JP2736066B2 - ３―アシロキシ―ビシクロ〔３．３．０〕オクタン―７―オン―２―カルボン酸エステルの立体特異性の酵素または微生物的アシレート加水分解によるラセミ分割 - Google Patents

３―アシロキシ―ビシクロ〔３．３．０〕オクタン―７―オン―２―カルボン酸エステルの立体特異性の酵素または微生物的アシレート加水分解によるラセミ分割

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JP2736066B2 JP62506737A JP50673787A JP2736066B2 JP 2736066 B2 JP2736066 B2 JP 2736066B2 JP 62506737 A JP62506737 A JP 62506737A JP 50673787 A JP50673787 A JP 50673787A JP 2736066 B2 JP2736066 B2 JP 2736066B2
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Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ラセミ体の３−アシロキシ−ビシクロ〔3,
3,0〕オクタン−７−オン−２−カルボン酸エステル
を、酵素または微生物を使用し光学的に活性な３−アル
コールに立体特異性アシレート加水分解する方法に関す
る。 殊にこの方法は、式（＋）−I: 〔式中、R1およびR2が一緒になつて酸素原子または、Ｃ
原子数１〜７を有する直鎖−または分枝鎖状アルキレン
としてのＸを有する２結合性の基：−Ｏ−Ｘ−Ｏ−を表
わし、またはR1およびR2のそれぞれが、Ｃ原子数１〜７
を有する直鎖−または分枝鎖状アルキルとしてのR5を有
する基:OR5を表わし、かつR3が、水素原子、Ｃ原子数１
〜７を有する直鎖−または分枝鎖状アルキル、Ｃ原子数
３〜６を有するシクロアルキル、フエニルまたはＣ原子
数７〜10を有するアルアルキルとしてのＺを有する基:C
OOZを表わし、またはR3が、１〜４の価のｎおよび、Ｃ
原子数１〜７を有する直鎖−または分枝鎖状アルキル、
Ｃ原子数３〜６を有するシクロアルキル、フエニルまた
はＣ原子数７〜10を有するアルアルキルとしてのR4を有
する基：−（CH2）ｎ−Ｏ−COR4を表わす〕の光学活性
の（＋）−ビシクロ〔3,3,0〕オクタノール誘導体を製
造するのに適当である。 この方法は、式（±）−II:〔式中、R1,R2,R3およびR4は前述のものを表わす〕のラ
セミ体の３α−アシロキシ−シス−ビシクロ〔3,3,0〕
オクタン誘導体に、酵素的または微生物学的に立体特異
性のアシレート加水分解を施こし、かつ生じる（＋）−
ビシクロ〔3,3,0〕オクタノール誘導体（＋）−Ｉを式
（−）−IIの不鹸化のビシクロ〔3,3,0〕オクタノール
−アシレートと分離するか、または不鹸化のエナンチオ
マー（＋）−IIを鹸化せるビシクロ〔3,3,0〕オクタノ
ール誘導体（−）−Ｉを分離し、かつ引続き化学的なア
シレート加水分解を施こすことを特徴とする。 従つて、ＸがＣ原子数１〜７を有する直鎖または分枝
鎖状アルキレン基を表わす場合、以下の基が挙げられ
る：−（CH2）ｎ−、但しｎ＝１−７（メチレン、エチ
レン、トリ−、テトラ−、ペンタ−、ヘキサ−およびヘ
プタメチレン）、−Ｃ（CH3）２−、−CH（CH3）−、−
CH（CH3）−CH2−、−Ｃ（CH3）２−CH2−、−CH2−CH
（CH3）−、CH2−Ｃ（CH3）２、−CH2−CH（CH3）−CH2
−、−CH2−Ｃ（CH3）２−CH2−、−CH−（C2H5）−、
−Ｃ（C2H5）２−、−CH（C2H5）−CH2−、−Ｃ（C
2H5）２−CH2−、−CH2−CH（C2H5）−、−CH2−Ｃ（C2
H5）２−、−CH2−CH（C2H5）−CH2−、−CH2−Ｃ（C2H
5）２−CH2−等。 Ｃ原子数１〜７を有する直鎖または分枝鎖状アルキル
基としてのＺ、R4およびR5は、メチル、エチル、ｎ−プ
ロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、第２
ブチル、第３ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、第
２ペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル、イソヘキシ
ル、ｎ−ヘプチル、イソヘプチルを表わす。 Ｃ原子数７〜10を有するアルアルキル基としてのＺな
いしはR4は以下の基を包含する：−CH2−C6H5、−CH2−
CH2−C6H5、−CH2−CH2−CH2−C6H5、−CH2−CH2−CH2
−CH2−C6H5、 Ｃ原子数３〜６を有するシクロアルキル基としてのＺ
ないしはR4は以下の基を包含する：シクロプロピル、シ
クロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル。 光学活性の6a−カルバ−プロスタサイクリンおよび殊
にこれより誘導された若干の化合物は、天然のプロスタ
サイクリン（PGI2）の安定な類縁体として大きい治療効
果を有する〔R.C.ニコルソン（Nikolson）、M.H.タウン
（Town）、H.フオルブリユツゲン（Vorbrueggen）：プ
ロスタサイクリン−アナログス（Prostacyclin−Analog
s）、メデイカル・リサーチ・レビユース（Medical Res
earch Reviews）、第５巻、第１号、１〜53頁（1985
年）〕。この新たな展望に示された合成は長時間かか
り、かつ部分的にラセミ体のカルバサイクリンを生じる
にすぎない。殊に費用のかかるのは、カルバサイクリン
が天然のPGI2に相応する絶対配置で生じる合成である。
このことは、容易に入手可能な適当な出発物質がアキラ
ル（achiral）でありかつ光学活性が差当り合成進行中
にそれに適当な中間工程中へ導入される必要があること
による。 すでに多数の合成が、光学活性な７α−ヒドロキシ−
６β−ヒドロキシメチル−２−オキサ−ビシクロ〔3,3,
0〕オクタン−３−オン誘導体から出発する。実際にそ
れにより、光学活性導入の難点が解決される。しかしな
がら、さらに引続く多工程の合成列が、２−オキサ官能
基をメチレン基により置換し、差当りカルバサイクリン
類縁体にそれぞれ代表的なα−およびω連鎖の組込みに
適当である３α−ヒドロキシ−２β−ヒドロキシメチル
−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−７−オンの誘導体を得
るために実施されなければならない。 最近の刊行物には、光学活性カルバサイクリンを合成
