JP2946850B2 - 抗原抗体反応におけるプロゾーン判定方法及び分析方法 - Google Patents
抗原抗体反応におけるプロゾーン判定方法及び分析方法Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は抗原抗体反応において試
料が適正な条件下で測定されたものか、プロゾーン状態
でのものかを判定する方法と、その判定結果に基づき再
検査の要否や再検査時の測定条件を決定する分析方法に
関するものである。
料が適正な条件下で測定されたものか、プロゾーン状態
でのものかを判定する方法と、その判定結果に基づき再
検査の要否や再検査時の測定条件を決定する分析方法に
関するものである。
【０００２】
【従来の技術】抗原抗体反応では規定の測定範囲を越え
て抗原が過剰に加えられた状態ではその吸光度は真の値
よりも低い値となる。そのような抗原過剰域をプロゾー
ン領域と称している。測定された抗原抗体反応がプロゾ
ーン領域か否かを判定する方法としては次のような幾つ
かの方法が知られている。 （ａ）抗体試薬又は試料を再添加する方法。 （ｂ）複数の測定値から濁度（見かけの吸光度）の比又
は濃度の比をとる方法。 （ｃ）複数個の測定値から反応速度の比をとる方法。 （ｄ）複数個の測定値から最大反応速度、最大反応速度
に達するまでの反応時間及び抗原濃度の三次元検量線を
用いる方法。 （ｅ）２波長測定を行ない、その吸光度比より判定する
方法。 これらの方法は、例えば日本臨床検査自動化学会会誌第
１５巻第６号第６７５〜６８７ページ（１９９０年）、
同誌第１４巻第３号第１７１〜１７６ページ（１９８９
年）などに記載されている。
て抗原が過剰に加えられた状態ではその吸光度は真の値
よりも低い値となる。そのような抗原過剰域をプロゾー
ン領域と称している。測定された抗原抗体反応がプロゾ
ーン領域か否かを判定する方法としては次のような幾つ
かの方法が知られている。 （ａ）抗体試薬又は試料を再添加する方法。 （ｂ）複数の測定値から濁度（見かけの吸光度）の比又
は濃度の比をとる方法。 （ｃ）複数個の測定値から反応速度の比をとる方法。 （ｄ）複数個の測定値から最大反応速度、最大反応速度
に達するまでの反応時間及び抗原濃度の三次元検量線を
用いる方法。 （ｅ）２波長測定を行ない、その吸光度比より判定する
方法。 これらの方法は、例えば日本臨床検査自動化学会会誌第
１５巻第６号第６７５〜６８７ページ（１９９０年）、
同誌第１４巻第３号第１７１〜１７６ページ（１９８９
年）などに記載されている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】上記の方法のうち、
（ａ）では全ての試料について再検査を行なうことにな
り、一般臨床生化学項目に比べて１桁〜２桁高い高価な
試薬を無駄に使用することになり、コスト高になる。
（ｂ）〜（ｅ）の方法では、吸光度比、反応速度比又は
三次元検量線を検体分析に先立って測定しておく必要が
ある。そのためにはプロゾーン現象を引き起こす高濃度
試料を準備しておかなければならない。しかし、そのよ
うな高濃度試料は一般には入手が困難である。また、こ
れらの事前の準備は試薬ロットが変わる度に行なわなけ
ればならず、コスト的にも時間的にも非常な負担とな
る。本発明は高価な試薬の無駄使いを防ぎ、容易にプロ
ゾーン判定を行なうことのできる方法を提供することを
目的とするものである。本発明はまた、そのようなプロ
ゾーン判定方法を用いて再検査の要否、及び再検査時の
測定条件を決定する分析方法を提供することを目的とす
るものである。
（ａ）では全ての試料について再検査を行なうことにな
り、一般臨床生化学項目に比べて１桁〜２桁高い高価な
試薬を無駄に使用することになり、コスト高になる。
（ｂ）〜（ｅ）の方法では、吸光度比、反応速度比又は
三次元検量線を検体分析に先立って測定しておく必要が
ある。そのためにはプロゾーン現象を引き起こす高濃度
試料を準備しておかなければならない。しかし、そのよ
うな高濃度試料は一般には入手が困難である。また、こ
れらの事前の準備は試薬ロットが変わる度に行なわなけ
ればならず、コスト的にも時間的にも非常な負担とな
る。本発明は高価な試薬の無駄使いを防ぎ、容易にプロ
ゾーン判定を行なうことのできる方法を提供することを
目的とするものである。本発明はまた、そのようなプロ
ゾーン判定方法を用いて再検査の要否、及び再検査時の
測定条件を決定する分析方法を提供することを目的とす
るものである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明のプロゾーン判定
方法では、濃度の異なる複数種類の標準試料について抗
原抗体反応の初期段階の第１の時刻及び反応が十分に進
行した後の第２の時刻で光学的な測定を行ない、それら
の測定値のうちプロゾーン現象が起こっていない濃度域
の測定値について第１の時刻での測定値と第２の時刻で
の測定値との関係を示す回帰式を算出し、試料反応液に
ついて第１の時刻及び第２の時刻で光学的測定を行な
い、その測定値と前記回帰式から算出される仮想値との
ずれからその測定値がプロゾーン現象の起こっていない
適正な抗原抗体反応下で行なわれたか否かを判定する。
第２の時刻は濃度算出のための測定時刻であってもよ
く、又は他の時刻であってもよい。
方法では、濃度の異なる複数種類の標準試料について抗
原抗体反応の初期段階の第１の時刻及び反応が十分に進
行した後の第２の時刻で光学的な測定を行ない、それら
の測定値のうちプロゾーン現象が起こっていない濃度域
の測定値について第１の時刻での測定値と第２の時刻で
の測定値との関係を示す回帰式を算出し、試料反応液に
ついて第１の時刻及び第２の時刻で光学的測定を行な
い、その測定値と前記回帰式から算出される仮想値との
ずれからその測定値がプロゾーン現象の起こっていない
適正な抗原抗体反応下で行なわれたか否かを判定する。
第２の時刻は濃度算出のための測定時刻であってもよ
く、又は他の時刻であってもよい。
【０００５】本発明の分析方法では、上記の方法でプロ
ゾーン現象が起こっているか否かを判定し、プロゾーン
現象が起こっていると判定した場合には再検査を行なう
ようにする。再検査においては試料反応液についての第
２の時刻での測定値を前記回帰式に代入して得た第１の
時刻での仮想値と、その試料反応液についての第１の時
刻での測定値とのずれの大きさに応じて再検査に好適な
試料量と試薬量との比を決定する。
ゾーン現象が起こっているか否かを判定し、プロゾーン
現象が起こっていると判定した場合には再検査を行なう
ようにする。再検査においては試料反応液についての第
２の時刻での測定値を前記回帰式に代入して得た第１の
時刻での仮想値と、その試料反応液についての第１の時
刻での測定値とのずれの大きさに応じて再検査に好適な
試料量と試薬量との比を決定する。
【０００６】
【作用】検量線作成用標準試料反応液について第１の時
刻での測定値Ａｓと第２の時刻での測定値Ａｅを得る。
濃度を変えた標準試料についての「Ａｓ対Ａｅ」の関係
から回帰直線Ｙａｃ＝ａ・Ｘａｅ＋ｂを例えば最小自乗
法により求める。検体反応液についての第１の時刻での
測定値Ａｓｓと第２の時刻での測定値Ａｅｓのうち、Ａ
ｅｓを回帰式のＸａｅに代入してＹａｃを求め、これと
Ａｓｓとの比較を行なう。このとき、例えばＹａｃ−α
＞Ａｓｓとなればプロゾーン現象が起こっていると判定
する。ここでαはＡｓｓに対する許容値である。Ｙａｃ
が広範囲な値をとる場合は、Ｙａｃ・α（例えばα＝
０．９５）として、Ｙａｃに対する比率で判定してもよ
い。この許容値を越えてＡｓｓが低くなれば、プロゾー
ン現象が起こっていると判定され、仮想値と測定値との
ずれの大きさを例えば（Ｙａｃ−Ａｓｓ）／Ｙａｃとし
て算出し、その値に応じて予め定めた分析条件（検体
量）で再検査し、再検査結果に基づいてその条件での濃
度を算出する。
刻での測定値Ａｓと第２の時刻での測定値Ａｅを得る。
濃度を変えた標準試料についての「Ａｓ対Ａｅ」の関係
から回帰直線Ｙａｃ＝ａ・Ｘａｅ＋ｂを例えば最小自乗
法により求める。検体反応液についての第１の時刻での
測定値Ａｓｓと第２の時刻での測定値Ａｅｓのうち、Ａ
ｅｓを回帰式のＸａｅに代入してＹａｃを求め、これと
Ａｓｓとの比較を行なう。このとき、例えばＹａｃ−α
＞Ａｓｓとなればプロゾーン現象が起こっていると判定
する。ここでαはＡｓｓに対する許容値である。Ｙａｃ
が広範囲な値をとる場合は、Ｙａｃ・α（例えばα＝
０．９５）として、Ｙａｃに対する比率で判定してもよ
い。この許容値を越えてＡｓｓが低くなれば、プロゾー
ン現象が起こっていると判定され、仮想値と測定値との
ずれの大きさを例えば（Ｙａｃ−Ａｓｓ）／Ｙａｃとし
て算出し、その値に応じて予め定めた分析条件（検体
量）で再検査し、再検査結果に基づいてその条件での濃
度を算出する。
【０００７】
【実施例】図１にＩｇＧ（免疫グロブリンＧ）を標準試
料とし、試薬として日水製薬（株）の試薬を用いた場合
の反応タイムコースを示す。（Ａ）は測定波長が３４０
ｎｍの場合、（Ｂ）は測定波長が５４０ｎｍの場合であ
る。抗原抗体反応では反応液の混濁状態を測定している
ため、測定波長によって感度（見かけの吸光度）は異な
るが、各希釈率試料の反応タイムコースは類似パターン
となっている。この測定データに基づいて反応開始１分
後と１５分後の各波長における吸光度を示したものが図
２である。図２の結果によれば、低濃度領域（４０／１
００以下）ではほぼ直線性があるのに対し、希釈率４０
／１００より高濃度側では直線からずれて吸光度が低下
しており、高濃度領域はプロゾーン領域（抗原過剰域）
であることがわかる。また、測定波長７５０ｎｍについ
ても類似のタイムコースが見られ、希釈率５０／１００
より高濃度域ではプロゾーン現象が見られる。
料とし、試薬として日水製薬（株）の試薬を用いた場合
の反応タイムコースを示す。（Ａ）は測定波長が３４０
ｎｍの場合、（Ｂ）は測定波長が５４０ｎｍの場合であ
る。抗原抗体反応では反応液の混濁状態を測定している
ため、測定波長によって感度（見かけの吸光度）は異な
るが、各希釈率試料の反応タイムコースは類似パターン
となっている。この測定データに基づいて反応開始１分
後と１５分後の各波長における吸光度を示したものが図
２である。図２の結果によれば、低濃度領域（４０／１
００以下）ではほぼ直線性があるのに対し、希釈率４０
／１００より高濃度側では直線からずれて吸光度が低下
しており、高濃度領域はプロゾーン領域（抗原過剰域）
であることがわかる。また、測定波長７５０ｎｍについ
ても類似のタイムコースが見られ、希釈率５０／１００
より高濃度域ではプロゾーン現象が見られる。
【０００８】測定波長３４０ｎｍについての図１（Ａ）
の測定データに基づいて、反応初期にあたる開始から１
分後、２分後、３分後、５分後の吸光度測定値と１５分
後の吸光度測定値との関係を図示したのが図３である。
図３から初期の段階の各測定値と１５分後の測定値との
間には低濃度領域で直線関係が見られる。それらの直線
関係から回帰式 Ｙａｃ＝ａ・Ｘａｅ＋ｂ を算出する
と、それぞれ次に示されるような回帰式が得られる。 １分後： Ｙａｃ＝０．９０８５・Ｘａｅ−６３ ２分後： Ｙａｃ＝０．９４３５・Ｘａｅ−５２ ３分後： Ｙａｃ＝０．９７７１・Ｘａｅ−３５ ５分後： Ｙａｃ＝０．９９１９・Ｘａｅ−２２
の測定データに基づいて、反応初期にあたる開始から１
分後、２分後、３分後、５分後の吸光度測定値と１５分
後の吸光度測定値との関係を図示したのが図３である。
図３から初期の段階の各測定値と１５分後の測定値との
間には低濃度領域で直線関係が見られる。それらの直線
関係から回帰式 Ｙａｃ＝ａ・Ｘａｅ＋ｂ を算出する
と、それぞれ次に示されるような回帰式が得られる。 １分後： Ｙａｃ＝０．９０８５・Ｘａｅ−６３ ２分後： Ｙａｃ＝０．９４３５・Ｘａｅ−５２ ３分後： Ｙａｃ＝０．９７７１・Ｘａｅ−３５ ５分後： Ｙａｃ＝０．９９１９・Ｘａｅ−２２
【０００９】図３中に０を基準として垂直方向の矢印で
示される大きさは、上記の回帰式のＸａｅに１５分後の
吸光度測定値Ａｅを代入して求めた仮想値Ｙａｃであ
る。また、図３中には回帰直線と実測値Ａｓとの差ΔＡ
も垂直方向の矢印で示されている。図３を図２と合わせ
て見ると、Ａｓが回帰直線から下方に落ち込む濃度（希
釈率５０／１００より高濃度側）ではいずれの測定時刻
のデータでも仮想値との差が生じており、濃度が高くな
るにつれてその差ΔＡも拡大している。
示される大きさは、上記の回帰式のＸａｅに１５分後の
吸光度測定値Ａｅを代入して求めた仮想値Ｙａｃであ
る。また、図３中には回帰直線と実測値Ａｓとの差ΔＡ
も垂直方向の矢印で示されている。図３を図２と合わせ
て見ると、Ａｓが回帰直線から下方に落ち込む濃度（希
釈率５０／１００より高濃度側）ではいずれの測定時刻
のデータでも仮想値との差が生じており、濃度が高くな
るにつれてその差ΔＡも拡大している。
【００１０】図３に示したデータと同一の反応液につい
て２波長測定した結果を図４に示す。１波長測定（図
３）と全く同じ傾向を示している。この場合、回帰式は
異なる波長の組合わせでも同一の値を示しており、ほぼ
原点を通り、回帰式のｂはほぼ０である。
て２波長測定した結果を図４に示す。１波長測定（図
３）と全く同じ傾向を示している。この場合、回帰式は
異なる波長の組合わせでも同一の値を示しており、ほぼ
原点を通り、回帰式のｂはほぼ０である。
【００１１】次に、試薬を変えた場合について示す。図
５はＩｇＧに試薬としてヤトロンイアトロエースＩｇＧ
を用い、反応開始後１分後と１５分後の吸光度の関係を
示したものである。感度は図３の例とは大きく異なって
いるが、プロゾーン検出は前述の方法で同様に行なえる
ことがわかる。
５はＩｇＧに試薬としてヤトロンイアトロエースＩｇＧ
を用い、反応開始後１分後と１５分後の吸光度の関係を
示したものである。感度は図３の例とは大きく異なって
いるが、プロゾーン検出は前述の方法で同様に行なえる
ことがわかる。
【００１２】試料として免疫グロブリンの一種であるＩ
ｇＡについて前述のＩｇＧと同様の測定を行なった結果
を図６に示す。図６でも同様の傾向を示し、ＩｇＡにつ
いてもプロゾーンの検出が可能であることがわかる。試
薬はヤトロンイアトロエースＩｇＡである。
ｇＡについて前述のＩｇＧと同様の測定を行なった結果
を図６に示す。図６でも同様の傾向を示し、ＩｇＡにつ
いてもプロゾーンの検出が可能であることがわかる。試
薬はヤトロンイアトロエースＩｇＡである。
【００１３】試料として補体第３（Ｃ３）、試薬として
ヤトロンイアトロエースＣ３を用いた場合の反応初期
（１分、２分、３分）と１５分後の吸光度の関係を図７
に示す。この場合も前述のＩｇＧやＩｇＡと同様にプロ
ゾーンの検出が可能なことがわかる。
ヤトロンイアトロエースＣ３を用いた場合の反応初期
（１分、２分、３分）と１５分後の吸光度の関係を図７
に示す。この場合も前述のＩｇＧやＩｇＡと同様にプロ
ゾーンの検出が可能なことがわかる。
【００１４】表１に図３で示したＩｇＧ反応における初
期吸光度差ΔＡ（＝仮想吸光度Ｙａｃ−実測値Ａｓｓ）
及び吸光度差のずれ率（Ｙａｃ−Ａｓｓ）／Ｙａｃの結
果を示す。この結果によれば、測定時刻が早いほどＡｓ
ｓは小さい値であるが、プロゾーン濃度領域ではΔＡも
ΔＡ／Ｙａｃも絶対値が大きくなっていることがわか
る。
期吸光度差ΔＡ（＝仮想吸光度Ｙａｃ−実測値Ａｓｓ）
及び吸光度差のずれ率（Ｙａｃ−Ａｓｓ）／Ｙａｃの結
果を示す。この結果によれば、測定時刻が早いほどＡｓ
ｓは小さい値であるが、プロゾーン濃度領域ではΔＡも
ΔＡ／Ｙａｃも絶対値が大きくなっていることがわか
る。
【００１５】
【表１】
【００１６】表２は図４に示した２波長測定のデータに
ついてのΔＡとΔＡ／Ｙａｃを示したものである。この
結果によれば、プロゾーンの検出に関しては２波長の組
合わせの依存性はない。また、表１の結果と表２の結果
を比べると１波長測定の方がプロゾーンの検出に関して
は有利であることがわかる。
ついてのΔＡとΔＡ／Ｙａｃを示したものである。この
結果によれば、プロゾーンの検出に関しては２波長の組
合わせの依存性はない。また、表１の結果と表２の結果
を比べると１波長測定の方がプロゾーンの検出に関して
は有利であることがわかる。
【００１７】
【表２】
【００１８】図８にプロゾーン判定方法とその判定結果
に従って再検査条件を決定する分析方法の手順をまとめ
て示す。先ず試薬ブランク測定を行ない、次に濃度の異
なる標準液について標準液測定を行なって検量線ｆ(ｘ)
を作成する。標準液についての初期段階の測定値と濃度
計算用測定値を用いて回帰直線を求める。回帰直線は一
次関数の形で Ｙａｃ＝ａ・Ｘａｅ＋ｂ とし、最小自乗法により計算する。
に従って再検査条件を決定する分析方法の手順をまとめ
て示す。先ず試薬ブランク測定を行ない、次に濃度の異
なる標準液について標準液測定を行なって検量線ｆ(ｘ)
を作成する。標準液についての初期段階の測定値と濃度
計算用測定値を用いて回帰直線を求める。回帰直線は一
次関数の形で Ｙａｃ＝ａ・Ｘａｅ＋ｂ とし、最小自乗法により計算する。
【００１９】次に、試料を分析する。試料量はＶｓ1，
試薬量はＶｒである。反応初期の時点での測定値をＡｓ
ｓ，濃度計算用測定値をＡｅｓとする。測定値Ａｅｓを
回帰直線のＸａｅに代入して初期の段階での仮想値Ｙａ
ｃを算出する。この試料が再検査試料でない場合には、
算出された初期の仮想値Ｙａｃと実測値Ａｓｓの比較を
行なう。比較ではＹａｃ−αとＡｓｓとの比較を行な
う。αは許容値である。許容値αは、測定誤差が存在す
るために、過去の再現精度を参考にして決めておく。ま
た、Ｙａｃ・α＞Ａｓｓ（例えばα＝０．９５）とし
て、プロゾーン判定を行なってもよい。この比較の結
果、Ｙａｃ−α＞Ａｓｓでなければプロゾーン現象は起
こっていないと判定し、検量線ｆ(ｘ)に従って濃度Ｃを
計算し出力して分析を終了する。
試薬量はＶｒである。反応初期の時点での測定値をＡｓ
ｓ，濃度計算用測定値をＡｅｓとする。測定値Ａｅｓを
回帰直線のＸａｅに代入して初期の段階での仮想値Ｙａ
ｃを算出する。この試料が再検査試料でない場合には、
算出された初期の仮想値Ｙａｃと実測値Ａｓｓの比較を
行なう。比較ではＹａｃ−αとＡｓｓとの比較を行な
う。αは許容値である。許容値αは、測定誤差が存在す
るために、過去の再現精度を参考にして決めておく。ま
た、Ｙａｃ・α＞Ａｓｓ（例えばα＝０．９５）とし
て、プロゾーン判定を行なってもよい。この比較の結
果、Ｙａｃ−α＞Ａｓｓでなければプロゾーン現象は起
こっていないと判定し、検量線ｆ(ｘ)に従って濃度Ｃを
計算し出力して分析を終了する。
【００２０】算出された初期の仮想値Ｙａｃと実測値Ａ
ｓｓとの比較の結果、Ｙａｃ−α＞Ａｓｓとなれば、プ
ロゾーン現象が起こっていると判定し、仮想値と実測値
とのずれ率を計算する。ずれ率は ΔＡ／Ｙａｃ＝（Ｙａｃ−Ａｓｓ）／Ｙａｃ として計算する。そのずれ率が０〜０．１の間にあれば
試料量を１／４に希釈して再検査を行ない、そのずれ率
が０．１〜０．４の間にあれば試料量を１／１０に希釈
して再検査を行なう。希釈率１／１０までは試料の減量
及び試薬の増量により自動的に希釈する機能が備わって
いるものとする。試薬量の増加による再検査は、プロゾ
ーン検体の割合が非常に少ないことから全体のコストか
らすれば大した上昇にはならない。もしずれ率が０．６
以下であれば自動的に希釈できないので、例えば「試料
を１／５０に希釈して下さい」というような表示を出し
て分析を終了する。
ｓｓとの比較の結果、Ｙａｃ−α＞Ａｓｓとなれば、プ
ロゾーン現象が起こっていると判定し、仮想値と実測値
とのずれ率を計算する。ずれ率は ΔＡ／Ｙａｃ＝（Ｙａｃ−Ａｓｓ）／Ｙａｃ として計算する。そのずれ率が０〜０．１の間にあれば
試料量を１／４に希釈して再検査を行ない、そのずれ率
が０．１〜０．４の間にあれば試料量を１／１０に希釈
して再検査を行なう。希釈率１／１０までは試料の減量
及び試薬の増量により自動的に希釈する機能が備わって
いるものとする。試薬量の増加による再検査は、プロゾ
ーン検体の割合が非常に少ないことから全体のコストか
らすれば大した上昇にはならない。もしずれ率が０．６
以下であれば自動的に希釈できないので、例えば「試料
を１／５０に希釈して下さい」というような表示を出し
て分析を終了する。
【００２１】測定された試料が再検査試料である場合に
は、検量線に従って濃度を計算した後、再検査での希釈
率が１／４であったか１／１０であったかにより検量線
から求めた濃度を希釈率に従って元の濃度に換算する作
業を行なう。初回の検査での試料量がＶｓ1、再検査で
の試料量がＶｓ2、試薬量は何れもＶｒとし、再検査で
で求められた濃度をＣｉとすると、試料の元の濃度Ｃは Ｃ＝Ｃ1×{Ｖｓ2／(Ｖｓ2＋Ｖｒ)}／{Ｖｓ1／(Ｖｓ1＋Ｖｒ)} として計算する。濃度Ｃの計算結果を出力し、分析を終
了する。
は、検量線に従って濃度を計算した後、再検査での希釈
率が１／４であったか１／１０であったかにより検量線
から求めた濃度を希釈率に従って元の濃度に換算する作
業を行なう。初回の検査での試料量がＶｓ1、再検査で
の試料量がＶｓ2、試薬量は何れもＶｒとし、再検査で
で求められた濃度をＣｉとすると、試料の元の濃度Ｃは Ｃ＝Ｃ1×{Ｖｓ2／(Ｖｓ2＋Ｖｒ)}／{Ｖｓ1／(Ｖｓ1＋Ｖｒ)} として計算する。濃度Ｃの計算結果を出力し、分析を終
了する。
【００２２】本発明が適用される具体的な自動分析装置
の一例を図９に示す。図９で、血液などの検体は検体容
器に入れられ、複数本の検体容器が配置された検体ラッ
ク２がベルトコンベア式の搬送路４に沿って移動させら
れる。搬送路４は図で左から右方向に検体ラック２を移
送する往路４ａと、逆に右から左方向へ検体ラックを移
送する復路４ｂとからなっている。図で往路４ａの左端
部分には検体ラック２を往路４ａに送り出す検体ラック
供給部６が設けられており、復路４ｂの左端部分には測
定終了後の検体ラック２を収納する収納部８が設けられ
ている。図で搬送路４の右端部分には往路４ａを送られ
てきた検体ラック２を一次収容し、分析終了後に検体ラ
ックを復路４ｂに送り出すラック待機部１０が設けられ
ている。検体ラック２は往路４ａを移送中に分析ユニッ
ト２６ａ，２６ｂの検体分注位置で停止させられ、分析
ユニット２６ａ，２６ｂの反応管に分注される。復路４
ｂでは往路４ａで分注されて測定された検体の測定結果
に従って、再検査の必要のある検体が再分注される。
の一例を図９に示す。図９で、血液などの検体は検体容
器に入れられ、複数本の検体容器が配置された検体ラッ
ク２がベルトコンベア式の搬送路４に沿って移動させら
れる。搬送路４は図で左から右方向に検体ラック２を移
送する往路４ａと、逆に右から左方向へ検体ラックを移
送する復路４ｂとからなっている。図で往路４ａの左端
部分には検体ラック２を往路４ａに送り出す検体ラック
供給部６が設けられており、復路４ｂの左端部分には測
定終了後の検体ラック２を収納する収納部８が設けられ
ている。図で搬送路４の右端部分には往路４ａを送られ
てきた検体ラック２を一次収容し、分析終了後に検体ラ
ックを復路４ｂに送り出すラック待機部１０が設けられ
ている。検体ラック２は往路４ａを移送中に分析ユニッ
ト２６ａ，２６ｂの検体分注位置で停止させられ、分析
ユニット２６ａ，２６ｂの反応管に分注される。復路４
ｂでは往路４ａで分注されて測定された検体の測定結果
に従って、再検査の必要のある検体が再分注される。
【００２３】搬送路４に沿って２台の分析ユニット１２
ａと１２ｂが配置されている。いずれも同じ構造をして
いる。各分析ユニットにはキュベットを兼ねる反応容器
１５が配置された反応ディスク１４が搬送路４の近くに
配置されており、搬送路４ａ，４ｂには反応ディスク１
４の近傍の検体分注位置で検体ラック２を停止させる停
止装置（図示略）が設けられている。搬送路４ａ又は４
ｂ上に停止させられた検体ラック２から検体を反応容器
１５に分注するために、ノズルを備えたピペッタ１６が
配置されている。各分析ユニット１２ａ，１２ｂには反
応容器１５に試薬を分注するために２台のターンテーブ
ル式試薬庫１８ａ，１８ｂが配置されており、各試薬庫
１８ａ，１８ｂには試薬を反応容器１５に分注するディ
スペンサ２０ａ，２０ｂが設けられている。反応ディス
ク１４で分析終了後の反応容器を洗浄するために洗浄機
構２２が設けられている。反応ディスク１４には検体と
試薬が入れられた反応容器１５の反応を測定するため
に、光学式分析部が設けられているが図示は省略されて
いる。
ａと１２ｂが配置されている。いずれも同じ構造をして
いる。各分析ユニットにはキュベットを兼ねる反応容器
１５が配置された反応ディスク１４が搬送路４の近くに
配置されており、搬送路４ａ，４ｂには反応ディスク１
４の近傍の検体分注位置で検体ラック２を停止させる停
止装置（図示略）が設けられている。搬送路４ａ又は４
ｂ上に停止させられた検体ラック２から検体を反応容器
１５に分注するために、ノズルを備えたピペッタ１６が
配置されている。各分析ユニット１２ａ，１２ｂには反
応容器１５に試薬を分注するために２台のターンテーブ
ル式試薬庫１８ａ，１８ｂが配置されており、各試薬庫
１８ａ，１８ｂには試薬を反応容器１５に分注するディ
スペンサ２０ａ，２０ｂが設けられている。反応ディス
ク１４で分析終了後の反応容器を洗浄するために洗浄機
構２２が設けられている。反応ディスク１４には検体と
試薬が入れられた反応容器１５の反応を測定するため
に、光学式分析部が設けられているが図示は省略されて
いる。
【００２４】検体ラック供給部６と収納部８にはインタ
ーフェースとＣＰＵ２４が設けられており、各分析ユニ
ット１２ａと１２ｂにもそれぞれインターフェースとＣ
ＰＵ２６ａ，２６ｂが設けられており、待機部１０にも
インターフェースとＣＰＵ２８が設けられている。それ
らのＣＰＵ２４，２６ａ，２６ｂ，２８はメインＣＰＵ
３０と接続されている。メインＣＰＵ３０にはさらにＣ
ＲＴ３２、キーボード３４及びプリンタ３６が接続され
ている。
ーフェースとＣＰＵ２４が設けられており、各分析ユニ
ット１２ａと１２ｂにもそれぞれインターフェースとＣ
ＰＵ２６ａ，２６ｂが設けられており、待機部１０にも
インターフェースとＣＰＵ２８が設けられている。それ
らのＣＰＵ２４，２６ａ，２６ｂ，２８はメインＣＰＵ
３０と接続されている。メインＣＰＵ３０にはさらにＣ
ＲＴ３２、キーボード３４及びプリンタ３６が接続され
ている。
【００２５】図９の自動分析装置の動作について説明す
る。各項目の測定に必要な試薬は分析ユニットの試薬庫
１８ａ，１８ｂにセットされる。検体ラック２を供給部
６に並べ、キーボード３４から動作を開始させると、反
応容器１５は洗浄機構２２で洗浄水により洗浄される。
洗浄をすませた反応容器１５には水が入れられて測定波
長によるセルブランク測定がなされる。セルブランク測
定後、水切りをすませた空の反応容器１５が検体分注位
置に移動したとき、検体ラック２が搬送路の往路４ａを
送られてきて、検体分注位置で停止させられ、まず最初
に分析する測定項目のためにピペッタ１６によって検体
が測定項目ごとに定められた検体量だけ反応容器１５に
分注される。検体分注後のピペッタ１６のノズルは図に
は現れていない洗浄ポットに移動してノズルの内外が純
水により洗浄される。その後、順次次の同一検体の次の
項目又は次の別の検体の分注が他の反応容器１５に行な
われる。反応ディスク１４で検体の分注された反応容器
１５が試薬分注位置へ移動してくると、ディスペンサ２
０ａ又は２０ｂによって所定の試薬が所定量吸引されて
反応容器１５に分注される。分注後、ディスペンサ２０
ａ，２０ｂのプローブは図には現われていない洗浄位置
に移動してプローブの内外が純水で洗浄される。その
後、ディスペンサ２０ａ，２０ｂは次の試薬の分注動作
に移る。
る。各項目の測定に必要な試薬は分析ユニットの試薬庫
１８ａ，１８ｂにセットされる。検体ラック２を供給部
６に並べ、キーボード３４から動作を開始させると、反
応容器１５は洗浄機構２２で洗浄水により洗浄される。
洗浄をすませた反応容器１５には水が入れられて測定波
長によるセルブランク測定がなされる。セルブランク測
定後、水切りをすませた空の反応容器１５が検体分注位
置に移動したとき、検体ラック２が搬送路の往路４ａを
送られてきて、検体分注位置で停止させられ、まず最初
に分析する測定項目のためにピペッタ１６によって検体
が測定項目ごとに定められた検体量だけ反応容器１５に
分注される。検体分注後のピペッタ１６のノズルは図に
は現れていない洗浄ポットに移動してノズルの内外が純
水により洗浄される。その後、順次次の同一検体の次の
項目又は次の別の検体の分注が他の反応容器１５に行な
われる。反応ディスク１４で検体の分注された反応容器
１５が試薬分注位置へ移動してくると、ディスペンサ２
０ａ又は２０ｂによって所定の試薬が所定量吸引されて
反応容器１５に分注される。分注後、ディスペンサ２０
ａ，２０ｂのプローブは図には現われていない洗浄位置
に移動してプローブの内外が純水で洗浄される。その
後、ディスペンサ２０ａ，２０ｂは次の試薬の分注動作
に移る。
【００２６】検体ラック２は往路を進んで待機部１０で
待機し、検体の分析結果を待って復路４ｂへ送り出さ
れ、収納部８へ収納される。復路４ｂを移動中に、再検
査の必要のある検体は検体分注位置で停止させられて再
び検体分注が行なわれる。反応ディスク１４では検体と
試薬が混ぜられた反応液の吸光度が測定部により測定さ
れる。分析の終了した反応容器１５は洗浄位置で反応液
が吸引されて排出され、水洗され、セルブランク測定の
後、反応容器内の水切りが行なわれて新たな検体の反応
容器として準備される。図９のように往路と複路のベル
トライン試料搬送システムを有する自動分析装置に本発
明を適用すれば、往路での測定でプロゾーン現象が起こ
っていると判定されたときや、往路で試薬分注ミスが生
じた場合などに複路で再検査を自動的に行なうといった
対応を素早く行なうことができるようになる。
待機し、検体の分析結果を待って復路４ｂへ送り出さ
れ、収納部８へ収納される。復路４ｂを移動中に、再検
査の必要のある検体は検体分注位置で停止させられて再
び検体分注が行なわれる。反応ディスク１４では検体と
試薬が混ぜられた反応液の吸光度が測定部により測定さ
れる。分析の終了した反応容器１５は洗浄位置で反応液
が吸引されて排出され、水洗され、セルブランク測定の
後、反応容器内の水切りが行なわれて新たな検体の反応
容器として準備される。図９のように往路と複路のベル
トライン試料搬送システムを有する自動分析装置に本発
明を適用すれば、往路での測定でプロゾーン現象が起こ
っていると判定されたときや、往路で試薬分注ミスが生
じた場合などに複路で再検査を自動的に行なうといった
対応を素早く行なうことができるようになる。
【００２７】
【発明の効果】本発明ではプロゾーン現象が起こってい
ない濃度域においては反応初期の測定値と一定時間後の
濃度測定用測定値との間には例えば一次式で表わされる
関係があることを利用し、試料の測定値がその関係から
ずれている程度によってプロゾーン域か否かを判定する
ようにしたので、ユーザーにおいてはプロゾーン現象が
発生したか否かを判定する数値、例えば、既に引用した
日本臨床検査自動化学会会誌第１４巻第３号（１９８９
年）の第１７３ページに述べられている判定値「ＡＧ
ＥＸＥＳＳ」や、他の手法での「プロゾーンチェック
値」（濃度の関数）などを設定する必要がない。本発明
では初期の段階の吸光度と濃度測定用吸光度の関係（こ
れは濃度の関数ではない）を回帰式として記憶する必要
があるが、これは自動分析装置で較正操作として自動的
に行なうことが可能であり、ユーザーの手を煩わすこと
はない。プロゾーン判定値を設定する必要がないことか
ら、高価な既知濃度の試料を購入したり、入手困難な高
濃度試料の入手や試料ロットが変わる毎の煩雑なプロゾ
ーン判定値の決定操作に悩まされることもない。図９に
示したような最も普及しているシングルマルチ方式の自
動分析装置に容易に適用することができる。
ない濃度域においては反応初期の測定値と一定時間後の
濃度測定用測定値との間には例えば一次式で表わされる
関係があることを利用し、試料の測定値がその関係から
ずれている程度によってプロゾーン域か否かを判定する
ようにしたので、ユーザーにおいてはプロゾーン現象が
発生したか否かを判定する数値、例えば、既に引用した
日本臨床検査自動化学会会誌第１４巻第３号（１９８９
年）の第１７３ページに述べられている判定値「ＡＧ
ＥＸＥＳＳ」や、他の手法での「プロゾーンチェック
値」（濃度の関数）などを設定する必要がない。本発明
では初期の段階の吸光度と濃度測定用吸光度の関係（こ
れは濃度の関数ではない）を回帰式として記憶する必要
があるが、これは自動分析装置で較正操作として自動的
に行なうことが可能であり、ユーザーの手を煩わすこと
はない。プロゾーン判定値を設定する必要がないことか
ら、高価な既知濃度の試料を購入したり、入手困難な高
濃度試料の入手や試料ロットが変わる毎の煩雑なプロゾ
ーン判定値の決定操作に悩まされることもない。図９に
示したような最も普及しているシングルマルチ方式の自
動分析装置に容易に適用することができる。
【図１】ＩｇＧ標準試料の反応タイムコースを示す図で
あり、（Ａ）は測定波長が３４０ｎｍの場合、（Ｂ）は
測定波長が５４０ｎｍの場合である。
あり、（Ａ）は測定波長が３４０ｎｍの場合、（Ｂ）は
測定波長が５４０ｎｍの場合である。
【図２】ＩｇＧ標準試料についての反応開始１分後と１
５分後の各波長における吸光度を示す図である。
５分後の各波長における吸光度を示す図である。
【図３】ＩｇＧ標準試料の測定データに基づいて、反応
開始から１分後、２分後、３分後、５分後の吸光度と１
５分後の吸光度との関係と回帰直線を示す図である。
開始から１分後、２分後、３分後、５分後の吸光度と１
５分後の吸光度との関係と回帰直線を示す図である。
【図４】ＩｇＧ標準試料について２波長測定した結果と
回帰直線を示す図である。
回帰直線を示す図である。
【図５】ＩｇＧに試薬としてヤトロンイアトロエースＩ
ｇＧ用いた場合の反応開始後１分後と１５分後の吸光度
の関係を示す図である。
ｇＧ用いた場合の反応開始後１分後と１５分後の吸光度
の関係を示す図である。
【図６】試料としてＩｇＡを用いた結果を示す図であ
る。
る。
【図７】試料として補体第３（Ｃ３）、試薬としてヤト
ロンイアトロエースをＣ３を用いた場合の反応初期と１
５分後の吸光度の関係を示す図である。
ロンイアトロエースをＣ３を用いた場合の反応初期と１
５分後の吸光度の関係を示す図である。
【図８】一実施例の動作を示すフローチャート図であ
る。
る。
【図９】本発明が適用される自動分析装置の一例を示す
図である。
図である。
Claims (2)
- 【請求項１】 濃度の異なる複数種類の標準試料につい
て抗原抗体反応の初期段階の第１の時刻及び反応が十分
に進行した後の第２の時刻で光学的な測定を行ない、そ
れらの測定値のうちプロゾーン現象が起こっていない濃
度域の測定値について前記第１の時刻での測定値と前記
第２の時刻での測定値との関係を示す回帰式を算出し、
試料反応液について前記第１の時刻及び前記第２の時刻
で光学的測定を行ない、その測定値と前記回帰式から算
出される仮想値とのずれからその測定値がプロゾーン現
象の起こっていない適正な抗原抗体反応下で行なわれた
か否かを判定するプロゾーン判定方法。 - 【請求項２】 濃度の異なる複数種類の標準試料につい
て抗原抗体反応の初期段階の第１の時刻及び反応が十分
に進行した後の第２の時刻で光学的な測定を行ない、そ
れらの測定値のうちプロゾーン現象が起こっていない濃
度域の測定値について前記第１の時刻での測定値と前記
第２の時刻での測定値との関係を示す回帰式を算出し、
試料反応液について前記第１の時刻及び前記第２の時刻
で光学的測定を行ない、試料反応液についての前記第２
の時刻での測定値を前記回帰式に代入して得た前記第１
の時刻での仮想値と、試料反応液についての前記第１の
時刻での測定値とのずれの大きさに応じて再検査の要否
を判定し、再検査においては前記ずれの大きさに応じて
再検査用の試料量と試薬量との比を決定する分析方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18679491A JP2946850B2 (ja) | 1991-06-30 | 1991-06-30 | 抗原抗体反応におけるプロゾーン判定方法及び分析方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18679491A JP2946850B2 (ja) | 1991-06-30 | 1991-06-30 | 抗原抗体反応におけるプロゾーン判定方法及び分析方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0510953A JPH0510953A (ja) | 1993-01-19 |
| JP2946850B2 true JP2946850B2 (ja) | 1999-09-06 |
Family
ID=16194705
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP18679491A Expired - Fee Related JP2946850B2 (ja) | 1991-06-30 | 1991-06-30 | 抗原抗体反応におけるプロゾーン判定方法及び分析方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2946850B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2018110006A1 (ja) * | 2016-12-15 | 2018-06-21 | 株式会社堀場製作所 | 免疫凝集反応を用いた濃度測定における被験物質濃度の適正性の判定方法およびそのための処理部を有する試料分析装置 |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1909206A1 (de) | 2006-09-11 | 2008-04-09 | Roche Diagnostics GmbH | Messbereichserweiterung chromatografischer Schnellteste |
| EP2790019A1 (de) * | 2013-04-10 | 2014-10-15 | Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH | High Dose Hook Erkennung |
| JP2017083296A (ja) * | 2015-10-28 | 2017-05-18 | 東芝メディカルシステムズ株式会社 | 自動分析装置 |
| US20190353664A1 (en) * | 2016-11-22 | 2019-11-21 | Beijing Chemclin Biotech Co., Ltd. | Method, system, reagent kit, and device for determining hd-hook-effect sample and immunoassay |
| CN110514647B (zh) * | 2018-05-21 | 2023-01-20 | 科美博阳诊断技术(上海)有限公司 | 一种化学发光分析测定方法及使用该方法的系统、试剂盒 |
| CN114563366B (zh) * | 2019-09-29 | 2023-09-01 | 迈克医疗电子有限公司 | 高浓度试样识别方法、装置及检测系统 |
-
1991
- 1991-06-30 JP JP18679491A patent/JP2946850B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2018110006A1 (ja) * | 2016-12-15 | 2018-06-21 | 株式会社堀場製作所 | 免疫凝集反応を用いた濃度測定における被験物質濃度の適正性の判定方法およびそのための処理部を有する試料分析装置 |
| JPWO2018110006A1 (ja) * | 2016-12-15 | 2019-10-24 | 株式会社堀場製作所 | 免疫凝集反応を用いた濃度測定における被験物質濃度の適正性の判定方法およびそのための処理部を有する試料分析装置 |
| JP2022046716A (ja) * | 2016-12-15 | 2022-03-23 | 株式会社堀場製作所 | 免疫凝集反応を用いた濃度測定における被験物質濃度の適正性の判定方法およびそのための処理部を有する試料分析装置 |
| JP7101124B2 (ja) | 2016-12-15 | 2022-07-14 | 株式会社堀場製作所 | 免疫凝集反応を用いた濃度測定における被験物質濃度の適正性の判定方法およびそのための処理部を有する試料分析装置 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0510953A (ja) | 1993-01-19 |
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Legal Events
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|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |