RU1788968C - Способ получени оптически активных производных (+)-бицикло (3.3.0)-октанола - Google Patents

Способ получени оптически активных производных (+)-бицикло (3.3.0)-октанола

Info

Publication number
RU1788968C
RU1788968C SU884356253A SU4356253A RU1788968C RU 1788968 C RU1788968 C RU 1788968C SU 884356253 A SU884356253 A SU 884356253A SU 4356253 A SU4356253 A SU 4356253A RU 1788968 C RU1788968 C RU 1788968C
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
bicyclo
octane
cis
carboxylic acid
dimethyl
Prior art date
Application number
SU884356253A
Other languages
English (en)
Inventor
Петцольдт Карл
Даль Хельмут
Скубалла Вернер
Original Assignee
Шеринг Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Шеринг Аг filed Critical Шеринг Аг
Application granted granted Critical
Publication of RU1788968C publication Critical patent/RU1788968C/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/72—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 spiro-condensed with carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C405/00—Compounds containing a five-membered ring having two side-chains in ortho position to each other, and having oxygen atoms directly attached to the ring in ortho position to one of the side-chains, one side-chain containing, not directly attached to the ring, a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, and the other side-chain having oxygen atoms attached in gamma-position to the ring, e.g. prostaglandins ; Analogues or derivatives thereof
    • C07C405/005—Analogues or derivatives having the five membered ring replaced by other rings
    • C07C405/0075—Analogues or derivatives having the five membered ring replaced by other rings having the side-chains or their analogues or derivatives attached to a condensed ring system
    • C07C405/0083—Analogues or derivatives having the five membered ring replaced by other rings having the side-chains or their analogues or derivatives attached to a condensed ring system which is only ortho or peri condensed, e.g. carbacyclins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D319/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D319/04—1,3-Dioxanes; Hydrogenated 1,3-dioxanes
    • C07D319/08—1,3-Dioxanes; Hydrogenated 1,3-dioxanes condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
    • C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
    • C12P41/004—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of alcohol- or thiol groups in the enantiomers or the inverse reaction
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/24—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carbonyl group
    • C12P7/26—Ketones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
    • C12P7/42—Hydroxy-carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/62—Carboxylic acid esters

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Использование: получение химических соединений биосинтезом, использование ферментов или микроорганизмов дл  разделени  рацемической смеси на оптические изомеры. Сущность изобретени : осуществл ют ферментативное или микробиологическое стереоспефическое ацилатное омыление ацилатной группы р да рацемических соединений промежуточных стадий Изобретение относитс  к способу сте- реоспецифического ацилатного гидролиза рацемических сложных эфиров 3-ацилокси- бицикло 3.3.0(-октан-7-он-2-карбоновых кислот до оптически активных спиртов с помощью ферментов или микроорганизмов. Он особенно пригоден дл  получени  оптически активных производных (+)-бицик- ло(3.3.0)-октанола формулы (+) у 7-R, он (+Ы , простаци клина. Берут, например, 3 г ( ±) метилового эфира За-ацетокси-7,7-(2,2- диметил-триметилендиокси)-цис-бицикло (3.3.0)-октан-2 /3 -карбоновой кислоты, раствор ют в 100 мл этанола и объедин ют с раствором 1,5 г липазы-PL из Alcaligenes в 1 л 0,1 М фосфатного буфера с рН 7 в колбе Эрленмейера емкостью 2 л. Суспензию встр хивают, по истечении 21ч превращаютс  50% используемого субстрата. Реакционную смесь экстрагируют 3 раза метилизобутилкетоном. Экстракты объедин ют , концентрируют досуха и дл  отделени  непрореагировавшего ацилата сложного эфира хроматографируют через колонку с силикагелем. Получают 1,15 г. энантиомерного чистого (+) метилового эфира За -окси-7,7-(2,2-диметил-триметилдиок- си)-цис-бицикло(3.3,0)-октан-2 /3 -карбоновой кислоты, который после кристаллизации из смеси гексана с диизопропиловым эфиром плавитс  при 64-66°С,(а)о20 +26,2° (с 1,255, в СНС1з). 3 з.п. ф-лы, 2 ил. (Л С где RI и R2 вместе обозначают атом кислорода или двухвалентный остаток -0-Х-О- с X в качестве линейного или разветвленного алкилена с 1-7 С-атомами или Рз обозначает остаток COOZ с Z в качестве линейного, или разветвленного алкила с 7-10 С-атомами. Он отличаетс  тем. что рацемические производные 3-ацилоксицис-бицик- ло(3.3.0)-октана формулы ()-И: % А, « 9- ОСОРЦ vi 00 00 О а 00 GJ (±)-ii,

