JP3485893B2 - 健康増進用薬味組成物 - Google Patents
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Description
【０００１】発明の分野
本発明は、健康増進用薬味組成物に関し、さらに詳細に
は、ニンニク１〜３０重量％、タマネギ１０〜５０重量
％、ショウガ０.２〜１０重量％、ナツメ５〜４０重量
％、および柑橘類果皮またはその抽出物１０〜５０重量
％、またはナリンジンもしくはヘスペリジン１〜２０重
量％を含む薬味組成物に関する。
は、ニンニク１〜３０重量％、タマネギ１０〜５０重量
％、ショウガ０.２〜１０重量％、ナツメ５〜４０重量
％、および柑橘類果皮またはその抽出物１０〜５０重量
％、またはナリンジンもしくはヘスペリジン１〜２０重
量％を含む薬味組成物に関する。
【０００２】発明の背景
近来、癌および心臓循環器疾患のような疾病にかかる成
人人口数が次第に増加しており、これらの疾患は、食生
活改善によって予防できると報告されている。
人人口数が次第に増加しており、これらの疾患は、食生
活改善によって予防できると報告されている。
【０００３】タマネギ、ニンニクおよびショウガは、韓
国において薬味の製造に通常用いられる原料物質であ
る。ニンニクは、抗癌作用とともに心臓循環器疾患の予
防、血液循環の促進および免疫系強化活性を有すること
が知られている(L. D. Lawson,"Bioactive Organosulfu
r Compounds of Garlic and Garlic products: Role in
Reducing Blood Lipids", in Human Medicinal Agent
s, 306-330, D. Kinghorn and M. F. Balaandrin Eds.,
ACS symposium Series, 534, 1993)。タマネギは、心
臓循環器疾患の予防に有用であり、血中コレステロール
濃度を降下させ、血中高密度リポタンパク質(HDL)濃度
を増加させ、血小板凝集を抑制することが知られている
(J. Carper, Food Pharmach, Batam Books(1989))。
国において薬味の製造に通常用いられる原料物質であ
る。ニンニクは、抗癌作用とともに心臓循環器疾患の予
防、血液循環の促進および免疫系強化活性を有すること
が知られている(L. D. Lawson,"Bioactive Organosulfu
r Compounds of Garlic and Garlic products: Role in
Reducing Blood Lipids", in Human Medicinal Agent
s, 306-330, D. Kinghorn and M. F. Balaandrin Eds.,
ACS symposium Series, 534, 1993)。タマネギは、心
臓循環器疾患の予防に有用であり、血中コレステロール
濃度を降下させ、血中高密度リポタンパク質(HDL)濃度
を増加させ、血小板凝集を抑制することが知られている
(J. Carper, Food Pharmach, Batam Books(1989))。
【０００４】これまで、柑橘類の果皮は廃棄されるか、
動物の飼料または有機質肥料製造用としてのみ用いられ
てきた。乾燥した柑橘類の果皮は、ペクチン、ヘミセル
ロースおよびセルロースのようなアルコール不溶性重合
体５０〜６０ｗｔ％；アルコール可溶性固形物３０〜５
０ｗｔ％(このうち、８０ｗｔ％はグルコース、フルク
トースおよびスクロースからなる)；および少量または
微量のバイオフラボノイド(bioflavonoids)、ビタミ
ン、リモノイド、フェノール系化合物およびオイルを含
む。特に、表１に示す種々のバイオフラボノイドが柑橘
類の果皮に存在する(Horowitz, R. M. et al., J. Org.
Chem., 25, 2183-2187(1960))。バイオフラボノイドの
うち、ヘスペリジンはオレンジ、レモンまたはタンジー
ルミカンの主要成分であり、ナリンジンはグレープフル
ーツの主要成分であり、シトロンにはナリンジンとヘス
ペリジンがほとんど同量入っている。
動物の飼料または有機質肥料製造用としてのみ用いられ
てきた。乾燥した柑橘類の果皮は、ペクチン、ヘミセル
ロースおよびセルロースのようなアルコール不溶性重合
体５０〜６０ｗｔ％；アルコール可溶性固形物３０〜５
０ｗｔ％(このうち、８０ｗｔ％はグルコース、フルク
トースおよびスクロースからなる)；および少量または
微量のバイオフラボノイド(bioflavonoids)、ビタミ
ン、リモノイド、フェノール系化合物およびオイルを含
む。特に、表１に示す種々のバイオフラボノイドが柑橘
類の果皮に存在する(Horowitz, R. M. et al., J. Org.
Chem., 25, 2183-2187(1960))。バイオフラボノイドの
うち、ヘスペリジンはオレンジ、レモンまたはタンジー
ルミカンの主要成分であり、ナリンジンはグレープフル
ーツの主要成分であり、シトロンにはナリンジンとヘス
ペリジンがほとんど同量入っている。
【０００５】
【表１】表Ｉ
【０００６】柑橘類の果皮から分離したバイオフラボノ
イドは、抗酸化、抗癌、抗ウイルスおよび血圧降下活性
を有することが知られている(Saija. A. et al., Free
Radical Biol. Med., 19, 481-486(1995); Matsubara,
Y. et al., Japan Organic Synthesis Chem. Associati
on Journal, 52, 318-327(1994, Mar.); Galati, E.M.
et al., Farmaco., 51(3), 219-221(1996, Mar.); Feli
cia, V., et al., Nutr. Cancer, 26, 167-181(1996);
EP 0352147 A2(1990.1.24); and Kaul, T. N.et al.,
J. Med. Virol., 15, 71-75(1985))。また、柑橘類の果
皮に存在するリモネイドは抗癌活性を有すると報告され
た(Lam, L. K. T., et al., Inhibition of Chemically
Induced Carcinogenesis by Citrus Limonoids, In Fo
od Phytochemicals for Cancer Prevention. Vol. I, A
CS Symposium series No. 546,M. T. Huang, O. Osawa,
C. T. Ho, R. Rosen(eds), 1993)。
イドは、抗酸化、抗癌、抗ウイルスおよび血圧降下活性
を有することが知られている(Saija. A. et al., Free
Radical Biol. Med., 19, 481-486(1995); Matsubara,
Y. et al., Japan Organic Synthesis Chem. Associati
on Journal, 52, 318-327(1994, Mar.); Galati, E.M.
et al., Farmaco., 51(3), 219-221(1996, Mar.); Feli
cia, V., et al., Nutr. Cancer, 26, 167-181(1996);
EP 0352147 A2(1990.1.24); and Kaul, T. N.et al.,
J. Med. Virol., 15, 71-75(1985))。また、柑橘類の果
皮に存在するリモネイドは抗癌活性を有すると報告され
た(Lam, L. K. T., et al., Inhibition of Chemically
Induced Carcinogenesis by Citrus Limonoids, In Fo
od Phytochemicals for Cancer Prevention. Vol. I, A
CS Symposium series No. 546,M. T. Huang, O. Osawa,
C. T. Ho, R. Rosen(eds), 1993)。
【０００７】しかし、現在まで柑橘類果皮またはその抽
出物を含む薬味組成物は報告されていない。本発明者ら
は、健康増進用薬味組成物を開発しようと努力し、タマ
ネギ、ニンニク、ショウガ、ナツメおよび柑橘類果皮ま
たはその抽出物を含有する薬味組成物が癌、高血圧およ
び心臓循環器疾患のような成人病を予防するに非常に有
用であることを発見した。
出物を含む薬味組成物は報告されていない。本発明者ら
は、健康増進用薬味組成物を開発しようと努力し、タマ
ネギ、ニンニク、ショウガ、ナツメおよび柑橘類果皮ま
たはその抽出物を含有する薬味組成物が癌、高血圧およ
び心臓循環器疾患のような成人病を予防するに非常に有
用であることを発見した。
【０００８】発明の要約
したがって、本発明の目的は、新規な健康増進用薬味組
成物を提供することである。
成物を提供することである。
【０００９】発明の詳細な説明
本発明の一実施態様によって、ニンニク１〜３０重量
％、タマネギ１０〜５０重量％、ショウガ０.２〜１０
重量％、ナツメ５〜４０重量％、および柑橘類果皮また
はその抽出物１０〜５０重量％を含む薬味組成物が提供
される。薬味組成物は、オートミール粉末２０〜５０重
量％をさらに含み得、このように製造された薬味組成物
はハンバーガーソースまたはステーキソースの製造に好
ましく用いられる。
％、タマネギ１０〜５０重量％、ショウガ０.２〜１０
重量％、ナツメ５〜４０重量％、および柑橘類果皮また
はその抽出物１０〜５０重量％を含む薬味組成物が提供
される。薬味組成物は、オートミール粉末２０〜５０重
量％をさらに含み得、このように製造された薬味組成物
はハンバーガーソースまたはステーキソースの製造に好
ましく用いられる。
【００１０】好ましくは、本発明の薬味組成物は、ニン
ニク５〜２５重量％、タマネギ１５〜４０重量％、ショ
ウガ０.５〜５重量％、ナツメ１０〜３５重量％および
柑橘類果皮またはその抽出物１５〜４０重量％を含む。
これにオートミール粉末２０〜５０重量％がさらに追加
されていてもよい。
ニク５〜２５重量％、タマネギ１５〜４０重量％、ショ
ウガ０.５〜５重量％、ナツメ１０〜３５重量％および
柑橘類果皮またはその抽出物１５〜４０重量％を含む。
これにオートミール粉末２０〜５０重量％がさらに追加
されていてもよい。
【００１１】一方、該薬味組成物は、柑橘類果皮または
その抽出物の代りにナリンジンまたはヘスペリジン１〜
２０重量％、好ましくは５〜１５重量％を含み得る。
その抽出物の代りにナリンジンまたはヘスペリジン１〜
２０重量％、好ましくは５〜１５重量％を含み得る。
【００１２】さらに、本発明の薬味組成物は、必要に応
じてコショウ、トウガラシ、ワケギ、ネギ、ゴマなどの
付加的成分をさらに含んでいてもよい。
じてコショウ、トウガラシ、ワケギ、ネギ、ゴマなどの
付加的成分をさらに含んでいてもよい。
【００１３】柑橘類とは、タンジールミカン、オレン
ジ、レモン、グレープフルーツ、シトロン、カラタチ(P
oncirus trifoliata)などをいう。化学農薬を用いずに
有機農法によって生産された柑橘類の果皮を用いること
が好ましい。
ジ、レモン、グレープフルーツ、シトロン、カラタチ(P
oncirus trifoliata)などをいう。化学農薬を用いずに
有機農法によって生産された柑橘類の果皮を用いること
が好ましい。
【００１４】本発明の柑橘類果皮抽出物は、水、または
アルコール、Ｃａ(ＯＨ)2およびＮａＯＨの水溶液のよ
うな適当な溶媒を用いて任意の通常の方法によって製造
できる。たとえば、乾燥した柑橘類果皮１ｋｇに２０〜
９５％エタノール３〜３０ｌを加え、混合物を２５〜８
０℃で１〜１２時間放置する。得られた抽出物を濾過
し、濾液を、たとえば、真空中で濃縮して濃縮された果
皮抽出物を得る。他の方法としては、乾燥した柑橘類果
皮１ｋｇに０.１〜２％Ｃａ(ＯＨ)2またはＮａＯＨ水溶
液５〜３０ｌを加え、混合物を２５〜６０℃で１〜５時
間放置する。得られた抽出物を濾過し、１Ｎ ＨＣｌを
加えて濾液をｐＨ４.０〜７.０に調整する。得られた濾
液を１〜１０℃で１０〜４８時間放置する。生成した沈
殿物を回収した後、乾燥して柑橘類果皮抽出物を得る。
アルコール、Ｃａ(ＯＨ)2およびＮａＯＨの水溶液のよ
うな適当な溶媒を用いて任意の通常の方法によって製造
できる。たとえば、乾燥した柑橘類果皮１ｋｇに２０〜
９５％エタノール３〜３０ｌを加え、混合物を２５〜８
０℃で１〜１２時間放置する。得られた抽出物を濾過
し、濾液を、たとえば、真空中で濃縮して濃縮された果
皮抽出物を得る。他の方法としては、乾燥した柑橘類果
皮１ｋｇに０.１〜２％Ｃａ(ＯＨ)2またはＮａＯＨ水溶
液５〜３０ｌを加え、混合物を２５〜６０℃で１〜５時
間放置する。得られた抽出物を濾過し、１Ｎ ＨＣｌを
加えて濾液をｐＨ４.０〜７.０に調整する。得られた濾
液を１〜１０℃で１０〜４８時間放置する。生成した沈
殿物を回収した後、乾燥して柑橘類果皮抽出物を得る。
【００１５】本発明の薬味組成物は、柑橘類果皮または
その抽出物が３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリルＣ
ｏＡ(ＨＭＧ−ＣｏＡ)還元酵素活性およびアシルＣｏＡ
−コレステロール−ｏ−アシルトランスフェラーゼ(Ａ
ＣＡＴ)活性に対して抑制効果を示すため、高い血中コ
レステロール濃度によって惹起される種々の心臓循環器
疾患を予防するため健康に有益である。また、柑橘類果
皮またはその抽出物は抗癌、抗ウイルスおよび血圧降下
活性のような種々の健康増進作用を示す。さらに、これ
に含まれたタマネギ、ニンニク、ショウガおよびナツメ
も心臓循環器疾患に対して予防活性を有する。
その抽出物が３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリルＣ
ｏＡ(ＨＭＧ−ＣｏＡ)還元酵素活性およびアシルＣｏＡ
−コレステロール−ｏ−アシルトランスフェラーゼ(Ａ
ＣＡＴ)活性に対して抑制効果を示すため、高い血中コ
レステロール濃度によって惹起される種々の心臓循環器
疾患を予防するため健康に有益である。また、柑橘類果
皮またはその抽出物は抗癌、抗ウイルスおよび血圧降下
活性のような種々の健康増進作用を示す。さらに、これ
に含まれたタマネギ、ニンニク、ショウガおよびナツメ
も心臓循環器疾患に対して予防活性を有する。
【００１６】このような卓越した効能にもかかわらず、
本発明の薬味組成物は動物実験において毒性や有糸分裂
