置。
- 閉込め手段が、脱離した材料を限られた領域に維持し、前記出口の前の衝突相互作用を強化する静電手段を含む請求の範囲第14項に記載の装置。
- ステージが、前記試料に隣接する平坦な電界を画定する導電領域を含む請求の範囲第14項に記載の装置。
- 前記支持ステージが、ステージの所定の領域内の基板上にサンプルを保持する手段を含み、かつ、前記ステージに向けられた前記手段が、光入力を受け取るために光源に結合するようになされた第1の端部と、サンプル上のスポット領域を照射するために前記ステージによりある位置に保持された第2の端部とを有する光ファイバとを備え、前記ステージが、出力ビームが基板を通過し、所定の寸法のスポットを含むサンプル上の前記スポット領域を、サンプルからアナライトを脱離させるのに有効なフルエンスで直接照射するように第2の端部を位置決めする、請求の範囲第14項に記載の装置。
- サンプルの別々のスポット領域のアレイを照射するように構成されたアレイ状の複数の光ファイバを備え、各ファイバが、それぞれの異なる時間にサンプルのそれぞれのスポット領域から材料を脱離させるように別々に作動させることができ、そのため、複数の脱離アナライトサンプルを、連続する瞬間に共通の質量分析器に与えることができる請求の範囲第20項に記載の装置。
- ステージが、基板をサンプルと共に、光ファイバの第二の端部に対して少なくとも二つの側面の次元において移動させて光をサンプル上の任意の位置に当て材料を脱離させるように動作する請求の範囲第20項に記載の装置。
- 前記アナライトが核酸であり、かつ閉込めが、核酸分子をピンツールのピン上に取りこむことによって実施される、請求の範囲第1項に記載の方法。
- 前記ピンが、チャンネルを含む、請求の範囲第23項に記載の方法。
- 前記ピンが、前記チャンネル内に光ファイバーを含む、請求の範囲第24に記載の方法。
- 前記ピンのチップの構成が、平坦、ナノウェル、凹、凸、円錐台、および角錐台からなる群より選択される、請求の範囲第23項に記載の方法。
- 前記核酸をピン上に取りこむステップが、
前記ピンと、前記核酸とを接触させるステップ、および
前記ピンに電界を印加し、それによって前記核酸を前記ピン上に取りこむステップ
を含む、請求の範囲第23項に記載の方法。 - 前記核酸をピン上に取りこむステップが、
前記ピンと、前記核酸とを接触させるステップ、および
前記核酸の一部に相補的なオリゴヌクレオチドに前記核酸をハイブリダイズさせるステップであって、ここで前記オリゴヌクレオチドが前記ピンに付着され、それによって前記核酸が前記ピン上に取りこまれるステップ
を含む、請求の範囲第23項に記載の方法。 - 前記核酸を前記ピン上に取りこむステップが、前記核酸を官能化ビーズに付着させるステップを含み、そして前記官能化ビーズは前記ピンに付着され、それによって前記核酸は前記ピン上に取りこまれる、請求の範囲第23項に記載の方法。
- 前記ピンとマトリックス材料とを接触させるステップをさらに含む、請求の範囲第23項に記載の方法。
- 前記核酸が、
前記核酸にプライマーをハイブリダイズさせるステップ、および
前記プライマーをデオキシ核酸の存在下で伸長させるステップ
を含む、プロセスによって増幅される、請求の範囲第23項に記載の方法。 - 前記ピンとプローブとを接触させるステップをさらに含む、請求の範囲第23項に記載の方法。
- 前記ピンが、前記プローブの溝を通して取りつけられる、請求の範囲第32項に記載の方法。
- 前記プローブが、1個の溝を含むか、または複数の溝を含む、請求の範囲第32項に記載の方法。
- 前記プローブが、前記ピンツール上のピンの数と等しい数の溝を含む、請求の範囲第34項に記載の方法。
- 前記核酸をピンツールのピン上に取りこむステップに先立ち、プライマー核酸をサンプル核酸にハイブリダイズさせ、前記プライマーを少なくとも1種のヌクレオチドの存在下で伸長させ、伸長した核酸を生成し、ここで前記ヌクレオチドは、デオキシヌクレオチドおよびジデオキシヌレオチドからなる群より選択される、請求の範囲第23項に記載の方法。
- 前記サンプル核酸を、前記プライマー核酸を前記サンプル核酸にハイブリダイズさせることに先立ち、増幅するステップをさらに含む、請求の範囲第31項に記載の方法。
- 前記ピンツールが少なくとも2個のピンを含む、請求の範囲第23項に記載の方法。
- 前記ピンから基板上に核酸を放出させるステップ、および前記基板上の前記核酸を照射し、脱離核酸を発生させるステップをさらに含む、請求の範囲第38項に記載の方法。
- 前記脱離核酸の指向性運動量が、十分にランダム化されている、請求の範囲第23項に記載の方法。
- 前記ピンツールが、
2または3以上のピンと、
脱離された材料の指向性運動量を少なくとも部分的にランダム化するための、前記脱離された材料を閉じ込める手段を提供する、少なくとも1個のピン上に取りこまれた核酸
とを含む、請求の範囲第23項の方法における使用のためのピンツール。 - 前記ピンのうちの少なくとも1個と接触するプローブをさらに含む請求の範囲第41項のピンツールであって、ここで、前記プローブは少なくとも1個の溝を含み、かつピンは前記溝を通して取りつけられる、前記ピンツール。
- 前記ピンが溝を含む、請求の範囲第41項のピンツール。
- 前記ピンが溝内に光ファイバーを含む、請求の範囲第43項に記載のピンツール。
- 前記プローブが1個の溝を含むか、または複数の溝を含む、請求の範囲第42項に記載のピンツール。
- 前記脱離した材料を閉じ込める手段がプローブであって、前記プローブは少なくとも1個の溝を含み、そしてピンは溝を通して取りつけられる、請求の範囲第41項のピンツール。
- プライマー核酸をサンプル核酸にハイブリダイズさせるステップと、
前記プライマーを少なくとも1種のヌクレオチドの存在下で伸長させ、2または3種以上の伸長した核酸を生成するステップであって、ここで前記ヌクレオチドは、デオキシヌクレオチドおよびジデオキシヌクレオチドからなる群より選択される、ステップと、
前記伸長した核酸を、請求の範囲第41項のピンツールのピン上に取りこませるステップと、
前記ピン上の伸長した核酸を照射し、脱離した核酸を発生させ、そして脱離した核酸の指向性運動量を、少なくとも部分的にランダム化するステップと、および質量分析によって前記核酸の分子量を決定するステップと、
を含む方法。 - ピンツールのピン上に核酸を取りこませるステップであって、ここで前記ピンツールが少なくとも2個のピンを含む、ステップと、
前記ピン上の核酸を照射し、脱離した核酸を発生させ、そして前記脱離した核酸の指向性運動量を少なくとも部分的にランダム化するステップと、および
前記脱離した核酸の分子量を、質量分析によって決定するステップと、
を含む方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US08/710,565 US5777324A (en) | 1996-09-19 | 1996-09-19 | Method and apparatus for maldi analysis |
US08/710,565 | 1996-09-19 | ||
PCT/US1997/016115 WO1998012734A1 (en) | 1996-09-19 | 1997-09-19 | Method and apparatus for maldi analysis |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2000500915A JP2000500915A (ja) | 2000-01-25 |
JP3601834B2 true JP3601834B2 (ja) | 2004-12-15 |
Family
ID=24854565
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP51475098A Expired - Fee Related JP3601834B2 (ja) | 1996-09-19 | 1997-09-19 | Maldi分析の方法および装置 |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US5777324A (ja) |
EP (2) | EP1271609A3 (ja) |
JP (1) | JP3601834B2 (ja) |
AT (1) | ATE231284T1 (ja) |
AU (1) | AU724884B2 (ja) |
CA (1) | CA2237946C (ja) |
DE (1) | DE69718438T2 (ja) |
WO (1) | WO1998012734A1 (ja) |
Families Citing this family (256)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5795714A (en) * | 1992-11-06 | 1998-08-18 | Trustees Of Boston University | Method for replicating an array of nucleic acid probes |
US6436635B1 (en) * | 1992-11-06 | 2002-08-20 | Boston University | Solid phase sequencing of double-stranded nucleic acids |
JPH08509857A (ja) | 1993-01-07 | 1996-10-22 | シーケノム・インコーポレーテッド | マススペクトロメトリーによるdna配列決定法 |
US6194144B1 (en) | 1993-01-07 | 2001-02-27 | Sequenom, Inc. | DNA sequencing by mass spectrometry |
US5605798A (en) * | 1993-01-07 | 1997-02-25 | Sequenom, Inc. | DNA diagnostic based on mass spectrometry |
US20060063193A1 (en) * | 1995-04-11 | 2006-03-23 | Dong-Jing Fu | Solid phase sequencing of double-stranded nucleic acids |
US7803529B1 (en) | 1995-04-11 | 2010-09-28 | Sequenom, Inc. | Solid phase sequencing of biopolymers |
US5830655A (en) | 1995-05-22 | 1998-11-03 | Sri International | Oligonucleotide sizing using cleavable primers |
US6146854A (en) * | 1995-08-31 | 2000-11-14 | Sequenom, Inc. | Filtration processes, kits and devices for isolating plasmids |
EP0886681A1 (en) * | 1996-03-04 | 1998-12-30 | Genetrace Systems, Inc. | Methods of screening nucleic acids using mass spectrometry |
WO1997041139A2 (en) | 1996-04-17 | 1997-11-06 | Koester Hubert | A combinatorial protecting group strategy for multifunctional molecules |
US5965363A (en) | 1996-09-19 | 1999-10-12 | Genetrace Systems Inc. | Methods of preparing nucleic acids for mass spectrometric analysis |
US5777324A (en) * | 1996-09-19 | 1998-07-07 | Sequenom, Inc. | Method and apparatus for maldi analysis |
US7285422B1 (en) * | 1997-01-23 | 2007-10-23 | Sequenom, Inc. | Systems and methods for preparing and analyzing low volume analyte array elements |
EP1457496B1 (en) | 1996-11-06 | 2014-01-15 | Sequenom, Inc. | High density immobilization of nucleic acids |
US6140053A (en) * | 1996-11-06 | 2000-10-31 | Sequenom, Inc. | DNA sequencing by mass spectrometry via exonuclease degradation |
US20030129589A1 (en) * | 1996-11-06 | 2003-07-10 | Hubert Koster | Dna diagnostics based on mass spectrometry |
AU5794498A (en) | 1996-12-10 | 1998-07-03 | Genetrace Systems, Inc. | Releasable nonvolatile mass-label molecules |
EP0991930B1 (en) * | 1997-06-26 | 2004-06-16 | Perseptive Biosystems, Inc. | High density sample holder for analysis of biological samples |
US6207370B1 (en) | 1997-09-02 | 2001-03-27 | Sequenom, Inc. | Diagnostics based on mass spectrometric detection of translated target polypeptides |
US20110166040A1 (en) * | 1997-09-05 | 2011-07-07 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions for use in identification of strains of e. coli o157:h7 |