Description

где Ri, R2, Рз и R4 имеют вышеуказанные значени ,
ферментативно или микробиологически подвергают стереоспецифическому ацилат- ному гидролизу и образовавшеес  (+)-про- изводное бицикло (З.З.О)-октанола (+)- отдел ют от неомыленного бицикло (3.3.0)- октанолацилата формулы (-)- или неомы- ленный энантиомер (+)-П отдел ют от смыленного производного бицикло (3.3.0)- октанола (-)- и затем подвергают химическому ацилатному гидролизу (гидролизу ацилатной группы).
Если X обозначает линейный или разветвленный алкильный остаток с 1-7 С-ато- мами, то подразумевают следующие остатки: .-
(СН2)п - с п 1-7 (метилен, этилен, три-, тетра-пента, -гекса- и гептаметилен),
-С(СН3)2-. -СН(СНз)-, -СН(СНз)-СН2-,
-С(СНз)2-, СН2-. -СН2-СН(СН)з-, -СН2- С(СН3)2, . -СН2-СН(СНз)-СН2- -СН2- С (СНз)2-СН2-, СН-(С2Н5)-, -С(С2Н5)-,
-CH(C2Hs)-CH2-, -CH2-CH(C2Hs)-,
-СН2-С(С2Н5)2-, -СН2-СН(С2Н5)-СН2-,
-СН2-С(С2Н5)-СН2-ит.д.
2, R-q в качестве линейных или разветв- ленныхалкильных остатков с 1-7 С-атомами обозначают метил, этил, н-пропил, изопро- пил, н-бутил, изобутил, втор, -бутил, трет,- бутил, н-пентил, изопентил, втор, -пентил, неопентил, н-гексил, изогексил, н-гептил, изогептил.
2, соответственно, R4 в качестве эрал- кильных остатков с 7-10 С-атомами должны охватывать следующие остатки: -CHi-CeHs,
-СН2-СН2-СбН5, -СН2-СН2-СН2-С6Н5,
-СН2-СН2-СН2-СН2-СеН5, СН(СНз)-СбНб,
-СН2-СН(СНз)-СбН5, СН2-СН2-СН(СНз)- С6Н5, СН(СНз)-СН2-СбН5, -СН(СНз)-СН2- СН2-СбН5, -СН2-СН(СНзКН2-СбН5, СН( CeHs, СН2-СН(С2Н5)-СбН5, -СН(СзН7)- СеНб, -аСНз -СбНб, -СН2-С(СНз)2-СбН5, - СН(СНз)- СН(СНз)-СбН5, -С(СНз)2-СН2- CeHs и т.д.
Известен способ, предусматривающий применение производных цис-бицик- ло(3.3.0)-октан-3,7-диона дл  синтеза оптически активных карбациклинов, который включает разделение диастереомерных солей рацемической 7,7-этилендиокси-За -ок- си-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2-карбоновой кислоты.
Также этот способ требует еще 7 реакционных стадий, чтобы исход  из сложных 3-оксоглутаровых эфиров достичь исходного материала дл  аналогов карбациклина. К тому же проход т промежуточную стадию получени  нестабильной/ -кетокислоты,
Целью изобретени   вл етс  повышение выхода и ускорение способа. Способ иллюстрируетс  фиг.1 и 2. В качестве ферментов дл  предлагаемо- го в изобретении способа предпочтительно пригодны:
Липаза-PL из AlaNgenes Липаза М из Candida cylindracea Липаза Saiken из Rhizopus Липаза :Selerotinia
й-химотрипсин из поджелудочной железы крупного рогатого скота Алкалаза Т
Эстераза из свиной печени Липаза из поджелудочной железы свиньи
Субтилизин из Bacillus subtilis, причем ферменты можно использовать как в растворенной, суспендированной или, на- пример, иммобилизованной на активированной BrCN сефарозе или на оксиранакриловых шариках форме.
1 В качестве микроорганизмов дл  предлагаемого в изобретении способа предпоч- . тительно пригодны:
Alcaligenes marshallii ATCC 21030 Mucorrouxie ATCC 8097 Corynebacterium egui ATCC21107 Trichoderma koningi CBS 85068 Sarcina lutea ATCC 9341
Penicilliumcitrinum ATCC 8506 Flavobacterium lutesuns IF03085 Alcaligenes paradoxus ATCC 17713 Однако также можно примен ть выде- ленные из микроорганизмов ферменты в раствё ёШ б й лй иммобилизованной форме .
Получаемые по способу согласно изо- бретениюоптически активные производные бициклооктана формулы (+)- представл ют собой ценные промежуточные продукты дл  синтеза фармакологически эффективных производных простацикпина. Множество стереоспеПифических гидролизующих ферментов и микроорганизмов омыл ют рацемические производные 3-эцилокси- цис-бицикло(3.3.0)-октана формулы (+)-П до оптически активных спиртов формулы (+)-, которые по своей абсолютной конфигура- ции соответствуют природному простацик- лину PCI2, Оказалось, путем сравнени  спектральных и оптических свойств со сравнительными веществами, что обычно можно получить оптически активные карбацикли- новые аналоги из промежуточной стадии синтеза. Таким образом полученные продукты после отделени  от неомыленных фальшивых энантиомеров (-)- можно пр мо использовать дл  синтеза соответствую56 ,6 г метилового эфира 7,7-(2,2-диме- тил-триметилендиокси)-цис-бицикло(З.З.О)- октан-З-он-2-карбоновой кислоты раствор ют в 300 мл этилацетата и после добавки 5.1 г диоксида платины гидрируют при 22°С и нормальном давлении до тех пор, пока не прекратитс  поглощение водорода. Отфильтровывают из катализатора и концентрируют в вакууме. Получают 56,8 г целевого соединени , чистота которого достаточна дл  получени  кристаллизующего сложного эфира. Продукт можно кристаллизовать из гексана и получают 44,4 г первого кристал- лизата с т.пл, 43°С.
П р и м е р А 3. Сложный 3-эфир метилового эфира 7,7-(2,2-диметил-трцметиленди- окси)-3а -окси-цис-бицикло(3.3.0)-октан- 2/ -карбоновой кислоты.
а) Ацетат (+)100 г полученного в предыдущем примере по методу Б сырого продукта раствор ют в 57 мл пиридина и 57 мл уксусного ангидрида и нагревают 3 ч при 40°С. После охлаж- дени  добавл ют лед ную воду, экстрагируют дихлорметаном, органическую фазу промывают 2н. серной кислотой, раствором гидрокарбоната натри  и раствором хлорида натри , высушивают над сульфатом натри , Концентрируют в вакууме и кристаллизуют остаток из гексана, Получают 97,7 г продукта с т.пл. 54°С.
б) Бензоат( ±)-3
5,0 г сырого сложного оксиэфира раствор ют в 10 мл пиридина, смешивают с 2,47 мл бензоилхлорида и перемешивают 4 часа при 22°С. Затем медленно добавл ют в 100 мл лед ной воды, перемешивают 30 минут и кристаллизат отсасывают. После высушивани  и лерёкристаллизации из метанола получают 5,97 г продукта с т.пл. 102°С.
в) Изобутират ( ±)-7
2,265 г закристаллизовавшегос  сложного оксиэфира раствор ют в 40 мл дихлор- метана, смешивают с 4,16 мл триэтиламина и медленно с 3,14 мл изобутилхлорида. Спуст  2,5 ч при 22°С добавл ют 40 мл насыщенного раствора гидрокарбоната натри , ограническую фазу отдел ют и промывают с помощью 2н. серной кислоты при охлаждении льдом и водой, сушат над сульфатом натри  и концентрируют в вакууме. Сырой продукт хроматографируют на силикагеле смес ми гексана с этилацетатом. Получают 4,91 г продукта с т.пл. 43°С.
г) Бутират ( ±)-6
4,265 г кристаллизованного сложного оксиэфира раствор ют в 10 мл пиридина, добавл ют 4,90 мл масл ного ангидрида и
перемешивают 20 ч при 22°С. Смешивают с лед ной водой, экстрагируют дихлорметаном и экстракт промывают раствором гидрокарбоната натри , при охлаждении льдом
2н. серной кислотой и водой, сушат над сульфатом натри , концентрируют в вакууме и хроматографируют на силикагеле с помощью смесей гексан-этилацетат. Получают 5,03 г продукта в виде бесцветного масла.
д) Неполный сукцинат ( ±)-8
4,265 г кристаллизованного сложного оксиэфира раствор ют в 10 мл пиридина, добавл ют туда 1,833 г 3-диметиламинопи- ридина и 1,501 г ангидрида  нтарной кислоты и перемешивают 20 ч при 22°С. Затем добавл ют в лед ную воду, подкисл ют 2н. серной кислотой до рН 3, экстрагируют дихлорметаном , промывают раствором хлорида натри , сушат над сульфатом натри  и
концентрируют в вакууме. Остаток обрабатывают раствором гидрокарбоната натри , экстрагируют диэтиловым эфиром, водную фазу подкисл ют до рН 3, экстрагируют дихлорметаном , промывают экстракт раствором хлорида натри , сушат над сульфатом натри  и концентрируют в вакууме. Получают 5,04 г продукта в виде бесцветного масла .
ПримерА4. Метиловый эфир Зс/ -эцетокси-7 ,7-этилендиокси-цис-бицикло(3.3.0) -октан-2/ -карбоновой кислоты (+)-2
10,0 г метилового эфира 7,7-этилендиок- си-3-окси-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2-карбо новой кислоты превращают в услови х примера А За и сырой продукт хроматографируют на силикагеле смес ми гесана с этилацетатом. Получают 10,28 г продукта с т.пл. 50°С.
ПримерА5. 7,7-(2,2-диметилтриметилендиокси )-3 а -окси-цис-бицикло(3.3.0)-ок- тан-2/ -карбонова  кислота
5,0 г кристаллического сложного оксиэфира из примера А 2 перемешивают с 17.6 мл 1н. раствора гидроксида натри  в течение 30 мин при 22°С, экстрагируют этилацетатом , подкисл ют при охлаждении льдом водной фазы с помощью 2н серной кислоты до рН 3, экстрагируют дихлорметаном, промывают раствором хлорида натри , сушат
над сульфатом натри  и концентрируют в
вакууме. Получают 4,66 г продукта, который
достаточно чист дл  последующих реакций.
ПримерАб. 3«-ацетокси-7,7-(2,2-диметилтриметилендиокси )-цис-бицикло(3.3.
0)октан-2/ -карбонова  кислота ( ±)-9
3,13 г оксикислоты из примера А 5 раствор ют в 15 мл пиридина и после добавки 2,74 мл уксусного ангидрида перемешивают 20 ч при 22°С. К полученному раствору добавл ют лед ную воду, перемешивают 30 мин, экстрагируют дихлорметаном, промывают экстракт водой, сушат над сульфатом натри , концентрируют в вакууме и хрома- тографируют на силикагеле смес ми гекса- на с этилацетатом. Получают 3,04 г продукта в виде бесцветного масла.
ПримерАТ. Этиловый эфир 7,7-(2,2- диметил-триметилендиокси)-3 а -окси-цис- бицикло(3.3.0)-октан-2 /3 -карбоновой кислоты .
4,78 г, полученной в примере А 5 окси- кислоты кип т т с обратным холодильником в течение 2 дней вместе с 50 мл ацетона, 4,90 г карбоната кали  и 5,72 мл иодэтана. После охлаждени  отфильтровывают, фильтрат концентрируют в вакууме, смешивают с водой, экстрагируют дихлорметаном, сушат экстракт над сульфатом натри , концентрируют и очищают остаток на силикагеле смесью гексана с этилацетатом. Получают 3,65 г продукта в виде бесцетного масла.
ПримерАЗ. Этиловый эфир За - ацетокси-7,7-(2,2-диметилтриметилендиок- сй)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2 /3 -карбоновой кислоты ( ±)-10.
3,10 г сложного оксиэфира из примера А 7 превращают в услови х примера А За и сырой продукт хроматографируют на силикагеле смес ми гексана с этилацетатом. Получают 3,20 г продукта в виде бесцветного масла.
ПримерАЭ. Бензиловыйэфир7,7-(2,2- диметил-триметилендиокси)-3 а -окси-цис- бицикло(3.3.0)-октан-2 /3 -карбоновой кис- . лоты.
2,52 г полученной в примере А оксикис- лоты вместе с 50 мл ацетата, 3,59 г карбоната кали  и 3,0 мл бензилхлорида кип т т с обратным холодильником в течение 5 дней и обрабатывают как описано в примере А 7. Получают 2,07 г продукта в виде бесцветного масла.
ПримерАЮ. Бензиловый эфир 3 а- ацетокси-(2,2-диметил-триметилендиокси)- цис-бицикло(3.3.0)-октан-2/ -карбоновой кислоты (+)-11.
1,89 г сложного оксиэфира из примера А 9 превращают в услови х примера А 3 и сырой продукт хроматографируют на силикагеле смес ми гексана с этилацетатом. Получают 1,78 г продукта в виде бесцветного масла.
П р и м е р А 11. Бензиловый эфир 7,7-(2,2-диметил-триметилендиокси)-цис- бицикло(3.3.0)-окси-3-он-2-карбоновой кислоты ,
К раствору 2,5 г метилового эфира 7,7- (2,2-диметил-триметилендиокси)-цис-бицикло (3.3.0)-октан-3-он-карбоновой кислоты в 50 мл толуола добавл ют 1,2 мл бензилового спирта и 217 мк диметиламинопиридина и раствор кип т т с обратным холодильником
в течение 8 часов, Затем охлаждают до 25°С, добавл ют насыщенный раствор хлорида натри , экстрагируют метиленхлоридом, промывают рассолом, сушат над сульфатом магни  и выпаривают в вакууме. Остаток
очищают путем колоночной хроматографии на силикагеле. Элюируют смесью гексана с уксусным эфиром (8:2) 2,6 г титульного соединени  в виде бесцветных кристаллов. После перекристаллизации из смеси уксусного
эфира с гексаном получают 1,8 г бесцветных кристаллов с т.пл. 78°С.
П р и м е р А 12. Бензиловый эфир 7,7-(2,2-диметил-триметилендиокси)-3 а -окси-цис-бицикло (3.3.0)-октан-2 / -карбоновой кислоты.
1,5 г бензилового эфира 7,7-(2,2-диме- тил-триметилендиокси)-цис-бицикло(З.З.О) -октан-З-он-2-карбоновой кислоты (пример
11) при температуре кипени  с обратным холодильником раствор ют в 25 мл метанола . Затем охлаждают до -40°С, добавл ют 470 мг боргидрида натри  и перемешивают 1 ч при -40°С. Добавл ют 3,8 мл ацетона,
перемешивают 1 ч при -40°С, нейтрализуют примерно 0,7 мл лед ной уксусной кислоты и концентрируют в вакууме. Остаток смешивают со 100 мл воды, экстрагируют с помощью метиленхлорида, промывают
рассолом, сушат над сульфатом магни  и выпаривают в вакууме. После хромэтогра- фии на силикагеле получают с помощью смеси гексана с уксусным эфиром (6-4) 1,4 г титульного соединени  в виде бесцветного
масла. ИК-спектр ():3600, 2960, 1722, 1447см 1.
П р и м е р А 13. Бензиловый эфир 7,7-(2,2-диметил-триметилендиокси)-3 а - бензоил-окси-цис-бицикло(3.3.0)октан-2 / карбоновой кислоты,
К раствору 1,85 г бензилового эфира 7,7- (2,2-диметилтриметилендиокси)-3 а -окси- цйс-бицикло(3.3.0)-октан-2 / -карбоновой кислоты (пример А 12) в 14 мл метиленхлорида при 0°С добавл ют 1,4 мл пиридина и 0,62 мл бензоилхлорида и перемешивают 0,5 ч при 0°С и 2 ч при 25°С. Затем добавл ют 0,2 мл воды, перемешивают 1 ч, разбавл ют метиленхлоридом, встр хивают
последовательно с водой, 5%-ным раствором гидрокарбоната натри  и водой. Сушат над сульфатом магни  и хроматографируют остаток после выпаривани  на силикагеле. С помощью смеси гексана с уксусным эфиром (3-2) получают 1,36 г титульного соединени  в виде бесцветного масла.
ПК-спектр ():3960, 2870, 1725, 1603 см 1,
Следующие примеры осуществлени  служат дл  по снени  предлагаемого в изобретении способа.
Пример.Зг(±) метилового эфира 3 а -ацетокси-7,7-(2,2-диметилтриметилен- диокси)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2/ -карбо- новой кислоты раствор ют в 100 мл этанола и обьедин ют с раствором 1,5 г липазы -PL из Alcaligenes в 1 л 0,1 М фосфатного буфера с рН 7 в колбе Эрленмейера емкостью 2 л, Суспензию встр хивают при 30°С на ротационном встр хивателе, причем за ходом реакции след т путем анализа непрерывно отбираемых проб. По истечении времени реакции 21 ч превращаетс  50% испытуемого субстрата. Реакционную смесь теперь экстрагируют 3 раза метилизобутилкето- ном. Экстракты объедин ют, концентрируют в вакууме досуха и дл  отделени  непрореагировавшего ацилата сложного эфира хроматографируют через колонку с силикагелем (градиент: метиленхлорид-ме- тиленхлррид (10% ацетона). Получают 1,15 г энантиомерного чистого (+) метилового эфира 3-окси-7,7-(2,2-димётил-триметилендиок- си)-цис-бицикло-(3.3.0)-октан-2уЗ -карбоновой кислоты, который после кристаллизации из смеси гексана с диизопропиловым эфиром плавитс  при 64-66°С, ( ог)о20 + 26,2°(с 1,255, вСНС1з).
П р и м е р 2. 300 мг ( ±)-метилового эфира 3 а-ацетокси-7,7-(2,2-диметилтриме- тилендиокси)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2 / - карбоновой кислоты суспендируют в 100 мл 0.1М фосфатного буфера с рН 7, добавл ют 750 мг липазы My из Candida cy.lindra- сеа и суспензию гомогенизируют с помощью ультра-Turrax. Затем смесь при комнатной температуре встр хивают на ротационном встр хивателе. Спуст  врем  реакции 30 ч, субстрат превращаетс  на 50%. Реакционную смесь тогда экстрагируют 3 раза эфиром, экстракты объедин ют и выпаривают в вакууме досуха. Оставшийс  остаток дл  отделени  непрореагировавшего исходного материала хроматографируют с помощью градиента растворителей мети- ленхлорид-метиленхлорид - (5% ацетона) через колонку с силикагелем. Получают .105 мг (+) метилового эфира 3 -окси-7,7-(2,2-ди- метил-триметилендиокси)-цис-бицикло(3.3.0) -октан-2/З-карбоновой кислоты, который после кристаллизации из гексана имеет т.пл. 62-63°С и величину вращени  (а)о +25°С (с 1,01 в ). Путем сравнительного измерени  с аутеничным сравнительным стандартом установили избыток энантиомера 93,6%.
П р и м е р 3. 300 мг ( + ) метилового
эфира 3 а -ацетокси-7,7-(2,2-диметилтриме- тилендиокси)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2 / - карбоновой кислоты раствор ют в этаноле и добавл ют суспензии 750 мг липазы Saiken из Rhizopus в 100 мл 0,1 М фосфатного буфера с рН 7. Спуст  96ч встр хивают на машине дл  встр хивани  при 28°С, затем реакционную смесь экстрагируют мети- лизобутилкетоном, экстракт концентрируют досуха и хроматографируют через, колонку с
силикагелем. Получают 112 мг (+)-метилово- го эфира 3«-окси-7,7-(2,2-диметил-тримети- лендиокси)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2 -карбоновой кислоты с т.пл. 64-65°С после кристаллизации из гексана. Величина вращени  составл ет (а)о20 + 23,8° (с 1,02 в ), избыток энантиомера после сравнительного измерени  по отношению к ауте- ничному стандарту 92,5%.
П р и м е р 4. 300 мг ( ±)-метилового
эфира 3 а-ацетокси-7,7-(2,2-диметилтриме- тилендиокси)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2 / - карбоновой кислоты суспендируют в 100 мл 0,1 М фосфатного буфера с рН 7. Добавл ют 750 мг а -Химотрипсина из поджелудочной
железы крупного рогатого скота и гомогенизируют с помощью ультра-Turrax. Затем реакционную смесь при 28°С встр хивают на ротационном встр хивателе до тех пор, пока используемый субстрат ацилата сложного эфира не превратитс  на 50%. После этого реакционную смесь экстрагируют многократно метилизобутилкетоном, объединенные экстракты концентрируют в вакууме досуха и с целью отделени  с
неестественной конфигурацией, омылен- ных в. этом случае энантиомеров хроматографируют с помощью градиентов растворителей метиленхлорид-метиленхло- рид/ 5% ацетона через колонку с силикагелем . Фракци  1 содержит соответствующий по своей абсолютной конфигурации природному простациклину PCI2, остающийс  нео- мыленным энантиомер (+ )-li. После концентрировани  досуха получают 115 мг
(+)-метилового эфира 3 #-ацетокси-7,7-(2,2- диметил-триметилендиокси)-цис-бицикло (3.3.0)-октан-2/3-карбоновой кислоты в виде некристаллизующегос  масла с величиной вращени  (а)о +2,6° (с 1,035 в хлороформе ).
П р и м е р 5. В услови х примера 4, 300 мг (+ )-метилового эфира 3 сг-ацетокси-7,7- этилендиокси-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2 / - карбоновой кислоты в фосфатном буфере с
рН 7 ввод т во взаимодействие с 750 мг субтилизина из Bacillus subtilis. После встр хивани  в течение 10ч при 28°С смесь экстрагируют метйлизобутилкетоном, экстракт концентрируют досуха и хроматогра- фируют на колонке с силикагелем. С помощью градиентов растворителей мети- ленхлорид-метиленхлорид/ 4% ацетона элюируют в виде первой фракции неомы- ленный, с соответствующей природному простациклину конфигурацией (+)-энантио- мер. После концентрировани  фракции досуха получают 130 мг (+)-метилового эфира
3 а -ацетокси-7,7-этилендиокси-цис-бицик- ло(3.3.0)октан-2/ -карбоновой кислоты в виде масл нистой жидкости с величиной вращени  (а)о20 +2,4° (с 1,085 в хлороформе ).
П р и м е р 6. Колбу Эрленмейера емкостью 2 л, котора  содержит 500 мл стерилизованного в течение 30 мин при 120°С в автоклаве питательного раствора из 0,1% пептона, 0,2% Corn Sreep Liguor 0,5% глюкозы и 0,5% дрожжевого экстракта, с уста- нйвленным при 7,5 значении рН, инокулируют с помощью культуры косых палочек (Schro grbhrehen) штамма Alcaligenes marshal ATCC 21030 и в течение 48 ч встр хивают на ротационном встр хивателе. С помощью 300 мл этой выращенной культуры инокулируют ферментер емкостью 10 л, который заполнен 5 л стерилизованной питательной среды такого же состава, что и такова  выращиваемой культуры. При добавке силикона SH в качестве антивспени- вател  оставл ют прорастать при 29°С при аэрации (5 л/мин) и перемешивании (220 об/мин). После фазы роста 36 часов добавл ют субстрат в форме стерильно отфильтрованного раствора 30 г (+ ) метилового эфира 3 а-ацетокси-7,7-(2,2-диметилтриме- тилендиокси)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2 / - карбоновой кислоты в 125 мл этанола и за течением реакции след т с помощью анализа непрерывно отбираемых проб. Спуст  10
4 после добавки субстрата, превратилось 50% используемого субстрата. Содержимое ферментера теперь экстрагируют 4 раза по Зл метйлизобутилкетоном, экстракты объедин ют и выпаривают в вакууме досуха. Оставшийс  остаток раствор ют в метаноле и дл  удалени  силиконового масла фильтруют через складчатый фильтр. Фильтрат снова довод т в вакууме досуха и остаток дл  отделени  непрореагировавшего с конфигурацией (-)-Н энантиомера (фракци  I) хрома- тографируют через колонку с силикагелем (градиент метиленхлорид - метиленхло- рид/20% ацетона). Получают во фракции II
после кристаллизации из гексана 10,7 г (+)- метилового эфира За-окси-7,7-(2,2-диметил- триметилендиокси)-цис-бицикло(3,3.0)-ок- тан-2/З-карбоновой кислоты с т.пл. 63-64°С,
что соответствует выходу энантиомера 81,9% от теории. Величина вращени  составл ет (а )о +26,1 ° (с 1,3 в хлороформе ), избыток энантиомера 97,5%.
П р и м е р 7. Колбу Эрленмейера емкостью 2 л, котора  содержит 500 мл стерилизованного в течение 80 мин при 120°С в автоклаве питательного раствора из 3% глюкозы, 1,0% Steep Liguor, 0,2% ЫаМОз, 0,1 % КН2РСм, 0,2% К2НРСм, 0,05% MgS04 7
4Н20, 0,002% FeSCU-7 H20 и 0,05% KCI, инокулируют с помощью культуры косых трубочек штамма Mucor rouxii (ATCC 8097) и 2,5 дн  встр хивают на ротационном встр хивателе при 30°С.
С помощью двойного объема этих выращенных культур инокулируют ферментер емкостью 20 л, который заполнен с помощью 14 л стерилизованной в течение 60 мин при 121°С и повышенном давлении 1,1
бар среды такого же состава, что и такова  выращиваемых культур. При добавке силикона SH в качестве антивспенивзтел  оставл ют прорастать при 29°С с повышенным давлением 0,7 бара при аэрации (15 л/мин)
и перемешивании (220 об/мин). После фазы роста 15 ч добавл ют субстрат в форме стерильно профильтрованного раствора 9 г (+ )-метилового эфира 3 а -ацетокси-7,7- (2,2-диметил-триметилендйокси)-цис-бицикло (3.3.0)-октан-2 / -карбоновой кислоты в 220 мл этанола и за течением реакции непрерывно след т путем анализа непрерьГв- но отбираемых проб.. .
Спуст  2 ч после добавки субстрата п ревратилось 50% используемого субстрата. Содержимое ферментера теперь экстрагируют 3 раза по 10 л метйлизобутилкетоном. экстракты объедин ют и концентрируют в вакууме досуха. Остающийс  остаток раствор ют в метаноле и дл  удалени  силиконового масла фильтруют через складчатый фильтр. Фильтрат снова довод т досуха в вакууме и остаток, дл  отделени  непревращенного исходного материала, хроматографируют через колонку с силикагелем (градиент: 5 л метиленхлорида - 5 л мети- ленхлорида 10% ацетона). Получают 3,3 г (+)-метилового эфира 3 #-окси-7,7-(2.2-диме- тил-триметилендиокси)-цис-бицикло(З.З.О)октан- 2 fi -карбоновой кислоты, который после кристаллизации из смеси гексана с диизопропиловым эфиром, плавитс  при 64-65°С. Величина вращени  составл ет (а )о20 +25,7° (с 1,045 в хлороформе).
Путем сравнительного измерени  по отношению к аутентичному стандарту определен энантиомерный избыток 96% вес.
Примерз. Колбу Зрленмейера емкостью 2 л, заполненную 500 мл стерильного питательного раствора из 0,1% пептона, 0,2% Corn Steep liguor, 0,5% глюкозы иО,5% дрожжевого экстракта, рН 7,3, инокулиру- ют с помощью культуры косого агара штамма Corynebactirium egui (ATCC 21107) и встр хивают 48 ч при 30°С.
С помощью двойного обьема этих выра- щенных культур инокулируют ферментер емкостью 20 л, который заполнен 14 л стерильной среды такого же состава, что и та- кова  выращиваемых культур. При добавке силикона SH- в качестве антивспенивател  оставл ют прорастать при 29°С и повышенном давлении 0,7 бара при аэрации (15 л/ мин) и перемешивании (220 об/мин). После времени роста 16 ч добавл ют субстрат в форме стерильно профильтрованного раствора 6 г (+ )-метилового эфира 3 а-ацеток- си-7,7-(2,2-диметил-триметилендиокси)-цис- бицикло(3.3.0)-октан-2/3 -карбоновой кисло- ты в 150 мл этанола и далее перемешивают и аэрируют. Спуст  3 ч после добавки субстрата превратилось 50% используемого субстрата. Смесь теперь экстрагируют ме- тилизобутилетоном и экстракт концентри- руют в вакууме досуха. Остающийс  остаток освобождают от силиконового масла путем обработки метанолом и хроматографируют через колонку с силикагелем. Получают 1.9 г (+ )-метилового эфира За- окси-7,7-(2,2-ди- метилтриметилендиокси)-цис- бицикло(З.З.О)- октан-2 /3 -карбоновой кис- лоты, который после кристаллизации из смеси гексана с диизопропиловым эфиром плавитс  при 63- 65°С. Величина вращени  составл ет (а)о20 +25,2° (с 1,04вСНС1з).
Пример 9. В услови х примера 7 с помощью культуры штамма Trichoderma Koningi (CBS 85068) 6 г (+)-мети левого эфира 3 а -ацетокси-7,7-(2,2-диметил-триметилен- диокси)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2/ -карбоновой кислоты после времени ферментации 28.5 ч превращают в 2,0 г (+)-метилового эфира 3 а -окси-7,7-(2,2-диметил-тримети- лендиокси)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2 ft - карбоновой кислоты. Величина вращени  кристаллизованного из гексана вещества составл ет(а)020 +24,2°(с 1,015вСНС1з).
ПримерЮ. В услови х примера 8 с помощью культуры штамма Sareina Lutea (ATCC 9341) 6 г (+ )-метилового эфира 3 а - ацетокси-7,7-(2,2-диметил-триметилендиок- си)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2 / -карбоновой кислоты после времени ферментации
135 ч превращают в 1,85 г (+)-метилового эфира 3 а -окси 7,7(2,2-диметил-тримети- лендиокси)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2 /3 - карбоновой кислоты. Величина вращени  составл ет (a)D20 + 23,6° (с 1,010 в ). ПримерИ. В услови х примера 7 с помощью культуры штамма Penicillium 11Ле8ип8(АТСС 8506)6г(±)-метиловогоэфи- ра 3 а -ацетокси-7,7-(2,2-диметил-тримети- лендиокси)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2 /
-карбоной кислоты за 8 ч времени ферментации превращают в 2,3 г (+ )-метилового эфира 3 а -окси-7,7-(2,2-диметил-тримети- лендиокси)-цис-бицикло(3.3.0)-ок.тан-2 / - карбоновой кислоты. Величина вращени  составл ет(«)о20 +21,8°(с 1,05вСНС1з).
П р и м е р 12. В услови х примера 8 с помощью культуры штамма Flavobacterium lutesuns (IFO 3085) 6 г (+)-метилового эфира 3 а. -ацетркси-7,7-(2,2-диметил-триметилен- диокси)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2/5-карбоновой кислоты за 47 ч времени ферментации превращают в 1,8 г (+ ) -метилового эфира 3 а -окси-7,7-(2,2-диметил- триметилендиокси)-цис-бицикло(3.3.0)-ок- тан-2/ -карбоновой кислоты. Величина вращени  составл ет (а)о20 +21,8° (с 1,145 в ).
Пример13. 300 мг (+ )-метилового эфира 3 -бутирилокси-7,7-(2,2-диметил-три- метилендиокси)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2
-карбоновой кислоты раствор ют в 9 мл этанола и объедин ют с раствором 750 мг липазы Saiken из Rhizopus в 100 мл 0,1 М фосфатного буфера с рН 7. Суспензию встр хивают в течение 150 ч при 28°С на ротационном встр хивателе и затем экстрагируют метилизобутилкетоном. Экстракт концентрируют в вакууме досуха и остаток дл  отделени  непрореагировавшего ацила- та сложного эфира хроматографируют через колонку с силикагелем. Получают 95 мг (+)- метилового эфира 3 о, -окси-7,7-(2,2-диме- тил-триметилёндиокси)-цис-бицикло-(З.З.О)
-октан-2/3-карбоновой кислоты с величиной вращени  (a)D20 +22,8° (с 0,905 в ).
П р и м е р 14. В услови х примера 13, 300 мг(±)-метилового эфира 3 -бутирилокси- 7,7-(2,2-диметил-триметилендиокси)-цис-би- цикло(3.3.0)-октан-2/ -карбоновой кислоты в фосфатном буфере с рН 7 превращают в присутствии 750 мг алкалазы Т. Спуст  2,5 ч встр хивани  при 28°С смесь экстрагируют метил-изобутилкетоном и экстракт хроматографируют на силикагеле. Получают 100 мг(-)-метилового эфира 3 2-окси-7,7-(2,2-ди- метил-триметилендиокси)-цис-бицикло(З.З.О)
-октан-2/ карбоновой кислоты с величиной вращени  (a)D20 -i24,9° (с 1,020 в ).
П р и мер 15. 300 мг (+ )-метилового эфира 3 -диметилацетокси-7,7-(2,2-диметил- триметилендиокси)-цис-бицикло(3.3.0)-ок- тан-2/З-карбоновой кислоты раствор ют в 9 мл этанола и объедин ют с раствором 1,5 мл разбавленной 1:40 эстеразы из свиной печени в 100 мл 0,1 М фосфатного буфера с рН 7. Смесь встр хивают 1 ч при 28°С на машине дл  встр хивани , затем экстрагируют метилизобутилкетоном и выпаренный в вакууме экстракт хроматографируют через колонку с силикагелем. Получают 114 мг (+)- метилового эфира 3 а. -окси-7,7-(2,2-диме- тил-триметилендиокси)-цис-бицикло(З.З.О)- октан-2/ -карбоновой кислоты в виде масла, которое медленно кристаллизуетс . Т.пл. 64-65°С (а),Г (с 1,010 в CHCIs).
П р и м е р 16. 300 мг (± )-метилового эфира За -карбоксипропионилокси-7,7-(2,2- диметил-триметилендиокси)-цис-бицикло (3.3.0)-октан-2/3 -карбоновой кислоты раствор ют в 9 мл этанола и объедин ют с раствором 750 мг липазы Sclerotinia в 100 мл 0,1 М фосфатного буфера с рН 7. После встр хивани  в течение 30 ч на машине дл  встр хивани  при 28°С устанавливают рН значение раствора равным 9,0 с помощью 0,1 н. NaOH, затем экстрагируют с помощью метилизббутилкетона и экстракт концентрируют в вакууме досуха. Получают 105 мг (+)-метилового эфира 3 а-окси-7,7-(2,2-диме- тил-триметилендиокси)-цис-бицикло(З.З.О)- октан-2 /3 -карбоновой кислоты с величиной вращени  («)о20 +24,0° (с 1,08 в СНСЬ).
Пример17. 300 мг ()-этилового эфира 3 ел -ацетокси-7,7-(2,2-диметил-триметилен- диокси)-цис-би цикл о(3.3.0)-октан-2 /3 -карбоновой кислоты раствор ют в 9 мл этанола и объедин ют с раствором 750 мг липазы из поджелудочной железы свиней в 100 мл фосфатного буфера с рН 7. Раствор встр хивают на ротационном встр хивателе при 28°С, причем за течением реакции след т путем анализа непрерывно отбираемых проб. Спуст  1 ч времени реакции превращаетс  50% используемого субстрата. Смесь теперь экстрагируют 3 раза метилизобутилкетоном , экстракты объедин ют, концентрируют в вакууме досуха и дл  отделени  непрореагировавшего ацилата сложного эфира, хроматографируют на колонке с силикагелем (градиентгметиленхлорид- метиленхпорид 10% ацетона). Получают 110 мг (+)-этилового эфира За -окси-7,7-(2,2-ди- метил-три метил ендиокси)-цис-би цикл о (3.3.0)-октан-2/3-карбоновой кислоты с величиной вращени  (а)о20 +23,8° (с 1,215 в ).
0
5
0
5
0
5
0
5
0
5
Пример18. В услови х примера 17, 300 мг (+)-эти левого эфира 3 «-ацетокси-7,7- (2,2-диметил-триметилендиокси)-цис-бици кло(3.3.0)-октан-2 /3 -карбоновой кислоты в течение 1 ч обрабатывают раствором 1,5 мл (разбавленным 1:40) эстеразы из свиной печени в 100 мл фосфатного буфера с рН 7. После экстракции метилизобутилкетоном и хроматографии через колонку с силикагелем получают 118 мг(+)-этилового эфира 3 а. -окси-7,7-(2,2-диметил-триметилен- диокси)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2 /3 -карбоновой кислоты с величиной вращени  (a)D20 +24,3° (1,075 в ).
П р и м е р 19. В услови х примера 17, 300 мг (+)-бензилового эфира 3 д-ацетокси- 7,7-(2,2-диметил-триметилендиокси)-цис-би- цикло(3.3.0)-октан-2 /3 -карбоновой кислоты в течение 1 ч обрабатывают раствором 750 мг липазы PL из Alcaligenes в 100 мл фосфатного буфера с рН 7. Затем смесь экстрагируют метилизобутилкетоном, экстракт концентрируют досуха и остаток хроматографируют через колонку с силикагелем. Получают 105 мг (+ )-бензилового эфира 3 а -окси-7,7-(2,2-диметил-триметиленди- окси)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2 /5 -карбоновой кислоты с величиной вращени  («Ъ +23,9°(с 1,045вСНС1з).
Пример 20. В услови х примера 17, 300 мг(+)-бензилового эфира 3 а-ацетокси- 7,7-(2,2-диметил-триметилендиокси)-цис- бицикло(3.3.0)-октан-2 /9 -карбоновой кислоты в течение 3 ч обрабатывают раствором 750 мг липазы My из Candida cyclindracea в 100 мл фосфатного буфера с рН 7. Затем смесь экстрагируют метилизобутилкетоном , экстракт концентрируют досуха й остаток хроматографируют на колонке с силикагелем. Получают 115 мг (+)-бензило- вого эфира 3 #-окси-7,7-(2,2-диметил-триме- тилёндиокси)-цис-бицикло(3.3.0)-октан-2 / - карбоновой кислоты с Ьелйчиной вращени  (а),5°(с 1,145 в ).
Пример21.В услови х примера 8 с помощью культуры штамма Alcaligenes paradoxus (ATCC 17713) превращают 6 г (+ )-метилового эфира 3 а -ацёто ксй-7,7:(2.2- диметил-три метилен ди о кси)-цис-бицикло (3.3.0)-октан-2 /3 -карбоновой кислоты. Спуст  4 ч после добавки субстрата, превращаютс  50% используемого рацемата. Смесь экстрагируют метилизобутилкетоном и экстракт концентрируют в вакууме досуха. Остающийс  остаток, с целью отделени  неестественной конфигурации омыленного энантиомера, хроматографируют через колонку с силикагелем. При этом во фракции 1 оказываетс  соответствующий по своей абсолютной конфигурации природному про- стациклину PGIa. оставшийс  неомыленным энантиомер (+)-П. После того, как фракцию концентрируют досуха, получают 2,4 г (+)- метилового эфира 3 а-ацетокси-7,7-(2,2-ди- метил-триметилендиокси)-цис-бицикло (3.3.0)-октан-2/ -карбоновой кислоты в виде некристаллизирующегос  масла с величиной вращени  (а )о20 +2,2° (с 1.11 в
СНС1з).
Пример 22. Проведение иммобилизации липазы из свиной поджелудочной железы .
1 г липазы из свиной поджелудочной железы суспендируют в 40 мл 1М фосфатного буфера рН 7,5, прибавл ют к 10 г Eupergit С.
После хорошего перемешивани  инкубируют три дн  при комнатной температуре . В заключение отсасывают иммобилизат, дважды промывают по 200 мл 0,1 М фосфатного буфера и выдерживают в 0,1 М при 4°С.
Энзимна  реакци :
В 2-литровой эрлейнмейеровской колбе суспендируют 20 г иммобилизованной на Eupergit С-липазы в 1 л фосфатного буфера, рН 7, После этого добавл ют субстрат в форме раствора 500 мг метилового эфира (1)- 3 а -ацетокси-7,7-(2,2-диметил-триметилен диокси)-цис-бицикло(3.3.0)октан-2 $ -карбо- новрй. кислоты в 25 мл этанола и встр хивают 16 ч при 30°С на встр хивающей машине.
В заключение отсасывают иммобилизованный фермент и промывают немного фос- фатным буфером. Фильтрат дважды экстрагируют по 500 мл метилизобутилкето- на, объединенные экстракты сушат над N32SCM и концентрируют досуха в вакууме. Оставшийс  остаток хроматографируют на силикагелевой колонке (градиент: 1,8 л ме- тиленхлорида - 1,8 л метиленхлорида) 5% ацетон. Перва  фракци  содержит непревращенный ацетоксибициклооктан-метило- вый эфир, втора  фракци  содержит 320 мг метилового эфира (+ )-3 а-гидрокси-7,7-(2,2- диметил-триметилен)-цис-бицикло(3.3.0)ок- тан-2/ -карбоновой кислоты с т.пл. 62-63°С. Угол вращени  составл ет +25,5° (с 1,001 в ).

Claims (3)

1. Способ получени  оптически активных производных (+)-бицикло(3.3.0)-октано- ла общей формулы (+)-| R j
Ck
где RI и Ra - кислород или двухвалентный остаток -0-Х-О- с X в качестве линейного или разветвленного С1-С -алкилена атомами;
Рз - остаток COOZ с Z в качестве линейного или разветвленного (и-Ст-алкила или С -Сю-аралкила атомами, отличающийс  тем, что, с целью повышени  выхода и ускорени  способа,
осуществл ют ферментативный или микробиологический стереоспецифический ацилатный гидролиз рацемических производи ых 3«-ацилоксицис-бицикло(3.3.0)-ок- тана общей формулы (+)- R, R,.
CU i кз
, где RI, R2 и RS имеют указанные значени ;
R4 - линейный или разветвленный Ci- C/j-алкил или фенил, используемый в качестве субстрата,
с последующим отделением образовавшегос  производного (+) -бицикло(3.3.0)-октанола формулы (+ )- от неомыленного бицикло(3.3.0)-октанол-эцилата формулы (-)-, или неомыленный энантиомер формулы (+)-|| отдел ют от смыленного производного бицикло (З.З.О)-октанола формулы (-)и затем подвергают химическому ацилатно- му гидролизу.
2. Способ по п.1,отличающийс  тем, что в качестве ферментов используют липазу -PL из Alcaligenes, липазу My из
Candida Cylindracoa, липазу Saiken из Rhizopus, липазу Sclerotonia, «-химотрип- син из поджелудочной железы крупного рогатого скота, алкалазу Т, эстеразу из свиной печени, липазу из поджелудочной железы
свиньи или субтилизин из Bacillus subtilis в растворенной, суспендированной или иммобилизованной на активированной бром- цианом сефарозе или на оксиранакриловых шариках форме.
3. Способ по п.1, о т л и ч а ю щ и и с   тем, что в качестве микроорганизмов используют штаммы Alcaligenes morshalii АТСС 21030, Mucor rouxii ATCC 8097. Corynebacterium egui ATCC 2107,
Tricoderma koningi CBC 85068, Sarcina lutea ATCC 9341, Penicillium citrinum ATCC 8506, Flavobacterium lutesuns IFO 3085 или Alcaligenes paradoxus ATCC 17713.
4, Способ по п.З, отличающийс 
тем, что в качестве ферментов используют выделенные из указанных микроорганизмов ферменты в растворенной,суспендированной или иммобилизованной форме.
он
f-H,
°Х°
°Х°
(ы °Х°
; 5 JLLW1 i Q-COOMe COOHQ
ОН.НОН
ОН
(±)
СТАЦИЯ (Ь): ВЫХОД 90,5% 1ВСЕГО 81о/0 СТАДИЯ (С): ВЫХОД 89,5%J
СТАДИЯ (а): выход 51 %
° 
Фиг.
К° J4
0-соосиз
ОСОСНз
СТАДИЯ ii выход 88%
СТАДИЯ I ВЫХОД 85%
(ы °Х°
i
(С)
° °
УОН
СООМе.
ft
ф-соосн3
он
Фиг. 2
SU884356253A 1986-11-13 1988-07-12 Способ получени оптически активных производных (+)-бицикло (3.3.0)-октанола RU1788968C (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19863638758 DE3638758A1 (de) 1986-11-13 1986-11-13 Racematspaltung von 3-acyloxy-bicyclo(3.3.0)octan-7-on-2- carbonsaeureestern durch stereospezifische enzymatische oder mikrobiologische acylat-hydrolyse

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU1788968C true RU1788968C (ru) 1993-01-15

Family

ID=6313858

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU884356253A RU1788968C (ru) 1986-11-13 1988-07-12 Способ получени оптически активных производных (+)-бицикло (3.3.0)-октанола

Country Status (20)

Country Link
US (1) US4894336A (ru)
EP (1) EP0271432B1 (ru)
JP (2) JP2736066B2 (ru)
AT (1) ATE80664T1 (ru)
AU (1) AU613328B2 (ru)
BG (1) BG48099A3 (ru)
CA (1) CA1301100C (ru)
CS (1) CS268542B2 (ru)
DD (1) DD264233A5 (ru)
DE (2) DE3638758A1 (ru)
DK (1) DK174394B1 (ru)
ES (1) ES2044969T3 (ru)
FI (1) FI92499C (ru)
GR (1) GR3006013T3 (ru)
HU (1) HU202596B (ru)
IE (1) IE61662B1 (ru)
NO (1) NO172903C (ru)
RU (1) RU1788968C (ru)
WO (1) WO1988003567A1 (ru)
ZA (1) ZA878542B (ru)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8600245D0 (en) * 1986-01-07 1986-02-12 Shell Int Research Preparation of 2-arylpropionic acids
DE3638760A1 (de) * 1986-11-13 1988-05-26 Schering Ag Verfahren zur herstellung von optisch aktiven bicyclo(3.3.0)octandioncarbonsaeureestern
JPH01257484A (ja) * 1987-12-14 1989-10-13 Idemitsu Kosan Co Ltd 光学活性な二級アルコールの製造方法
CA2118795A1 (en) * 1991-09-20 1993-04-01 John Crosby Pyranones

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4644068A (en) * 1983-08-19 1987-02-17 Sagami Chemical Research Center Bicyclo[3.3.0]octenylaldehyde derivatives
US4681951A (en) * 1983-12-27 1987-07-21 Sagami Chemical Research Center Bicyclo(3.3.0)octene derivatives
JPS61280294A (ja) * 1985-06-04 1986-12-10 Nisshin Flour Milling Co Ltd 光学活性カルバサイクリン中間体の製造方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
K.Kojima et al: A convenient synethsis of (+}-9(0) Methanoprostacyclin, Chem. Pharm, Bull. Band 33, № 7, 1985, p, 2688-2696. *

Also Published As

Publication number Publication date
ES2044969T3 (es) 1994-01-16
EP0271432B1 (de) 1992-09-16
AU8236487A (en) 1988-06-01
JP2786437B2 (ja) 1998-08-13
GR3006013T3 (ru) 1993-06-21
AU613328B2 (en) 1991-08-01
CS268542B2 (en) 1990-03-14
DK174394B1 (da) 2003-01-27
DK389188A (da) 1988-07-12
NO172903B (no) 1993-06-14
US4894336A (en) 1990-01-16
NO883109D0 (no) 1988-07-12
ZA878542B (en) 1988-10-26
FI92499C (fi) 1994-11-25
DE3638758A1 (de) 1988-05-26
HUT47157A (en) 1989-01-30
HU202596B (en) 1991-03-28
JPH1057095A (ja) 1998-03-03
ATE80664T1 (de) 1992-10-15
FI92499B (fi) 1994-08-15
DK389188D0 (da) 1988-07-12
IE873046L (en) 1988-05-13
BG48099A3 (en) 1990-11-15
CA1301100C (en) 1992-05-19
EP0271432A2 (de) 1988-06-15
FI883316A0 (fi) 1988-07-12
NO883109L (no) 1988-07-12
FI883316A (fi) 1988-07-12
DD264233A5 (de) 1989-01-25
JP2736066B2 (ja) 1998-04-02
NO172903C (no) 1993-09-22
JPH01501202A (ja) 1989-04-27
CS815187A2 (en) 1989-06-13
EP0271432A3 (en) 1988-06-22
IE61662B1 (en) 1994-11-16
DE3781775D1 (de) 1992-10-22
WO1988003567A1 (fr) 1988-05-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4762793A (en) Process for the biotechnological preparation of optically active alpha-arylalkanoic acids
FR2483912A1 (fr) Derives hydroxycarboxyles du compose ml-236b, leur procede de preparation et leur application therapeutique
US5248610A (en) Process for producing optically active α-hydroxyesters using lipase PS
RU1788968C (ru) Способ получени оптически активных производных (+)-бицикло (3.3.0)-октанола
AU717771B2 (en) The bioresolution of n-acylazetidine-2-carboxylic acids
US5412110A (en) Enzymatic process to separate racemic mixtures of delta valerolactones
US5128252A (en) Process for producing optically active compound
EP0528607B1 (en) Process for preparing optically active 3-phenylglycidic acid esters
US5102793A (en) Stereospecific keto reduction of bicyclooctandione-carboxylic acid esters by microorganisms
US5248609A (en) Racemic separation of 7α-acyloxy-6β-hydroxymethyl-2-oxabicyclo[3.]-octan-3-ones by stereospecific enzymatic acylate hydrolysis
EP0080671B1 (en) 4-cyclopentenones and their production
US5459067A (en) Method for producing optically active norborneol by ester hydrolysis
US5750382A (en) Process for producing optically active 2-alkoxycyclohexanol derivatives
US5248601A (en) Process for preparing L(-)-carnitine chloride
US5654440A (en) Method for production of optically active (+)-4,4,4-trifluoro-3-(indole-3-)butyric acid
JPH04279576A (ja) 光学活性４−ペンタノライド誘導体の製法