するためシス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−3,7−ジオ
ン誘導体の使用が記載されている。小島等（Kojima et
al.）によりケム・フアーム・ブル（Chem.Pharm.Bul
l.）第33巻、2688頁（1985年）に記載された方法は、ラ
セミ体7,7−エチレンジオキシ−３α−ヒドロキシ−シ
ス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２−カルボン酸のジ
アステレオマー塩の分離を包含する。 さらにまたこの方法は、３−オキソグルタルエステル
から出発しカルバサイクリン類縁体の出発物質を得るた
め、７つの反応工程を必要とする。さらに、不安定なβ
−ケト酸中間工程を通る。 さらに、前記せるような光学活性のカルバサイクリン
類縁体の製造には、簡単な製造を許容する合成法が知ら
れていない。 酵素として、本発明による方法にとくに適当なのが、 アルカリゲネス（Alcaligens）からのリパーゼ−PL〔名
糖産業社（Fa.Meito Sangyo）〕 カンジダ・シリンドラセア（Candida cylindracea）か
らのリパーゼ−My〔名糖産業社〕 リゾプス属（Rhizopus）からのリパーゼ“サイケン”
（Saiken）〔長瀬社（Fa.Nagase）〕 リパーゼ“スクレロチニア”（Sclerotinia）〔長瀬
社〕 牛膵臓からのα−キモトリプシン（α−Chymotrypsin）
〔ケミカル・ダイナミツクス・コーポレーシヨン社（F
a.Chemical Dynamics Corporation）〕 アルカラーゼＴ〔ノボ・インダストリアズ社（Fa.Novo
Industrias）〕 豚肝臓からのエステラーゼ〔ベーリンガー・マンハイム
社（Fa.Boehringer Mannheim）〕 豚膵臓からのリパーゼ〔ケミカル・ダイナミツクス・コ
ーポレーシヨン社〕 バチルス・スブチリス（Bacillus subtilis）からのス
ブチリシン（subtilisin）〔ベーリンガー・マンハイム
社〕であり、 その場合これら酵素が、溶解、懸濁されるかまたは、
例えばBrCN活性化セフアロースまたはオキシランアクリ
ル粒状物に定着された形で、もしくは任意の他の定着さ
れた形で使用されることができる。 微生物として、本発明による方法にとくに適当なの
が、 アルカリゲンス・マルシヤリ（Alcaligens marshalli）
ATCC 21030 ムコール・ロウキシ（Mucor rouxii）ATCC8097;DSM3897 コリネバクテリウム・エクイ（Corynebacterium equi）
ATCC 21107 トリコデルマ・コニンギ（Trichoderma koningi）CBS
85068 サルシナ・ルテア（Sarcina lutea）ATCC 9341 ペニシリウム・シトリヌム（Penicillilm citrinum）AT
CC 8506 フラボノバクテリウム・ルテセンス（Flavonobacterium
lutescens）IFO 3085 アルカリゲネス・パラドクスス（Alcaligenes paradoxu
s）ATCC 17713 である。 しかしまた、微生物から単離された酵素が溶解せるか
または定着された形で使用されてもよい。 本発明による方法により製造可能な式：（＋）−Ｉの
光学活性ビシクロオクタン誘導体は、薬理学的に有効な
プロスタサイクリン誘導体を合成するのに有用な中間生
成物である。立体特異性加水分解性の多数の酵素が、
式：（±）−IIのラセミ体３α−アシロキシ−シス−ビ
シクロ〔3,3,0〕オクタン誘導体を、その絶対配置が天
然のプロスタサイクリンPGI2に相応する式：（＋）−Ｉ
の光学活性アルコールに鹸化する。このことは、分光お
よび光学的特性を、光学活性カルバサイクリン類縁体合
成の中間工程から常法により製造されることのできる比
較物質と比較することにより明白である。こうして得ら
れた生成物は、不鹸化の“擬性の”エナンチオマー
（−）−Ｉを分離した後、直接に、天然のプロスタサイ
クリンPGI2に相応する類縁体の合成に使用されることが
できる。 しかしながら、例えばα−キモトリプシンまたはアル
カラーゼＴのような微生物および酵素も挙げられ、これ
らはラセミ化合物（±）−IIの２つの成分のうち、“擬
性の”非天然形立体配置のエナンチオマーを（−）−Ｉ
に鹸化する。この場合、残存せる不鹸化のエナンチオマ
ー（＋）−IIがPGI2類縁体であるカルバサイクリンの合
成に使用される。 他の場合、本発明による方法は、一般に酵素による反
応ないしは微生物による変換で適用されかつ実施例から
明白である一般に公知の操作条件により作業する。酵素
または微生物による変換の経過が、連続的に採取される
サンプルを分析することにより追跡される。分析法とし
て、HLPCまたは薄層クロマトグラフ高速分析〔メルク社
／ダルムシユタツト在（Fa.Merck/Darmstadt）のシリカ
ゲル板、エーテルによる展開、硫酸／メタノールによる
着色〕が適当である。 使用せるラセミ基質の50％が反応した際に、反応を中
止しかつバツチを処理する。 殊に、本発明による酵素または微生物による立体特異
性アシレート鹸化が、以下のラセミ体プロスタサイクリ
ン中間工程のアシレート鹸化に適当である： 本発明による方法により製造された式：（＋）−Ｉの
光学活性３α−ヒドロキシ化合物から、薬学的に有効な
プロスタサイクリンが製造されることができる。例え
ば、（＋）−Ｉから出発し有効物質であるアイロプロス
ト（Iloprost）（欧州特許明細書第11591号に記載）が
得られる。 1986年11月11日に、菌株であるムコル・ロウキシ（Mu
cor rouxii）（DSM 3897）およびアルカリゲネス・マ
ルシヤリ（Alcaligenes marshallii）（DSM 3900）が
ドイツチエン・ザンムルング・フオン・ミクロオルガニ
スメン（Deutschen Sammlung von Mikroorganismen）に
寄託された。 出発化合物の製造： 例A1 7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シス
−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−３−オン−２−カルボ
ン酸メチルエステル 55〜60％水素化ナトリウム38.34gをジメチルカーボネ
ート616ml中に懸濁し、窒素下に50℃に加熱し、かつこ
のものに、3,3−（2,2−ジメチルトリメチレンジオキ
シ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−７−オン49.
31gのジメチルカーボネート370ml中溶液のわずかな量を
添加する。メタノール2mlを添加することにより反応を
惹起し、これに残りの溶液を添加しかつ合計7.5時間50
℃で撹拌する。氷浴中で冷却し、過剰量の水素化ナトリ
ウムをメタノールで分解し、水を添加しかつ酢酸で中和
する。生成物をジクロルメタンで抽出し、真空中で濃縮
し、かつ生成物をヘキサンで結晶化する。融点72℃の生
成物532.44gが得られる。 例A2 7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−３α
−ヒドロキシ−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２
β−カルボン酸メチルエステル 方法Ａ 7,7−（ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シス−
ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−３−オン−２−カルボン
酸メチルエステル52.0gを加熱状態でメタノール1000ml
に溶解し、かつ−40℃に冷却する。その後に、硼水素化
ナトリウム20.91gを装入し、30分撹拌し、アセトン171m
lを徐々に混合し、かつ引続く１時間後に酢酸で中和す
る。主量の溶剤を溜去した後、水およびジクロルメタン
を混合し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥しかつ真空中
で濃縮する。 残渣をメタノール550ml中にとり、これにナトリウム
メチレート9.94gを添加し、かつ105分40℃に加熱する。
氷浴中で冷却し、中和しかつ前記せるように処理する。
得られた粗生成物を、シリカゲルでジクロルメタン−エ
チルアセテート混合物を使用しクロマトグラフ処理す
る。所望の化合物47gが得られ、このものはヘキサンで
結晶化することができかつ融点43℃を有する。 方法Ｂ 7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シ
ス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−３−オン−２−カル
ボン酸メチルエステル56.6gをエチルアセテート300mlに
溶解し、かつ二酸化白金5.1gを添加した後、22℃で常圧
下に、水素吸収が終了するまで水素添加する。触媒と濾
別しかつ真空中で濃縮する。所望の化合物56.8gが得ら
れ、その純度が結晶性エステルを製造するのに十分であ
る。生成物はヘキサンから結晶化することができ、かつ
融点43℃の初結晶体44.4gが得られる。 例A3 7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−３α
−ヒドロキシ−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２
β−カルボン酸メチルエステル−３−エステル ａ） アセテート（＋）−１ 方法Ｂによる前記実施例で得られた粗生成物100gをピ
リジン57mlおよび無水酢酸57ml中に溶解し、かつ３時間
40℃に加熱する。冷却した後、氷水を添加し、ジクロル
メタンで抽出し、有機相を２−ノルマル硫酸、炭酸水素
ナトリウム溶液および塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫
酸ナトリウムで乾燥し、真空中で濃縮し、かつ残渣をヘ
キサンから結晶化する。融点54℃の生成物97.6gが得ら
れる。 ｂ） ベンゾエート（±）−３ ヒドロキシエステル粗生成物5.0gをピリジン10mlに溶
解し、ベンゾイルクロリド2.47mlを混合し、かつ４時間
22℃で撹拌する。その後に、徐々に氷水100mlに添加
し、30分撹拌しかつ結晶を吸引濾別する。乾燥しかつメ
タノールから再結晶することにより、融点102℃の生成
物5.97gが得られる。 ｃ） イソブチレート（±）−７ 結晶化せるヒドロキシエステル4.265gをジクロルメタ
ン40mlに溶解し、トリエチルアミン4.16mlを混合しかつ
徐々にイソブチリルクロリド3.14mlを混合する。22℃で
2.5時間後に、炭酸水素ナトリウム飽和溶液40mlを添加
し、有機相を分離し、かつ2n−硫酸で氷冷下におよび水
で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥しかつ真空中で濃縮す
る。粗生成物を、シリカゲルでヘキサン−エチルアセテ
ート混合物を使用しクロマトグラフ処理する。融点43℃
の生成物4.91gが得られる。 ｄ） ブチレート（±）−６ 結晶化せるヒドロキシエステル4.265gをピリジン10ml
に溶解し、無水酪酸4.90mlを添加し、かつ20時間22℃で
撹拌する。氷水を混合し、ジクロルメタンで抽出し、か
つこのものを炭酸水素ナトリウム溶液で、氷冷下に2n−
硫酸および水で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥し、真空
中で濃縮し、かつシリカゲルでヘキサン−エチルアセテ
ート混合物を使用しクロマトグラフ処理する。生成物5.
03gが無色の油状物として得られる。 ｅ） ヘミサクシネート（±）−８ 結晶化せるヒドロキシエステル4.265gをピリジン10ml
に溶解し、４−ジメチルアミノピリジン1.833gおよび無
水コハク酸1.501gを添加し、かつ20時間22℃で撹拌す
る。その後に氷水に入れ、2n−硫酸でpH＝３に酸性化
し、ジクロルメタンで抽出し、塩化ナトリウム溶液で洗
浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、かつ真空中で濃縮す
る。残渣を炭酸水素ナトリウム溶液にとり、ジエチルエ
ーテルで抽出し、水相をpH＝３に酸性化し、ジクロルメ
タンで抽出し、このものを塩化ナトリウム溶液で洗浄
し、硫酸ナトリウムで乾燥し、かつ真空中で濃縮する。
生成物5.04gが無色の油状物として得られる。 例A4 ３α−アセトキシ−7,7−エチレンジオキシ−シス−ビ
シクロ〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボン酸メチルエ
ステル（＋）−２ 7,7−エチレンジオキシ−３α−ヒドロキシ−シス−
ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボン酸メチル
エステル10.0gを例A3a）の条件下に反応させ、かつ粗生
成物をシリカゲルでヘキサン−エチルアセテート混合物
を使用しクロマトグラフ処理する。融点50℃の生成物1
0.28gが得られる。 例A5 7,7−（2,2−ジメチルトリメチレンジオキシ）−３α−
ヒドロキシ−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２β
−カルボン酸 例A2からの結晶性ヒドロキシエステル5.0gを1n−苛性
ソーダ溶液17.6mlと30分22℃で撹拌し、エチルアセテー
トで抽出し、氷冷下に水相を2n−硫酸でpH＝３に酸性化
し、ジクロルメタンで抽出し、塩化ナトリウム溶液で洗
浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、かつ真空中で濃縮す
る。逐次反応用に十分に純粋である生成物4.66gが得ら
れる。 例A6 ３α−アセトキシ−7,7−（2,2−ジメチルトリメチレン
ジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２β
−カルボン酸（±）−９ 例A5からのオキシ酸3.13gをピリジン15mlに溶解し、
かつ無水酢酸2.74mlを添加した後20時間22℃で撹拌す
る。これに氷水を添加し、30分撹拌し、ジクロルメタン
で抽出し、このものを水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾
燥し、真空中で濃縮し、かつシリカゲルでヘキサン−エ
チルアセテート混合物を使用しクロマトグラフ処理す
る。生成物3.04gが無色油状物として得られる。 例A7 7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−３α
−ヒドロキシ−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２
β−カルボン酸エチルエステル 例A5で得られたオキシ酸4.78gを、アセトン50ml、炭
酸カリウム4.90gおよび沃化エタン5.72mlとともに２日
還流下に加熱する。冷却した後濾過し、濾液を真空中で
濃縮し、水を混合し、ジクロルメタンで抽出し、このも
のを硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、かつ残渣をシリ
カゲルでヘキサン−エチルアセテート混合物を使用し精
製する。生成物3.65gが無色油状物として得られる。 例A8 ３α−アセトキシ−7,7−（2,2−ジメチルトリメチレン
ジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２β
−カルボン酸エチルエステル（±）−10 例A7からのヒドロキシエステル3.10gを例A3a）の条件
下に反応させ、かつ粗生成物をシリカゲルでヘキサン−
エチルアセテート混合物を使用しクロマトグラフ処理す
る。無色油状物としての生成物3.20gが得られる。 例A9 7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−３α
−ヒドロキシ−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２
β−カルボン酸ベンジルエステル 例A5で得られたオキシ酸3.52gを、アセトン50ml、炭
酸カリウム3.59gおよびベンジルクロリド3.0mlとともに
５日還流下に加熱し、かつ例A7に記載せるように処理す
る。無色油状物としての生成物2.07gが得られる。 例A10 ３α−アセトキシ−（2,2−ジメチル−トリメチレンジ
オキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２β−
カルボン酸ベンジルエステル（±）−11 例A9からのヒドロキシエステル1.89gを例A3a）の条件
下に反応させ、かつ粗生成物をシリカゲルでヘキサン−
エチルアセテート混合物を使用しクロマトグラフ処理す
る。無色油状物としての生成物1.78gが得られる。 例A11 7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シス
−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−３−オン−２−カルボ
ン酸ベンジルエステル 7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−ビ
ス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−３−オン−２−カル
ボン酸メチルエステル2.5gのトルエン50ml中溶液に、ベ
ンジルアルコール1.2mlおよびジメチルアミノピリジン2
17mgを添加し、かつこの溶液を８時間還流温度に加熱す
る。引続き25℃に冷却し、塩化ナトリウム飽和溶液を添
加し、メチレンクロリドで抽出し、塩水で洗浄し、硫酸
マグネシウムで乾燥し、かつ真空中で蒸発濃縮する。残
渣を、シリカゲルでのカラムクロマトグラフイーにより
精製する。ヘキサン／酢酸エステル8:2を使用し、無色
結晶としての表記化合物2.6gを溶離する。酢酸エステル
／ヘキサンから再結晶することにより、融点78℃の無色
の結晶1.8gが得られる。 例A12 7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−３α
−ヒドロキシ−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２
β−カルボン酸ベンジルエステル 7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シ
ス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−３−オン−２−カル
ボン酸ベンジルエステル（例11）1.5gを還流温度でメタ
ノール25mlに溶解する。引続き−40℃に冷却し、硼水素
化ナトリウム470mgを添加し、かつ１時間−40℃で撹拌
する。アセトン3.8mlを添加し、１時間−40℃で撹拌
し、酢酸約0.7mlで中和し、かつ真空中で蒸発濃縮す
る。残渣を水100mlと混合し、メチレンクロリドで抽出
し、塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、かつ真
空中で蒸発濃縮する。シリカゲルでヘキサン／酢酸エス
テル（６＋４）を使用しクロマトグラフ処理することに
より、無色油状物としての表記化合物1.4gが得られる。 IR（CNCl3）:3600,2960,2870,1722,1447cm-1 例A13 7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−３α
−ベンゾイルオキシ−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタ
ン−２β−カルボン酸ベンジルエステル 7,7−（2,2−ジメチルトリメチレンジオキシ）−３α
−ヒドロキシ−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２
β−カルボン酸ベンジルエステル（例A12）1.35gのメチ
レンクロリド14ml中溶液に０℃でピリジン1.4mlおよび
ベンゾイルクロリド0.62mlを添加し、かつ0.5時間０℃
でおよび２時間25℃で撹拌する。引続き水0.2mlを添加
し、１時間撹拌し、メチレンクロリドで希釈し、順次に
水、炭酸水素ナトリウム５％溶液および水とともに振と
うする。硫酸マグネシウム上で乾燥し、かつ蒸発濃縮残
渣をシリカゲルでクロマトグラフ処理する。ヘキサン／
酢酸エステル（３＋２）を使用し、無色油状物としての
表記化合物1.36gが得られる。 IR（CNCl3）:2960,2870,1725,1603cm-1 実施例 以下の実施例は、本発明による方法を詳説するために
使用する。 例 １ （±）−３α−アセトキシ−7,7−（2,2−ジメチル−
トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オ
クタン−２β−カルボン酸−メチルエステル3gをエタノ
ール100mlに溶解し、かつアルカリゲネス（Alcaligene
s）からのリパーゼ（Lipase）−PL〔名糖産業社（Fa.Me
ito Sangyo）〕1.5gの0.1M燐酸塩緩衝液pH7 １中溶
液と２−エルレンマイヤーフラスコ中で合する。この
懸濁液を、30℃で回転振とう装置上で振とうし、その場
合反応の経過を、連続的に取出したサンプルを分析する
ことにより追跡する。21時間の反応時間後に、使用せる
