HU202596B - Process for racemate dissociation of 3-acyloxybicyclo(3.3.0) octan-7-one-2-carboxylic acid esters by stereospecific enzymic or microbiological acylate hydrolysis - Google Patents
Process for racemate dissociation of 3-acyloxybicyclo(3.3.0) octan-7-one-2-carboxylic acid esters by stereospecific enzymic or microbiological acylate hydrolysis Download PDFInfo
- Publication number
- HU202596B HU202596B HU875804A HU580487A HU202596B HU 202596 B HU202596 B HU 202596B HU 875804 A HU875804 A HU 875804A HU 580487 A HU580487 A HU 580487A HU 202596 B HU202596 B HU 202596B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- bicyclo
- carboxylic acid
- octane
- cis
- formula
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 17
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 title claims description 5
- ODIGIKRIUKFKHP-UHFFFAOYSA-N (n-propan-2-yloxycarbonylanilino) acetate Chemical compound CC(C)OC(=O)N(OC(C)=O)C1=CC=CC=C1 ODIGIKRIUKFKHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title description 4
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 title description 4
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 title description 4
- SVCJHZLSWZIWQT-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-7-oxooctanoic acid Chemical class OC(=O)C(C)CCCCC(C)=O SVCJHZLSWZIWQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 title description 3
- 230000000707 stereoselective effect Effects 0.000 title description 3
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 title 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 title 1
- -1 crimotrypsin Proteins 0.000 claims description 86
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 claims description 20
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 claims description 19
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 claims description 19
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 claims description 19
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 12
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 12
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 12
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 10
- 241000588986 Alcaligenes Species 0.000 claims description 9
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 8
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 claims description 6
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 6
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 6
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims description 6
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 claims description 6
- 241001149952 Amylomyces rouxii Species 0.000 claims description 5
- 108090000787 Subtilisin Proteins 0.000 claims description 5
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- LDDVZRCVQYSNPT-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5,6,6a-hexahydro-1h-pentalen-3a-ol Chemical class C1CCC2CCCC21O LDDVZRCVQYSNPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 241000235527 Rhizopus Species 0.000 claims description 4
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 claims description 3
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 claims description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 3
- 241000221662 Sclerotinia Species 0.000 claims description 3
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims description 3
- 108010027597 alpha-chymotrypsin Proteins 0.000 claims description 3
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 claims description 2
- 241000179532 [Candida] cylindracea Species 0.000 claims description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 claims description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 2
- TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N octane Chemical class CCCCCCCC TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- 229940040461 lipase Drugs 0.000 claims 4
- 102000019280 Pancreatic lipases Human genes 0.000 claims 1
- 108050006759 Pancreatic lipases Proteins 0.000 claims 1
- 230000007073 chemical hydrolysis Effects 0.000 claims 1
- 229940116369 pancreatic lipase Drugs 0.000 claims 1
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 78
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 46
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 27
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 27
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 27
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 20
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 18
- 239000000047 product Substances 0.000 description 18
- NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Chemical compound CC(C)CC(C)=O NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Natural products CCC(C)C(C)=O UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 15
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 15
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 11
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 10
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 10
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 8
- KAQKFAOMNZTLHT-VVUHWYTRSA-N epoprostenol Chemical compound O1C(=CCCCC(O)=O)C[C@@H]2[C@@H](/C=C/[C@@H](O)CCCCC)[C@H](O)C[C@@H]21 KAQKFAOMNZTLHT-VVUHWYTRSA-N 0.000 description 8
- 229960001123 epoprostenol Drugs 0.000 description 8
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 7
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 7
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 6
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 5
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 5
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 5
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 5
- AEBWATHAIVJLTA-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,3a,4,5,6,6a-octahydropentalene Chemical compound C1CCC2CCCC21 AEBWATHAIVJLTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- YSEQNZOXHCKLOG-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-octanoic acid Chemical compound CCCCCCC(C)C(O)=O YSEQNZOXHCKLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 4
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 4
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 4
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- SVTUTAPBXAEHNW-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-3-oxooctanoic acid Chemical compound CCCCCC(=O)C(C)C(O)=O SVTUTAPBXAEHNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 3
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 3
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 3
- AYUDKHZYDXBNKT-UHFFFAOYSA-N benzyl 2-methyloctanoate Chemical compound CCCCCCC(C)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 AYUDKHZYDXBNKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 3
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 3
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 150000001261 hydroxy acids Chemical class 0.000 description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 3
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 3
- FGRWTNWKYQDCPL-UHFFFAOYSA-N methyl 2-methyl-3-oxooctanoate Chemical compound CCCCCC(=O)C(C)C(=O)OC FGRWTNWKYQDCPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PUTZZJOMRXPKCK-UHFFFAOYSA-N methyl 2-methyloctanoate Chemical compound CCCCCCC(C)C(=O)OC PUTZZJOMRXPKCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 3
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 3
- 238000012552 review Methods 0.000 description 3
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 3
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- AZUYLZMQTIKGSC-UHFFFAOYSA-N 1-[6-[4-(5-chloro-6-methyl-1H-indazol-4-yl)-5-methyl-3-(1-methylindazol-5-yl)pyrazol-1-yl]-2-azaspiro[3.3]heptan-2-yl]prop-2-en-1-one Chemical compound ClC=1C(=C2C=NNC2=CC=1C)C=1C(=NN(C=1C)C1CC2(CN(C2)C(C=C)=O)C1)C=1C=C2C=NN(C2=CC=1)C AZUYLZMQTIKGSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 2
- ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N Diisopropyl ether Chemical compound CC(C)OC(C)C ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000191938 Micrococcus luteus Species 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000158504 Rhodococcus hoagii Species 0.000 description 2
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010056079 Subtilisins Proteins 0.000 description 2
- 102000005158 Subtilisins Human genes 0.000 description 2
- 241000378866 Trichoderma koningii Species 0.000 description 2
- 241001478284 Variovorax paradoxus Species 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N benzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CC=C1 PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- DMEGYFMYUHOHGS-UHFFFAOYSA-N cycloheptane Chemical group C1CCCCCC1 DMEGYFMYUHOHGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DEZRYPDIMOWBDS-UHFFFAOYSA-N dcm dichloromethane Chemical compound ClCCl.ClCCl DEZRYPDIMOWBDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- IEJIGPNLZYLLBP-UHFFFAOYSA-N dimethyl carbonate Chemical compound COC(=O)OC IEJIGPNLZYLLBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 2
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 2
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 2
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 2
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- HAFQHNGZPQYKFF-UHFFFAOYSA-N 1,3,3a,4,6,6a-hexahydropentalene-2,5-dione Chemical class C1C(=O)CC2CC(=O)CC21 HAFQHNGZPQYKFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004343 1-phenylethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- ZFFMLCVRJBZUDZ-UHFFFAOYSA-N 2,3-dimethylbutane Chemical group CC(C)C(C)C ZFFMLCVRJBZUDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound ClCC1=NC=CC=C1C#N FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003229 2-methylhexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- ZPVFWPFBNIEHGJ-UHFFFAOYSA-N 2-octanone Chemical compound CCCCCCC(C)=O ZPVFWPFBNIEHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003890 2-phenylbutyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])(C([H])([H])*)C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000094 2-phenylethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000006201 3-phenylpropyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- CFYIUBWVKZQDOG-UHFFFAOYSA-N 4-[[2-[[2-[[1-(4-nitroanilino)-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-2-oxoethyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound C=1C=C([N+]([O-])=O)C=CC=1NC(=O)C(NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)CCC(=O)O)CC1=CC=CC=C1 CFYIUBWVKZQDOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FQLNKLDZSQSSKV-UHFFFAOYSA-N CCCCCCCC.C(CC)(=O)O Chemical compound CCCCCCCC.C(CC)(=O)O FQLNKLDZSQSSKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 1
- 241000228153 Penicillium citrinum Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000589587 [Flavobacterium] lutescens Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- YKIOKAURTKXMSB-UHFFFAOYSA-N adams's catalyst Chemical compound O=[Pt]=O YKIOKAURTKXMSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SESWNYZHPZHKNV-UHFFFAOYSA-N benzyl 2-methyl-3-oxooctanoate Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)OC(=O)C(C)C(CCCCC)=O SESWNYZHPZHKNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N benzyl chloride Chemical compound ClCC1=CC=CC=C1 KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940073608 benzyl chloride Drugs 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- YHASWHZGWUONAO-UHFFFAOYSA-N butanoyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OC(=O)CCC YHASWHZGWUONAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 239000002178 crystalline material Substances 0.000 description 1
- NLUNLVTVUDIHFE-UHFFFAOYSA-N cyclooctylcyclooctane Chemical class C1CCCCCCC1C1CCCCCCC1 NLUNLVTVUDIHFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- HRJHQOXWONBAJC-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-methyloctanoate Chemical compound CCCCCCC(C)C(=O)OCC HRJHQOXWONBAJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 125000003187 heptyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- HIFJCPQKFCZDDL-ACWOEMLNSA-N iloprost Chemical compound C1\C(=C/CCCC(O)=O)C[C@@H]2[C@@H](/C=C/[C@@H](O)C(C)CC#CC)[C@H](O)C[C@@H]21 HIFJCPQKFCZDDL-ACWOEMLNSA-N 0.000 description 1
- 229960002240 iloprost Drugs 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- HVTICUPFWKNHNG-UHFFFAOYSA-N iodoethane Chemical compound CCI HVTICUPFWKNHNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBFPMKWQKYFLR-UHFFFAOYSA-N isobutyl chloride Chemical compound CC(C)CCl QTBFPMKWQKYFLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N isobutyric acid Chemical compound CC(C)C(O)=O KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004491 isohexyl group Chemical group C(CCC(C)C)* 0.000 description 1
- 125000001972 isopentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000654 isopropylidene group Chemical group C(C)(C)=* 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- GXHTYYWMPPPKRZ-UHFFFAOYSA-N methyl 2-propylhexanoate Chemical compound CCCCC(CCC)C(=O)OC GXHTYYWMPPPKRZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 125000001971 neopentyl group Chemical group [H]C([*])([H])C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 150000003815 prostacyclins Chemical class 0.000 description 1
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 1
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000003548 sec-pentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000004317 sodium nitrate Substances 0.000 description 1
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 229940014800 succinic anhydride Drugs 0.000 description 1
- RVUXIPACAZKWHU-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid;heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.OS(O)(=O)=O RVUXIPACAZKWHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
- C07D317/72—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 spiro-condensed with carbocyclic rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C405/00—Compounds containing a five-membered ring having two side-chains in ortho position to each other, and having oxygen atoms directly attached to the ring in ortho position to one of the side-chains, one side-chain containing, not directly attached to the ring, a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, and the other side-chain having oxygen atoms attached in gamma-position to the ring, e.g. prostaglandins ; Analogues or derivatives thereof
- C07C405/005—Analogues or derivatives having the five membered ring replaced by other rings
- C07C405/0075—Analogues or derivatives having the five membered ring replaced by other rings having the side-chains or their analogues or derivatives attached to a condensed ring system
- C07C405/0083—Analogues or derivatives having the five membered ring replaced by other rings having the side-chains or their analogues or derivatives attached to a condensed ring system which is only ortho or peri condensed, e.g. carbacyclins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D319/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D319/04—1,3-Dioxanes; Hydrogenated 1,3-dioxanes
- C07D319/08—1,3-Dioxanes; Hydrogenated 1,3-dioxanes condensed with carbocyclic rings or ring systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
- C12P41/004—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of alcohol- or thiol groups in the enantiomers or the inverse reaction
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/24—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carbonyl group
- C12P7/26—Ketones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/42—Hydroxy-carboxylic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/62—Carboxylic acid esters
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
A találmány tárgya új eljárás racém 3-aciloxi-biciklo [3.3.0] oktán-7-on-2-karbonsav-észterek enzimek vagy mikroorganizmusok segítségével optikailag aktív 3-hidroxi-vegyületekké (3-alkoholokká) való sztereospecifikus acilát-hidrolízisére.
A jelen találmány optikailag aktív (+)-I általános képletű (+)-biciklo [3.3.0] oktanol-származékok - amelyek képletében
RiésRí együtt -O-X-O- általános képletű kétvegyértékű csoportot jelentenek, amelyben X jelentése 1-7 szénatomot tartalmazó egyenesláncú vagy elágazó láncú alkiléncsoport;
Rs jelentése olyan -COOZ általános képletű csoport, amelyben Z 1-7 szénatomot tartalmazó egyenesláncú vagy elágazó láncú alkilcsoportot, vagy 7-10 szénatomot tartalmazó aralkilcsoportot jelent; elóllítására szolgál.
A találmány szerinti eljárást az jellemzi, hogy (±)-II általános képletű racém 3a-aciloxi-cisz-biciklo [3.3.0]-oktán-származékokat - amelyek képletében R1, R2 és R3 jelentése az előbb megadottakkal azonos, R4 jelentése egyenes vagy elágazó szénláncú
1-7 szénatomos alkilcsoport, amely karboxilcsoporttal lehet helyettesítve, vagy fenilcsoport valamely lipáz, proteáz, észteráz, krimotripszin, szubtilizin enzimmel vagy Alcaligenes marshallii, Mucor rouxii, Coprynebacterium equi, Trichoderma koningii, Sarcina lutea, Penicillium citrinum, Flavobacterium lutescens vagy Alcaligenes paradoxus jelenlétében sztereospecifikusan elhidrolizálunk, és a keletkező (+)-I általános képletű (+)-biciklo [3.3.0] oktanol-származékot elkülönítjük, vagy abban az esetben, ha az enzim vagy mikroorganizmus a (±)-II általános képletű racemátból a (-)-formát hidrolizálja, a változaüanul maradt, elkülönített (+)-11 általános képletű oktán-származékot kémiai úton hidrolizáljuk el.
Amennyiben X jelentése 1-7 szénatomos egyenes láncú vagy elágazó láncú alkiléncsoport, úgy a következő csoportokról van szó:
olyan -(CHJ,,- általános képletű csoportok, melyekben n jelentése 1-től 7-ig terjedő egész szám, azaz metilén-, etilén-, trimetilén-, tetrametilén-, pentametilén-, hexametilén- és heptametilén-csoportok; valamint izopropilidén-, eetilidén-, Ι-metil-etilén-, 1,1-dimetil-etilén-, 2-metil-etilén-, 2,2-dimetil-etilén-, 2-metil-trimetilén-, 2,2-dimetil-trimetilén-, propilidén-, 1-etil-propilidén-, 1-etil-etilén-, 1,1 -dietil-etilén-, 2-etil-etilén-, 2,2-dietil-etilén-, 2-etil-trimetilén-, 2,2-dietil-trimetilén-csoportokstb.
Amennyiben Z és K 1-7 szénatomot tartalmazó egyenes láncú vagy elágazó láncú alkilcsoportokat jelentenek, úgy a következő csoportok jöhetnek számításba: metil-, etil-, propil-, izopropil-, butil-, izobutil-, szek-butil-, terc-butil-, pentil-, izopentil-, szek-pentil-, neopentil-, hexil-, izohexil-, heptil-, izoheptil-csoportok.
Amennyiben Z 7-10 szénatomot tartalmazó aralkilcsoportokat jelent, úgy a következő csoportok jönnek számításba: benzil-, 2-fenil-etil-, 3-fenil-propil-, 4-feηίΐ-butil-, 1-fenil-etil-, 2-fenil-propil-, 3-fenil-butil-, 2-fenil-l-metil-etil-, 3-fenil-l-metil-propiI-, 3-fenil-2-metil-propil-, 1-fenil-propil-, 2-fenil-butil-, 1-fenil-butil-, 1-fenil-l-metil-etil-, 2-fenil-2-metil-propil-, 2-fenil-l-metil-propil-csoport stb.
Az optikailag aktív 6a-karba-prosztaciklin és különösen néhány ebből levezethető vegyület, mint a természetes prosztaciklin (PGI2) stabil analógjai, gyógyászatilag nagyon hasznos anyagok [R. C. Nickolson, Μ. H. Town, H. Vorbrüggen: Prostacyclin-Analogs. Medicinái Research Reviews, Vol. 5. No. 1. 1-53. old. (1985)]. Az ebben az újabb áttekintésben felsorolt szintézisek hosszúak, és részben csak racém karbaciklineket eredményeznek. Különsen költségesek azok a szintézisek, amelyek a természetes PGI2-nck megfelelő abszolút konfigurációjú karbaciklinekhez vezetnek. Ennek oka az, hogy a jól hozzáférhető, megfelelő kiindulási anyagok akirálisak, és az optikai aktivitást a szintézissorozat folyamán az erre megfelelő közbülső műveletekben kell bevinni.
Több szintézis már optikailag aktív 7a-hidroxi-6p-(hidroxi-metil)-2-oxa-biciklo [3.3.0] oktán-3-on-származckokból indul ki. [Nickolson, R. C., Town, Μ. H., Vorbrüggen, H.: Prostecyclin Analogs, Medicinái Research Reviews, 5. kötet, 1. szám, 39-41. oldal (1985); Skuballa, W„ Vorbrüggen, H.: Angew. Chem. Intem. Ed. Engl. 20, 1046, (1981)]. Ezzel ugyan megoldódik az optikai aktivitás bevitelének problémája, azonban még több további egymást követő szintézislépést kell végrehajtani a 2-oxa-funkció metiléncsoporttal való szubsztituáláshoz, hogy a 3a-hidroxi-2p-(hidroxi-metil)-biciklo [3.3.0] oktán-7-on olyan származékaihoz jussunk, amelyek már alkalmasak a karbaciklin-analógokra mindig jellemző a- és ω-láncok felépítésére.
Egy újabb közlemény cisz-biciklo [3.3.0] oktán-3,7-dion-származékok felhasználását árja te optikailag aktív karbaciklinek szintézisénél. Kojima és munkatársai a Chem. Pharm. Bull. 33, 2688 (1985)-ben egy olyan eljárást írnak le, amelyben szerepel a racém 7,7-etilén-dioxi-3a-hidroxi-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2-karbonsav diasztereomer sóinak szétválasztása.
Ez az eljárás is még 7 reakciólépést igényel ahhoz, hogy 3-oxo-glutár-észterekből karbaciklin-analógokhoz alkalmas kiindulási anyagokhoz jussunk. Ráadásul egy instabil B-ketosav közbülső terméken át megy a szintézis.
Az optikailag aktív karbaciklin-analógok előállítására, amint már előbb leírtuk, semmilyen további olyan szintézisút nem ismeretes, amely egyszerűbb előállítást tesz tehetővé.
Felismertük, hogy a racém 3-aciloxi-biciklo[3.3.0] oktán-7-on-2-karbonsav-észterek bizonyos enzimekkel vagy mikroorganizmusokkal sztereospecifikusan hidrolizálhatók alkoholokká úgy, hogy mindjárt a természetes prosztacikleinnek megfelelő konfigurációjú (+) enontiomert kapjuk. így egy lépésben, előnyösebben juthatunk fontos karbaciklin-analógok kiindulási vegyületeihez, mint az ismert eljárásokkal.
A találmány szerinti eljáráshoz különösen a következő enzimek megfelelése:
Alcaligenes eredetű lipáz-PL (Meito Sangyo cégtől),
Candida cylindracea-ból származó lipáz My (Meito
Snagyo cégtől), Rhizopus-ból származó „Saiken” lipáz (Nagase cégtől). „Sclerotinia” lipáz (Nagase cégtől), marhapankreászból származó a-kimotripszin (Chemical Dynamics Corporation cégtől), Alcalase T néven forgalmazott proteáz (Novo Industria cégtől),
HU 202 596 Β sertésmájból származó.észteráz (Boehringer Mannheim cégtől), sertéspankreászból származó lipáz (Chemical Dynamics Corporation cégtől),
Bacillus subtilis eredetű szubtilizin (Boehringer
Mannheim cégtől).
Ezen enzimek mind oldott, szuszpendált vagy például bróm-ciánnal aktivált Sepharose-hoz vagy oxirán-akrilgyöngyökhöz kötött formában vagy bármilyen más immobilizált formában használhatók.
A találmány szerinti eljáráshoz különösen a következő mikroorganizmusok megfelelők:
Alcaligenes marshallii ATCC 21030,
Mucorrouxii ATCC 8097,
Corynebacterium equi ATCC 21107,
Trichoderma koningii CBS 85068,
Sarcina lutea ATCC 9341,
Penicillium citrinum ATCC 8506,
Flavobaterium lutescens IFO 3085,
Alcaligenes paradoxus ATCC 17713.
Felhasználhatók azonban a mikroorganizmusokból izolált enzimek is oldott vagy immobilizált formában.
A találmány szerinti eljárással előállítható (+)-I általános képletű optikailag aktív biciklooktán-származékok értékes köztitermékek a gyógyászatüag hatásos prosztaciklinszármazékok szintéziséhez. A sztereospecifikusan hidrolizáló enzimek és mikroorganizmusok többsége a (±)-II általános képletű racém 3a-aciloxicisz-biciklo [3.3.0] oktán-származékokat a PGI2 természetes prosztaciklinnek megfelelő abszolút konfigurációjú (+-)-1 általános képletű optikailag aktív alkoholokká hidrolizálja. Ez a spektrális és optikai tulajdonságok olyan referenciaanyagokkal való összehasonlítása útján derül ki, amelyek optikailag aktív karbaciklin-analógok szintézisének közbülső lépéseiben szokásosan előállíthatók. Az így kapott termékek az elhidrolizálatlan (-)-I általános képletű „hamis” enantiomerek elválasztása után közvetlenül felhasználhatók a PGI2 természetes prosztaciklinnek megfelelő analógok szintéziséhez.
Vannak azonban olyan mikroorganizmusok és enzimek, mint például az α-kimotripszin vagy az Alcalase T (proteáz), amelyek a (±)-II általános képletű racemát két komponense közül a „hamis”, nem természetes konfigurációjú enantiomert hidrolizálják (-)-1 általános képletű vegyületté. Ebben az esetben a visszamaradó elhidrolizálatlan (+)-11 általános képletű enantiomert használjuk fel a PGI2-analóg karbaciklinek szintézisére.
A találmány szerinti eljárást egyébként olyan általánosan ismert eljárási körülmények között hajtjuk végre, amilyeneket általában alkalmaznak enzimes reakciók, illetve mikrobiológiai átalakítások során, és amelyek a példákból is kiderülnek. Az enzimes vagy mikrobiológiai átalakulás menetét folyamatosan vett minták analízisével követjük nyomon. Analízismódszerekként nagyhatékonyságú folyadékkromatográfia (HPLC) vagy vékonyrétegkromatográfiás gyorsanalízisek a megfelelők. (A Merck/Darmstadt cég szilikagéldemezei, kifejlesztés dietil-éterrel, előhívás kénsavas etanollal).
A reakciót leállítjuk, és az elegyet feldolgozzuk, amikor a bevitt racém szubsztrat 50%-a átalakult
A találmány szerinti enzimes vagy mikrobiológiai sztereospecifikus acilát-hidrolízis különösen a (±)-7-77 képletekkel ábrázolt racém prosztaciklin-intermedierek acilát-hidrolízisére alkalmas.
A találmány szerinti eljárással előállított (+)-I általános képletű optikailag aktív 3a-hidroxi-vegyületekből gyógyászatüag hatásos prosztaciklinek állíthatók elő. Például (+)-I általános képletű vegyületből kiindulva Iloprost hatóanyaghoz jutunk (leírva a 11591 számú európai szabadalmi leírásban).
A Mucor rouxii (DSM 3897) és Alcaligenes marshallii (DSM 3900) törzseket 1986.11.11-én letétbe helyeztük a Német Mikroorganizmus-gyűjteményben (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen).
A kiindulási vegyületek előállítása:
A-l. példa
7.7- (2,2 -Dimetil-tritnetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-3-on-2-karbonsav-metil-észter
616 ml dimetil-karbonátban felszuszpendálunk 38,34 g 55-60%-os nátrium-hidridet, és nitrogéngáz alatt felmelegítjük 50 *C-ra, majd hozzáadunk egy kis mennyiséget 49,31 g 3,3-(2,2-dimctil-trimetiléndioxi)cisz-biciklo[3.3.0] oktán-7-on 370 ml dimetil-kaibonáttal készített oldatából. A reakciót 2 ml metanol hozzáadásával beindítjuk, majd hozzáadagoljuk a maradék oldatot, és összesen 7,5 óra hosszat keveijük 50 *C-on. Ezután jeges fürdőben lehűtjük, a fölös nátrium-hidridet metanollal elbontjuk, vizet adunk az elegyhez, és ecetsavval semlegesítjük. A terméket diklór-metánnal extraháljuk, vákuumban bepároljuk és a terméket hexánnal megkristályosítjuk. Ily módon 532,44 g 72 *C olvadáspontú terméket kapunk.
A-2. példa A-módszer:
7.7- (2,2-Dimetil-trimetiléndioxi)-3a-hidroxi-cisz-biciklo-[3.3.0]oktán-2$-karbonsav-metil-észter
52,0 g 7,7-(2,2-Dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo[3.3.0] oktán-3-on-2-karbonsav-metil-észtert melegítés közben feloldunk 1000ml metanolban, és után lehűtjük az oldatot -40 ’C-ra. Ekkor beadagolunk 20,91 g nátrium-bórhidridet, 30 percig keveijük, majd lassan 171 ml acetonnal elegyítjük és további 1 óra múlva ecetsavval semlegesítjük. Az oldószer nagyrészének ledesztillálása után a maradékot vízzel és diklór-metánnal elegyítjük, extrakció után az elválasztott szerves fázist nátrium-szulfáttal szárítjuk és vákuuban bepároljuk.
A maradékot 550 ml metanollal oldjuk, hozzáadunk 9,94 g nátrium-metanolátot, és 105 percig 40 ‘C-on melegítjük. Utána jeges fürdőben lehűtjük, semlegesítjük, és az előbb leírtakhoz hasonlóan dolgozzuk fel. A kapott nyersterméket szilikagélen diklór-metán/etilacetát elegyekkel kromatografáljuk. így 47 g kívánt vegyületet kapunk, amely hexánnal megkristályosodik és olvadáspontja 43 ’C.
B-módszer:
5,6 g 7,7-(2,2-dimetU-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-3-on-2-kaibonsav-metü-észtert oldunk 300 ml etil-acetátban, és 5,1 g platina-dioxid hozzáadása után 22 C-on normál nyomárón hidrogénezzük, amíg a hidrogénfelvétel befejeződik. Utána kiszűrjük a katalizátort és az oldatot vákuumban bepároljuk. így 56,8 g kívánt vegyületet kapunk, amelynek tisztasága kristályosodó észter készítéséhez megfelelő. A terméket hexánból kristályosíthatjuk és így 44,4 első kristályos terméket kapunk, amelynek olvadáspontja 43 ‘C.
HU 202 596 Β
A-3. példák
7,7-(2,2-Dimetil-trimetiléndioxi)-3a-hidroxi-cisz-biciklo-[3.3.0]oktán-2fi-karbonsav-metil-észter-3-észterek
a) (±)-7 acetát
100 g előző példa Β-módszere szerint előállított nyersterméket oldunk 57 ml piridin és 57 ml ecetsavanhidrid elegyében, majd 3 óra hosszat 40 ’C-on melegítjük. Lehűlés után jeges vizet adunk hozzá, diklór-metánnal extraháljuk, a szerves fázist 2n kénsavoldattal, nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és nátrium-klorid oldattal mossuk, nátrium-szulfáttal szárítjuk, vákuumban bepároljuk, és a maradékot hexánból kristályosítjuk. így 97,6 g 54 ’C olvadáspontú terméket kapunk.
b) (±)-3 benzoát g hidroxi-észter nyersterméket oldunk 10 ml piridinben, hozzáadunk 2,47 ml benzoil-kloridot és 4 óra hosszat keveijük 22 ’C-on. Utána lassan 100 ml jeges vízbe öntjük, 30 percig keveijük, majd a kristályos anyagot kiszűrjük. Szárítás és metanolból végzett átkristályosítás után 5,97 g 102 ’C olvadáspontú terméket kapunk.
c) (±)-7 izobutirát
4,265 g kristályosított hidroxi-észtert oldunk 40 ml diklór-metánban, hozzáadunk 4,16 ml trietil-amint és lassan 3,14 ml izobutil-kloriddal elegyítjük. A reakcióelegyet 2,5 óra hosszat 22 ’C-on keverjük, majd 40 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát oldatot adunk hozzá, utána a szerves fázist elválasztjuk és jeges hűtés közben 2n kénsavoldattal és vízzel mossuk, nátrium-szulfáttal szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A nyersterméket szilikagélen hexán/etil-acetát elegyekkel kromatografáljuk. így 4,91 g 43 ’C olvadáspontú terméket kapunk.
d) (±)-ő butirát
4,265 g kristályosított hidroxi-észtert oldunk 10 ml piridinben, hozzáadunk 4,90 ml vajsavanhidridet, és 20 óra hosszat keverjük 22 ’C-on. A reakcióelegyet jeges vízzel elegyítjük, diklór-metánnal extraháljuk, majd ezt nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, jeges hűtés közben 2n kénsavoldattal és vízzel, nátrium-szulfáttal szárítjuk, vákuumban bepároljuk, és szilikagélen hexán/etil-acetát elegyekkel kromatografáljuk. Ily módon 5,03 g terméket kapunk színtelen olajként.
e) (±)-5 hemiszukcinát
4,265 g kristályosított hidroxi-észtert oldunk 10 ml piridinben, hozzáadunk 1,833 g 4-(dimetil-amino)-piridint és 1,501 g borostyánkősavanhidridet, majd 22 ’Con 20 óra hosszat keverjük. Utána jeges vízbe öntjük, 2n kénsavoldattal 3 pH-ra savanyítjuk, diklór-metánnal extraháljuk, nátrium-klorid oldattal mossuk, nátrium-szulfáttal szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. A maradékot nátrium-hidrogén-karbonát oldattal oldjuk, dietil-éterrel extraháljuk, a vizes fázist 3 pH-ra savanyítjuk, diklór-metánnal extraháljuk, ezt nátrium-klorid oldattal mossuk, nátrium-szulfáttal szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. Ily módon 5,04 g terméket kapunk színtelen olajként
A-4. példa
3a-Acetoxi-7,7-etiléndioxi-cisz-bicildo-[33.0]oktán-2^-karbonsav-metil-észter; (±)-2
10,0 g 7,7-etiléndioxi-3a-hidroxi-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-23-karbonsav-metil-észtert reagáltatunk az A3.a) példában leírt körülmények között, és a nyersterméket szilikagélen hexán/etil-acetát elegyekkel kromatografáljuk. Ily módon 10,28 g 50 ’C olvadáspontú terméket kapunk.
A-5. példa
7.7- (2,2-Dimetil-trimetiléndioxi)-3a-hidroxi-cisz-biciklo-[3.3.0] oktán-2$-karbonsav
Az A-2. példából származó 5,0 g kristályos hidroxi-észtert 22 ’C-on 30 percig keverünk 17,6 ml In nátrium-hidroxi oldattal, majd etil-acetáttal extraháljuk, a vizes fázist jeges hűtés közben 2n kénsavoldattal 3 pHra savanyítjuk, diklór-metánnal extraháljuk, nátrium-klorid oldattal mossuk, nátrium-szulfáttal szárítjuk és vákuumban bepároljuk. így 4,66 g terméket kapunk, amely a további reakciókhoz eléggé tiszta.
A-6. példa
3a-Acetoxi-7,7-(2 2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo-[33.0] oktán-2fi-karbonsav; (±)-9
Az A-5. példából származó 3,13 g hidroxi-savat oldunk 15 ml piridinben és 2,74 ml ecetsavanhidrid hozzáadása után 22 ’C-on 20 óra hosszat keveijük. Ezután jeges vizet adunk hozzá, 30 percig keverjük, diklór-metánnal extraháljuk, ezt vízzel mossuk, nátrium-szulfáttal szárítjuk, vákuumban bepároljuk, és szilikagélen hexán/etil-acetát elegyekkel kromatografáljuk. Ily módon 3,04 g terméket kapunk színtelen olajként.
A-7. példa
7.7- (2,2-Dimettl-trimetiléndioxi)-3a-hidroxi-cisz-biciklo [33.0] oktán-2-$-karbonsav-etil-észter
4,78 g A-5. példában kapott hidroxi-savat 50 ml acetonban 4,90 kálium-karbonáttal és 5,72 ml etil-jodiddal 2 napig forralunk visszafolyató hűtő alatt. Lehűtés után szűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk, vízzel elegyítjük, diklór-metánnal extraháljuk, ezt nátrium-szulfáttal szárítjuk, bepároljuk, és a maradékot szilikagélen hexán/etil-acetát elegyekkel kromatografálva tisztítjuk, így 3,65 g terméket kapunk színtelen olajként.
A-8. példa
3a-Acetoxi-7,7-(23-dimetil-trimetiléndioxi)-cis2-biciklo-[33.0] oktán-2$-karbonsav-etil-észter; (+)-10
Az A-7. példából származó 3,10 g hidroxi-észtert reagáltatunk az A-3.a) példában leírt körülmények között, és a nyersterméket szilikagélen hexán/etil-acetát elegyekkel kromatografáljuk. így 3,20 g terméket kapunk színtelen olajként.
A-9. példa
7.7- (2,2-Dlmetil-trimetiléndioxi)-3a-hidroxi-cisz-biciklo [33.0] oktán-2-$-karbonsav-benzil-észter
3,52 g A-5. példában kapott hidroxi-savat 50 ml acetonban 3,59 g kálium-karbonáttal és 3,0 ml benzil-kloriddal 5 napon keresztül forralunk visszafolyató hűtő alatt, majd az A-7. példában leírtakhoz hasonlóan feldolgozzuk. üy módon 2,07 g terméket kapunk színtelen olajként.
A-10. példa
3(z-Acetoxi-7,7-(22-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo-[3.3.0] oktán-2$-karbonsav-benzil-észter; (+)-11
1,89 g A-9. példából származó hidroxi-észtert reagál-47
HU 202 596 Β tatunk az A-3.a) példánál leírt körülmények között, és a nyersterméket szilikagélen hexán/etil-acetát eleggyel kromatografáljuk. Ilyenképpen 1,78 g terméket kapunk színtelen olajként
A-ll. példa
7.7- (2,2-DÍmetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo[3.3.0] oktán-3-on-2-karbonsav-benzil-észter
2.5 g 7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-3-on-2-karbonsav-metil-észter 50 ml toluollal készített oldatához 1 /2 ml benzilalkoholt és 217 mg 4-(dimetil-amino)-piridint adunk, és az oldatot 8 óra hosszat fonatjuk visszafolyató hűtő alatt Ezt követően lehűtjük 25 ‘C-ra, telített nátrium-klorid oldatot adunk hozzá, diklór-metánnal extraháljuk, ezt nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáttal szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Hexán/etil-acetát (8:2) eleggyel eluálva 2,6 g cím szerinti vegyülethez jutunk, színtelen kristályos anyagként. Etil-acetát/hexán elegyből végzett átkristályosítás után 1,8 g színtelen, kristályos, 78 *C olvadáspontú anyagot kapunk.
A-12. példa
7.7- (2,2-Dimetil-trimeti[éndioxi)-3a-hidroxi-cisz-biciklo-[3.3.0] oktán-2^-karbonsav-benzil-észter
1.5 g 7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-3-on-2-karbonsav-benzil-észtert (A-ll. példa) oldunk 25 ml metanolban visszafolyató hűtő alatt végzett forralás közben. Oldódás után az oldatot lehűtjük -40 ‘C-ra, hozzáadunk 470 mg nátrium-bórhidridet, és 1 óra hosszat-40‘C-on keverjük. Hozzáadunk 3,8 ml acetont, 1 óra hosszat keverjük -40 ‘C-on, körülbelül 0,7 ml ecetsavval semlegesítjük, és vákuumban bepároljuk. A maradékot 100 ml vízzel elegyítjük, diklór-metánnal extraháljuk, ezt nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáttal szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. Szilikagélen hexáa/etil-acetát (6:4) eleggyel végzett kromatografálás után 1,4 g cím szerinti vegyületet kapunk színtelen olajként
Az infravörös spektrum (CHC13) adatai: 3600, 2960, 2870,1722,1447 cm-’.
A-13. példa
7.7- (2,2-Dimetil-trimetiléndioxi)-3a.-benzoiloxi-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2$-karbonsav-benzil-észter
1,35 g 7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-3a-hidroxi-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2p*karbonsav-benzil-észter (A-12. példa) 14 ml diklór-metánnal készített oldatához 0 ’C-on hozzáadunk 1,4 ml piridint és 0,62 ml benzoil-kloridot, majd 0,5 óra hosszat 0 ’C-on és 2 óra hosszat 25 ’C-on keverjük. Utána hozzáadunk 0,2 ml vizet, 1 óra hosszat keveijük, diklór-metánnal hígítjuk, egymás után vízzel, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és vízzel mossuk. Ezután magnézium-szulfáton szárítjuk és a bepárlási maradékot szilikagélen kromatografáljuk. Hexán/etil-acetát (3:2) eleggyel eluzálva 1,36 g cím szerinti vegyületet kapunk színtelen olajként.
Az infravörös spektrum (CHC13) adatai: 2960, 2870, 1725,1603 cm-1.
A következő kiviteli példák a találmány szerinti eljárás szemléltetését szolgálják.
1. példa g (±)-3a-acetoxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-23-kaibonsav-metil-észtert (7. képlet) oldunk 100 ml etanolban, és egy 2 literes Erlenmeyer-lombikban 1,5 g Alcaligenes-ből származó lipáz-PL (Meita Sangyo cég) 1 liter 7 pH-jú 0,1 mólos foszfátpufferrel készített oldatával elegyítjük. A szuszpenziót körkörös rázóasztalon 30 ’C-on rázatjuk, közben a reakció menetét folyamatosan vett minták analízisével követjük. 21 órás reakcióidő után a bevitt szubsztrát 50%-a átalakul. Az elegyet 3-szor extraháljuk metil-izobutil-ketonnal, az extraktumokat egyesítjük, vákuumban szárazra bepároljuk és az átalakulatlan észter-acilát elválasztása céljából szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk. (Diklór-metán diklór-metán/10% aceton gradiens). Ily módon 1,15 g enantiomertiszta (+)-3a-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo[3.3.0] oktán-2P-karbonsav-metil-észtert kapunk, amely hexán/diizopropil-éter elegyből végzett kristályosítás után 65-66 ’C-on olvad.
[a] $ = +26,2’ (c = 1,255; kloroform).
2. példa
300 mg (±)-3a-acetoxi-7,7-(2^-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2P-karbonsav-metil-észtert (7 képlet) szuszpendálunk 100 ml 7 pH-jú 0,1 mólos foszfátpufferben. Hozzáadunk 750 mg Candida cyclindracea-ból származó lipáz My-t (Meito Sangyo cég), és a szuszpenziót Ultra-Turrax-szal homogenizáljuk. Utána az elegyet szobahőmérsékleten körkörös rázóasztalon rázatjuk. 30 óra reakcióidő elteltével a szubsztrát 50%-ig átalakul. Ekkor az elegyet 3-szor extraháljuk dietil-éterrel, az extraktumokat egyesítjük, és vákuumban szárazra bepároljuk. A kapott maradékot az át nem alakult kiindulási anyag elválasztása céljából szilikagéllel töltött oszlopon diklór-metán diklór-metán/5% aceton oldószergradienssel eluálva kromatografáljuk. Ily képpen 105 mg (+)-3a-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [33Ό] oktán-2p- karbonsav-metil-észtert kapunk, amelynek olvadáspont hexánból végzett átkristályosítás után62-63 ’C, és fajlagos forgatása: [a] $ = +25’ (c = 1,01; kloroform). Autentikus referencianyaggal való összehasonlító mérés útján erre 93,6%-os enantiomer-túlsúlyt állapítottunk meg.
3. példa
300 mg (±)-3a-acetoxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-23-karbonsav-metil-észtert (7 képlet) oldunk etanolban, és hozzáadjuk 750 mg Rhizopusból származó „Saiken” lipáz (Nagase cég) 100 ml 7 pH-jú 0,1 mólos foszfátpufferrel készített szuszpenziójához. Rázógépen 28 ’C hőmérsékleten való 96 óra rázatás után az elegyet metil-izobutil-ketonnal extraháljuk, az extraktumot szárazra bepároljuk, és szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk. így 112 mg (+)-3a-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-ciszbiciklo [3.3.0] oktán-23-karbonsav-metil-észtert kapunk, amelynek olvadáspontja 64-65 ’C hexánból végzett átkristályosítás után. A fajlagos forgatás: [a] □ = = +23,8’ (c = 1,02; kloroform). Az autentikus sztandarddal szemben végzett összehasonlító mérés alapján az enantiomer-felesleg 92,5% tisztaságú.
4. példa
300 mg (±)-3a-acetoxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-23-karbonsav-metil- észtert (7 képlet) szuszpendálunk 100 ml 7 pH-jú 0,1
HU 202 596 Β mólos foszfát-pufferben. Hozzáadunk 750 mg marhapankreászból származó α-kimotripszint (Chemical Dynamics Corporation cég), és Ultra-Turrax-szal homogenizáljuk. Utána a reakcióelegyet 28 ’C-on körkörös rázógépen addig rázatjuk, amíg a bevitt észter-acilát szubsztrát 50%-ig átalakul. Ezután az elegyet többször extraháljuk metil-izobutil-ketonnal, az egyesített extraktumokat vákuumban szárazra bepároljuk, és a nem természetes konfigurációjú, jelen esetben lehidrolizált enantiomer elválasztása céljából szilikagéllel töltött oszlopon diklór-metán diklór-metán/5% aceton oldószergradiensei eluálva kromatografáljuk. Az 1. frakció tartalmazza az abszolút konfigurációban a PGI2 természetes prosztaciklinnek megfelelő, elhidrolizálatlanul maradt (+)-11 általános képletű enantiomert Szárazra párlás után 115 mg (+)-3a-acetoxi-7,7-(2,2-dimctil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2p-karbonsav-metil-észtert kapunk.
[a] d = +2,6’ (c = 1,035; kloroform) fajlagos forgatású nem kristályosodó olajként.
Az elhidrolizálatlanul maradt (+)-11 általános képletű enantiomer kémiai úton végrehajtott acilát-hidrolízise a 3. példa szerinti terméket eredményezi.
5. példa
A 4. példában leírtaknak megfelelő körülmények között 300 mg (+)-3a-acetoxi-7,7-etiléndioxi-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2p-karbonsav-metil -észtert (2 képlet) reagáltatunk 7 pH-jú foszfátpufferban 750 mg Bacillus subtilisből származó szubtilizinnel (Boehringer Mannheim cég). Az elegyet 28’C-on 10 óra hosszat való rázás után metil-izobutil-ketonnal extraháljuk, az extraktumot szárazra bepároljuk, és szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk. Diklór-metán diklór-metán/4% aceton oldószergradienssel első frakcióként az elhidrolizálatlan, a természetes prosztaciklinnek megfelelő konfigurációjú (+)-enantiomert eluáljuk. A frakció szárazra párlása után 130 mg (+)-3a-acetoxi-7,7-etiléndioxi-cisz-biciklo [3.3.0]-oktán-2P-karbonsav-metil-észtert kapunk [a]” = +2,4’ (c = 1,085; kloroform) fajlagos forgatási értékű olajos folyadékként
100 mg (+)-3a-acetoxi-7,7-etiléndioxi-cisz-biciklo[3.3.0] oktán-2p-karbonsav-metilésztert feloldunk 1 ml metanolban, az oldatot hozzáadjuk 250 ml vízmentes, porított kálium-karbonát 2 ml metanollal készített szuszpenziójához és 1 órát keveijük szobahőmérsékleten. A szilárd részeket kiszűrjük és a szűrlet pH-ját ecetsavval 7,5-re állítjuk be. A metanolt vákuumban ledesztilláljuk és a maradékot megosztjuk etil-acetát és víz között Az etil-acetátos fázist vízmentes nátriumszulfáttal szárítjuk és vákuumban besűrítjük. 80 mg (+)-7,7-etilén-dioxi-3a-hidroxi-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2p-karbonsv-metilésztert kapunk olajos folyadék alakjában, amelynek specifikus forgatóképessége +27,5’ (c= 1,0; kloroformban).
6. példa
Egy 2 literes Erlenmeyer-lombikot, amely 500 ml autoklávban 120 ’C-on 30 percig sterilezett, 0,1% peptonból, 0(2% kukoricalekvárból, 0,5% glükózból és 0,5% élesztőkivonatból álló, 7,5 pH-ra beállított tápoldatot tartalmaz, beoltjuk az Alcaligenes marshallii ATCC 21030 törzs kémcsöves ferdetenyészetével, és 48 óra hosszat körkörös rázógépen rázatjuk. Ebből a szaporítótenyéseztből 300 ml-rel beoltunk egy 10 literes fermen6 tort, amely az előbb a szaporítótenyészetnél megadottal azonos összetételű 5 liter sterilezett táptalajjal van töltve. Silicon SH habzásgátló hozzáadása közben 29 ’C-on 5 liter/perc levegőztetés és 220 fordulat/perc keverés mellett tenyésztünk. Egy 36 órás szaporítási szakasz után hozzáadjuk a szubsztrátot 30 g (±)-3a-acetoxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2p-karbonsav-metil-észter (7 képlet) 125 ml etanollal készített, sterilre szűrt oldatát, és a reakció lefutását folyamatosan kivett minták analízisével követjük. A szubsztrát hozzáadása után 10 órával a bevitt szubsztrát 50%-a átalakul. A fermentor tartalmát 4x3 liter metil-izobutil-ketonnal extraháljuk, az extraktumokat egyesítjük, és vákuumban szárazra pároljuk. A kapott maradékot metanolban oldjuk, és szilikonolaj eltávolítása céljából redős szűrőn szűrjük. A székletet vákuumban ismét szárazra pároljuk és a maradékot az elreagálatlan nem természetes konfigurációjú (-)-Π általános képletű enantiomer (1. frakció) eltávolítása céljából szilikagéllel töltött oszlopon diklór-metán diklór-metán/20% aceton gradienssel eluálva kromatografáljuk. A 2. frakcióban hexánból végzett kristályosítás után 10,7 g (+)-3a-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetilén-dioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2p-karbonsav-metil-észtert kapunk, amelynek olvadáspontja 63-64 ’C, az enantiomer-kitermelés az elméleti 81,9%-a. A fajlagos forgatás: [a] $ = +26,1’ (c = 1,3; kloroform). Az enantiomer-felesleg 97,5%.
7. példa
Egy 2 literes Erlenmeyer-lombikot, amely 500 ml autoklávban 120 ’C-on 30 percig sterilezett, 3% glükózból, 1% kukoricalekvárból, 0,2% nátrium-nitrátból, 0,1% kálium-dihidrogén-foszfátból, 0,05% magnézium-szulfát-heptahidrátból, 0,002% vas(II)-szulfát-heptahidrátból és 0,05% kálium-kloridból álló táptalajt tartalmaz, beoltunk a Mucor rouxii (ATCC 8097 törzs kémcsöves ferdetenyészetével, és a körkörös rázógépen 30 ’C-on 2 és 1/2 napig rázatjuk.
Két ilyen szaporítótenyészet tartalmával beoltunk egy 20 literes fermentort, amely az előbb megadott szaporító-tenyészetével azonos összetételű 14 liter 121 ’C-on és 1,1 bar túlnyomáson 60 percig sterilezett táptalajjal van töltve. Silicon SH habzásgátló hozzáadása közben 29 ’C-on 0,7 bar túlnyomáson 15 liter/perc levegőztetés és 220 fordulat/perc keverés mellett tenyésztünk. Egy 15 órás szaporítási szakasz után a szubsztrátot 9 g (±)-3a-acetoxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo[3.3.0] oktán-2p-karbonsav-metil-észter (7 képlet) 220 ml etanollal készített sterilre szűrt oldata formájában adjuk hozzá a tenyészethez, és a reakció lefutását folyamatosan kivett minták analízisével követjük.
A szubsztrátbeadagolás után két órával a beadott szubsztrát 50%-a átalakul. A fermentor tartalmát 3x10 liter metil-izobutil-ketonnal extraháljuk, az extraktumokat egyesítjük és vákuumban szárazra bepároljuk. A kapott maradékot metanolban oldjuk és a szilikonolaj eltávolítása céljából redős szűrőn megszűrjük. A szűrletet vákuumban ismét szárazra pároljuk, és a maradékot az átlakulatlan kiindulási anyag eltávolítása céljából szilikagéllel töltött oszlopon 5 liter diklór-metán 5 liter diklór-metán/10% aceton gradienssel eluálva kromatografáljuk. Ily módon 3,3 g (+)-3a-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-23-karbon-611
HU 202 596 Β sav-metil-észtert kapunk, amely hexán/diizopropil-éter elegyből végzett kristályosítás után 64-65 ’C-on olvad. A fajlagos forgatási érték: [a] g* = +25,7’ (c = 1,045; kloroform). Autentikus standarddal szemben végzett összehasonlító méréssel 96%-os enantiomer-felesleget állapítottunk meg.
8. példa
Egy 2 literes Erlenmeyer-lombikot, amely 0,1% peptont, 0,2% kukoricalekvárt, 0,5% glükózt és 0,5% élesztőkivonatot tartalmazó 7,3 pH-jú steril tápoldattal van töltve, beoltunk a Corynebacterium equi (ATCC 21107) törzs ferde agaros tenyészetével, és 30 ’C-on 48 óra hosszat rázatjuk.
Két ilyen szaporítótenyészet tartalmával oltunk be egy 20 literes fermentort, amely a szaporító tenyészetéhez hasonló összetételű 14 liter steril táptalajjal van töltve. Silicon SH habzásgátló adagolása közben 29 ’Con és 0,7 bar túlnyomáson 15 liter/perc levegőztetés és 220 fordulal/perc keverés mellett tenyésztünk. A szubsztrátot 16 órás szaporítási idő után 6 g (±)-3a-acetoxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-23-karbonsav-metil-észter (7 képlet) 150 ml etanollal készített sterilre szűrt oldata formájában adagoljuk be, és tovább folytatjuk a keverést és levegőztetést. A szubsztrátbeadás után három órával a beadott szubsztrát 50%-a átalakul. Az elegyet metil-izobutil-ketonnal extraháljuk, és az extraktumot vákuumban szárazra bepároljuk. A kapott maradékot metanolos kezeléssel megszabadítjuk a szilikonolajtól, és szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk. Ilyenképpen
1,9 g (+)-3a-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2P-karbonsav-metil-észtert kapunk, amely hexán/diizopropil-éter elegyből végzett átkristályosítás után 63-65 ’C-on olvad. A fajlagos forgatási érték: [a] ” = +25,2' (c = 1,04; kloroform).
9. példa
A 7. példában leírt körülmények között a Trichoderma koningi (CBS 85068) törzs tenyészetével 6 g (±)-3a-acetoxi-7,7-(2,2-dimetil-tritnetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2P-karbonsav-metil-észter(7 képlet) 28,5 órás fermentációs idő után 2,0 g (+)-3a-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo-[3.3.0] oktán-2P-karbonsav-metil-észterré alakítunk áL A hexánból kristályosított anyag forgatási értéke: [a] g* = +24,2’ (c = 1,015; kloroform).
10. példa
A 8. példában leírt körülmények között a Sarcina lutea (ATCC 9341) törzs tenyészetével 6 g (±)-3a-acetoxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2p-karbonsav-metil-észtert (7 képlet) 135 órás fermentációs idő után 1,85 g (+>3a-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2p-karbonsav-metil-észterré alakítunk át A forgatási érték:: [a] g*= +23,6’ (c = 1,010; kloroform).
11. példa
A 7. példában leírt körülmények között a Penicillium cilrinum (ATCC 8506) törzs tenyészetével 6 g (±)-3a-acetoxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2p-karbonsav-metil-észtert (7 képlet) 8 órás fermentációs idő után 2,3 g (+)-3a-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo[3.3.0] oktán2JJ-karbonsav-metil-észterré alakítunk át. A fajlagos forgatási érték: [a] g1 = +21,8’ (c = 1,05; kloroform).
12. példa
A 8. példa körülményei között a Flavobacterium lutescens (IFO 3085) törzs tenyészetével 6 g (±)-3a-acetoxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2P-karbonsav-metil-észtert (7 képlet) 47 órás fermentációs idő alatt 1,8 g (+)-3a-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2p-karbonsav-metil-észterré alakítunk át. A fajlagos forgatási érték: [a] g’= +21,8* (c = 1,1245; kloroform).
13. példa
300 mg (±)-3a-butiriloxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2p-karbonsav-metil-észtert (6 képlet) oldunk 9 ml etanolban, és 750 mg Rhizopus eredetű „Saiken” lipáz (Nagase cég) 100 ml 7 pH-jú 0,1 mólos foszfátpufferral készített oldatával elegyítjük. A szuszpenziót 28 ’C-on 150 óra hosszat rázatjuk körkörös rázógépen, majd metil-izobutil-ketonnal extraháljuk. Az extraktumot vákuumban szárazra pároljuk, és a maradékot az elreagálatlan észter-acilát elválasztása céljából szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk. Ily módon 95 mg (+)-3a-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-23-karbonsav-metil-észtert kapunk, amelynek fajlagos forgatási értéke: [a] g* = +22,8’ (c= 0,905; kloroform).
14. példa
A13. példa körülményei között 300 g (±)-3a-butiriloxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2p-karbonsav-metil-észtert (6 képlet) 7 pH-jú foszfátpufferben 750 mg Alcalose T néven forgalmazott proteáz (Novo Industria cég) jelenlétében reagáltatunk. Az elegyet 28 ’C-on végzett 2,5 órás rázatás után metil-izobutil-ketonnal extraháljuk, és az extraktumot szilikagélen kromatografáljuk. Eképpen 100 mg (-)-3a-hidroxi-7,7-{2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2p-karbonsav-metil-észtert kapunk, amelynek fajlagos forgatási értéke: [a] g*= = -24,9* (c = 1,020; kloroform).
75. példa
300 mg (±)-3a-(Dimetil-acetoxi)-7,7-(2^-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo[3.3.0] oktán-^-karbonsav-metil-észtert (7 képlet) oldunk 9 ml etanolban, és sertésmájból kivont észteráz (Boehringer cég) 1,5 ml 1:40 hígítású oldatának 100 ml 7 pH-jú 0,1 mólos föszfátpuffenel készített oldatával elegyítjük. Az elegyet 28 ’C-on 1 óra hosszat rázatjuk ráizógépen, majd metil-izobutil-ketonnal extraháljuk, és a vákuumban bepárolt extraktumot szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk. így 114 mg (+)-3a-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2p-karbonsav-metil-észtert kapunk olajként, amely lassan átkristályosodik. Olvadáspont: 64-65 ’C. Fajlagos forgatóképesség: [a] g1 = +25,1’ (c = 1,010; kloroform).
16. példa
300 mg (±)-3a-(Karboxi-propioniloxi)-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-23-karbonsav-metil-észtert (8 képlet) oldunk 9 ml etanol7
-713
HU 202 596 Β bán, és 750 mg „Sclerotinia” lipáz (Nagasa cég) 100 mg 7 pH-jú 0,1 mólos foszfátpufferral készített oldatával elegyítjük. Rázógépen 28 ’C-on végzett 30 órás rázás után az oldat pH-ját 0,1 n nátrium-hidroxid oldattal 9,0-ra állítjuk, majd metil-izobutil-ketonnal extraháljuk, és az extraktumot vákuumban szárazra pároljuk. így 105 mg (+)-3a-hidroxi-7,7-(2,2-dimetíl-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2P-karbonsav-metil-észtert kapunk, amelynek fajlagos forgatási értéke: [a] “ = = +24,0* (c = 1,08; kloroform).
17. példa
300 mg (±)-3a-acetoxi-7,7-(2,2-dimetil-triinetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2p-karbonsav-etil-észtert (10 képlet) oldunk 9 ml etanolban, és 750 mg sertéspankreászból származó lipáz (Chemical Dinamics Corporation cég) 100 mg 7 pH-jú foszfátpufferral készült oldatával elegyítjük. Az oldatot körkörös rázógépen rázatjuk 28 ’C-on, közben a reakció lefutását folyamatosan kivett minták analízisével követjük. 1 óra reakcióidő után a beadagolt szubsztrát 50%-a átalakul. Az elegyet 3-szor extraháljuk metil-izobutil-ketonnal, az extraktumokat egyesítjük, vákuumban szárazra bepároljuk, és az elreagálatlan észter-acilát elválasztása céljából szilikagéllel töltött oszlopon diklór-metán diklór-metán/10% aceton gradienssel kromatografáljuk. Ily módon 100 mg (+)-3<x-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trÍmetiléndioxi)-cisz-biciklo-[3.3.0] oktán-2P-karbonsav-etil-észtert kapunk, amelynek fajlagos forgatása: [a] $ = +23,8’ (c = = 1,215; kloroform).
18. példa
A 17. példában leírt körülmények között 300 mg (±)-3a-acetoxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2p-karbonsav-etil-észtert (70 képlet) lóra hosszat reagáltatunk 1,5 ml (1:40hígítású) sertésmáj-észteráz (Boehringer Mannheim cég) 100 ml 7 pH-jú foszfátpufferral készített oldatával. Metil-izobutil-ketonnal végzett extrakció és szilikagéllel töltött oszlopon történő kromatografálás után 118 mg (+)-3a-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo-[3.3.0] oktán-2p-karbonsav-etil-észtert kapunk, amelynek fajlagos forgatása: [a] g* = +24,3’ (q = 1,075; kloroform).
19. példa
A17. példában leírt körülmények között 300 mg (±)-3aacetoxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-23-karbonsav-benzil-észtert (77 képlet) 1 óra hosszat reagáltatunk 750 mg Alcaligenes eredetű lipáz-PL (Meito Sangyo cég) 100 ml 7 pH-jú foszfátpufferral készített oldatával. Utána az elegyet metil-izobutil-ketonnal extraháljuk, az extraktumot szárazra bepároljuk, és a maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk. Ilyképpen 105 mg (+)-3<x-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo-[3.3.0] oktán-2P-karbonsav-benzil-észtert kapunk, amelynek fajlagos forgatása: [a] ” = +23,9’ (c = 1,045; kloroform).
20. példa
A 17. példában leírt körülmények között 300 mg (±)-3a-acetoxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo[3.3.0] oktán-23-karbonsav-benzil-észtert (77 képlet) 3 óra hosszat reagáltatunk 750 mg Candida cyclindracea-ból származó lipáz My (Meito Sangyo cég) 100 ml 7 pH-jú foszfátpufferral készített oldatával. Utána az elegyet metil-izobutil-ketonnal extraháljuk, az extraktumot szárazra bepároljuk, és a maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk. így 115 mg (+)-3a-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiÍéndioxi)-cisz-biciklo-[3.3.0] oktán-2p-karbonsav-benzil-észtert kapunk, amelynek fajlagos forgatása: [α] “ = +24,5’ (c = = 1,145; kloroform).
21. példa
A 8. példában leírt körülmények között az Alcaligenes paradoxus (ATCC 17713) törzs tenyészetével reagáltatunk 6 g (±)-3a-acetoxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-2P-karbonsav-metil-észtert (7 képlet). A szubsztrát hozzáadása után 4 órával a beadagolt racemát 50%-a átalakul. Az elegyet metil-izobutil-ketonnal extraháljuk, és az extraktumot vákuumban szárazra bepároljuk. A kapott maradékot a nem természetes konfigurációjú elhidrolizált enentiomer elválasztása céljából szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk. Ekkor 1. frakcióként az abszolút konfigurációban aPGI2 természetes prosztaciklinének megfelelő (+)-11 általános képlettel ábrázolható elhidrolizálatlanul maradt enantiomer jelenik meg. A frakció szárazra pártosával 2,4 g (+)-3a-acetoxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-23-karbonsav-metil-észtert kapunk nem kristályosodó olajként, amelynek fajlagos forgatása: [a] ” = +2,2’ (c = 1,11; kloroform).
22. példa
Sertéspankreászból (gyártó a Chemical Dynamics Corporation) származó lipáz immobilizálása Eupergit C-n (gyártó a Röhm Pharma NSZK).
g sertéspankreászból származó lipázt szuszpendálunk 40 ml 1M foszfátpufferben (pH = 7,5) és hozzáadjuk 10 g Eupergit C-hez. Jól összekeveijük és 3 napig szobahőfokon inkubáljuk. Ezután az immobilizátumot leszivatjuk, kétszer 200 ml 0,1 M foszfátpufferrel mossuk és 0,1 M foszfátpufferben 4 ’C-on tároljuk.
Enzimes reakció:
Erlenmeyer-lombikban 20 g Eupergit C-lipáz immobilizátumot szuszpendálunk 1 liter 7-es pH-jú foszfátpufferben. Ezután hozzáadjuk a szubsztrátumot 500 mg (±)-3-acetoxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo[3.3.0] oktán-23-karbonsav-metilészter (7 képlet) 25 ml etanollal készített oldata alakjában és 16 órát rázzuk 30 ’C-on rázógépen. Ezután az immobilizált enzimet G2-jelű zsugorított üvegszűrőn leszivatjuk és kevés foszfátpufferrel mossuk. A szűrletet kétszer 500 ml metil-izobutil-ketonnal extraháljuk, az egyesített extraktumokat nátrium-szulfát fölött szárítjuk és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot Kiesel gél oszlopon kromatografáljuk (gradiens: 1,8 1 metilén-klorid -1,81 metilén-klorid/5% aceton). Az első frakció tartalmazza az át nem alakult acetoxi-biciklooktán-metilésztert, a 2. frakcióban 320mg (+)-3a-hidroxi-7,7-(2,2-dimetil-trimetiléndioxi)-cisz-biciklo-[3.3.0] oktán-23-karbonsav-metilésztert kapunk, amelynek olvadáspontja 62-63 ’C. Forgatóképesség: [a] g» = +25,5’ (c = 1,001; kloroform).
Claims (3)
1. Eljárás (+)-I általános képletű optikailag aktív (+)-biciklo [3.3.0] oktanol-származékok amelyek képletében
RiésRí együtt -O-X-O- általános képletű kétvegyértékű csoportot jelentenek, amelyben X jelentése 1-7 szénatomot tartalmazó egyenesláncú vagy elágazó láncú alkiléncsoport;
R3 jelentése olyan -COOZ általános képletű csoport, amelyben Z 1-7 szénatomot tartalmazó egyenesláncú vagy elágazó láncú alkilcsoportot, vagy 7-10 szénatomot tartalmazó aralkilcsoportot jelent;
előállítására, azzal jellemezve, hogy egy (±)-II általános képletű racém 3a-aciloxi-cisz-biciklo [3.3.0] oktán-származékot - mely képletben
Rí, R2 és R3jelentése az előbb megadottakkal azonos, R4 jelentése egyenes vagy elágazó szénláncú
1-7 szénatomos alkilcsoport, amely karboxilcsoporttal lehet helyettesítve, vagy fenilcsoport valamely lipáz, proteáz, észteráz, krimotripszin, szubtilizin enzimmel vagy Alcaligenes marshallii, Mucor rouxii, Coprynebacterium equi, Trichoderma koningii, Sarcina lutea, Penicillium citrinum, Flavobacterium lutescens vagy Alcaligenes paradoxus jelenlétében sztereospecifikusan elhidrolizálunk, és a keletkező (+)-I általános képletű (+)-biciklo [3.3.0] oktanol-származékot elkülönítjük, vagy abban az esetben, ha az enzim vagy mikroorganizmus a (±)-Π általános képletű racemátból a (-)-formál hidrolizálja, a változatlanul maradt, elkülönített (+)-11 általános képletű oktán-származékot kémiai úton hidrolizáljuk el.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy enzimként Alcaligenes-ból származó lipáz-PL-t, Candida cylindracea-ból származó lipáz My-t, Rhizopus-ból származó „Saiken” lipázt, Sclerotinia-ból származó lipázt, marhapankreászból származó a-kimotripszint, proteázt, sertésmájból származó észterázt, sertéspankreászból származó lipázt vagy Bacillus subtilis-ből származó szubtilizint használunk oldott, szuszpendált vagy bróm-ciánnal aktivált Sepharose-on vagy oxirán-akril-gyöngyökön immobilizált formában.
3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy enzimként a 2. igénypontban említett mikroorganizmusból izolált enzimeket használunk oldott, szuszpendált vagy immobilizált formában.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE19863638758 DE3638758A1 (de) | 1986-11-13 | 1986-11-13 | Racematspaltung von 3-acyloxy-bicyclo(3.3.0)octan-7-on-2- carbonsaeureestern durch stereospezifische enzymatische oder mikrobiologische acylat-hydrolyse |
PCT/DE1987/000513 WO1988003567A1 (fr) | 1986-11-13 | 1987-11-12 | Clivage racemique de 3-acyloxy-bicyclo [3.3.0] octane-7-one-2 esters d'acide carboxylique par hydrolyse d'acylate stereospecifique enzimatique ou microbiologique |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HUT47157A HUT47157A (en) | 1989-01-30 |
HU202596B true HU202596B (en) | 1991-03-28 |
Family
ID=6313858
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU875804A HU202596B (en) | 1986-11-13 | 1987-11-12 | Process for racemate dissociation of 3-acyloxybicyclo(3.3.0) octan-7-one-2-carboxylic acid esters by stereospecific enzymic or microbiological acylate hydrolysis |
Country Status (20)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4894336A (hu) |
EP (1) | EP0271432B1 (hu) |
JP (2) | JP2736066B2 (hu) |
AT (1) | ATE80664T1 (hu) |
AU (1) | AU613328B2 (hu) |
BG (1) | BG48099A3 (hu) |
CA (1) | CA1301100C (hu) |
CS (1) | CS268542B2 (hu) |
DD (1) | DD264233A5 (hu) |
DE (2) | DE3638758A1 (hu) |
DK (1) | DK174394B1 (hu) |
ES (1) | ES2044969T3 (hu) |
FI (1) | FI92499C (hu) |
GR (1) | GR3006013T3 (hu) |
HU (1) | HU202596B (hu) |
IE (1) | IE61662B1 (hu) |
NO (1) | NO172903C (hu) |
RU (1) | RU1788968C (hu) |
WO (1) | WO1988003567A1 (hu) |
ZA (1) | ZA878542B (hu) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB8600245D0 (en) * | 1986-01-07 | 1986-02-12 | Shell Int Research | Preparation of 2-arylpropionic acids |
DE3638760A1 (de) * | 1986-11-13 | 1988-05-26 | Schering Ag | Verfahren zur herstellung von optisch aktiven bicyclo(3.3.0)octandioncarbonsaeureestern |
JPH01257484A (ja) * | 1987-12-14 | 1989-10-13 | Idemitsu Kosan Co Ltd | 光学活性な二級アルコールの製造方法 |
CA2118795A1 (en) * | 1991-09-20 | 1993-04-01 | John Crosby | Pyranones |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4644068A (en) * | 1983-08-19 | 1987-02-17 | Sagami Chemical Research Center | Bicyclo[3.3.0]octenylaldehyde derivatives |
US4681951A (en) * | 1983-12-27 | 1987-07-21 | Sagami Chemical Research Center | Bicyclo(3.3.0)octene derivatives |
JPS61280294A (ja) * | 1985-06-04 | 1986-12-10 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | 光学活性カルバサイクリン中間体の製造方法 |
-
1986
- 1986-11-13 DE DE19863638758 patent/DE3638758A1/de not_active Withdrawn
-
1987
- 1987-11-11 DD DD87308936A patent/DD264233A5/de not_active IP Right Cessation
- 1987-11-12 AT AT87730144T patent/ATE80664T1/de not_active IP Right Cessation
- 1987-11-12 DE DE8787730144T patent/DE3781775D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 EP EP87730144A patent/EP0271432B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 AU AU82364/87A patent/AU613328B2/en not_active Expired
- 1987-11-12 US US07/237,109 patent/US4894336A/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 HU HU875804A patent/HU202596B/hu unknown
- 1987-11-12 JP JP62506737A patent/JP2736066B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 ES ES87730144T patent/ES2044969T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 IE IE304687A patent/IE61662B1/en not_active IP Right Cessation
- 1987-11-12 CA CA000551618A patent/CA1301100C/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-11-12 WO PCT/DE1987/000513 patent/WO1988003567A1/de active IP Right Grant
- 1987-11-13 ZA ZA878542A patent/ZA878542B/xx unknown
- 1987-11-13 CS CS878151A patent/CS268542B2/cs unknown
-
1988
- 1988-07-12 RU SU884356253A patent/RU1788968C/ru active
- 1988-07-12 BG BG84851A patent/BG48099A3/xx unknown
- 1988-07-12 FI FI883316A patent/FI92499C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-07-12 NO NO883109A patent/NO172903C/no not_active IP Right Cessation
- 1988-07-12 DK DK198803891A patent/DK174394B1/da not_active IP Right Cessation
-
1992
- 1992-12-09 GR GR920402865T patent/GR3006013T3/el unknown
-
1997
- 1997-07-14 JP JP9187953A patent/JP2786437B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP1117823B1 (en) | Resolution of trans-2 -(alkoxycarbonylethyl) -lactams useful in the synthesis of 1- (4-fluorophenyl) -3(r) - 3(s) -hydroxy-3 -(4-fluorophenyl) -propyl)] -4(s) -(4-hydroxyphenyl) -2-azetidinone | |
US4916074A (en) | Process for producing optically active compounds | |
EP0912755B1 (en) | The bioresolution of n-acylazetidine-2-carboxylic acids | |
HU202596B (en) | Process for racemate dissociation of 3-acyloxybicyclo(3.3.0) octan-7-one-2-carboxylic acid esters by stereospecific enzymic or microbiological acylate hydrolysis | |
AU670088B2 (en) | Enzymatic process to separate racemic mixtures of delta valerolactones | |
EP0528607B1 (en) | Process for preparing optically active 3-phenylglycidic acid esters | |
HU202289B (en) | Process for racemate-splitting 7-alpha-acyloxy-6-beta-(hydroxy-methyl)-2-oxabicyclo(3.3.0)octan-3-one derivatives with stereospecific enzymatic acylate-hydrolysis | |
US5102793A (en) | Stereospecific keto reduction of bicyclooctandione-carboxylic acid esters by microorganisms | |
US5248609A (en) | Racemic separation of 7α-acyloxy-6β-hydroxymethyl-2-oxabicyclo[3.]-octan-3-ones by stereospecific enzymatic acylate hydrolysis | |
US5391494A (en) | Process for selectively producing optically active 1-derivatized-2-diol using lipase CES and triglyceride | |
EP0655504A2 (en) | Process for optical resolution of 1,2-diol derivatives | |
US5248601A (en) | Process for preparing L(-)-carnitine chloride | |
JP2838527B2 (ja) | 光学活性化合物の製造法 | |
WO1999060151A1 (en) | New biotechnological process for preparing hydroxylated ml-236b derivatives, known as m-4 and m-4', and analogues thereof | |
JPH1087613A (ja) | 光学活性アジリン類およびその製造法 | |
JPH0965891A (ja) | 光学活性α−メチルアルカン酸誘導体の製造方法 | |
HU176104B (hu) | Üj eljárás (+)13B-alkiI-3-metoxi-17-oxo-gonaének mikrobiológiai előállítására | |
JPH0959211A (ja) | 新規光学活性ジカルボン酸誘導体及びそれを製造する方法 |