DE19741874A1 (de) * | 1997-09-23 | 1999-04-01 | Henkel Ecolab Gmbh & Co Ohg | Alkoholathaltiger Reiniger |
USRE39099E1 (en) * | 1998-01-23 | 2006-05-23 | University Of Manitoba | Spectrometer provided with pulsed ion source and transmission device to damp ion motion and method of use |
US6331702B1 (en) | 1999-01-25 | 2001-12-18 | University Of Manitoba | Spectrometer provided with pulsed ion source and transmission device to damp ion motion and method of use |
US6723564B2 (en) | 1998-05-07 | 2004-04-20 | Sequenom, Inc. | IR MALDI mass spectrometry of nucleic acids using liquid matrices |
JP4106751B2 (ja) * | 1998-08-04 | 2008-06-25 | ソニー株式会社 | 画像表示装置及びその製造方法 |
EP1166329A4 (en) | 1999-03-09 | 2005-03-23 | Scripps Research Inst | METHOD AND DEVICE FOR THE DESORPTION / IONIZATION OF POROUS, LIGHT ABSORBING PAPERS |
US6225061B1 (en) | 1999-03-10 | 2001-05-01 | Sequenom, Inc. | Systems and methods for performing reactions in an unsealed environment |
US6436640B1 (en) | 1999-03-18 | 2002-08-20 | Exiqon A/S | Use of LNA in mass spectrometry |
US20020009394A1 (en) | 1999-04-02 | 2002-01-24 | Hubert Koster | Automated process line |
DE60044899D1 (de) * | 1999-06-11 | 2010-10-14 | Applied Biosystems Llc | Maldi ionenquelle mit gasimpuls, vorrichtung und verfahren zur ermittlung des molekulargewichtes labilen moleküle |
DE19937438C2 (de) * | 1999-08-07 | 2001-09-13 | Bruker Daltonik Gmbh | Kopplung Dünnschicht-Chromatographie und Massenspektrometrie (TLC/MS) |
GB9922837D0 (en) * | 1999-09-27 | 1999-11-24 | Ludwig Inst Cancer Res | Modified ion source targets for use in liquid maldi ms |
US7668658B2 (en) | 1999-10-13 | 2010-02-23 | Sequenom, Inc. | Methods for generating databases and databases for identifying polymorphic genetic markers |
US7917301B1 (en) | 2000-09-19 | 2011-03-29 | Sequenom, Inc. | Method and device for identifying a biological sample |
US20030207297A1 (en) * | 1999-10-13 | 2003-11-06 | Hubert Koster | Methods for generating databases and databases for identifying polymorphic genetic markers |
WO2001027857A2 (en) | 1999-10-13 | 2001-04-19 | Sequenom, Inc. | Methods for generating databases and databases for identifying polymorphic genetic markers |
JP2003524193A (ja) * | 2000-02-23 | 2003-08-12 | ザイオミックス インコーポレイテッド | 高い位置に配置されたサンプル表面を有するチップ |
US7122790B2 (en) * | 2000-05-30 | 2006-10-17 | The Penn State Research Foundation | Matrix-free desorption ionization mass spectrometry using tailored morphology layer devices |
DE10027794A1 (de) * | 2000-06-07 | 2001-12-13 | Basf Ag | Verfahren zur Analyse Enzym-katalysierter Umsetzungen mit MALDI-TOF-Massenspektrometrie |
US7375319B1 (en) | 2000-06-09 | 2008-05-20 | Willoughby Ross C | Laser desorption ion source |
AU2001268468A1 (en) | 2000-06-13 | 2001-12-24 | The Trustees Of Boston University | Use of nucleotide analogs in the analysis of oligonucleotide mixtures and in highly multiplexed nucleic acid sequencing |
EP1816214B1 (en) | 2000-07-11 | 2008-06-25 | Kirk Hogan | Methods and compositions for perioperative genomic profiling |
WO2002031484A2 (en) * | 2000-10-11 | 2002-04-18 | Ciphergen Biosystems, Inc. | Methods for characterizing molecular interactions using affinity capture tandem mass spectrometry |
US20020195555A1 (en) * | 2000-10-11 | 2002-12-26 | Weinberger Scot R. | Apparatus and methods for affinity capture tandem mass spectrometry |
US20020142483A1 (en) | 2000-10-30 | 2002-10-03 | Sequenom, Inc. | Method and apparatus for delivery of submicroliter volumes onto a substrate |
US7060442B2 (en) * | 2000-10-30 | 2006-06-13 | Regents Of The University Of Michigan | Modulators on Nod2 signaling |
US6969757B2 (en) * | 2001-01-26 | 2005-11-29 | Syngenta Participations Ag | Differential labeling for quantitative analysis of complex protein mixtures |
US7166436B2 (en) | 2001-01-26 | 2007-01-23 | Syngenta Participations, Ag | Differential labeling for quantitative analysis of complex protein mixtures |
US7609731B2 (en) * | 2001-01-30 | 2009-10-27 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Laser system using ultra-short laser pulses |
US7567596B2 (en) * | 2001-01-30 | 2009-07-28 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Control system and apparatus for use with ultra-fast laser |
US7973936B2 (en) | 2001-01-30 | 2011-07-05 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Control system and apparatus for use with ultra-fast laser |
US7583710B2 (en) | 2001-01-30 | 2009-09-01 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Laser and environmental monitoring system |
US8208505B2 (en) | 2001-01-30 | 2012-06-26 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Laser system employing harmonic generation |
US7450618B2 (en) | 2001-01-30 | 2008-11-11 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Laser system using ultrashort laser pulses |
WO2002061799A2 (en) * | 2001-01-30 | 2002-08-08 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Control system and apparatus for use with laser excitation or ionization |
WO2002061047A2 (en) * | 2001-02-01 | 2002-08-08 | Ciphergen Biosystems, Inc. | Improved methods for protein identification, characterization and sequencing by tandem mass spectrometry |
US20040121314A1 (en) * | 2002-12-06 | 2004-06-24 | Ecker David J. | Methods for rapid detection and identification of bioagents in containers |
US20040121313A1 (en) | 2002-12-06 | 2004-06-24 | Ecker David J. | Methods for rapid detection and identification of bioagents in organs for transplantation |
US7666588B2 (en) | 2001-03-02 | 2010-02-23 | Ibis Biosciences, Inc. | Methods for rapid forensic analysis of mitochondrial DNA and characterization of mitochondrial DNA heteroplasmy |
US7718354B2 (en) * | 2001-03-02 | 2010-05-18 | Ibis Biosciences, Inc. | Methods for rapid identification of pathogens in humans and animals |
US20030027135A1 (en) | 2001-03-02 | 2003-02-06 | Ecker David J. | Method for rapid detection and identification of bioagents |
US7226739B2 (en) | 2001-03-02 | 2007-06-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc | Methods for rapid detection and identification of bioagents in epidemiological and forensic investigations |
US20040121310A1 (en) * | 2002-12-18 | 2004-06-24 | Ecker David J. | Methods for rapid detection and identification of bioagents in forensic studies |
US20030036057A1 (en) * | 2001-03-09 | 2003-02-20 | Andreas Braun | Genes and polymorphisms associated with cardiovascular disease and their use |
US20020155587A1 (en) | 2001-04-20 | 2002-10-24 | Sequenom, Inc. | System and method for testing a biological sample |
EP1395939A4 (en) * | 2001-05-24 | 2006-06-07 | New Objective Inc | METHOD AND APPARATUS FOR ELECTRO-WAVING REGULATED BY FEEDBACK |
US6936224B2 (en) * | 2001-06-21 | 2005-08-30 | Perseptive Biosystems, Inc. | Apparatus and process for transporting sample plates |
US8073627B2 (en) | 2001-06-26 | 2011-12-06 | Ibis Biosciences, Inc. | System for indentification of pathogens |
US7217510B2 (en) | 2001-06-26 | 2007-05-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for providing bacterial bioagent characterizing information |
US6800449B1 (en) | 2001-07-13 | 2004-10-05 | Syngenta Participations Ag | High throughput functional proteomics |
DE10140499B4 (de) * | 2001-08-17 | 2005-02-03 | Bruker Daltonik Gmbh | Probenträgerplatten für Massenspektrometrie mit Ionisierung durch matrixunterstützte Laserdesorption |
US7108975B2 (en) * | 2001-09-21 | 2006-09-19 | Regents Of The University Of Michigan | Atlastin |
US7582425B2 (en) * | 2001-09-21 | 2009-09-01 | The Regents Of The University Of Michigan | Atlastin |
EP1451674A4 (en) * | 2001-10-26 | 2008-08-20 | Sequenom Inc | METHOD AND APPARATUS FOR PARALLEL DISTRIBUTION OF PRECISE VOLUMES OF SOLID PARTICLES |
US7255986B2 (en) * | 2002-01-31 | 2007-08-14 | The Board Of Trustees Operating Michigan State University | Compositions for the diagnosis and treatment of epizootic catarrhal enteritis in ferrets |
BR0200690A (pt) * | 2002-03-04 | 2004-03-23 | Embrapa Pesquisa Agropecuaria | Método para detecção de proteinas de origem em misturas complexas |
JP3530942B2 (ja) * | 2002-03-05 | 2004-05-24 | 独立行政法人通信総合研究所 | 分子ビーム発生方法及び装置 |
CA2479872C (en) * | 2002-03-21 | 2009-06-23 | Thermo Finnigan Llc | Ionization apparatus and method for mass spectrometer system |
AUPS177202A0 (en) * | 2002-04-16 | 2002-05-23 | Diakyne Pty Ltd | Multi-element screening of trace elements |
WO2003093296A2 (en) * | 2002-05-03 | 2003-11-13 | Sequenom, Inc. | Kinase anchor protein muteins, peptides thereof, and related methods |
US6680477B2 (en) * | 2002-05-31 | 2004-01-20 | Battelle Memorial Institute | High spatial resolution matrix assisted laser desorption/ionization (MALDI) |
US6624409B1 (en) | 2002-07-30 | 2003-09-23 | Agilent Technologies, Inc. | Matrix assisted laser desorption substrates for biological and reactive samples |
US7214353B2 (en) * | 2002-08-30 | 2007-05-08 | Corning Incorporated | Peptide or protein-capturing surfaces for high throughput MALDI mass spectrometry |
US20030119063A1 (en) * | 2002-09-03 | 2003-06-26 | Pham Thang T. | High accuracy protein identification |
US6707039B1 (en) | 2002-09-19 | 2004-03-16 | Agilent Technologies, Inc. | AP-MALDI target illumination device and method for using an AP-MALDI target illumination device |
US6863731B2 (en) * | 2002-10-18 | 2005-03-08 | Controls Corporation Of America | System for deposition of inert barrier coating to increase corrosion resistance |
JP4241006B2 (ja) * | 2002-11-11 | 2009-03-18 | 株式会社島津製作所 | レーザー脱離イオン化質量分析方法とそれに用いるサンプルプレート |
US7105809B2 (en) * | 2002-11-18 | 2006-09-12 | 3M Innovative Properties Company | Microstructured polymeric substrate |
JP4786904B2 (ja) * | 2002-11-27 | 2011-10-05 | セクエノム,インコーポレイティド | 配列変化検出及び発見用の断片化をベースとする方法及びシステム |
EP1578399A4 (en) | 2002-12-06 | 2007-11-28 | Isis Pharmaceuticals Inc | METHODS FOR RAPID IDENTIFICATION OF PATHOGENS IN HUMANS AND BEETS |
US6642516B1 (en) * | 2002-12-18 | 2003-11-04 | Agilent Technologies, Inc. | Apparatus and method of laser dissociation for mass spectrometry |
US6822230B2 (en) * | 2002-12-23 | 2004-11-23 | Agilent Technologies, Inc. | Matrix-assisted laser desorption/ionization sample holders and methods of using the same |
JP2004264043A (ja) * | 2003-01-31 | 2004-09-24 | National Institute Of Advanced Industrial & Technology | イオン化装置および微小領域分析装置 |
JP4555820B2 (ja) * | 2003-02-10 | 2010-10-06 | ウオーターズ・テクノロジーズ・コーポレイシヨン | シリコン上の脱離/イオン化質量分析(dios−ms)を使用した周囲空気の成分の吸着、検出、および同定 |
JP4074921B2 (ja) * | 2003-03-14 | 2008-04-16 | 日本電気株式会社 | 質量分析システムおよび分析方法 |
US6903334B1 (en) | 2003-03-19 | 2005-06-07 | Thermo Finnigan Llc | High throughput ion source for MALDI mass spectrometry |
US20040185448A1 (en) * | 2003-03-20 | 2004-09-23 | Viorica Lopez-Avila | Methods and devices for performing matrix assisted laser desorption/lonization protocols |
US8046171B2 (en) | 2003-04-18 | 2011-10-25 | Ibis Biosciences, Inc. | Methods and apparatus for genetic evaluation |
US20050009053A1 (en) * | 2003-04-25 | 2005-01-13 | Sebastian Boecker | Fragmentation-based methods and systems for de novo sequencing |
US8057993B2 (en) | 2003-04-26 | 2011-11-15 | Ibis Biosciences, Inc. | Methods for identification of coronaviruses |
US7964343B2 (en) | 2003-05-13 | 2011-06-21 | Ibis Biosciences, Inc. | Method for rapid purification of nucleic acids for subsequent analysis by mass spectrometry by solution capture |
US8158354B2 (en) | 2003-05-13 | 2012-04-17 | Ibis Biosciences, Inc. | Methods for rapid purification of nucleic acids for subsequent analysis by mass spectrometry by solution capture |
US7145135B1 (en) | 2003-05-30 | 2006-12-05 | Agilent Technologies, Inc. | Apparatus and method for MALDI source control with external image capture |
GB0313170D0 (en) | 2003-06-09 | 2003-07-16 | Qinetiq Ltd | Method and apparatus for spore disruption and/or detection |
GB2418250A (en) * | 2003-06-25 | 2006-03-22 | Waters Investments Ltd | An apparatus used to prevent cross-contamination along a platform and methods of manufacturing the same |
DE602004019941D1 (de) | 2003-07-31 | 2009-04-23 | Sequenom Inc | Verfahren für multiplex-polymerasekettenreaktionen auf hohem niveau und homogenen massenverlängerungsreaktionen zur genotypisierung von polymorphismen |
US9394565B2 (en) * | 2003-09-05 | 2016-07-19 | Agena Bioscience, Inc. | Allele-specific sequence variation analysis |
US8546082B2 (en) | 2003-09-11 | 2013-10-01 | Ibis Biosciences, Inc. | Methods for identification of sepsis-causing bacteria |
US8097416B2 (en) | 2003-09-11 | 2012-01-17 | Ibis Biosciences, Inc. | Methods for identification of sepsis-causing bacteria |
US8242254B2 (en) | 2003-09-11 | 2012-08-14 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions for use in identification of bacteria |
US20100129811A1 (en) * | 2003-09-11 | 2010-05-27 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions for use in identification of pseudomonas aeruginosa |
WO2005028665A2 (en) | 2003-09-19 | 2005-03-31 | Epitopix, Llc | Campylobacter polypeptides and methods of use |
US6825478B1 (en) * | 2003-10-10 | 2004-11-30 | Perseptive Biosystems, Inc. | MALDI plate with removable magnetic insert |
US6953928B2 (en) * | 2003-10-31 | 2005-10-11 | Applera Corporation | Ion source and methods for MALDI mass spectrometry |
US8163895B2 (en) | 2003-12-05 | 2012-04-24 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions for use in identification of orthopoxviruses |
US20050128754A1 (en) * | 2003-12-12 | 2005-06-16 | Redden Myron K. | Ceramic foam light diffuser |
US7030373B2 (en) * | 2003-12-19 | 2006-04-18 | Applera Corporation | MALDI plate construction with grid |
US7438859B2 (en) * | 2003-12-31 | 2008-10-21 | Protedyne Corporation | Method and apparatus for laser impulse sample deposition |
CA2493691A1 (en) * | 2004-01-22 | 2005-07-22 | Ionalytics Corporation | Method and apparatus for faims with a laser-based ionization source |
US7432057B2 (en) * | 2004-01-30 | 2008-10-07 | Michigan State University | Genetic test for PSE-susceptible turkeys |
US7666592B2 (en) | 2004-02-18 | 2010-02-23 | Ibis Biosciences, Inc. | Methods for concurrent identification and quantification of an unknown bioagent |
US8119336B2 (en) | 2004-03-03 | 2012-02-21 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions for use in identification of alphaviruses |
US7623234B2 (en) * | 2004-03-22 | 2009-11-24 | Quantaspec, Inc. | System and method for detecting and identifying an analyte |
AU2005230936B2 (en) * | 2004-03-26 | 2010-08-05 | Agena Bioscience, Inc. | Base specific cleavage of methylation-specific amplification products in combination with mass analysis |
US7608394B2 (en) | 2004-03-26 | 2009-10-27 | Sequenom, Inc. | Methods and compositions for phenotype identification based on nucleic acid methylation |
JP4366508B2 (ja) * | 2004-03-30 | 2009-11-18 | 国立大学法人山梨大学 | 質量分析のためのイオン化方法および装置 |
WO2005117270A2 (en) | 2004-05-24 | 2005-12-08 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Mass spectrometry with selective ion filtration by digital thresholding |
US20050266411A1 (en) | 2004-05-25 | 2005-12-01 | Hofstadler Steven A | Methods for rapid forensic analysis of mitochondrial DNA |
US7785843B2 (en) * | 2004-06-23 | 2010-08-31 | Sequenom, Inc. | Target-specific compomers and methods of use |
US7811753B2 (en) | 2004-07-14 | 2010-10-12 | Ibis Biosciences, Inc. | Methods for repairing degraded DNA |
AU2005284980A1 (en) * | 2004-09-10 | 2006-03-23 | Sequenom, Inc. | Methods for long-range sequence analysis of nucleic acids |
CA2578359A1 (en) * | 2004-09-17 | 2006-11-09 | Nanosys, Inc. | Nanostructured thin films and their uses |
US8633437B2 (en) | 2005-02-14 | 2014-01-21 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Ultra-fast laser system |
US8084207B2 (en) | 2005-03-03 | 2011-12-27 | Ibis Bioscience, Inc. | Compositions for use in identification of papillomavirus |
CA2600184A1 (en) | 2005-03-03 | 2006-09-08 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions for use in identification of adventitious viruses |
US7265368B2 (en) * | 2005-05-13 | 2007-09-04 | Applera Corporation | Ion optical mounting assemblies |
US20060266941A1 (en) * | 2005-05-26 | 2006-11-30 | Vestal Marvin L | Method and apparatus for interfacing separations techniques to MALDI-TOF mass spectrometry |
US7435951B2 (en) * | 2005-06-08 | 2008-10-14 | Agilent Technologies, Inc. | Ion source sample plate illumination system |
AU2006272776B2 (en) | 2005-07-21 | 2012-01-19 | Ibis Biosciences, Inc. | Methods for rapid identification and quantitation of nucleic acid variants |
US7495231B2 (en) * | 2005-09-08 | 2009-02-24 | Agilent Technologies, Inc. | MALDI sample plate imaging workstation |
US7919279B2 (en) * | 2005-09-29 | 2011-04-05 | Children's Hospital & Research Center At Oakland | Methods and compositions for KIR genotyping |
US7180058B1 (en) | 2005-10-05 | 2007-02-20 | Thermo Finnigan Llc | LDI/MALDI source for enhanced spatial resolution |
JP4885142B2 (ja) * | 2005-10-20 | 2012-02-29 | 独立行政法人科学技術振興機構 | 質量分析法に用いられる試料ターゲットおよびその製造方法、並びに当該試料ターゲットを用いた質量分析装置 |
US7423260B2 (en) * | 2005-11-04 | 2008-09-09 | Agilent Technologies, Inc. | Apparatus for combined laser focusing and spot imaging for MALDI |
WO2007059348A2 (en) * | 2005-11-17 | 2007-05-24 | Third Wave Technologies, Inc. | Compositions and methods for detecting an hcv-1 subtype |
EP2468901B1 (en) | 2005-11-29 | 2017-04-05 | Cambridge Enterprise Limited | Markers for breast cancer |
US8618470B2 (en) | 2005-11-30 | 2013-12-31 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Laser based identification of molecular characteristics |
US7781730B2 (en) * | 2006-02-14 | 2010-08-24 | Los Alamos National Security, Llc | Linear electronic field time-of-flight ion mass spectrometers |
JP2009528063A (ja) * | 2006-03-01 | 2009-08-06 | パーレジェン サイエンシーズ, インコーポレイテッド | 依存症に対するマーカー |
US20110143344A1 (en) * | 2006-03-01 | 2011-06-16 | The Washington University | Genetic polymorphisms and substance dependence |
US7700913B2 (en) | 2006-03-03 | 2010-04-20 | Ionsense, Inc. | Sampling system for use with surface ionization spectroscopy |
US8026477B2 (en) * | 2006-03-03 | 2011-09-27 | Ionsense, Inc. | Sampling system for use with surface ionization spectroscopy |
US8088582B2 (en) | 2006-04-06 | 2012-01-03 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions for the use in identification of fungi |
WO2007145702A2 (en) | 2006-04-10 | 2007-12-21 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Laser material processing systems and methods with, in particular, use of a hollow waveguide for broadening the bandwidth of the pulse above 20 nm |
DE102006023061B4 (de) * | 2006-05-17 | 2008-08-14 | Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. | Gasdetektor mit akustischer Messzelle und selektiv adsorbierender Oberfläche |
US7714281B2 (en) * | 2006-05-26 | 2010-05-11 | Ionsense, Inc. | Apparatus for holding solids for use with surface ionization technology |
AU2007353877B2 (en) | 2006-09-14 | 2012-07-19 | Ibis Biosciences, Inc. | Targeted whole genome amplification method for identification of pathogens |
US8440965B2 (en) | 2006-10-13 | 2013-05-14 | Ionsense, Inc. | Sampling system for use with surface ionization spectroscopy |
EP2099553A4 (en) | 2006-10-13 | 2010-05-12 | Ionsense Inc | SAMPLING SYSTEM FOR CONFINEMENT AND ION TRANSFER IN A SPECTROSCOPY SYSTEM |
US7642806B2 (en) * | 2006-10-13 | 2010-01-05 | General Atomics | Test apparatus, system, and method with a magnetic feature |
KR101483805B1 (ko) | 2007-01-30 | 2015-01-16 | 파마시클릭스, 인코포레이티드 | 히스톤 데아세틸라제 억제제에 대한 암 내성을 확인하는 방법 |