基質の50％が変換されている。次いでこのバツチをメチ
ルイソブチルケトンで３回抽出し、抽出物を合し、真空
中で乾燥するまで蒸発濃縮し、かつ未反応のエステルア
シレートをシリカゲルカラムを経てクロマトグラフ処理
する（傾斜法：メチレンクロリド−メチレンクロリド/1
0％アセトン）。エナンチオマー形の純粋な（＋）−３
α−ヒドロキシ−7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレン
ジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２β
−カルボン酸メチルエステル1.15gが得られ、このもの
はヘキサン／イソプロピルエーテルから結晶化すること
により64〜66℃で融解する。（▲〔α〕20 D▼＋26.2
℃、HCCl3中ｃ＝1.255）。 例 ２ （±）−３α−アセトキシ−7,7−（2,2−ジメチル−
トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オ
クタン−２β−カルボン酸メチルエステル300mgを0.1M
燐酸塩緩衝液pH＝７ 100mlに懸濁し、カンジダ・シリ
ンドラセア（Candida cylindracea）からのリパーゼMy
（名糖産業社）750mgを添加し、かつこの懸濁液をウル
トラ・タラツクス（Ultra−Turrax）でホモジナイズす
る。引続き、この混合物を室温で回転振とう装置上で振
とうする。30時間の反応時間後に、基質は50％が反応し
ている。次いでこのバツチをエーテルで３回抽出し、抽
出物を合し、かつ真空中で乾燥するまで蒸発濃縮する。
残存せる残渣を、未反応の出発物質を分離するためメチ
レンクロリド−メチレンクロリド／アセトン５％の溶剤
傾斜を使用しシリカゲルカラムを経てクロマトグラフ処
理する。（＋）−３α−ヒドロキシ−7,7−（2,2−ジメ
チル−トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,
0〕オクタン−２β−カルボン酸−メチルエステル105mg
が得られ、このものはヘキサンから結晶化することによ
り融点62〜63℃を有しかつ旋光度▲〔α〕20 D▼＋25゜
（HCCl3中ｃ＝1.01）を有する。これに対し、真正の比
較基準を使用し比較測定することにより、エナンチオマ
ー過剰率93.6と判明した。 例 ３ （±）−３α−アセトキシ−7,7−（2,2−ジメチル−
トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オ
クタン−２β−カルボン酸−メチルエステル300mgをエ
タノールに溶解し、かつリゾプス属（Rhizopus）からの
リパーゼ“サイケン”（Saiken）〔長瀬社（Fa.Nagas
e）〕750mgの0.1M燐酸塩緩衝液pH7 100ml中懸濁液に添
加する。このバツチを、振とう装置上で28℃で96時間振
とうした後メチルイソブチルケトンで抽出し、抽出物を
乾燥するまで蒸発濃縮し、かつシリカゲルカラムを経て
クロマトグラフ処理する。ヘキサンから結晶化後の融点
64〜65℃である（＋）−３α−ヒドロキシ−7,7−（2,2
−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ
〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−メチルエステ
ル112gが得られる。旋光度が▲〔α〕20 D▼＋23.8゜（H
CCl3中のｃ＝1.02）、真正の基準に対する比較測定によ
るエナンチオマー過剰率が92.5％eeである。 参考例４ （±）−３α−アセトキシ−7,7−（2,2−ジメチル−
トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オ
クタン−２β−カルボン酸−メチルエステル300mgを、
0.1M燐酸塩緩衝液pH7 100mlに懸濁し、牛膵臓からのα
−キモトリプシン〔ケミカル・ダイナミクス社（Fa.Che
mical Dynamics Corporation）〕750mgを添加し、かつ
ウルトラ・タラツクスでホモジナイズする。引続き、反
応混合物を28℃で回転振とう装置上で、使用せるエステ
ルアシレート基質の50％が反応するまで振とうする。そ
の後に、このバツチを多数回メチルイソブチルケトンで
抽出し、合した抽出物を真空中で乾燥するまで蒸発濃縮
し、かつ非天然形立体配置の、この場合は鹸化せるエナ
ンチオマーを分離する目的で、メチレンクロリド−メチ
レンクロリド／アセトン５％の溶剤傾斜を使用しシリカ
ゲルカラムを経てクロマトグラフ処理する。フラクシヨ
ン１が、その絶対配置が天然のプロスタサイクリンPGI2
に相応する、鹸化されずに残存するエナンチオマー
（＋）−IIを含有する。乾燥するまで蒸発濃縮すること
により、（＋）−３α−アセトキシ−7,7−（2,2−ジメ
チル−トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,
0〕オクタン−２β−カルボン酸−メチルエステル115mg
が、旋光度〔α〕Ｄ＋2.6゜（クロロホルム中ｃ＝1.03
5）を有する非結晶性の油状物として得られる。 参考例５ 例４の条件下に、（±）−３α−アセトキシ−7,7−
エチレンジオキシ−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン
−２β−カルボン酸−メチルエステル300mgを、燐酸塩
緩衝液pH7中で、バチルス・スブチリス（Bacillus subt
ilis）からのスブスチリシン（Substilisin）〔ベーリ
ンガー・マンハイム社（Fa.Boehringer Mannheim）〕75
0mgと反応させる。このバツチを、28℃で10時間振とう
した後メチルイソブチルケトンで抽出し、抽出物を乾燥
するまで蒸発濃縮し、シリカゲルカラムを経てクロマト
グラフ処理する。メチレンクロリド−メチレンクロリド
／アセトン４％の溶剤傾斜を使用し、第１のフラクシヨ
ンとして、天然のプロスタサイクリンに相応する立体配
置の、不鹸化の（＋）−エナンチオマーを溶離する。こ
のフラクシヨンを乾燥するまで蒸発濃縮することによ
り、（＋）−３α−アセトキシ−7,7−エチレンジオキ
シ−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボ
ン酸−メチルエステル130mgが、旋光度〔α〕Ｄ＋2.4゜
（クロロホルム中ｃ＝1.085）を有する油状の液体とし
て得られる。 例 ６ ペプトン0.1％、コーン・ステイープ・リカー（Corn
steep liquor）0.2％、グルコース0.5％および酵母エキ
ス0.5％より成る、30分120℃でオートクレーブ中で滅菌
した培養液500mlをpH7.5に調節して含有する２−エル
レンマイヤーフラスコに、アルカリゲネス・マルシヤリ
（Alcaligenes marshalli）ATCC 21030菌株の傾斜管培
養物を接種し、かつ48時間回転振とう装置上で振とうす
る。この成長培養物を、成長培養物と同じ組成の滅菌せ
る培養媒体５が充填された10−発酵装置に接種す
る。消泡剤としてのシリコーンSHの添加下に、29℃で通
気（５／分）および撹拌（220rpm）下に成長させる。
成長工程36時間後に、基質を、滅菌濾過せる、（±）−
３α−アセトキシ−7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレ
ンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２
β−カルボン酸−メチルエステル30gのエタノール125ml
溶液の形で添加し、かつ反応経過を、連続的に取出した
サンプルを分析することにより追跡する。基質添加後10
時間で、使用せる基質の50％が反応される。次いで、発
酵装置内容物をメチルイソブチルケトンそれぞれ３で
４回抽出し、抽出物を合しかつ真空中で乾燥するまで蒸
発濃縮する。残存せる残渣をメタノールに溶解し、かつ
シリコーンオイルを除去するためひだ付き濾紙を通して
濾過する。この濾液を再び真空中で乾燥させ、かつ残渣
を、未反応の非天然形立体配置の（−）−IIエナンチオ
マー（フラクシヨン１）を分離するため、シリカゲルカ
ラムを経てクロマトグラフ処理する（傾斜：メチレンク
ロリド−メチレンクロリド／アセトン20％）。フラクシ
ヨン２で、ヘキサンから結晶化することにより、融点63
〜64℃の（＋）−３α−ヒドロキシ−7,7−（2,2−ジメ
チル−トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,
0〕オクタン−２β−カルボン酸−メチルエステル10.7g
が得られ、このことがエナンチオマー収率81.9％（理論
量の）に相応する。旋光度が〔α〕Ｄ＋26.1゜（クロロ
ホルム中ｃ＝1.3）、エナンチオマー過剰率が97.5％ee
である。 例 ７ グルコース３％、コーン・ステイープ・リカー1.0
％、NaNO3 0.2％、KH2PO4 0.1％、K2HPO4 0.2％、MgSO4
・7H2O 0.05％、FeSO4・7H2O 0.002％およびKCl 0.0
5％より成る、30分120℃でオートクレーブ中で滅菌せる
培養液を含有する２−エルレンマイヤーフラスコに、
ムコール・ロウキシ（Mucor rouxii）菌株（ATCC 809
7）の傾斜管培養物を接種し、かつ2 1/2日30℃で回転振
とう装置上で振とうする。 これら２つの成長培養物の内容物を、60分121℃およ
びゲージ圧1.1barで滅菌せる、成長培養物と同じ組成の
媒体14が充填された20−発酵装置に接種する。消泡
剤としてのシリコーンSHの添加下に、29℃でゲージ圧0.
7barで通気（15／分）および撹拌（220rpm）下に成長
させる。成長工程15時間後に、基質を、滅菌濾過せる、
（±）−３α−アセトキシ−7,7−（2,2−ジメチル−ト
リメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オク
タン−２β−カルボン酸−メチルエステル9gのエタノー
ル220ml中溶液の形で添加し、かつ反応経過を、連続的
に取出したサンプルを分析することにより追跡する。 基質添加後２時間で、使用せる基質の50％が反応され
る。次いで、発酵装置内容物をメチルイソブチルケトン
それぞれ10で３回抽出し、抽出物を合しかつ真空中で
乾燥するまで蒸発濃縮する。残存せる残渣をメタノール
に溶解し、かつシリコーンオイルを除去するためひだ付
き濾紙を通して濾過する。濾液を再び真空中で乾燥さ
せ、かつ残渣を、未反応の出発物質を分離するためシリ
カゲルカラムを経てクロマトグラフ処理する（傾斜：メ
チレンクロリド５−メチレンクロリド／アセトン10％
−５）。（＋）−３α−ヒドロキシ−7,7−（2,2−ジ
メチル−トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,
3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−メチルエステル3.3
gが得られ、このものはヘキサン／イソプロピルエーテ
ルから結晶化することにより64〜65℃で融解する。旋光
度が▲〔α〕20 D▼＋25.7゜（HCCl3中ｃ＝1.045）であ
る。真正の基準に対し比較測定することにより、エナン
チオマー過剰率を96％eeと確定した。 例 ８ ペプトン0.1％、コーン・ステイープ・リカー0.2％、
グルコース0.5％および酵母エキス0.5％より成る滅菌培
養液pH7.3 500mlが充填された２−エルレンマイヤー
フラスコに、コリネバクテリウム・エクイ（Corynebact
erium equi）菌株（ATCC21107）の傾斜管培養物を接種
し、かつ48時間30℃で振とうする。これら２つの成長増
養物の内容物を、これら成長培養物と同じ組成の滅菌培
養媒体14を装入した20−発酵装置に接種する。消泡
剤としてのシリコーンSHの添加下に、29℃およびゲージ
圧0.7barで通気（15／分）および撹拌（220rpm）下に
成長させる。成長時間16時間後に、基質を、（±）−３
α−アセトキシ−7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレン
ジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２β
−カルボン酸−メチルエステル6gのエタノール150ml中
滅菌濾過溶液の形で添加し、かつ引続き撹拌および通気
する。基質添加後３時間で、使用せる基質の50％が変換
される。次いで、このバツチをメチルイソブチルケトン
で抽出し、かつ抽出物を真空中で乾燥するまで蒸発濃縮
する。残存せる残渣を、メタノール処理することにより
シリコーンオイルと分離しかつシリカゲルカラムを経て
クロマトグラフ処理する。（＋）−３α−ヒドロキシ−
7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シス
−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−メ
チルエステル1.9gが得られ、このものはヘキサン／イソ
プロピルエーテルから結晶化することにより63〜65℃で
融解する。旋光度が▲〔α〕20 D▼＋25.2゜（HCCl3中ｃ
＝1.04）である。 例 ９ 例７の条件下に、トリコデルマ・コニンギ（Trichode
rma koningi）菌株（CBS 85068）の培養物を使用し、
（±）−３α−アセトキシ−7,7−（2,2−ジメチル−ト
リメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オク
タン−２β−カルボン酸−メチルエステル6gを発酵時間
28.5時間で（＋）−３α−ヒドロキシ−7,7−（2,2−ジ
メチル−トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,
3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−メチルエステル2.0
gに変換する。ヘキサンから結晶化した物質の旋光度が
▲〔α〕20 D▼＋24.2゜（HCCl3中ｃ＝1.015）である。 例10 例８の条件下に、サルチナ・ルテア（Sartina lute
a）菌株（ATCC 9341）の培養物を使用し、（±）−３
α−アセトキシ−7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレン
ジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２β
−カルボン酸−メチルエステル6gを発酵時間135時間で
（＋）−３α−ヒドロキシ−7,7−（2,2−ジメチル−ト
リメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オク
タン−２β−カルボン酸−メチルエステル1.85gに変換
する。旋光度が▲〔α〕20 D▼＋23.6゜（HCCl3中ｃ＝1.
010）である。 例11 例７の条件下に、ペニシリウム・シトリヌム（Penici
llium citrinum）菌株（ATCC 8506）の培養物を使用
し、（±）−３α−アセトキシ−7,7−（2,2−ジメチル
−トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕
オクタン−２β−カルボン酸−メチルエステル6gを
（＋）−３α−ヒドロキシ−7,7−（2,2−ジメチル−ト
リメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オク
タン−２β−カルボン酸−メチルエステル2.3gに変換す
る。旋光度が▲〔α〕20 D▼＋21.8゜（HCCl3中ｃ＝1.0
5）である。 例12 例８の条件下に、フラボバクテリウム・ルテセンス
（Flavobacterium lutescens）菌株（IFO 3085）の培
養物を使用し、（±）−３α−アセトキシ−7,7−（2,2
−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ
〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−メチルエステ
ル6gを発酵時間47時間で（＋）−３α−ヒドロキシ−7,
7−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シス−
ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−メチ
ルエステル1.8gに変換する。旋光度が▲〔α〕20 D▼＋2
1.8゜（HCCl3中ｃ＝1.145）である。 例13 （±）−３α−ブチリルオキシ−7,7−（2,2−ジメチ
ル−トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,
0〕オクタン−２β−カルボン酸−メチルエステル300mg
をエタノール9mlに溶解し、リゾプス属（Rhizopus）か
らのリパーゼ“サイケン”（Saiken）〔長瀬社（Fa.Nag
ase）〕750mgの0.1M燐酸塩緩衝剤pH7 100ml中溶液と合
する。この懸濁液を、150時間28℃で回転振とう装置上
で振とうしかつ引続きメチルイソブチルケトンで抽出す
る。抽出物を真空中で乾燥するまで蒸発濃縮し、かつ残
渣を、未反応のエステルアシレートを分離するためシリ
カゲルカラムを経てクロマトグラフ処理する。旋光度▲
〔α〕20 D▼＋22.8゜（HCCl3中ｃ＝0.905）を有する
（＋）−３α−ヒドロキシ−7,7−（2,2−ジメチル−ト
リメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オク
タン−２β−カルボン酸−メチルエステル95mgが得られ
る。 参考例14 例13の条件下に、（±）−３α−ブチリルオキシ−7,
7−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シス−
ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−メチ
ルエステル300mgを燐酸塩緩衝液pH7中でアルカラーゼ
（Alcalase）Ｔ〔ノボ・インダストリアズ社（Fa.Novo
Industrias）〕750mgの存在において反応させる。2.5時
間28℃で振とうした後、バツチをメチルイソブチルケト
ンで抽出し、かつ抽出物をシリカゲルでクロマトグラフ
処理する。旋光度▲〔α〕20 D▼＋24.9゜（HCCl3中ｃ＝
1.020）を有する（−）−３α−ヒドロキシ−7,7−（2,
2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シス−ビシク
ロ〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−メチルエス
テル100mgが得られる。 例15 （±）−３α−ジメチルアセトキシ−7,7−（2,2−ジ
メチル−トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,
3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−メチルエステル300
mgをエタノール9mlに溶解し、かつ豚肝臓からの1:40希
釈エステラーゼ〔ベーリンガー社（Fa Boehringer）〕
1.5mlの0.1M燐酸塩緩衝液pH7 100ml中溶液と合する。
この混合物を１時間28℃で振とう装置上で振とうし、引
続きメチルイソブチルケトンで抽出し、かつ真空中で蒸
発濃縮せる抽出物をシリカゲルカラムを経てクロマトグ
ラフ処理する。（＋）−３α−ヒドロキシ−7,7−（2,2
−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ
〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−メチルエステ
ル114mgが油状物として得られ、これが徐徐に結晶化す
る。融点64〜65℃：▲〔α〕20 D▼＋25.1゜（HCCl3中ｃ
＝1.010）。 例16 （±）−３α−カルボキシプロピオニルオキシ−7,7
−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シス−
ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−メチ
ルエステル300mgをエタノール9mlに溶解し、かつリパー
ゼ“スクレロチニア”（Sclerotinia）〔長瀬社（Fa.Na
gase）〕750mgの0.1M燐酸塩緩衝液pH7 100ml中溶液と
合する。振とう装置上で28℃で30時間振とうした後、溶
液のpH価を0.1n NaOHでpH9.0に調節し、引続きメチルイ
ソブチルケトンで抽出し、かつ抽出物を真空中で乾燥す
るまで蒸発濃縮する。旋光度▲〔α〕20 D▼＋24.0゜（H
CCl3中ｃ＝1.08）を有する（＋）−３α−ヒドロキシ−
7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ−シス−
ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−メチ
ルエステル105mgが得られる。 例17 （±）−３α−アセトキシ−7,7−（2,2−ジメチル−
トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オ
クタン−２β−カルボン酸−エチルエステル300mgをエ
タノール9mlに溶解し、かつ豚膵臓からのリパーゼ〔ケ
ミカル・ダイナミツクス社（Fa.Chemical Dynamics Cor
poration）〕750mgの燐酸塩緩衝液pH7 100ml中溶液と
合する。この溶液を28℃で回転振とう装置上で振とう
し、その場合反応の経過を、連続的に取出したサンプル
を分析することにより追跡する。反応時間１時間後に、
使用せる基質の50％が変換されている。次いで、このバ
ツチをメチルイソブチルケトンで３回抽出し、抽出物を
合し、真空中で乾燥するまで蒸発濃縮し、かつ未反応の
エステルアシレートを分離するため、シリカゲルカラム
を経てクロマトグラフ処理する（傾斜：メチレンクロリ
ド−メチレンクロリド／アセトン10％）。旋光度▲
〔α〕20 D▼＋23.8゜（HCCl3中ｃ＝1.215）を有する
（＋）−３α−ヒドロキシ−7,7−（2,2−ジメチル−ト
リメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オク
タン−２β−カルボン酸−エチルエステル110mgが得ら
れる。 例18 例17の条件下に、（±）−３α−アセトキシ−7,7−
（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シス−ビ
シクロ〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−エチル
エステル300mgを、１時間にわたり、豚肝臓からのエス
テラーゼ〔ベーリンガー・マンハイム社（Fa.Boehringe
r Mannheim）〕（1:40希釈）1.5mlの燐酸塩緩衝液pH7
100ml中溶液で処理する。メチルイソブチルケトンで抽
出しかつシリカゲルカラムを経てクロマトグラフ処理す
ることにより、旋光度▲〔α〕20 D▼＋24.3゜（HCCl3中
ｃ＝1.075）を有する（＋）−３α−ヒドロキシ−7,7−
（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シス−ビ
シクロ〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−エチル
エステル118mgが得られる。 例19 例17の条件下に、（±）−３α−アセトキシ−7,7−
（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シス−ビ
シクロ〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−ベンジ
ルエステル300mgを、１時間にわたり、アルカリゲネス
（Alcaligenes）からのリパーゼ−PL〔名糖産業社（Fa.
Meito Sangyo）〕750mgの燐酸塩緩衝液pH7 100ml中溶
液で処理する。その後に、このバツチをメチルイソブチ
ルケトンで抽出し、抽出物を乾燥するまで蒸発濃縮し、
かつ残渣をシリカゲルカラムを経てクロマトグラフ処理
する。旋光度▲〔α〕20 D▼＋23.9゜（HCCl3中のｃ＝1.
045）を有する（＋）−３α−ヒドロキシ−7,7−（2,2
−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ
〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−ベンジルエス
テル105mgが得られる。 例20 例17の条件下に、（±）−３α−アセトキシ−7,7−
（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキシ）−シス−ビ
シクロ〔3,3,0〕オクタン−２β−カルボン酸−ベンジ
ルエステル300mgを、３時間にわたり、カンジダ・サイ
クリンドラセア（Candida cyclindracea）からのリパー
ゼMy〔名糖産業社（Fa.Meito Sangyo）〕750mgの燐酸塩
緩衝液pH7 100ml中溶液で処理する。その後に、このバ
ツチをメチルイソブチルケトンで抽出し、抽出物を乾燥
するまで蒸発濃縮し、かつ残渣をシリカゲルカラムを経
てクロマトグラフ処理する。旋光度▲〔α〕20 D▼＋24.
5゜（HCCl3中ｃ＝1.145）を有する（＋）−３α−ヒド
ロキシ−7,7−（2,2−ジメチル−トリメチレンジオキ
シ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−２β−カル
ボン酸−ベンジルエステル115mgが得られる。 参考例21 例８の条件下に、アルカリゲネス・パラドクスス（Al
caligenes paradoxus）菌株（ATCC 17713）に、（±）
−３α−アセトキシ−7,7−（2,2−ジメチル−トリメチ
レンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オクタン−
２β−カルボン酸−メチルエステル6gを反応させる。基
質の添加後４時間で、使用したラセミ化合物の50％が変
換される。このバツチをメチルイソブチルケトンで抽出
し、かつ抽出物を真空中で乾燥するまで蒸発濃縮する。
残存せる残渣を、非天然形立体配置の鹸化せるエナンチ
オマーを分離する目的で、シリカゲルカラムを経てクロ
マトグラフ処理する。この場合フラクシヨン１中に、そ
の絶対配置が天然のプロスタサイクリンPGI2に相応する
不鹸化のエナンチオマー（＋）−IIが生じる。このフラ
クシヨンを乾燥するまで蒸発濃縮することにより、
（＋）−３α−アセトキシ−7,7−（2,2−ジメチル−ト
リメチレンジオキシ）−シス−ビシクロ〔3,3,0〕オク
タン−２β−カルボン酸−メチルエステル2.4gが、旋光
度〔α〕Ｄ＋2.2゜（クロロホルム中ｃ＝1.11）を有す
る非結晶性油状物として得られる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:15） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:885） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:80） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:20）

Claims (1)

  1. (57)【特許請求の範囲】 １．式（＋）−： ［式中、R1およびR2が一緒になって酸素原子または、Ｃ
    原子数１〜７を有する直鎖−または分枝鎖状アルキレン
    としてのＸを有する２結合性の基：−Ｏ−Ｘ−Ｏ−を表
    わし、またはR1およびR2のそれぞれが、Ｃ原子数１〜７
    を有する直鎖−または分枝鎖状アルキルとしてのR5を有
    する基:OR5を表わし、かつR3が、水素原子、Ｃ原子数１
    〜７を有する直鎖−または分枝鎖状アルキル、Ｃ原子数
    ３〜６を有するシクロアルキル、フェニルまたはＣ原子
    数７〜10を有するアルアルキルとしてのＺを有する基:C
    OOZを表わし、またはR3が、１〜４の価のｎおよび、Ｃ
    原子数１〜７を有する直鎖−または分枝鎖状アルキル、
    Ｃ原子数３〜６を有するシクロアルキル、フェニルまた
    はＣ原子数７〜10を有するアルアルキルとしてのR4を有
    する基：−（CH2）ｎ−Ｏ−COR4を表わす］の化合物を
    製造するに当り、式（±）−II:［式中、R1,R2,R3およびR4は前述のものを表わす］のラ
    セミ体の３α−アシロキシ−シス−ビシクロ［3,3,0］
    オクタン誘導体に、酵素的または微生物学的に立体特異
    性のアシレート加水分解を施し、その際、酵素として、
    アルカリゲネス（Alcaligenes）からのリパーゼ−PL、
    カンジダ・シリンドラセア（Candida cylindracea）か
    らのリパーゼ−My、リゾプス属（Rhizopus）からのリパ
    ーゼ・サイケン、リパーゼ・スクレロチニア（Lipase S
    clerotinia）、豚肝臓からのエステラーゼまたは豚膵臓
    からのリパーゼ、または微生物として、アルカリゲネス
    ・マルシャリ（Alcaligenes marshallii），ムコール・
    ロウキシ（Mucor rouxii）、コリネ・バクテリウム・エ
    ウイ（Coryne bacterium equi）、トリコデルマ・コニ
    ンギ（Tricoderma koningi）、サルシナ・ルテア（Sarc
    ina lutea）、ペニシリウム・シトリヌム（Penicillium
    citrinum）またはフラボバクテリウム・ルテセンス（F
    lavobacterium lutescens）を使用し、かつ生じる
    （＋）−ビシクロ［3,3,0］オクタノール誘導体（＋）
    −Ｉを式（−）−IIの不鹸化のビシクロ［3,3,0］オク
    タノール−アシレートと分離することを特徴とする光学
    活性の（＋）−ビシクロ［3,3,0］オクタノール誘導体
    の製造法。 ２．酵素を、溶解、懸濁またはBrCN活性化セファロース
    またはオキシランアクリル粒状物で固定化せる形で使用
    することを特徴とする請求の範囲第１項記載の方法。 ３．酵素として、請求の範囲第１項記載の微生物から単
    離せる酵素を、溶解、懸濁または固定化せる形で使用す
    ることを特徴とする、請求の範囲第１項記載の方法。
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