JP2930719B2

JP2930719B2 - リパーゼ含有液体プレスポッターおよびその使用

Info

Publication number: JP2930719B2
Application number: JP3504594A
Authority: JP
Inventors: ゴルムセン，エリク
Original assignee: Novo Nordisk AS
Current assignee: Novo Nordisk AS
Priority date: 1990-03-01
Filing date: 1991-02-28
Publication date: 1999-08-03
Anticipated expiration: 2014-08-03
Also published as: DE69101219D1; WO1991013141A1; EP0517761B1; WO1991013142A1; ES2051122T3; JPH05504368A; DE69101219T2; EP0517761A1; DK0517761T3

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、リパーゼ含有液体プレスポッターおよび該
プレスポッターの使用に関する。

洗浄プロセスに関し、次のように記載されている。す
なわち、除去が困難である脂肪又は油のしみは、リパー
ゼ含有液体プレスポッターで処理できるが、このプレス
ポッターは洗浄プロセス前にしみに直接適用される。し
かし、出願人の熟知しているところによれば、リパーゼ
含有プレスポッターは商業化されていない。おそらく、
これはリパーゼ安定性又は特性が問題である。更に以下
のように記載されている。すなわち、このように処理さ
れた洗たく物を引き続き、通常短時間後比較的低温度で
洗う。リパーゼ含有プレスポッターを用いる利点の一つ
は、その後の洗浄プロセスが比較的低温、すなわち約60
℃未満で行うことができることである。もしも、リパー
ゼ含有プレスポッターを用いない場合、通常洗浄プロセ
スは脂肪又は油のしみを有効に除くためには約100℃で
かつ高アルカリで行なわなければならないだろう。しか
し、このような条件、すなわち約100℃でかつ高アルカ
リのもとでさえ、頑固な脂肪又は油のしみは除去できな
い。EP177183を参照のこと、この特許には酵素が逆ミセ
ル中に封入された特別のリパーゼ含有プレスポッターが
記載されている。以下の内容が見出された。すなわち、
従来技術のリパーゼ含有プレスポッターの脂肪および油
除去効果および従来技術のリパーゼ含有プレスポッター
のリパーゼ安定性は改善の余地がある。

従って、本発明の目的は、改善された脂肪および油除
去効果および改善されたリパーゼ安定性を示す、簡単な
リパーゼ含有液体プレスポッターを提供することにあ
る。

本発明に係るリパーゼ含有の、かつ界面活性剤を有し
ないプレスポッターは、アルコール含有20重量％超のア
ルコールと水の混合物並びに有効量のリパーゼを含んで
なり、この際バランスは水である。本発明に係るプレス
ポッターは界面活性剤を含んでおらず、従って本発明に
係るプレスポッターは以下の実施例で実施される如く極
めて有効であるという事実にもかかわらず簡単な組成を
示すということは注目すべきである。

明細書および請求の範囲において、語句アルコール
は、エタノールの如き一価のアルコールおよびプロピレ
ングリコールの如き多価アルコール（ポリオール）の双
方を含む。もしもアルコール含量が10重量％未満である
場合、リパーゼの効果および安定性は不満足となりがち
である。

語句「有効量のリパーゼの」は本明細書中、後に記載
するワックステストにより評価した場合、脂肪および油
のしみを有効に除去できる量のリパーゼを意味する。本
発明に係るプレスポッターにおいては、全てのリパーゼ
が使用できる。Research Disclosure,1988年７月No.29
0,29056を参照のこと。

西ドイツ特許第3,003766号は、リパーゼ含有液体プレ
スポッターを開示しており、このプレスポッターはアル
カノールアミンに加えて、少なくとも10％の界面活性剤
を有する。これは水性の酵素含有プレスポッターの典型
的例である。

何故ならこの種の従来技術のプレスポッターは全て界
面活性剤を有するからである。しかし、本発明に係るプ
レスポッターは界面活性剤を有さず、アルカノールアミ
ンの含有を必要としない。本発明に係るプレスポッター
の効果は、公知の界面活性剤含有プレスポッターと同等
又はそれ以上に良好であり、そして本発明に係るプレス
ポッターは従来のプレスポッターよりも安価である。本
発明に係るプレスポッターは比較的に高価な界面活性剤
を有しないからである。

本発明に係るプレスポッターの好ましい態様におい
て、プレスポッターは更にリパーゼ安定化剤を含有す
る。適当なリパーゼ安定化剤はCaCl₂（例えば0.1〜0.5
％、又はプロテアーゼ阻害剤（例えばボレートおよびホ
ルメート）である。

本発明に係るプレスポッターの好ましい態様におい
て、アルコールは２〜３個の炭素原子を有する一価又は
多価アルコールであり、好ましくはエタノール、プロピ
レングリコール、クリセロール又はこれらの２種又はそ
れ以上の混合物である。脂肪および油除去効果はこれら
のアルコールに関し最良に満足できることが見出され
た。

本発明に係るプレスポッターの好ましい態様におい
て、リパーゼ活性は１の液体プレスポッター当たり少
なくとも10,000LUである。以下の内容が見出された。

すなわち、もしもリパーゼ活性が１の液体プレスポ
ッター当たり10,000LU未満である場合プレスポッターと
主洗浄間の時間間隔は、有効な脂肪および油の除去のた
めには必要以上に長い。一方、経済的理由から、リパー
ゼ活性に対する適当な上限値は１の液体プレスポッタ
ー当たり5,000,000LUである。

本発明に係るプレスポッターの好ましい態様におい
て、リパーゼはリポラーゼ（Lipolase）（登録商標）で
ある。脂肪および油の除去は、この態様において極めて
有効であることが見出された。

本発明に係るプレスポッターの好ましい態様におい
て、プレスポッターは抗微生物剤を含む。このような抗
微生物剤の例は、無機塩（例えばNaCl）、通（例えばス
クロースおよびグルコース）、有機酸（安息香酸）、ソ
ルビン酸、ピロピオン酸、乳酸およびギ酸）であり、こ
れらは一般に低pH（５未満）で0.01〜２％量で有効であ
る。他の安定化剤の例は、酸化防止剤（例えば二酸化イ
オウ）、1,2−ベンズ−イソチアゾリン−３−オン（BI
T）およびパラベンである。これらの幾つかは又、酸素
安定性の改良にも役立つ。

本発明に係るプレスポッターの好ましい態様におい
て、pH値は４〜10、好ましくは５〜９である。特定のプ
レスポッターに対するpH値を選択する場合、リパーゼの
最適安定性および最適活性が考慮されるべきである。

また、本発明は、本発明に係るプレスポッターの使用
を含み、この使用はプレスポッターを洗たく物の脂肪又
は油のしみに局所的に適用し、洗たく物を単独で一定時
間放置し、引続き洗たく物を低温洗浄プロセスに委ねる
ことを特徴とする。

上記の一定時間は、通常少なくとも５分であるが、プ
ロスポッター中のリパーゼ活性が法外に高い場合は短か
くできる。

ノボ洗浄用酵素B4351−GB（1989年７月）のパンフレ
ットから、以下の略が明らかである。極めて困難なしみ
が、重質液体洗剤を用いる、特定のテストにおいてリポ
ラーゼ（登録商標）含有洗剤を有するプレスポッターの
導入により除去できる。この重質液体洗剤は約28％の界
面活性剤を含有していた。

以下の内容が見出された。すなわち、プレスポッティ
ング（pre−spotting）中、脂肪の加水分解は法外には
起こらないが、しかし、更にプレスポッター中のアルコ
ールに基づくエステル合成および脂肪酸が脂肪触媒化加
水分解により脂肪又は油のしみから放出される。高い水
の活性のため、エステル合成が起こることは驚くべきこ
とである。更に、上記のエステルにより形成されたエス
テルは界面活性剤として挙動し、脂肪および油除去効果
合を改善する。従って、本発明に係るプレスポッターの
改善された脂肪および油の除去効果の一部は、このエス
テル合成に起因すべきであると推定される；しかし、出
願人はこの仮説には拘束されたくない。

以下の実施例において、リパーゼ活性はLUリパーゼ活
性単位で測定される。LU活性の測定方法は、pH−スタッ
ト中トリブチリンの加水分解に基づく。1LU（リパーゼ
単位）は、乳化剤としてアラビアゴムを用い30℃でかつ
pH7.0で毎分１μモルの滴定可能な酪酸を放出する酵素
の量である。詳しくはノボノルディスク分析方法AF95/5
（ノボノルディスク社、デンマーク国バグマバエルトDK
−2880、ノボアレーより要求により入手可能）に示され
る。

以下の実施例において、一般的手段を用いた。

方法：液体プレスポッターの態様が、ピペット法により
試験スワッチ上の脂肪のよごれに適用される。用いたプ
レスポッターの量は、しみの大きさおよび布帛の種類に
依存する；典型的には0.5〜3mlのプレスポッターが満足
できる。５〜30分インキュベーション後、スワッチを洗
たく機（ランダリーオートメーター又はトルク−オート
メーター）で低温度（20〜40℃）で洗う。洗浄プロセス
で用いる洗剤は、標準の粉末又は液体洗剤である。

スワッチ：スワッチは着色（例えば青又は緑）の綿布帛
から作成する。布帛を12×12cmの寸法の試験片に切断
し、75〜150μの脂肪物質（例えばラード、マーガリ
ン、バター又はオリーブ油）を各スワッチの中央に適用
する。適用した脂肪物質の量は、用いて脂肪物質のタイ
プに依存する。脂肪物質を適用前に約70℃に加熱し、布
帛への脂肪物質の侵入を促進する。しみのついた布帛
を、処理前１日間室温で老化せしめた。

評価：洗浄および乾燥後、スワッチを穏やかにアイロン
がけする。スワッチを可視的に調べ、プレスポッター配
合物にリパーゼを添加しないで同様に処理した参考スワ
ッチと比較する。リパーゼの有効性を数量化するため、
残留脂肪物質の抽出を行うことができる（ソックスレ
ー、700ホルム、５時間）。

例１水およびプロピレングリコールに基づくプレスポッター
配合物中のリポラーゼ（登録商標）の作用しみ：緑色綿シート上にラード。

75μのラードを各スワッチに適用した。しみを適用
後、スワッチをオーガン中75℃で30分間加熱し、より良
く分散したしみを得る。

プレスポッティング:1mlのプレスポッターをピペット
を用い、しみの中央に適用し、引続きスワッチを室温で
15分間インキュベートする。

プレスポッター配合物は、１％のリポセーゼ（登録商
標）100L（100,000LU/g）および99％（W/W）の水および
プロピレングリコールの混合物を含有していた。従っ
て、プレスポッター中のリパーゼ活性は1000LU/gであっ
た。比較のため、リパーゼを添加しない同様のプレスポ
ッター配合物を同様に評価した。

洗たく：プレスポッティング後、直ちにスワッチを、1.
75g/のナトリウムトリホスフェート、0.40g/のナト
リウムメタシリケート、2.00g/の硫酸ナトリウム、0.
30g/のベロール160（アルコールエトキシレート、ベ
ロールチミー社スウェーデン）および0.50g/のナン
サS80/S（LAS、アルブライトアンドウィルソン、U
K）を含有する簡易化ヨーロッパ粉末洗剤を用い、トリ
クオートメーター（40℃、20分、18゜dH、pH9.5）中で
洗った。

評価：しみのついた試験パネルを可視的検査によりしみ
の除去を評価した（13）人）。

評価の点数:0ひどいもみ（処理されていないしみ）１明らかに見えるしみ２可視可能なしみ３可視困難なしみ４トレース量のしみ５しみは完全に除去結果：開発したプレスポッター配合物の平均点は次の通
りであった：例２水およびプロピレングリコールに基づくプレスポッター
配合物中のリパーゼ用量の効果例１で記載したと同様の試験物質、同じプレスポッテ
ィング、洗たくおよび評価を用いた；唯一の相違はソポ
ラーゼ（登録商標）100Lの用量が０〜５％に変えられた
ことであった。

結果（試験パネル評価の平均点）例３水およびプロピレングリコールに基づくプレスポッター
配合物中の種々のリパーゼの効果例２に記載したと同様の実験を行った。但し、唯一の
相違は、異る起源の４種のリパーゼ（２種は菌類由来、
１種は細菌由来、および１種は酵母由来）を調べた点で
ある。リパーゼをLU−活性基準について比較した。

結果（試験パネル評価の平均点）：例４種々のアルコールを含有するプレスポッター配合物中の
リポラーゼ（登録商標）の効果例１に記載したと同様の試験物質、同じプレスポッテ
ィング、洗たくおよび評価方法を用いた。

結果（試験パネル評価の平均値）：例５水／プロピレングリコール配合物中のリポラーゼ（登録
商標）の結果しみ:3種のしみを調べた１）白い綿（からみ合いタイプ）に口ベニ。口ベニを布
帛上に均質な層で（スポットの直径:40mm）適用した。

２）紫色の綿（からみ合いタイプ）上にラード。１個の
スワッチ当たり150μのラード。

３）暗緑色綿（からみ合いタイプ）上にオリーブ油、１
個のスワッチ当たり150μのオリーブ油。

プレスポッティング:3mlのプレスポッターをしみの中央
に適用し、引続きスワッチを室温で15分間インキュベー
トする。プレスポッター配合物は、５％（W/W）のリポ
ラーゼ（登録商標）100L、45％（W/W）の水、および50
％（W/W）のプロピレングリコールを含有していた。従
って、プレスポッター中のリパーゼ活性は5000LU/gであ
った。比較のため、リパーゼを添加せず、すなわち50％
W/Wの水および50％W/Wのプロピレングリコールの同じプ
レスポッター配合物を同様に評価した。

洗たく：プレスポッティング直後、スワッチをトルクオ
ートメータ（30℃、30分、18゜dH、pH9.5）中、商業上
のヨーロッパ粉末洗剤（5g/）で洗った。

評価：プレスポッターの特性を例１に記載した方法と同
じ試験パネル法で評価した。

結果：平均点（12人）は次の通りであった：例６プレスポッター配合物の保存安定性リポラーザ（登録商標）の酵素安定性を５種の異なる
プレスポッター配合物中で調べた。

プレスポッター配合物を、密閉ビン中、30℃で保存
し、次いで活性を２カ月にわたって調べた。

例７プレスポッティング条件下でのエステル合成対加水分解リパーゼ触媒化エステル合成対加水分解を調べるた
め、次の実験を行った。PVC粒子に吸着したオリーブ油
を、リパーゼを含有するプレスポッティング配合物中で
インキュベートした。５分間インキュベーションした
後、反応を停止させ、脂肪物質を抽出し、クロマトグラ
フィー法で分析した。インキュベーションの分析:30
℃、pH7.0、1.67gのPVC粉末に吸着した0.33gのオリーブ
油、20gのプレスポッター、1500LU。

結果：

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (31)優先権主張番号１１８／９１ (32)優先日 1991年１月24日 (33)優先権主張国デンマーク（ＤＫ） (58)調査した分野(Int.Cl.⁶，ＤＢ名) C11D 7/42 C11D 3/386 D06L 1/12 D06M 16/00 ＷＰＩ／Ｌ（ＱＵＥＳＴＥＬ) ＥＰＡＴ（ＱＵＥＳＴＥＬ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】アルコール含量が20重量％を超える水及び
アルコールの液体混合物と、有効量のリパーゼとを含ん
で成り、残りが水である、リパーゼを含有しかつ界面活
性剤を有しない液体プレスポッター。
【請求項２】更にリパーゼ安定化剤を含んでなる、請求
の範囲第１項記載のプレスポッター。
【請求項３】アルコールがエタノール、プロピレングリ
コール、グリセロール又はこれらの２種又はそれ以上の
混合物である、請求の範囲第１項又は第２項記載のプレ
スポッター。
【請求項４】リパーゼ活性が１の液体プレスポッター
当たり、少なくとも10,000LUである、請求の範囲第１〜
３項のいずれかに記載のプレスポッター。
【請求項５】リパーゼがリポラーゼ（登録商標）であ
る、請求の範囲第１〜４項のいずれかに記載のプレスポ
ッター。
【請求項６】プレスポッターが抗微生物剤を含有する請
求の範囲第１〜５項のいずれかに記載のプレスポッタ
ー。
【請求項７】pH値が４〜10である、請求の範囲第１〜６
項のいずれかに記載のプレスポッター。