EP2126132B1 (en) | 2007-02-23 | 2013-03-20 | Ibis Biosciences, Inc. | Methods for rapid foresnsic dna analysis |
WO2009023358A2 (en) * | 2007-05-25 | 2009-02-19 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions for use in identification of strains of hepatitis c virus |
WO2008151023A2 (en) | 2007-06-01 | 2008-12-11 | Ibis Biosciences, Inc. | Methods and compositions for multiple displacement amplification of nucleic acids |
US20110045456A1 (en) * | 2007-06-14 | 2011-02-24 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions for use in identification of adventitious contaminant viruses |
DE102007043456B4 (de) * | 2007-07-31 | 2012-02-09 | Bruker Daltonik Gmbh | Matrixunterstützte Laserdesorption hoher Ionisierungsausbeute |
GB2453407B (en) * | 2007-07-31 | 2012-07-18 | Bruker Daltonik Gmbh | Matrix-assisted laser desorption with high ionization yield |
WO2009039122A2 (en) | 2007-09-17 | 2009-03-26 | Sequenom, Inc. | Integrated robotic sample transfer device |
US8311069B2 (en) | 2007-12-21 | 2012-11-13 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Direct ultrashort laser system |
US8044346B2 (en) * | 2007-12-21 | 2011-10-25 | Licentia Oy | Method and system for desorbing and ionizing chemical compounds from surfaces |
US20110097704A1 (en) * | 2008-01-29 | 2011-04-28 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions for use in identification of picornaviruses |
WO2009155103A2 (en) * | 2008-05-30 | 2009-12-23 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions for use in identification of tick-borne pathogens |
US20110177515A1 (en) * | 2008-05-30 | 2011-07-21 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions for use in identification of francisella |
US20110151437A1 (en) * | 2008-06-02 | 2011-06-23 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions for use in identification of adventitious viruses |
EP2349549B1 (en) | 2008-09-16 | 2012-07-18 | Ibis Biosciences, Inc. | Mixing cartridges, mixing stations, and related kits, and system |
US8148163B2 (en) | 2008-09-16 | 2012-04-03 | Ibis Biosciences, Inc. | Sample processing units, systems, and related methods |
EP2344893B1 (en) | 2008-09-16 | 2014-10-15 | Ibis Biosciences, Inc. | Microplate handling systems and methods |
US20110200985A1 (en) * | 2008-10-02 | 2011-08-18 | Rangarajan Sampath | Compositions for use in identification of herpesviruses |
US20110189687A1 (en) * | 2008-10-02 | 2011-08-04 | Ibis Bioscience, Inc. | Compositions for use in identification of members of the bacterial genus mycoplasma |
US20110183346A1 (en) * | 2008-10-03 | 2011-07-28 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions for use in identification of neisseria, chlamydia, and/or chlamydophila bacteria |
US20110190170A1 (en) * | 2008-10-03 | 2011-08-04 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions for use in identification of antibiotic-resistant bacteria |
US20110183344A1 (en) * | 2008-10-03 | 2011-07-28 | Rangarajan Sampath | Compositions for use in identification of clostridium difficile |
WO2010039775A1 (en) * | 2008-10-03 | 2010-04-08 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions for use in identification of members of the bacterial class alphaproteobacter |
US20110183345A1 (en) * | 2008-10-03 | 2011-07-28 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions for use in identification of streptococcus pneumoniae |
US9202678B2 (en) * | 2008-11-14 | 2015-12-01 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Ultrafast laser system for biological mass spectrometry |
US8675699B2 (en) | 2009-01-23 | 2014-03-18 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Laser pulse synthesis system |
EP2396803A4 (en) | 2009-02-12 | 2016-10-26 | Ibis Biosciences Inc | IONIZATION PROBE ASSEMBLIES |
DE202009002192U1 (de) * | 2009-02-16 | 2009-04-23 | Thermo Fisher Scientific (Bremen) Gmbh | Elektrode zur Beeinflussung der Ionenbewegung in Massenspektrometern |
WO2010141128A2 (en) | 2009-03-05 | 2010-12-09 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Laser amplification system |
US9719083B2 (en) | 2009-03-08 | 2017-08-01 | Ibis Biosciences, Inc. | Bioagent detection methods |
US9393564B2 (en) | 2009-03-30 | 2016-07-19 | Ibis Biosciences, Inc. | Bioagent detection systems, devices, and methods |
WO2010124257A2 (en) * | 2009-04-24 | 2010-10-28 | Colby Pharmaceutical Company | Methods and kits for determining oxygen free radical (ofr) levels in animal and human tissues as a prognostic marker for cancer and other pathophysiologies |
US8207497B2 (en) | 2009-05-08 | 2012-06-26 | Ionsense, Inc. | Sampling of confined spaces |
WO2011008971A1 (en) | 2009-07-17 | 2011-01-20 | Ibis Biosciences, Inc. | Lift and mount apparatus |
US9194877B2 (en) | 2009-07-17 | 2015-11-24 | Ibis Biosciences, Inc. | Systems for bioagent indentification |
US9416409B2 (en) | 2009-07-31 | 2016-08-16 | Ibis Biosciences, Inc. | Capture primers and capture sequence linked solid supports for molecular diagnostic tests |
EP3098325A1 (en) | 2009-08-06 | 2016-11-30 | Ibis Biosciences, Inc. | Non-mass determined base compositions for nucleic acid detection |
US20110065111A1 (en) * | 2009-08-31 | 2011-03-17 | Ibis Biosciences, Inc. | Compositions For Use In Genotyping Of Klebsiella Pneumoniae |
EP2488656B1 (en) | 2009-10-15 | 2015-06-03 | Ibis Biosciences, Inc. | Multiple displacement amplification |
US8630322B2 (en) | 2010-03-01 | 2014-01-14 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Laser system for output manipulation |
US8774488B2 (en) | 2010-03-11 | 2014-07-08 | Cellscape Corporation | Method and device for identification of nucleated red blood cells from a maternal blood sample |
WO2011115840A2 (en) * | 2010-03-14 | 2011-09-22 | Ibis Biosciences, Inc. | Parasite detection via endosymbiont detection |
US9492887B2 (en) | 2010-04-01 | 2016-11-15 | Electro Scientific Industries, Inc. | Touch screen interface for laser processing |
US8519330B2 (en) | 2010-10-01 | 2013-08-27 | Ut-Battelle, Llc | Systems and methods for laser assisted sample transfer to solution for chemical analysis |
US8637813B2 (en) * | 2010-10-01 | 2014-01-28 | Ut-Battelle, Llc | System and method for laser assisted sample transfer to solution for chemical analysis |
US8822949B2 (en) | 2011-02-05 | 2014-09-02 | Ionsense Inc. | Apparatus and method for thermal assisted desorption ionization systems |
US8901488B1 (en) | 2011-04-18 | 2014-12-02 | Ionsense, Inc. | Robust, rapid, secure sample manipulation before during and after ionization for a spectroscopy system |