(mitogenicity)をほどんど示さない。さらに詳しくは、
本薬味組成物は５０ｋｇ体重のヒトに対する経口投与量
５０〜１００ｇ/ｋｇに相当する１,０００ｍｇ/ｋｇの
量をマウスに経口投与しても毒性を示さない。また、柑
橘類果皮抽出物は肝機能に対する副作用を惹起しない。
本発明の薬味組成物は動物実験において毒性や有糸分裂
(mitogenicity)をほどんど示さない。さらに詳しくは、
本薬味組成物は５０ｋｇ体重のヒトに対する経口投与量
５０〜１００ｇ/ｋｇに相当する１,０００ｍｇ/ｋｇの
量をマウスに経口投与しても毒性を示さない。また、柑
橘類果皮抽出物は肝機能に対する副作用を惹起しない。
【００１７】また、本発明の薬味組成物は、ニンニク、
タマネギ、ショウガ、ナツメおよび柑橘類果皮またはそ
の抽出物を混合し、生成した混合物に水を加えた後混合
物を混和することによって製造できる。混和した薬味組
成物を乾燥した後粉砕することによって粉末状の薬味組
成物が製造できる。本発明の薬味組成物の製造におい
て、ニンニク、タマネギおよびショウガは、皮を剥いて
水で洗浄した後用い、ナツメは水で洗浄した後種を除去
して用いる。特に、ナツメを薬味組成物に加えることに
よって本薬味組成物は非常に優れた味と香りを有する。
タマネギ、ショウガ、ナツメおよび柑橘類果皮またはそ
の抽出物を混合し、生成した混合物に水を加えた後混合
物を混和することによって製造できる。混和した薬味組
成物を乾燥した後粉砕することによって粉末状の薬味組
成物が製造できる。本発明の薬味組成物の製造におい
て、ニンニク、タマネギおよびショウガは、皮を剥いて
水で洗浄した後用い、ナツメは水で洗浄した後種を除去
して用いる。特に、ナツメを薬味組成物に加えることに
よって本薬味組成物は非常に優れた味と香りを有する。
【００１８】健康増進または疾病予防の目的で、本発明
の薬味組成物を食品１ｋｇ当り１０〜１００ｇの量で用
いることができる。たとえば、ハンバーガーステーキを
作るとき本発明の薬味組成物を加えるか、魚、肉類、ま
たはニワトリ、アヒル、七面鳥などの家禽類を本発明の
薬味組成物とともに料理することによって健康増進食品
を製造することができる。また、本発明の薬味組成物は
調理された食品に加えるか、通常の薬味とともに用いる
ことができる。
の薬味組成物を食品１ｋｇ当り１０〜１００ｇの量で用
いることができる。たとえば、ハンバーガーステーキを
作るとき本発明の薬味組成物を加えるか、魚、肉類、ま
たはニワトリ、アヒル、七面鳥などの家禽類を本発明の
薬味組成物とともに料理することによって健康増進食品
を製造することができる。また、本発明の薬味組成物は
調理された食品に加えるか、通常の薬味とともに用いる
ことができる。
【００１９】下記実施例は本発明をさらに詳細に説明す
るためのものであり、本発明の範囲を制限しない。
るためのものであり、本発明の範囲を制限しない。
【００２０】また、下記固体混合物中の固体、液体中の
液体、および液体中の固体に対して下記に与えられた百
分率は、各々重量/重量、体積/体積および重量/体積に
基づいたものであり、特に断らない限りすべての反応は
室温で行われた。
液体、および液体中の固体に対して下記に与えられた百
分率は、各々重量/重量、体積/体積および重量/体積に
基づいたものであり、特に断らない限りすべての反応は
室温で行われた。
【００２１】実施例１：柑橘類果皮抽出物の製造
(１)エタノールを用いる方法
柑橘(済州島、韓国)の果皮を室温で乾燥した後、乾燥し
た柑橘類果皮５００ｇに３０％エタノール５ｌを加え
た。果皮を６０℃で５時間抽出した。この抽出物を綿織
物を通して濾過した後、濾液を真空濃縮してシロップ状
抽出物１９０ｇを得た。
た柑橘類果皮５００ｇに３０％エタノール５ｌを加え
た。果皮を６０℃で５時間抽出した。この抽出物を綿織
物を通して濾過した後、濾液を真空濃縮してシロップ状
抽出物１９０ｇを得た。
【００２２】前記のように得られた柑橘類果皮抽出物の
成分を分析するために、生成した抽出物５.０μｌを用
いて３７％メタノールで予め平衡化し、３０℃に維持し
てリクロソルブ(Lichrosorb)ＲＰ−８カラム(５μｍ、
４ｘ２５０ｍｍ)を用いる高性能液体クロマトグラフィ
ー(ＨＰＬＣ)を行った。抽出物は３７％メタノールで
１.０ｍｌ/分の流速で溶出させた。ヘスペリジンおよび
ナリンジン(Sigma Chemical Co., 米国)を最終濃度が各
々０.１、０.２、０、３、０.４および０.５ｍｇ/ｍｌ
になるようにメタノールに溶解して標準溶液を製造し、
前記と同様な条件でＨＰＬＣを行なった。溶出物をＵＶ
−ＶＩＳ分光光度計(spectrophotometer)を用いて２８
０ｎｍで検出し、柑橘類果皮抽出物と標準溶液のＨＰＬ
Ｃスキャン(scan)を比べてヘスペリジンおよびナリンジ
ンの含量を計算した。柑橘類果皮抽出物はヘスペリジン
５.１ｇを含むことが分かった。
成分を分析するために、生成した抽出物５.０μｌを用
いて３７％メタノールで予め平衡化し、３０℃に維持し
てリクロソルブ(Lichrosorb)ＲＰ−８カラム(５μｍ、
４ｘ２５０ｍｍ)を用いる高性能液体クロマトグラフィ
ー(ＨＰＬＣ)を行った。抽出物は３７％メタノールで
１.０ｍｌ/分の流速で溶出させた。ヘスペリジンおよび
ナリンジン(Sigma Chemical Co., 米国)を最終濃度が各
々０.１、０.２、０、３、０.４および０.５ｍｇ/ｍｌ
になるようにメタノールに溶解して標準溶液を製造し、
前記と同様な条件でＨＰＬＣを行なった。溶出物をＵＶ
−ＶＩＳ分光光度計(spectrophotometer)を用いて２８
０ｎｍで検出し、柑橘類果皮抽出物と標準溶液のＨＰＬ
Ｃスキャン(scan)を比べてヘスペリジンおよびナリンジ
ンの含量を計算した。柑橘類果皮抽出物はヘスペリジン
５.１ｇを含むことが分かった。
【００２３】また、柑橘類果物抽出物の組成は、水分６
５％、糖２８％(果糖１１％、グルコース１１％および
スクロース６％)、ヘスペリジン２.７％およびその他灰
粉などの微量成分を含むと分析された。
５％、糖２８％(果糖１１％、グルコース１１％および
スクロース６％)、ヘスペリジン２.７％およびその他灰
粉などの微量成分を含むと分析された。
【００２４】(２)Ｃａ(ＯＨ)2を用いる方法
柑橘(済州島、韓国)の果皮を室温で乾燥し、乾燥した果
皮５００ｇに０.５％Ｃａ(ＯＨ)2溶液５ｌを加えた。室
温でかき混ぜながら１時間果皮を抽出し、得られた抽出
物を綿織物を通して濾過した。濾液に１Ｎ ＨＣｌ溶液
を加えてｐＨを４.５に調整した。前記と同様な手順を
繰り返して第２濾液を得、これをｐＨ６.８に調整し
た。このように得られた二つの濾液を５℃で２４時間放
置して沈澱を形成させた。このように得られた沈澱物を
回収し、乾燥して各々５ｇおよび１０ｇの粉末を得た。
粉末をＨＰＬＣで分析して柑橘類果皮抽出物がヘスペリ
ジン３.２ｇおよび６.５５ｇ(純度：６４％および６５
％)を各々含むことを確認した。
皮５００ｇに０.５％Ｃａ(ＯＨ)2溶液５ｌを加えた。室
温でかき混ぜながら１時間果皮を抽出し、得られた抽出
物を綿織物を通して濾過した。濾液に１Ｎ ＨＣｌ溶液
を加えてｐＨを４.５に調整した。前記と同様な手順を
繰り返して第２濾液を得、これをｐＨ６.８に調整し
た。このように得られた二つの濾液を５℃で２４時間放
置して沈澱を形成させた。このように得られた沈澱物を
回収し、乾燥して各々５ｇおよび１０ｇの粉末を得た。
粉末をＨＰＬＣで分析して柑橘類果皮抽出物がヘスペリ
ジン３.２ｇおよび６.５５ｇ(純度：６４％および６５
％)を各々含むことを確認した。
【００２５】(３)ＮａＯＨを用いる方法
柑橘(済州島、韓国)の果皮を室温で乾燥し、乾燥した果
皮５００ｇに０.５％ＮａＯＨ ５ｌを加えた。室温で
かき混ぜながら１時間果皮を抽出し、得られた抽出物を
綿織物に通して濾過した。濾液に１Ｎ ＨＣｌ溶液を加
えてｐＨを４.５に調整した。前記と同様な手順を繰り
返して第２濾液を得、これをｐＨ６.８に調整した。こ
のように得られた二つの濾液を５℃で２４時間放置して
沈澱を形成させた。このように得られた沈澱物を回収
し、乾燥して各々４４ｇおよび４９ｇの粉末を得た。粉
末をＨＰＬＣで分析して柑橘類果皮抽出物がヘスペリジ
ン１３.６ｇおよび９.８ｇ(純度：３１％および２０％)
を各々含むことを確認した。
皮５００ｇに０.５％ＮａＯＨ ５ｌを加えた。室温で
かき混ぜながら１時間果皮を抽出し、得られた抽出物を
綿織物に通して濾過した。濾液に１Ｎ ＨＣｌ溶液を加
えてｐＨを４.５に調整した。前記と同様な手順を繰り
返して第２濾液を得、これをｐＨ６.８に調整した。こ
のように得られた二つの濾液を５℃で２４時間放置して
沈澱を形成させた。このように得られた沈澱物を回収
し、乾燥して各々４４ｇおよび４９ｇの粉末を得た。粉
末をＨＰＬＣで分析して柑橘類果皮抽出物がヘスペリジ
ン１３.６ｇおよび９.８ｇ(純度：３１％および２０％)
を各々含むことを確認した。
【００２６】実施例２：薬味組成物の製造
韓国産タマネギ、ニンニクおよびショウガは皮を剥いた
後水で洗浄した。ナツメは水で洗浄した後種を除去し
た。化学農薬を用いずに有機農法によって生産された柑
橘類果皮を水で洗浄した。これらの材料を日陰で風乾す
るか、またはオーブンで乾燥した。乾燥したナツメおよ
び柑橘類果皮を粉砕機で粉末化した。
後水で洗浄した。ナツメは水で洗浄した後種を除去し
た。化学農薬を用いずに有機農法によって生産された柑
橘類果皮を水で洗浄した。これらの材料を日陰で風乾す
るか、またはオーブンで乾燥した。乾燥したナツメおよ
び柑橘類果皮を粉砕機で粉末化した。
【００２７】乾燥タマネギ２００ｇ、乾燥ニンニク５０
ｇ、乾燥ショウガ１０ｇ、ナツメ粉末８０ｇおよび柑橘
類果皮粉末２００ｇを混合し、これに水１,０００ｍｌ
を加えた後混合物をブレンダーで均質化した。
ｇ、乾燥ショウガ１０ｇ、ナツメ粉末８０ｇおよび柑橘
類果皮粉末２００ｇを混合し、これに水１,０００ｍｌ
を加えた後混合物をブレンダーで均質化した。
【００２８】長期保存のために、前記のように製造され
た薬味組成物を１２１℃で滅菌するか、または乾燥後粉
末化した。
た薬味組成物を１２１℃で滅菌するか、または乾燥後粉
末化した。
【００２９】実施例３：ステーキソースの製造
乾燥タマネギ、ニンニクおよびショウガ、ナツメ粉末お
よび柑橘類果皮粉末を実施例２と同様に製造した。乾燥
タマネギ２００ｇ、乾燥ニンニク５０ｇ、乾燥ショウガ
１０ｇ、ナツメ粉末８０ｇおよび柑橘類果皮粉末２００
ｇおよびオートミール粉末２６０ｇを混合し、これに水
１，０００ｍｌを加えた後混合物をブレンダーで均質化
した。
よび柑橘類果皮粉末を実施例２と同様に製造した。乾燥
タマネギ２００ｇ、乾燥ニンニク５０ｇ、乾燥ショウガ
１０ｇ、ナツメ粉末８０ｇおよび柑橘類果皮粉末２００
ｇおよびオートミール粉末２６０ｇを混合し、これに水
１，０００ｍｌを加えた後混合物をブレンダーで均質化
した。
【００３０】長期保存のために、前記のように製造され
た薬味組成物を１２１℃で滅菌するか、または乾燥後粉
末化した。
た薬味組成物を１２１℃で滅菌するか、または乾燥後粉
末化した。
【００３１】実施例４〜８：薬味組成物の製造
表IIに示す成分を用いて実施例２または３の操作に従っ
て種々の薬味組成物を製造した。
て種々の薬味組成物を製造した。
【００３２】
【表２】表II
注)＊実施例１(１)で製造したもの
【００３３】実施例９：本発明の薬味組成物摂取による
有益な効果：動物試験 体重が各々９０〜１１０ｇである４週齢スプラグダウリ
ーラット(Taihan laboratory animal center, Korea)２
０匹を乱塊法(randomized block design)に従って２つ
の食餌群に分けた。２群のラットに２種類の異なる高コ
レステロール食餌、すなわち、１％コレステロールを含
むＡＩＮ−７６実験動物食餌(ICN Biochemicals, Cleve
land, OH, U.S.A.)(対照群)および１％コレステロール
と１２.２％薬味組成物(４.５％柑橘類果皮粉末、２％
ナツメ粉末、４.５％タマネギ粉末、０.２％ショウガ粉
末および１％ニンニク粉末)を含むＡＩＮ−７６実験動
物食餌を各々摂取させた。２群に摂取させた食餌組成を
表IIIに示す。
有益な効果：動物試験 体重が各々９０〜１１０ｇである４週齢スプラグダウリ
ーラット(Taihan laboratory animal center, Korea)２
０匹を乱塊法(randomized block design)に従って２つ
の食餌群に分けた。２群のラットに２種類の異なる高コ
レステロール食餌、すなわち、１％コレステロールを含
むＡＩＮ−７６実験動物食餌(ICN Biochemicals, Cleve
land, OH, U.S.A.)(対照群)および１％コレステロール
と１２.２％薬味組成物(４.５％柑橘類果皮粉末、２％
ナツメ粉末、４.５％タマネギ粉末、０.２％ショウガ粉
末および１％ニンニク粉末)を含むＡＩＮ−７６実験動
物食餌を各々摂取させた。２群に摂取させた食餌組成を
表IIIに示す。
【００３４】
【表３】表III
*は、テクラドプレミアー社(TEKLAD premier Co., Madi
son, WI, U. S. A.)から購入した。
son, WI, U. S. A.)から購入した。
【００３５】ラットに水とともに特定食餌を８週間自由
に摂取させ、摂取量を毎日記録し、ラットの体重を７日
ごとに測定した後飼育記録を分析した。すべてのラット
は正常の成長速度を示し、食餌摂取量と体重増加量にお
いては２群間の差はほとんどなかった。
に摂取させ、摂取量を毎日記録し、ラットの体重を７日
ごとに測定した後飼育記録を分析した。すべてのラット
は正常の成長速度を示し、食餌摂取量と体重増加量にお
いては２群間の差はほとんどなかった。
【００３６】その後、薬味組成物の投与がラットの血漿
コレステロールおよび中性脂質含量に及ぼす影響を次の
ように調査した。
コレステロールおよび中性脂質含量に及ぼす影響を次の
ように調査した。
【００３７】２つの食餌群のラットから採取した血液を
室温で２時間静置した後、３,０００ｒｐｍで１５分間
遠心分離して上澄液(血清)を得、これを分析時まで冷凍
庫に保管した。
室温で２時間静置した後、３,０００ｒｐｍで１５分間
遠心分離して上澄液(血清)を得、これを分析時まで冷凍
庫に保管した。
【００３８】各血液試料の総コレステロール(TC)濃度は
血液化学分析器(CIBA Corning 550Express, U.S.A.)を
用いて直接測定した。また、ＨＤＬ−コレステロール濃
度を測定するために、硫酸デキストランおよび硫酸マグ
ネシウムを用いるＨＤＬ定量方法(Warnick G. R., et a
l., Clin Chem., 28:1379-1388(1982))を応用して製造
したＨＤＬ測定用試薬(Chiron Diagnostics Co., U.S.
A.)を１：１０(ｖ/ｖ)の比率で各血清試料と混合し、こ
の混合物を２０〜２５℃の培養器で５分間反応させた。
反応物を２,５００ｒｐｍで１０分間遠心分離して上澄
液を得た後、これを血液化学分析器で分析した。
血液化学分析器(CIBA Corning 550Express, U.S.A.)を
用いて直接測定した。また、ＨＤＬ−コレステロール濃
度を測定するために、硫酸デキストランおよび硫酸マグ
ネシウムを用いるＨＤＬ定量方法(Warnick G. R., et a
l., Clin Chem., 28:1379-1388(1982))を応用して製造
したＨＤＬ測定用試薬(Chiron Diagnostics Co., U.S.
A.)を１：１０(ｖ/ｖ)の比率で各血清試料と混合し、こ
の混合物を２０〜２５℃の培養器で５分間反応させた。
反応物を２,５００ｒｐｍで１０分間遠心分離して上澄
液を得た後、これを血液化学分析器で分析した。
【００３９】コンピューターソフトウエア(Microsoft E
xcel, Ver. 7.0)を用いて各々のマウスから分析した値
の有意性分析(student t-test)を実施した。結果を表IV
に示す。
xcel, Ver. 7.0)を用いて各々のマウスから分析した値
の有意性分析(student t-test)を実施した。結果を表IV
に示す。
【００４０】
【表４】表IV
【００４１】前記表IVから分かるように、本発明の薬味
組成物を投与したラットの血中総コレステロール量は対
照群に比べて１０％減少した。特に、血清ＨＤＬ濃度
は、薬味組成物群において対照群に比べて約５０％増加
した。この結果は、本発明の薬味組成物の摂取が血清Ｈ
ＤＬ濃度を増加させるとともに、血清コレステロール濃
度を低下させることによって心臓循環器疾患の予防に寄
与することを証明している。
組成物を投与したラットの血中総コレステロール量は対
照群に比べて１０％減少した。特に、血清ＨＤＬ濃度
は、薬味組成物群において対照群に比べて約５０％増加
した。この結果は、本発明の薬味組成物の摂取が血清Ｈ
ＤＬ濃度を増加させるとともに、血清コレステロール濃
度を低下させることによって心臓循環器疾患の予防に寄
与することを証明している。
【００４２】実施例１０：経口投与された薬味組成物の
毒性 ７〜８週齢の特定の病原体がない(specific pathogens
free)ＩＣＲマウスであって、体重２５〜２９ｇの雌マ
ウス(６匹)と体重３４〜３８ｇの雄マウス(６匹)を温度
２２±１℃、湿度５５±５％、および光周期１２Ｌ/１
２Ｄの条件下で飼育した。飼料(マウスおよびラット飼
料、Cheiljedang Co., Korea)および水は滅菌してマウ
スに摂取させた。
毒性 ７〜８週齢の特定の病原体がない(specific pathogens
free)ＩＣＲマウスであって、体重２５〜２９ｇの雌マ
ウス(６匹)と体重３４〜３８ｇの雄マウス(６匹)を温度
２２±１℃、湿度５５±５％、および光周期１２Ｌ/１
２Ｄの条件下で飼育した。飼料(マウスおよびラット飼
料、Cheiljedang Co., Korea)および水は滅菌してマウ
スに摂取させた。
【００４３】実施例２で製造した薬味組成物を０.５％
ツイーン(商標)８０に１００ｍｇ/ｍｌの濃度で溶解し
た後、この溶液をマウス体重２０ｇ当り０.２ｍｌの量
でマウスに経口投与した。溶液は１回投与し、投与後
１、４、８および１２時間、およびその後１２時間ごと
にマウスにおける副作用の徴候または致死について１０
日間観察した。マウスの体重変化を毎日記録して薬味組
成物の効果を調査した。また、１０日目にマウスを屠殺
し、内部臓器を肉眼で検査した。
ツイーン(商標)８０に１００ｍｇ/ｍｌの濃度で溶解し
た後、この溶液をマウス体重２０ｇ当り０.２ｍｌの量
でマウスに経口投与した。溶液は１回投与し、投与後
１、４、８および１２時間、およびその後１２時間ごと
にマウスにおける副作用の徴候または致死について１０
日間観察した。マウスの体重変化を毎日記録して薬味組
成物の効果を調査した。また、１０日目にマウスを屠殺
し、内部臓器を肉眼で検査した。
【００４４】すべてのマウスは１０日目も生存し、薬味
組成物は１,０００ｍｇ/ｋｇの投与量で毒性を示さなか
った。剖検の結果、マウスには何ら病理学的異常も表れ
ておらず、１０日間の試験期間中体重の減少は観察され
なかった。したがって、薬味組成物を動物に経口投与し
たとき毒性がないという結論を下した。
組成物は１,０００ｍｇ/ｋｇの投与量で毒性を示さなか
った。剖検の結果、マウスには何ら病理学的異常も表れ
ておらず、１０日間の試験期間中体重の減少は観察され
なかった。したがって、薬味組成物を動物に経口投与し
たとき毒性がないという結論を下した。
【００４５】実施例１１：ＡＣＡＴ阻害における柑橘類
果皮抽出物摂取の効果 (段階１)試験動物に対する柑橘類果皮抽出物の投与 体重が各々９０〜１１０ｇである４週齢のスプラグダウ
リーラット(Taihan laboratory animal center, Korea)
２０匹を乱塊法に従って２つの食餌群に分けた。２群の
ラットに２種類の異なる高コレステロール食餌、すなわ
ち、１％コレステロールを含むＡＩＮ−７６実験動物食
餌(ICN Biochemicals, Cleveland, OH,U.S.A.)(対照群)
および１％コレステロールと実施例１(１)で得られた１
６.７％柑橘類果皮抽出物を含むＡＩＮ−７６実験動物
食餌を各々摂取させた。２群に摂取させた食餌組成を表
Ｖに示す。
果皮抽出物摂取の効果 (段階１)試験動物に対する柑橘類果皮抽出物の投与 体重が各々９０〜１１０ｇである４週齢のスプラグダウ
リーラット(Taihan laboratory animal center, Korea)
２０匹を乱塊法に従って２つの食餌群に分けた。２群の
ラットに２種類の異なる高コレステロール食餌、すなわ
ち、１％コレステロールを含むＡＩＮ−７６実験動物食
餌(ICN Biochemicals, Cleveland, OH,U.S.A.)(対照群)
および１％コレステロールと実施例１(１)で得られた１
６.７％柑橘類果皮抽出物を含むＡＩＮ−７６実験動物
食餌を各々摂取させた。２群に摂取させた食餌組成を表
Ｖに示す。
【００４６】
【表５】表Ｖ
*1は、テクラドプレミアー社(TEKLAD premier Co., Mad
ison, WI, U. S. A.)から購入した。*2 は、０.１％ヘスペリジン相当量
ison, WI, U. S. A.)から購入した。*2 は、０.１％ヘスペリジン相当量
【００４７】ラットに水とともに特定食餌を６週間自由
に摂取させ、食餌摂取量を毎日記録し、ラットの体重を
７日ごとに測定した後記録を分析した。すべてのラット
は正常の成長速度を示し、食餌摂取量と体重増加量にお
いて２群間の差はほとんど観察されなかった。
に摂取させ、食餌摂取量を毎日記録し、ラットの体重を
７日ごとに測定した後記録を分析した。すべてのラット
は正常の成長速度を示し、食餌摂取量と体重増加量にお
いて２群間の差はほとんど観察されなかった。
【００４８】(段階２)ミクロソームの製造
ラットに投与した柑橘類果皮抽出物がＡＣＡＴ酵素活性
に及ぼす影響を調査するために肝組織からミクロソーム
を分離して酵素源として用いた。
に及ぼす影響を調査するために肝組織からミクロソーム
を分離して酵素源として用いた。
【００４９】まず、２群のラットを斬首して屠殺した
後、肝臓を切り取った。肝組織１ｇを均質化媒質５ｍｌ
(０.１Ｍリン酸カリウム(ｐＨ７.４)、０.１ｍＭ ＥＤ
ＴＡおよび１０ｍＭ β−メルカプトエタノール)中で
ホモジネートした。この均質液を４℃で３,０００ｘｇ
で１０分間遠心分離し、得られた上澄液を４℃で１５分
間１５,０００ｘｇでさらに遠心分離して上澄液を得
た。上澄液を超遠心分離チューブ(ベックマン社)に入
れ、４℃で１００，０００ｘｇで１時間遠心分離してミ
クロソームペレットを得た後、これを均質化溶液３ｍｌ
に懸濁し、４℃で１００,０００ｘｇで１時間遠心分離
した。得られたペレットを前記均質化溶液１ｍｌに懸濁
させた。懸濁液中のタンパク質濃度をローリ(Lowry)ら
の方法で測定した後、タンパク質の濃度を４〜８ｍｇ/
ｍｌに調整した。この懸濁液を超低温フリーザー(Biofr
eezer, Forma Scientific Inc.)に保管した。
後、肝臓を切り取った。肝組織１ｇを均質化媒質５ｍｌ
(０.１Ｍリン酸カリウム(ｐＨ７.４)、０.１ｍＭ ＥＤ
ＴＡおよび１０ｍＭ β−メルカプトエタノール)中で
ホモジネートした。この均質液を４℃で３,０００ｘｇ
で１０分間遠心分離し、得られた上澄液を４℃で１５分
間１５,０００ｘｇでさらに遠心分離して上澄液を得
た。上澄液を超遠心分離チューブ(ベックマン社)に入
れ、４℃で１００，０００ｘｇで１時間遠心分離してミ
クロソームペレットを得た後、これを均質化溶液３ｍｌ
に懸濁し、４℃で１００,０００ｘｇで１時間遠心分離
した。得られたペレットを前記均質化溶液１ｍｌに懸濁
させた。懸濁液中のタンパク質濃度をローリ(Lowry)ら
の方法で測定した後、タンパク質の濃度を４〜８ｍｇ/
ｍｌに調整した。この懸濁液を超低温フリーザー(Biofr
eezer, Forma Scientific Inc.)に保管した。
【００５０】(段階３)ＡＣＡＴ分析
１ｍｇ/ｍｌ濃度のコレステロールアセトン溶液６.６７
μｌを１０％トリトンＷＲ−１３３９(Sigma Co.)アセ
トン溶液６μｌと混合した後、窒素気流下アセトンを蒸
発させて混合物から除去した。得られた混合物に蒸留水
を加えてコレステロールの濃度が３０ｍｇ/ｍｌになる
ようにした。
μｌを１０％トリトンＷＲ−１３３９(Sigma Co.)アセ
トン溶液６μｌと混合した後、窒素気流下アセトンを蒸
発させて混合物から除去した。得られた混合物に蒸留水
を加えてコレステロールの濃度が３０ｍｇ/ｍｌになる
ようにした。
【００５１】前記で得られたコレステロール水溶液１０
μｌに、１Ｍリン酸カリウム１０μｌ(ｐＨ７.４)、０.
６ｍＭウシ血清アルブミン(ＢＳＡ)５μｌ、段階２で得
られたミクロソーム溶液１０μｌおよび蒸留水５５μｌ
を加えた(総９０μｌ)。混合物を３７℃水浴中で３０分
間予備反応させた。
μｌに、１Ｍリン酸カリウム１０μｌ(ｐＨ７.４)、０.
６ｍＭウシ血清アルブミン(ＢＳＡ)５μｌ、段階２で得
られたミクロソーム溶液１０μｌおよび蒸留水５５μｌ
を加えた(総９０μｌ)。混合物を３７℃水浴中で３０分
間予備反応させた。
【００５２】(１−14Ｃ)オレオイル−ＣｏＡ溶液１０μ
ｌ(０.０５μＣｉ、最終濃度：１０μＭ)を予備反応さ
せた混合物に加え、生成した混合物を３７℃水浴中で３
０分間反応させた。これに、イソプロパノール：ヘプタ
ン混合溶液(４：１(ｖ/ｖ))５００μl、ヘプタン３００
μlおよび０.１Ｍリン酸カリウム２００μl(ｐＨ７.４)
を加え、混合物をボルテックス(vortex)混合器で激しく
混合した後、室温で２分間静置した。
ｌ(０.０５μＣｉ、最終濃度：１０μＭ)を予備反応さ
せた混合物に加え、生成した混合物を３７℃水浴中で３
０分間反応させた。これに、イソプロパノール：ヘプタ
ン混合溶液(４：１(ｖ/ｖ))５００μl、ヘプタン３００
μlおよび０.１Ｍリン酸カリウム２００μl(ｐＨ７.４)
を加え、混合物をボルテックス(vortex)混合器で激しく
混合した後、室温で２分間静置した。
【００５３】生成した上澄液２００μlをシンチレーシ
ョン瓶に入れ、これにシンチレーション液(Lumac社)４
ｍｌを加えた。この混合物の放射線量を１４５０マイク
ロベータ液体シンチレーション計数器(1450 Microbeta
liquid scintillation counter, Wallacoy, Finland)で
測定した。ＡＣＡＴ活性は、タンパク質１ｍｇ当り１分
間に合成されたオレイン酸コレステリルのピコモル(ピ
コモル/分/ｍｇタンパク質)で計算した。その結果を表V
Iに示す。
ョン瓶に入れ、これにシンチレーション液(Lumac社)４
ｍｌを加えた。この混合物の放射線量を１４５０マイク
ロベータ液体シンチレーション計数器(1450 Microbeta
liquid scintillation counter, Wallacoy, Finland)で
測定した。ＡＣＡＴ活性は、タンパク質１ｍｇ当り１分
間に合成されたオレイン酸コレステリルのピコモル(ピ
コモル/分/ｍｇタンパク質)で計算した。その結果を表V
Iに示す。
【００５４】
【表６】表VI
【００５５】表VIから分かるように、柑橘類果皮抽出物
群のラットから観察されたＡＣＡＴ活性は対照群に比べ
て３２％低かった。
群のラットから観察されたＡＣＡＴ活性は対照群に比べ
て３２％低かった。
【００５６】実施例１２：ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害
における柑橘類果皮抽出物摂取の効果 (段階１)ミクロソームの製造 ラットに投与した柑橘類果皮抽出物が、肝においてコレ
ステロール合成の調節酵素であるＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵
素の活性に及ぼす影響を調査するために、肝組織からミ
クロソームを分離して酵素源として用いた。
における柑橘類果皮抽出物摂取の効果 (段階１)ミクロソームの製造 ラットに投与した柑橘類果皮抽出物が、肝においてコレ
ステロール合成の調節酵素であるＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵
素の活性に及ぼす影響を調査するために、肝組織からミ
クロソームを分離して酵素源として用いた。
【００５７】まず、実施例１１の段階１と同様に調製し
た２群のラットを斬首して屠殺し、肝臓を切り取った
後、直ちに氷冷均質化媒質(５０ｍＭリン酸カリウム(ｐ
Ｈ７.４)、０.２ｍＭスクロース、２ｍＭジチオトレイ
トール(ＤＴＴ)に入れた。ワーリングブレンダー(Warin
g blender)を用いて肝臓を１５秒間均質化媒質(肝１ｇ
当り媒質２ｍｌ)中で均質化した(Potter-Elvehjem型ガ
ラスホモジナイザーでモーターで駆動されるテフロン内
筒で３回実施)。均質液を１５,０００ｘｇで１０分間遠
心分離し、得られた上澄液を１００,０００ｘｇで７５
分間遠心分離してミクロソームペレットを得た後、これ
を５０ｍＭ ＥＤＴＡを含む均質化媒質にさらに懸濁さ
せ、１００,０００ｘｇで６０分間遠心分離した。ミク
ロソームを含む上澄液を酵素源として用いた。
た２群のラットを斬首して屠殺し、肝臓を切り取った
後、直ちに氷冷均質化媒質(５０ｍＭリン酸カリウム(ｐ
Ｈ７.４)、０.２ｍＭスクロース、２ｍＭジチオトレイ
トール(ＤＴＴ)に入れた。ワーリングブレンダー(Warin
g blender)を用いて肝臓を１５秒間均質化媒質(肝１ｇ
当り媒質２ｍｌ)中で均質化した(Potter-Elvehjem型ガ
ラスホモジナイザーでモーターで駆動されるテフロン内
筒で３回実施)。均質液を１５,０００ｘｇで１０分間遠
心分離し、得られた上澄液を１００,０００ｘｇで７５
分間遠心分離してミクロソームペレットを得た後、これ
を５０ｍＭ ＥＤＴＡを含む均質化媒質にさらに懸濁さ
せ、１００,０００ｘｇで６０分間遠心分離した。ミク
ロソームを含む上澄液を酵素源として用いた。
【００５８】(段階２)ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素測定
ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素の活性は、シャピロらの方法(B
iochemica et Biophysica Acta, 370, 369〜377(1974))
に従って、[14Ｃ]ＨＭＧ−ＣｏＡを用いて次のように測
定した。
iochemica et Biophysica Acta, 370, 369〜377(1974))
に従って、[14Ｃ]ＨＭＧ−ＣｏＡを用いて次のように測
定した。
【００５９】段階１で得られたミクロソームを含む上澄
液中の酵素を３７℃で３０分間活性化させた。反応チュ
ーブにＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素分析緩衝溶液２０μｌ
(０.２５Ｍリン酸カリウム(ｐＨ７.０)、８.７５ｍＭ
ＥＤＴＡ、２５ｍＭ ＤＴＴ、０.４５Ｍ ＫＣｌおよ
び０.２５ｍｇ/ｍｌ ＢＳＡ)、５０ｍＭ ＮＡＤＰＨ
５μｌ、[14Ｃ]ＨＭＧ−ＣｏＡ ５μｌ(０.０５μＣｉ
/チューブ、最終濃度：１２０μＭ)、および活性化した
ミクロソーム酵素１０μｌ(０.０３〜０.０４ｍｇ)を加
え、混合物を３７℃で３０分間反応させた。混合物に６
Ｍ ＨＣｌ １０μｌを加えて反応を終了させ、混合物
を３７℃で１５分間反応させて生成物(メバロネート)が
完全にラクトン化されるようにした。１０,０００ｘｇ
で１分間遠心分離して沈澱物を除去し、上澄液をシリカ
ゲル６０Ｇ ＴＬＣフレート(Altech, Inc., Newark, U
SA)にかけ、ベンゼン：アセトン(１：１(ｖ/ｖ))で展開
させた。Ｒf値が０.６５〜０.７５である領域を使い捨
てカバーガラスで掻き出した後、１４５０マイクロベー
タ液体シンチレーション計数器(1450 Microbeta liquid
scintillation counter；Wallacoy, Finland)で放射線
量を測定した。酵素活性は、タンパク質１ｍｇ当り１分
間に合成されたメバロン酸のピコモル(ピコモル/分/ｍ
ｇタンパク質)で計算した。その結果を表VIIに示す。
液中の酵素を３７℃で３０分間活性化させた。反応チュ
ーブにＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素分析緩衝溶液２０μｌ
(０.２５Ｍリン酸カリウム(ｐＨ７.０)、８.７５ｍＭ
ＥＤＴＡ、２５ｍＭ ＤＴＴ、０.４５Ｍ ＫＣｌおよ
び０.２５ｍｇ/ｍｌ ＢＳＡ)、５０ｍＭ ＮＡＤＰＨ
５μｌ、[14Ｃ]ＨＭＧ−ＣｏＡ ５μｌ(０.０５μＣｉ
/チューブ、最終濃度：１２０μＭ)、および活性化した
ミクロソーム酵素１０μｌ(０.０３〜０.０４ｍｇ)を加
え、混合物を３７℃で３０分間反応させた。混合物に６
Ｍ ＨＣｌ １０μｌを加えて反応を終了させ、混合物
を３７℃で１５分間反応させて生成物(メバロネート)が
完全にラクトン化されるようにした。１０,０００ｘｇ
で１分間遠心分離して沈澱物を除去し、上澄液をシリカ
ゲル６０Ｇ ＴＬＣフレート(Altech, Inc., Newark, U
SA)にかけ、ベンゼン：アセトン(１：１(ｖ/ｖ))で展開
させた。Ｒf値が０.６５〜０.７５である領域を使い捨
てカバーガラスで掻き出した後、１４５０マイクロベー
タ液体シンチレーション計数器(1450 Microbeta liquid
scintillation counter；Wallacoy, Finland)で放射線
量を測定した。酵素活性は、タンパク質１ｍｇ当り１分
間に合成されたメバロン酸のピコモル(ピコモル/分/ｍ
ｇタンパク質)で計算した。その結果を表VIIに示す。
【００６０】
【表７】表VII
【００６１】表VIIから分かるように、対照群のラット
は比較的高いＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素活性を示すが、一
方、柑橘類果皮抽出物群のラットから観察されたＨＭＧ
−ＣｏＡ還元酵素活性は対照群に比べて３４％低かっ
た。
は比較的高いＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素活性を示すが、一
方、柑橘類果皮抽出物群のラットから観察されたＨＭＧ
−ＣｏＡ還元酵素活性は対照群に比べて３４％低かっ
た。
【００６２】本発明を具体的な実施態様と関連させて記
述したが、添付した特許請求の範囲によって定義される
本発明の範囲内で、当該分野の熟練者が本発明を多様に
変形および変化させ得ると理解されなければならない。
述したが、添付した特許請求の範囲によって定義される
本発明の範囲内で、当該分野の熟練者が本発明を多様に
変形および変化させ得ると理解されなければならない。
フロントページの続き
(72)発明者 ベ・キファン
大韓民国302−200テジョン、ソーク、ゴ
イジョンドン、ナンバー113−12番
(72)発明者 パク・ヨンボク
大韓民国706−014テク、スソンク、ブメ
オ４ドン、ガーデン・ハイツ・アパート
メント102−203
(72)発明者 チョイ・ミュンソク
大韓民国706−014テク、スソンク、ブメ
オ４ドン、ガーデン・ハイツ・アパート
メント102−203
(72)発明者 クウォン・ヨンコク
大韓民国305−333テジョン、ユソンク、
エウンドン、ナンバー99番、ハンビッ
ト・アパートメント126−1307
(72)発明者 ヒュン・ビュンハ
大韓民国305−333テジョン、ユソンク、
エウンドン、ナンバー99番、ハンビッ
ト・アパートメント131−1401
(72)発明者 チョイ・ヤンキュー
大韓民国305−333テジョン、ユソンク、
エウンドン、ナンバー99番、ハンビッ
ト・アパートメント137−706
(72)発明者 リー・チュルホー
大韓民国302−171テジョン、ソーク、ガ
ルマドン、ギュンソン・クンマエウル・
アパートメント120−1307
(72)発明者 モン・スルクシク
大韓民国314−110チュンチョンナムド、
ゴンジュシ、シンクワンドン、ナンバー
５番、ゴムナル・アパートメント101−
601
(56)参考文献 特開 平４−117261（ＪＰ，Ａ)
特開 平10−52235（ＪＰ，Ａ)
特公 昭50−9862（ＪＰ，Ｂ１)
(58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名)
A23L 1/212 - 1/24
Claims (11)
- 【請求項１】 ニンニク１〜３０重量％、タマネギ１０
〜５０重量％、ショウガ０.２〜１０重量％、ナツメ５
〜４０重量％および、柑橘類果皮もしくはその抽出物１
０〜５０重量％、またはナリンジンもしくはヘスペリジ
ン１〜２０重量％を含む薬味組成物。 - 【請求項２】 ニンニク５〜２５重量％、タマネギ１５
〜４０重量％、ショウガ０.５〜５重量％、ナツメ１０
〜３５重量％および柑橘類果皮またはその抽出物１５〜
４０重量％を含む、請求項１記載の薬味組成物。 - 【請求項３】 ニンニク５〜２５重量％、タマネギ１５
〜４０重量％、ショウガ０.５〜５重量％、ナツメ１０
〜３５重量％およびナリンジンまたはヘスペリジン１〜
２０重量％を含む、請求項１記載の薬味組成物。 - 【請求項４】 オートミール粉末２０〜５０重量％をさ
らに含む、請求項１記載の薬味組成物。 - 【請求項５】 ニンニク５〜２５重量％、タマネギ１５
〜４０重量％、ショウガ０.５〜５重量％、ナツメ１０
〜３５重量％、柑橘類果皮またはその抽出物１５〜４０
重量％およびオートミール粉末２０〜５０重量％を含
む、請求項４記載の薬味組成物。 - 【請求項６】 ニンニク５〜２５重量％、タマネギ１５
〜４０重量％、ショウガ０.５〜５重量％、ナツメ１０
〜３５重量％、ナリンジンまたはヘスペリジン１〜２０
重量％およびオートミール粉末２０〜５０重量％を含
む、請求項４記載の薬味組成物。 - 【請求項７】 前記柑橘類が、タンジールミカン、オレ
ンジ、レモン、グレープフルーツ、シトロン、カラタチ
(Poncirus trifoliata)である、請求項１記載の薬味組
成物。 - 【請求項８】 前記柑橘類果皮抽出物が、乾燥した柑橘
類果皮１ｋｇに２０〜９５％エタノール３〜３０ｌを加
え、該混合物を２５〜８０℃で１〜１２時間静置し、得
られた抽出物を濾過し、濾液を濃縮して柑橘類果皮抽出
物を得る段階を有する方法によって製造される、請求項
１記載の薬味組成物。 - 【請求項９】 前記柑橘類果皮抽出物が、乾燥した柑橘
類果皮１ｋｇにＣａ(ＯＨ)2またはＮａＯＨの０.１〜２
％溶液５〜３０ｌを加え、該混合物を２５〜６０℃で１
〜５時間静置し、生成した抽出物を濾過し、濾液のｐＨ
を４.０〜７.０に調整し、得られた濾液を１〜１０℃で
１０〜４８時間静置し、得られた沈殿物を回収および乾
燥して柑橘類果皮抽出物を得る段階を有する方法によっ
て製造される、請求項１記載の薬味組成物。 - 【請求項１０】 ニンニク１〜３０重量％、タマネギ１
０〜５０重量％、ショウガ０.２〜１０重量％、ナツメ
５〜４０重量％および柑橘類果皮もしくはその抽出物１
０〜５０重量％またはナリンジンもしくはヘスペリジン
１〜２０重量％を混合し、得られた混合物に水を加え、
混合物を混和する段階を含む、薬味組成物の製造方法。 - 【請求項１１】 薬味組成物にオートミール粉末を加え
る段階をさらに含む、請求項１０記載の方法。
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| JP2002051732A (ja) * | 2000-06-12 | 2002-02-19 | Access Business Group Llc | 食事による植物性化学物質欠乏症を矯正する組成物及び方法 |
| KR100479736B1 (ko) * | 2002-06-28 | 2005-03-30 | (주)바이오뉴트리젠 | 천연 식물체 유래의 혼합분말 또는 추출물을 포함하는 지방간 예방용 식품 |
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2000
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