EP2732457A4 (en) * | 2011-07-14 | 2015-09-16 | Univ George Washington | COLLIMATION OF PANACES FOR MASS SPECTROMETRY WITH IONIZATION BY ELECTROPULVERIZATION IN LASER ABLATION |
GB2493179B (en) * | 2011-07-26 | 2018-09-05 | Kratos Analytical Ltd | MALDI sample preparation methods and targets |
CA2867996C (en) * | 2011-10-26 | 2020-03-10 | Dh Technologies Development Pte. Ltd. | Quantification of an analyte in serum and other biological matrices |
GB201122309D0 (en) * | 2011-12-23 | 2012-02-01 | Micromass Ltd | An imaging mass spectrometer and a method of mass spectrometry |
WO2013101743A2 (en) | 2011-12-30 | 2013-07-04 | Abbott Molecular, Inc. | Microorganism nucelic acid purification from host samples |
SG193046A1 (en) * | 2012-02-23 | 2013-09-30 | Histoindex Pte Ltd | A digital imaging system for biopsy inspection |
EP2836482B1 (en) | 2012-04-10 | 2019-12-25 | The Regents of The University of California | Compositions and methods for treating cancer |
JP5875483B2 (ja) * | 2012-08-14 | 2016-03-02 | 富士フイルム株式会社 | 質量分析装置 |
US9227978B2 (en) | 2013-03-15 | 2016-01-05 | Araxes Pharma Llc | Covalent inhibitors of Kras G12C |
US10800895B2 (en) | 2013-04-16 | 2020-10-13 | STRATEC CONSUMABLES GmbH | Polymer slides having hydrophobic small molecules |
EP3690923A1 (en) * | 2013-04-17 | 2020-08-05 | Fluidigm Canada Inc. | Sample analysis for mass cytometry |
JO3805B1 (ar) | 2013-10-10 | 2021-01-31 | Araxes Pharma Llc | مثبطات كراس جي12سي |
US9337007B2 (en) | 2014-06-15 | 2016-05-10 | Ionsense, Inc. | Apparatus and method for generating chemical signatures using differential desorption |
BR112016030008A2 (pt) | 2014-06-27 | 2017-10-24 | Abbott Lab | método para a detecção de infecção por pegivirus humano 2 em um indivíduo, para a detecção de ácido nucleico de pegivirus humano 2 e para a detecção de pegivirus humano 2 em uma amostra, e, composição |
JO3556B1 (ar) | 2014-09-18 | 2020-07-05 | Araxes Pharma Llc | علاجات مدمجة لمعالجة السرطان |
ES2826443T3 (es) | 2014-09-25 | 2021-05-18 | Araxes Pharma Llc | Inhibidores de proteínas mutantes KRAS G12C |
US10011600B2 (en) | 2014-09-25 | 2018-07-03 | Araxes Pharma Llc | Methods and compositions for inhibition of Ras |
US20160135657A1 (en) * | 2014-10-17 | 2016-05-19 | Porex Corporation | Disposable Porous Cleaning Devices and Methods |
US9850479B2 (en) * | 2015-03-03 | 2017-12-26 | The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma | Method and apparatus for sampling macromolecules from a biological specimen |
KR20180005178A (ko) | 2015-04-10 | 2018-01-15 | 아락세스 파마 엘엘씨 | 치환된 퀴나졸린 화합물 및 이의 사용방법 |
JP6789239B2 (ja) | 2015-04-15 | 2020-11-25 | アラクセス ファーマ エルエルシー | Krasの縮合三環系インヒビターおよびその使用の方法 |
US10144724B2 (en) | 2015-07-22 | 2018-12-04 | Araxes Pharma Llc | Substituted quinazoline compounds and methods of use thereof |
ES2901506T3 (es) | 2015-08-17 | 2022-03-22 | Kura Oncology Inc | Métodos para tratar pacientes con cáncer con inhibidores de la farnesiltransferasa |
US10882847B2 (en) | 2015-09-28 | 2021-01-05 | Araxes Pharma Llc | Inhibitors of KRAS G12C mutant proteins |
US10875842B2 (en) | 2015-09-28 | 2020-12-29 | Araxes Pharma Llc | Inhibitors of KRAS G12C mutant proteins |
EP3356339A1 (en) | 2015-09-28 | 2018-08-08 | Araxes Pharma LLC | Inhibitors of kras g12c mutant proteins |
EP3356351A1 (en) | 2015-09-28 | 2018-08-08 | Araxes Pharma LLC | Inhibitors of kras g12c mutant proteins |
EP3356354A1 (en) | 2015-09-28 | 2018-08-08 | Araxes Pharma LLC | Inhibitors of kras g12c mutant proteins |
US10858343B2 (en) | 2015-09-28 | 2020-12-08 | Araxes Pharma Llc | Inhibitors of KRAS G12C mutant proteins |
EP3356349A1 (en) | 2015-09-28 | 2018-08-08 | Araxes Pharma LLC | Inhibitors of kras g12c mutant proteins |
WO2017070256A2 (en) | 2015-10-19 | 2017-04-27 | Araxes Pharma Llc | Method for screening inhibitors of ras |
EA038635B9 (ru) | 2015-11-16 | 2021-10-26 | Араксис Фарма Ллк | 2-замещенные соединения хиназолина, содержащие замещенную гетероциклическую группу, и способы их применения |
WO2017100546A1 (en) | 2015-12-09 | 2017-06-15 | Araxes Pharma Llc | Methods for preparation of quinazoline derivatives |
US10822312B2 (en) | 2016-03-30 | 2020-11-03 | Araxes Pharma Llc | Substituted quinazoline compounds and methods of use |
US10646488B2 (en) | 2016-07-13 | 2020-05-12 | Araxes Pharma Llc | Conjugates of cereblon binding compounds and G12C mutant KRAS, HRAS or NRAS protein modulating compounds and methods of use thereof |
JP2019529484A (ja) | 2016-09-29 | 2019-10-17 | アラクセス ファーマ エルエルシー | Kras g12c変異体タンパク質の阻害剤 |
CN110312711A (zh) | 2016-10-07 | 2019-10-08 | 亚瑞克西斯制药公司 | 作为ras抑制剂的杂环化合物及其使用方法 |
BR112019012263A2 (pt) | 2016-12-15 | 2020-01-28 | Univ California | composições e métodos para tratar câncer |
WO2018140513A1 (en) | 2017-01-26 | 2018-08-02 | Araxes Pharma Llc | 1-(3-(6-(3-hydroxynaphthalen-1-yl)benzofuran-2-yl)azetidin-1yl)prop-2-en-1-one derivatives and similar compounds as kras g12c modulators for treating cancer |
US11274093B2 (en) | 2017-01-26 | 2022-03-15 | Araxes Pharma Llc | Fused bicyclic benzoheteroaromatic compounds and methods of use thereof |
WO2018140600A1 (en) | 2017-01-26 | 2018-08-02 | Araxes Pharma Llc | Fused hetero-hetero bicyclic compounds and methods of use thereof |
EP3573970A1 (en) | 2017-01-26 | 2019-12-04 | Araxes Pharma LLC | 1-(6-(3-hydroxynaphthalen-1-yl)quinazolin-2-yl)azetidin-1-yl)prop-2-en-1-one derivatives and similar compounds as kras g12c inhibitors for the treatment of cancer |
EP3573964A1 (en) | 2017-01-26 | 2019-12-04 | Araxes Pharma LLC | Benzothiophene and benzothiazole compounds and methods of use thereof |
BR112019024674A2 (pt) | 2017-05-25 | 2020-06-16 | Araxes Pharma Llc | Inibidores covalentes da kras |
JP2020521741A (ja) | 2017-05-25 | 2020-07-27 | アラクセス ファーマ エルエルシー | がんの処置のための化合物およびその使用の方法 |
CN110831933A (zh) | 2017-05-25 | 2020-02-21 | 亚瑞克西斯制药公司 | 喹唑啉衍生物作为突变kras、hras或nras的调节剂 |
WO2020046892A1 (en) * | 2018-08-28 | 2020-03-05 | Virgin Instruments Corporation | Molecular imaging of biological samples with sub-cellular spatial resolution and high sensitivity |
DE102021105327B3 (de) * | 2021-03-05 | 2022-05-12 | Bruker Daltonics GmbH & Co. KG | Desorptions-Ionenquelle mit Postdesorptions-Ionisierung in Transmissionsgeometrie |
Family Cites Families (65)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2141387C3 (de) * | 1971-08-18 | 1975-12-11 | Ernst Dr. 8000 Muenchen Remy | Verfahren zur auf Mikrobereiche beschränkten Verdampfung, Zerstörung, Anregung und/oder Ionisierung von Probenmaterial sowie Anordnung zur Durchführung des Verfahrens |
DE2739829C2 (de) * | 1977-09-03 | 1986-04-10 | Gesellschaft für Strahlen- und Umweltforschung mbH, 8000 München | Anordnung zur Analyse einer Probenschicht durch Beschuß mit elektromagnetischer Strahlung |
DE2739828C2 (de) * | 1977-09-03 | 1986-07-03 | Gesellschaft für Strahlen- und Umweltforschung mbH, 8000 München | Einrichtung zur Analyse von Proben |
DE2819711C2 (de) | 1978-05-05 | 1984-02-16 | Gesellschaft für Strahlen- und Umweltforschung mbH, 8000 München | Verfahren und Vorrichtung zur Analyse einer Probe mit Hilfe gepulster Laserstrahlung |
US4442354A (en) | 1982-01-22 | 1984-04-10 | Atom Sciences, Inc. | Sputter initiated resonance ionization spectrometry |
DE3221681A1 (de) * | 1982-06-08 | 1983-12-08 | Bayer Ag, 5090 Leverkusen | Massenspektrometer mit externer probenhalterung |
DE3329892A1 (de) * | 1983-08-18 | 1985-03-07 | Köster, Hubert, Prof. Dr., 2000 Hamburg | Verfahren zur herstellung von oligonucleotiden |
US5118605A (en) | 1984-10-16 | 1992-06-02 | Chiron Corporation | Polynucleotide determination with selectable cleavage sites |
US4740692A (en) * | 1985-06-13 | 1988-04-26 | Mitsubishi Denki Kabushiki Kaisha | Laser mass spectroscopic analyzer and method |
FR2597260B1 (fr) * | 1986-04-10 | 1988-07-15 | Univ Pasteur | Procede d'introduction directe automatique d'echantillons dans un spectrometre de masse, et dispositif pour la mise en oeuvre de ce procede |
GB8626075D0 (en) | 1986-10-31 | 1986-12-03 | Vg Instr Group | Time-of-flight mass spectrometer |
DE3809504C1 (ja) | 1988-03-22 | 1989-09-21 | Bruker - Franzen Analytik Gmbh, 2800 Bremen, De | |
US4920264A (en) | 1989-01-17 | 1990-04-24 | Sri International | Method for preparing samples for mass analysis by desorption from a frozen solution |
WO1990014148A1 (en) | 1989-05-19 | 1990-11-29 | Fenn John B | Multiply charged ions and a method for determining the molecular weight of large molecules |
GB2236186B (en) * | 1989-08-22 | 1994-01-05 | Finnigan Mat Gmbh | Process and device for laser desorption of analyte molecular ions, especially of biomolecules |
US5045694A (en) | 1989-09-27 | 1991-09-03 | The Rockefeller University | Instrument and method for the laser desorption of ions in mass spectrometry |
US5288644A (en) * | 1990-04-04 | 1994-02-22 | The Rockefeller University | Instrument and method for the sequencing of genome |
US5135870A (en) | 1990-06-01 | 1992-08-04 | Arizona Board Of Regents | Laser ablation/ionizaton and mass spectrometric analysis of massive polymers |
DE4019005C2 (de) | 1990-06-13 | 2000-03-09 | Finnigan Mat Gmbh | Vorrichtungen zur Analyse von Ionen hoher Masse |
US5210412A (en) | 1991-01-31 | 1993-05-11 | Wayne State University | Method for analyzing an organic sample |
WO1992013629A1 (en) | 1991-01-31 | 1992-08-20 | Wayne State University | A method for analyzing an organic sample |
US5300774A (en) * | 1991-04-25 | 1994-04-05 | Applied Biosystems, Inc. | Time-of-flight mass spectrometer with an aperture enabling tradeoff of transmission efficiency and resolution |
DE4202123C2 (de) * | 1992-01-27 | 1995-04-06 | Bruker Franzen Analytik Gmbh | Vorrichtung für die massenspektrometrische Untersuchung schneller organischer Ionen |
US5382793A (en) * | 1992-03-06 | 1995-01-17 | Hewlett-Packard Company | Laser desorption ionization mass monitor (LDIM) |
US5795714A (en) * | 1992-11-06 | 1998-08-18 | Trustees Of Boston University | Method for replicating an array of nucleic acid probes |
US5503980A (en) * | 1992-11-06 | 1996-04-02 | Trustees Of Boston University | Positional sequencing by hybridization |
JPH08509857A (ja) * | 1993-01-07 | 1996-10-22 | シーケノム・インコーポレーテッド | マススペクトロメトリーによるdna配列決定法 |
US5605798A (en) * | 1993-01-07 | 1997-02-25 | Sequenom, Inc. | DNA diagnostic based on mass spectrometry |
EP0689610B1 (en) * | 1993-03-19 | 2002-07-03 | Sequenom, Inc. | Dna sequencing by mass spectrometry via exonuclease degradation |
US5381008A (en) * | 1993-05-11 | 1995-01-10 | Mds Health Group Ltd. | Method of plasma mass analysis with reduced space charge effects |
US5376788A (en) * | 1993-05-26 | 1994-12-27 | University Of Manitoba | Apparatus and method for matrix-assisted laser desorption mass spectrometry |
GB9315847D0 (en) * | 1993-07-30 | 1993-09-15 | Isis Innovation | Tag reagent and assay method |
FR2709761B1 (fr) | 1993-09-10 | 1995-11-24 | Pasteur Institut | Procédé de détection de molécules contenant des mésappariements nucléotidiques et de localisation de ces mésappariements, et application à la détection de substitutions ou de délétions de bases . |
US5807522A (en) * | 1994-06-17 | 1998-09-15 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Methods for fabricating microarrays of biological samples |
US5498545A (en) * | 1994-07-21 | 1996-03-12 | Vestal; Marvin L. | Mass spectrometer system and method for matrix-assisted laser desorption measurements |
US5504326A (en) * | 1994-10-24 | 1996-04-02 | Indiana University Foundation | Spatial-velocity correlation focusing in time-of-flight mass spectrometry |
EP0830460A1 (en) * | 1995-04-11 | 1998-03-25 | Trustees Of Boston University | Solid phase sequencing of biopolymers |
US5591969A (en) * | 1995-04-12 | 1997-01-07 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy | Inductive detector for time-of-flight mass spectrometers |
US5625184A (en) | 1995-05-19 | 1997-04-29 | Perseptive Biosystems, Inc. | Time-of-flight mass spectrometry analysis of biomolecules |
WO1996036986A1 (en) | 1995-05-19 | 1996-11-21 | Perseptive Biosystems, Inc. | Methods and apparatus for sequencing polymers with a statistical certainty using mass spectrometry |
US5753439A (en) * | 1995-05-19 | 1998-05-19 | Trustees Of Boston University | Nucleic acid detection methods |
US5700642A (en) | 1995-05-22 | 1997-12-23 | Sri International | Oligonucleotide sizing using immobilized cleavable primers |
US5830655A (en) | 1995-05-22 | 1998-11-03 | Sri International | Oligonucleotide sizing using cleavable primers |
US6146854A (en) * | 1995-08-31 | 2000-11-14 | Sequenom, Inc. | Filtration processes, kits and devices for isolating plasmids |
US5869242A (en) | 1995-09-18 | 1999-02-09 | Myriad Genetics, Inc. | Mass spectrometry to assess DNA sequence polymorphisms |
US5654545A (en) | 1995-09-19 | 1997-08-05 | Bruker-Franzen Analytik Gmbh | Mass resolution in time-of-flight mass spectrometers with reflectors |
WO1997016699A1 (en) * | 1995-10-30 | 1997-05-09 | Trustees Of Boston University | Piezoelectric force sensing apparatus and methods for biopolymer sequencing |
US5716825A (en) * | 1995-11-01 | 1998-02-10 | Hewlett Packard Company | Integrated nucleic acid analysis system for MALDI-TOF MS |
US5641959A (en) | 1995-12-21 | 1997-06-24 | Bruker-Franzen Analytik Gmbh | Method for improved mass resolution with a TOF-LD source |
US5742049A (en) | 1995-12-21 | 1998-04-21 | Bruker-Franzen Analytik Gmbh | Method of improving mass resolution in time-of-flight mass spectrometry |
AU2217597A (en) * | 1996-03-18 | 1997-10-22 | Sequenom, Inc. | Dna sequencing by mass spectrometry |
US5777325A (en) | 1996-05-06 | 1998-07-07 | Hewlett-Packard Company | Device for time lag focusing time-of-flight mass spectrometry |
US5928906A (en) * | 1996-05-09 | 1999-07-27 | Sequenom, Inc. | Process for direct sequencing during template amplification |
US6022688A (en) * | 1996-05-13 | 2000-02-08 | Sequenom, Inc. | Method for dissociating biotin complexes |
DE19628178C1 (de) * | 1996-07-12 | 1997-09-18 | Bruker Franzen Analytik Gmbh | Verfahren zum Beladen von Probenträgern für Massenspektrometer |
US5777324A (en) * | 1996-09-19 | 1998-07-07 | Sequenom, Inc. | Method and apparatus for maldi analysis |
US5864137A (en) * | 1996-10-01 | 1999-01-26 | Genetrace Systems, Inc. | Mass spectrometer |
US5885775A (en) | 1996-10-04 | 1999-03-23 | Perseptive Biosystems, Inc. | Methods for determining sequences information in polynucleotides using mass spectrometry |
US20030129589A1 (en) * | 1996-11-06 | 2003-07-10 | Hubert Koster | Dna diagnostics based on mass spectrometry |
CA2267070A1 (en) | 1996-11-06 | 1998-05-14 | Sequenom, Inc. | Compositions and methods for immobilizing nucleic acids to solid supports |
EP1457496B1 (en) | 1996-11-06 | 2014-01-15 | Sequenom, Inc. | High density immobilization of nucleic acids |
US5900481A (en) | 1996-11-06 | 1999-05-04 | Sequenom, Inc. | Bead linkers for immobilizing nucleic acids to solid supports |
US6248101B1 (en) | 1997-01-22 | 2001-06-19 | Barzell Whitmore Maroon Bells, Inc. | Omni-directional precision instrument platform |
US6207370B1 (en) | 1997-09-02 | 2001-03-27 | Sequenom, Inc. | Diagnostics based on mass spectrometric detection of translated target polypeptides |
US6723564B2 (en) | 1998-05-07 | 2004-04-20 | Sequenom, Inc. | IR MALDI mass spectrometry of nucleic acids using liquid matrices |
-
1996
- 1996-09-19 US US08/710,565 patent/US5777324A/en not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-09-19 EP EP02018808A patent/EP1271609A3/en not_active Withdrawn
- 1997-09-19 CA CA002237946A patent/CA2237946C/en not_active Expired - Fee Related
- 1997-09-19 WO PCT/US1997/016115 patent/WO1998012734A1/en active IP Right Grant
- 1997-09-19 AU AU43423/97A patent/AU724884B2/en not_active Ceased
- 1997-09-19 DE DE69718438T patent/DE69718438T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-19 EP EP97941535A patent/EP0868740B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-19 AT AT97941535T patent/ATE231284T1/de not_active IP Right Cessation
- 1997-09-19 US US08/934,455 patent/US6111251A/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-19 JP JP51475098A patent/JP3601834B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2000
- 2000-01-14 US US09/483,629 patent/US6423966B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2002
- 2002-04-03 US US10/117,558 patent/US6812455B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE69718438T2 (de) | 2003-10-23 |
US20020109085A1 (en) | 2002-08-15 |
US5777324A (en) | 1998-07-07 |
EP0868740A1 (en) | 1998-10-07 |
WO1998012734A1 (en) | 1998-03-26 |
DE69718438D1 (de) | 2003-02-20 |
EP0868740B1 (en) | 2003-01-15 |
US6111251A (en) | 2000-08-29 |
US6812455B2 (en) | 2004-11-02 |
JP2000500915A (ja) | 2000-01-25 |
EP1271609A3 (en) | 2006-05-03 |
CA2237946C (en) | 2003-06-17 |
CA2237946A1 (en) | 1998-03-26 |
AU724884B2 (en) | 2000-10-05 |
EP1271609A2 (en) | 2003-01-02 |
US20020005478A1 (en) | 2002-01-17 |
US6423966B2 (en) | 2002-07-23 |
ATE231284T1 (de) | 2003-02-15 |
AU4342397A (en) | 1998-04-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP3601834B2 (ja) | Maldi分析の方法および装置 | |
US6414306B1 (en) | TLC/MALDI carrier plate and method for using same | |
US20050230615A1 (en) | MALDI-IM-ortho-TOF mass spectrometry with simultaneous positive and negative mode detection | |
EP2140478B1 (en) | Laser desorption - electrospray ion (esi) source for mass spectrometers | |
EP0991930B1 (en) | High density sample holder for analysis of biological samples | |
US7361311B2 (en) | System and method for the preparation of arrays of biological or other molecules | |
US6707038B2 (en) | Method and system using acoustic ejection for selective fluid deposition on a nonuniform sample surface | |
JP2009282038A (ja) | レーザ脱離およびマルチプルリアクションモニタリングを用いる小分子のハイスループット定量のための方法およびシステム | |
GB2437623A (en) | Method and apparatus for sample preparation for imaging mass spectrometry | |
US20110139977A1 (en) | Matrix-assisted laser desorption with high ionization yield | |
US20060110833A1 (en) | Method and apparatus for coupling an analyte supply to an electrodynamic droplet processor | |
GB2441200A (en) | Preparative ion mobility spectrometry | |
GB2434911A (en) | Generation of ions from desorbed analyte molecules | |
JP2005521874A5 (ja) | ||
JP2005513490A (ja) | 質量分析計のための標的プレート及び該標的プレートの使用 | |
US20040063113A1 (en) | Method and apparatus for producing a discrete particle | |
JP3640387B2 (ja) | レーザーアブレーションを用いた高分子の分析方法およびそのシステム | |
EP1434251A2 (en) | High throughput method and apparatus for introducing biological samples into analytical instruments | |
US20040217277A1 (en) | Apparatus and method for surface activation and selective ion generation for MALDI mass spectrometry | |
WO2004075208A2 (en) | Formation of closely packed microspots and irradiation of same |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20040907 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20040921 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20081001 Year of fee payment: 4 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091001 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20101001 Year of fee payment: 6 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20111001 Year of fee payment: 7 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121001 Year of fee payment: 8 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20131001 Year of fee payment: 9 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |